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    Espectofotrometri 14

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    joel flores cuevas
    La espectrofotometría se caracteriza por su precisión, sensibilidad y aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza. Se basa en las leyes de Lambert y Beer, las cuales establecen que la intensidad de luz disminuye de forma proporcional al espesor y concentración de la sustancia absorbente. El espectrofotómetro mide la absorbancia o transmitancia de una muestra para cuantificar cuánta radiación electromagnética es absorbida y así relacionarlo con la concentración de analitos en solución.

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    La espectrofotometría se caracteriza por su precisión, sensibilidad y aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza. Se basa en las leyes de Lambert y Beer, las cuales establecen que la intensidad de luz disminuye de forma proporcional al espesor y concentración de la sustancia absorbente. El espectrofotómetro mide la absorbancia o transmitancia de una muestra para cuantificar cuánta radiación electromagnética es absorbida y así relacionarlo con la concentración de analitos en solución.

    Título original

    ESPECTOFOTROMETRI 14

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    La espectrofotometría se caracteriza por su precisión, sensibilidad y aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza. Se basa en las leyes de Lambert y Beer, las cuales establecen que la intensidad de luz disminuye de forma proporcional al espesor y concentración de la sustancia absorbente. El espectrofotómetro mide la absorbancia o transmitancia de una muestra para cuantificar cuánta radiación electromagnética es absorbida y así relacionarlo con la concentración de analitos en solución.

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    La espectrofotometría se caracteriza por su precisión, sensibilidad y aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza. Se basa en las leyes de Lambert y Beer, las cuales establecen que la intensidad de luz disminuye de forma proporcional al espesor y concentración de la sustancia absorbente. El espectrofotómetro mide la absorbancia o transmitancia de una muestra para cuantificar cuánta radiación electromagnética es absorbida y así relacionarlo con la concentración de analitos en solución.

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    Espectrofotometría

    Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su aplicabilidad a moléculas de


    distinta naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc.) y estado de agregación
    (sólido, líquido, gas).
    TIPOS DE ESPECTROFOTOMETRO
    TRAMITANCIA
    ABSORBANCIA
    Ley de Lambert B : espesor del medio absorvente

    Establece que cuando pasa


    luz monocromática por un
    medio homogéneo, la
    disminución de la
    intensidad del haz de luz es
    proporcional al espesor del
    medio.
    B

    P : intensidad de la luz Po : intensidad de la luz


    transmitida incidente
    C : concentración de la solucion

    Ley de beer
    La intensidad de un haz de luz
    monocromática disminuye al
    aumentar aritméticamente la
    concentración de la sustancia
    C absorbente, cuando este haz
    pasa a través de un medio
    homogéneo.

    P : intensidad de la luz Po : intensidad de la luz


    transmitida incidente

    K: constante
    Ley de Lambert-Beer

    La cantidad de radiación
    electromagnética
    absorbida por un analito
    se puede relacionar
    cuantitativamente con la
    concentración de dichas
    sustancias en solución
    CALIBRACION:
    Antes de utilizar el espectrofotómetro o fotocolorímetro debemos realizar
    rutinas básicas de calibración.

    Antes de usar debemos hacer lo siguiente:


     limpieza de la superficie del instrumento.
     limpieza de los filtros y fuente de luz
     verificar las instalaciones eléctricas.
     Se encuentra el equipo y se deja que caliente 15 minutos
     Selecciona la longitud de onda según loa técnica del análisis bioquímico.
     Seleccionar absorbancia o tramitancia
     Ajustar a 0 con agua destilada.
     Se lee un estándar de concentración conocida y se ajusta el aparato a esa
    concentración.
    RECOMENDACIONES
    COLOCAR Proteje el instrumento Calentar
    01 El instrumento en 02 Nunca tocar las 03 Encender el
    una superficie superficies ópticas tales instrumento para
    plana sin como lentes y filtros. que este se
    vibraciones, calor Seguir las instrucciones caliente antes de
    excesivo, para una buena usar
    humedad o luz limpieza.
    directa.

    Verificar Asegurarse
    Calibrar
    04 Se debe hacer un 05 El 0 y el 100% T 06 De que las cubetas
    chequeo (cada cada vez que se estén limpias sin
    semana) de la vaya a hacer rayaduras y huellas
    calibración de la lecturas y cuando digitales. Esto debe
    longitud de onda varíe la longitud de hacerse cada vez que
    onda. va a usarse
    GRACIAS

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