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    Reporte DL50

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    JuanJesúsGarcíaGonzález
    Este estudio buscó determinar la dosis letal media de cafeína en ratones hembras por vía oral utilizando el método estadístico de Litchfield y Wilcoxon. Se administraron diferentes dosis de cafeína a 24 ratones y se observó su comportamiento y mortalidad. Sin embargo, los resultados no mostraron homogeneidad y no fue posible calcular la dosis letal media.

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    JuanJesúsGarcíaGonzález
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    Este estudio buscó determinar la dosis letal media de cafeína en ratones hembras por vía oral utilizando el método estadístico de Litchfield y Wilcoxon. Se administraron diferentes dosis de cafeína a 24 ratones y se observó su comportamiento y mortalidad. Sin embargo, los resultados no mostraron homogeneidad y no fue posible calcular la dosis letal media.

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    Este estudio buscó determinar la dosis letal media de cafeína en ratones hembras por vía oral utilizando el método estadístico de Litchfield y Wilcoxon. Se administraron diferentes dosis de cafeína a 24 ratones y se observó su comportamiento y mortalidad. Sin embargo, los resultados no mostraron homogeneidad y no fue posible calcular la dosis letal media.

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    Reporte DL50

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    Este estudio buscó determinar la dosis letal media de cafeína en ratones hembras por vía oral utilizando el método estadístico de Litchfield y Wilcoxon. Se administraron diferentes dosis de cafeína a 24 ratones y se observó su comportamiento y mortalidad. Sin embargo, los resultados no mostraron homogeneidad y no fue posible calcular la dosis letal media.

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    UNAM

    Facultad de Química
    Laboratorio de Alimentos II
    Reporte 1: “ Determinación de la dosis letal media de cafeína en
    ratones por vía oral.”
    Por: ​García González Juan Jesús, Palacios Brito Esmeralda, Soto Ramírez Daniel
    Objetivo​.

    Determinar la dosis letal media de la cafeína por vía oral en ratones hembra
    empleando el método estadístico de Litchfield y Wilcoxon, para relacionar dicho
    parámetro con el grado de toxicidad de una sustancia.

    Cuestionario Previo.

    1. ¿De qué factores depende la variabilidad intraespecie?


    Puede depender de factores como la edad, sexo y alimentación del individuo.
    2. ¿Qué características debe tener la sustancia utilizada como vehículo en un
    estudio de toxicidad? Dé un ejemplo de un vehículo que utilizaría para
    evaluar la toxicidad aguda de un agente xenobiótico liposoluble.
    Diluir por completo el complejo analizado hasta un volumen o peso determinado,
    son inertes y de naturaleza acuosa u oleosa, facilitan la incorporación de los
    elementos restantes, permiten una mejor dosificación y administración, dan
    consistencia y forma. Se podría aplicar aceite mineral de oliva como vehículo.
    3. Explicar el mecanismo de acción de la cafeína en humanos.
    Bloquea los receptores de la adenosina de los subtipos A1, A2A y A2B. Este
    bloqueo es el responsable de su leve efecto excitante nervioso, ya que la absorción
    de la adenosina por las células del Sistema Nervioso, es uno de los mecanismos
    que desencadenan sueño y la sedación.
    4. Investigar el valor de DL50 teórico de la cafeína para ratones hembra vía oral
    e intraperitoneal.
    127 mg/kg vía oral.

    Datos de la Muestra.
    ➔ Soluciones de cafeína para dosis de 75,150, 225, 300 y 375 mg/kg p.c.,
    utilizando una dosificación 3D (0.03 mL/g).
    ➔ Ratones hembras, albinas, jóvenes, con aproximadamente 12 h de ayuno.
    Tabla 1. Peso de ratones utilizados para el análisis.

    Ratón Masa (g) Ratón Masa (g)

    1 25.0 14 26.8

    2 31.5 15 26.0

    3 25.0 16 31.0

    4 28.1 17 27.1

    5 24.7 18 23.0

    6 24.7 19 25.2

    7 29.4 20 25.5

    8 28.4 21 28.3

    9 30.6 22 27.8

    10 27.0 23 25.5

    11 27.5 24 29.7

    12 21.0 25 28.0

    13 23.1

    Tabla 2. Distribución de culebra japonesa, dosis/ratones.


    R/Dosis 75 150 225 300 375

    1 21.0(12) 23.0(18) 23.1(13) 24.7(5) 24.7(6)

    2 25.5(23) 25.5(20) 25.2(19) 25.0(3) 25.0(1)

    3 26(15) 26.8(14) 27.0(10) 27.1(17) 27.5(11)

    4 28.4(8) 28.3(21) 28.1(4) 28.0(25) 27.8(22)

    5 29.4(7) 29.7(24) 30.6(9) 31.0(16) 31.5(2)

    Media 26.06 26.6 26.8 27.16 27.3

    Cálculos.

    Para determinar la dosis administrada a cada ratón según su masa, aplicando


    dosificación 3D:
    25 g p.c. ( 0.03 mL
    1 g p.c. ) = 0.75 mL
    Para determinar CHI2 con los valores de mortalidad observados y esperados:
    2 2 2 2 2
    2 (100−14) (20−18) (25−22) (0−25) (20−27)
    C HI = ( 14 + + + + ) × ( 24 ) = 31.10
    *(100−14) 18*(100−18) 22*(100−22) 25*(100−25) 27*(100−27) 5
    C HI 2 crítica = 7.81

    Resultados.

    Tabla 3. Muertes observadas y esperadas a diferentes dosis.


    Dosis (mg/kg Ratones Ratones % de % de
    p.c.) tratados muertos mortalidad mortalidad
    observado esperado

    75 5 5 100 14

    150 5 1 20 18

    225 4 1 25 22

    300 5 0 0 25

    375 5 1 20 27

    Tabla 4. Observaciones de ratones analizados.


    Ratón Observaciones

    3 Alterado con taquicardia,


    posteriormente dejó de moverse y se
    relajó.

    5 Tranquilo y relajado.

    16 Alterado e hiperactivo, dando vueltas


    por la jaula, posteriormente se relajó.

    17 Sangrado al momento de retirar la


    sonda, se relajó en una esquina de la
    jaula y murió aproximadamente 15
    minutos después de la aplicación de la
    dosis.

    25 Alterado e hiperactivo, dando vueltas


    por la jaula, posteriormente se relajó.
    Análisis de Resultados
    Como puede observarse en la tabla 2, los porcentajes de mortalidad obtenidos no
    presentan coherencia, conforme se aumentaba la dosis administrada se esperaba la
    muerte de más ratones, no se presentó este comportamiento, esto pudo deberse a
    una incorrecta manipulación y aplicación de las dosis a los ratones analizados o a
    una incorrecta preparación de las dosis de cafeína durante la práctica. Como puede
    observarse el C HI 2 , al comparar el valor crítico con el obtenido experimentalmente,
    el valor experimental es más grande que el valor crítico, por lo que los datos no
    presentan homogeneidad, se realizaron pruebas estableciendo rectas diferentes
    pero con ninguna se obtuvo una C HI 2 experimental menor a la crítica. Por lo que
    no se procedió a realizar los cálculos de la pendiente S aplicando los valores de
    DL16, DL50 y DL84, así como sus respectivos límites de confianza. Los ratones sí
    presentaron un comportamiento conforme se les administraba sus dosis, como
    puede observarse en la tabla 4, aunque este comportamiento fue muy variable,
    todos los ratones presentaron síntomas de cambios en su comportamiento
    inmediatamente después de administrarles sus dosis, la cafeína es un xenobiótico
    que estimula el sistema nervioso central, el sistema cardiovascular y el sistema
    respiratorio medular entre otros de los cuales la principal causa de muerte puede ser
    atribuida a un fallo cardiaco.
    Con base en la literatura la DL50 de la cafeína en humanos es de 150mg/Kg para
    adultos y 35mg/Kg peso corporal en niños, por ejemplo: una persona con un peso
    de 50 kg podría morir con 7.5 g de cafeína la cual según la Asociación Nacional de
    Café, una taza de 240 mL tiene entre 60 y 125 mg de cafeína por lo que una
    persona podría morir después de beber 173 tazas de café.
    Conclusiones
    Un xenobiótico puede ser letal según la cantidad que se administre y la tolerancia
    del individuo estudiado, la cafeína es un xenobiótico presente en la vida cotidiana y
    tiene un rango de toxicidad de 3 según la OMS por lo que se considera
    moderadamente tóxica.
    El experimento tiene que repetirse para poder obtener un valor de dosis letal media
    de la cafeína por vía oral confiable.
    No se obtuvo una homogeneidad en la recta obtenida a partir del tratamiento a los
    ratones con 5 dosificaciones distintas para 24 ratones analizados.

    Referencias
    1. Desphande, S. Handbook of Food Toxicology; Marcel Dekker: New York,
    2002.
    2. Nicandro, M. (2008). Farmacología médica. UNAM, Facultad de Medicina:
    México. Editorial Médica Panamericana.
    3. Morales G. Ensayos toxicológicos y métodos de evaluación de calidad de aguas.
    México, 2004.

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