TRANSPORTE I TEÓRICO nº20

Transporte a través de las membranas.

Cap. 11 Alberts y Lodish

La célula está rodeada por una membrana plasmática (MP) que la rodea del
entorno. En la célula procarionte, además de una membrana plasmática hay
una pared bacteriana. En la célula eucarionte tenemos la MP y también hay
organelas que se separan del citosol mediante membranas. Por ejemplo, la
mitocondria posee doble membrana.

La composición de la MP es de una bicapa lipídica de fosfolípidos y colesterol y

un montón de proteínas, algunas de las cuales poseen la función de transportar
sustancias de un lado a otro de la membrana.

El contenido de las cosas que están afuera es distinto con el que está adentro
de la célula. La célula selecciona qué cosas pueden ingresar y qué cosas
pueden salir. La selección ayuda a regular los aspectos vitales de la célula. Por
ejemplo: la concentración de sodio y la concentración de K son bastante
distintas a un lado y al otro de la membrana y hay distintas concentraciones de
varios iones importantes, como el Ca2+. Otro ión es el protón cuya
concentración está dado por el valor pH, siendo un poco más dentro de la
célula que fuera de la misma, indicando una leve acidez en la célula.

En síntesis, tengo distintos iones dentro y fuera de la célula. La distribución de

cargas, por éstas y por las proteínas que aportan cargas negativas, va a ser
distinto. Voy a tener entonces del lado extracelular una concentración de
cargas positivas y del otro lado una concentración de cargas negativas. Esto
genera una diferencia de potencial entre los dos lados de la membrana que se
llama potencial de membrana.

¿Cómo hace la célula para mantener alta las concentraciones de iones, de

solutos y de cargas donde deben, es decir, mantener el potasio alto de adentro
sin que se salga? La membrana plasmática es semipermeable.

Si tuviéramos una membrana compuesta por lípidos sin proteínas en un tubo

de ensayo, y analizáramos los tipos de moléculas que cruzan la membrana,
veríamos que las moléculas hidrofóbicas pueden difundir libremente y muy
rápido a través de ella y las moléculas hidrofílicas sin carga menos que las
hidrofóbicas, siendo un pasaje un poco más lento.
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Con moléculas más grandes y polares pero sin carga el paso se hace con cada
vez más dificultad y finalmente los iones que son moléculas pequeñas cargadas
no pueden atravesar la membrana porque tienen un alto grado de
impermeabilidad a la membrana.
Entonces se puede decir que la velocidad de difusión está determinada por el
tamaño de las moléculas (más chica, más rápido pasa), por el grado de
solubilidad (pasa más rápido si es hidrofóbica) y el gradiente de
concentración (a más concentrado más fácil).

La membrana plasmática, sin embargo, tiene proteínas que van a ayudar o

facilitar el transporte de moléculas grandes e iones. Las proteínas tienen que
ser proteínas transmembrana.

¿Cómo pasa de un lado a otro? Es importante la concentración de una

sustancia. Si una sustancia está más concentrada de un lado que del otro,
tiende a pasar hacia él, y eso se llama gradiente de concentración. Además la
célula está cargada negativamente en su interior, con lo que tiende a dejar
pasar moléculas cargadas positivamente. Eso se llama gradiente eléctrico. La
suma de ambos se denomina gradiente electroquímico, y es lo que determina
la fuerza neta de dirección de flujo, o sea, hacia qué dirección va a ir una
sustancia.

Nos encontramos con tres situaciones. La primera situación es donde no tengo

una diferencia potencial pero la molécula cargada positivamente está en alta
concentración, lo que me determina hacia donde va es el gradiente de
concentración, a la ausencia de un gradiente eléctrico. Va a ir de donde está
más concentrada hacia donde está menos concentrada.
En la segunda situación tengo la misma sustancia muy concentrada del lado
externo pero también tengo una diferencia de potencial de ambos lados de la
membrana (adentro está cargada negativamente). Entonces mi molécula va a
estar impulsada también por el gradiente eléctrico. Ambas fuerzas estarían, en
este caso, llevando a la molécula del lado de adentro, ya que el gradiente
electroquímico lo impulsa hacia ese lado.
En el tercer caso tengo una molécula positiva muy concentrada del lado
externo pero el potencial de membrana se invierte, es decir, afuera está
negativo y adentro está positivo. En este caso depende de cómo sea el
gradiente respecto al otro, si el gradiente de concentración es mayor que el
eléctrico, entonces la molécula va a ir hacia el lado de adentro de la célula;
mientras que si el gradiente eléctrico es mayor que el de concentración no va a
poder pasar la membrana plasmática.
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En base a eso tenemos distintas posibilidades de transporte de membrana. Los

tipos de transporte se dividen en pasivo, que no necesita de un gasto
energético para transportar una sustancia, y activo, que sí lo necesita.
El transporte pasivo siempre es favor del gradiente electroquímico, en contra
del transporte activo que transporta solutos en contra de su gradiente
electroquímico.

El transporte pasivo incluye la difusión simple, que es la difusión a través de la

bicapa lipídica, el transporte mediado por una proteína canal, una proteína
integral de membrana con un poro hidrofílico que permite el paso de las
moléculas que poseen esa naturaleza, y el transporte mediado por
transportadores a favor de su gradiente de concentración, es decir,
uniportadores.
En el caso del transporte activo tenemos un gasto energético. Dentro de éste
tipo de transportadores están las bombas, que aprovechan la hidrólisis de ATP
para transportar una molécula en contra de su gradiente electroquímico, o
pueden ser un cotransporte o transporte activo secundario (TAS) que acopla la
energía liberada de una molécula que se transportó a favor del gradiente
electroquímico para transportar una molécula en contra del mismo.

Transportadores:
 Facilitan el movimiento de pequeñas moléculas o iones en forma
específica.
 Deja pasar a un tipo de molécula. ESPECIFICIDAD por esa sustancia
transportada
 Clasificación
o Uniportadores: Transporta una molécula. No necesita E.
o Cotransportadores: Transportan dos o más moléculas. También se
le llama transporte activo secundario, necesita E.
 Antimportador
 Simportador

Bombas impulsadas por ATP:

 También transportan un ión en contra de grad. electroqco., pero para
transportarla necesito energía que la saco de la hidrólisis del ATP.

Proteínas canal:
 Mueven iones o agua a favor de su grad. electroqco. TRANSPORTE
PASIVO
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 Forman poros en la membrana que dejan pasar iones (canales iónicos) o

agua (canales de agua o acuaporinas)

TRANSPORTADORES.

UNIPORTADOR:
 Proteína transmembrana
 Deja pasar un solo tipo de molécula a favor de su gradiente de su cc
 Especificidad por una molécula determinada y deja que pase de un lado
a otro de la memb
 EJ: Familia de transportadores GLUT, transportadores de urea.

GLUT:
 Transportadores de glucosa.
 12 alfa hélices transmembrana que se ubican formando un poro
 Cambia la conformación para dejar que pase la glucosa.

¿Qué diferencia tiene la urea que puede pasar por difusión simple con un
transportador?
La urea y la glucosa PASAN por difusión simple, es para ACELERAR la difusión a
través de la membrana. (GRAFICO ALBERTS) El transportador tiene una
velocidad de difusión mucho mayor dado la pendiente que posee en el gráfico.
La velocidad es mayor por el coeficiente de partición, que es la capacidad de
una molécula de disolverse en lípidos o en agua. En el caso de la urea ésta se
disuelve en agua más que en lípidos. El poro hidrofílico del uniportador hace
que el coeficiente de partición, vital para la difusión simple, no importe y haga
que la urea pueda pasar cómodamente. Además en la célula hay un número
limitado de transportadores, que me ofrecen una velocidad máxima que me
indica que todos los transportadores están transportando solutos, mientras
que en la difusión simple no hay velocidad máxima ya que pasa por todos
lados.
Otra cosa importante es la concentración. El transportador tiene una Km que
hace que ese transportador pierda especificidad a medida que se une más
soluto mientras que la difusión simple no la necesita. Va a pasar a través de la
bicapa dependiendo de la hidrofobicidad.

GLUT:
 En mamíferos
 14 isoformas
 En casi todas las células
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 Distintos grados de especificidad de la glucosa y algunas tienen afinidad

por la fructosa
 En la MP de forma constitutiva (siempre) y otras isoformas van por un
estímulo
 (Un transportador es funcional cuando está en la membrana)
 La liberación de insulina me hace funcional la GLUT4 para tomar la
glucosa y almacenarla. (transporte regulado)

¿Cómo hacen las GLUT para tomar la glucosa?

La glucosa si está más concentrada del lado externo se une a la GLUT, se
cambia la conformación haciendo que se abra hacia el interior. Sale la glucosa
del transportador. Sale porque la constante de afinidad es baja y en el citosol
hay baja concentración de glucosa, lo que hace que se libere. Del lado externo,
la alta concentración de glucosa supera la baja afinidad del GLUT por la
glucosa.

COTRANSPORTADORES (SIMPORTADORES Y ANTIMPORTADORES)

 Forman parte del transporte activo secundario.

 Usan una energía contenida en un gradiente electroquímico, no de la
hidrólisis
 Transportan una molécula o ión a favor de su gradiente de cc con un grad
electroqco favorable y esta energía es la que utiliza para transportar a
otro soluto en contra de su gradiente.
 RN NO FAVORABLE QUE SE ACOPLA A UNA FAVORABLE en la célula

SIMPORTADORES:
Proteínas transmembrana que permiten el pasaje de un ión o molécula en
contra de su grad de cc porque lo acoplan al movimiento de uno o más iones o
moléculas a favor de su grad de cc. Ambos van en el MISMO SENTIDO
Ej:
 Simporter Lactosa/H+ (Bacterias)
 Glucosa (en contra)/Na+ (a favor)

¿Como funciona el Glu/Na+?

El grad de cc hace que el Na+ pase hacia el lado de adentro de la célula porque
está más concentrado de lado de afuera. El gradiente eléctrico, ya que la célula
está cargada negativamente, también hace que el Na+ entre a la célula. Si
sumamos las energías libres de ambos gradientes tengo la energía libre del
gradiente electroquímico que resulta ser muy negativa (más rápido ocurre)
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Esto hace que la fuerza de dirección de Na sea siempre hacia dentro de la

célula. Esto se puede acoplar al transporte de glucosa, que no está en alta
concentración dentro de la célula. Entonces se unen al transportador que
transporta Na a favor de gradiente y Glu en contra. Se unen a sitios catalíticos
específicos de Glu y de Na, posteriormente ocurre un cambio de conformación
que hace que el transportador se abra hacia el interior de la célula y deja en
libertad el Na y la Glu.
(la glucosa no tiene carga, no tiene gradiente eléctrico)

ANTIMPORTADORES.
Transportan un ion en contra de grad de cc acoplado al transporte de otra
sustancia a favor de grad de cc pero en este caso es de dirección opuesta (uno
entra y otro sale).
Se los conoce como intercambiadores.
Ej.:

Intercambiador Na+/Ca+2

Intercambiador Na+/H+

Intercambiador Cl-/HCO3-
El intercambiador Na/H y Cl/HCO3 mantienen el pH de la célula.
¿Cómo funciona el Cl/HCO3?
(Fig. glóbulo rojo Lodish)

Cuando llega a un tejido, el glóbulo rojo libera O2 y capta CO2. Ambos gases
pueden pasar por difusión. El dióxido de carbono entra y reacciona con el agua
de dentro de la célula y con la ayuda de la anhidrasa carbónica da ácido
carbónico que se disocia en bicarbonato y protón. El protón se une a la Hb que
liberó el O2, no cambia el pH. Pero el bicarbonato libre del citosol cambia el
pH, con lo que sale afuera de la célula en contra de su gradiente de
concentración a cambio de que entre Cl a la célula.

BOMBAS IMPULSADAS POR ATP

Hacen que una sustancia se transporte en contra de su gradiente a cambio de
la hidrólisis del ATP.
Existen 4 tipos de bombas impulsadas por ATP.
 Bombas de clase P
 Clase F
 Clase V
 Transportadores ABC
(Fig. LODISH)
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Bombas de clase P.
 Las más conocidas
 Generan gradientes de Na+, de Ca2+, de K+ y de H+ a través de la MP
 Dentro de ella se encuentran la Na/K ATPasa, la bomba de Ca2+, la
bomba K+/H+ que se encuentra en el estómago, la bomba de H+ de
plantas y hongos.
 Subunidades alfa y beta, las alfa son catalíticas
 Sitio de unión al ión a transportar
 Sitio conservado donde hay un ácido aspártico donde se fosforilan. Se
autofosforilan en el residuo de ácido aspártico. Por eso se llaman de
clase P

Ej: Bomba de Ca2+: Mantiene o regula la concentración de Ca en el citosol. La

concentración allí es muy baja y se tiene que regular ya que el Ca funciona
como segundo mensajero, activa señales.

Regulación de la cc de Ca en la célula.
 En las organelas, retículo sarcoplásmico (reservorio de Ca), hay una
bomba de Ca que lo incorpora al RS en contra de grad. Utiliza la energía
del ATP.
 Proteínas específicas que se encuentran en el citosol
 Incorpora en las mitocondrias con TA intercambiador H+/Ca2+
 Sacándolo de la célula por un intercambiador Na/Ca en contra de grad
 Bomba de Ca que lo saca al exterior.
¿Qué pasaría en una célula muscular?
El Ca2+ estimula la contracción muscular. Cuando se une a la troponina se
produce la contracción muscular y cuando se libera de la misma se produce la
relajación muscular. ¿Cómo entonces disminuye la cc de Ca?
El Ca2+ vuelve en contra de gradiente de cc al retículo sarcoplásmico por una
bomba de Ca, ingresa en contra de grad de cc. También se puede ir al exterior
de la célula por medio de un int Ca2+/Na+. El Na entra a favor de gradiente. El
Ca2+ sale fuera de grad. Pero, hago que ingrese Na y tengo que mantener la cc
de Na baja; la bomba Na/K se encarga de mantener dicho gradiente. El Na sale
y el K entra, ambos en contra de gradiente de cc.

ESTRUCTURA:
 10 hélices alfa transmembrana, 2 hélices truncadas que dejan un hueco.
 Está en el retículo sarcoplásmico.
 Tiene un sitio de unión al ATP en el citosol. El ATP hidroliza
 Ácido aspártico que se fosforila.
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 Se abre entonces y entra el Ca dentro del retículo

Bomba Na/K ATPasa

 Mantiene el gradiente de Na alto afuera y bajo adentro.
 Entra K
 En casi todas las células
 Uno de los más importantes, un montón de nutrientes entran por
intercambio con Na.
 Regula el pH intracelular y la osmolaridad
 Contribuye a la transmisión del impulso nervioso.
 Mantiene y genera el potencial de membrana, en forma directa un 10% y
un 90% en forma indirecta
 Electrogénica  capacidad de establecer una corriente neta a través la
membrana generando un potencial eléctrico.
 Mueve Na en contra de grad electroqco fuera de la célula
 Sitio de unión al Na (SE PUEDE INHIBIR POR LA OUABAÍNA) y al K
 Sitio de unión al ATP
 Sitio de fosforilación
 Múltiples dominios transmembrana

La bomba transporta 3 Na y 2K. El Na que va a salir afuera en contra de su

grad se une a su dominio de unión. Eso hace que el ATP se hidrolice y que se
fosforile el aspártico que produce un cambio conformacional que hace que
se abra y permita la salida del Na. Al mismo tiempo, el K se une al sitio de
unión y hace que la bomba se altere, desfosforilándose. Al desfosforilarse
produce un cambio de conformación que finalmente hace que el K se libere
dentro del lado citosólico de la célula.

Bombas clase F.
 Multiples dominios transmembrana
 Transportan sólo protones a favor de grad de cc
 Utilizan esa energía favorable para sintetizar ATP
 Se las llama ATP sintetasas.
 Se encuentran en las mitocondrias y en los cloroplastos.

La mitocondria tiene una membrana interna, una externa y una matriz. En la

membrana interna se encuentran las proteínas involucradas en los procesos de
fosforilación oxidativa en la cadena de transporte de electrones y en ella se van
a generar protones. Estos salen al espacio intermembrana donde aumenta su
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cc. Van a entrar a la matriz a favor del grad de cc por las bombas de clase F, y
con esa energía sintetizar ATP. El ATP se utiliza en un montón de procesos
biológicos vitales.

Bombas de clase V.
 Transportan sólo protones en contra de su grad de cc
 Hidrolizan ATP
 Mantienen la acidez de los lisosomas, que tienen enzimas que sólo
funcionan a pH ácido.
 Al igual que la ATPasa Na/K, son bombas electrogénicas, pueden mover
cargas generando una diferencia de potencial.

Si en el lisosoma tuviera sólo bombas de tipo V entrarían muchos protones por

medio de gasto energético, pero éstos generarían una variación de potencial
porque de un lado de la membrana tendría muchas cargas positivas (en el
citosol tendría cargas negativas), por lo que no podrían entrar más protones y
por lo tanto no podría alcanzar una diferencia de pH notable; mi pH dentro del
lisosoma sería neutro. Para que el pH se mantenga muy distinto, tiene que
estar acoplado al transporte de Cl- por un canal de Cl-. Entra un protón y un ión
Cl-, neutralizando las cargas y no modificando la diferencia de potencial pero
disminuyendo el pH (El Cl- y el H+ da HCl, que está disociado).
El gradiente eléctrico es más fuerte que el de cc

Transportadores ABC
 Proteínas transmembrana
 Familia de transportadores más grande
 ABC: ATP-binding cassette (sitios de unión al ATP)
 2 sitios de unión al ATP, múltiples sitios transmembrana
 En la membrana plasmát. de eucariontes y proc.

¿Cómo funciona?
PROC: El ATP se une, se produce la hidrólisis y un soluto puede entrar porque
como que se “abre” la molécula como un poro. Pueden ser importadores o
exportadores. Transportan muchas cosas.
EUC: 2 sitios de unión al ATP que permiten la apertura del canal para la
exportación. EXPORTADORES de fosfolípidos, cloruro, colesterol, fármacos, etc.
Son unidireccionales. Va en contra del gradiente de cc.
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Ej: CFTR (regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística) y

MDR (Proteína de resistencia a múltiples fármacos)

Las mutaciones del CFTR son responsables de la fibrosis quística, exporta Cl-.
Dos sitios de unión al ATP, un sitio de regulación y un montón de sitios
transmembrana que forman el poro. En la fibrosis quística, cuando éste canal
está mutado y no funciona o cuando no está en la MP es cuando no ejerce su
función. Normalmente se encuentra en la mayoría de las células pero en los
pulmones éste canal tiene una función muy importante. Saca el Cl y con él se
va Na y H2O, solubiliza las secreciones. Cuando no funciona, se forma una capa
mucosa en el pulmón cuando esto está mutado y las bacterias pueden anidar
en ella, lo que hace que tenga infecciones y que la capa sea más espesa, lo que
hace que no se produzca el intercambio gaseoso y que el paciente tenga
problemas respiratorios graves.
El MDR es el responsable de la expulsión del fármaco antitumoral, otorgándole
resistencia a las células tumorales

Proteínas canal
 Transporte pasivo a favor de grad de cc
 Canales iónicos
a. Siempre abiertos
b. Abiertos o cerrados frente a un estímulo
 Acuaporinas: siempre abiertos.
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EJEMPLOS:
En el epitelio polarizado hay una membrana apical y una memb
basolateral. Las cél están unidas por uniones oclusivas, adherentes, GAP.
Las uniones oclusivas son las primeras de la memb. basolateral; están lo
más cerca de la cara apical, unen las células y separan las membranas.
Mantienen la polaridad celular.
¿Cómo hago para transpasar la célula?
Hay una permeabilidad paracelular que es mantenida por las uniones
estrechas. También está la permeabilidad transcelular (atraviesa la célula).
Necesito una serie de transportadores y otros en las distintas caras de la
célula. DISTRIBUCIÓN ASIMÉTRICA DE LOS TRANSPORTADORES DE LA
MEMBRANA (en la MP los transportadores están distribuidos de tal
manera que me posibilitan el pasaje transcelular)
La glucosa tiene que atravesar la célula intestinal, de la luz hasta la sangre.
¿Cómo hace? En los alimentos hay glucosa pero no es lo que predomina.
Pero cuando esa glucosa pero cuando ésta ingresa a la célula es más alta,
porque la célula es mucho más pequeña. La glucosa entra en contra de
grad de cc, usa un simportador Na/Glu. El Na ingresa a favor y la glucosa en
contra. La Glu está concentrada y tiene que salir hacia la sangre. Sale por
un GLUT a favor de grad de cc. El Na se tiene que ir por la bomba Na/K
ATPasa. Si inhibiera la bomba con ouabaína, el Na no puede salir y
quedaría concentrado dentro de la célula. No habría gradiente de cc y no
podría entrar la Glu.

La luz del estómago tiene un pH ácido. Tengo que mantener una

concentración de H+ alta. Tengo una bomba H/K que saca H de la célula
estomacal hacia la luz. La salida de H va a ser en contra del grad de cc
porque en la célula hay menos cantidad; además de que el K también va a
entrar en contra de grad de cc ya que su cc en la cél es más alta. El protón
salió de una molécula de H2O que a su vez liberó OH-. El oxhidrilo se
combina con el dióxido de carbono que difunde libremente a través de la
membrana lipídica. Se combina formando bicarbonato que tiende a salir,
sale por un antiportador. El cloruro posteriormente sale por un canal de Cl-.
Hay un canal de K que recircula el K para mantener su circulación
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En la célula muscular tenemos canales de Ca2+. El Ca2+ entra a la célula y

activa a canales del retículo sarcoplásmico abriéndolos y libera Ca2+. Este
se une a la troponina e induce la contracción muscular. Cuando se relaja, el
Ca2+ se va de la troponina y va hacia el citosol. ¿Cómo lo saco?
Bomba de Ca2+ hacia el retículo. Intercambiador Ca2+/Na+; entra Na+ y
sale Ca2+. El Na+ que entró se tiene que ir y lo va a hacer por medio de la
ATPasa Na+/K+
Si la bomba está inhibida no puede salir el Na+. Si no sale éste, no sale el
Ca2+. Este se queda unido a la troponina entonces.

Difusión simple. Difusión facilitada (Uniportadores y

No requiere proteínas específicas Canales)
El soluto no es transportado en contra Requiere proteínas específicas
de grad de cc Es a favor de grad de cc
No está acoplado a la hidrólisis de ATP
El soluto no es transportado por
gradiente de cc
Sustancias transportadas: Gases, mol
TA Primario (Bombas ATP) TA Secundario (Simportadores y
Requiere proteínas específicas Antimportadores)
El st es transportado en contra de Requiere proteínas específicas
grad de cc Uno de los prod. es transportado en
Necesita hidrólisis de ATP contra del grad de cc y el otro a favor
No necesita hidrólisis de ATP.