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    Auglutinacion y Precipitacion

    Cargado por

    Anselmo Gonzalez
    Este documento describe las técnicas de aglutinación e inmunoprecipitación. La aglutinación ocurre cuando un antígeno particulado interactúa con su anticuerpo correspondiente, formando aglutinados visibles. La precipitación implica la formación de un precipitado insoluble cuando antígenos y anticuerpos solubles interactúan. Ambas técnicas se utilizan comúnmente en laboratorios clínicos para identificar antígenos y anticuerpos.

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    Auglutinacion y Precipitacion

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    Anselmo Gonzalez
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    Este documento describe las técnicas de aglutinación e inmunoprecipitación. La aglutinación ocurre cuando un antígeno particulado interactúa con su anticuerpo correspondiente, formando aglutinados visibles. La precipitación implica la formación de un precipitado insoluble cuando antígenos y anticuerpos solubles interactúan. Ambas técnicas se utilizan comúnmente en laboratorios clínicos para identificar antígenos y anticuerpos.

    Título original

    auglutinacion y precipitacion

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    Este documento describe las técnicas de aglutinación e inmunoprecipitación. La aglutinación ocurre cuando un antígeno particulado interactúa con su anticuerpo correspondiente, formando aglutinados visibles. La precipitación implica la formación de un precipitado insoluble cuando antígenos y anticuerpos solubles interactúan. Ambas técnicas se utilizan comúnmente en laboratorios clínicos para identificar antígenos y anticuerpos.

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    Auglutinacion y Precipitacion

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    Anselmo Gonzalez
    Este documento describe las técnicas de aglutinación e inmunoprecipitación. La aglutinación ocurre cuando un antígeno particulado interactúa con su anticuerpo correspondiente, formando aglutinados visibles. La precipitación implica la formación de un precipitado insoluble cuando antígenos y anticuerpos solubles interactúan. Ambas técnicas se utilizan comúnmente en laboratorios clínicos para identificar antígenos y anticuerpos.

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    AGLUTINACION Y

    PRECIPITACION

    INMUNOLOGIA

    22 de noviembre 2023

    Integrantes
    Luis Eduardo Morin Pesina 2083834
    Héctor Emmanuel Rodríguez Díaz 1945043
    Aglutinación

    Interacción de un antígeno particulado con


    Reacción
    su anticuerpo correspondiente que se
    Antígeno - Anticuerpo
    visualiza por la formación de ¨aglutinados¨

    Ocurre en 2 etapas:

    1ra Etapa: Interacción fisicoquímica 2da Etapa: Formación de aglutinado

    Los anticuerpos son polivalentes o


    Depende de la conformacion de las bivalentes, lo que permite que su unión con
    moleculas y de la carga de sus elementos las moléculas del antígeno dé lugar a la
    formación de un producto visible

    Complejos antigeno-anticuerpo Ag particulado = aglutinación


    Fundamento

    Aglutinación activa Aglutinación paasiva


    Cuando la partícula aglutinada es el
    Si el antígeno es soluble y se adsorbe
    antígeno mismo se habla de una
    física o químicamente sobre una
    reacción de aglutinación directa o
    partícula, entonces se habla de
    activa
    aglutinación indirecta o pasiva.

    Materiales

    Determinación de grupo sanguíneo y factor Rh


    Lanceta
    Algodones con alcohol Sangre
    Placa de aglutinación Suero anti-A, anti-B y anti-Rh
    Metodología Aglutinación activa

    Realizar la asepsia del dedo Agregar una gota de suero


    índice del paciente anti-B a una gota de sangre

    Pinchar dedo con lanceta, haciendo Agregar una gota de suero anti-
    punción suave pero firme Rh a la última gota de sangre

    Colocar 3 gotas de sangre en la


    Mezclar cada gota con suero
    placa de aglutinación (una en
    con un aplicador diferente
    cada pocillo)

    Agregar una gota de suero Esperar 2 minutos y


    anti-A a una gota de sangre observar si hay aglutinación
    Metodología Aglutinación pasiva

    Prueba de aglutinación de látex

    Se recubren las perlas de látex con un


    anticuerpo o antígeno específico

    Se hace la reacción entre la muestra y el


    látex recubierto

    Observar. Resultados tardan de 15-60


    minutos

    Muestra: saliva, orina, sangre, líquido cefalorraquídeo (punción lumbar).


    Ejemplos

    Aglutinación activa
    Aglutinación pasiva
    Particula
    Reacción Utilidad diagnóstica Particula Reacció
    aglutinante Utilidad diagnóstica
    aglutinante n

    Determinacion de
    Globulos Coombs Globulos Busqueda de Ac anti-
    sensibilizacion por HAI-
    rojos indirecta rojos + lisado T.cruzi en suero
    incompatibilidad de Rh Chagas
    de T.cruzi humano

    Determinación de
    Glóbulos Glóbulos Busqueda de Ac anti-
    - grupo sanguíneo y HAI-
    rojos rojos + lisado T.gondii en suero
    factor Rh Toxo
    de T.gondii humano

    Búsqueda de Ac anti-
    AD-
    Parásitos T.cruzi en suero
    Chagas
    humano
    Aplicaciones

    Aglutinación activa Aglutinación pasiva

    Detección de anticuerpos o Prueba de embarazo (algutinacion


    antígenos con latex)
    Reaccciones febriles: para buscar Particulas de latex cubiertas con
    anticuerpos contra bacterias anticueroos dirigidos contra
    Tipificacion grupo sanguineo: se gonadotrofina corionica humana
    emplean eritrocitos como se mezclan con orina del paciente
    antigenos particulados y los para detectar presencia de la
    antisueros. hormona
    Ventajas Desventajas

    Sencillo y rápido Limitación de ser


    No es costoso semicuantitativo, solo permite
    No requieren de ningún una estimación aproximada
    equipamiento para su lectura No es posible determinar la
    Mayor sensibilidad que las concentración, solo es posible
    reacciones de precipitación por calcular un título
    lo que las han sustituido en Baja sensibilidad, menor que o
    muchos casos. ELISA e inmunofluorescencia
    indirecta.
    Precipitación

    La precipitación, también conocida como inmunoprecipitación, se refiere a la


    interacción no covalente entre antígenos solubles y anticuerpos solubles, lo que da
    como resultado la formación de un precipitado insoluble. Este proceso puede ocurrir
    tanto in vivo (dentro de organismos vivos) como in vitro (en entornos de laboratorio).
    Fundamento

    El principio de las reacciones de precipitación


    se basa en la interacción entre antígenos
    solubles y anticuerpos específicos
    multivalentes (bivalente en el caso de las IgG, o
    decavalente en el caso de las IgM) que, en
    condiciones adecuadas de temperatura y pH,
    forman complejos insolubles conocidos como
    precipitados.
    Cuando se agregan concentraciones crecientes de Ag
    soluble a una cantidad fija de suero conteniendo Acs
    específicos, a medida que la cantidad de Ag agregado
    aumenta, la cantidad de precipitado se incrementa
    hasta alcanzar un máximo, luego del cual declina

    Cuando se agregan pequeñas cantidades de Ag, los


    complejos se forman en exceso de Ac.
    En el otro extremo, al agregar grandes cantidades de
    Ag, los complejos se forman en exceso de Ag siendo
    pequeños y probablemente constituidos por una
    molécula de Ac y dos de Ag.
    Entre estas dos situaciones extremas se encuentra la
    zona de equivalencia, en donde la relación Ag-Ac
    permite la formación de grandes redes de complejos
    inmunes que precipitan.
    MATERIALES

    Los ensayos de precipitación se realizan en


    medios semisólidos como agar o agarosa donde
    los anticuerpos y antígenos pueden difundirse
    entre sí y formar una línea visible de precipitación.

    Sin embargo, en técnicas de precipitación de medio


    liquido se utiliza el espectrofotómetro para cuantificar el
    precipitado generado
    Precipitación en medio líquido

    La inmunoturbidimetría y la inmunonefelometría son técnicas de


    inmunoprecipitación en medio líquido en donde los inmunocomplejos quedan en
    suspensión en la muestra dando un aspecto turbio al líquido. La dispersión de la luz
    que incide sobre una solución de inmunocomplejos es máxima en la zona de
    equivalencia, debido al mayor tamaño de las partículas.
    Precipitación en medio

    semisólido

    Difusión doble bidimensional (método de Oüchterlony)


    Esta técnica se realiza en placas de agar 1.5% en
    donde se practican pocillos, en uno de estos
    pozos se coloca el suero o muestras a investigar y
    en el resto se coloca el anticuerpo preparado
    frente a la sustancia que se quiere identificar.
    Cuando difunden, ambos sistemas se
    encontrarán y se formará en la zona de
    equivalencia el complejo Ag-Ac correspondiente
    que se hace visible en forma de una línea de
    precipitación
    Precipitación en medio

    semisólido
    Materiales

    Placa de vidrio o placa de Petri


    Agarosa
    Barrenador de gel
    Tampón
    Antisuero
    Soluciones de antígeno
    Metodología

    Disuelva 100 mg de agarosa en 10 ml del Enfriar la solución a 55 ° C y verter la solución


    tampón hirviendo para disolver de agarosa a una profundidad de 1 – 2 mm en
    completamente la agarosa. una placa de vidrio limpia

    Incubar la placa de vidrio en una cámara húmeda Deje que el gel se asiente durante 30
    durante la noche a 37 ° C. minutos.

    Llene los pocillos con soluciones de antígeno y antisuero


    Los pocillos se perforan en el gel usando un
    hasta que el menisco simplemente desaparezca. El antisuero
    barrenador de gel correspondiente a las
    generalmente se coloca en el pozo central y se agregan
    diferentes antígenos a los pozos que rodean el pozo central.
    marcas en la plantilla
    UTILIDAD

    Inmunodiagnostico
    Las pruebas de precipitación miden la
    cantidad de antígeno o de anticuerpo en los
    líquidos corporales a partir del grado de
    precipitación visible de complejos de
    antígeno-anticuerpo dentro de un gel de
    agarosa o en solución. Ejemplo: Partículas
    víricas
    UTILIDAD

    Es útil para el análisis de antígenos y anticuerpos.


    Se utiliza en la detección, identificación y
    cuantificación de anticuerpos y antígenos, como
    inmunoglobulinas y antígenos nucleares extraíbles.
    Las inmunodifusiones en gel de agar se utilizan como
    pruebas serológicas que históricamente se han
    informado para identificar anticuerpos contra varios
    organismos patógenos como Blastomyces .
    RANDOM FACT

    Örjan Thomas Gunnarson Ouchterlony (1914


    2004), bacteriólogo sueco nacido en 1914 en
    Gotemburgo (Gotemburgo), desarrolló en 1948
    una técnica de inmunodifusión doble que,
    cuando se utiliza en la medicina forense,
    determina si una mancha de sangre es humana
    o animal.
    VENTAJAS DESVENTAJAS

    Las técnicas inmunológicas que


    Menor sensibilidad que otras
    evidencian la interacción Ag-Ac a
    reacciones
    través de una reacción secundaria Menos específicas
    (precipitación o aglutinación) son, Depender grandemente de los
    generalmente: factores físico - químicos, tales como
    concentración de electrolitos, pH,
    Más económicas temperatura y tiempo de reacción.
    Sencillas
    No requieren de ningún equipamiento
    para su lectura
    Rápidas
    REFERENCIAS

    Vazquez-Pertejo, M. T. (2023, 15 noviembre). Pruebas inmunológicas para las enfermedades infecciosas.


    Manual MSD versión para profesionales. https://www.msdmanuals.com/es-mx/professional/enfermedades-
    infecciosas/diagn%C3%B3stico-de-laboratorio-de-las-enfermedades-infecciosas/pruebas-
    inmunol%C3%B3gicas-para-las-enfermedades-infecciosas
    Presentation name. (s. f.). emaze presentations. https://app.emaze.com/@AZFLLFOT#/22
    Unknown. (s. f.). PRÁCTICA 14: INMUNOTURBIDIMETRÍA CUANTIFICACIÓN DE IG G POR
    INMUNOTURBIDIMETRIA. http://hematoprac.blogspot.com/2014/12/practica-14-inmunoturbidimetria.html
    TECNICAS INMUNOLOGICAS. (s. f.). Scribd.
    https://es.scribd.com/document/375590787/TECNICAS-INMUNOLOGICAS
    Passen, M. (2021b, octubre 26). Técnica de doble inmunodifusión de Ouchterlony - micro biio.
    Micro Biio. https://microbiio.info/tecnica-de-doble-inmunodifusion-de-ouchterlony/
    GRACIAS

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