Cultivo Invitro Oficial 1

 APAZA MAMANI MARILUZ  LOBO FLORES NAHOMI
 CCUNO CCALLO ELIZABETH  QUISPE AMPUERO JHON ELISEO

 CHAMPI HUILLCA ALISON SHARMELY  RAMOS QUISPE YADHYRA LISBETH
 FARFAN LECHUGA SUSAN  CRUZ HERRERA IVAN
 AUCCAHUAQUI TTITO MARITZA  CCANA TUNQUE JHON
INTRODUCCION
El cultivo in vitro permite el crecimiento y desarrollo
del tejido vegetal en recipientes que lo separan del
ambiente exterior y lo mantienen en condiciones
controladas y asépticas. Entre las diversas técnicas
de cultivo in vitro, la Micropropagación consiste en
la producción clonal de vegetales a partir,
generalmente, de ápices o explantes nodales de
una planta madre.
La Micropropagación no solo ha contribuido a un

mejor entendimiento de los eventos de la
diferenciación celular, sino a un uso eficaz de tales
eventos en la explotación más eficiente de las
plantas.
En este último aspecto se destacan los siguientes

usos delas técnicas de cultivo in vitro, como el
mejoramiento genético, la obtención de plantas
libres de virus. Instituto Bellows 2
OBJETIVOS PRINCIPAL DEL PROYECTO:
Utilizar técnicas o sistemas de micro propagación vegetal (cultivo de tejidos “in vitro”) para B. excelsa,
a partir de un "explante" constituido por las “yemas terminales” que se encuentran en los árboles (y
contienen células merístemáticas) para ser reproducidas en medios de cultivo aparentes.
Instituto Bellows 3
OBJETIVOS ESPECIFICOS DEL PROYECTO:
 DEFINIR MEDIOS DE CULTIVO Y TIPO DE CLONES ADECUADOS PARA EL ENRAIZAMIENTO DE
PLÁNTULAS EN LABORATORIO
Se espera la estandarización de procedimientos “in vitro”, para la obtención de plántulas

enraizadas a partir de yemas terminales de castaña, provenientes de árboles seleccionados
(jardín clonal), para luego ser propagadas en condiciones de vivero. Instituto Bellows 4
 DETERMINAR EL SUSTRATO Y CLON ADECUADOS, SEGÚN EL PORCENTAJE DE
SUPERVIVENCIA Y CRECIMIENTO DE LOS PLANTONES, EN EL PROCESO DE ADAPTACIÓN A
CONDICIONES DE VIVERO
Se espera, la consolidación de los resultados obtenidos en el proceso de enraizamiento en

laboratorio de micropropagación, en la fase de adaptación de plantones a condiciones de vivero,
utilizando tres tipos de sustrato (tierra vegetal, tierra vegetal + biocarbón yInstituto
tierra vegetal
Bellows 5
+biocarbón enriquecido).
 FORTALECIMIENTO DE LA CAPACIDAD CIENTÍFICA
Se espera un fortalecimiento constante del personal del proyecto, para la formación de

cuadros técnicos especializados en la metodología de micro propagación vegetal, la misma
que será extensiva a otras especies a futuro.
Instituto Bellows 6
• Facilita la realización de
una propagación clonal • El costo de
masiva de plantas mantenimiento de un
idénticas en un corto banco de germoplasma
periodo. en condiciones de
laboratorio es menor en
comparación al
mantenimiento en
• Las plántulas se
condiciones de campo,
mantienen libres de evitando el riesgo de
plagas y enfermedades pérdidas por factores
por ser una técnica que climáticos y/o sanitarios.
requiere de mucha
asepsia p.
• Permite sanear
• Los clones pueden plantas con virus,
ser propagados en LA MICROPROPAGACIÓN mediante el cultivo de
cualquier época del VEGETAL meristemas.
año
Instituto Bellows 7
RESULTADO DE LA ASEPSIA
El tratamiento 2,
constituido por la
variable Cloruro de
mercurio (HgCl2) 2 mg/L
obtuvo el porcentaje de
48% de efectividad,
siendo el mayor
alcanzado hasta el
momento.
Instituto Bellows 8
ASEPSIA DE LOS EXPLANTES DE CASTAÑA
Para lograr una asepsia importante, se aplicaron una serie de tratamientos (5) a
fin de obtener al menos uno tratamiento que sea eficiente.
Tratamiento N° 1 Tratamiento N° 2 Tratamiento N° 3 Tratamiento N° 4

MERTECT 1% 10 min MERTECT 1% 10 min MERTECT 1% 10 min MERTECT 1% 10 min
500 500 500 500
ALCOHOL 70° 30 s ALCOHOL 70° 30 s

ALCOHOL 70° 30 s ALCOHOL 70° 30 s
CLORURO 1 mg/L 15 min CLORURO 2mg/L 15 min
HIPOCLOR 2% 15 min HIPOCLORI 3% 15 min
DE DE
ITO DE TO DE
MERCURIO MERCURI
SODIO SODIO
O
AC. 100 mg/L 0 – 20 AC. 100 mg/ L 0 – 20 días

AC. 100 mg/L 0 – 20 días AC. 100 mg/ L 0 – 20 días
ASCORBIC días ASCORBIC
ASCORBIC ASCORBI
O O
O CO
Instituto Bellows 9
ETAPAS DE LA MICRO-PROPAGACIÓN:
La regeneración de plantas in vitro presenta cuatro

etapas principales:
Establecimiento del cultivo
Desarrollo y multiplicación de vástagos.
Enraizamiento Establecimiento Aclimatación de los

del cultivo in-vitro implantes
Aclimatación de Los implantes. Atreves del fotoperiodo
Desarrollo y
multiplicación
de vástagos
Instituto Bellows 10
ESTABLECIMIENTO IN VITRO
Se logra cuando hay una

asepsia y existe un desarrollo
de órganos (hojas, tallo, etc.)
del explante en un medio de
cultivo adecuado.
Plántulas de castaña
METODOLOGIA
Área de preparación de Área de introducción de Área de crecimiento o

medios siembra incubación
se realiza un preparado uso de equipos como la Es el área donde se extrae
de medios y la disección cámara flujo laminar y se el explante ya crecido y es
del material del explante. llevara a cabo la así como empieza a
desarrollarseInstituto
la planta.Bellows
12
introducción a la siembra.
Medio de cultivo adecuado
Está compuesto por macro y micronutrientes

como sales, vitaminas, fitohormonas,
agar(sustrato).
Plántulas de castaña in vitro
MATERIALES Y EQUIPOS
BALANZA ANALÍTICA PHMETRO
ESTUFA
AUTOCLAVE DESTILADOR DE AGUA REFRIGERADORA
RESULTADO
 Se logró un 50% en la germinación in vitro de la castaña y el otro

50% estuvo contaminado con algunas bacterias y hongos.
 Se logró encontrar un tratamiento de desinfección la cual estaba
compuesta de mercurio al 2%, alcohol y fungicida.
CONCLUSIONES
• Es la primera vez que se hace esta prueba
con la especie Bertholletia excelsa, y hasta
el momento hay un buen resultado, el
cultivo invitro a la larga es una técnica que
asegura producción y reduce costos de
mano de obra en primera instancia, y
semillas. Las plántulas que salen como
resultados son clones, y es de esta manera
que garantiza el éxito en cuestión de elegir
la mejor muestra.
• Analizamos detalladamente la funcion que

cumplen los equipos, materiales e
intrumentos y en que tipo de medio tienen
que estar para mayor productividad dentro
del estudio como tambien en el CITE
productivo.
Gracias

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La Micropropagación no solo ha contribuido a un

En este último aspecto se destacan los siguientes

Se espera la estandarización de procedimientos “in vitro”, para la obtención de plántulas

Se espera, la consolidación de los resultados obtenidos en el proceso de enraizamiento en

Se espera un fortalecimiento constante del personal del proyecto, para la formación de

Tratamiento N° 1 Tratamiento N° 2 Tratamiento N° 3 Tratamiento N° 4

ALCOHOL 70° 30 s ALCOHOL 70° 30 s

AC. 100 mg/L 0 – 20 AC. 100 mg/ L 0 – 20 días

La regeneración de plantas in vitro presenta cuatro

Establecimiento del cultivo

Desarrollo y multiplicación de vástagos.

Enraizamiento Establecimiento Aclimatación de los

Se logra cuando hay una

Área de preparación de Área de introducción de Área de crecimiento o

Está compuesto por macro y micronutrientes

BALANZA ANALÍTICA PHMETRO

 Se logró un 50% en la germinación in vitro de la castaña y el otro

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