1.

La transformación de bacterias a-b- con ADN procedente de una estirpe a+b+

origina 12.000 colonias transformadas. Si ambos genes están a una distancia de 0.
25 unidades, ¿cuántas de las colonias transformadas serán a-b+?

R= 1500 COLONIAS

2. En un experimento de cotransducción entre los genes a y b realizado en dos

laboratorios independientemente, se obtuvieron frecuencias de cotransducción de
0.82, en el laboratorio A, y de 0.53 en el B. ¿Qué laboratorio detecta mayor
distancia entre ambos genes?

R= El B

3. Al realizar varios experimentos de cotransducción, se cointrodujeron

satisfactoriamente las siguientes combinaciones de genes: FHC, BEI, DBA, EG, GH.
Indica el orden más probable de los genes A a I en este fragmento de cromosoma.

R= ADBIEGHCF ó ADBIEGHFC

4. Strickberger, en 1968, obtuvo los siguientes resultados utilizando cepas de B.

subtilis, para los loci triptófano (trp) y tirosina (tyr):

ADN Cepa receptora Clases Nº de colonias

transformante transformadas
Mezcla de trp+ tyr- 190
trp+ tyr- y trp- tyr+ trp- tyr- trp- tyr+ 256
trp+ tyr+ 2
trp+ tyr- 196
trp+ tyr+ trp- tyr- trp- tyr+ 328
trp+ tyr+ 367

Interpreta estos resultados y estima la distancia entre los dos loci.

R= trp y tyr están ligados; p= 0.588

5. Realizamos dos cruces recíprocos con las cepas de E.coli:

1. A+B+C-D+E- X A-B-C+D-E+
R
estreptomicina estreptomicinaS

2. A+B+C-D+E- X A-B-C+D-E+
estreptomicinaS estreptomicinaR

Después de incubar, se inoculan sobre medio mínimo que contiene estreptomicina. El

resultado es que el cruce 1 desarrolla colonias pero el cruce 2 no. Explicar.

R= Cepa 2 donadora, 1 aceptora. No se transmite la resistencia.

6. Supón que el ADN de una cepa Hfr de E.coli tiene la siguiente ordenación de
nucleótidos

5' AGCTAT 3'

3' TCGATA 5'

Supón también que las células Hfr han crecido en un medio con C14y N15, de forma
que su ADN es pesado. Se realizan cruzamientos de células Hfr con células F- sobre
medio ordinario. En el cruzamiento la hebra inferior de ADN se transfiere desde su
extremo 5'.

a) ¿Cómo sería el segmento de la doble hélice en la célula donadora después de la

replicación de ADN? Indica cuál es la hebra ligera (L) y cuál la pesada (H).

b) Lo mismo para la célula receptora, asumiendo que se incorpora el total de la hebra.

R= a) 5´- AGCTAT-3´ pesada b) 5´-AGCTAT-3´ ligera

7. Cierta cepa Hfr normalmente transmite el marcador lac+ el último durante la

conjugación. En un cruce entre esta cepa y otra F-lac- se obtienen algunas células
recombinantes lac+ demasiado pronto. Cuando estas células lac+ se mezclan con
células F-lac- la mayoría de éstas se convierten en F+lac+, pero no se transfiere
ningún otro marcador. Explícalo. ¿Qué puedes decir sobre el genotipo de las
células recombinantes?.

R= a) El factor F se ha liberado (Hfr--->F+). En la conjugación se transfiere el factor F'

con el gen lac.

8. Se realiza un experimento de transformación utilizando dos cepas de

Pneumococcus. La cepa A es estreptomicina resistente y la cepa B sensible. Se
incuban células competentes de la cepa B con ADN de las células A.

a) La célula receptora transformada, ¿será A o B?

b) Cuando las células transformadas se dividan, ¿cómo serán los dos productos
celulares respecto a la resistencia a la estreptomicina?

c) ¿Cómo será su ADN respecto al de las células A y B?

R= Si ser A representa resistencia, serán A b) ambos resistentes c) semejante a A (en

las regiones de transformación).

9. En un experimento de transformación se utiliza una cepa a+b+ como donadora, y cepas

doblemente defectuosas como receptoras (a-b-). Se originan tres tipos de transformantes:

Tipo de célula transformada Nº de células transformadas

a+b+ 1300
a-b+ 310
a+b- 190

a) Con estos datos, ¿puedes decir si los genes están ligados o no? ¿Por qué?

b) ¿Cuál parece ser la distancia, en unidades de mapa, entre los dos genes?

c) ¿Por qué las clases recombinantes aparecen con valores diferentes?

R= a) ligados b)0.2778 c) preferencia en la complementación del gen b

10. Consideramos dos estirpes de una determinada especie bacteriana. La estirpe 1 es sensible
a las drogas A, B, C y D, mientras que la estirpe 2, obtenida mediante 4 mutaciones
independientes, es resistente a los cuatro productos. Al extraer el ADN de la estirpe 2 y
transformar con él células competentes de la estirpe 1, se obtienen los siguientes tipos de
siembras y número de colonias:

DROGA COLONIAS DROGA COLONIAS DROGA COLONIAS

A 1235 AC 643 ABC 28
B 1252 AD 956 ABD 60
C 1260 BC 54 ACD 536
D 1243 BD 57 BCD 42
AB 53 CD 835 ABCD 35

a) ¿Cuál de los cuatro genes no está ligado a los otros tres?

b) ¿Cuál es la ordenación de los tres genes ligados?

R= a) B b) ADC

11. Tenemos una cepa ala- pro- arg- trp- (ala: alanina; pro: prolina; arg: arginina; trp:
triptófano), que es transformada con ADN procedente de otra cepa, y que es protótrofa
para los aminoácidos considerados. El cultivo transformante se inocula en diferentes
medios, obteniéndose los siguientes resultados:

MEDIO COLONIAS MEDIO COLONIAS

Completo 20.000 MM+ala+trp 0
Medio mínimo 0 MM+pro+arg 485
(MM)
MM+ala 0 MM+pro+trp 0
MM+pro 0 MM+arg+trp 340
MM+arg 14 MM+ala+pro+arg 1352
MM+trp 0 MM+ala+pro+trp 1358
MM+ala+pro 4 MM+ala+arg+trp 1213
MM+ala+arg 25 MM+pro+arg+trp 1234

a) ¿Qué genes están ligados?

b) ¿Cuál es el orden de los que están ligados?

c) ¿A qué distancia se encuentran?

R= a) Ala, Pro y Trp b) Pro-Ala-Trp c) Ala-Pro: 0.84, Pro-Trp: 0.99, Ala-Trp:0.77.

12. En 1963, Nester y colaboradores realizaron un experimento con B. subtilis. En él

utilizaban ADN transformante obtenido de cepas trp+ tyr+ his+ y bacterias
receptoras auxótrofas para los tres compuestos (trp- tyr- his-). Los resultados que
obtuvieron fueron:

Tipo y número de colonias transformadas

trp - - - + + + +
tyr + - + - + - +
hys - + + - - + +
685 418 3660 2600 107 1180 11940

a) ¿Qué tipos de recombinación se producen en cada caso?

b) ¿A qué distancia se encuentran los tres genes?

c) ¿Pueden existir en procariotas fenómenos de interferencia similares a los de

eucariotas?

R= a) Trp-His-Tyr b)Trp-His:0.34, Trp-Tyr: 0.4, His-Tyr: 0.13 c) Trp--0.34--His--0.13--Tyr.

I=.88

13. Doermann infectó células de E.coli con dos cepas del bacteriófago T4, una salvaje (+,+,
+) y otra triple mutante (m,r,tu) donde 'm' significa placa pequeña, 'r' lisis rápida y 'tu'
placa turbia. En la progenie se obtuvieron los siguientes resultados:

GENOTIPO Nº DE PLACAS
+,+,+ 1864
m,r,tu 1732
+,r,tu 237
+,+,tu 483
+,r,+ 86
m,+,+ 260
m,+,tu 81
m,r,+ 427
A partir de estos datos dibuja el mapa de ligamiento.

R= m--0.128--r--0.208--tn

14. Se han aislado varias cepas mutantes z- , todas incapaces de sintetizar 

galactosidasa. Se realizó un cruce entre una cepa Hfr (z1- Ade+ Ss) con una F- (z2-
Ade- Sr), donde Ade- significa que requiere adenina para crecer, y Ss o Sr
sensibilidad o resistencia a la estreptomicina, respectivamente. Una hora después
se diluyó la muestra y se colocó en un medio con estreptomicina. Muchas de las
colonias Ade+ tenían actividad -galactosidasa. Sin embargo, en el cruce recíproco
Hfr (z2- Ade+ Ss) x F-(z1- Ade- Sr) sólo unas pocas colonias tenían actividad -
galactosidasa. ¿Cuál es el orden de los marcadores respecto al locus Ade?. ¿Cuál es
la función del marcador S?

R= a) Ade-z2-z1 ; b) sirve para eliminar la cepa donadora y seleccionar sólo los Ade+
recombinantes.

15. Utilizando el fago transductante generalizado P22, crecido en un cultivo bacteriano

pur+pro+his+ se infecta e incuba un cultivo pur-pro-his-. Luego, se seleccionan los
transductantes para cada gen donador. En el experimento I se seleccionan los
transductantes pur+, en el experimento II los pro+ y en el III los transductantes his+

a) qué medios hay que utilizar para estos experimentos de selección?

b) cuando se observaron los transductantes en relación con la presencia de los marcadores

donadores no seleccionados, se obtuvieron los siguientes resultados:

I II III
pro- his- 87% pur- his- 43% pur- pro- 21%
pro+ his- 0% pur+ his- 0% pur+ pro- 15%
pro- his+ 10% pur- his+ 55% pur- pro+ 60%
pro+ his+ 3% pur+ his+ 2% pur+ pro+ 4%

Cuál es el orden de los genes de la bacteria?

c) Qué dos genes están más cercanos uno de otro?

d) Con el orden de genes que has propuesto explica las proporciones relativas de los
genotipos observados en el experimento II.

R=a)ExpI: MM+pro+his; expII: MM+pur+his; expIII: MM+pur+pro; b) pur-his-pro: c) his-

pro los mas cercanos; d) pur-his-pro+ 2 sobrecruzamientos; pur+his-pro+ 4 sobrecruz.;
pur-his+pro+ 2 sobrecruz.; pur+his+pro+ 2 sobrecruz. pero pur alejado
(independiente).

16. En E.coli la capacidad de utilizar lactosa como fuente de carbono requiere la

presencia del enzima - galactosidasa y - galactósido permeasa. Los genes que
codifican ambas enzimas (lacZ y lacY) están estrechamente ligados. Otro gen proC
 controla parcialmente la capacidad de las células de E.coli de sintetizar la prolina.
Los alelos strs y strr controlan la sensibilidad y resistencia a la estreptomicina,
respectivamente. Se sabe que la cepa HfrH transfiere los dos genes lac, proC y str,
en este orden, durante la conjugación.

Se hizo un cruce entre HfrH de genotipo lacZ-lacY+proC+strs y una F- de genotipo

lacZ+lacY-proC-strr. Después de alrededor de 2 horas, la muestra se diluyó y sembró en
una placa Petri con estreptomicina, pero no prolina. Cuando se probó la capacidad de
esas colonias recombinantes proC+strr de crecer en un medio que contenía lactosa
como única fuente de carbono, muy pocas colonias fueron capaces de fermentar la
lactosa. Cuando se realizó el cruce recíproco, bastantes recombinantes proC+strr
fueron capaces de crecer. ¿Cuál es el orden de los genes lacZ y lacY respecto a proC?
¿Para qué se utiliza el marcador str?

R= orden: lacY, lacZ, proC; Str para eliminar las donadoras y seleccionar las
conjugantes.

17. En un experimento se transformó con DNA de una cepa protótrofa (a+b+c+), una
cepa auxótrofa para estos marcadores (a-b-c-).

Se obtuvieron las siguientes clases transformantes:

a+b-c- 180 a+b-c+ 2

a-b+c- 150 a-b+c+ 1
a+b+c- 210 a+b+c+ 3
a-b-c+ 179

¿Qué conclusiones pueden extraerse acerca de las relaciones de ligamiento entre estos
loci marcadores?

R= el gen c es independiente de a y de b; frecuencia de recombinación entre a y b=

0.252

18. Cinco cepas Hfr (A,B,C,D,E), con los mismos alelos salvajes, se cruzan con una cepa F- que
posee los correspondientes alelos recesivos. Usando la técnica de la interrupción de la
conjugación, se comprueba que cada cepa Hfr transmite sus genes en una única secuencia
y que ésta es diferente en cada cepa, tal como se indica a continuación:

Cepa Hfr:
A mal+ strS ser+ ade+ his+
B ade+ his+ gal+ pro+ met+
C pro+ met+ xyl+ mal+ strS
D pro+ gal+ his+ ade+ ser+
E his+ gal+ pro+ met+ xyl+

a) ¿Cuál es la secuencia de estos genes en el cromosoma bacteriano? Sitúalos en el

cromosoma bacteriano.
b) Indica, para cada una de las cepas, qué marcador génico donador seleccionarías en
los receptores tras la conjugación para obtener la máxima proporción de
recombinantes que fuesen Hfr.

R= a)

b) cepa A: gal, cepa B: xyl; cepa C: ser; cepa D: str s; cepa E: mal

19. En un experimento de transducción generalizada, se obtuvieron fagos a partir de

una cepa donadora de E. coli de genotipo cys+ leu+ thr+ que se utilizaron para
transducir una receptora de genotipo cys- leu- thr-. Inicialmente la población
receptora tratada es cultivada en un medio mínimo suplementado con treonina y
leucina. Se obtienen muchas colonias.

a. ¿Cuáles son los genotipos probables de esas colonias?

b. Estas colonias son entonces replicadas (replica-platting) en tres medios diferentes:

(1) mínimo más treonina sólo, (2) mínimo más leucina sólo, y (3) mínimo. ¿Qué
genotipos pueden crecer, en teoría, en estos tres medios?

c. Se observa que el 56% de las colonias originales crecen sólo en (1), el 5% crecen en
(2) y no hay crecimiento en (3). ¿ Cuáles son los genotipos reales de las colonias sobre
(1), (2) y (3)?

d. Dibuja un mapa mostrando el orden de los genes y cuál de los genes de los extremos
está mas cerca del gen del medio.

R= a) cys+throleuo; b) 1: cys+leu+thro; 2: cys+leuothr+; 3: cys+leu+thr+; c)1: cys+leu+thr-;

2:cys+ leu-thr+; leu--cys-----thr

20. A partir de una cepa bacteriana prototrofa se obtuvo DNA que fue utilizado para
transformar una cepa mutante incapaz de sintetizar las substancias A, B y C. El número de
bacterias producidas en las diferentes clases transformadas se expresa a continuación:

5040 a+ b+ c+ 504 a+ b- c-
1260 a+ b- c+ 840 a+ b+ c-
252 a- b+ c+ 504 a- b+ c-
504 a- b- c+
a) ¿Cuál es el orden relativo en que están situados estos genes? b) Calcular la
distancia entre ellos.

R= a) El orden es BAC b) q(BA)= 0.3 y q(AC)= 0.25 y q(BC)= 0.37

21. De una cepa bacteriana de tipo salvaje se extrajo el DNA y se utilizó para
trasformar una cepa mutante incapaz de sintetizar los aminoácidos prolina (pro),
histidina (his) y arginina (arg). El número de colonias que se formaron de las
distintas clases transformantes fueron: 7164 pro+ his+ arg+; 708 pro+ his- arg+, 63
pro- his+ arg+; 1560 pro- his- arg+; 2196 pro+ his+ arg-; 249 pro+ his- arg- y 411
pro- his+ arg-. a) ¿Cuál es la distancia de ligamiento que separa estos genes?; b)
¿Cuál es el orden de ligamiento?

R= a) q(his,pro)= 0.13 y q(pro,arg)= 0.34 y q(his,arg)= 0.4

b) his pro arg

22. En un experimento de conjugación interrumpida con cuatro cepas Hfr, se encontró

que cada una transfería distintos marcadores genéticos a la cepa F en los tiempos
de interrupción que a continuación se señalan:

Marcadores y tiempo en minutos

cepa 1 phe his tio azi thr tia

6 11 33 48 49 60
cepa 2 mal met tia thr trp
10 17 22 33 57
cepa 3 arg tim met thr
15 21 32 48
cepa 4 his phe arg mal
18 23 35 45

Construye un mapa genético que incluya todos estos marcadores y señala la distancia
en minutos entre los pares de genes adyacentes.

R= 6 3 2 14 4 4 15 1 11 5 7 4 6 6

phe his trp tio azi thr tia met mal tim arg

23. Mediante la técnica de apareamiento interrumpido se probaron 5 cepas Hfr para

ver la secuencia con que transmitían cierto número de genes distintos a una cepa
F-. Se encontró que cada cepa Hfr transmitía los genes según una secuencia única,
como se presenta a continuación (en cada cepa sólo se contaron los 6 primeros
genes transmitidos).
 Cepa
1 2 3 4 5
Hfr
Orden 1 Q Y R O Q
de 2 S G S P W
trans- 3 R F Q R X
misión 4 P O W S Y
5 O P X Q G
6 F R Y W F
a) ¿Cuál es la secuencia génica en la cepa original a partir de la cuál se han
derivado estas cepas Hfr? b) Establezca para cada una de estas cepas Hfr qué
marcador genético dador seleccionaría en los receptores tras la conjugación
para obtener la máxima proporción de recombinantes que fuesen Hfr?

R= a) Y-X-W-Q-S-R-P-O-F-G b) cepa 1 W, cepa 2 X, cepa 3 P, cepa 4 F y cepa 5 S.

24. Utilizando el fago P1 de E. coli como partícula transductora de información genética

desde una cepa donante trp A+ Sup C- pyr F+ a una cepa receptora trp A- sup C+ pyr F-, se
encontraron los siguientes resultados al seleccionar transducidas Sup C+:

Sup C+ Trp A+ pyr F+ 36

Sup C+ Trp A+ pyr F- 114
Sup C+ Trp A- pyr F+ 0
Sup C+ Trp A- pyr F- 453

Determinar el orden de estos tres marcadores y estimar la frecuencia de

cotransducción.

R= Orden SupC trpA pyrF y fr cotransducción SupC,trpA= 0.25; SupC,pyrF= 0.06

25. En una experiencia de transducción con el fago P1 se utilizaron los marcadores genéticos
bacterianos a, b y c. Al seleccionar por un determinado marcador las bacterias
transducidas, se observa cotransducción de los marcadores no seleccionados con
diferentes frecuencias, cuyos valores se expresan a continuación:

Marcador Porcentaje de cotransducción

seleccionado con:
a b c
a - 53 3
c 3.52 0 -

Determinar la posición relativa de estos marcadores en el cromosoma bacteriano.

R= Posición relativa c a b ; Distancias 62 kb entre c y a y 17.5 entre a y b.

26. Para mapear tres loci en un cierto fago se cruzaron dos cepas de genotipos abc y
a+b+c+, respectivamente, mediante la técnica de infección simultánea. De un total
de 21200 calvas, se obtuvieron las siguientes clases recombinantes:

a + + 300 a b + 615 a + c 89 + b c 318 + + c 595 + b + 56

A partir de estos datos se pide establecer el orden relativo de estos tres loci, las
distancias entre ellos y el valor y significado de la interferencia.

R= Orden a b c; dist a,b=3.6 y dist b,c=6.4. Interferencia -2.04 (múltiples

entrecruzamientos, fenómeno poblacional).

27. En E.coli, cuatro cepas Hfr transfieren los siguientes marcadores genéticos, siguiendo el
orden que se indica a continuación:

Cepa 1: QWDMT
Cepa 2: AXPTM
Cepa 3: BNCAX
Cepa 4: BQWDM

Las cuatro cepas derivan de una misma cepa F+. ¿Cuál es el orden de estos marcadores
en el cromosoma circular de la cepa F+ original?

R= Q-W-D-M-T-P-X-A-C-N-B

28. En el cruzamiento Hfr x F-, se sabe que el primer marcador que entra es leu+, pero
se desconoce el orden de los otros marcadores. Si la estirpe Hfr es silvestre y la F-
es auxótrofa para todos los marcadores en cuestión, ¿cuál es el orden de los
marcadores en un cruzamiento en que se seleccionan los recombinantes leu+, si el
27% son ile+, el 13% son mal+, el 82% son thr+ y el 1% son trp+?

R= leu thr ile mal trp

29. Se realiza un cruzamiento entre una estirpe Hfr que es met+ thi+ pur+ y una F- que
es met- thi- pur-. Los experimentos de conjugación interrumpida indican que met+
es el último marcador que entra, por lo que en, el fondo genético F-, los
recombinantes met+ se seleccionan en un medio suplementado con los
compuestos pur y thi. Se determina la presencia de los alelos thi+ y pur+ entre
estos recombinantes met+ y se encuentran los siguientes números de individuos
de cada genotipo.

met+ thi+ pur+ 280

 met+ thi+ pur- 0
met+ thi- pur+ 6
met+ thi- pur- 52

a) ¿Por qué se omitió la metionina en el medio selectivo?

b) ¿Cuál es el orden de los genes?

c) ¿Cuáles son las distancias entre los marcadores, en unidades de mapa?

R=. a) Para poder obtener todos los recombinantes posibles met+; b) Orden met pur
thi; c) dist met,pur=15.4 y dist pur,thi= 1.8

30. Compara el mecanismo de transferencia y de herencia de los genes lac+ en

cruzamientos con estripes que sean Hfr, F+ y F'lac. ¿Cómo se comportaría una
célula F- incapaz de recombinar (rec-) en cruzamientos con cada una de las tres
estirpes? ¿Sería capaz la célula de heredar los genes lac+?

R= Sólo son incapaces de incorporar los genes lac+ las células F- rec- en los
cruzamientos con células Hfr y F+.

31. Se realiza un cruzamiento entre una estirpe Hfr arg+ bio+ leu+ y una estirpe F- arg- bio-
leu-. Los experimentos de conjugación interrumpida indican que arg+ es el último
marcador que entra en el receptor, de modo que los recombinantes arg+ pueden
seleccionarse en un medio que contenga sólo bio y leu. Se determina la presencia de bio+
y leu+ en estos recombinantes y se encuentran los siguientes números de cada genotipo:

arg+ bio+ leu+ 320

arg+ bio+ leu- 8
arg+ bio- leu+ 0
arg+ bio- leu- 48

a) ¿Cuál es el orden de los genes?

b) ¿Cuáles son las distancia de mapa en unidades de recombinación?

R= Orden arg bio leu; Distancias arg,bio= 12.8, bio,leu= 2.1

32. Se realiza un experimento de transformación con una estirpe donante resistente a

cuatro drogas: A, B, C y D. El receptor es sensible a las cuatro drogas. La población
 de células receptoras tratada se divide y se siembra en placas de medios suplementados
con varias combinaciones de las drogas. Los resultados fueron:

Droga(s) Añadida(s) Número de Droga(s) Añadida(s) Número de

colonias colonias
A 1.156 B 1.148
C 1.161 D 1.139
AB 46 AC 640
AD 942 BC 51
BD 40 CD 786
ABC 30 ABD 42
ACD 630 BCD 36
ABCD 30

N=10.000

a) Uno de los genes está claramente alejado de los otros tres, los cuales parecen estar
estrechamente ligados. ¿Cuál es el gen distante?

b) ¿Cuál es el orden de los tres marcadores que están ligados?

R= a) B es el gen distante; b) A D C.

33. Infectamos células de E.coli con dos cepas del virus T4. Una de las cepas es diminuta
(m), de lisis rápida (r) y turbia (tu); la otra es silvestre para los tres marcadors. Se siembran
y se clasifican los productos de la lisis. De 10.342 calvas, se encontraron los siguientes
números para cada genotipo:

m r tu 3467
+++ 3729
mr+ 853
m + tu 162
m++ 520
+ r tu 474
+r+ 172
+ + tu 965

(a) Determina la distancia de ligamiento entre entre estos genes,

(b) ¿Cuál es el orden de los genes?

(c) Determina el coeficiente de coincidencia y explica su significado.

R= a) distancias m,r= 12.8 y r,tu= 19.9. b) Orden m r tu c) Coeficiente de coincidencia

1.26 (múltiples entrecruzamientos, fenómeno poblacional)