PREPARACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE NANOCRISTALES DE CELULOSA

DE CACOTA DE CAFÉ (COFFEA ARÁBICA)

FRANCISCO PARRA VARGAS

CÓDIGO 1320068234

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS – PROGRAMA DE QUÍMICA
METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN II
FLORENCIA - CAQUETÁ
2022
PREPARACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE NANOCRISTALES DE CELULOSA
DE CACOTA DE CAFÉ (COFFEA ARÁBICA)

FRANCISCO PARRA VARGAS

CÓDIGO 1320068234

DIRECTOR: VLADIMIR SÁNCHEZ TOVAR, UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA,

FLORENCIA-CAQUETÁ

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS – PROGRAMA DE QUÍMICA
METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN II
FLORENCIA - CAQUETÁ
2022
 3

TABLA DE CONTENIDO
1 INTRODUCCIÓN .............................................................................................. 5

2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA .................................................................. 8

3 JUSTIFICACIÓN ............................................................................................... 9

4 PREGUNTA DE INVESTIGACIÓN ................................................................. 11

5 OBJETIVOS.................................................................................................... 11

6 MARCO TEÓRICO ....................................................................................... 111

7 ESTADO DEL ARTE ...................................................................................... 15

8 HIPÓTESIS..................................................................................................... 18

9 METODOLOGÍA ............................................................................................. 18

10 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES……………………………………………..21

11 PRESUPUESTO……………………………………………………………………22

12 BIBLIOGRAFÍA……………………………………………………………………..23
 4

TABLA DE FIGURAS

FIGURA 1. Imágenes TEM de alta resolución de (a) CNC y (b) Nanofibras de

celulosa.

FIGURA 2. Sección típica de una cereza de café.

FIGURA 3. Estructura química de la celulosa.

FIGURA 4. Nanocristales de celulosa.

TABLA DE CUADROS

CUADRO 1. Residuos obtenidos en el proceso de beneficio e industrialización de 1

Kg de café cereza.

CUADRO 2. Cronograma de actividades.

CUADRO 3. Presupuesto de proyecto.

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1 INTRODUCCIÓN

El café es una de las bebidas más consumidas en el mundo. Colombia es uno de

los mayores productores de café, según la USDA se estima que durante el
2016/2017 se produjeron 14.5 millones de sacos (1 saco=60 kilogramos). En el
proceso de extracción se generan grandes cantidades de desechos. En estos
residuos se encuentran compuestos tóxicos, que normalmente se eliminan en el
medio ambiente y causan problemas ambientales (Leifa et al., 2000). En la tabla 1
se pueden observar los residuos generados y la cantidad que representan en 1 Kg
de cereza de café.

CUADRO 1. Residuos obtenidos en el proceso de beneficio e industrialización de

1Kg de café cereza. (Calle, 1977)

La cáscara o cacota de café representa el 39,4% del desperdicio en 1 Kg de cereza

de café. Este compuesto está constituido por un 35% de celulosa, 46% de
hemicelulosa y 19% de lignina (Sánchez 2009). Este subproducto se ha empleado
para la obtención de abonos de compostaje, ensilaje para rumiantes, para la
obtención de pectinas y cafeína, para la obtención de levaduras alimenticias. La
cacota de café puede ayudar al desarrollo sustentable y se le puede dar un uso
diferente a los mencionados, puesto que es un compuesto orgánico, representa una
fuente para la extracción de nanocristales de celulosa (CNC) debido a su contenido
de celulosa.

La celulosa es el material orgánico renovable más abundante producido en la

biosfera, la celulosa es ampliamente distribuida en plantas superiores, en varios
animales marinos, y en menor grado en algas, hongos, bacterias, invertebrados e
incluso amebas. En general, la celulosa es una sustancia fibrosa, dura e insoluble
 6

en agua que juega un papel esencial en el mantenimiento de la estructura de las

paredes celulares de las plantas. Primero fue descubierta y aislada por Anselme
Payen en 1838, y desde entonces, múltiples aspectos físicos y químicos de celulosa
se han estudiado ampliamente. Descubrimientos constantemente se están haciendo
con respecto a su biosíntesis, ensamblaje y características estructurales que han
inspirado un número de los esfuerzos de investigación entre una gran cantidad de
disciplinas (Battista et al., 1956).

Los vegetales están constituidos básicamente por holocelulosa, lignina, resinas,

aceites volátiles, ceras, taninos, proteínas, lípidos, ácidos, minerales y agua. La
holocelulosa está constituida por celulosa (40 al 60%) y hemicelulosa (15-35%) la
cual es utilizada para fabricar papel. La lignina es rica en carbono y está presente
en un 20-25% en los vegetales; las resinas, las ceras y los taninos se hallan en
cantidades variables, dependiendo del tipo de material vegetal. El agua
generalmente constituye el 20 a 35% de las maderas. (Cavaille et al., 2000).

Independientemente de su origen, la celulosa se puede caracterizar como un

homopolímero de alto peso molecular, unida por enlaces 1,4 de unidades de
anhidro-D-glucosa en las que cada unidad está en sacacorchos 180° con respecto
a sus vecinos, y el segmento de repetición con frecuencia se toma como un dímero
de glucosa, conocido como celobiosa. Cada cadena de celulosa posee una
asimetría química direccional con respecto a los términos de su eje molecular: un
extremo es una reducción química funcional y la otra tiene un grupo hidroxilo
colgante, el extremo nominal no reductor. Los números de unidades de glucosa o el
grado de polimerización es de hasta 20000, pero pueden ocurrir cadenas de
celulosa más cortas y se localizan principalmente en las paredes celulares
primarias. (Youssef et al., 2010)

Las suspensiones coloidales de celulosa fueron sintetizadas por primera vez por
Ranby en 1951 mediante el uso de una degradación catalizada por ácido sulfúrico
controlada de fibras de celulosa.

Los CNC son cristales de celulosa con forma de aguja de 10-20 nm de ancho y
varios cientos de nanómetros de longitud. Se producen a partir de diversas fuentes
 7

biológicas (por ejemplo, pulpa de madera blanqueada, algodón, manila, tunicina,

bacterias, etc.) a menudo mediante hidrólisis ácida fuerte. Los tratamientos ácidos
eliminan los componentes no celulosos y la mayoría de la celulosa amorfa de los
materiales de origen y producen cristales de celulosa de alta pureza. Por lo tanto,
los CNC son altamente cristalinos. Los CNC se han incorporado como agentes de
refuerzo en una amplia gama de matrices de polímeros tales como polioxietileno,
poli alcohol vinílico, caucho natural, almidón y poliuretano. En los procesos de
extracción de NCN también se pueden observar las nanofibras de celulosa que
tienen una morfología y dimensiones que pueden variar sustancialmente,
dependiendo de los grados de fibrilación y de cualquier pretratamiento involucrado.
Las nanofibras de celulosa contienen celulosa amorfa y no son tan altamente
cristalinos como los CNC. Numerosos estudios se han llevado a cabo utilizando
diversas fibras celulósicas para el refuerzo de polímeros (Xuezhu et al., 2013).

Figura 1. Imágenes TEM de alta resolución de (a) CNC y (b) Nanofibras de celulosa
(Xuezhu et al., 2013).
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2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA

Uno de los principales ingresos en la economía colombiana está representado

por la comercialización del café colombiano. Para octubre de 2012 y septiembre
de 2013, las ventas externas superaron los 8.8 millones de sacos de 60 kilos de
café. La producción de café anualmente deja 2 millones de toneladas de cacota
de café, que representa un residuo en el proceso de producción de café. En la
mayoría de los casos, los procesos para la utilización de estos residuos han
sido encaminados en hacer de la cacota de café un producto apto para el
consumo animal, en forma de ensilaje o bien seca, empleada como abonos de
compostaje. El departamento del Huila es uno de los mayores productores de
café en el país y anualmente también produce grandes cantidades de cacota
de café, este desecho representa el 39,4% en 1 Kg de café cereza. Las grandes
cantidades de desechos de café representan un problema, debido a que
contienen sustancias tóxicas como taninos y cafeína que resultan perjudiciales
para algunos animales. La cacota de café contiene un 35% de celulosa, 46%
de hemicelulosa, y 19% de lignina. Una alternativa para el aprovechamiento de
este desecho y la disminución de la contaminación para un proceso de
producción de café más sostenible, sería la extracción de nanocristales de
celulosa debido al contenido de celulosa presente en este material. Los
nanocristales tienen varios campos de aplicación, como el área biomédica,
dispositivos de almacenamiento, separación de baterías, refuerzo de
materiales, la purificación de agua y aire, material de revestimiento superficial,
entre otros.
 9

3 JUSTIFICACIÓN

En los últimos años, la sostenibilidad se ha convertido en un aspecto esencial para ser

observada en cualquier actividad humana. Por ejemplo, la fabricación y el
procesamiento sostenibles de alimentos (que reduce el desperdicio de materias
primas y minimiza los desechos) ya es un componente obligatorio del modelo
comercial. Además, puede representar un desafío y una oportunidad para innovar,
buscando mejores productos y tecnologías de producción, mejorando el desempeño
ambiental. En el caso específico de los productores de café, ya se han adoptado varios
procedimientos para obtener un producto más sostenible, empleando prácticas de
cultivo orgánico, conservación de bosques nativos y biodiversidad, café cultivado a
prueba de sombra, y café de comercio justo. (Anabela et al,. 2014)

Sin embargo, la industria del café que es el segundo mayor producto en el mundo
después de la industria petrolera, aún genera grandes cantidades de residuos que
representan serios problemas ambientales, debido a sustancias tóxicas como los
taninos y cafeína presentes en estos residuos (Mussatto et al., 2011), debido a los
efectos de estos problemas es importante la gestión de estos desechos.

El café es una de las bebidas más consumidas en el mundo actual, donde anualmente
la producción mundial es de 7 millones de toneladas de granos verdes de café para el
2010. El café representa una de las principales fuentes de ingresos para la economía
colombiana y especialmente para el departamento del Huila, ya que es uno de los
mayores productores de café en el país. En el proceso de la producción de café se
generan diferentes residuos; uno de ellos es la cacota de café que representa
aproximadamente el 39,4% del residuo de 1 Kg de la cereza de café (Calle, 1977).

La cacota de café se ha empleado para el cultivo de hongos comestibles del género

Pleurotus (Rodriguez et al., 1994), también en la transformación de la cáscara en
abono utilizando lombriz roja (Davila et al,. 1996). Se ha aprovechado este residuo
para la obtención de pectinas (rodriguez, 1995) y en la producción de levaduras
alimenticias (Calle, 1977). También se ha utilizado para la producción de abono
orgánico, obtención de cafeína, extracción de proteína, sustancias pécticas y enzimas
pectinolíticas. Otras posibilidades son la hidrólisis de la pulpa para producir melaza, la
 10

fermentación para la producción de alcohol y la obtención de una variedad de extractos

para bebidas gaseosas, mermeladas y otros tipos similares de alimentos y para la
producción de proteína unicelular (Calle, 1977; Bressani, 1978).

Entre los usos que se le ha dado a este residuo no se encontró su empleo en la

extracción de nanocristales de celulosa. La cacota de café puede representar una
buena opción para extraer este compuesto ya que está constituida por un 35% de
celulosa (Garcial et al,. 1999).

Los CNC son únicos entre una gama de otros materiales nanoestructurados debido a
sus beneficios, como ser un nanomaterial renovable, sostenible, no tóxico y
biocompatible. Debido a sus dimensiones nanométricas, gran relación de aspecto y
excelentes propiedades mecánicas y químicas, el CNC tiene muchas aplicaciones
potenciales en muchas áreas, en una amplia gama de aplicaciones industriales, como
ciencia de materiales biodegradables de alto rendimiento, electrónica, ingeniería
biomédica, administración de fármacos, catálisis, etc, (Johnsy, 2015).

La extracción de los CNC a partir de la cacota de café puede representar una

alternativa para el aprovechamiento de este residuo y al mismo tiempo disminuir el
impacto en el medio ambiente aportando un plus para el desarrollo sostenible en la
industria del café.
 11

4 PREGUNTA DE INVESTIGACIÓN

➢ ¿Se pueden extraer nanocristales de celulosa a partir de cacota de café, el

cual es un desecho generado en el proceso de la producción de café?

5 OBJETIVOS

5.1 OBJETIVO GENERAL

Obtener nanocristales de celulosa a partir de la cacota de café (Coffea arabica).

5.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

➢ Recolectar el material cacota de café.

➢ Secar la cacota de café en un horno a 60 °C.
➢ Moler y tamizar la cacota de café mediante un tamiz de 250 micras y otro de 1
mm.
➢ Caracterizar la cacota de café con parámetros de humedad, contenido de
celulosa, hemicelulosa, lignina, cenizas, minerales, retención de agua y aceite.
➢ Extraer materiales no celulósicos utilizando una mezcla de tolueno/alcohol 2:1
de la cacota de café tamizada a 250 micras.
➢ Obtener celulosa de la cacota de café aplicando un tratamiento alcalino con
KOH.
➢ Preparar nanocristales de celulosa de la celulosa extraída realizando una
hidrolisis ácida con H2SO4.
➢ Caracterizar los nanocristales de celulosa mediante las técnicas de FTIR,
difracción de rayos X, análisis termogravimétrico y microscopía electrónica de
barrido.
 12

6 MARCO TEÓRICO
Las plantas de café pertenecen a la familia botánica Rubiaceae, que incluye
aproximadamente 80 especies. Dos especies principales de café se cultivan para
beber. Coffea arabica, conocido como café arábica, representa aproximadamente
el 75% de la producción mundial de café y C.canephora, conocida como café
robusta, representa aproximadamente el 24% de la producción mundial de café
(Bertrand et al,. 2002).
En el proceso de producción de café se generan varios subproductos celulósicos,
tales son cáscara o cacota, mucílago, pergamino, piel y borra de café.

Figura 2. Sección típica de una cereza de café (Narita et al,. 2011).

La celulosa representa aproximadamente 1,5×1012 toneladas de la biomasa anual

generada por las plantas, es el polímero orgánico más abundante y se considera
una fuente casi inagotable de materias primas para diversos productos (Sukumaran
et al.2005). Además de celulosa las plantas también contienen polisacáridos como
hemicelulosa y lignina, que al igual que la celulosa se encuentran en la pared celular
de las células, aportando rigidez a las plantas. Pueden variar de acuerdo a la fuente
orgánica (Heck et al. 2002). Por ejemplo, los residuos de cacota de café contienen
35% de celulosa, 46% de hemicelulosa y 19% de lignina (Sanchez 2009), el aserrín
suele contener 40-50% de celulosa, 25-35% de hemicelulosa y 20-30% de lignina
(Sınağ et al. 2009).
 13

Figura 3. Estructura química de la celulosa.

La celulosa está formada por un homopolisacárido lineal compuesto por unidades

repetitivas de β-D-glucopiranosilo unidas por 1-4 enlaces glicosídicos en una
variedad de disposiciones y tiene la tendencia de formar fibras. La biosíntesis de
celulosa en madera y plantas consiste en la inclusión progresiva de unidades de
glucosa en estructuras fibrilares largas y monocristalinas, dentro de las cuales las
moléculas de celulosa se disponen paralelas entre sí con una simetría doble de
tornillo a lo largo de su longitud. Muchas cadenas de celulosa se unen para formar
fibras que tienen un diámetro aproximado ente 2 y 20 nm, dependiendo de la fuente
(Hudson et al., 2013).
La celulosa en las plantas está constituida en regiones amorfas y cristalinas. Las
microfibrillas están formadas por la agregación de fibrillas elementales por
coalescencia, que se usa como mecanismo para reducir la energía libre de las
superficies. El fenómeno de agregación está respaldado por las fuerzas de Van Der
Waals, también las cadenas de celulosa se encuentran estabilizadas lateralmente
por enlaces de hidrógeno intra e intermoleculares entre los grupos hidroxilo y el
oxígeno de las moléculas adyacentes. Las moléculas de celulosa que se agregan
para formar microfibrillas tienen diferentes orientaciones dependiendo de la fuente.
Los agregados de microfibra también consisten en cadenas de celulosa muy
compactas que forman cristales, que se estabilizan mediante enlaces de hidrógeno
complejos y fuertes, junto con algunas cadenas menos ordenadas que forman
regiones amorfas. Cuando se someten a los tratamientos mecánicos, químicos y
enzimáticos adecuados, las nanofibras individualizadas, llamadas nanocristales de
celulosa (CNC), la longitud promedio puede variar de decenas de nanómetros a
 14

varios micrómetros, mientras que el ancho oscila entre 3 nm y 50 nm. Se pueden

extraer mediante la descomposición de las regiones amorfas. En comparación con
la celulosa ordinaria, el CNC muestra muchas otras propiedades excelentes, como
una gran superficie específica, excelente propiedad mecánica, alto grado de
cristalinidad, bajo coeficiente de expansión térmica, etc. Debido a sus propiedades
únicas y efectos a nanoescala, CNC se han utilizado en muchos campos, como el
área biomédica, separador de baterías, dispositivos de almacenamiento, el refuerzo
de compuestos, la purificación del agua y del aire (Johnsy, 2015).
Se han utilizado varios procesos mecánicos, como homogeneizaciones a alta
presión, tratamientos ultrasónicos de alta intensidad, técnicas de microfluidización,
criocritura, etc., para la extracción de microfibrillas de celulosa. El método químico
para convertir microfibrillas de celulosa en CNC es mejor que los métodos
mecánicos, ya que el primero reduce el consumo de energía y también produce
nanocristales cortos en forma de varillas con cristalinidad mejorada. La hidrólisis
ácida fuerte como método químico generalmente es usada para la eliminación de
regiones amorfas que se distribuyen regularmente a lo largo de las microfibrillas.
Los ácidos fuertes pueden penetrar fácilmente en las regiones amorfas que tienen
un bajo nivel de orden e hidrolizarlas, dejando intactas las regiones cristalinas. La
degradación de las fibras de celulosa se realiza a ebullición en solución ácida
alcanzando un límite después de un cierto período de tratamiento. Mediante la
microscopía electrónica de transmisión y estudios de difracción de rayos x se puede
confirmar la presencia de partículas de celulosa en forma de aguja y su cristalinidad
(Cataño, 2009).

Figura 4. Nanocristales de celulosa (Youssef et al,. 2010).

 15

7 ESTADO DEL ARTE

La cacota de café es un desecho que deriva de la producción de café, se han venido
aplicando varios estudios para el aprovechamiento de este subproducto, tales como
en Fathallh et al (2012) donde se investiga las capacidades celulolíticas y
hemicelulolíticas de hongos y bacterias aislados de serrín maduro y compost de
residuos de café, con el fin de mejorar el ciclo del compostaje de estos compuestos,
para luego ser utilizados como abono. Otros estudios muestran que las cáscaras de
café, representa una materia prima potencial para la producción de bioetanol
(Gouvea et al., 2009). También se ha utilizado aceite extraído de granos de café
defectuosos como alternativa en la producción de biodiesel (Oliveira et al., 2008b).
Las cáscaras de café se han empleado como adsorbentes para la eliminación de
colorantes de medios acuosos (Oliveira et al., 2008a). También se ha estudiado la
producción de adsorbentes de bajo costo a partir de cáscaras de café para el
tratamiento de aguas residuales que contienen metales pesados (Oliveira et al.,
2008c). La piel de café que recubre el grano de café es aprovechada por sus
propiedades potenciales para la salud, ya que sus extractos podrían aplicarse a
partir de ahora en productos como suplementos alimenticios antioxidantes o
productos cosméticos. (Anabela et al,. 2014).
Se ha trabajado otros desechos de café como la piel de café, la cual tiene inhibición
de la hialuronidasa, propiedades prebióticas, actividad antioxidante, como alimento,
fertilizante, materiales de fermentación microbiana para la biorrefinería y
recuperación de energía por combustión (Narita et al,. 2011). También se encontró
que tiene un 31±2% de celulosa (Alghooneh et al., 2016).
También se ha utilizado el café en industrias decolorantes, donde se obtiene como
residuo la borra de café, que es utilizada como combustible en fábricas y en rellenos
sanitarios. Utilizando la borra de café se realizó un estudio llevando a cabo una
digestión Kraft en un reactor piloto que ha determinado que la borra de café
representa una buena fuente de celulosa debido a que tiene un contenido del
85,75% de α-celulosa (Garcial et al,. 1999).
En otro estudio se obtuvo para la borra y pergamino de café un 78% y 75% de
celulosa, respectivamente. A partir de la celulosa extraída se obtuvieron derivados
 16

como de acetato de celulosa, carboximetilcelulosa y bencil celulosa (Moya et al,.

1990).
En Cenicafé se han desarrollado diversos estudios para la utilización de la cáscara
de café en el cultivo de hongos comestibles del género Pleurotus (Rodriguez et al.,
1994), también en la transformación de la cáscara en abono utilizando lombriz roja
(Davila et al,. 1996). También se ha aprovechado este residuo para la obtención de
pectinas (Rodriguez, 1995) y en la producción de levaduras alimenticias. (Calle,
1977)
De igual forma se ha utilizado para la producción de abono orgánico, obtención de
cafeína, extracción de proteína, sustancias pécticas y enzimas pectinolíticas. Otras
posibilidades son la hidrólisis de la pulpa para producir melaza, la fermentación para
la producción de alcohol y la obtención de una variedad de extractos para bebidas
gaseosas, mermeladas y otros tipos similares de alimentos y para la producción de
proteína unicelular (Calle, 1977; Bressani, 1978).
Calle, 1977, en Cenicafé, realizó ensayos con la pulpa de café para producir gas
metano, para la producción de levaduras alimenticias (Torulopsis utilis), para la
propagación de hongos del género Penicillium y Rhizopus, Aspergillus orizae,
Bacillus megatherium y Streptomyces.
Los CNC se han obtenido de diferentes fuentes celulósicas, entre las cuales se
encuentra la piel de café de la cual se obtuvo un rendimiento total del 12% después
de una hidrólisis ácida, para después ser usada en el refuerzo de películas de
nanocompuestos de ácido poliláctico (Sung et al., 2017). Otra fuente es el bambú
que mediante una hidrólisis catalizada con FeCl3 asistida por ultrasonido dió un
rendimiento de 22,10% (Qilin et al., 2014). También se han extraído CNC a partir de
subproductos industriales de Agave tequilana y cebada (Etzael et al., 2014), Capim
Dorado (Gilberto et al., 2010), bagazo de la caña de azúcar (Cataño, 2009), cáscara
de arroz (Nurain et al., 2012), tusa de maíz (Hudson et al., 2013), entre otros.
Los CNC son un nanomaterial adecuado para una amplia gama de aplicaciones,
como inmovilización de enzimas, síntesis de materiales antimicrobianos y médicos,
catálisis verde, biodetección, síntesis de portadores de fármacos en medicina
terapéutica y diagnóstica, etc. Estos nanomateriales ofrecen varias ventajas
 17

potenciales como la administración de medicamentos, los aerogeles, como un

agente de refuerzo, productos como nanopapel, películas de barrera y sensores de
pH, a la estabilización de las interfaces aceite/agua, a la producción de emulsiones
Pickering con una excelente estabilidad, etc. Estos tipos de nanocompuestos se
utilizan para fabricar espumas biomiméticas, papel templado, paneles flexibles para
pantallas planas, repelentes al agua y papeles de alta seguridad. También son útiles
para diversas aplicaciones biomédicas, como parches de cicatrización de heridas,
andamios de ingeniería de tejidos e hidrogeles para aplicaciones clínicas y
farmacológicas, etc. (Johnsy, 2015).
Los nanocompuestos de polímero que contienen CNC también se utilizan para
desarrollar membranas, fibras, textiles, baterías, supercondensadores, polímeros
electroactivos y sensores y actuadores que utilizan respuestas electromecánicas.
Un área futura de aplicación en la que los nanocompuestos de polímeros que
contienen CNC pueden tener un impacto es en el campo de los materiales de
embalaje biodegradables (Yang et al., 2012; Wan et al., 2006).
 18

8 HIPÓTESIS

La cacota de café representa una fuente para la extracción de nanocristales de

celulosa.

9 METODOLOGÍA

Obtención del material celulósico cacota de café

Se recolecta la cacota de café (coffea arábica).

Tratamiento de la cacota de café

Se seca el material celulósico en un horno a 60 °C, después es pulverizado con una

licuadora Samurai, después se procede a tamizar una 100 g a 1 mm y otra muestra
de 100 g a 250 µm.

Caracterización de la cacota de café

Se toma la muestra tamizada a 1 mm y se realizan las siguientes pruebas:

Humedad: Medir en un analizador de humedad modelo MAC 50/1/ NH.

Celulosa, Hemicelulosa y Lignina: Para determinar los contenidos de celulosa,

hemicelulosa y lignina (libre de cenizas), se toman 10 g de cacota de café y se somete
a una hidrólisis ácida con 20 mL de H2SO4, después se filtra la reacción y los azúcares
en la solución resultante se determinan por cromatografía líquida de alto rendimiento.

Cenizas, minerales, grasas: Las cenizas se determinan incinerando 1 g de muestra

a 550 °C durante 4 h. El contenido de minerales en cenizas se determina por
espectrometría de emisión atómica de plasma acoplado inductivamente (ICP-AES). El
contenido de grasa se determina utilizando éter de petróleo como disolvente en un
sistema de extracción Soxhlet durante 1 h, según el método oficial AOAC n° 920.39.

Capacidad de retención de agua y capacidad de retención de aceite: Se determina

la capacidad de retención de agua (WHC) y la capacidad de retención de aceite (OHC)
mezclando 1 g de muestra con 10 mL de agua destilada o aceite de maíz. Las mezclas
se someten a vórtice durante 1 minuto, se centrifugan a 2330 rpm durante 30 minutos
y se determina el volumen de sobrenadante.
 19

Extracción de celulosa de cacota de café

Se toman 30 g de muestra tamizada a 250 µm y se mezcla con una solución de 2:1,

v/v de tolueno/etanol (450 ml) durante 20 h, seguido de secado en horno a 55 °C
durante 24 h. El polvo desparafinado se sumerge luego en NaClO2 acidificado al 1,4%
(1000 mL), con pH ajustado a 3,0-4,0 por CH3COOH, a 70 °C durante 5 h para disolver
la lignina. Después se enfría rápidamente la reacción con hielo y se decanta el líquido
en exceso, el sólido se lava con abundante cantidad de agua hasta que el filtrado se
vuelva neutro. La hemicelulosa se lixivia con 600 mL de KOH al 5% a temperatura
ambiente durante 24 h y luego a 90°C durante 2 h. El polvo de celulosa blanca se
centrifuga y se lava con abundante cantidad de agua hasta que el filtrado alcanzó la
neutralidad. La suspensión de muestra acuosa se congeló rápidamente vertiendo
nitrógeno líquido en el recipiente de la muestra y luego se liofiliza para eliminar agua.

Preparación de nanocristales de celulosa

La celulosa aislada de la cascara de café se hidroliza utilizando ácido sulfúrico 64-65%

en peso a una relación de ácido a celulosa de 8,75ml/g como para la pulpa de madera
blanda; a una temperatura de 45°C durante 30 min. La hidrólisis ácida se detiene
diluyendo con 10 veces agua con hielo. El gel de nanocristal de celulosa resultante se
lava una vez, se centrifuga a 5000 rpm durante 25 min a 10°C. La suspensión se
somete a ultrasonidos en un baño de hielo durante 30 min, y después se filtra para
retirar grandes piezas de agregados. La suspensión de CNC se congela rápidamente
vertiendo nitrógeno líquido en el recipiente de muestra y se liofiliza. El producto seco
se almacena al vacío.

Caracterización de los nanocristales de celulosa

Espectroscopía FTIR

El análisis FTIR de las muestras se realiza usando un espectrómetro Spectrum 100

(Perkin-Elmer, EE. UU.). Los CNC de muestra de 1 mg se mezcla con 100 mg de KBr
en la relación 1: 100, se sedimentan en forma de discos y su espectro se escanea de
4000 a 400 cm y se analiza usando el software incluido.
 20

Difractometría de rayos X

El patrón de difracción de rayos X (XRD) de las muestras se registra usando Bruker

D8 Advance (Bruker AXS GmbH, Alemania) que opera con longitud de onda Cu-Kα,
voltaje objetivo e intensidad de 1.541874 Å, 40 kV y 40 mA, respectivamente. Las
exploraciones se realizan en el ángulo de difracción (2θ) de 10-90º a un tamaño de
paso de 0.02º. La cristalinidad se toma como la relación de la suma de áreas bajo los
picos de difracción al área total bajo la curva.

Análisis termogravimétrico

Las características térmicas de las muestras se determinan usando un analizador

termogravimétrico Pyris Diamond TG / DTA (Perkin-Elmer, EE. UU.). Brevemente, se
transfirieren 3 mg de muestra a recipientes de aluminio y se escanean de 25 a 500 °
C a una velocidad de calentamiento de 10 °C / min y una velocidad de flujo de N de
20 mL / min.

Microscopia electrónica de barrido

La morfología se investiga bajo un microscopio electrónico de barrido (JSM-5600LV,

JEOL, Tokio, Japón).

Análisis de los datos

Todos los experimentos se llevan a cabo al menos por triplicado. Los datos
experimentales se analizarán mediante análisis de varianza de una vía (ANOVA) con
un nivel de confianza del 95%.
 21

8 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

Cuadro 2. Cronograma de actividades

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9 PRESUPUESTO

Cuadro 3. Presupuesto de proyecto.

Rubros Financiado Contrapartida Total

Uniamazonia
EQUIPOS 0 440.000.000 440.000.000
BIBLIOGRAFÍA 0 50.000.000 50.000.000
PERSONAL CIENTÍFICO 0 10.920.696 10.920.696
MATERIALES E 0 18.700.000 18.700.000
INSUMOS
SERVICIOS TÉCNICOS 0 62.400.000 62.400.000
VIAJES 0 3.000.000 3.000.000
SALIDA DE CAMPO 0 0 0
EVENTOS ACADEMICOS 0 300.000 300.000
PUBLICACIONES Y 0 7.000.000 7.000.000
PATENTES
SOFTWARE 0 1.000.000 1.000.000
ESPECIALIZADO
TOTAL 0 593.320.000 593.320.000
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