Ast

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GOT (AST)-LQ

GOT (AST)
NADH. Cinético UV. IFCC rec. Líquido

Determinación cuantitativa de aspartato aminotransferasa 6. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto (ΔA/min).
GOT (AST) CÁLCULOS
IVD ΔA/min x 1750 = U/L de AST
Conservar a 2-8ºC Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 μmol
de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en
PRINCIPIO DEL MÉTODO unidades por litro (U/L).
La aspartato aminotransferasa (AST) inicialmente llamada transaminasa
glutamato oxaloacética (GOT) cataliza la transferencia reversible de un Factores de conversión de temperaturas
grupo amino del aspartato al α-cetoglutarato con formación de glutamato y Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
oxalacetato. El oxalacetato producido es reducido a malato en presencia Temperatura Factor para convertir a
de malato deshidrogenasa (MDH) y NADH: de medición 25ºC 30ºC 37ºC
AST
L-Aspartato + α-Cetoglutarato ⎯⎯⎯→ Glutamato + Oxalacetato 25ºC 1,00 1,37 2,08
MDH 30ºC 0,73 1,00 1,54
Oxalacetato + NADH + H+ ⎯⎯ ⎯ ⎯→ Malato + NAD+ 37ºC 0,48 0,65 1,00
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio,
determinada fotométricamente, es proporcional a la concentración CONTROL DE CALIDAD
catalítica de AST en la muestra ensayada1. Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
SIGNIFICADO CLÍNICO Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
La AST es una enzima intracelular, se encuentra en niveles altos en el revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.
músculo del corazón, las células del hígado, las células del músculo Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
esquelético y en menores cantidades en otros tejidos. correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
Aunque un nivel elevado de AST en suero no es específico de
enfermedad hepática se emplea principalmente para su diagnóstico y VALORES DE REFERENCIA1
seguimiento, junto con otras enzimas como la ALT y ALP. También se 25ºC 30ºC 37ºC
emplea en el control post-infarto, en pacientes con desórdenes del Hombres Hasta 19 U/L 26 U/L 38 U/L
músculo esquelético, y en otras afecciones1,4,5. Mujeres Hasta 16 U/L 22 U/L 31 U/L
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
clínicos y de laboratorio. establezca sus propios valores de referencia.

REACTIVOS CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO


TRIS pH 7,8 80 mmol/L Rango de medida: Desde el límite de detección 1 U/L hasta el límite de
R1 Lactato deshidrogenasa (LDH) 800 U/L linealidad 260 U/L.
Tampón Malato deshidrogenasa (MDH) 600 U/L Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/10
L-Aspartato 200 mmol/L con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.
0,18 mmol/L Precisión:
R2 NADH
Substrato α-Cetoglutarato 12 mmol/L
Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Media (U/L) 17,0 135 17,3 131
PREPARACIÓN
SD 0,72 1,05 0,81 2,25
Reactivo de trabajo (RT):
CV (%) 4,27 0,77 4,68 1,72
Mezclar: 1 vol. de (R2) Substrato + 4 vol. (R1) Tampón.
Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,0048 ΔA/min.
Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 72 horas a temperatura ambiente.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad Los resultados obtenidos con 100 muestras fueron los siguientes:
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a Coeficiente de regresión (r): 0.9839.
2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. Ecuación de la recta de regresión: y= 0.9866x + 0.588.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
INTERFERENCIAS
- Presencia de partículas y turbidez.
- Absorbancias del Blanco a 340 < 1,00. Los anticoagulantes de uso corriente como la heparina, EDTA oxalato o fluoruro
no afectan los resultados. La hemólisis interfiere con la determinación1.
MATERIAL ADICIONAL Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm. determinación de la AST2,3.
- Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC)
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. NOTAS
- Equipamiento habitual de laboratorio. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este
reactivo en distintos analizadores.
MUESTRAS
Suero o plasma1. Estabilidad de la muestra: 7 días a 2-8ºC. BIBLIOGRAFÍA
1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
PROCEDIMIENTO Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
1. Condiciones del ensayo: 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .340 nm 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 1 cm paso de luz 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Temperatura constante . . . . . . . . . . .. . . .25ºC / 30ºC / 37ºC 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
3. Pipetear en una cubeta: PRESENTACIÓN
R1 60 mL
Ref: 41270
RT (mL) 1,0 R2 15 mL
Cont.
Muestra (μL) 100 R1 240 mL
Ref: 41272
R2 60 mL
4. Mezclar, incubar 1 minuto.

5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el


cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.

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