Manual de Clases
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INMUNOHEMATOLOGÍA
LICENCIATURA EN LABORATORIO CLINICO
Esperando que el viaje que emprenderemos juntos sea una buena experiencia
y que apliquen sus conocimientos técnicos y éticos para el bien de la salud de
quien lo necesite.
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1 ASPECTOS BÁSICOS DE HEMATOLOGÍA
LA SANGRE Y SUS COMPONENTES
La Sangre
Sustancia líquida que circula por las arterias y las venas del organismo.
Tejido especializado
La sangre es roja brillante o escarlata cuando ha sido oxigenada en los
pulmones y pasa a las arterias; adquiere una tonalidad más azulada
cuando ha cedido su oxígeno para nutrir los tejidos del organismo y
regresa a los pulmones a través de las venas y de los pequeños vasos
denominados capilares.
Sus dos componentes fundamentales:
paquete celular
plasma
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Neutrófilos: fagocitan material extraño o células muertas o dañadas en
los lugares de inflamación, activan mecanismos bactericidas y producen
mediadores de la quimiotaxis.
Eosinófilos: tienen todas las funciones de un neutrófilo y son importantes
en la defensa del huésped contra los parásitos (cubiertos de anticuerpo).
También regulan las reacciones de hipersensibilidad inmediatas.
Basófilos: representan la fuente de la mayor parte de la histamina en el
cuerpo humano y pueden estar cubiertos de IgE y liberar histamina:
median las reacciones de hipersensibilidad de tipo I. Los mastocitos de los
tejidos son similares a los basófilos de la sangre.
Monocitos: entran en los tejidos para convertirse en macrófagos. Las
células derivadas de los monocitos se encuentran en todo el cuerpo
formando parte del sistema reticuloendotelial. Fagocitan microorganismos
patógenos y restos celulares y producen varias citocinas. También
procesan y presentan antígenos a los linfocitos como parte de la respuesta
inmunitaria adaptativa. Células mononucleares muy especializadas,
llamadas células dendríticas, son excelentes presentadoras de antígenos
a los linfocitos T.
Linfocitos B: como células plasmáticas son responsables de la
producción de inmunoglobulinas. También pueden convertirse en
linfocitos B memoria.
Linfocitos T: los linfocitos T CD8 citotóxicos matan células infectadas por
microorganismos intracelulares. Los linfocitos T CD4 cooperadores
producen citocinas para activar a los linfocitos B o los macrófagos.
Linfocitos citolíticos espontáneos (NK): matan células que detectan
como extrañas bien directamente o a través de una citotoxicidad celular
dependiente de anticuerpos.
Plaquetas: fragmentos de megacariocitos implicados en la respuesta
hemostática a la lesión vascular mediante la adhesión al tejido conjuntivo
subendotelial.
Hematopoyesis
Es la formación y desarrollo de células sanguíneas. El sistema hematopoyético
está compuesto de la médula ósea, el bazo, el hígado, los ganglios linfáticos
y el timo. Este proceso depende de células progenitoras, que se dividen para
dejar una población de reserva y células comprometidas en la diferenciación
en varias líneas de célula sanguíneas. La diferenciación se produce a lo largo
de una de dos líneas:
1. Linfoide —> linfocitos B y T y linfocitos NK.
2. No linfoide (mieloide) eritrocitos, neutrófilos, basófilos, eosinófilos,
monocitos y megacariocitos.
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Descripción de los componentes sanguíneos:
La sangre está formada por un líquido de composición compleja y variable
conocida con el nombre de PLASMA. Posee además elementos celulares
(elementos figurados) que se encuentran suspendidos en ese líquido, siendo
ellos; los eritrocitos (hematíes o glóbulos rojos), los leucocitos (glóbulos
blancos) y las plaquetas (trombocitos).
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La parte líquida de la sangre está compuesta por un 90% por agua
conteniendo además proteínas, carbohidratos, sustancias lipoides,
electrolitos, aminoácidos, cationes, urea, ácido úrico, etc.
I- Hematíes, eritrocitos o glóbulos rojos.
Estructura del eritrocito Los eritrocitos son células rojas maduras con una vida
media de 120 días.
• No están nucleados ni contienen organelas.
• Contienen millones de moléculas de hemoglobina, un pigmento transportador
de oxígeno que da a la sangre su color rojo.
• Tienen una forma discoide bicóncava característica en las extensiones de
sangre. Esto ofrece una superficie un 20-30% mayor que una esfera con el
mismo volumen.
• Son muy flexibles y se deforman con facilidad, lo que les permite pasar a
través de vasos de la microvasculatura.
Son discos bicóncavos, (células) de 6 a 8 micras de diámetro, su color se debe
a la hemoglobina.
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esta función. También desempeñan una función importante en la
amortiguación del pH.
El contenido de oxígeno de la sangre depende de tres factores:
1. La concentración de hemoglobina.
2. La afinidad de la hemoglobina por el oxígeno
3. La solubilidad del oxígeno en la sangre (efecto pequeño).
El dióxido de carbono se transporta en la sangre de tres formas
1. 90% como bicarbonato.
2. 5% en forma de compuestos carbamino (el C02 se combina con los grupos
amino de las proteínas plasmáticas y de la hemoglobina).
3. 5% en solución física (el C02 es unas 20 veces más soluble en la sangre
que el oxígeno).
Los grandes depósitos de CO2 en forma de bicarbonato son un amortiguador
importante del pH en la sangre. Las concentraciones de CO2, están
estrechamente reguladas por los cambios en la ventilación.
Equilibrio electrolítico Los iones de cloro, potasio e hidrógeno se transportan a
través de la membrana del eritrocito. Una consecuencia de esto es que, en la
sangre almacenada para la transfusión, la concentración extracelular de
potasio es bastante alta debido a la interrupción del transporte activo. En las
transfusiones masivas existe la posibilidad de una hiperpotasemia en algunos
casos.
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Función Los linfocitos en la sangre están simplemente en tránsito entre la
médula ósea y los tejidos linfáticos, que es donde actúan. Producen
anticuerpos y matan a células extrañas y alteradas por virus.
Las células de la línea blanca (Leucocitos) intervienen en diversas funciones
orgánicas de defensa corporal y de reparación contra diversos agentes
nocivos.
Sus valores de referencia son de 5,000 a 10,000/ mm3
Aumento de la cantidad de glóbulos blancos=Leucocitosis
Disminución de la cantidad de glóbulos blancos = Leucopenia.
Los glóbulos blancos se dividen en:
1- Granulocitos o polimorfonucleares
2- Agranulocitos o mononucleares.
1- Granulocitos o polimorfonucleares.
Poseen gránulos en el citoplasma y tienen su núcleo de forma irregular a veces
con varios lóbulos.
Su valor fundamental se refiere a la defensa contra agentes nocivos la
fagocitosis es uno de los principales mecanismos de defensa.
Los tres tipos de células de este grupo son:
a) Neutrófilos
b) Eosinófilos
c) Basófilos
a) NEUTRÓFILOS:
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El citoplasma de estas células es abundante, ligeramente rosado o acidófilo
poseen gránulos finos, el núcleo posee de 2 a 5 lóbulos por lo que se llaman
polimorfonucleares.
Con colorante de Wright, la cromatina del núcleo toma color púrpura. En la
fórmula diferencial observada en el microscopio a través de un frotis coloreado
se encuentran en una proporción del 50 a 70% con relación a todos los
glóbulos blancos.
En algunos estados patológicos el núcleo posee más lóbulos.
Neutropenia - Disminución en el número de neutrófilos
Neutrofilia – Aumento en el número de neutrófilos
b) EOSINÓFILOS.
Aspecto y estructura Los eosinófilos, son similares a los neutrófilos, pero son
más grandes. Su núcleo tiene forma de salchicha y suele ser bilobulado.
Tienen un aparato de Golgi pequeño central y un retículo endoplásmico rugoso
limitado y mitocondrias. Los eosinófilos contienen gránulos específicos
grandes y ovoideos y gránulos azurófilos. Los gránulos tienen un centro
cristaloide que contiene proteína básica mayor, proteína catiónica del
eosinófilo y neurotoxina derivada del eosinófilo. El exterior del granulo contiene
varias enzimas, incluidas histaminasa, peroxidasa y catepsina.
Localización Se encuentran sobre todo en los tejidos, y sólo pasan menos de
1 hora en la sangre.
Función Su principal función es combatir la infección parasitaria. Los
eosinófilos se observan en los procesos alérgicos y malignos de ciertos tipos.
También fagocitan complejos antígeno-anticuerpo.
Su estructura es semejante a los neutrófilos, se caracterizan porque los
gránulos de su citoplasma son gruesos, redondos y toman un color
anaranjado, tienen afinidad por los colorantes ácidos.
Valores normales en la forma diferencial: 2 a 4%.
Su aumento se conoce con el nombre de Eosinofilia.
c) BASÓFILOS:
Aspecto y estructura Los basófilos (figs. 4.8 y 4.9) tienen 14-16 (im de diámetro
con un núcleo bilobulado en forma de «S». Se denominan así por sus gránulos
citoplásmicos específicos muy basófilos, pero también contienen gránulos
azurófilos. Los gránulos específicos (0,5 ^m de diámetro) son estructuras
grandes ovales o redondas rodeadas de membrana. Empujan la membrana
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plasmática dando lugar a un «perímetro rugoso». Los gránulos contienen
heparina, histamina, factores quimiotácticos y peroxidasa.
Localización Los basófilos maduran en la médula a lo largo de 2-7 días. Se
encuentran en la sangre periférica y duran hasta 2 semanas.
Función Los basófilos tienen una función muy parecida a los mas- tocitos,
aunque son de dos estirpes diferentes. Al contrario que los basófilos, los
mastocitos se localizan en los tejidos. Mediante interacciones con la
inmunoglobulina E (IgE), los basófilos producen respuestas inflamatorias
locales. Los basófilos no se conocen muy bien y tampoco está clara la
extensión con la que participan en las reacciones inmunes in vivo. Se cree que
median las reacciones de hipersensibilidad inmediatas (tipo I) como el asma y
la anafilaxia , junto a los mastocitos. Estudios recientes realizados en ratones
han demostrado que los basófilos son importantes en una nueva vía de la
anafilaxia en la que participan la IgG y el factor activador de las plaquetas
(PAF).
Son células de 7 a 9 micras de diámetro en su citoplasma posee gránulos de
color púrpura o negro azulado, tienen afinidad a los colorantes básicos y son
metacromáticos, son difíciles de precisar ya que constituyen del 0 al 1% en la
fórmula diferencial del total de glóbulos blancos.
2- Agranulocitos o mononucleares.
Poseen citoplasma homogéneo y núcleo grande. Entre este tipo de células
encontramos dos clases:
A. Linfocitos
B. Monocitos
A. Linfocitos:
Son células pequeñas mononucleares de 6-10 micras, poseen un solo núcleo,
por lo general redondo.
En su mayor parte la producción de linfocitos en el tejido linfoide periférico se
produce como consecuencia de una estimulación antigénica. La recirculación
de linfocitos probablemente tenga importancia para la inducción de respuestas
inmunes.
Su valor normal en la fórmula diferencial: 20-40% (en adultos).
Aumento en el número de linfocitos = Linfocitosis.
Disminución en el número de linfocitos = Linfocitopenia.
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B. Monocitos:
Aspecto y estructura Los monocitos tienden a ser las células circulantes
sanguíneas de mayor tamaño. Tienen un núcleo grande arriñonado. A menudo
hay nucléolos, lo que da al núcleo un aspecto «moteado». El citoplasma
contiene muchos lisosomas y espacios similares a vacuolas que producen un
aspecto en «vidrio deslustrado».
Hay microtúbulos, microfilamentos, vesículas pinocíticas y filamentos o
seudópodos alrededor del borde de la célula.
Localización Los monocitos pasan sólo unos días en la sangre antes de migrar
a los tejidos, donde se diferencian hasta convertirse en macrófagos. Los
macrófagos sobreviven desde varios meses hasta años en el tejido conjuntivo.
Función Los monocitos forman el sistema reticuloendotelial, que participa
sobre todo en la fagocitosis. Destruyen células muertas e ingieren material
extraño. Los antígenos se pro- cesan y pueden presentarse a los linfocitos
para iniciar una respuesta inmunitaria adaptativa. Los macrófagos también
tienen una función proinflamatoria, con la liberación de diversas citocinas.
Los monocitos o macrófagos mononucleares son, las células más grandes de
la sangre. Su diámetro es de 2 a 3 veces mayor que del glóbulo rojo (de 14 a
20 micras) contiene un solo núcleo en forma de herradura y en ocasiones
redondo u ovalado.
Su valor normal en la fórmula es de 2 a 8%
3- Plaquetas
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2 ASPECTOS INMUNOLÓGICOS
APLICADOS AL BANCO DE
SANGRE.
El sistema inmunológico
Conjunto de moléculas, células, tejidos y órganos; cuya función es reconocer,
inactivar y/o eliminar al inductor.
La respuesta es colectiva y coordinada de todos los componentes del sistema
inmunológico y esto se conoce como respuesta inmunológica. (Respuesta
inmune).
La primera línea de defensa de nuestro organismo es mecánica, y está
representada por la piel y las membranas mucosas que revisten el tracto
digestivo y respiratorio. La mayoría de los microorganismos son destruidos
antes de que consigan invadir los tejidos del cuerpo. Estas superficies de
defensa, aunque eficaces, son eventualmente lesionadas, lo que permite la
penetración de patógenos u otros elementos extraños en el organismo. A partir
de entonces, se desarrolla una respuesta inmune en función del tipo de agente
invasor. Los diferentes tipos de respuestas inmunitarias se pueden clasificar
en dos categorías:
1. la respuesta inmune innata (no adaptativa)
2. la respuesta inmune adaptativa.
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tienen la misma función de eliminar los restos de células viejas, como los
glóbulos rojos.
Los macrófagos que fagocitan y digieren microorganismos y células tumorales
pueden dividirse y sobrevivir por meses en el tejido conjuntivo del órgano.
Después de la ingestión de material extraño al organismo, secretan citoquinas
que atraen las células del sistema inmune a los sitios de inflamación. También
son células muy eficientes en la presentación de antígenos a los linfocitos T
Las células dendríticas (DC) son fagocíticas, también derivadas de monocitos
circulantes diferenciados. Son particularmente importantes en la activación de
linfocitos T inmaduros, a diferencia de los macrófagos y linfocitos B que activan
células de memoria.
Los neutrófilos polimorfonucleares son leucocitos, que como los macrófagos
migran de la sangre a los tejidos donde fagocitan y digieren microorganismos
invasores. Son, sin embargo, células de vida corta que mueren conjuntamente
con el contenido fagocitado.
Las células “NK” son un tipo especial de linfocitos que no expresan receptores
de antígenos en sus membranas. No atacan directamente los
microorganismos invasores, pero destruyen células del organismo infecta- das
por virus. Estas células producen proteínas especiales llamadas “perforinas”,
las cuales son capaces de introducirse en las membranas de células blanco,
con el fin de crear poros que permiten la entrada de agua en las células
promoviendo la lisis celular. Otra importante función de las células “NK” es el
reconocimiento y destrucción de células cancerosas.
Además de las células implicadas en la inmunidad innata (no adaptativa), un
sistema de veinte proteínas del suero, llamado sistema del complemento,
constituye una línea de defensa química muy eficiente contra microorganismos
y otros agentes invasores. Debido a la importancia del sistema de
complemento en inmunohematología, lo trataremos en tópico especial.
Respuesta inmune adaptativa o adquirida
1. Exquisita especificidad frente a diversas moléculas
2. Propiedad de “recordar” exposiciones repetidas al mismo antígeno
3. Capacidad de reconocer GRAN cantidad de sustancias microbianas y
no microbianas
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El sistema del complemento
Complejo proteico poli molecular, constituido por varias sustancias, que se
encuentran en el plasma sanguíneo y desempeña un papel importante en los
distintos tipos de reacciones inmunológicas. Participa en eventos fisiológicos
esenciales incluyendo la opsonizacion, adherencia celular, quimiotaxis,
citolisis, agregación plaquetaria constituye un puente entre la inmunidad innata
y la adaptativa, ofrece protección contra la infección por bacterias piógenas y
favorece la eliminación de complejos inmunes y de productos de la
inflamación.
Las moléculas que integran el sistema del complemento son glicoproteínas
con diferentes propiedades fisicoquímicas. Algunas se designan como
componentes y se abrevian con la letra C y un número: C1, C2, C3, C4, C5,
C6, C7, C8 y C9. En la ruta alternativa, los componentes se suelen llamar
factores, y en muchos casos su nomenclatura es a base de una letra
mayúscula: factor B, factor D, factor H, factor P
Actualmente se reconocen tres vías de activación del complemento; éstas son
la vía clásica, dependiente de complejos antígeno-anticuerpo; la vía alterna,
iniciada por sustancias localizadas en la superficie de microorganismos y la
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vía de la lectina que se une a la manosa (LUM), conocida también como la vía
clásica independiente de anticuerpos.
Reacción antígeno-anticuerpo
Antígenos
Antígeno: “anti” = opuesto y "geno“ = generar o producir (que genera
o crea oposición)
Es toda sustancia que es reconocida por el sistema inmune y si
además desencadena una respuesta inmune.
Inmunogeno: Son proteínas o polisacáridos, incluyen estructuras de
microorganismos (bacterias, virus, hongos y parásitos)
Epítopos o determinantes antigénico dentro de toda la estructura del
antígeno, se denominan así las partes que son reconocidas de forma
específica
Hapteno: Sustancias que por si solas no son capaces de provocar una
respuesta inmune, si se combinan con una proteína transportadora o
adquieren capacidad inmunógena (lípidos, ácidos nucleicos, algunos
fármacos)
Tolerógeno: Antígeno que a pesar de ser externo, no provoca una
respuesta inmune debido a su estructura molecular. Si su estructura
molecular cambia podría convertirse en inmunógeno
Alérgeno: Sustancia que en la mayoría de los individuos es reconocida
como Tolerógeno por su sistema inmune, pero que en ciertos
individuos induce una hipersensibilidad en el sistema inmune conocida
como alergia
Anticuerpos
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Función de las Inmunoglobulinas
Ig A Predominante en secreciones seromucosas (saliva, secreciones
traqueo-bronquiales, vaginales, etc.)
Se presenta como dímero (impide proteólisis por enzimas digestivas).
Ig G Principal anticuerpo de respuesta secundaria (memoria).Actividad
anti-virus, bacterias, parásitos y algunos hongosCruzan placenta
(inmunidad pasiva transplacentaria, 3-6 meses postparto)
Activa complemento por vía clásica.
Es la más abundante (80% del total de inmunoglobulinas). Se une
rápidamente con macrófagos y neutrófilos, provocando la destrucción
del microorganismo. Puede atravesar la barrera placentaria y se secreta
en la leche materna. Por ello, es responsable de la inmunidad fetal y la
del recién nacido.
Los anticuerpos IgG son más pequeños y no aglutinan los glóbulos rojos
en forma directa, sólo recubren y sensibilizan
Ig M Principal anticuerpo de respuesta inmune inmediata y primaria
Se presenta como pentámero en asociación con cadena "J“
Activa complemento por vía clásica
Representa el 6% del total de inmunoglobulina. Aparece en los linfocitos
B unida a su membrana plasmática. Se manifiesta en la respuesta
primaria activando el sistema del complemento.
Los anticuerpos IgM son grandes y exhiben 10 puntos de combinación
antigénica. Pueden sensibilizar y producir aglutinación de los eritrocitos
de manera directa.
Ig E Se une a receptores de alta afinidad en basofilos y mastocitos
Participa en respuestas anti-helmintos e hipersensibilidad inmediata
(anafilaxia)
Ig D Se encuentra circulante y en la superficie de las células B
maduras
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Respuesta primaria y secundaria
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Reacciones de aglutinación indirecta: Aquellas en las que se utilizan
células tratadas o partículas inertes recubiertas de antígeno, que actúan
como portadores pasivos, como los eritrocitos humanos, los de oveja ó
los de pavo y las partículas de látex.
Hemólisis
Es la ruptura de los eritrocitos con la correspondiente liberación de la
hemoglobina intracelular. La hemólisis in vitro mediada por anticuerpos
depende del ataque del complemento a la membrana de la célula roja. La
hemólisis no ocurre si el antígeno y el anticuerpo interactúan en el suero, al
cual le falta el complemento, o en el plasma, en el cual el anticoagulante ha
quelado los cationes de calcio y magnesio, necesarios para la activación del
complemento
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INTERPRETACION DE LA AGLUTINACION
Anotación Grado de Descripción de la aglutinación
aglutinación
temperatura,
Proporción antígeno-anticuerpo
pH
fuerza iónica
Estructura antigénica
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Temperatura
Los anticuerpos de los grupos sanguíneos difieren con respecto a su actividad
térmica óptima y son reactivos en un rango de temperatura restringido. Los
anticuerpos fríos, generalmente IgM, reaccionan de forma óptimaa bajas
temperaturas, entre 4°C y 25°C. Por otro lado, los anticuerpos calientes,
generalmente IgG, reaccionan mejor a 37°C. Los anticuerpos que reaccionan
in vitro sólo a temperaturas por debajo de 37°C se considera que no tienen
significado clínico y raramente causan destrucción de los glóbulos rojos.
pH
No existe un pH exacto óptimo, pero se dice que entre 6-7.3 se detecta la
mayoría de los grupos sanguíneos clínicamente
Significativos la solución salina isotónica, la cual después de un largo periodo
de almacenamiento el pH cambia de 5.0- 6.0
Fuerza iónica
Está directamente relacionada con el potencial z. En la solución salina normal,
los iones de Na+ y Cl- se reúnen alrededor de los antígenos y de los
anticuerpos y neutralizan
Potencial iónico del medio y potencial Z.
Cuando los hematíes se encuentran en suspensión en una solución
electrolítica conteniendo iones libres (aniones – y cationes +), su carga
negativa de membrana atraerá a los cationes de la suspensión, formándose
una envoltura o nube de cargas positivas alrededor de aquellos,
convirtiéndolos en partículas cargadas de electricidad del mismo signo que
experimentan fuerzas de repulsión entre ellas. A esa fuerza de repulsión se la
denomina POTENCIAL Z.
El potencial Z puede ser alterado por variación de la carga electrostática de
los hematíes y por la variación en la concentración de cationes libres en el
medio de la suspensión hemática.
Reduciendo la densidad de la nube de cationes, los anticuerpos pueden
acercarse más fácilmente a la superficie de los hematíes favoreciendo la
sensibilización y posterior aglutinación.
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Para eliminar la repulsión y potenciar la aglutinación se usan varias estrategias
como ser la reducción de la carga negativa de los hematíes por el uso de
enzimas proteolíticas, introducción de macromoléculas como la albúmina y
polietilenglicol y el uso de soluciones de baja fuerza iónica (LISS).
Tiempo de incubación
Las reacciones antígeno-anticuerpo tienen un tiempo óptimo de incubación
que favorece la máxima unión del anticuerpo al antígeno. Periodos de
incubación cortos no permiten que cantidades significativas de anticuerpo se
unan, y periodos prolongados de incubación pueden resultar en disociación
del anticuerpo del antígeno.
TÉCNICA 22 37
Salina 30-60 minutos 45- 60 minutos
Albumina 45-60 minutos 30-45 minutos
Enzima 10-15 minutos 10-15 minutos
L.I.S.S NO PROCEDE 15 minutos
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Estructura antigénica
Los antígenos de grupo sanguíneo son proteínas o hidratos de carbono. Su
especificidad antigénica está determinada por una secuencia concreta de
aminoácidos o por una molécula constituida por 3 o 4 azúcares.
MEDO DE MICROPLACAS
Tecnica de microplacas manual
Tecnica de microplacas en equipo auntmatizado
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tubo
Aglutinación en columna
microplacas
Hemolisis
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Tecnología de aglutinación en columna
Se han diseñado varios métodos en los cuales los eritrocitos son filtrados a
través de una columna que contiene un medio que separa los eritrocitos. Los
sistemas comerciales emplean una tarjeta o tira de microtubos, a diferencia de
los tubos convencionales. Estos permiten el pro cesamiento de varias pruebas
en forma simultánea. Un espacio o cámara en la parte superior de cada
columna se usa para los eritrocitos o para incubar las células y el suero o
plasma. Cuando los eritrocitos pasan a través de la columna durante la
centrifugación, el medio de la columna separa los eritrocitos aglutinados de los
no aglutinados, de acuerdo al tamaño del agregado.
En las pruebas de columna, el botón de células en las pruebasnegativas se
va para el fondo. En las pruebas positivas, las células son capturadas en la
parte superioro en el cuerpo de la columna. Una ventaja de estos sistemas es
la estabilidad al final de la reacción, la cual puede ser leída por varias
personas, o en algunos casos, documentarla por medio de fotocopiado. Las
pruebas de columna tienen generalmente una sensibilidad similar a los
métodos de antiglobulina en LISS.
Alternativamente, en algunas pruebas se puede incluir en el medio un
antisuero específico o proteínas. Las células que portan el antígeno específico
son capturadas selectivamente cuando pasasnn atraves del gel.
VENTAJAS DESVENTAJAS
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Grado de Interpretacion
aglutinación
REACCIÓN 4+ Las células rojas aglutinadas forman una banda sólida en la parte
superior del gel.
NEGATIVA Todas las células rojas atraviesan el gel y forman un botón celular
bien definido en la base del microtubo
DOBLE La reacción de doble población también conocida como campo
POBLACIÓN mixto se caracteriza por una banda de células rojas aglutinadas en
la parte superior de la columna de gel en tanto que las células no
aglutinadas se depositan en el fondo del microtubo
HEMÓLISIS La ruptura del glóbulo rojo se visualiza por el color rojo brillante en
toda la columna del microtubo
.
.
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La aglutinación se presenta en los pocillos
Los reactivos están unidos a la superficie de los pocillos
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3 Bases genéticas de la Inmunohematología
Herencia de grupos sanguíneos
Genética
• La Genética es el campo de la Biología que estudia cómo se transmite
la herencia
• La transmisión de las características fenotípicas de padres a hijos intrigó
a los humanos ya desde la época de los griegos
• Los experimentos de Gregor Mendel (1865) sientan las bases de la
Genética
• Gen Es lo que Mendel llamó inicialmente “factores” se refiere a la
codificación de una determinada característica fenotípica en el sistema
genético
• Diploidía Significa que de cada gen existen dos copias los mamíferos
somos organismos diploides
• Alelo Se refiere a cada una de las copias de un determinado gen
Se representan con letras (A, a)
• Dominancia y recesividad Indica el comportamiento de un determinado
alelo Se representan con el tipo de letra (A mayúscula = alelo dominante/
a minúscula = alelo recesivo). Se expresa en el fenotipo la letra
mayúscula
• Homocigosis Se refiere a si los dos alelos de un determinado gen son
iguales ejemplo A/A, 0/0 se dice que es genotipo homocigota
• Heterocigosis Se refiere a si los dos alelos de un determinado gen son
diferentes ejemplos A/0 , B/0 genotipo heterocigota
• Codominancia se refiere a la situación en la que, en una situación
heterocigota, ambas características fenotípicas se expresan juntas no
habiendo una que prevalezca sobre la otra.
La herencia de características transmisibles o rasgo, incluyendo los antígenos
de los grupos sanguíneos, forma la base de la genética. El material genético
que determina cada rasgo se encuentra en el núcleo de la célula. Este material
nuclear se llama cromatina, la cual está constituida principalmente por ácido
desoxirribonucleico (DNA). Cuando la célula se divide, la cromatina pierde su
apariencia homogénea y conforma unas organelas en forma de bastones
denominadas cromosomas. Cada cromosoma está formado por cadenas de
DNA. Dentro del DNA cromosómico están los genes, que poseen la
información genética, los cuales están constituidos por secuencias específicas
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de nucleótidos. Los genes están ubicados en un orden específico a lo largo
del cromosoma, ubicados en una posición fija conocida como locus, loci en
plural
Todos los cromosomas están dispuestos en parejas y por ello son diploides en
el núcleo celular. Cuando un par de alelos perteneciente al mismo gen de
ambos cromosomas son idénticos decimos que el individuo es homocigoto.
Por el contrario, cuando este par de alelos difiere decimos que el individuo es
heterocigoto.
Un alelo puede ser dominante respecto a su pareja. Esto implica que sólo se
expresará la versión de la proteína codificada por este alelo. El alelo suprimido
se conoce como alelo recesivo. Sólo cuando el alelo recesivo esté presente
en ambos cromosomas (el individuo será homocigoto para este alelo recesivo)
será posible reconocer la correspondiente versión de la proteína.
También puede suceder que ambos alelos sean codominantes. Esta es la
situación que concierne a la mayoría de alelos que codifican para los diferentes
productos polimórficos responsables de los grupos sanguíneos. Algunos
genes tienen alelos que no codifican ningún producto: son los alelos silentes.
Los alelos de genes muy próximos se heredan conjuntamente y constituyen lo
que conocemos por haplotipo.
Cromosomas
El número de cromosomas y la morfología de los cromosomas son específicos
para cada especie. Las células somáticas humanas tienen 46 cromosomas
que existen como 23 pares (la mitad de cada par se hereda de cada padre).
Veintidós de los pares son semejantes en hombres y mujeres, denominados
autosomas; los cromosomas sexuales, XX en las mujeres y XY en los
hombres, son el par restante
Los genes de los grupos sanguíneos están localizados en los 22 pares de
autosomas. Ningún antígeno de grupo sanguíneo se ha encontrado en el
cromosoma Y, y en el cromosoma X sólo los genes Xg y Xk.
Alelos
Cada gen tiene un locus específico sobre un cromosoma, y genes alternos que
ocupan un solo locus se denominan alelos, los cuales son responsables de la
especificidad de los antígenos. La terminología de la Sociedad Internacional
de Medicina Transfusional, ISBT (por sus siglas en inglés, International Society
of Blood Transfusion) distingue entre los alelos para los antígenos de los
grupos sanguíneos (polimorfismos genéticos) y los antígenos que ellos
codifican [22]. Por ejemplo, los antígenos principales del sistema del ABO son
A, B y O, y los alelos son A1, B1 y O1. En el sistema Kell, dos alelos, K y k,
determinan los antígenos K y k, respectivamente. Los individuos que tienen
30
alelos idénticos en un locus específico en ambos cromosomas se denominan
homocigotos para el alelo (por ejemplo A1/A1 o K/K o k/k). En el estado
heterocigoto, los alelos presentes en el locus en cada cromosoma no son
idénticos (por ejemplo A1/O1 o A1/B1 o K/k).presenta los genotipos y las
localizaciones cromosómicas para los 30 sistemas de antígenos de los grupos
sanguíneos
GENOTIPO.se refiere al conjunto de alelos heredados provenientes de
un determinado gen (por ejemplo AA, AO)
FENOTIPO se refiere, exclusivamente, al producto reconocible de estos
alelos. Características que se expresan (ejemplo A)
Los antígenos producidos por diferentes alelos de un determinado locus
se denominan antitéticos.
31
Los hijos reciben un gen de cada progenitor para formar el genotipo lo cual se
expresara en fenotipo
Grupo
sanguíneo A B AB 0
A B AB 0
fenotipo
antígeno Ag A Ag A Ag B Ag B Ag A, Ag B Ag H
32
4 SISTEMAS DE GRUPOS SANGUINEOS
Los antígenos de grupo sanguíneo dependiendo de
las características presentes en la superficie de los
glóbulos rojos y en el suero se han agrupado en
sistemas
Según la sociedad internacional de la transfusión sanguínea (ISBT) existen 33
sistemas de grupo sanguíneos y un aproximado de 297 antígenos.
Sistema de Grupo Sanguíneo ABO
Descubierto por Landsteiner en 1900, continúa siendo el sistema más
importante en la transfusión sanguínea y en trasplante, debido a la presencia
sistemática de anticuerpos regulares reactivos a 37 °C, fijadores de
complemento y dirigidos contra los antígenos de los que carece el portador de
los anticuerpos. Estos anticuerpos pueden producir reacciones hemolíticas
muy graves de tipo intravascular cuando se transfunden hematíes ABO
incompatibles
Es el único sistema en el cual el suero de la mayoría de las personas no
expuestas a eritrocitos humanos posee anticuerpos recíprocos, constantes y
previsibles
Siempre que se carece del antígeno, el anticuerpo está presente.
Significancia en caso de incompatibilidad:
1. Transfusión: causan rápida y total destrucción intravascular.
2. Trasplantes de órganos: asociado a rechazo humoral agudo.
3. Medina forense
33
Antígenos del sistema AB0
• Son estructuras representadas por cadenas de oligosacáridos sobre
glicoproteínas y glicolipidos
• Presentes en casi todos los tejidos y órganos (forma particulada) y en
secreciones o fluidos (de forma solubles)
• También son llamados ags histo-sanguineos
• Se encuentran en los recién nacidos en bajas cantidades
Locus Sese
• Ubicado en el cromosoma 19
• Existen dos alelos reconocidos, el Se y el se
• El gen Se es directo responsable de la expresión del H
• Indirecto responsable de la expresión del A y B, en secreciones
epiteliales.
• El 80% de la población se describe como secretora.
• El gen amorfo es el se.
Locus ABO
• Localizado en el cromosoma 9q34.
• Existen tres alelos comunes A, B y O.
• El producto de los genes A y B son enzimas glucosil-transferasas.
• Las enzimas agregan azúcares específicos a las cadenas de
olgosacáridos (antígeno H), para dar paso a los antígenos A y B.
• Las cadenas de oligosacáridos existen en forma lineal o ramificadas
• El gen O no determina antígeno de grupo sanguíneo detectable.
34
• Los eritrocitos grupo O portan cantidad abundante del antígeno H.
Los antígenos del sistema ABO están compuestos por azúcares que protruyen
de la membrana de la superficie de los eritrocitos, unidos a un componente
denominado ceramida, el cual se encuentra en la membrana de los eritrocitos.
Una serie de cuatro azúcares se une a la ceramida. A esta estructura de cuatro
azúcares o sustancia precursora, se le unen otros azúcares que le dan la
especificidad a cada antígeno ABO. Por ejemplo, fucosa y D-galactosa unidas
al azúcar terminal de la sustancia precursora, da la especificidad del grupo
sanguíneo B.
35
Biosíntesis
El primer paso en la biosíntesis de los antígenos ABO es la adición de una L-
fucosa a la galactosa terminal (Gal) de un precursor común (sustancia
precursora) unido a los lípidos o proteínas de membrana, por la enzima a1,2
fucosiltransferasa (transferasa H), dando origen al antígeno H.
Posteriormente, se forman los determinantes para los grupos sanguíneos A o
B por la acción de enzimas transferasas, que catalizan la adición de azúcares
específicos: la transferasa A para los que tendrán grupo A y la transferasa B
para los que tendrán grupo B, formando así los antígenos
A y B, respectivamente. En el caso de las personas con grupo O, se produce
una transferasa O que es inactiva, quedando el antígeno H sin modificarse.
Las personas que sintetizan el antígeno A exclusivamente, tendrán grupo
sanguíneo A; las que sintetizan el antígeno B exclusivamente, tendrán grupo
sanguíneo B; y las que producen ambos antígenos A y B, tendrán grupo AB
36
GEN ENZIMA AZUCAR ANTIGENO
H FUCOSIL-TRANSFERASA FUCOSA
H
A N- N- A
ACETILGALACTOSAMILTRANS ACETILGALACTOSAM
FERASA INA
B GALACTOSAMILTRANSFERAS GALACTOSA B
A
37
Subgrupos de A y B
38
Uso de las lectinas
En general, la distinción serológica entre A1 y A2 se basa en la aglutinación
de los eritrocitos A1 y la no aglutinación de los eritrocitos A2 con anti-A1 lectina
(extracto de semillas de Dolichos biflo Los eritrocitos de las personas A1 y A2
reaccionan fuertemente con el reactivo anti-A en A1 y A2 reaccionan
fuertemente con el reactivo anti-A en las pruebas de aglutinación directa, como
A2 las pruebas de aglutinación directa. Se puede observar la disminución en
el número de cruces
39
• Carecen del gen funcional H
• Las personas con este grupo carecen de antígeno H, A y B en sus
eritrocitos y en sus secreciones (no secretores).
• De modo que estas personas desarrollan anti A, anti B y anti H
Grupo para-Bombay (Ah, Bh, ABh)
• Las personas con este grupo tienen una transferasa H pero una
transferasa Se activa (son secretores)
• Se puede encontrar antígenos A, B y H en secreciones.
• De modo que estas personas pueden desarrollar anti A, anti B y anti H
Anticuerpos anti-A1
Los anticuerpos anti-A1 se presentan en el suero como un aloanticuerpo entre
el 1% y el 2% de las personas A2 y en el 25% de las personas A2 B. Algunas
veces también se pueden encontrar anticuerpos anti-A1 en el suero de
personas con otros subgrupos débiles de A. Los anticuerpos A1 antiA1 pueden
causar discrepancias en las pruebas ABO e incompatibilidad en las pruebas
cruzadas con eritrocitos A1 o A1B. Los anticuerpos anti-A1 usualmente
reaccionan mejor o sólo a temperaturas por debajo de 37°C y se consideran
clínicamente insignificantes a menos que sean reactivos a 37°C. Cuando son
reactivos a 37°C, sólo se deben usar unidades de eritrocitos O A2 en caso de
necesitarse una transfusión
41
42
43
44
DISCREPANACIAS DEL SISTEMA ABO
Es cuando en los resultados de la determinación de la prueba globular y sérica
no son los esperados, por lo tanto no podemos definir el grupo sanguíneo
45
ERRORES COMUNES
Identificación inadecuada de la muestra de sangre, tubos de ensayo
Mezcla de muestras
Error administrativo
Suspensión celular demasiado concentrada o demasiada diluida
Centrifugación excesiva
Falla en la adición de reactivo
Falla en seguir las instrucciones del fabricante
Reactivo de mala calidad, contaminado
Falta de observación de hemólisis
Centrífuga sin calibrar
Material de vidrio sucio/contaminado
El Rouleaux
Consiste en agregados de glóbulos rojos que se adhieren a lo largo de
sus superficies planas, dando una apariencia al microscopio de monedas
apiladas. Este Rouleaux se dispersará cuando se resuspenda en
46
solución salina. Una aglutinación verdadera es estable en presencia de
solución salina.
REGLAS GENERALES PARA RESOLVERLOS
1. repetir la prueba
2. chequear los errores administrativos y técnicos
3. las reacciones débiles suelen ser dudosas
4. revisar la edad del paciente
5. revisar el diagnostico
6. indagar en el historial de transfusión
5. Sistema Rh
El antígeno Rho (d) fue caracterizado en 1939 por Levine y Stetson, quienes
encontraron el anticuerpo en el suero de una madre cuyo niño tubo
Enfermedad hemolítica del recién nacido. Recibió su nombre en 1940 cuando
Landsteiner y Weiner inmunizaron conejos con eritrocitos de mono.
TEORÍAS Y NOMENCLATURAS
a) FISHER y RACE en 1943 postulan que en el cromosoma 1 existen 3 (tres)
locus estrechamente relacionados ‘O, °C” y “E” con dos pares de alelos — “c”
y “E” —*“e”; y el alelo del “D” que no produce antígeno, por lo tanto aceptan
colocar “d” para significar la ausencia del mismo. El grupo de alelos del
complejo génico es denominado haplofipo.
b) WIENER, en el mismo año sugería que hoy múltiples aletos en un solo loci
y que cada alelo codifico un antígeno distinto.- Los productos del gen
(haplotipo) son designados “R”, para los que codifican D y “Y” paro los que no
codifican, se les agregan subíndices o supraíndices para indicar los distintos
haplotipos que desarrollan. Para el lenguaje hablado es esta notación la que
más se utiliza, por lo abreviada.
CDe R1 RH1,2,5
Cde R RH 4,5
DcE R2 RH 1,3,4
cDe R0 RH3,4
dcE r” RH3,4
Cde r´ RH2,5
CDE Rz RH1,2,3
CdE ry RH2,3
48
ANTIGENOS
Este es el segundo sistema de importancia, es extremadamente inmunogénico
por lo que es muy importante en la práctica transfusional y en la enfermedad
hemolítica del recién nacido, también tiene bastante peso en los estudios de
diversidad genética y medicina legal. Han sido descritos más de 40 antígenos
de los cuales los más importantes son 5: D, C, c, E, e, estos se combinan entre
si dando lugar a diversos patrones antigénicos. De estos el antígeno D es el
que posee la mayor capacidad antigénica. Las personas que presentan el
antígeno en sus eritrocitos se denominan Rh positivos y los que no lo
presentan se denominan Rh negativos. Los \ genes responsables de este
sistema están localizados en el cromosoma
49
• Descubierto en 1,939 por Levine y Stetson
• En 1,940 Landstainer y Wiener, encontraron
un anticuerpo al inmunizar cobayos y conejos
con eritrocitos de MONOS RHESUS
• De descubrir los anti-D, estudios familiares
demostraron que los antígenos D son rasgos
genéticos que se transmiten de forma
autosómica dominante
•
ANTIGENO D
• Antígeno D común ( 37 epítopes) designados como epD1 a epD9 con
subdivisiones
Antígeno D común
• Los eritrocitos aglutinan en centrifugación inmediata con ant-D
Fenotipo D variante: D débil, D parcial, DEL
En la tipificación de rutina no resulta extraño encontrar glóbulos rojos con una
expresión disminuida del antígeno D. Estas variaciones fenotípicas pueden ser
cuantitativas (fenotipo D débil) y/o cualitativas (fenotipo D parcial). La
dicotomía D débil / D parcial tiene, en realidad, límites confusos y depende
principalmente de la sensibilidad y avidez de los reactivos utilizados para
intentar establecer diferencias entre ambas variantes. Debido a la dificultad
que presenta la discriminación serológica de estos fenotipos, se les agrupa
bajo la denominación “variantes D” o fenotipo “D variante”, permitiendo así una
visión unitaria de los mismos.
50
Ag D débil
Los eritrocitos se aglutinan Anti-D generalmente hasta en la fase se Coombs
D parcial
• Presente en cantidades normales pero que carece de algún o algunos
de los epítopos, es decir se presentan mutaciones que modifican la
porción extracelular de la proteína D
• Se presentan con más frecuencia en individuos de raza negra.
• Los individuos de parcial pueden producir anti-D a pesar de ser
clasificados como Rh positivos con reactivos y procedimientos de rutina.
• Los eritrocitos se aglutinan en centrifugación inmediata con anti-D, pero
si cambiamos de reactivo podrían ser no aglutinados.
51
52
• Las técnicas enzimáticas son muy útiles para que los antígenos
débiles reaccione con su correspondiente anticuerpos.
Generalmente no activan el complemento
Significado de los antígenos D débil - D parcial
Rh nulo
• Existen algunos eritrocitos que carecen de los antigenos del
sistema Rh.
• Depresión global de antígenos Rh
• Estomatocitosis, Esferocitosis
Presentan anemia leve y producen un anti-Rh29
54
Respuesta inmunitaria al Rh
Formación de agtutininas anti-Rh. Cuando se inyectan eritrocitos que
contienen el factor Rh a una persona cuya sangre no contiene el factor Rh (es
decir, en una persona Rh negativa) aparecen las aglutininas anti-Rh
lentamente, y se alcanza una concentración máxima de aglutininas 2-4 meses
después. Esta respuesta inmunitaria alcanza un grado de extensión mayor en
unas personas que en otras. Con múltiples exposiciones al factor Rh, una
persona Rh negativa finalmente llega a «sensibilizarse» con más fuerza al
factor Rh.
Anticuerpos
Anticuerpos más importantes del sistema Rh
Ac D Ac C Ac c Ac E Ac e
56
57
58
59
6 OTROS GRUPOS SANGUÍNEOS
60
Sistema KELL (ISBT 006)
Generalidades:
1. Descubierto por Mourant en 1946, asociado a EHRN
2. El genKEL
3. Fenotipo con antígeno Kell deprimido: presenta expresión débil de
los antígenos del sistema Kell.
4. Fenotipo kell nulo: Kellnnull (K0), descrito en 1957 por Chown y
colaboradores:
• A excepción del Kx, las personas no expresan otros antígenos
• Desarrollan anticuerpos contra todos los antígenos del sistema
Kell
5. El sistema Kell esta constituido por 38 antígenos numerados del 1 al
38 Ag K (k1)
Antígenos:
1. Son altamente inmunógenicos: segundo después del ag. D
2. Los principales (K y k), y existen varios relacionados
3. Son 22 antígenos descritos, mayormente de alta frecuencia
4. Son fácilmente inactivados por reactivos sulfihídricos: 2 mercaptoetanol
(2ME), ditiotreitol (DTT) o bromuro de 2 aminoetilsotiouronio (AET)
5. Se encuentran totalmente formados al momento del nacimiento
no son destruidos por enzimas (bromelina, papaina y fiscina
Anticuerpos:
1. Todos son potencialmente clínicamente
61
2. Se debe suministrar al paciente, unidades carentes del antígeno
3. El anti-K, clínicamente es el más significativo:
• Es de naturaleza IgG, causa EHRN y RTH (tardía), y reacciona
mejor en AGH.
• Fácilmente se encuentran unidades de sangre K neg
4. El anti-k ha causado RHT inmediatas severas, así como raros casos de
EHRN:
• Alta frecuencia del antígeno dificulta encontrar unidades negativas
(frecuencia aproximadamente el 0.2%)
5. Fijan el complemento
62
Antígenos:
1. Bioquímicamente son glicoproteínas de membrana de paso múltiple.
2. El enlace externo puede ser destruido por enzimas ej: ficina, papaina, y
tripsina.
3. Han sido identificados como receptores eritrocitarios para varias
citoquinas
Anticuerpos:
1. Se observan más frecuentemente en individuos de raza negra y en
pacientes poli transfundidos.
2. El anti-Fya es mucho más común que el anti-Fyb y está más
comúnmente asociado a RTH y EHRN.
3. Ambos son de tipo IgG.
4. Reaccionan mejor en fase de AGH y las reacciones son destruidas por
enzima.
5. Las personas Fy(a-b-) pueden desarrollar el anticuerpo Fy3.
6. Pueden presentar el fenómeno de dosis.
7. Se producen anti-Fya (IgG1), que están involucrados en accidentes
transfusionales.
8. Se detectan usando la prueba de Coombs indirecta.
9. El tipo de herencia es mendeliana codominante.
SISTEMA LEWIS
64
• Quienes heredan el gen Le pero no el Se, expresan el Lea
(
antígeno simple )
• Las personas Le (a- b-) pueden ser o no secretores
Antígenos:
1. Se localizan en glucoesfingolípidos solubles, en la saliva y en el plasma,
de donde son adsorbidos por el eritrocito.
2. No llegan a ser parte estructural de la membrana , pueden ser eluidos.
3. Tienden a debilitarse en el embarazo y quizás la sustancia Lewis puede
eluirse de sus células.
4. Son receptores para Helicobacter pylori en la mucosa gástrica.
Anticuerpos:
1. No son considerados clínicamente significativos
2. Se producen de forma natural
3. Suelen ser de tipo IgM y fijan el complemento.
65
SISTEMA P
• En eritrocitos se encuentran los antigenos P1, P, y Pk, en plasma P y
Pk.
• Los antígenos están bioquímicamente relacionados a los grupos ABO e
I.
• Son antígenos débilmente inmunogénicos y se heredan de forma
mendeliana.
• El fenotipo más común en las razas blanca y negra es P1 (79% y 94%).
• Producen anticuerpos IgM, se detectan en solución salina a22 o 4°C por
Coombs Indirecto.
• Anti-P1 esta asociado con infecciones parasitarias, Anti-P y anti-Pk
están asociados a abortos prematuros; anti-P1 y anti-Pk a infecciones
del tracto urinario.
Antígenos:
1. Descubierto por Landsteiner y Levien en 1927.
2. Constituidos por la adición de azúcares a los glucoesfingolipidos
precursores.
3. Están bioquímicamente relacionados con grupos ABO e I.
4. Son débilmente inmunogénicos.
5. Más del 99,999 % de la población pertenece a los fenotipos P1 o P2.
6. La expresión antigénica P1 varía entre individuos
66
7. La expresión disminuye con el almacenamiento.
8. Son receptores de distintos agentes infecciosos:
1. Parvovirus-B19, causante del eritema infeccioso
2. Hemoglobinuria paroxística, hemolizados por un efímero auto-anti
P
3. El VIH interacciona con el antígeno Pk (CD77) y con el CD4 para
entrar a la célula
4. Las verotoxinas producidas por E. coli, se unen al Pk para inducir
apoptosis
5. P1, Pk y P funcionan como receptores para la E. coli uro
patogénica
9. Las personas P2 desarrollan comúnmente anti P1.
10. Reacción a 4oC, en ocasiones a 37oC.
11. Generalmente son tipo IgM.
Rara vez han estado involucrada en hemolisis in vivo
67
2. Aquellos Ig G o amplio rango térmico deben considerarse
potencialmente peligrosos. Unidades carentes del antígeno.
3. Aglutinina fría no hemolítica, comúnmente producción natural.
4. Ocasionalmente implicados en RTH y EHRN.
5. Generalmente reaccionan mejor a TA e inferiores
6. Anti M y Anti N exhiben el efecto de dosis
7. Anti S pueden ser de tipo Ig G o Ig M
8. Anti s y anti U generalmente son de tipo Ig G y han estado presentes en
RTH y EHRN.
9. El anti U es raro, debe considerarse en pacientes de raza negra con
historia de transfusión o embarazos
SISTEMA LUTHERAN
• Fue identificado en 1945 en el suero de un paciente politransfundido.
• Este sistema está compuesto por 17 antígenos, pricipalmente se
expresan Lua y Lub.
• Son glicolípidos o estructuras homólogas.
• Hay pocos en un recién nacido.
• El fenotipo más frecuente en las razas blanca y negra es Lu(a-b+) >90%.
• Se producen anticuerpos IgG, están asociados a pacientes
politransfundidos.
• Anti-Lu a se encontro en el suero de pacientes con lupus eritematoso.
• Anti-Lu b causa hemólisis de eritrocitos in vivo
• Se detectan con Coombs Indirecto en solución salina.
• El tipo de herencia es mendeliana codominante.
SISTEMA DIEGO
• Formado por nueve antígenos principalmente: Di a y D ib.
• Ayudan a mantener la integridad estructural de la membrana del
eritrocito, estabilizan la membrana lipídica.
• La prevalencia de Di a es del 54% en latinoamericanos, 5% en Mongolia,
8% China y 8-12% Japón.
68
• Di b se presenta en el 99% de caucásicos.
• Se producen anticuerpos IgG1 e IgG3, Di a también produce IgM.
• Se utiliza la prueba indirecta de Cooms para detectarlos.
• Se han presentado 6 casos de anemia hemolítica del recién nacido.
SISTEMA I
• Encontrado en 1956 en el suero de un paciente con anemia hemolítica
del tipo de acticuerpos fríos.
• Se presentan los antígenos I e i.
• Están bioquímicamente relacionados a los grupos ABO, Lewis y P.
• Aparte de las células rojas se presenta en otros tejidos y células.
• Los infantes recién nacidos presentan el antígeno i.
• El antígeno I se desarrolla después de los 18 meses de vida.
• Se producen anticuerpos IgM.
• Anti-I es el autoanticuerpo más común y puede ser benigno o patológico
y está asociado con M. Pneumoniae.
• Anti-i es un anticuerpo raro asociado al virus Epstein –Barr.
• La reactividad de los anticuerpos disminuye por tratamiento con
enzimas.
• Se detecta por Coombs Indirecto.
• Se hereda de manera mendeliana.
7 El banco de sangre
BANCO DE SANGRE: Es la institución que se encarga de la promoción de
la donación de sangre, la selección de donantes, la extracción de sangre
completa o hemocomponentes por aféresis, procesamiento, calificación
Inmunohematología, calificación serológica, criopreservación, conservación,
distribución, uso y control de calidad de los productos y los servicios.
Un banco de sangre es una organización dedicada a promover, recolectar,
almacenar, procesar y suministrar sangre segura, todo este proceso bajo
una adecuada Gestión de la Calidad.
PRINCIPAL OBJETIVO DEL BANCO DE SANGRE
69
Asegurar la protección de la salud de:
Donantes de sangre
Pacientes receptores de sangre
Personal que labora en los Bancos de Sangre
FINALIDAD
Generar resultados, productos y servicios clínicamente útiles para el cuidado
de la salud del paciente..
Características del producto
Eficaz
Seguro
Inocuo
Libre de contaminación bacteriana
TIPOS DE BANCOS DE SANGRE
TIPO A
TIPO B
TIPO C
• HEMOCENTROS: son bancos de sangre tipo A
71
La implantación de sistemas de monitoreo y evaluación continua del
ambiente organizacional polifuncional con altas expectativas de
alcanzar niveles adecuados de calidad en todos los procesos,
productos y servicios.
La necesidad de definir centros de costo y delegar responsabilidades
en el uso y destino de los recursos , con base al análisis de la
experiencia de la aplicación y la dinámica administrativa
72
de calidad de los procesos y servicios, la recuperación del paciente
con un costo-beneficio que le permite su funcionamiento
El Banco de Sangre con el fin de cumplir los objetivos
institucionales y legales mantiene una estructura técnica de
jerarquía intermedia que permite un control directo operacional,
traducida en una estructura orgánica funcional.
Con excepción del Comité Técnico Administrativo que se reúne en
forma continua y dinámica para la toma de decisiones.(comité de
hemovigilancia o comité transfusional)
Profesionales idóneos del Banco de Sangre
Dirección Médico especialista recertificado en Hematología y
Hemoterapia con Maestría en Administración de los servicios de
salud, Gestión hospitalaria ; amplia formación en administración
gerencia y gestión en Hospitales y Bancos de Sangre, Especialista-
Consultor en Sistemas de Gestión de Calidad Y, Licdo. En
Laboratorio Clínico con los estudios anteriores. en cada
requerimiento técnico administrativo (RTA) del consejos superior de
salud. Está definido el perfil del director o jefe
Asesoramiento Comités de Calidad, Promoción y Enseñanza e
Investigación (en organización afectados por la falta de
infraestructura y RRHH).
División de Calidad licenciados en Laboratorio Clínico con
formación en Control de calidad en inmunoserología e
inmunohematología, diplomado en Sangre y Componentes Seguros
y Puebla Especialista-Consultor en Sistemas de Gestión de Calidad
ISO 9000;Diplomado en Inmunohematologia y Medicina
Transfusional (UES),
Departamento Administrativo Financiero
auditor financiero, con amplios conocimientos en ciencias
administrativo contables, Maestría en Administración de Empresas,
Diplomado en Sangre y Componentes Seguros; Especialista-
Consultor en Sistemas de Gestión de Calidad ISO 9000:2000
responsable del manejo de los niveles administrativo-económico-
73
financieros y en el ámbito de su competencia de la aplicación de los
sistemas de administración y control fiscal. (aplica para el sector
privado)
Departamento de producción
Licenciado en Laboratorio Clínico Diplomado en Sangre y
Componentes Seguros inscrito legalmente al JVPLC ; se
desempeña en las áreas de atención al cliente, selección del
donante, tamizaje clínico, extracción, separación de componentes,
almacenamiento y distribución de hemocomponentes de sangre
segura.
Departamento de Promoción y extensión social
Comunicadora social formada en Promoción y extensión social
referidos a Bancos de Sangre; responsable de la aplicación de
políticas de Mercadeo social para el reclutamiento, selección,
fidelización y registro de donantes, este departamento se halla bajo
la responsabilidad de la Secretaria de Dirección que fue formada en
Promoción de Bancos de Sangre, bajo el control de la Jefe del
Departamento de Calidad. Con quien coordina sus acciones.
Secciones del Banco de Sangre:
• Atención del Donante: área destinada para atender a los donantes, y
debe contar con sala de espera, área de entrevista, área de toma de
muestra. Es atendida por Licdo. en Laboratorio Clínico y Médicos.
• Control de Calidad
• Laboratorio de Inmunohemotologia.
• Fraccionamiento de Hemocomponentes.
• Almacén.
Buscar en google como material de apoyo en la temática y les servirá para la segunda discusión
75
3 Donante dirigido en la cual el donante solicita, que su sangre se destine a
un paciente determinado ya se familiar o porque es un grupo de sangre
escaso.
4 Donante autólogo Persona que previa evaluación y autorización médica,
dona su sangre antes de una cirugía programada, la cual es conservada para
un requerimiento transfusional del donante.
5 Donante remunerado o comercial (este tipo de donación ya no se
acepta) Persona que dona sangre a cambio de dinero u otra forma de
retribución, que puede cambiarse por dinero. Son capaces de estafar e incluso
mentir al momento de su interrogatorio, lo que pone en riesgo la seguridad de
la sangre
PERFIL DEL DONANTE VOLUNTARIO
Es la persona que cumple con los criterios siguientes:
Tiene la capacidad y la competencia para decidir ser donante de sangre.
Sabe que está saludable y desea mantenerse saludable.
Está bien informado sobre las medidas que deben tomar para mantenerse
en buenas condiciones de salud y cómo evitar conducta de riesgo.
Conoce cuales son las necesidades de sangre y los requerimientos,
procesos y riesgos de la donación de sangre.
Está positivamente motivado para donar sangre decide voluntariamente
donar sangre; y dona sangre en forma repetida
Niveles de Hemoglobina:
Mujeres 12.5 gr/dl (38% Ht)
Hombres 13.5 gr/dl (40% Ht)
Solo para mujeres: Mujeres que deseen donar durante su periodo
menstrual deben ser aceptadas si cumplen los otros requisitos (Ht,Hb)
Presión Arterial
Sistólica 100-160 mm/Hg
Diastólica 60-90 mm/Hg
Pulso: de 50 a 100 latidos por minuto
Mujer Embarazada no debe donar
Lactancia materna donar 6 meses después del parto.
Cuidados de la salud:
Tratamientos odontológicos donar después de 72Hrs
Prácticas de riesgo:
Perforaciones cosméticas (piercing) diferidos por un año.Tatuajes y
maquillajes permanentes diferidos por un año.
Conductas sexuales de riesgo (promiscuidad o múltiples parejas
sexuales)
78
Cardiopatía: No apto
Infartos, Bloqueos
Drogadicción No apto
Epilepsia No apto
Enfermedad de No apto
Chagas
79
CAUSAS CLÍNICAS ACEPTABILIDAD
Menstruación Aceptable
80
CUESTIONARIO PARA DONANTES
Preguntas Sí No
1. ¿Se siente bien de salud hoy?
35.
39. ¿Ha recibido un injerto de tejido proveniente de otra persona (duramadre, cornea, etc.)?
43. ¿Ha aceptado alguna vez dinero, drogas u otro tipo de pago a cambio de mantener relaciones
sexuales?
44. ¿Ha mantenido, en los últimos 6 meses relaciones sexuales (sexo vaginal, anal o bucal) con:
Más de una persona diferente.
Alguna persona portadora del virus del SIDA (VIH)
Persona que cambia frecuentemente de pareja
Persona que haya podido pincharse drogas intravenosas
Persona que ejerce la prostitución
Persona residente u originaria de zonas del mundo donde el virus del SIDA está muy
extendido (África, Caribe y Asia)
45. ¿Ha padecido alguna enfermedad de transmisión sexual (sífilis, gonorrea, etc.)
Observaciones
82
ANTES DE COMENZAR LA RECOLECCIÓN EL FLEBOTOMISTA DEBE:
A) Verificar la correspondencia entre la ficha y el donante.
B) Rotular con el mismo número de la ficha del donante la bolsa de
recolección y las secundarias y el tubo de muestra de la sangre.
C) Controlar la numeración correcta de los tubos y su ubicación junto a
la bolsa durante la recolección. Podrían fijarse a la bolsa primaria. (ese
tubo piloto es para las pruebas serológicas y inmunohematologicas)
83
La bolsa tiene que estar en un hemolador que la mezcla constante mente o
mezclar constantemente con las manos
En ningún momento se debe dejar solo al donante durante la extracción.
Reacciones adversas del Donante
1. Si la reacción ocurre durante la flebotomía, retire el torniquete y extraiga la
aguja.
2. Perdida del conocimiento.
3 .Nauseas y vomito
4. Calambres y Espasmos Musculares
5. Formación de hematomas
6. Convulsiones
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Detención momentánea de la actividad del corazón o de los pulmones que
produce pérdida repentina del conocimiento y de la sensibilidad, con
recuperación espontánea y sin que medien maniobras de reanimación.
2) PÉRDIDA DE CONOCIMIENTO
Puede ocurrir después de una hipotensión progresiva debida a una
inadecuada función simpática. Tratamiento: Colocar compresas frías en la
frente o nuca del donante. Si no responde a las medidas iniciales, administrar
sales aromáticas por inhalación. Probar primero con Amoníaco porque podría
ser muy fuerte o muy débil. En el primer caso podría irritar la mucosa nasal y
en el segundo podría ser ineficaz. El donante debe toser y elevar así la tensión
arterial. Colocar al donante en posición decúbito supino, con los miembros
inferiores Elevados por encima del nivel de la cabeza. Desprender las prendas
ajustadas. Verificar la permeabilidad de la vía aérea. Controlar la tensión
arterial, el pulso y la respiración en forma periódica, hasta observar
recuperación (en algunos casos el MÉDICO solicita la aplicación de Solución
Salina normal para tratar la HIPOTENSIÓN).
3) SÍNDROME VASOVAGAL O NEUROCARDIOGÉNICO
"Vaso" está referido a la vasodilatación y "vagal" al descenso de la frecuencia
cardíaca. Es un fenómeno transitorio, auto limitado y benigno. Generalmente
el primer síntoma es el descenso progresivo de la presión sistólica con leve
aumento de la frecuencia cardíaca. En la fase siguiente hay una caída brusca
dela presión arterial con BRADICARDIA (en los adultos es el ritmo cardíaco
menor a 60latidos por minutos). Se puede desencadenar en el momento de la
ven puntura, con mayor frecuencia si el paciente está sentado.
B) Manifestaciones causadas por (actores psicológicos o respuestas
neurofisiológicas:
1) ASTENIA
Falta o decaimiento de las fuerzas.
2) SUDORACIÓN
Tratamiento: darle al donante toallas de papel o húmedas.
3) VÉRTIGO
Sensación de inseguridad y miedo que produce al acercarse al borde de una
altura o imaginarse en él.
4) PALIDEZ
Pérdida o disminución del color rosado de la piel humana.
5) NAÚSEAS y VOMITOS
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Malestar que se siente en el estómago cuando se requiere vomitar o
repugnancia a algo. Tratamiento: Colocar al donante en la posición más
cómoda posible
HEMATOMAS
, en el Tejido Celular Subcutáneo, a veces muy extendidos, generalmente sin
importancia; a nivel de las Venas superficiales (perivenosos) Muy frecuentes
en niños y ancianos, favorecidos por su estructura anatómica. Cuando la
punción es de tipo arterial, antes o después de introducir la aguja en la vena,
hay también extravasación sanguínea y FENÓMENOS ISQUÉMICOS
distales, pasajeros durables. Se puede comprobar la punción arterial por los
latidos, el color rojo vivo de la sangre, la velocidad aumentada de salida, etc.
Atención del Donante después de la extracción.
1. Comprimir el sitio de la venopunción.
2. Mantener al donante recostado, en observación, durante algunos minutos.
3. Si el estado del donante parece satisfactorio, se le permite levantarse y
pasar al área de refrigerio.
4. Dar indicaciones al donante a seguir después de la extracción.
Post-donación: el personal responsable le indicará que puede levantarse, y
le servirá un refrigerio (si se cuenta con ello.
Serológicas
86
Pruebas inmunohematologicas
AUTOEXCLUSIÓN
La autoexclusión es una alternativa que tiene la persona que llega a los
servicios de banco de sangre, con la intención de donar sangre o posdonación,
que le permite decidir responsablemente y de forma confidencial, excluir su
sangre o componente sanguíneo para la transfusión, porque reconoce que
ésta o éstos pueden ser perjudiciales para la persona que será transfundida
(receptor), debido a una posible conducta de riesgo o a su propio estado de
salud, mediante los mecanismos siguientes
1. Posterior a la información generalmente proporcionada de forma oral,
escrita o audiovisual en el servicio de Bancos de Sangre.
2. Posterior a la donación, llenando la ficha para ese fin proporcionado en la
entrevista, notificando que su sangre no es apta para transfusión y
depositándolo en el buzón respectivo
SISTEMA DEL REGISTRO
Los registros son la evidencia de las actividades realizadas, y es
necesaria
su conservación, porque servirán de elemento de consulta para la toma
de
decisiones, y realizar controles para garantizar la trazabilidad de la
sangre y los
hemocomponentes obtenidos en los Bancos de Sangre
87
9
BASE LEGAL
CODIGO DE SALUD
LEY DE PREVISION DE RIESGO EN LOS LUGARES DE TRABAJO
LEY DE PREVISION Y CONTROL DE LA INFECCION PROVOCADA
POR VIH
REGLAMENTO TECNICO SALVADOREÑO DE BUENAS PRACTICAS EN
LABORATORIO CLINICI (RTS-BPLBC)
NORMA TÉCNICA SALVADOREÑA PARA EL MANEJO DE BIOINFECCIOSOS
ESTANDARES DE TRABAJO PARA BANCO DE SANGRE
89
ESTANDAR NACIONAL PARA BANCOS DE SANGRE
90
BIOSEGURIDAD
• Se define Bioseguridad como el conjunto de medidas
preventivas destinadas a protegerla salud de los trabajadores
de los riesgos delos agentes biológicos, físicos, químicos,
radiactivos y otros, así como también de los pacientes y del
medio ambiente
Principios
Universalidad: Toda persona o líquido corporal es potencialmente infectante.
Utilización de barreras: Que eviten el contacto con sangre y líquidos
corporales contaminados.
Medios de eliminación de material contaminado (procedimientos de
asepsia antisepsia y dispositivos
91
VIH
92
Qué se analiza? … los RIESGOS
Riesgo es la probabilidad que tiene un individuo de generar o
desarrollar efectos adversos a la salud bajo condiciones de exposición
a situaciones de peligro.
Los accidentes pueden ocurrir porque el riesgo cero no existe, por ello
las normas de seguridad deben estar correctamente establecidas y no
deben descuidarse nunca.
Tipos de riesgos en el laboratorio:
RIESGO FÍSICO
Está relacionado con factores ambientales y depende de las características físicas de los objetos que
pueden actuar sobre los tejidos y órganos de las personas produciendo un efecto nocivo.
la carga física,
el ruido,
la iluminación,
las radiaciones,
la temperatura,
las vibraciones
RIESGO QUÍMICO
Probabilidad de que un contaminante químico pueda entrar en contacto con personas o con el medio
ambiente y genere consecuencias adversas
Conocer las características peligrosas asociadas a los compuestos químicos para saber como trabajar con
ellos, almacenarlos, transportarlos, descartarlos, etc.
93
Tóxicos
Reactivos
Radioactivos
Corrosivos
Inflamables
Explosivos
RÓTULO o ETIQUETA Es la primera información que recibe el usuario y es la que permite identificar el
producto en el momento de su utilización
RIESGO BIOLÓGICO
Probabilidad de que material de origen biológico entre en contacto con
un receptor (humanos, animales, plantas, o el medio ambiente) y
genere consecuencias adversas para su salud o para el medio
ambiente.
Material Biológico:
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aspiración de secreciones, toses, estornudos, corte de piezas, etc. Ej. TBC;
Sarampión etc.
VÍA DIGESTIVA (FECAL-ORAL): Por ingestión accidental, al pipetear con la
boca, al comer, beber, fumar o maquillarse en el lugar de trabajo Ej.: Hepatitis
A
VÍA SANGUÍNEA, POR PIEL O MUCOSAS: Como consecuencia de
pinchazos, mordeduras, cortes, erosiones, salpicaduras, etc. Ej. : VIH, varicela
etc.
AGENTES BIOLÓGICOS Y AIRE INTERIOR
• Los microorganismos más preocupantes del aire interior son las
bacterias, los virus y los hongos, sin olvidar a los ácaros del polvo,
susceptibles todos ellos de generar infecciones en el ser humano
• Humidificadores
• Ciertos microorganismos pueden producir metabolitos tóxicos o irritantes
y las esporas fúngicas que provocan alergias e hipersensibilidad
CONJUNTIVAL
Salpicaduras de materiales infecciosos en los ojos
Transferencia de microorganismos a los ojos mediante dedos
contaminados
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Se suelen describir cuatro niveles de contención o de seguridad biológica, que consisten
en la combinación, en menor o mayor grado. Cada combinación está específicamente
dirigida al tipo de operaciones que se realizan, las vías de transmisión de los agentes
infecciosos y la función o actividad del laboratorio. Los niveles de riesgo de bioseguridad
que pueden ser encontrados en el área de trabajo son:
Nivel 1:
Trabajo que involucra a agentes de peligro potencial mínimo para el personal y el medio
ambiente. Representa un sistema básico de contención que se basa en prácticas
microbiológicas estándar sin ninguna barrera primaria o secundaria especialmente
recomendada, salvo una pileta para lavado de manos.
Nivel 2:
Trabajo que involucra a agentes de moderado peligro potencial para el personal y el
medio ambiente. Es adecuado cuando se trabaja con sangre derivada de humanos,
fluidos corporales, tejidos, etc. Donde puede desconocerse la presencia de un agente
infeccioso.
La mayoría de trabajos con sangre requiere de este nivel de bioseguridad. Los riesgos
primarios del personal que trabaja con estos agentes están relacionados con exposiciones
accidentales de membranas mucosas o percutáneas, o ingestión de materiales
infecciosos. Debe tenerse especial precaución con agujas o instrumentos cortantes
contaminados. Si bien no se ha demostrado que los organismos que se manipulan de
rutina en el Nivel de Bioseguridad 2 sean transmisibles a través de la vía de aerosoles, los
procedimientos con potencial de producir aerosoles o grandes salpicaduras -que pueden
incrementar el riesgo de exposición de dicho personal- deben llevarse a cabo en equipos
de contención primaria o en dispositivos tales como un BSC o cubetas centrífugas de
seguridad
Se deben utilizar las demás barreras primarias que correspondan, tales como máscaras
contra salpicaduras, protección facial, delantales y guantes. Sé debe contar con barreras
secundarias, tales como piletas para lavado de manos e instalaciones de
descontaminación de desechos a fin de reducir la contaminación potencial del medio
ambiente.
Nivel 3:
Trabajo que involucra a agentes que pueden causar enfermedades serias o letales como
resultado de la exposición. Trabajo con agentes exóticos o indígenas con potencial de
transmisión respiratoria, y que pueden provocar una infección grave y potencialmente
letal. Se pone mayor énfasis en las barreras primarias y secundarias. Al manipular
agentes del Nivel de Bioseguridad 3 se pone mayor énfasis en las barreras primarias y
secundarias infeccioso.
Nivel 4:
Trabajo con agentes peligrosos o tóxicos que representan un alto riesgo individual de
enfermedades que ponen en peligro la vida, que pueden transmitirse a través de
aerosoles y para las cuales no existen vacunas o terapias disponibles. Los riesgos
principales para el personal que trabaja con agentes del Nivel de
Bioseguridad 4 son la exposición respiratoria a aerosoles infecciosos, la exposición de
membranas mucosas o piel lastimada a gotitas infecciosas y la auto inoculación.
Todas las manipulaciones de materiales de diagnóstico potencialmente infecciosos,
implican un alto riesgo de exposición e infección para el personal de laboratorio, la
comunidad y el medio ambiente
96
Debe contar con la indumentaria de protección adecuada y conocer su correcto
uso.
El laboratorio debe tener un manual de procedimientos apropiado.
Qué es un EPI?
Equipos de Protección Individual (EPI) como “cualquier equipo destinado a ser llevado o
sujetado por el trabajador para que le proteja de uno o varios riesgos, que puedan
amenazar su seguridad o su salud en el trabajo, así como cualquier complemento o
accesorio destinado a este fin.
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En el banco de sangre debe tener recipientes para corto punzantes, para descartar bolsas
con sangre, y material contaminado,(bolsa roja),también para desechos comunes (bolsa
negra)
VIRUS DE LA HEPATITIS B
Sobrevida fuera del huésped: El VHB puede sobrevivir en la sangre y los fluidos o
sustancias corporales fuera del organismo. En sangre seca sobrevive por períodos largos
(semanas). Es estable a temperatura ambiente por 7 días a 25° C en superficies de
trabajo en sangre seca.
En cadáveres refrigerados puede sobrevivir algunas semanas.
Inactivación física: Es estable a 37° C por 1 hora y 56° C por 30 minutos, pero no es
estable a temperaturas superiores a 60° C. Estable por años –70° C.
Es estable a pH 2.4 sobre 6 horas (algunos virus pierden su capacidad infectante).
Antígeno de Superficie de Virus de Hepatitis B (HBsAg) no se destruye por Radiación
Ultravioleta en productos sanguíneos.
Susceptibilidad a desinfectantes: Es susceptible a varios desinfectantes Hipoclorito
de sodio al 1% , Etanol al 70%, Glutaraldehído alcalino al 2%, Formaldehído.
99
Esquema de vacunación
Un esquema de vacunación conveniente: 0, 1, 6 meses
100
10 Separación y Preparación de componentes sanguíneos,
(fraccionamiento)
Objetivos
101
Deben existir datos de validación que demuestren que el método de transporte
conserva la sangre dentro del margen de temperatura especificado durante
todo el período de transporte.
Preparación de componentes
102
Tipos de bolsas colectoras de sangre
103
SOLUCIONES ANTICOAGULANTES PRESERVANTES
104
BOLSA DOBLE (una sola centrifugada)
105
BOLSA TRIPLE O CUADRUPLE SIN SOLUCIONES ADITIVAS
106
Primera fase centrifugación suave, segunda fase centrifugación intensa
107
Sistemas de fraccionamiento
Sistemas TOP and TOP
Sistemas TOP and BOTTOM
108
109
110
111
112
Primera fase centrifugación intensa segunda fase,
centrifugación suave
113
Crioprecipitado
Se Obtienen de un plasma fresco congelado que se sometió a un congelamiento
brusco de -70 ºC y que se descongelo en refrigeración de 2 a 4 grados centígrados se
centrifuga a 3000 rpm a 4 grados centígrados, se dejan en 20 mL de plasma, también
puede dejar el precipitado sin plasma, pero tendrá que reconstituirlo con 20 mL de
ssn al momento de usarlo
AFERESIS
La palabra aféresis proviene del griego
«aphaíresis» y significa «separar» o «remover» por la fuerza.
Proceso mediante el cual se separa la sangre de un individuo en sus
componentes permitiendo la retención de uno o más de ellos retornando los
restantes.
Puede ser paciente o donante.
¿Cómo lo hacen estos equipos? Por medio del principio de
centrifugación
Tipos de aféresis
Donantes
Pacientes
114
1. Centrifugación
A. De flujo continuo: Este equipo extrae, procesa, retorno y reemplazo de
líquidos a la vez.
Sistema Cobe Spectra
B. De flujo discontinuo: Extrae y procesa luego retorno y reemplazo
Sistema Haemonetic, Trima accel
OBJETIVOS DE LA LEUCORREDUCCIÓN
Disminuir la concentración de las células presentadoras de antígenos
(dendríticas y monocitos) y linfocitos
Disminuir la posibilidad de injerto contra huésped (EICH)
Disminuir la incidencia de CMV y otros patógenos intraleucitarios.
CONCENTRADO DE HEMATIES
• On - Line o prealmacenamiento
• Borde del lecho
CONCENTRADO DE PLAQUETAS
• On – Line
• Borde del lecho
PLASMA
• Antes del congelamiento
115
11 Conservación de la sangre
116
• Los equipos destinados al almacenamiento de productos sanguíneo no se
debe de almacenar reactivos ni muestras
• No se debe almacenar alimentos bebidas o materiales contaminados dentro
de los equipos de almacenamiento de hemocomponentes
• Uso de guantes al manipular los hemocomponentes
117
Anticoagulantes usados
118
119
120
121
122
CONTROL DE CALIDAD DE COMPONENTES
123
• Cultivo bacteriano
• Si es leucoreducido (recuento de glóbulos blancos)
Determinación de Volumen:
Para la determinación del volumen es importante que se utilice una balanza
calibrada, que se conozcan los pesos de las bolsas vacías y la densidad de
los componentes sanguíneos. El peso de las bolsas vacías debe ser
determinado por cada banco de sangre, teniendo en cuenta que se pueden
presentar variaciones de peso entre cada cambio de lote.
Procedimiento:
-Pesar el componente sanguíneo
-Registrar el peso de la unidad completa: gramos (gr).
Cálculo:
124
CALIDAD DE LOS HEMATIES
Recuento de leucocitos
Concentrado plaquetarios
• Volumen
• pH
• Cultivo bacteriológico
• Recuento de plaquetas
• Recuento de glóbulos bancos
• aspecto
Crioprecipitado
• Determinación del factor VIII y Fibrinógeno en Crioprecipitado
• Cultivo bacteriológico
126
127