CONSERVACIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS

El servicio de transporte y conservación de material biológico es fundamental

para clínicas y centros hospitalarios. Además de favorecer a estas
instituciones, el paciente también aprovecha de estas atenciones. Se trata de
un sistema que permite trasladar con seguridad análisis y muestras médicas.
Los productos que se trasladan pueden salvar una vida o ser el inicio de un
estudio que acabe con determinadas enfermedades. Es por eso que preservar
la integridad de las muestras es vital para la sociedad. Las empresas
especializadas en prestar este servicio cuentan con el personal y el
equipamiento adecuado para lograr con éxito ambos procedimientos.

¿Cómo es el transporte y conservación de muestras biológicas?

El procedimiento para trasladar y resguardar material biológico se enmarca en
ciertos reglamentos y normas nacionales e internacionales. Cuando se realiza la
recolección, bien sea en una clínica o en un caso especial, dentro de un
domicilio, se toman ciertas medidas generales:

 Un nivel alto de asepsia durante la recolección

 Según el tipo de muestra existe un medio de transporte y de contenedor
adecuado
  Contar con el volumen correcto de la muestra para un estudio completo
 Mantener un etiquetado de cada muestra, bien identificado con el
destino y el paciente
 Tener un sistema de entrega rápida y urgente al destino determinado
 La conservación de la muestra varía en función al tipo. Debe contar con
las diferentes medidas

Los protocolos de recolección, traslado y conservación de muestra son

específicos. Las empresas encargadas de realizar este procedimiento deben
manejarse con extrema delicadeza y sin errores. Además, son estas empresas
las encargadas de realizar el servicio y por nada del mundo debe hacerlo el
paciente.

Conservación de las muestras biológicas

La conservación de las muestras biológicas es de vital importancia. Su
manipulación no debe interferir en lo absoluto en el diagnóstico del paciente o
en la investigación. Es por eso que se someten a una serie de protocolos que
ayuden a validar su estado.
Estos métodos pueden ser generales y específicos, según sea el caso. La
calidad de la muestra está directamente asociada con el transporte y
conservación de la misma. Por eso se recomienda, en términos generales seguir
estos pasos:

 Protocolos estandarizados: estos contemplan la temperatura de la cadena

completa de la muestra. Esta va desde su obtención hasta la entrega
final. Es fundamental observar la muestra y anotar cada variación que
sufra durante su conservación.
 Fraccionamiento: se debe realizar durante la obtención para evitar
alteraciones en la temperatura y calidad de la muestra. Allí también
entra la toma específica del material
 Contenedores especializados: las muestras deben ser trasladadas en
contenedores especializados. Cada uno debe apuntar a un manejo
adecuado de los materiales para evitar derrames, fugas y cualquier daño.
  Supervisión: hay que contar con equipos alternos y listos para ser usados
si surge alguna alerta o alarma con los contenedores originales.
 Aplicar la temperatura ideal: las muestras requieren de temperaturas
para su conservación. Estas pueden variar dependiendo del material.

Transporte de las muestras biológicas

Existen recomendaciones legales e internacionales que facilitan el traslado de
este tipo de materiales. Las muestras biológicas no solo se definen como
pruebas de investigación o diagnóstico. También pueden ser altamente
infecciosas con agentes patógenos que causan enfermedades.
Se puede realizar por aire, mar o tierra, y en cada caso el procedimiento varía,
no solo por el medio sino por la muestra. En algunos casos requiere el apoyo
policial o incluso de otras especialidades médicas.
La clave es que la muestra llegue sana y salva para sus fines consiguientes. El
riesgo en amplio cuando de trasladar estos materiales se trata. Desde
mantener una velocidad constante, evitar tráfico o incluso algunas vías. El
procedimiento legal de certificaciones y permisos debe ir acompañado en cada
salida.

¿Cuál es el medio de transporte y conservación más utilizado en estos

casos?
Cuando la muestra es recogida y es trasladada a un centro final es obligación
de la empresa preservar el contenido. Esta no puede estar expuesta a la flora
bacteriana externa y que los patógenos de la muestra se mantengan activos. Al
recoger, transportar y manipular el material es fundamental que se haga de
forma adecuada.
El hisopo es el implemento más usado para la correcta recolección de una
muestra. Es similar al que usamos en nuestro sistema de higiene personal es
perfecto para no entrar en contacto con la muestra. Si la recolección fue
exitosa el instrumento se deposita en el contenedor.
La mayoría de los medios de transporte se compone de agar semisólido. Estos
no poseen ningún tipo de nutrientes, sin embargo, si contienen agentes
reductores que ayudan a incrementar la vida de los microorganismos. Dentro
de los más usados está el medio de Stuart.
Es un agar semisólido con amortiguación cuyo componente principal es el
tioglicolato de sodio. Es un agente reproductor con ayuda a mantener los
niveles de pH activos que no dejan que la muestra se oxide, deshidrate o
autodestruye

CONSERVACIÓN DE MUESTRAS EN EL LABORATORIO

La calidad y confiabilidad de un buen resultado no se basa únicamente en el

proceso analítico, inicia desde la toma, la identificación y el almacenamiento de
la muestra, en este artículo hablaremos de los factores que influyen en la
conservación.

La identificación de la muestra en el laboratorio mediante un código que se

coloca en el tubo se puede realizar de muchas maneras, aunque la más segura
en lo referente a la posibilidad de identificación de la misma durante un largo
periodo de tiempo y trazabilidad de la misma, es mediante una codificación 2D
en el tubo, evitando el tedioso y nada seguro trabajo de rotular los tubos a
mano. Este código es leído mediante un escaneo transfiriendo la información
a una base de datos donde se podrá almacenar el resto de parámetros que se
consideren necesarios: como tipo, origen, fecha de toma y almacenamiento de
la muestra, análisis realizados a la misma junto con sus resultados, localización
física en nuestro congelador o refrigerador, etc. Posteriormente, en caso de
requerir información, bastará con ir a nuestra base de datos para obtener
localización física de esta.

El deterioro de la muestra invalida cualquier resultado analítico, por ello

deberán conservarse de manera que se asegure su integridad, seguridad,
regularidad y estabilidad.

La conservación de la muestra debe ser tal que evite aquellas variaciones

físicas o químicas que puedan ocasionar alteraciones en la composición de los
elementos traza. Cuando haya que realizar análisis de trazas, será necesario
tomar precauciones para que la muestra y el equipo no se contaminen con
materias extrañas.

Las muestras se estropean por muchos motivos que originan cambios en la

composición como: los procesos de oxidación por contacto con la atmósfera,
desnaturalización de proteínas por exceso de calor, fermentaciones,
reacciones fotoquímicas, efectos microbiológicos, absorción de agua, de CO
etc. Por ello, deben de conservarse de forma que se reduzca al mínimo los
riesgos de alteraciones que esta pueda experimentar antes del análisis.

Entre el momento de la llegada al laboratorio y el inicio del análisis, la muestra

tiene que ser conservada a cierta temperatura. Existen intervalos de
temperatura que se consideran estándares para determinados tipos o
determinados procesos. La siguiente tabla muestra las normas básicas de
preservación, estas temperaturas son recomendación general, y deberán
revisarse en función del uso final de las muestras o del tiempo de
almacenamiento.

TEMPERATURA O C IMPORTANCIA BIOLÓGICA

0a4 Temperatura a la que se deben realizar las manipulaciones del material fresco

-20 Límite de movilidad proteica, estabilidad de ADN

-80 Estabilidad de ARN, almacenamiento de tejidos

-150 a -196 Almacenamiento recomendado de células

La elección de los contenedores es un punto importante, deben elegirse de

tomando en cuenta el tiempo que se van a conservar las muestras, la
temperatura a la que se van a almacenar y el procesamiento o análisis a que
serán sometidas. Asimismo hay que disponer de equipos de emergencia o
sistemas alternativos por si se produjeran fallos en los sistemas de
almacenamiento.
Las muestras de producto biológicos para analizar pueden ser de
distinto tipo según su procedencia. Así, tendríamos:

× Muestras de orina.

× Muestras de sangre.

× Muestras de heces.

× Muestras de vómitos.

× Muestras de esputo.

× Muestras de líquido cefalorraquídeo (LCR).

× Muestras de contenido gástrico – duodenal.

× Muestras de líquido seminal.

× Muestras de piel, pelo y uñas.

× Muestras de exudados:

El personal de laboratorio, generalmente, es el responsable de la

obtención y recogida de las muestras biológicas.

Sólo en casos excepcionales, bien por las características y

complejidad de la técnica o por la enfermedad padecida por el
paciente, será el médico quien lleve a cabo el procedimiento de
obtención de la muestra, como es el caso de LCR o de cierto tipo
de exudados.

Existen unas normas generales de seguridad para la recogida y

manipulación de muestras de contenidos biológicos que deben
seguirse siempre, independientemente del tipo de muestra a
extraer:

¤ Toda muestra debe ir acompañada de un impreso o solicitud del

estudio.
Este impreso será distinto en cada centro sanitario y
siempre habrá de ser cumplimentado por el médico, que es
el único que podrá solicitar el análisis.

En algunas áreas sanitarias hay un tipo de impreso único en

el que se solicitan todas las pruebas analíticas; en otros,
cada tipo de muestra tiene su propio impreso. No obstante,
sea cual sea el que se use, en él deberá poderse leer de
forma clara los siguientes datos:

 Tipo de análisis que solicita.

 Si es urgente o no.

 Nombre, apellidos, edad y sexo del paciente.

 Número de cama, de afiliación a la Seguridad

Social y de historia clínica.

 Datos clínicos: fecha de comienzo de la

enfermedad, diagnóstico clínico de presunción...
  Nombre del facultativo que solicita el análisis y
servicio al que pertenece.

 Fecha de la petición y fecha de la obtención de

la muestra, así como el procedimiento de
extracción y si se ha seguido alguna técnica
especial.

 Terapéutica seguida: antibióticos que se han

administrado y tiempo desde la última toma.

¤ El paciente debe estar informado del tipo de muestra

requerida y del procedimiento que vamos a utiliza para su
obtención. Así como precauciones a tener en cuenta antes
de la recogida o toma de las muestras.

¤ La preparación de los materiales y obtención de la muestra

deben hacerse en condiciones de asepsia para asegurar la
fiabilidad del resultado y evitar contaminación que falsee el
diagnóstico.

¤ Manipular las muestras siempre con guantes, para evitar el

riesgo del contagio del personal sanitario.

¤ Utilizar, siempre que sea posible, recipientes desechables,

manipulándolos con el mayor cuidado posible.

¤ Al obtener una muestra estamos manipulando residuos

biológicos; por lo tanto, debemos adoptar las medidas
universales de precaución que ya se han visto en un módulo
anterior. Se procesan los recipientes como residuos
biológicos.

¤ Una vez obtenida la muestra, la identificaremos

correctamente para evitar confusiones y pérdidas.

¤ Debemos tomar las medidas necesarias que aseguren su

 correcto mantenimiento, conservación y transporte de la
muestra hasta el servicio de laboratorio para su análisis.

Normas generales de conservación y transporte de las

muestras.

Una vez obtenida la muestra, es importante que se haga llegar al

laboratorio con celeridad para no alterar sus características y
dificultar el análisis.

El procedimiento de obtención de muestras se realiza teniendo

en cuenta las características de las muestras y la organización de
cada hospital, centro sanitario o laboratorio.

El personal que interviene en el proceso debe tener la formación,

habilidades y experiencia necesarias para garantizar que se
cumplan los siguientes objetivos respetando la normativa vigente:

 Mantener la integridad de las muestras para

garantizar la estabilidad de sus propiedades
biológicas.

 Conservar las características originales de las

muestras, para garantizar que los resultados
obtenidos en su análisis sean lo más próximos
posible a su valor verdadero.

 Cumplir las condiciones y los requisitos de

seguridad para disminuir o minimizar al máximo
el riesgo que puede conllevar el proceso.

Tipos de envase para la toma de muestras

¤ Frascos de boca ancha, de plástico y con tapa de rosca:

permiten recoger las muestras sin manipularlas
excesivamente y sin que haya riesgo de que se contaminen.
 Se comercializan estériles. Hay distintos tipos:

 Frascos para urocultivo: 150 ml.

 Frascos para heces: con una cucharilla para su recogida.

 Frascos para esputo: 30 ml. Pueden sustituirse

por una placa de petri.

¤ Frascos de boca estrecha: para muestras cuya recogida sea

menos dificultosa, reduciéndose la posibilidad de
contaminación.

¤ Hisopos: se emplean para tomas de muestra de orificios naturales y de

heridas.

¤ Jeringas: para la extracción de sangre u otros líquidos de

cavidades sin acceso o en el caso en que se quiera
determinar la posible existencia de organismos anaerobios.
Precauciones ante el transporte de la muestra: Riesgos
posibles y soluciones

¤ Proliferación bacteriana: a Tª ambiente es muy intensa, por

tanto, no admiten demora en su análisis. Algunas permiten
que el análisis se retrase si están refrigeradas.

¤ Contaminación de la muestra: puede ocurrir por una mala

calidad del envase o por una excesiva manipulación, lo cual
dará lugar a múltiples errores.

¤ Pérdida de la actividad biológica de microorganismos:

Muchos microorganismos, al ser extraídos del ser humano,
mueren. Para evitarlo hay que utilizar sustancias para el
transporte de la muestra que mantengan su viabilidad (p.ej.
el medio de Stuart: evita la desecación y muerte de
microorganismos recogidos con un hisopo estéril).
 ¤ Diseminación de los microorganismos al exterior: debida a
una mala manipulación de la muestra, rotura, extravío, etc.,
siendo un material peligroso, en muchos casos
microorganismos con un alto índice de virulencia. Se evita
educando y formando al personal sobre la importancia del
material transportado, utilizando materiales adecuados,
identificándolos correctamente, protegiéndolos dentro de
otros recipientes, etc.

¤ Transporte para estudios de anaerobiosis: Es necesario

eliminar el oxígeno. Para ello, se recomiendan tubos que
contienen CO2. Si la muestra se obtiene con un hisopo, el
tubo en el que lo introduciremos debe estar en condiciones
anaeróbicas.

Obtención de muestras de productos biológicos para analizar

Muestras de orina.

Los análisis de orina y, en consecuencia, la obtención de muestras

de orina, son actuaciones que se llevan a cabo con mucha
frecuencia; son algo rutinario en la práctica clínica.

La muestra de orina es relativamente fácil de obtener, ya que

implica escasa molestia para el paciente; además, aporta gran
cantidad de información al clínico.
Medidas especiales de conservación y transporte

o Conservación. La muestra ha de enviarse al laboratorio tan

pronto como sea posible. Si el traslado va a demorarse,
deberemos conservarla en frigorífico.
Muestras de sangre.

El objetivo de los análisis de sangre es realizar el estudio de

todos sus componentes para el diagnóstico de enfermedades
hematológicas o que afectan a otros órganos, sistemas y
funciones del organismo.

Las pruebas que con más frecuencia se demandan son:

 Análisis de rutina o hemograma básico.

 Análisis bioquímico.

 Pruebas de coagulación.

 Estudios hormonales.

 Hemocultivo, etc.

Dependiendo del tipo de análisis que el médico solicite, las

muestras de sangre pueden obtenerse a partir de sangre capilar,
venosa o arterial.

Medidas especiales de conservación y transporte.

Este tipo de muestra no requiere de medidas especiales de

conservación o transporte.

El personal auxiliar asiste en este procedimiento, si bien no lo realiza por sí

mismo.

Procedimiento de extracción de sangre

Hemocultivo.

Existe un análisis microbiológico de la sangre que se llama

hemocultivo y que sirve para estudiar si existe algún germen en
la sangre que sea el responsable de un determinado proceso
infeccioso. Para ello, se aislan en la sangre, partiendo de un medio
de cultivo, las bacterias aerobias o anaerobias causantes de la
enfermedad.

La toma de muestra debe realizarse cuando el paciente se

encuentra en un pico febril de la enfermedad.

Medidas especiales de conservación y transporte

Conservación. Las muestras de sangre venosa para hemocultivo

han de ser enviadas directamente al laboratorio. Si esto no fuese
posible, se mantendrán en una estufa de cultivo a 36-37ºC o a
temperatura ambiente (18-25ºC), pero NUNCA se refrigerarán
ni se congelarán. Las muestras de plasma y suero pueden
conservarse entre 4-6ºC, una vez que se les ha separado de los
elementos formes.

Por debajo de -18ºC (mediante aparatos congeladores), para

muestras de suero y plasma sin elementos formes.

Muestras de heces

Las heces son los productos de desecho que se originan en el

tubo digestivo. El colon conduce estos desechos hasta el recto
para eliminarlos al exterior a través del ano.
Medidas especiales de conservación y transporte.

Conservación. Si la toma es para un coprocultivo, ésta deberá

depositarse en un tubo de ensayo estéril y enviarse directamente
al laboratorio para su análisis. Esta técnica se hace en
condiciones de máxima esterilidad: se recoge con una torunda
estéril y se deposita en un recipiente también estéril.

A continuación, se envía directamente al laboratorio para su

análisis. En niños menores de 2 años, la muestra se recoge con
una bolsa que se adhiere a la zona anal del niño, para evitar
riesgos de contaminación.

Las muestras pueden mantenerse en el frigorífico a 4-6ºC hasta

su análisis, pero es conveniente enviarlas antes de 2 ó 3 h.

TOMA DE MUESTRAS PARA EL ESTUDIO DE PARÁSITOS.

Los parásitos son microorganismos que pueden vivir dentro fuera

del organismo de una persona alimentándose de sus nutrientes.

Procedimiento:

o Recoger la muestra durante 3 días alternos, en envases

estériles con cucharilla, siguiendo el procedimiento antes
descrito.

o Identificar las muestras debidamente.

o Conservarla a temperatura ambiente hasta su transporte al

laboratorio.

o Procesar la muestra antes de que transcurran 24 h.

Muestras de esputo

Llamamos esputo a la expulsión con la tos del contenido bronquial.

Son mucosidades, u otro tipo de sustancias o elementos,
procedentes de las vías respiratorias inferiores que se expulsan
al exterior gracias al acto reflejo de la tos.

Su análisis aporta gran cantidad de datos al clínico, siendo una

muestra solicitada con bastante frecuencia.

Medidas especiales de conservación y transporte

Para este tipo de muestra se atenderán a las medidas generales

de conservación y transporte. Conviene que sean enviadas de
forma inmediata al laboratorio. Si no es posible, se mantenfrán
refrigeradas como máximo 2 ó 3 h a 4-6ºC.

Muestras de líquido cefalorraquídeo (LCR)

El LCR es un líquido de color transparente (parecido a la linfa),

que se produce continuamente en los plexos coroideos vasculares.
Circula por los ventrículos cerebrales y entra en los espacios
subaracnoideos, tanto del cerebro como de la médula espinal,
para filtrarse y regresar al sistema venoso. Su volumen total es
de unos 100 a 150 ml, y su presión oscila entre los 100-200 mm
de agua. Su función principal es proteger al encéfalo y además
sirve para disminuir o paliar los daños por traumatismos de
cabeza o cuello.
Procedimiento

o Explicar al paciente el procedimiento y solicitar su colaboración.

o Lavarnos las manos y colocarnos los guantes.

o Colocar al paciente en DL, en posición fetal; de esta forma,

se abren más los espacios intervertebrales y es más fácil la
punción. La postura es un DL con las rodillas flexionadas
hacia adelante y la cabeza también flexionada y colocada lo
más cerca posible de las rodillas: con esta postura se
consigue que la columna esté en hiperflexión.

o Una vez identificada la zona, se desinfecta con antiséptico.

o Colocarnos los guantes estériles y extender el paño

quirúrgico creando un pequeño campo completamente
estéril. El paño fenestrado se coloca en la zona de punción.

o Desinfectar la zona con el antiséptico (hasta la cresta

ilíaca) y administrar el anestésico local.

o Realizar la punción entre las vértebras lumbares 3ª, 4ª ó 5ª

(espacio subaracnoideo). La técnica más frecuente es
realizar la punción entre L3 y L4.
Medidas especiales de conservación y transporte.

Conservación. Es importante que el envío de la muestra al

laboratorio se haga con rapidez, sobre todos si se sospecha
meningitis. Si esto no es posible, la toma se conservará en una
estufa a 35-37ºC. Si no se dispone de estufas, se mantendrá a
temperatura ambiente.

Muestras de líquido seminal

Se solicitan generalmente para el estudio citológico o de la

infertilidad en el varón o tras una vasectomía para comprobar si
ésta ha sido eficaz. También tiene gran valor en el caso de
violaciones. Se estudia la cantidad, forma, número y movilidad de
los espermatozoides.

La muestra se obtiene tras 2-3 días de abstinencia sexual.

Generalmente, se recoge en domicilio (por masturbación o coito
interrumpido), aunque también puede recogerse en el laboratorio
(masturbación).

Con el análisis del semen se determinan la movilidad, la

morfología, el volumen del eyaculado y el recuento de
espermetazoides.

Medidas especiales de conservación y transporte

Debe enviarse al laboratorio antes de transcurridas 2 h desde su

obtención.
Muestras de piel, pelo y uñas

Se toman, generalmente, para el estudio de infecciones producidas por

hongos.

Obtención de muestras de piel

La muestra se toma raspando con lanceta o bisturí las escamas

superficiales en la zona de la lesión.

Se recoge en recipientes estériles.

Se coloca la etiqueta con los datos debidamente cumplimentados.

Enviar al laboratorio de microbiología para su análisis.

Medidas especiales de conservación y transporte de este tipo de muestras

Para el estudio de los hongos: pueden mantenerse a Tª ambiente

durante varios días antes de su procesamiento. Pero hay que
tener en cuenta que, a largo plazo, los efectos de la conservación
de las muestras pueden alterarlas, por lo tanto, se modificarán
los resultados de los análisis.