Determinacin Fotomtrica del Hierro

1. Introduccin
Hasta ahora hemos realizado determinaciones analticas en base a la masa y el volumen del
analito para saber cuantitativamente la presencia de este en una muestra problema, pudimos
ver la existencia de un sinfn de mtodos analticos para el tipo de analito que se desea
determinar, y son un buen manejo de estas tcnicas podremos calcular de una forma precisa y
exacta la cantidad de volumen, pero sin embargo, cuando la cantidad del analito en una
muestra es muy pequea o es dificultoso de separarlo por medios convencionales (por lo
menos por los aprendidos hasta ahora), es en estos casos que se busca la manera de poder
determinarlos, y se utilizan las otras propiedades fsicas de los analitos.
Las otras propiedades que se pueden utilizar para la determinacin cuantitativa del analito son
la intensidad luminosa y/o carga elctrica del analito, cuando se hace uso de estas propiedades
de los elementos se usan otros mtodos de determinacin, como ser, el mtodo
electroanalticos que miden propiedades elctricas como voltaje, corriente, resistencia y
cantidad de carga elctrica; pero tambin se utilizan los mtodos espectroscpicos que se
basan en la medicin de la interaccin entre un tipo de radiacin electromagntica y los
tomos o molculas la carga de las molculas por espectrometra de masas, entre otras.
En esta experiencia veremos los principios generales de la radiacin electromagntica como
tambin sus principales propiedades, que nos ayudaran para la determinacin de una
concentracin del analito en una muestra dada.

2. Objetivos
2.1. Objetivo General
El objetivo general de esta prctica es:

Realizar la determinacin fotomtrica del hierro.

2.2. Objetivos Especficos

Los objetivos especficos de la prctica son:

Conocer un espectrofotmetro.
Conocer el espectro electromagntico.
Conocer las diferencias entre absorcin y transmitancia.
Aplicacin de la ley de Lambert y Beer.
Relacionar la absorbancia con la concentracin.

3. Fundamento terico

Introduccin a los mtodos espectromtricos

Los mtodos espectromtricos son un amplio grupo de mtodos analticos que se basan en las
espectroscopias atmica y molecular. La espectroscopia es un trmino general para la ciencia
que trata de las distintas interacciones de la radicacin con la materia. Histricamente, las
interacciones de inters se producan entre la radiacin electromagntica y la materia, sin
embargo, ahora el termino espectroscopia se ha ampliado para incluir las interacciones entre la
materia y otras formas de materia. La espectrometra y los mtodos espectromtricos hacen
referencia a la medida de la intensidad de la radiacin mediante un detector fotoelctrico o con
otro tipo de dispositivo.
Los mtodos espectromtricos ms ampliamente utilizados son los relacionados con la
radiacin electromagntica, que es un tipo de energa que toma varias formas, de las cuales las
ms fcilmente reconocibles son la luz y el calor radiante. Sus manifestaciones ms
difcilmente reconocibles incluyen los rayos gamma y los rayos X, as como las radiaciones
ultravioleta, de microondas y de radiofrecuencia.
Propiedades generales de la radiacin electromagntica (REM).
Muchas de las propiedades de la REM se explican adecuadamente con un modelo clsico de
onda sinusoidal, que utiliza parmetros como la longitud de onda, la frecuencia, la velocidad y
la amplitud. A diferencia de otros fenmenos ondulatorios, como el sonido, la REM no
necesita un medio de apoyo para transmitirse y, por tanto, se propaga fcilmente a travs del
vacio.
El modelo ondulatorio falla al intentar explicar fenmenos asociados con la absorcin o la
emisin de energa radiante. Para comprender estos procesos, hay que acudir a un modelo
corpuscular en el que la REM se contempla como un flujo de partculas discretas, o paquetes
ondulatorios, de energa denominados fotones, en los que la energa de un fotn es
proporcional a la frecuencia de la radicacin. Este doble punto de vista de la radiacin como
partcula y como onda no es mutuamente excluyente, sino complementario. De hecho la
dualidad onda-corpsculo se aplica al comportamiento de haces de electrones, y se racionaliza
completamente por medio de la mecnica ondulatoria.
Propiedades de onda
Para entender los fenmenos tales como la reflexin, refraccin, interferencia y difraccin, la
REM puede presentarse como oscilaciones sinusoidales perpendiculares de campos
magnticos y elctricos. El campo elctrico de una onda sinusoidal que se mueve con una sola
frecuencia en el espacio y el tiempo, este campo se representa como un vector cuya longitud
es proporcional a la fuerza del campo.
La amplitud de la onda sinusoidal se define como la longitud del vector del campo elctrico en
el punto mximo de la onda. Ele tiempo necesario para el paso de los sucesivos mximos o

mnimos por un punto fijo del espacio se denomina el periodo p de la onda. La frecuencia v es
el nmero de oscilaciones del vector del ampo por unidad de tiempo y es igual a 1/p.
La potencia P de la radiacin es la energa en watts (W) del haz que llega a un rea dada por
unidad de tiempo.
Propiedades de la partcula de la luz: los fotones
En muchos tipos de interaccin de la REM con la materia, es mas adecuado considerar a la luz
como paquetes de fotones o cuantos. La energa de un fotn puede relacionarse con la longitud
de onda, frecuencia y nmero de ondas mediante la ecuacin.

Donde h es la constante de Planck (6.63*10-34 J s).

Qu mediciones hacen los espectroscopistas?
Los espectroscopistas utilizan las interacciones de la radiacin con la materia a fin de obtener
informacin de una muestra. Algunos de los elementos fueron descubiertos mediante el
anlisis espectroscpico. La muestra se estimula de alguna forma, ya sea aplicando energa en
forma de calor, de electricidad, de luz, de partculas o sometindola a alguna reaccin qumica.
Antes de aplicar cualquiera de estos estmulos, el analito esta predominantemente en su nivel
ms bajo de energa o estado fundamental. El estimulo induce una transicin de algunas
especias del analito a un estado de energa superior o estado excitado. Para obtener
informacin sobre el analito, se mide la REM emitida cuando este regresa a su estado basal, o
puede medirse la cantidad de REM absorbida como consecuencia de la excitacin.
Absorcin de la luz
Cada especie molecular tiene la capacidad de absorber su propia frecuencia caracterstica de la
REM. Este proceso transfiere energa a la molcula y provoca una disminucin en la
intensidad de la REM incidente. Por consiguiente, la absorcin de la radiacin atena el rayo
incidente de acuerdo con la ley de la absorcin que se describe a continuacin.
Ley de la absorcin
La ley de la absorcin, tambin conocida como ley de Lambert y Beer, o simplemente ley de
Beer, da informacin cuantitativa de cmo es que la atenuacin de la radiacin depende de la
concentracin de las molculas que la absorben y de la distancia que recorre el rayo en el
medio absorbente. Cuando la luz atraviesa una solucin de analito, la intensidad de la
radiacin disminuye como consecuencia de la excitacin del analito. Cuanto mayor sea la
trayectoria del rayo en la solucin del analito de una concentracin dada, habr mas especies
que absorban la radiacin y la atenuacin ser mayor.

La atenuacin que experimenta una haz paralelo de radiacin monocromtica cuando pasa por
una solucin absorbente de espesor b en cm y concentracin c de moles por litros. Debido a
las interacciones que suceden entre los fotones y las partculas absorbentes la energa radiante
del rayo disminuye desde P0 hasta P. la transmitancia T de la solucin, es la fraccin de
radiacin incidente que transmite la solucin. La transmitancia suele expresarse como
porcentaje o porcentaje de transmitancia.

La absorbancia A de una solucin esta relacionada con la transmitancia en forma logartmica.

Obsrvese que el aumento en la absorbancia de una solucin se acompaa de una disminucin
en la transmitancia. Los primeros instrumentos venan equipados con escalas lineales de
transmitancia; los instrumentos modernos traen escalas lineales de absorbancia y algunos
tienen una computadora que calcula la absorbancia a partir de las mediciones.

Ley de Beer
De acuerdo con la ley de Beer, la absorbancia esta relacionada linealmente con la
concentracin (c) de las especies absorbentes y con la longitud de la trayectoria de la radiacin
(b) en el medio absorbente; y se expresa mediante la siguiente ecuacin:

En este caso,

es una constante de proporcionalidad llamada absortividad. Dado que la

absorbancia es una cantidad adimensional, la absortividad debe tener unidades que cancelen
las unidades de b y c.
Limitaciones de la ley de Beer
La relacin lineal entre la absorbancia y la longitud de la trayectoria de la radiacin a una
concentracin fija, es una generalizacin para la que hay pocas excepciones. Por lo contrario,
es muy frecuente encontrar desviaciones a la proporcionalidad directa entre la absorbancia y
concentracin (cuando b es constante). Algunas de estas desviaciones, denominadas
desviaciones reales de esta ley. A veces se observan desviaciones debidas a la forma en que se
mide la absorbancia (desviaciones instrumentales) o como resultado de los cambios qumicos
asociados a las variaciones de concentracin (desviaciones qumicas).
Limitaciones reales de la ley de Beer

La ley de Beer solo describe el comportamiento de la absorcin en soluciones diluidas y, en

este sentido, es una ley limitada. Con concentraciones superiores a 0.01M, la distancia
promedio entre los iones o molculas de las especies absorbentes disminuyen al punto en que
cada partcula afecta la distribucin de carga (y, por tanto, la absorcin) de las partculas
vecinas. Como el grado de interaccin depende de la concentracin, cuando este fenmeno se
presenta se observan desviaciones de la relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin.
Esto tambin se observa con soluciones diluidas de sustancias absorbentes que contienen
concentraciones altas de otras especies, electrolitos en particular. Cuando los iones estn muy
cerca del analito, alteran si absortividad molar por interaccin electrosttica, ocasionando
desviaciones de la ley de Beer.
Desviaciones Qumicas
Las desviaciones de la ley de Beer se presentan cuando las especies absorbentes experimentan
asociacin, disociacin o reaccionan con el disolvente formando productos que tienen una
absorcin distinta de la del analito. La magnitud de estas desviaciones se puede predecir
conociendo las absortividades molares de las especies absorbentes y las constantes de
equilibrio de las reacciones.
Desviaciones debidas a los instrumentos
La necesidad de contar con fuentes de radiacin monocromtica y evitar la radiacin parasita
son algunos factores prcticos que restringen la aplicacin de la ley de Beer. Estrictamente,
esta ley se aplica solo cuando las mediciones se hacen con una fuente de radiacin
monocromtica. Sin embargo, en la prctica, se emplean las fuentes de radiacin policromtica
junto con una rejilla o un filtro para aislar una banda de longitudes de onda que sea ms o
menos simtrica en torno a la longitud de onda que se va a utilizar. Para evitar estas
desviaciones, es conveniente seleccionar una banda de longitudes de onda cercana a la
longitud de onda donde la absorcin sea mxima y la absortividad del analito cambie my poco
con la longitud de onda.
La radiacin parasita se define como la radiacin debida al instrumento y que esta fuera de la
banda de longitud de onda seleccionada para hacer las mediciones. Este tipo de radiacin
proviene a menudo de la dispersin y reflexin de las superficies de las rejillas, los lentes o
espejos, filtros y ventanas.
Componentes de los instrumentos para espectroscopia ptica
Los instrumentos para las espectroscopias ultravioleta e infrarroja tienen las suficientes
caractersticas comunes con los diseados para la regin visible que habitualmente se
denominan instrumentos pticos, aunque de hecho, el ojo humano no es sensible ni a la
radiacin ultravioleta ni a la infrarroja.
Diseos generales de instrumentos pticos.

Los mtodos espectroscpicos pticos se fundamentan en seis fenmenos: (1) absorcin, (2)
fluorescencia, (3) fosforescencia, (4) dispersin, (5) emisin y (6) quimioluminiscencia. Para
medir cada fenmeno la mayora de los componentes bsicos de los instrumentos son muy
parecidos, aunque difieren algo en su configuracin. Adems, las propiedades necesarias de
estos componentes son las mismas independientemente de si se aplican a la regin ultravioleta,
visible o infrarroja del espectro.
Los instrumentos espectroscpicos caractersticos incluyen cinco componentes: (1) una fuente
estable de energa radiante, (2) un recipiente transparente para contener la muestra, (3) un
dispositivo que aisl una regin restringida del espectro para la medida, (4) un detector de
radiacin, que convierta la energa radiante en una seal utilizable (en general elctrica), y (5)
un sistema de procesamiento y lectura de la seal, que visualice la seal detectada en una
escala de medida, en una pantalla de osciloscopio, en un medidor digital o en un registrador.
4. Procedimiento Experimental
4.1. Materiales, Equipos y Reactivos

Vaso de precipitado de 250mL.

Matraces Erlenmeyer de 250mL.
Matraz aforado de 100mL
Matraces volumtricos de 50mL.
Matraz volumtrico de 1000mL.
Pipeta volumtrica de 10mL.
Pipeta graduada de 5mL.
Espectrofotmetro.
1.10 fenantrolina.
Cloruro de hidroxilamina.
Acetato de sodio.
Sulfato de amonio y hierro(II).
Acido sulfrico concentrado.

4.2. Procedimiento
Preparar las siguientes soluciones:
1. Disuelva 0.1g de 1,10 fenantrolina monohidratada en 100mL de agua destilada, si es
necesario caliente para disolverla.
2. Disuelva 10g de cloruro de hidroxilamina en 100mL de agua.
3. Disuelva 10g. de acetato de sodio en 100mL de agua destilada.
4. Pese con exactitud 0.0702 g de sulfato de amonio y hierro II puro, disulvalos en agua
y transfiera la solucin a un matraz volumtrico de 100mL. Agregue 2.5mL de acido
sulfrico concentrado y diluya la solucin hasta la marca. Calcule la concentracin de
la solucin en miligramos de hierro por mililitro.

Pipetee en 5 matraces volumtricos de 50mL 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 y 3.0mL de la solucin estndar
de hierro. En otro matraz coloque 50mL de agua destilada para que sirva de blanco y en otro
matraz coloque un volumen medido de la muestra desconocida (ver nota). A cada matraz
adicione 1mL de la solucin de hidroxilamina, 5mL de la solucin de fanantrolina y 4mL de
acetato de sodio. Luego diluya todas las soluciones hasta la marca de 50mL y deje reposar
durante 10 minutos.
Empleando el blanco de referencia y cualquiera de las soluciones que preparo, mida la
absorbancia a diferentes longitudes de onda en el, intervalo de 400 a 600nm. Tome lecturas
cada 20nm, excepto en la regin de la mxima absorbancia donde se lee en intervalos de 5nm.
Grafique la absorbancia contra longitud de onda para obtener la curva de absorcin.
Seleccione la longitud de onda adecuada (mximo de absorcin) para graficar la curva de
calibracin con las soluciones estndar (absorbancias versus concentraciones) y mediante esta
curva determinar la concentracin del hierro de la solucin problema.
Nota: se puede utilizar soluciones de concentracin conocida como muestras problemas.
Consulte con el instructor respecto al tamao de las muestras que se debe utilizar. Si se va
utilizar agua ordinaria, asegrese que sea incolora y libre de turbidez.
5. Datos, Clculos y Resultados y Discusin
Para esta prctica utilizamos el espectrofotmetro que es un equipo que nos ayudara a
determinar y saber la concentracin de una muestra desconocida, pero antes de determinar la
concentracin tenemos que realizar una calibracin del equipo, para as saber en que longitud
de onda es que se debe de trabajar, debemos aclarar este equipo emite seales de transmitancia
y debemos de realizar los clculos en base a la absorbancia es por eso que se utilizara la ley de
Lambert y Beer, para as calcular la absorbancia. A continuacin mostraremos la reaccin que
ocurre para determinar de la mejor manera el hierro es la siguiente:
El hierro debe estar en el estado de oxidacin de +2 para formar el complejo. Por tanto se debe
utilizar un compuesto reductor como el cloruro de hidroxilamina para garantizar la formacin
del color. La reaccin es:

El pH se ajusta a un valor de 6 y 9 agregando acetato de sodio.

La coloracin que tiene la solucin que contiene el hierro que queremos determinar es de color
anaranjado.
Para realizar la calibracin utilizamos como referencia la muestra de la solucin de hierro que
tiene mayor concentracin, es decir la de 7ppm de hierro, pero al utilizar esta como referencia
no tuvimos resultados muy buenos, en la calibracin del equipo, es por eso que utilizaremos la

muestra de 5ppm de referencia para calibrar el equipo. En la siguiente tabla tenemos la

calibracin del equipo con la muestra haciendo variar la longitud de onda, donde el equipo nos
dio como resultado la transmitancia pero como tenemos que trabajar en absorbancia utilizaros
la siguiente ecuacin y as determinar la absorbancia.

Longitud
onda

de Transmitancia
Absorbancia
(%)
400
97
0,01
420
91
0,04
440
80,5
0,09
460
64
0,19
480
45,5
0,34
500
23
0,64
510
15
0,82
515
14
0,85
520
12,5
0,90
525
16
0,80
530
23
0,64
540
44
0,36
560
85
0,07
Ahora mostraremos la grafica de absorbancia vs. Longitud de onda

La longitud de onda en la cual se trabajara es de 520 ya que es en esa longitud que se tiene la
mxima transmitancia que es lo mismo decir la mxima absorbancia, a continuacin con la
longitud de onda a trabajar determinaremos la absorbancia de distintos tipos de
concentraciones, de esa forma tendremos una relacin lineal de la absorbancia, para luego
poder determinar la concentracin de la muestra desconocida.

C ppm Transmitancia Absorbancia

Fe
0
100
0,00
1
82
0,09
2
61
0,21
4
31
0,51
5
18
0,74
X
2
1,70
Con estos datos podemos construir una recta lineal para luego poder determinar la
concentracin de muestra problema.

La ecuacin de la curva linealizada es la siguiente

Con esta ecuacin podremos calcular la concentracin reemplazando la absorbancia que se

determino de la muestra problema.
Por lo que la concentracin de la muestra es:

6. Observaciones, Conclusiones y Recomendacin

Observaciones
Las observaciones de la prctica son las siguientes:

En la preparacin de las muestras se tiene que tener la mejor precisin y exactitud

posible, ya que de ello depende que se tenga buenos resultados.
La solucin de muestras que tenan contenidas las concentraciones de Fe eran de color
anaranjado rojizo, color tpico del hierro.
El uso del espectrofotmetro es bastante sencillo, la parte clave es la calibracin que se
debe realizar para saber a que longitud de onda se debe trabajar, se debe tener cuidado
siempre cerrar los cubculos donde se colocan la referencia y la muestra.
Tanto las muestras como la referencia estn contenidos en cubetas de vidrio pyrex eso
por que se trabaja en un espectro dentro del rango visible, estas cubetas se deben
enjuagar bien antes de dar uso, como tambin se debe de ambientar siempre que sea
posible.

Conclusiones
Las conclusiones de la prctica son:

Conocimos que un espectrofotmetro es un aparato que sirve para medir la intensidad

de luz que atraviesa una muestra de solucin del analito que se desea determinar, los
espectrofotmetros comnmente trabajan a en rangos de espectros de la luz ultravioleta
y el visible, ya que para espectros infrarrojos se deben utilizar otros equipos mas
sofisticados.
Un espectro electromagntico es una grafica de la potencia o intensidad de radiacin
electromagntica en funcin de la longitud de onda o la frecuencia. La potencia puede
estar expresada en absorbancia o transmitancia.
La absorbancia en la capacidad de incorporarse o asimilarse dentro de otra, mientras
que a transmitancia es la capacidad que tiene un elemento de dejar pasar una cantidad
de energa a travs de ella, es decir, la absorcin se da en la fuente de energia, mientras
que la transmisin se refiere al elemento o analito a estudiar.
La aplicacin de la ley de Beer es mayormente para saber la absortividades de especies
de concentraciones conocidas y asi poder realizar una relacin de lineal o el que mejor
describa el comportamiento de la absorcin y la concentracin de muestras, para asi
poder determinar la concentracin de un analito de una muestra problema.
La absorbancia esta en funcin a la concentracin del analito, normalmente en relacin
lineal, pero si existiesen interferencias este comportamiento seria algo logartmico o
parablico.

Recomendaciones
Las recomendaciones de la prctica son las siguientes:

Como mencionamos antes la preparacin de las concentraciones de las muestras para

realizar la curva de absrobancia vs concentracin, es fundamental ya que si no se

preparan bien las muestras tal vez no se logre tener una lineal recta al relacionar las
muestras.
El manejo del espectrofotmetro es sencillo y simple sin embargo al momento de
realizar la curva de calibracin se tienen que tener algo de paciencia y tranquilidad
para poder tomar los datos, si es necesario se debe repetir las determinaciones en cada
longitud de onda deseada.
Se tiene que tener cuidado con este aparato (espectrofotmetro) ya que es bastante caro
y sensible, mas que todo con sus recipientes que son especiales.
7. Bibliografa
1. Qumica Analtica, Skoog/West/Holler/Crouch, Mc Graw Hill, Mexico (2001).
2. Anlisis Qumico Cuantitativo, Fischer Robert B, Peters Dennis G, Editorial
Interamericana, Mxico (1970).
3. Anlisis Qumico Cuantitativo, Ayres Gilbert, Editorial Harla S.A. Latinoamrica
(1975).
4. Laboratorio Qumica Analtica Cuantitativa, Hamel Fonseca Jaime, Texto Gua de
Laboratorio (2007) UMSS.
8. Cuestionario
Preguntas y Ejercicios Previos
1. De un concepto de espectrofotometra.
Son las tcnicas, mtodos de medicin de absorcin o emisin de radiacin ultravioleta,
visible e infrarroja, puede determinar analitos de forma cualitativa como cuantitativa.
2. Graficar el espectro electromagntico.

3. De un concepto de absortividad molar.

Constante de proporcionalidad en la ecuacin de la ley de Lambert y Beer, A=abc, donde A es
la absorbancia, b la trayectoria de la radiacin, y c la concentracin de las especies que
absorben la radiacin.

4. De un concepto de radiacin monocromtica.

En situacin ideal, la radiacin electromagntica que consta de una sola longitud de onda; en
la prctica, una banda muy estrecha de longitudes de onda.
5. Un compuesto cuyo peso molecular es 100 tiene una absortividad molar de 1*10 5.

Cuantos gramos de este compuesto se debe disolver en 1 litro de solucin para que
despus de diluir 200 veces la solucin tenga una absorbancia de 0.5 en una celda
de 1.0 cm de espesor.
Primero hallaremos la concentracin que tiene el compuesto en cuestin de la siguiente forma

La masa se calcula de la siguiente forma:

Por lo que se debe pesar 0.1 g del compuesto.

Conclusiones
1. Explique el mtodo espectrofotomtrico y su aplicacin a los anlisis
cuantitativos.
Los mtodos espectromtricos son un amplio grupo de mtodos analticos que se basan en las
espectroscopias atmica y molecular. La espectroscopia es un trmino general para la ciencia
que trata de las distintas interacciones de la radicacin con la materia. Histricamente, las
interacciones de inters se producan entre la radiacin electromagntica y la materia, sin
embargo, ahora el termino espectroscopia se ha ampliado para incluir las interacciones entre la
materia y otras formas de materia. La espectrometra y los mtodos espectromtricos hacen
referencia a la medida de la intensidad de la radiacin mediante un detector fotoelctrico o con
otro tipo de dispositivo.
Los espectroscopistas utilizan las interacciones de la radiacin con la materia a fin de obtener
informacin de una muestra. Algunos de los elementos fueron descubiertos mediante el
anlisis espectroscpico. La muestra se estimula de alguna forma, ya sea aplicando energa en
forma de calor, de electricidad, de luz, de partculas o sometindola a alguna reaccin qumica.
Antes de aplicar cualquiera de estos estmulos, el analito esta predominantemente en su nivel
ms bajo de energa o estado fundamental. El estimulo induce una transicin de algunas
especias del analito a un estado de energa superior o estado excitado. Para obtener

informacin sobre el analito, se mide la REM emitida cuando este regresa a su estado basal, o
puede medirse la cantidad de REM absorbida como consecuencia de la excitacin.
Se puede decir que estos mtodos se basan en la ley de la absorcin, tambin conocida como
ley de Lambert y Beer, o simplemente ley de Beer, da informacin cuantitativa de cmo es que
la atenuacin de la radiacin depende de la concentracin de las molculas que la absorben y
de la distancia que recorre el rayo en el medio absorbente. Cuando la luz atraviesa una
solucin de analito, la intensidad de la radiacin disminuye como consecuencia de la
excitacin del analito. Cuanto mayor sea la trayectoria del rayo en la solucin del analito de
una concentracin dada, habr mas especies que absorban la radiacin y la atenuacin ser
mayor
2. Indique las limitaciones e interferencias de este mtodo.
Desviaciones Qumicas, las desviaciones de la ley de Beer se presentan cuando las especies
absorbentes experimentan asociacin, disociacin o reaccionan con el disolvente formando
productos que tienen una absorcin distinta de la del analito. La magnitud de estas
desviaciones se puede predecir conociendo las absortividades molares de las especies
absorbentes y las constantes de equilibrio de las reacciones.
Desviaciones debidas a los instrumentos, la necesidad de contar con fuentes de radiacin
monocromtica y evitar la radiacin parasita son algunos factores prcticos que restringen la
aplicacin de la ley de Beer. Estrictamente, esta ley se aplica solo cuando las mediciones se
hacen con una fuente de radiacin monocromtica. Sin embargo, en la prctica, se emplean las
fuentes de radiacin policromtica junto con una rejilla o un filtro para aislar una banda de
longitudes de onda que sea ms o menos simtrica en torno a la longitud de onda que se va a
utilizar. Para evitar estas desviaciones, es conveniente seleccionar una banda de longitudes de
onda cercana a la longitud de onda donde la absorcin sea mxima y la absortividad del
analito cambie my poco con la longitud de onda.
La radiacin parasita se define como la radiacin debida al instrumento y que esta fuera de la
banda de longitud de onda seleccionada para hacer las mediciones. Este tipo de radiacin
proviene a menudo de la dispersin y reflexin de las superficies de las rejillas, los lentes o
espejos, filtros y ventanas