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    Método de DNS

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    Bryan Velasquez
    Este documento describe el método de DNS (ácido 3,5-dinitrosalicílico) para medir azúcares reductores. Explica cómo preparar la solución de DNS disolviendo ácido 3,5-dinitrosalicílico en una solución de hidróxido de sodio y tartrato de sodio y potasio. También describe cómo preparar una curva de calibrado usando diferentes concentraciones de glucosa y medir la absorbancia. Finalmente, resume los pasos del ensayo, incluyendo diluir las muestras, me

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    Método de DNS

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    Este documento describe el método de DNS (ácido 3,5-dinitrosalicílico) para medir azúcares reductores. Explica cómo preparar la solución de DNS disolviendo ácido 3,5-dinitrosalicílico en una solución de hidróxido de sodio y tartrato de sodio y potasio. También describe cómo preparar una curva de calibrado usando diferentes concentraciones de glucosa y medir la absorbancia. Finalmente, resume los pasos del ensayo, incluyendo diluir las muestras, me

    Descripción original:

    metodologia para determinacion de zucares reductores

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    3.2.

    1 Mtodo de DNS para medir azcares reductores


    A. Preparacin de la solucin de DNS
    1. Disolver 10 g de cido 3,5-dinitrosaliclico en 200 mL de una solucin de hidrxido de
    sodio 2M.
    2. Preparar una solucin de 300 g de tartrato de sodio y potasio en 300 mL de agua
    destilada.
    3. Adicionar la solucin del cido 3,5-dinitrosaliclico caliente a la solucin de tartrato de
    sodio y potasio.
    4. Enrasar el volumen final de la solucin de DNS a 1 L con agua destilada. Proteger la
    solucin final de la luz y almacenar en condiciones ambientales.
    5. Preparar una curva de calibrado con 1 g/L de una solucin de glucosa.

    Curva de calibrado: solucin de glucosa de 1 g/L (solucin A)


    En la Tabla 1 se presenta las diluciones a partir de la solucin de 1 g/L de glucosa para
    realizar la curva de calibrado.
    Tabla 1. Diluciones para obtener la curva de calibrado de glucosa
    Conc. (g/L)

    Sol. A (mL)

    Agua destilada (mL)

    DNS (mL)

    1
    0.8
    0.5
    0.3
    0.1

    1
    0.8
    0.5
    0.3
    0.1

    0
    0.2
    0.5
    0.7
    0.9

    1
    1
    1
    1
    1

    Absorbancia
    (540 nm)

    B. Ensayo para la determinacin de azcares reductores por el mtodo de DNS


    1. Diluir las muestras 1:50 para cuantificar azcares reductores
    2. Mezclar un volumen de muestra (1 mL) con un volumen de la solucin de DNS (1 mL).
    3. Sumergir en agua hirviendo por 10 min.
    4. Enfriar en bao de hielo por 5 minutos.
    5. Adicionar 5 mL de agua destilada
    6. Dejar reposar los tubos por 5 min.
    7. Leer la absorbancia a 540 nm. Tomar como blanco 1 mL de agua con 1 mL del reactivo
    DNS.

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