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    Cristalización de Albúmina

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    Daniel Valenzuela
    Este documento describe un experimento de laboratorio para cristalizar la albúmina de huevo a partir de la clara de huevo. Se explica que las sales neutras como el sulfato de amonio afectan la solubilidad de las proteínas globulares como la albúmina, causando su precipitación. El procedimiento involucra medir claras de huevo, agregar ácido acético y sulfato de amonio, y dejar precipitar la albúmina a bajas temperaturas para formar cristales. Luego se separan los cristales mediante centrifugación y

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    Cristalización de Albúmina

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    Daniel Valenzuela
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    Este documento describe un experimento de laboratorio para cristalizar la albúmina de huevo a partir de la clara de huevo. Se explica que las sales neutras como el sulfato de amonio afectan la solubilidad de las proteínas globulares como la albúmina, causando su precipitación. El procedimiento involucra medir claras de huevo, agregar ácido acético y sulfato de amonio, y dejar precipitar la albúmina a bajas temperaturas para formar cristales. Luego se separan los cristales mediante centrifugación y

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    Este documento describe un experimento de laboratorio para cristalizar la albúmina de huevo a partir de la clara de huevo. Se explica que las sales neutras como el sulfato de amonio afectan la solubilidad de las proteínas globulares como la albúmina, causando su precipitación. El procedimiento involucra medir claras de huevo, agregar ácido acético y sulfato de amonio, y dejar precipitar la albúmina a bajas temperaturas para formar cristales. Luego se separan los cristales mediante centrifugación y

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    UNIVERSIDAD VERACRUZANA

    ÁREA ACADÉMICA TÉCNICA

    FAC. DE QUÍMICA FARMACÉUTICA BIÓLOGICA

    LABORATORIO DE BIOQUIMÍCA

    PRÁCTICA No. 5

    CRISTALIZACIÓN DE ALBÚMINA DE HUEVO.

    Tiempo de práctica: 2 horas.

    Objetivo:

    El alumno separará por medio de globulares, de modo que producen su


    cristalización, una proteína a partir precipitación.7
    de la clara de huevo

    Funtamento: Material y reactivos

    La solubilidad de las proteínas Material de laboratorio


    globulares se ve afectada por la presencia
    de sales neutras debido a su fuerza iónica, Probeta de 200 ml
    que constituye una medida, tanto de la Embudo de filtración
    concentración como del número de las Varilla de vidrio
    cargas eléctricas de los cationes y los Gasa
    aniones aportados por la sal.6
    Reactivos
    A baja concentración, las sales
    Ácido acético 1 N
    incrementan la solubilidad de muchas
    Solución de sulfato de amonio al 50%
    proteínas, fenómeno conocido como
    solubilización por salado. Para solubilizar
    Material biológico
    proteínas por salado son más eficaces las
    sales de iones divalentes tales como el 1 huevo
    MgCl2 y el (NH4)2SO4 que las sales de hielo para hacer un baño frío
    iones monovalentes, tales como el NaCl,
    KCl y el NH4Cl. Procedimiento
    La adición de solventes orgánicos
    1. Medir 10 ml de clara de huevo.
    miscibles en agua, particularmente etanol
    2. Agitar las claras y añadir 0.1 ml de ácido
    y acetona, disminuye la solubilidad en
    acético 1N, filtrar para romper las
    agua de la mayor parte de las proteínas
    membranas agitando fuertemente con una
    varilla para acelerar el paso por la gasa.
    6. Dejar la mezcla previamente identificada
    3. Añadir 0.3 ml de solución de (NH4)2SO4 con el nombre del profesor, número de
    al 50% y dejar precipitar 30 minutos en equipo y fecha, a 4 °C (en el refrigerador)
    baño frío. hasta la siguiente práctica (mínimo 2 días).
    4. Separar mediante centrifugación por 10 7. Separar mediante centrifugación los
    min. a 3500 rpm. Guardar el precipitado. cristales de albúmina precipitada.
    5. Medir el volumen del sobrenadante (de 8. Suspender en 5ml de acetona y
    color amarillo) y añadir lentamente un recuperar filtrando en embudo Büchner
    volumen igual de (NH4)2SO4. Agitar con un papel filtro previamente pesado.
    esporádicamente. Al contacto con el 9. Secar al aire y volver a pesar.
    (NH4)2SO4 se torna de color blanco 10. Guardar en un vial etiquetado.
    lechoso indicando la precipitación de
    proteínas.
    Hoja de resultados:
    Nombre:__________________________________Grupo:________Fecha:___________

    Discusión de resultados

    Conclusiones

    Cuestionario

    1. Compara el rendimiento obtenido por tu equipo con el obtenido por los otros
    equipos.
    2. ¿Los datos concuerdan con lo reportado en la bibliografía?
    3. ¿Qué es la albúmina?
    4. Compara el peso molecular de la albúmina de huevo con la de otras fuentes
    como suero o leche.
    5. ¿Porque se utiliza el sulfato de amonio al 50%?

    Bibliografía consultada

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