PROCESO TÉCNICO DE MUESTRA

El buen manejo de los especímenes quirúrgicos se inicia en el quirófano y culmina con el diagnóstico
anatomopatológico.

El reporte histopatológico incluye: el diagnóstico del espécimen recibido y la información respecto al

pronóstico y tratamiento.

El principal objetivo de una biopsia es: proporcionar un diagnóstico histopatológico que dictaminará un
tratamiento.

Distintas etapas de este proceso: (DISTINTAS ETAPAS POR LAS QUE PASA LA MUESTRA) Aprender

1- Procedimiento quirúrgico.

2- Fijación del material.

3- Identificación del espécimen.

4- Transporte del material al laboratorio de patología. (Hasta aquí lo hace el medico o enfermera)

EN EL LABORATORIO DE PATOLOGIA: (Aquí lo hacemos nosotros)

5- Re - identificación del espécimen y archivo de datos en el laboratorio.

6- Estudio macroscópico.

7- Procesamiento de los tejidos

8- Inclusión de especímenes seccionados y procesados en parafina.

9- Microtomía o cortes de los bloques

10- Coloración.

11- Montaje.

12- Microscopía y diagnóstico.

13- Copia y entrega del informe final

La Obtencion de la muestra debe de ser:

1-Especimen representativo.

2-Adecuada cantidad de tejido para diagnostico

3-Tejido viable para diagnostico

En cuanto la sangre deja de llevar oxígeno a los tejidos y de extraerles el anhídrido carbónico, las
enzimas de las células que componen los tejidos comienzan a actuar y se produce la autolisis, las
propias estructuras moleculares son deformadas, que es lo que precisamente se ha de evitar.
Los tejidos y órganos se han de extraer considerando las siguientes prioridades:

1- Las glándulas exocrinas y endocrinas lo más rápidamente posible.

2 - El páncreas y el riñón deben extraerse no más de 10 a 15 min. post-mortem.

3- Otros órganos tales como intestino delgado y/o grueso, estómago, hígado, se deben extraer no más
allá de los 30 min.

4- Los músculos esqueléticos, huesos, piel, encéfalo, médula, ganglios nerviosos no deben extraerse más
allá de 60 min. Postmortem

FIJACION

Consiste en interrumpir los procesos de degradación (autolisis y putrefacción) que aparece tras la
muerte celular, tratando de conservar la arquitectura y composición tisular lo mas próxima posible a
como se encontraba en el organismo vivo: FIJACION

El reactivo más utilizado para fijar tejidos es: el Formol o formalina en una dilución al 10% (P D P)

La fijacion es una operación destinada a “matar” las células, conservándolas, cuanto sea posible en el
estado en que están durante la vida.

Una buena fijación debe: 1 - Inmovilizar la célula (Pregunta de Parcial)

2 - Conservar exactamente todas las partes constitutivas.

3 - No hacer aparecer artificialmente otros detalles en la estructura

La rapidez de acción de un fijador debe tener por objetivo el de “matar” lo más pronto posible las
células. La precipitación total, por el contrario, debe producirse adecuadamente de modo que no se
produzcan contracciones.

“La muerte de la célula debe ser inmediata y su coagulación debe ser mediata”

Este cuerpo es un gas cuya solución acuosa lleva el nombre de formalina o de formol. Toda vez que
hablemos de formol puro tendremos en vista la solución comercial al 40%. El formol es el fijador más
utilizado, a causa de su bajo precio y la facilidad de su empleo. Es un fijador importante a causa de su
poder coagulante y su notable capacidad de penetración: FORMALDEHIDO

El principal objetivo es: observar la estructura histológica lo mas parecido posible como se encontraba
en el organismo. El órgano debe ser fijado después de su extirpación con el fin de que se conserve lo
mas veras posible sus estructuras celulares.
El formol comercial es un líquido incoloro, que emite vapores irritantes. A veces los vapores del formol
pueden producir accidentes: febriles, bronquitis, queratitis.

FIJACION

FIJADORES: El mas utilizado es: la formalina al 10%, su funcion es evitar la desnaturalizacion de las
proteínas.

La cantidad de líquido fijador en microscopia óptica debe ser: aproximadamente 10 a 20 veces el

volumen de la muestra.

La velocidad de fijación en formalina al 10%, es de: 1 mm/hora, de manera que se necesitan muchas
horas para la fijación adecuada de un espécimen (P D P)

CONSEJO ARDO PARA GARANTIZAR LAS PROPIEDADES DEL FORMOL: enjuagar la

muestra con abundante agua y eliminar el exceso de sangre antes de introducirla
en el recipiente con formol.

(La sangre impide que el formol penetre)

IMAGEN

El tamaño del frasco debe de ser el adecuado, recordando que la muestra una
vez fijada se endura:

MUESTRA SIN FIJADOR:

ESTUDIO MACROSCOPICO (TALLA O CORTE DE MUESTRA)

Descripción protocolizada de las características macroscópicas del espécimen a estudiar detallando

su: morfología general, dimensiones, coloración, consistencia, lesiones macroscópicas evidenciables y
relaciones de estas con otras estructuras: Estudio macroscopico

Se realizan diversos cortes dependiendo del tipo de muestra para anotar el estado
en que se encuentra la muestra, con el fin de identificar anomalías morfológicas.
 MANEJO DE LOS ESPECIMENES

Cono de cervix: extraccion de fragmento de cervix en forma de cono,

sirve para diagnostico y tratamiento para cuando hay lesion
intraepitelial del cervix

PROCESADOR DE TEJIDOS

El procesador de tejidos es un equipo que consta básicamente de 12 recipientes con reactivos

dispuestos de la siguiente manera:

1. Formol, encargado de la fijación (2 frascos).

2. Alcohol (isopropilico, metanol o etanol) de manera ascendente, encargado de la deshidratación del

tejido (5 frascos).

3. Xilol, encargado del aclaramiento del tejido (3 frascos).

4. Parafina, impregnación del tejido (2 frascos).

DURA 12 HORAS APROX EL PROCESADOR

DESHIDRATACION, ACLARAMIENTO Y PRIMER PASO DE INCLUSION EN PARAFINA: Son procesos que

requiere un procesador de tejidos

El tiempo obtimo para este paso son: 12 horas

 DESHIDRATACION

En que consiste la Deshidratación: Los tejidos contienen grandes cantidades de agua, tanto intracelular
como extracelular, que debe ser eliminada y reemplazada por parafina.

Detención de la fijación:

Una vez transcurrido el tiempo de fijación deseado es preciso detenerlo rápidamente.

El fijador que rodea la pieza puede ser eliminado por lavado en: A) Agua

b) alcohol o metanol

Piezas que han estado en alcohol, ácido pícrico o formol, se llevan directamente al alcohol 70 o 80%,
llevándose así a cabo el lavado y el inicio de la deshidratación.

La deshidratación se realiza por medio de un reactivo anhidro pero ávido de agua. Puede utilizarse la:
acetona o el alcohol etílico (es el más utilizado).

La deshidratación se hace en forma progresiva con sucesivos baños de alcohol, cada vez menos
hidratados: 70° – 80° – 90° – 96° – 100°.

Tiempos de permanencia en cada líquido:

Alcohol 70% las piezas pueden permanecer varios días.

Alcohol 96 % 2 baños en un lapso de 24 h.

Alcohol 100 3 baños de una hora c/u.

ACLARAMIENTO:

Permite que el alcohol de los tejidos sea reemplazado por un líquido (solvente) que disuelva la
parafina con la cual el tejido va a ser impregnado: El aclaramiento o desalcoholización

Es un hidrocarburo sólido, con escasa elasticidad que ha de penetrar a los tejidos, ocupando hasta sus
últimos intersticios. Para lo cual ha de licuarse mediante temperatura: La parafina

Solventes: Benceno, xileno, tolueno, cloroformo, fenol en alcohol, carbolxilol, etc.

La palabra aclarar proviene de que además de eliminar el alcohol muchas de estas sustancias tienen la
propiedad de trasparentar los tejidos.

Es un excelente agente aclarante pero tiende a hacer que los tejidos sean excesivamente duros y
quebradizos y esto nunca deben dejarse en este líquido más de 3 horas: Xileno

Tiene las mismas propiedades generales que el xileno pero resulta mejor porque endurece mucho
menos los tejidos: Tolueno
Resulta excelente para el tejido nervioso, ganglios linfáticos y embriones pues produce poco
encogimiento y no endurece mucho los tejidos: Cloroformo

¿Cómo se realiza el aclaramiento? :

Las piezas se trasladan a un frasco que contenga el volumen adecuado del solvente (30 veces).

Si cuando las piezas son colocadas en el solvente se observa que están formando nubosidades opalinas y
que estas no desaparecen de inmediato, quiere decir que la deshidratación no ha sido completa. Debe
volverse al alcohol absoluto.

INCLUSION EN PARAFINA

Inclusion en parafina: consiste en sustituir el agua tisular por medio de un medio capaz de solidificar en
condiciones adecuadas de temperatura con el fin de proporcionar a la muestra consistencia y
homogeneidad que permita realizar cortes micro en el micrótomo.

La parafina es: un hidrocarburo no cíclico. A la temperatura ambiente es sólido. La temperatura suave la

disuelve por completo. Una temperatura mayor de 65° llega a disolverla, produciéndose vapores de olor
desagradable, inflamables y también tóxicos.

Hay parafinas que funden a distintas temperaturas, para la mayoría de los trabajos pueden utilizarse
las que lo hacen a: 56-58°.

DISPENSOR DE PARAFINA. La parafina debe calentarse a una temperatura adecuada para el

procesamiento

INCLUSION EN PARAFINA: en este paso todo el reactivo utilizado para el claramiento esta sustituido por
parafina

ELABORACION DE LOS BLAQUES DE PARAFINA

CONTROL MULTIPLE DE TEJIDOS

Los CORTES REALIZADOS POR MICROTOMO: deben de ser: -Cortes muy delgados entre 2 y 4
micrometros de espesor, se utilizan cuchillas y tecnica (o) especializado

Cortes micro, corte de los bloques de parafina llevados a cabo en el micrótomo, se obtienen: finas
tirillas de tejido .
 TINCION Y MONTAJE

En la TINCION se utilizan : hematoxilina y eosina, tinciones especiales para mucinas y microorganismos

MONTAJE: posterior a la tincion se utiliza pegamento y se monta la lamina ya teñida (según clase jaja)

ESTUDIO CITOLOGICO DE LIQUIDOS Y FROTES:

Para estudios citologicos se debe considerar: 1. El liquido debe de ser presentado en refrigeracion

2. Centrifugacion

3. Fijador en citologia: alcohol isopropilico

BIOPSIA CON ASPIRACION POR AGUJA FINA (BAAF): Se

utiliza aguja fina y se extraen celulas del tejido por
aspiracion o por varias aspiraciones

DIAGNOSTICO DE UNA LESION DE LA MAMA:

1 -Biopsia por aspiración con aguja fina.

2 -Impronta de secreción del pezón

3 -Biopsia excisional o incisional

Datos clinicos en el diagnostico de una lesion de mama: se puede observar lo siguiente:

1- Cambos en la textura de la piel

2- Retracción o hendidura en el pezon

3- Secreció del pezon

4- Llenura atipica o fruncimiento

CONTROL DE CALIDAD:

En que consiste el Control de Calidad de las muestras: Es el proceso mediante el cual se detectan,
corrigen y reducen las deficiencias de procesos tecnicos y analiticos de una prueba diagnostica con el
objetivo de establecer en forma apropiada el manejo del paciente y mantener la excelencia