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    Tecnica in Vitro en Equinos

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    Karly Julieth Echeverry Florez
    1) La biotecnología reproductiva, como la inseminación artificial y la transferencia de embriones, permite aumentar la eficiencia reproductiva de los caballos. 2) Sin embargo, las técnicas de fertilización in vitro han tenido éxito limitado en los caballos debido a la baja competencia de los oocitos equinos y la dificultad en lograr la capacitación del espermatozoide. 3) La inyección intracitoplasmática de espermatozoides ha producido varios nacimientos de potros, pero la efici

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    1) La biotecnología reproductiva, como la inseminación artificial y la transferencia de embriones, permite aumentar la eficiencia reproductiva de los caballos. 2) Sin embargo, las técnicas de fertilización in vitro han tenido éxito limitado en los caballos debido a la baja competencia de los oocitos equinos y la dificultad en lograr la capacitación del espermatozoide. 3) La inyección intracitoplasmática de espermatozoides ha producido varios nacimientos de potros, pero la efici

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    TECNICA IN VITRO EN EQUINOS

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    1) La biotecnología reproductiva, como la inseminación artificial y la transferencia de embriones, permite aumentar la eficiencia reproductiva de los caballos. 2) Sin embargo, las técnicas de fertilización in vitro han tenido éxito limitado en los caballos debido a la baja competencia de los oocitos equinos y la dificultad en lograr la capacitación del espermatozoide. 3) La inyección intracitoplasmática de espermatozoides ha producido varios nacimientos de potros, pero la efici

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    1) La biotecnología reproductiva, como la inseminación artificial y la transferencia de embriones, permite aumentar la eficiencia reproductiva de los caballos. 2) Sin embargo, las técnicas de fertilización in vitro han tenido éxito limitado en los caballos debido a la baja competencia de los oocitos equinos y la dificultad en lograr la capacitación del espermatozoide. 3) La inyección intracitoplasmática de espermatozoides ha producido varios nacimientos de potros, pero la efici

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    TECNICA IN VITRO EN EQUINOS

    La biotecnología reproductiva permite aumentar la eficiencia reproductiva de los animales


    mediante el aprovechamiento de sus rasgos genéticos de valor, en la búsqueda de un mayor
    beneficio productivo y rentable para el hombre. Hay evidencias que demuestran que la
    biotecnología reproductiva no es una herramienta nueva en la relación del hombre con los
    animales, dado que algunos pueblos de Asia Menor alrededor del 2.500 A.C, la utilizaban de
    forma empírica, castrando los machos que no reunían las condiciones requeridas como
    reproductores14.

    Para la especie equina se han implementado biotecnologías reproductivas como la inseminación


    artificial, la transferencia de embriones, la producción in vitro de embriones (PIVE) y la
    clonación, sin embargo las tasas de éxito para algunas de ellas, se han visto limitadas ya sea por
    restricciones de tipo técnico, o por barreras de tipo fisiológico propias de dicha especie. La
    inseminación artificial y la transferencia de embriones han logrado un posicionamiento
    significativo en las prácticas reproductivas equinas en países desarrollados donde esta
    explotación es altamente relevante, sin embargo la difusión de estas biotecnologías en los
    denominados países en desarrollo es aún muy escasa para el gremio de los productores.

    Una variedad de técnicas de reproducción asistida han sido implementadas en la reproducción


    equina. La fertilización in vitro (FIV), la transferencia de oocitos y embriones, la inyección
    intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI), y la transferencia nuclear han sido desarrolladas
    con gametos equinos. Sin embargo la baja eficiencia de estos procedimientos ha impedido su
    aplicación comercial19. El primer reporte de fertilización in vitro en equinos se dio en 19891, y la
    mayoría de las investigaciones reportan tasas de fertilización in vitro de oocitos equinos entre 4
    y 33%2,21.

    Las técnicas de maduración in vitro (MIV) de oocitos, de FIV convencional, y de cultivo de cigotos
    hasta el estado de blastocistos han sido inadecuadas para la especie equina21. Se ha reportado
    escasos nacimientos de potros por FIV convencional, mientras con la implementación de
    ICSI19,20, múltiples nacimientos han sido logrados principalmente por transferencia de cigotos
    post-clivaje, y en menor medida por la transferencia de blastocistos producidos in vitro5,15,18.

    La producción in vitro de embriones equinos ha tenido un éxito limitado, posiblemente


    relacionado con la baja competencia para el desarrollo de los oocitos usados4, la cual es
    influenciada no sólo por el ambiente de cultivo, sino también por las condiciones de maduración
    de los mismos8.

    Una de las dificultades en el desarrollo de estudios de PIVE para la especie equina es la limitada
    disponibilidad de oocitos, dado que una de las principales fuentes para su obtención son las
    plantas de faenado equino, las cuales son poco comunes en muchos países respecto aquellas
    dedicadas al sacrificio bovino y de otras especies. Adicionalmente la fisiología ovárica de esta
    especie limita el número de folículos presentes en el ovario, por lo cual se hace necesario recurrir
    a técnicas como aspiración folicular, la disección de folículos y el raspado de la pared folicular
    de los ovarios9,10 con el fin de maximizar el número de estructuras recuperadas.
    CULTIVO IN VITRO

    El desarrollo de métodos para producir embriones in vitro en equinos se ha retrasado en


    comparación con otras especies domésticas. Los embriones cultivados in vitro tienen algunas
    diferencias morfológicas en 8 comparaciones con los embriones recolectados del útero de las
    yeguas3. Para obtener embriones viables, es necesario un protocolo que brinde las pautas
    necesarias de producción in vitro con el uso de medios de cultivo, tiempo y condiciones
    ambientales que simulen el escenario real de la producción natural de embriones en la madre y
    así lograr resultados eficientes6. Tres días después de realizada la fertilización, se procede a
    verificar el estado de los embriones, aquellos que se evidencien con más de cuatro células se
    procede a pasar a un medio de cultivo el cual va a proporcionar condiciones óptimas para el
    desarrollo del embrión, donde van a continuar su crecimiento hasta alcanzar un estado de
    mórula o de blastocito temprano17.

    Para la transferencia embrionaria, en la receptora se suele realizar transervical al útero


    (intrauterina) 8 días después cuando se encuentre en una fase de blastocito, para este proceso
    se debe de tener en cuenta la sincronización entre donadora y receptara para así poder
    aumentar las tasas de preñez que generalmente se acepta +1 a -3 días11. Los medios de cultivo
    utilizados contienen glucosa, piruvato, lactato de sodio, amortiguadores de pH, Cloruro de sodio
    (NaCl), cloruro de potasio (KCl), albumina sérica bovina (BSA) o suero fetal bovino (SFB).

    Los medios de cultivo se clasifican en indefinidos cuando se utiliza cocultivo de embriones con
    células somáticas para estimular la producción de embriones in vitro siendo las células de la
    granulosa y células epiteliales del oviducto los principales tipos celulares utilizadas, obteniendo
    ventaja sobre la disminución del estrés oxidativo, dado que existen antecedentes en el
    mejoramiento en las tasas de maduración para ovocitos bovinos y porcinos aunque para la
    especie equina han tenido bajo éxito. Los semi definidos cuando se utiliza la albumina sérica
    bovina (BSA) permitiendo el paso de fluidos a través de la membrana plasmática, mejorando la
    maduración y desarrollo del embrión y definidos como polímeros sintéticos (alcohol polivinilico
    y la polivinilpirrolidona) teniendo actividad similar a la albumina sobre el embrión, así mismo
    actúan como surfactantes17. El desarrollo de embriones equinos ha estado de mórula o
    blastocito ha aumentado con la utilización de fluido ovidutal sintético (SOF) suplementado con
    albumina, con la transferencia al día 5 a medio Eagle Dulbecco modificado (DMEM) 16

    VENTAJAS

     Estas técnicas juegan un papel importante en la reproducción equina, favoreciendo


    principalmente a aquellos animales hembras o machos que presentan patologías
    reproductivas que impiden la obtención de su descendencia.
     En general la ICSI es una alternativa exitosa para la fertilización in vitro comercial,
    tratando incluso problemas de infertilidad en el macho como en la hembra para la
    obtención de embriones12. Otro aspecto importante señalado, es que el semen de los
    reproductores se puede descongelar, diluir en menor concentración y volver a congelar
    sin afectar el desarrollo del embrión después de la ICSI13. Entre las principales razones
    para justificar los lentos avances en los estudios en la fertilización in vitro convencional
    en la especie equina es la falta de material necesario como los ovarios y ovocitos20

    DESVENTAJAS
     Otros factores que pueden afectar el éxito de la FIV son los asociados al semen, en
    donde el contenido de colesterol del plasma seminal puede afectar la tasa de
    capacitación al alterar la orientación, la fluidez y el grosor de la membrana plasmática,
    modificando de esta forma procesos de capacitación espermática. En los sementales, el
    plasma seminal es variable entre los individuos y puede afectar de manera positiva o
    perjudicial la motilidad del espermatozoide después del enfriamiento7.
     Desafortunadamente no funciona en el caballo (sólo se han podido producir dos potros
    mediante FIV en toda la historia)
     Principal problema: resolver la inducción de la capacitación del espermatozoide e
    incapacidad de penetrar la zona pelúcida del ovocito.
     Los medios de desarrollo embrionario para equinos requieren aún ser lo
    suficientemente estudiados, dado que los componentes exitosos en la producción de
    embriones de otras especies animales no siempre son los óptimos para los embriones
    equinos, lo que sugiere que deberán ser maximizados los esfuerzos investigativos
    futuros para el mejoramiento de la técnica y sus resultados.

    BIBLIOGRAFIA

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    20. Unidade Acadêmica de Garanhuns - Universidade Federal Rural de Pernambuco, técnica
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    Especial
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