Este documento proporciona las especificaciones para la hoja de boldo, incluyendo definiciones, ensayos de identificación, conservación, cenizas totales, metales pesados, materia extraña, pérdida por secado, residuos de pesticidas, valoración de aceites esenciales y alcaloides, y requisitos de rotulado. Se describen métodos cromatográficos para el análisis cualitativo y cuantitativo de alcaloides en boldo.
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Este documento proporciona las especificaciones para la hoja de boldo, incluyendo definiciones, ensayos de identificación, conservación, cenizas totales, metales pesados, materia extraña, pérdida por secado, residuos de pesticidas, valoración de aceites esenciales y alcaloides, y requisitos de rotulado. Se describen métodos cromatográficos para el análisis cualitativo y cuantitativo de alcaloides en boldo.
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Este documento proporciona las especificaciones para la hoja de boldo, incluyendo definiciones, ensayos de identificación, conservación, cenizas totales, metales pesados, materia extraña, pérdida por secado, residuos de pesticidas, valoración de aceites esenciales y alcaloides, y requisitos de rotulado. Se describen métodos cromatográficos para el análisis cualitativo y cuantitativo de alcaloides en boldo.
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BOLDO, Hoja llina al 1 % en ácido clorhídrico: se obtiene una
coloración rosa alilada, estable por unos minutos.
E - Aplicar la siguiente técnica cromatográfica. Definición - Boldo es la hoja desecada de Peu- Fase estacionaria - Emplear una placa para mus boldus Mol. (Boldea boldus (Mol.) Looser) cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromato- (Monimiaceae). Contiene no menos de 2,0 por grafía) recubierta con gel de sílice para cromato- ciento de aceite esencial y no menos de 0,20 por grafía con indicador de fluorescencia, de 0,25 mm ciento de alcaloides totales, calculados como boldi- de espesor. na y debe cumplir con las siguientes especificacio- Fase móvil - Tolueno, acetato de etilo y dieti- nes. lamina (7:2:1). Solución estándar - Disolver 0,1 g de Boldina CONSERVACIÓN en 100 ml de una mezcla de cloroformo y metanol En envases inactínicos bien cerrados. (5:5). Solución muestra - Agregar 10 ml de ácido ENSAYOS sulfúrico 0,1 N a 100 g de Boldo en polvo. Agitar Identificación durante 2 minutos y filtrar. Ajustar el filtrado a A - Características macroscópicas - La hoja de pH 8 con amoníaco diluido. Realizar cinco extrac- Boldo es elíptica u oval elíptica, redondeada en la ciones sucesivas con 30 ml de cloroformo. Reunir base, cortamente peciolada, de hasta 6 cm de largo los extractos clorofórmicos y filtrar a través de y 4 cm de ancho; de borde entero y ligeramente sulfato de sodio anhidro. Evaporar a sequedad en replegado hacia abajo; gruesa, coriácea, áspera al baño de agua y disolver el residuo en 0,25 ml de tacto y quebradiza; cubierta en ambas caras de pelos una mezcla de cloroformo y metanol (5:5). cortos rígidos estrellados; de color verde grisáceo; Revelador - Reactivo de Dragendorff. con nervadura principal prominente. El haz presenta Procedimiento - Aplicar por separado en ban- como característica más relevante numerosas eleva- das, 10 µl de la Solución muestra y 10 µl de la ciones puntiformes. El Boldo tiene olor aromático Solución estándar. Dejar secar las aplicaciones y fuerte, semejante al timol, que aumenta cuando se desarrollar los cromatogramas hasta que el frente tritura entre los dedos, de sabor amargo y astringen- del solvente haya recorrido aproximadamente tres te. cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la B - Características microscópicas - La lámina placa de la cámara, marcar el frente del solvente y en vista superficial presenta la epidermis adaxial dejar que el solvente se evapore. Dejar secar al con células poligonales de paredes rectas con cutí- aire. Examinar la placa bajo luz ultravioleta a cula gruesa, lisa sin estomas y con escasos pelos 366 nm. El cromatograma obtenido a partir de la estrellados; la epidermis abaxial presenta células de Solución estándar debe presentar una zona de fluo- paredes sinuosas; estomas anomocíticos y numero- rescencia azul violeta, correspondiente a boldina a sos pelos estrellados. El mesófilo está constituido un Rf aproximado de 0,27. El cromatograma obte- por una hipodermis de 1 a 3 hileras de células de nido a partir de la Solución muestra debe presentar paredes engrosadas; parénquima en empalizada de dos zonas azul violeta en el valor de Rf correspon- dos capas de células y parénquima esponjoso dis- diente a la boldina en la Solución estándar. Pulve- puesto en varias capas de células. En ambos parén- rizar con Revelador. El cromatograma obtenido a quimas se observan abundantes células secretoras partir de la Solución muestra debe presentar dos esféricas, más abundantes en el esponjoso. zonas anaranjadas en el valor de Rf correspondiente C - Droga en polvo - Polvo verde claro con a la boldina en la Solución estándar y, por debajo olor aromático y pungente. Se observan numerosos de las mismas, otras dos zonas de alcaloides minori- fragmentos de pelos estrellados; parénquima con tarios. abundantes células oleíferas; fragmentos de epi- Cenizas totales (ver 630. Métodos de Farma- dermis con estomas anomocíticos. cognosia) D - A 1 g de hoja pulverizada, agregar 10 ml de No debe contener más de 13 %. alcohol al 80 % v/v, calentar a ebullición 15 minu- tos, enfriar y filtrar. Evaporar en un baño de agua, Control higiénico (ver 630. Métodos de Far- hasta un volumen aproximado de 1 ml. Agregar macognosia) una gota de amoníaco y agitar 2 minutos con 5 ml Debe cumplir con los requisitos. de éter etílico. Filtrar a través de sulfato de sodio Determinación de aflatoxinas <110> anhidro la fase etérea. Evaporar en una cápsula de Debe cumplir con los requisitos. porcelana y agregar 2 ml de una solución de vaini- Límite de metales pesados <590> agua a 80 °C durante 30 minutos. Filtrar, tomar el Debe cumplir con los requisitos. residuo con 50 ml de ácido clorhídrico, agitar y Materia extraña (ver 630. Métodos de Farma- calentar en un baño de agua a 80 ºC durante cognosia) 30 minutos. Filtrar, y repetir la operación sobre el No debe contener más de 4 % de ramas y 2 % residuo obtenido. Filtrar, reunir los líquidos filtra- de otras materias extrañas. dos fríos y agitar con 100 ml de una mezcla de acetato de etilo y hexano (5:5). Ajustar la fase Pérdida por secado (ver 630. Métodos de Far- acuosa a pH 9,5 con amoníaco diluido. Agitar macognosia) sucesivamente con 100 ml, 50 ml y 50 ml de cloru- No debe perder más de 10 %, determinado me- ro de metileno. Reunir las fases orgánicas y evapo- diante destilación sobre 20 g de Boldo en polvo. rarlas a presión reducida. Transferir el residuo a un Residuos de Pesticidas (ver 630. Métodos de matraz aforado de 10 ml y diluir a volumen con Farmacognosia) Fase móvil. Debe cumplir con los requisitos. Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) - Cromatografiar la Preparación estándar y registrar VALORACIÓN las respuestas de los picos según se indica en Pro- Aceites esenciales cedimiento: los tiempos de retención relativos a la Realizar la determinación de aceites esenciales boldina deben ser: 0,9 para isoboldina, 1,8 para (ver 630. Métodos de Farmacognosia). Pesar 10 g isocorydina N-óxido; 2,2 para laurotetanina; 2,8 de Boldo en polvo y transferir a un balón de 1 litro. para isocorudina y 3,2 para N-metillaurotetanina; Destilar con 300 ml de agua y recolectar el destila- (pueden aparecer picos adicionales); la desviación do empleando 0,5 ml de xileno en un tubo gradua- estándar relativa para inyecciones repetidas no debe do, a una velocidad de 2 a 3 ml por minuto durante ser mayor de 2,0 %. 2 horas. Procedimiento - Inyectar por separado en el cromatógrafo aproximadamente 20 µl de la Prepa- Alcaloides ración muestra y 20 µl de la Preparación estándar, Sistema cromatográfico - Emplear un equipo registrar los cromatogramas y medir las respuestas para cromatografía de líquidos con un detector de los picos. Calcular el contenido en porcentaje ultravioleta ajustado a 304 nm y una columna de del total de alcaloides, expresado como boldina en 25 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida la porción de Boldo en ensayo por la fórmula si- por octadecilsilano químicamente unido a partículas guiente: porosas de sílice de 3 a 10 µm de diámetro. El caudal debe ser aproximadamente 1,5 ml por minu- (∑ri /rE)(PE/ PM) to. en la cual ∑ri es la suma de las respuestas de los Solución A - Preparar una mezcla de 99,8 ml de picos correspondiente a los alcaloides identificados agua y 0,2 ml de dietilamina. Ajustar a pH 3 con en el cromatograma obtenido con la Preparación ácido fórmico. muestra, rE es la respuesta del pico correspondiente Solución B - Preparar una mezcla de 99,8 ml de a la boldina en el cromatograma obtenido con la acetonitrilo y 0,2 ml de dietilamina. Preparación estándar, PM es el peso de la muestra Fase móvil - Solución A y Solución B (84:16). expresada en mg en la Preparación muestra y PE es Filtrar y desgasificar. Hacer los ajustes necesarios el peso de la boldina en mg en la Preparación (ver Aptitud del sistema en 100. Cromatografía). estándar. Preparación estándar - Preparar una solución de boldina en Fase móvil con una concentración de ROTULADO 0,012 mg por ml. Indicar en el rótulo la denominación oficial, se- Preparación muestra - Pesar exactamente alre- guida del nombre científico en latín. dedor de 1 g de Boldo en polvo, agregar 50 ml de ácido clorhídrico, agitar y calentar en un baño de Peumus boldus Molina, A-I: A, hoja, exomorfología. B-D sección transversal. B, esquema representativo del limbo. C, detalle de lo indicado en B. D, esquema representativo del pecíolo. E-F vista superficial de la epidermis, mostrando pelos fasciculados. E, superior. F, inferior con estomas. G-I, polvo. G, parénquima axial del xilema de paredes engrosadas. H, porción del parénquima del mesófilo con células oleíferas y un vaso espiralado acompañado de parénquima engrosado. I, fragmento de epidermis con un estoma anomocí- tico. Las reglillas corresponden a: 1 a B, D; 2 a C, E, F; 3 a H, I; 4 a G.