Fungos Biblioteca
Fungos Biblioteca
Fungos Biblioteca
doi: 10.5123/S2176-6223202100769
RESUMO
INTRODUÇÃO: Estudos sobre micobiota anemófila de bibliotecas evidenciam ampla variedade de fungos, incluindo
aqueles potencialmente patogênicos, oferecendo risco ocupacional e manifestações alérgicas a seus frequentadores.
OBJETIVO: Avaliar a ocorrência de fungos anemófilos em bibliotecas de instituições de ensino da educação básica e
superior da cidade de Maceió, estado de Alagoas, Brasil. MATERIAIS E MÉTODOS: Amostras do ambiente foram obtidas
a partir da exposição de 55 placas de Petri contendo ágar Sabouraud com cloranfenicol em três bibliotecas de três
instituições de ensino. As colônias fúngicas resultantes foram submetidas à identificação por meio da associação de aspectos
macroscópicos e microscópicos, utilizando-se microcultivo. Ensaios fenotípicos complementares também foram utilizados.
RESULTADOS: Das 55 amostras analisadas, foram obtidas 351 unidades formadoras de colônias (UFC), das quais 331
(94,3%) corresponderam a fungos filamentosos e 20 (5,7%) a leveduriformes. As espécies de fungos filamentosos mais
frequentes foram Penicillium sp., Cladosporium sp., Alternaria sp., Aspergillus sp. e Curvularia sp., destacando-se maior
predomínio de Penicillium sp. em uma biblioteca cujo ambiente não era climatizado, com 80 (22,7%) UFC. CONCLUSÃO:
Os resultados deste estudo evidenciam ampla variedade de fungos com potencial patogênico e toxigênico, que podem
desencadear processos alérgicos, ratificando assim a importância do estabelecimento de protocolos de higiene e de
desinfecção nesse tipo de ambiente.
Palavras-chave: Fungos; Contagem de Colônia Microbiana; Bibliotecas.
ABSTRACT
INTRODUCTION: Studies on airborne mycobiota from libraries show a wide variety of fungi, including those potentially
pathogenic, offering occupational risk and allergic manifestations to their visitors. OBJECTIVE: To evaluate the occurrence
of anemophilous fungi in libraries of educational institutions of basic and higher education in the city of Maceió, Alagoas
State, Brazil. MATERIALS AND METHODS: Samples of the air were obtained from the exposure of 55 Petri dishes containing
Sabouraud agar with chloramphenicol in three libraries of three educational institutions. The resulting fungal colonies
were subjected to identification through the association of macroscopic and microscopic aspects, using microculture.
Complementary phenotypic assays were also performed. RESULTS: A total of 351 colony-forming units (CFU) were obtained
from the 55 analyzed samples, of which 331 (94.3%) were filamentous fungi and 20 (5.7%) were yeasts. The most frequent
filamentous fungus species were Penicillium sp., Cladosporium sp., Alternaria sp., Aspergillus sp., and Curvularia sp., with
a greater predominance of Penicillium sp. in a library that was not acclimatized, with 80 (22.7%) CFU. CONCLUSION:
The results of this study show a great diversity of fungi with pathogenic and toxigenic potential, which can trigger allergic
processes, thus confirming the importance of establishing hygiene and disinfection protocols in this type of environment.
Keywords: Fungi; Microbial Colony Count; Libraries.
Correspondência / Correspondence:
Maria Anilda dos Santos Araújo
Centro Universitário Tiradentes
Av. Comendador Gustavo Paiva, 5017. Bairro: Cruz das Almas. CEP: 57038-000 – Maceió, Alagoas, Brasil – Tel.: +55 (82) 3311-3100
E-mail: fungosanilda@gmail.com
Micologia do Centro Universitário Cesmac, onde foram Para identificação dos fungos leveduriformes, foram
incubadas à temperatura ambiente (28 ± 2 ºC) e realizadas as análises macromorfológica das colônias
observadas diariamente por um período de sete dias. e microscópica pela técnica de microcultivo em ágar
fubá. O resultado foi associado ao teste de tubo
ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DOS FUNGOS
germinativo, formação de clamidósporos em ágar Tween
Após constatação de crescimento fúngico nas 80 (Difco) e ao padrão de assimilação e fermentação de
placas, foi realizada a análise quantitativa por meio diversas fontes de carbono e nitrogênio14.
da contagem do número de UFC, diferenciando-as em
leveduriformes e filamentosas. RESULTADOS
Para o isolamento dos fungos, inicialmente, foi No momento da exposição das placas, foram
realizada a purificação por meio da transferência observados registros térmicos de 24,6 °C, 28,1 °C e
de fragmentos de colônias para o preparo de uma 21,6 °C e umidade de 68%, 69% e 59% nos acervos A,
suspensão em água destilada esterilizada e, em seguida, B e C, respectivamente, que originaram 55 amostras no
a semeadura por esgotamento em placas de Petri total (Tabela 1).
contendo ASD adicionado de cloranfenicol (50 mg/L). Nas 55 amostras analisadas, foram obtidas 351
As placas foram mantidas à temperatura ambiente UFC, das quais 331 UFC (94,3%) eram fungos
(28 ± 2 ºC) para o desenvolvimento de colônias filamentosos e 20 UFC (5,7%) fungos leveduriformes. A
isoladas. Constatado o crescimento, essas colônias contagem global de colônias nos acervos bibliográficos
foram transferidas para tubos de ensaio contendo A, B e C resultou em 212 (60,4%), 123 (35,0%) e 16
ágar batata dextrose para manutenção e posterior (4,6%) UFC, respectivamente, conforme tabela 2.
identificação11,12,13.
A biblioteca A apresentou maior contagem
A identificação dos fungos filamentosos de UFC, tanto de fungos filamentosos quanto de
baseou-se na associação das características macro leveduriformes. Em relação à identificação dos fungos,
e micromorfológicas da cultura. As características observou-se uma maior ocorrência de Penicillium
macroscópicas, como textura, formato e coloração sp. (115 UFC), seguido por Cladosporium sp. (79 UFC),
no verso e reverso da colônia, juntamente com as Alternaria sp. (20 UFC), Aspergillus sp. (20 UFC) e
características microscópicas, tais como estruturas Curvularia sp. (18 UFC). A maior diversidade fúngica
reprodutivas e outras, como clamidósporos, hifas foi verificada na biblioteca A, registrando 15
(presença ou ausência de septos), coloração das hifas e gêneros, sendo Cladosporium sp. (69 UFC) o fungo
dos esporos (hialinos ou demáceos), foram comparadas predominante, seguido por Penicillium sp. (32 UFC)
aos critérios adotados por Hoog et al.11, Lacaz et al.12, e Curvularia sp. (16 UFC). Na biblioteca B, onde não
Sidrim e Rocha13, Zaitz et al.14 e Mezzari e Fuentefria15. havia climatização, o gênero de maior ocorrência
Para melhor identificação e visualização das estruturas foi Penicillium sp. (80 UFC), enquanto na biblioteca
dos fungos filamentosos, foi feito o microcultivo em C predominou o gênero Aspergillus sp. (6 UFC). Não
lâmina, pela técnica descrita por Riddell16, utilizando foram identificados 13,9% (49 UFC) dos fungos devido
ágar Lactrimel para estimular a esporulação. à ausência de estruturas reprodutivas (Tabela 3).
Tabela 1 – Registro de temperatura e umidade do ambiente, no momento de exposição das placas, e número de
amostras obtidas nas bibliotecas A, B e C da cidade de Maceió, estado de Alagoas, Brasil
Parâmetros termo-higrométricos
Biblioteca Número de amostras %
Temperatura ºC URA
A 24,6 68 25 45,4
B 28,1 59 15 27,3
C 21,6 69 15 27,3
Total 55 100,0
URA: Umidade relativa do ar.
Tabela 2 – Ocorrência de UFC de fungos filamentosos e leveduriformes nas bibliotecas A, B e C da cidade de Maceió,
estado de Alagoas, Brasil
Fungos
Bibliotecas Filamentosos Leveduriformes Total %
FA (UFC) FR (%) FA (UFC) FR (%)
A 198 56,4 14 4,0 212 60,4
B 118 33,6 5 1,4 123 35,0
C 15 4,3 1 0,3 16 4,6
Total 331 94,3 20 5,7 351 100,0
FA: Frequência absoluta; FR: Frequência relativa.
Tabela 3 – Microbiota fúngica anemófila identificada nas bibliotecas A, B e C da cidade de Maceió, estado de Alagoas,
Brasil
Bibliotecas
Gêneros/
A B C Total %
Espécies
FA (UFC) FR (%) FA (UFC) FR (%) FA (UFC) FR (%)
Acremonium sp. 2 0,6 – – 2 0,6 4 1,2
Alternaria sp. 15 4,3 5 1,4 – – 20 5,7
Aspergillus sp. 14 4,0 – – 6 1,7 20 5,7
Bipolaris sp. 2 0,6 – – – – 2 0,6
Cladosporium sp. 69 19,6 8 2,3 2 0,6 79 22,5
Curvularia sp. 16 4,6 2 0,6 – – 18 5,2
Fonsecaea sp. 5 1,4 – – – – 5 1,4
Fusarium sp. 10 2,8 – – – – 10 2,8
Mycelia sterilia – – 1 0,3 – – 1 0,3
Neurospora sp. 1 0,3 – – – – 1 0,3
Nigrospora sp. – – 1 0,3 – – 1 0,3
Penicillium sp. 32 9,1 80 22,7 3 0,8 115 32,6
Rhodotorula sp. 5 1,4 1 0,3 1 0,3 7 2,0
Scopulariopsis sp. 3 0,9 – – – – 3 0,9
Trichosporon sp. 7 2,0 2 0,6 – – 9 2,6
Ulocladium sp. 4 1,1 – – – – 4 1,1
Veronaea sp. 2 0,6 1 0,3 – – 3 0,9
Não identificados 25 7,1 22 6,2 2 0,6 49 13,9
Total 212 60,4 123 35,0 16 4,6 351 100,0
UFC: Unidade formadora de colônia; FA: Frequência absoluta; FR: Frequência relativa. Sinal convencional utilizado: – Dado numérico igual a zero,
não resultante de arredondamento.
Diversas culturas fúngicas foram obtidas após a coleta vez que concentram grande quantidade de matéria
das amostras por sedimentação espontânea nas três orgânica, incluindo papel, cola de amido, couro e
bibliotecas estudadas. Na figura 1, estão apresentados tecidos18. Por isso, evidências apontam que, mesmo em
os aspectos macroscópicos e microscópicos dos seis condições controladas, há contaminação por fungos em
fungos mais prevalentes e que exibiram mais de 10 UFC superfícies e no ar desses ambientes19.
nos ambientes avaliados, sendo esses representados No espaço C, foi observado um menor
por Alternaria sp., Aspergillus sp., Cladosporium sp., número de UFC e espécies de fungos filamentosos
Curvularia sp., Fusarium sp. e Penicillium sp. quando comparado à biblioteca A, que também
As limitações deste estudo estão relacionadas à é climatizada. Esse fato pode estar relacionado
quantidade de espaços estudados e à falta de estrutura à sistematização da limpeza desse local e menor
para realizar a identificação molecular desses fungos. temperatura e umidade verificada no momento da
coleta. A biblioteca C adotava práticas regulares
DISCUSSÃO de limpeza e higienização; além disso, o ambiente
apresentava melhor refrigeração, especialmente por
Os resultados obtidos neste estudo assemelham-se
possuir menor fluxo de pessoas no local, observação
aos relatados por Menezes et al.17, no que se refere
feita durante o período do estudo, quando comparado à
à diversidade fúngica encontrada, já que obtiveram
biblioteca A, que oferecia 88 cursos presenciais, e a C,
220 UFC a partir de 50 exposições em uma biblioteca
13 cursos e ser constituída por uma área menor. Assim,
climatizada de uma instituição pública de ensino
a maior frequência de fungos no espaço A pode estar
superior no nordeste do Brasil. Ambientes fechados
relacionada à maior visitação nesse espaço por alunos
climatizados tendem ao acúmulo de células fúngicas
e funcionários, visto que essa biblioteca serve de
dispersas no ar, como evidenciado por Ribeiro e
referência para outras instituições de ensino e pesquisa
Lubisco6, ao compararem a concentração de UFC de
do estado. Ademais, é importante considerar que os
ambiente interno com o externo de uma biblioteca,
equipamentos de climatização são frequentemente
onde o primeiro apresentou aproximadamente o dobro desligados no período noturno e aos fins de semana
de concentração de UFC que o segundo. nessa biblioteca, o que causa uma variabilidade de
As bibliotecas são espaços que propiciam condições temperatura, sobretudo em decorrência das amplitudes
ideais para o crescimento de microrganismos, uma térmicas experimentadas na Região Nordeste.
A D
B E
C F
A: Alternaria sp.; B: Aspergillus sp.; C: Cladosporium sp.; D: Curvularia sp.; E: Fusarium sp.; F: Penicillium sp. Lâminas coradas com
lactofenol azul-algodão.
Figura 1 – Aspectos macroscópicos e microscópicos dos fungos que apresentaram maior prevalência no ambiente das
bibliotecas A, B e C, cultivados em placas de Petri contendo ágar batata dextrose a 28 ºC, na cidade de
Maceió, estado de Alagoas, Brasil
contaminam esses espaços, predominam espécies Em menor frequência, foi observada a presença de
do gênero Aspergillus e Penicillium8,17,20. No presente fungos leveduriformes nos ambientes de estudo. Embora
estudo, as espécies de fungos filamentosos mais tenha sido relatado o isolamento desses fungos, pouca
frequentes foram Penicillium sp. e Cladosporium sp.; atenção é dada aos mesmos, quando comparados
entretanto, Alternaria sp., Aspergillus sp. e Curvularia aos fungos filamentosos responsáveis por desencadear
sp. também apresentaram frequência superior às outras processos alérgicos de forma iminente, a exemplo
espécies identificadas. do Aspergillus, enquanto fungos leveduriformes não
Estudos ambientais realizados nos últimos 20 anos produzem reações alérgicas ou respiratórias de
com ar dos ambientes de bibliotecas evidenciaram que imediato, embora possam ser danosos a indivíduos
espécies de Cladosporium, Aspergillus e Penicillium são com imunocomprometimento8. É importante ressaltar
quase onipresentes e podem produzir numerosos conídios que podem estar relacionados a infecções superficiais
que são facilmente dispersados pelo ar25. Segundo e sistêmicas, especialmente naqueles indivíduos com
Martins26, a diversidade de fungos presente em ambientes comprometimento do sistema imunológico39.
fechados é resultante da disseminação ocasionada Entre as espécies leveduriformes isoladas,
pelas correntes de ar, entre outros fatores bióticos do Trichosporon sp. apresentou maior frequência, com
ambiente externo, e está relacionada especialmente ao 9 UFC (2,6%). Trichosporon é um fungo que pode
aparecimento de gêneros característicos da microbiota fazer parte da microbiota normal da pele humana e
local de determinada região. trato gastrointestinal, e 17 espécies desse gênero são
Nesse sentido, espécies pertencentes aos gêneros clinicamente relevantes40,41,42 por serem causadoras
Aspergillus, Penicillium e Verticillium apresentam de piedra branca, pneumonite por hipersensibilidade e
atividade celulolítica, sendo capazes de deteriorar vários tipos de infecções invasivas, principalmente em
materiais ricos em celulose, tais como madeira, livros e indivíduos imunocomprometidos41, sendo, portanto,
quadros27. Além do mais, os gêneros de fungos que são considerado oportunista.
encontrados com maior frequência no ar são Aspergillus
Outra levedura identificada foi Rhodotorula
sp., Penicillium sp., Fusarium sp., Cladosporium sp.,
sp., considerada comensal e que está presente
Curvularia sp., Neurospora sp. e Alternaria sp., sendo
nas vias respiratórias, microbiota gastrointestinal e
Aspergillus e Penicillium considerados os colonizadores
genital humana e disseminada no meio
primários de superfícies e interiores28.
ambiente. Pode causar infecções oportunistas em
Em relação aos fungos filamentosos identificados pacientes imunocomprometidos, as quais variam de
neste estudo, grande parte desses microrganismos está endocardite, meningite, ventriculite e peritonite, até
comumente associada a processos patológicos. Fungos casos de fungemia potencialmente fatais43,44,45.
anemófilos, quando inalados, podem desencadear
doenças que vão desde manifestações alérgicas Os resultados deste estudo demonstram a
respiratórias, tais como asma e rinite, até infecções necessidade da melhoria das medidas de desinfecção
graves em indivíduos imunocomprometidos20. ambiental para manutenção do acevo de bibliotecas e
prevenção de doenças ocasionadas por fungos em seus
Entre essas espécies, fungos do gênero Aspergillus frequentadores.
causam maior preocupação, por poder ocasionar desde
reações alérgicas até aspergilose, doença caracterizada CONCLUSÃO
por um quadro clínico broncopulmonar e que pode Os resultados deste estudo evidenciam a importância
se disseminar, comprometendo diversos órgãos20. A de rotinas de desinfecção ambiental em espaços
aspergilose invasiva está relacionada a uma diversidade fechados, como as bibliotecas, para a prevenção de
de cenários clínicos, comumente variável em relação às doenças em seus frequentadores e a conservação do
manifestações, apresentando uma taxa de mortalidade
acervo, visto que o risco à saúde pode ser maior ou
muito elevada29.
menor, dependendo das medidas de controle ambiental
Embora as espécies de Penicillium sejam saprófitas, adotadas, da frequência da higienização do acervo e do
ubíquas do solo e, consequentemente, sobrevivam de ambiente em geral, do monitoramento da temperatura e
substâncias orgânicas biodegradáveis e prefiram climas da umidade relativa do ar.
frios a moderados, sua colonização está relacionada
à capacidade de crescimento em uma variedade de CONFLITOS DE INTERESSES
temperaturas, habilidade de sobreviver em diferentes Os autores declaram não haver conflitos de
faixas de atividade de água e condições físico-químicas, interesses em relação à pesquisa.
as quais são encontradas em bibliotecas, tornando esse
ambiente propício para a sua dispersão30. CONTRIBUIÇÃO DOS AUTORES
Além disso, Cladosporium tem sido o gênero fúngico José Rafaelly Gaia de Sousa, Delane Cristina
mais comum em diversos estudos de ambientes internos da Silva e Maria Anilda dos Santos Araújo foram
climatizados, sendo considerado um fungo dominante responsáveis pela coleta, processamento e identificação
universal31,32,33,34,35,36. Muitas espécies de Cladosporium das amostras. Davi Porfirio da Silva, Rodrigo José Nunes
são reconhecidas como patógenos emergentes, Calumby, Lais Nicolly Ribeiro da Silva, Jayane Omena
responsáveis por infecções pulmonares, cutâneas de Oliveira e Rossana Teotônio de Farias Moreira
e problemas relacionados ao sistema respiratório, foram responsáveis pela elaboração e aprovação do
frequentemente associados a queixas asmáticas37,38. manuscrito.
26 Martins OA. Fungos anemófilos e leveduras 36 Souza AKP, Nascimento JPM, Araújo MAS,
isolados em ambientes de laboratórios de Pedrosa KPS, Tenorio BM, Pires LLS, et al. Airborne
microbiologia em instituição de Ensino Superior fungi in neonatal intensive care unit of a public
[Dissertação]. Pelotas (RS): Universidade Federal de hospital in Brazil. Int J Curr Microbiol App Sci.
Pelotas, Faculdade de Veterinária; 2016. 2019;8(12):1210-9.
27 Monteiro MCP. Identificação de fungos dos gêneros 37 Castro AS, Oliveira A, Lopes V. Pulmonary
Aspergillus e Penicillium em solos preservados no phaeohyphomycosis: a challenge to the clinician.
cerrado [Dissertação]. Lavras (MG): Universidade Eur Respir Rev. 2013;22(128):187-8.
Federal de Lavras; 2012.
38 Nascimento JPM, López AMQ, Araújo MA, Araujo
28 Sobral LV. Fungos anemófilos em ambientes LA, Silva Filho EA. Airborne fungi in indoor hospital
climatizados: prevalência, produção de enzimas environments. Int J Curr Microbiol App Sci.
e atividade antibacteriana [Dissertação]. Vitória 2019;8(1):2749-72.
de Santo Antão (PE): Universidade Federal de
Pernambuco; 2016. 50 p. 39 Silva DP, Lessa ILP, Medeiros MAS, Lacerda GAN,
Mascarenhas MLVC, Costa ALC, et al. Fungal
29 Carvalho LIC. Aspergillus e aspergilose: desafios infections in preterm infants by yeasts of the genus
no combate da doença [Dissertação]. Porto (PT): Malassezia. Rev Enferm UFPE on line. 2018
Universidade Fernando Pessoa; 2013. Oct;12(10):2836-43.
30 Singh S, Khajuria R. Penicillium enzymes for the 40 Colombo AL, Padovan ACB, Chaves GM.
textile industry. In: Gupta VK, Rodriguez-Couto S, Current knowledge of Trichosporon spp. and
editors. New and future developments in microbial trichosporonosis. Clin Microbiol Rev. 2011
biotechnology and bioengineering. Florida: Elsevier; Oct;24(4):682-700.
2018. Chapter 11; p. 201-15.
41 Guého E, Smith MT, Hoog GS, Billon-Grand
31 Ribeiro EL. Fungos na biodeterioração de livros G, Christen R, Batenburg van der Vegte
em ambientes bibliotecários nos últimos 35 anos WH. Contributions to a revision of the genus
(1977 – 2012). Rev Bras Bibliot Doc. 2013 Trichosporon. Antonie Van Leeuwenhoek. 1992
jan-dez;9(1):17-27. May;61(4):289-316.
32 Grava S, Lopes FAD, Cavallazzi RS, Grassi MFNN, 42 Sugita T, Nakajima M, Ikeda R, Matsushima T,
Svidzinski TIE. Um caso raro de pneumonia Shinoda T. Sequence analysis of the ribosomal DNA
hemorrágica por Cladosporium cladosporioides. J intergenic spacer 1 regions of Trichosporon species.
Bras Pneumol. 2016 set-out;42(5):392-4. J Clin Microbiol. 2002 May;40(50:1826-30.
33 Calumby RJN, Silva JA, Silva DP, Moreira RTF, 43 Samonis G, Anatoliotaki M, Apostolakou H, Maraki
Araújo MAS, Almeida LM, et al. Isolamento e S, Mavroudis D, Georgoulias V. Transient fungemia
identificação da microbiota fúngica anemófila em due to Rhodotorula rubra in a cancer patient: case
Unidade de Terapia Intensiva. Braz J Develop. 2019 report and review of the literature. Infection. 2001
out;5(10):19708-22. Jun;29:173-6.
34 Gonçalves CL, Mota FV, Ferreira GF, Mendes 44 Alliot C, Desablens B, Garidi R, Tabuteau S.
JF, Pereira EC, Freitas CH, et al. Airborne fungi Opportunistic infection with Rhodotorula in cancer
in an intensive care unit. Braz J Biol. 2018 patients treated by chemotherapy: two case reports.
May-Aug;78(2):265-70. Clin Oncol. 2000 Apr;12(2):115-7.
35 Schoenlein-Crusius IH, Trufem SFB, Grandi RAP, 45 Huttova M, Kralinsky K, Horn J, Marinova I, Iligova
Milanez AI, Pires-Zottarelli CLA. Airborne fungi in K, Fric J, et al. Prospective study of nosocomial
the region of Cubatão, São Paulo State, Brazil. Braz fungal meningitis in children-report of 10 cases.
J Microbiol. 2001 Jan-Mar;32(1):61-5. Scand J Infect Dis. 1998;30(5):485-7.