Congreso de Investigación CUAM

¿LÁGRIMAS QUE CURAN?

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LAS LAGRIMAS EN CEPAS DEL TRACTO DIGESTIVO Y RESPIRATORIO.

Aquino Rivera Carlos,Sánchez Melgar Lorena,García Pinete Emily

Asesor: Biol. Ivonne Herrera Reyes
Centro Universitario México
AREA BIOLÓGICAS - QUÍMICAS

1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:

Las lágrimas, son el líquido lubricante que se encarga de humedecer y limpiar los ojos, su composición química es agua,
mucina, lípidos, lisozima, lactoferrina, lipocalina, lacritina, inmunoglobulinas, glucosa, urea, sodio y potasio. Se ha dicho
que las lágrimas tienen propiedades antimicrobianas desde el descubrimiento de la lisozima, que es parte del sistema
inmunológico, sin embargo no se ha determinado con exactitud qué organismos son capaces de combatir.
Es por eso que en este trabajo probaremos la actividad antimicrobiana y bactericida de las lágrimas sobre
Staphyloccocus aureus, Staphyloccocus epidermis, Escherichia colli, Salmonella typhi, Shigella, Vibrio cholerae y el
hongo Candida albicans.

2. HIPÓTESIS

• Si las lágrimas tienen actividad antimicrobiana, entonces inhibiran el crecimiento de las cepas bacterianas.
• Si los menores están más expuestos a los microorganismos entonces sus lágrimas tendrán un mayor efecto
antimicrobiano que la de los otros donadores.

3. MARCO TEÓRICO:

COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS LAGRIMAS

El contenido sólido de la lágrima representa 1.8% del total de esta, lo que le proporciona una constitución parecida a la
de la solución salina. Los componentes solidos más notables son cloruro de sodio (NaCl), albuminas y globulinas. El pH
lagrimal, aunque cambiante, es cercano a 7.3. Los principales componentes de las lágrimas son: glucosa, ácido
ascórbico, serotonina, histamina, albúmina, lactoferrina, lisozima, Ig A, Ig M, Ig G, transferrina, factores de crecimiento.
(Wiechers, 2013).
La enzima lisozima, que se encuentra en las lágrimas, el moco y la saliva de los humanos puede romper el esqueleto del
pepetidoglucano de la bacteria por medio de la destrucción de sus enlaces, lo cual contribuye a la resistencia natural del
huésped a las infecciones microbianas. Las bacterias tratadas con lisozima se hinchan y estallan debido a la entrada de
agua a la célula, cuya presión osmótica interna es elevada. (Levinson y Jawetz, 1999).
CEPAS BACTERIANAS
• Staphyloccocus aureus: Es un coco grampositivo de vida libre de 0,5 a 1 µm de diámetro, pertenece a la familia
Micrococcaceae, es el que con mayor frecuencia causa infecciones en el ser humano; suele estar en la piel y en
las membranas mucosas sin llegar a causar infección, pero puede ocasionar una amplia gama de infecciones
debido a su producción de toxinas. Las enfermedades más destacadas son osteomielitis, conjuntivitis, Artritis,
Sinusitis, Meningitis, Otitis media, Neumonía estafilocócica primaria, entre otras. (Pelcazar, 1966).
• Staphyloccocus epidermidis: Forma parte de la flora del humano, tiene un tamaño de 0,5 a 1 µm de diámetro, es
productor de penicilinasa, aparecen colonias de gonococos adyacentes a las de Staphyloccocus. (Pelcazar,
1966). Se ubica en la piel, nariz, boca, vagina y uretra, puede causar infecciones de catéteres intravenosos e
implantaciones de prótesis; es también una causa importante de la sepsis en neonatos. (Levinson y Jawetz,
1999).
• Escherichia coli: Forma parte de la familia Enterobacteriaceae, son bacilos gramnegativos que no forman
esporas. Habita normalmente en el conducto intestinal humano. (Gray; 1975). En ocasiones son patógenos para
el hombre causando enteritis, peritonitis y cistitis. (Pelczar y Reid, 1977).
• Salmonella typhi es, sin duda alguna, el mas estudiado y mejor conocido del gran grupo de bacilos no
esporulados causantes de enfermedades entéricas. Es un bastoncillo gramnegativo. Es un anaerobio facultativo.
(Gray; 1975), agente etiológico de fiebre tifoidea (Instituto de salud pública de Chile, 2011).
 • Candida albicans: Hongo oportunista que habita en la boca, el colon y la vagina, es parte de la flora normal del
cuerpo. Permite que se desarrollen diversas enfermedades. 1) candidiasis bucal o algodoncillo, consistente en
placas blancas de células del hongo e hifas sobre las mucosas de boca y faringe; 2) candidiasis vulvovaginal
(Carpenter, 1979). Es un organismo grampositivo, de 3-6 um de diámetro. (Levinson y Jawetz, 1999).

4. PROPÓSITOS

• Evaluar la actividad antimicrobiana de las lágrimas.

• Determinar si la actividad antimicrobiana depende de la edad de los donadores.
• Determinar si el sexo de los donadores es determinante en la actividad antimicrobiana de las lágrimas
• Determinar la Concentración Mínima Inhibitoria (MIC) y la Concentración Máxima Bactericida (CBM).

5. METODOLOGÍA

Materiales:

Ø Sujetos experimentales que no hayan recibido tratamiento médico en diez días previos a la recolección de las
muestras. (5 Niñas y 5 niños entre los 5 y 8 de edad, 5 adolescentes mujeres y 5 adolescentes hombres entre 15
y 18 años de edad, 5 mujeres adultas y 5 hombres adultos entre 45 y 48 de edad).
Ø Agar Müeller- Hinton, 120 cajas de Petri, Sensidiscos, Autoclave, Lágrimas
Procedimiento:

Obtención  de  las   Obtención  de  las  

muestras   cepas  

5  Niños  y  5  niñas   5    Mujeres  y  5   5    Mujeres  y  5  

de  5  a  8  años  de   hombres  de  15  a   hombres  de  45  a  
edad   18  años  de  edad   48  años  de  edad    
Foto  1.  Recolección  

Preparación  de   Siembra  –  Kirby   Incubar  24  hrs.   Medir  halos  de  
inóculos   Baüer   A  37  °  C.     inhibición  

Escala  de  Mc.   10  repeticiones  

Sensidiscos   Farland   por  cepa.  

6. RESULTADOS Y ANÁLISIS

Cabe mencionar que cuando iniciamos este trabajo teníamos la certeza de que las lágrimas tendrían una elevada
actividad antimicrobiana, sobre todo las cepas que actúan sobre el sistema respiratorio, sin embargo los resultados nos
sorprendieron enormemente.

CEPA SENSIBILIDAD
CP CN N A M
Salmonella typhi 32 0 0 0 0
Escherichia coli 15 0 0 8 0
Staphyloccocus aureus 27 0 6 6 6
Staphyloccocus epidermidis 26 0 9 0 0
Candida albicans 33 0 4 0 10
Tabla 1. Se observa el promedio de los halos de inhibición en mm de las cepas bacterianas a las lagrimas de individuos del sexo masculino. CP- control
positivo, CN control negativo, N-niños, A-adolescentes, M- hombres maduros.

  2  
La tabla 1 muestra que las lágrimas de los varones fueron más efectivas al inhibir con mayor frecuencia el crecimiento de
las cepas bacterianas. La cepa más sensible fue Staphyloccocus aureus al presentar halos de inhibición para todas las
edades, seguida de Candida albicans con halos de inhibición de 4 y 10 mm para niños y hombres mayores
respectivamente. Escherichia coli y Staphyloccocus epidermidis tuvieron promedio en los halos de 8 mm en adolescentes
para la primera y 9 mm en niños para la segunda. Nuevamente la cepa de Salmonella typhi no fue sensible para ninguna
de las muestras.
Existen 3 tipos de lágrimas: las lágrimas basales o lubricantes se asignan continuamente en pequeñas cantidades, se
originan en la córnea y protegen los ojos contra el polvo y las bacterias. El segundo tipo de lágrimas, son las reflejas y se
producen en respuesta del organismo a estímulos, tales como partículas extrañas, la evaporación de un gas o desgarre.
El tercer tipo son las lágrimas de emoción, tanto a sentimientos negativos como positivos, se asigna cuando una persona
llora. Ellas contienen hormonas como la prolactina y ACTH en una concentración mucho más alta que en comparación
con lágrimas basales y reflejas, también poseen lisozima. En las lágrimas basales y de emoción la concentración de
lisozima es mayor a la de cualquier otro fluido en el cuerpo, el nivel normal de lisozima en la lágrima es de 1mg por ml,
por lo tanto en 10 µl la concentración de la lisozima corresponde a 0.001 mg que puede resultar una dosis muy baja para
la eliminación de los microorganimos patógenos. La lisozima tiene su mayor grado de eficacia en un pH de 7 y de ahi
disminuye conforme el pH se acidifica.
La lisozima es una enzima hidrolítica que rompe el enlace entre la N-acetilglucosamina y el ácido N- acetilmuramico.
Estos enlaces existen en el péptidoglicano de la pared celular bacteriana. En algunas ocasiones la lisozima puede
intervenir en la lisis de las bacterias, siendo más efectiva con las cepas gram positivas, razón por la cual las cepas de
Escherichia coli y Salmonella typhi no fueron sensibles a las lagrimas mientas que Staphyloccocus aureus y S.
epidermidis si fueron sensibles a las lágrimas; con respecto a Candida albicans su pared celular compuesta por quitina y
otros carbohidratos si es sensible a la lisozima.
Según las fuentes bibliográficas la producción de lágrimas es mayor en los hombres que en las mujeres razón por la cual
los resultados de esta investigación demuestran que las lágrimas fueron más efectivas en las lágrimas obtenidas de los
individuos masculinos.
También el periodo menstrual tiene un efecto en la producción de lisozima en las mujeres por lo que esta situación pudo
haber afectado nuestros resultados debido a que las hormonas sexuales también afectan el sistema inmune,
especialmente ciertos tipos de linfocitos.
Otro punto importante es la maduración del sistema inmunológico que se acentúa con la edad, por lo que en los niños
este sistema aún se encuentra poco desarrollado razón por la cual las lágrimas no tuvieron actividad antimicrobiana
sobre las cepas bacterianas.

7. CONCLUSIONES

• Las lágrimas de las mujeres adultas y niñas nos poseen actividad antimicrobiana para ninguna de la cepas
bacterianas probadas.
• Las lágrimas de mujeres adolescentes solo tuvieron actividad antimicrobiana sobre Candida albicans con un halo
de inhibición de 7mm.
• La actividad antimicrobiana de las lágrimas si depende del sexo del individuo, ya que en los hombres hay una
mayor producción de lisozima.
• La lágrimas de los varones tienen una limitada actividad antimicrobiana para las cepas de Staphyloccocus
aureus con halos de inhibición de 6 mm para niños, adolescentes y adultos, mientras que Staphyloccocus
epidermidis tuvo halos correspondientes a 8 mm en los niños. Las lágrimas de los adultos masculinos tuvieron
una actividad moderada sobre Candida albicans.
• La producción de lisozima en las mujeres se ve afectada por el ciclo menstrual, por lo que varía de acuerdo a la
fase en la que se encuentra la persona.
• Como el sistema inmunológico termina su desarrollo y maduración alrededor de los 10 años, las lágrimas de los
niños contienen una menor cantidad de lisozima, por lo que los adultos están más protegidos contra las
infecciones bacterianas.

8. BIBLIOGRAFÍA

• Carpenter, P. L. (1979). Microbiología. Interamericana. México D.F. 15-16, 129, 15, 300-306.
• Pelcazar M.J. y Reid R.D. (1966). Microbiología. Libros McGraw-Hill. México D.F. 193-210, 208-209.

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 • Gray,Y.G.(1975). Microbiologia. Editoral Mc Graw Hill Book Company. México, D.F. 408-409
• Rodríguez A. Guadalupe. (2002). Principales características y diagnóstico de los grupos patógenos de
Escherichia coli. Salud Pública. México, D.F. 464 pp.
• López, M. V., Álvarez M.J. (2011). Escherichia colli: mecanismos de patogenicidad. Universidad Nacional
Autónoma de México. México D.F. 1-2-pp.
• Instituo de salud Pública de Chile. (2011). Salmonella entérica serotipo typhi. Instituto de salud pública. Santiago
de Chile. 1pp.
• Prats G. y Mirelis B., (2008). Aspectos prácticos para el laboratorio de microbiología. Hospital de Saint Pau.
Barcelona, España. 1pp.
• Ulloa, F. M. T., (2009). Vibrio cholerae. Facultad de medicina. Santiago de Chile. 9pp.
• (Graue, W. E. (2013). El ojo: estructura y función. McGraw-Hill, (O8 diciembre 13,
14:22hs)http://highered.mcgraw-hill.com/sites /dl/ free/ 9701069293/ 786420/
Graue_oftalmologia_3e_cap_muestra.pdf)
• Levinson W. y Jawetz E. (1999) microbiología e inmunología: autoevaluación y repaso. Editorial El Manual
Moderno, México D.F. 13pp.
• http://www.medicalpress.es/el-sistema-inmunologico-de-las-mujeres-sigue-siendo-mas-joven-durante-mas-
tiempo#ixzz2vKqkGM3Y Follow us: @Medical_press on Twitter

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