Asimilación de Nutrientes

Profesor: Alfredo Rodríguez Delfín

Universidad Nacional Agraria La Molina

Centro de Investigación de Hidroponía
Lima, PERÚ
Asimilación de Cationes
◼ Cationes absorbidos por células vegetales
forman complejos con compuestos orgánicos: el
catión llega a ser enlazado a un compuesto
carbonado.

◼ Plantas asimilan cationes micronutrientes: cobre,

hierro, manganeso y zinc.
◼ Cationes forman Enlaces de Coordinación (no
covalentes) con compuestos carbonados.

◼ En un complejo de coordinación, varios átomos

de oxígeno y nitrógeno de un compuesto
carbonado donan electrones no compartidos
para formar un enlace con el catión nutriente.
Se neutraliza la carga positiva del catión.
◼ Enlaces de coordinación se forman entre
cationes polivalentes y moléculas de carbono.

◼ Cationes asimilados como complejos de

coordinación: cobre, zinc, hierro, magnesio y
calcio.
 Complejos de Coordinación

Iones cobre comparten Iones magnesio comparten electrones con

electrones con oxígenos átomos de nitrógeno en la clorofila a
hidroxilos del ácido tartárico
 Complejos de Coordinación

Ferroquelatasa cataliza la inserción del hierro ferroso dentro del

anillo porfirínico para formar el complejo de coordinación
Asimilación de Nitrógeno
 Energética de Asimilación de N
◼ Asimilación N requiere cantidades significativas de
energía para convertir compuestos inorgánicos estables,
de baja energía, en compuestos orgánicos de alta
energía.

◼ Reducción de nitrato a nitrito; luego a amonio, requiere

la transferencia de 10 electrones: 25% del total de
energía gastada tanto en raíces como en follaje.
◼ Plantas usan 1/4 de su energía para asimilar N, que
representa menos del 2% del PS total de la planta.
◼ Reacciones asimilatorias de N ocurre en cloroplasto
(estroma), intervienen agentes reductores: NADPH,
tioredoxina, ferrodoxina, generados durante transporte
de electrones.
◼ Foto asimilación: asimilación de nutrientes y
transporte de electrones: genera exceso de reductores
más de lo que necesita el ciclo de Calvin (bajo
condiciones de alta luminosidad y bajo CO2).
Ciclo de N
 Asimilación de Nitrato
◼ Plantas asimilan N en raíces a través de sistemas de
transporte de alta o baja afinidad.
◼ El N se asimila como nitrato (NO3-) o amonio (NH4+).
◼ También puede ocurrir asimilación de N orgánico como
amino ácidos.
◼ Asimilación de N inorgánico u orgánico involucra
enzimas estrechamente relacionadas
◼ Amonio frecuentemente es fijado en raíces
◼ Nitrato transportado hacia el follaje antes de ser
reducido; también puede ser almacenado en vacuolas.
◼ Primera etapa: reducción de NO3- a NO2- en el
citosol.

NO3- + NAD(P)H + H+ + 2 e- NO2- + NAD(P)+ + H2O

Nitrato Reductasa

◼ Nitrato reductasa (NR) contiene 2 subunidades

idénticas, c/u con 3 grupos prostéticos: FAD, HEME y
Complejo Molibdeno. Principal proteína que contiene
Mo en tejidos vegetales.
◼ Falta de Mo provoca acumulación de nitratos.
◼ Reacción empieza con transporte de NAD(P)H al Dominio
Flavin, a través del Dominio Heme y, finalmente, vía
cofactor Mo.
◼ Tejidos verdes tienen >>> actividad de NR que NiR: NR
tiene una tasa limitante.
◼ Plantas regulan proceso de reducción de nitrato al
consumir ~20% de e- producidos por transporte de
electrones fotosintéticos.
◼ Producto intermedio de la reducción de nitrato (nitrito)
es citotóxico y mutagénico.
◼ Genes NR son regulados por:
◼ nitrato

◼ luz

◼ azúcares

◼ Glutamato

◼ Glutamina
Actividad de Nitrato Reductasa
en tejidos de Zostera marina

Touchette y Burkholder, 2001

 Actividad de Nitrato Reductasa
en hojas de melón

RA: Tasa relativa de adición de N dia−1

Roosta et al., 2009
Actividad de la Nitrato reductasa en plántulas de arroz

Singh et al, 2019

 Actividad de la nitrato reductasa en dos cultivares de lechugas
crecidas en diferentes sistemas de producción de cultivos.

0.03
2 g PF h )
-1

0.025
NR (NOFWxh])

0.02
-

Manuela
NRA (NO2-/[g

0.015
Asterix
0.01
Actividad

0.005

0
Hydroponics
Hidroponía Organics
Orgánico Traditional
Tradicional

crop systems
Sistema de cultivo

Coronel, 2010
• Exceso de nitrato: peligro potencial por su conversión en
nitrito: produce metahemoglobina luego de la ingestión.

• Metahemoglobina no puede unir oxígeno causando

hipoxemia.

• En verduras frescas y no dañadas, las concentraciones de

nitrito son muy bajas.

• En condiciones adversas de almacenamiento después de

la cosecha, las concentraciones de nitrito en hortalizas
aumentan como resultado de la contaminación bacteriana
y la acción endógena de la nitrato reductasa.
Nitrato en vegetales a menudo se asocia con efectos
nocivos para la salud humana, con efectos tóxicos de la
metahemoglobinemia, causando formación endógena de
compuestos nitrosos cancerígenos.

Comité Científico de Alimentos UE estableció una Ingesta

Diaria Aceptable (IDA) de:
• 0 a 3.7 mg/kg de peso corporal para nitrato
(equivalente a 222 mg de nitrato por día para un
adulto de 60 kg).
• 0–0.06 mg/kg para el nitrito (UE, 1997).
• Metahemoglobinemia se produce cuando los glóbulos rojos
contienen methemoglobina a niveles superiores al 1%.

• Metahemoglobina: presencia de hierro en forma férrica en

lugar de la forma ferrosa: Disminución de la disponibilidad
de oxígeno en los tejidos.

• Síntomas incluyen cambios en el color de la piel y en el

color de la sangre en niveles de hasta el 15%.

• Por encima del 15%, los síntomas neurológicos y cardíacos

surgen como consecuencia de la hipoxia.

• Niveles superiores al 70% suelen ser fatales.

• Acumulación de nitrito en verduras se inhibe bajo
almacenamiento congelado debido a que la nitrato
reductasa endógena está inactivada.

• Reducción oral del nitrato es la fuente más importante de

nitrito.

• Evitar el uso excesivo de fertilizantes nitrogenados para

reducir la acumulación de nitratos en el suelo y en las
hortalizas.
• Almacenar y procesar adecuadamente las hortalizas
para evitar la contaminación de bacterias.

• Eliminación del tallo y de la nervadura central

disminuye contenido de nitratos en lechuga y
espinaca.

• Pelado de papas y betarragas disminuye contenido de

nitrato.

• Evitar dar alimentos preparados que contengan

hortalizas a infantes menores de 3 meses.
◼ Nitrito Reductasa (NiR): convierte NO2- en NH4+.
altamente reactivo y potencialmente tóxico.

◼ Células vegetales transportan rápidamente NO2-

generado durante la reducción del NO3-.

◼ Reducción de NO2- en NH4+ en cloroplastos y plastidios

◼ En Hojas: desde el citosol hacia cloroplastos

◼ En Raíces: desde el citosol hacia plastidios

◼ NiR contiene 2 grupos prostéticos: Fe4-S4 y Heme

◼ NiR transfiere electrones de Ferrodoxina (Fd) al NO2-:

NO2- + 6 Fd red + 8 H+ + 6 e- NH4+ + 6 Fd ox + 2 H2O

◼ Ferrodoxina reducida proviene del transporte de

electrones de la fotosíntesis en cloroplastos.
 Nitrito Reductasa

Luz
Ferrodoxina
(reducida) (NO2-)
Nitrito

Reacciones luminosas
en la fotosíntesis

Nitrito Reductasa (NH4+)

Amonio
Ferrodoxina
(oxidada)

NO2- + 6 Fd red + 8 H+ + 6 e- NH4+ + 6 Fd ox + 2 H2O

 Asimilación del Amonio

◼ Altas [NH4+] en solución suelo, raíces lo absorben

rápidamente; transportado y acumulado en diferentes
partes de la planta.

◼ Para asimilar NH4+, las plantas consumen compuestos de

reserva (almidón, sacarosa, etc.)

◼ Exceso NH4+ asimilado, se almacena en vacuolas,

evitando efectos tóxicos sobre membranas y en citosol.
◼ Células vegetales evitan toxicidad de NH4+ por su
conversión rápida en aminoácidos, vía:
◼ Glutamina Sintetasa (GS)
◼ Glutamato Sintasa (GOGAT, Glutamina-2-Oxoglutarato
Aminotransferasa)

◼ Plantas contienen 2 GS:

◼ en citosol
◼ en plastidios de raíces o en cloroplastos.

Glutamato + NH4+ + ATP Glutamina + ADP + Pi

Glutamina Sintetasa
◼ Altos niveles de glutamina en plastidios estimula
Glutamato Sintasa, transfiriendo grupo amida a 2-
oxoglutarato: 2 moléculas de glutamato.

◼ Plantas contienen 2 enzimas GOGAT:

◼ acepta electrones de NADH (NADH-GOGAT)
◼ acepta electrones de la Ferrodoxina (Fd-GOGAT)

Glutamina + 2-oxoglutarato + NADH + H+ 2 Glutamato + NAD+

NADH-GOGAT

Glutamina + 2-oxoglutarato + Fd red 2 Glutamato + Fd ox

Fd-GOGAT
 Vía GDH forma Glutamato (NADH o NADPH)

Glutamato
Dehidrogenasa
(GDH)

Amonio

2-Oxoglutarato Glutamato
 Vía GS-GOGAT forman Glutamina y Glutamato

Glutamina Glutamato
Sintetasa (GS) Sintasa (GOGAT)

Glutamato Glutamina 2-Oxoglutarato 2 Glutamatos

◼ Una vez asimilados glutamina y glutamato, N es
incorporado en otro aminoácido a través de reacciones
de transaminación: Aminotransferasas

◼ Presentes en: citosol, cloroplastos, mitocondrias,

glioxisomas y peroxisomas.

◼ Asparagina y Glutamina no solo son precursores de

proteínas, también sirven para transportar y almacenar
N.
 Aspartato
aminotransferasa

Glutamato Oxalacetato Aspartato 2-Oxoglutarato

Asparagina
Sintetasa (AS)

Glutamina Aspartato Asparagina Glutamato

 Absorción y Asimilación de
Nitrógeno en Plantas

GS2 GOGAT
Asimilación de Azufre
Ciclo del Azufre
 Rol Esencial del Azufre

◼ Plantas incorporan azufre en una amplia gama de

compuestos secundarios que tienen impacto medio
ambiental:
◼ olor penetrante y sabor de cebolla, ajo y col causados ​por
compuestos secundarios que contienen azufre
◼ Algunas fitoalexinas contienen azufre (camalexin,
metoxybrassinina, brassinina, ciclobrassinina), importantes en la
lucha contra agentes patógenos de plantas.
◼ Puentes disulfuro: rol estructural y regulatorio en
proteínas.
◼ Sitios catalíticos de varias enzimas y coenzimas
contienen S: ureasa, coenzima A.
◼ Constituyente en amino ácidos cisteína y metionina,
coenzimas: centros Fe-S, ácido lipoico, tiamina (Vit B1).
◼ Participa en transporte de electrones a través de centros
Fe-S.
◼ Metabolitos secundarios que contienen S: aliína en ajo
(antiséptico); sulforafano en brócoli (anticancerígeno).
◼ Plantas sintetizan numerosos metabolitos secundarios
que contienen S. Grupo más característico:
Glucosinolatos, importante para la defensa contra
patógenos, y también por su gran valor nutricional.
◼ Azufre disponible en plantas en forma de sulfato aniónico
(SO4=) presente en el suelo. Se transporta activamente en
raíces. Luego se distribuye sin metabolizar por toda la
planta.
◼ SO4= componente aniónico importante de la savia
vacuolar. No necesariamente entra en la corriente de
asimilación.
◼ Transporte de SO4= ocurre a través de varios sistemas de
membrana a medida que entra y se distribuye por toda la
planta y dentro de las células.
◼ Transporte a través de la membrana plasmática se
produce con protones en una proporción de 1 SO4=: 3 H+,
impulsado por un gradiente de protones mantenido por
una ATPasa.
◼ SO4= se puede añadir a un grupo hidroxilo de una
molécula orgánica: sulfatación, catalizada por
sulfotransferasas.
◼ Cys contiene azufre reducido, que se produce a partir de
SO4= en una vía de múltiples etapas en el que se añaden
ocho electrones para formar sulfuro (S=).

◼ Reducción de SO4= a S= consume 732 kJ mol-1.

◼ Reducción de NO3- a NH4+ requiere 347 kJ mol-1.
◼ SO4= compuesto inerte que debe activarse antes de ser
metabolizado.
◼ Hojas más activas que raíces en Asimilación de S.
◼ Glutatión, Tioredoxina, Ferrodoxina, NADPH o O-
acetilserina sirven como donadores de electrones en
varias etapas de la vía.
◼ Fotosíntesis provee Tioredoxina y Ferrodoxina
◼ Fotorespiración genera serina, estimula la producción de
O-acetilserina.
◼ S asimilado en hojas exportado como Glutatión (Glicina-
Cisteina-Glutamato) vía floema hacia lugares de síntesis
de proteínas.
◼ Glutatión actúa como señal que coordina la absorción de
SO4= por las raíces y, su asimilación por el vástago.
 Glicina

Cisteina

Glutamato

Glutatión Reducido
◼ Primera etapa en síntesis de compuestos orgánicos que
contienen S: reducción de SO4= a cisteína.
◼ SO4= absorbido del suelo, transportado hacia las hojas
donde es activado por ATP vía ATP sulfurilasa (en
citosol y plastidios).
◼ Reacción entre SO4= y ATP: Adenosin-5-fosfosulfato
(APS) y pirofosfato (PPi).
SO4= + MgATP MgPPi + APS
◼ Productos APS y PPi convertidos rápidamente a otros
compuestos.
◼ APS reducido por APS reductasa. Glutatión (GSH) actúa
como donador de e-.
◼ Reducción de APS: proceso múltiple, ocurre en plastidios
◼ 1) APS reductasa transfiere 2 electrones del glutatión
reducido (GSH) para producir sulfito (SO32-):

APS + 2 GSH SO32- + 2 H+ + GSSG + AMP

SH en GSH enlace S-H

SS en GSSG enlace S-S

◼ 2) Sulfito reductasa transfiere 6 electrones de

ferrodoxina (Fdred) para producir sulfuro (S2-):

SO32- + 6 Fdred S2- + 6 Fdox

 Asimilación del Azufre

3-Fosfoadenosin-5-fosfosulfato (PAPS)

Adenosin-5-fosfosulfato (APS)

S-sulfoglutatión
◼ Sulfuro reacciona con O-acetilserina (OAS) para
formar cisteína y acetato.
◼ OAS reacciona con sulfuro vía serina acetil
transferasa:

Serina + acetilCoA OAS + CoA

◼ Reacción que produce cisteína y acetato catalizada por

OAS tioliasa:

OAS + S2- cisteína + acetato

 Asimilación del Azufre

Adenosin-5-fosfosulfato (APS)

S-Sulfoglutatión

Serina O-Acetilserina Cisteína

◼ Vía alterna sulfatación de APS
◼ APS reacciona con ATP para formar 3-
fosfoadenosin-5-fosfosulfato (PAPS) vía
APS Kinasa:

APS + ATP PAPS + ADP

◼ Sulfotransferasas transfieren grupo SO4= de

PAPS a varios compuestos: colina,
brassinosteroides, flavonoles, ácido gálico,
glucosinolatos, péptidos y polisacáridos
◼ Metabolismo primario y secundario del S es
conectado por una reacción enzimática simple
catalizada por APS kinasa.
 Asimilación del Azufre

3-Fosfoadenosin-5-fosfosulfato (PAPS) Metabolito sulfatado

Adenosin-5-fosfosulfato (APS)
▪ APS activado por APS kinasa para formar PAPS, requerido
para varias reacciones de sulfatación, incluyendo
biosíntesis de glucosinolatos.
▪ Sulfuro reducido por sulfuro reductasa a Sulfuro Hidrógeno
(H2S), incorporado en O-acetilserina vía O-acetil(tiol)liasa
para formar cisteína.
▪ Cisteína: producto primario de la asimilación de S,
incorporado en Proteínas Ricas en S (SRPs; incluyendo
tioninas) y GSH. Donador del S reducido para biosíntesis de
glucosinolatos y síntesis de fitoalexinas.
▪ Biosíntesis de cisteína ocurre principalmente en hojas.
▪ H2S liberado de cisteína vía acción de desulfhidrasas
(localizadas en diferentes compartimentos celulares),
mientras que el S elemental, S0, es liberado de GSH.
▪ Exceso sulfuro convertido a sulfato vía sulfuro oxidasa,
reacción que usa O2 como aceptor de e-, liberando H2O2
(señal de defensa).
Asimilación del Azufre y su Localización
subcelular de las principales etapas

1 Transportador sulfato
2 ATP sulfurilasa
3 APS reductasa
4 Sulfito reductasa
5 Serina acetiltransferasa
6 O-acetilserina tioliasa
7 γ-glutamilcisteina sintetasa
8 Glutatión sintetasa
9 APS kinasa
10 Sulfotransferasa

Kopriva, S. 2005
◼ Metionina sintetizada a partir de cisteína.
◼ Luego de sintetizar cisteína y metionina, S
puede ser incorporado a proteínas y una
variedad de otros compuestos:
◼ acetil coenzima A
◼ S-adenosilmetionina (importante síntesis de etileno y
en las reacciones que involucran la transferencia de
grupos metilo, como en la síntesis de lignina).
 Biosíntesis de
compuestos de defensa
1) Transportador de alta afinidad que contienen S
2) ATP sulfurilasa en hojas
3) APS reductasa
4) APS kinasa
5) Sulfuro oxidasa
6) Sulfuro reductasa
7) Serina acetiltransferasa
8) O-acetil(tiol)liasa
9) desulfhidrasas

Reacciones (2), (3), (6), (8) en plastidios

Liberación H2S en plastidios, mitocondrias y

citosol.
En peroxisomas (5)

Rausch y Wachter 2005

Síntesis de amino ácidos en Plantas