Michaelis Menten

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REACCIONES ENZIMÁTICAS

EXPRESIÓN DE MICHAELIS – MENTEN PARA LEY DE


VELOCIDAD
Ejemplo
𝐸+𝑆 →𝑃+𝐸

𝑘3 𝑊 = 𝑘3 ′

Michaelis - Menten

11/05/2020 INGENIERIA DE REACCIONES 2


Michaelis - Menten
• Biografía
http://umich.edu/~elements/5e/09chap/summary-
biography1.html

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Michaelis - Menten
𝑘3 𝑊 = 𝑘3′ = 𝑘𝑐𝑎𝑡
¿qué significa que 𝑆 ≫ 𝐾𝑀 ?
¿cómo queda la expresión cuando 𝑆 ≫ 𝐾𝑀 ?

−𝑟𝑆 = 𝑘𝑐𝑎𝑡 (𝐸𝑡 )

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Michaelis - Menten
𝑘3 𝑊 = 𝑘3′ = 𝑘𝑐𝑎𝑡

Número de recambio: Número de moléculas de sustrato que se convierten


en producto en un intervalo de tiempo sobre una molécula de enzima-
única, cuando la enzima esta saturada con el sustrato, es decir, todos os
sitios activos de la enzima están ocupados(𝑆) ≫ 𝐾𝑀

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Michaelis - Menten
𝑘3 𝑊 = 𝑘3′ = 𝑘𝑐𝑎𝑡
Número de recambio.

Ejemplo: El número de recambio para la descomposición de


hidrogeno-peróxido H2O2, por la enzima catalasa es de 40x106 s-1.
40 millones de moléculas de H2O2 se descomponen cada
segundo sobre una molécula de enzima única saturada con
H2O2.
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Michaelis - Menten

𝑚𝑜𝑙
𝐾𝑚 Constante de Michaelis,
𝑑𝑚3
medición de la atracción de la
enzima al sustrato, constante de
afinidad

Ejemplo: Para la descomposición de hidroperóxido (catalasa) es


1.1M y para chymotrypsin 0.1 M

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Michaelis - Menten
Velocidad de reacción
máxima para una
concentración de
enzima dada

𝑘𝑐𝑎𝑡 𝐸𝑡 = 𝑉𝑚á𝑥

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Michaelis - Menten
Velocidad de reacción máxima para una concentración de
enzima dada

Gráfica de
Michaelis –
Menten para una
concentración de
enzima dada

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Michaelis - Menten
𝐾𝑀 ≫ (𝑆)
https://padlet.com/amgarciamo/l4gomlha7fdgei45
Michaelis - Menten
𝑉𝑚á𝑥 (𝑆)
𝐾𝑀 ≫ (𝑆) −𝑟𝑆 ≅
𝐾𝑚
Michaelis - Menten
𝑉𝑚á𝑥 (𝑆)
𝐾𝑀 ≫ (𝑆) −𝑟𝑆 ≅
𝐾𝑚

(𝑆) ≫ 𝐾𝑚

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Michaelis - Menten
𝑉𝑚á𝑥 (𝑆)
𝐾𝑀 ≫ (𝑆) −𝑟𝑆 ≅
𝐾𝑚

(𝑆) ≫ 𝐾𝑚 −𝑟𝑆 ≅ 𝑉𝑚á𝑥

Gráfica de
Michaelis -
Menten

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Gráfica de Michaelis – Menten: KM

𝑉𝑚á𝑥
−𝑟𝑆 =
2

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Gráfica de Michaelis – Menten: KM

𝑉𝑚á𝑥
−𝑟𝑆 =
2

𝑉𝑚á𝑥 𝑉𝑚á𝑥 (𝑆1/2 )


−𝑟𝑆 = =
2 𝐾𝑚 + (𝑆1/2 )

𝐾𝑚 = (𝑆1/2 )
𝐾𝑚 = (𝑆1/2 )

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Parámetros de Michaelis - Menten

Función de la
concentración total
de la enzima
𝑘𝑐𝑎𝑡 𝐸𝑡 = 𝑉𝑚á𝑥

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Comparar eficiencias catalíticas

Para comparar eficiencias: 𝑘𝑐𝑎𝑡 /𝐾𝑀

𝑘𝑐𝑎𝑡
= 108 − 109 𝑙𝑖𝑚𝑖𝑡𝑎𝑑𝑜 𝑝𝑜𝑟 𝑑𝑖𝑓𝑢𝑠𝑖ó𝑛
𝐾𝑀

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Michaelis - Menten
Ejemplo 7-3
Problema 7-11 (3ra y
4ta Edición)

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Ejercicio catalasa: Reacción
• https://padlet.com/amgarciamo/l4gomlha7fdgei45

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Ejercicio de práctica

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Ejercicio catalasa: Reacción

Enzima: 𝑐𝑎𝑡𝑎𝑙𝑎𝑠𝑎
Sustrato: 𝐻2 𝑂2
Productos: 𝐻2 𝑂 + 𝑂2

Intermedia: 𝑐𝑎𝑡𝑎𝑙𝑎𝑠𝑎 ∙ 𝐻2 𝑂2
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Ejercicio catalasa: Reacción

𝑘3
𝑐𝑎𝑡𝑎𝑙𝑎𝑠𝑎 + 𝐻2 𝑂2 ⇌ 𝑐𝑎𝑡𝑎𝑙𝑎𝑠𝑎 ∙ ∗
𝐻2 𝑂2 → 𝐻2 𝑂 + 𝑂2 + 𝑐𝑎𝑡𝑎𝑙𝑎𝑠𝑎

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Ejercicio catalasa: Constantes de Michaelis - Menten

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Reacción enzimática en reactor batch
Enzima: 𝑐𝑎𝑡𝑎𝑙𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑁𝑠
Sustrato: 𝑯𝟐 𝑶𝟐 − = −𝑟𝑠 𝑉
Productos: 𝐻2 𝑂 + 𝑂2 𝑑𝑡
Intermedia: 𝑐𝑎𝑡𝑎𝑙𝑎𝑠𝑎 ∙ 𝐻2 𝑂2 ∗
𝑑𝑆
− = −𝑟𝑠
𝑑𝑡
𝑆 𝑆0
𝑑𝑆 𝑑𝑆
𝑡=න − =න
𝑆0 −𝑟𝑆 𝑆 −𝑟𝑆
𝑆0 𝐾𝑀 +𝑆
t= ‫𝑆𝑑 𝑆 𝑉 𝑆׬‬
𝑚á𝑥
𝐾𝑀 𝑆0 𝑆0 − 𝑆
𝑡= 𝑙𝑛 +
𝑉𝑚á𝑥 𝑆 𝑉𝑚á𝑥
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Reacción enzimática en reactor batch
𝐾𝑀 𝑆0 𝑆0 − 𝑆 (𝑆0 − 𝑆) 1 𝑆0
𝑡= 𝑙𝑛 + 𝑉𝑚á𝑥 − = 𝐾𝑀 𝑙𝑛
𝑉𝑚á𝑥 𝑆 𝑉𝑚á𝑥 𝑡 𝑡 𝑆

𝑆 𝑉𝑚á𝑥 1 (𝑆0 − 𝑆) 1 𝑆0
𝐾𝑀 𝑙𝑛 0 + (𝑆0 − 𝑆) − = 𝑙𝑛
𝑡= 𝑆 𝐾𝑀 𝐾𝑀 𝑡 𝑡 𝑆
𝑉𝑚á𝑥
𝑏 + 𝑚𝑥 = 𝑦
𝑆0
𝐾𝑀 𝑙𝑛 + (𝑆0 − 𝑆)
𝑉𝑚á𝑥 = 𝑆
𝑡

𝐾𝑀 𝑆0 (𝑆0 − 𝑆)
𝑉𝑚á𝑥 = 𝑙𝑛 +
𝑡 𝑆 𝑡
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Ejercicio catalasa

1 𝑆0 𝑉𝑚á𝑥 1 (𝑆0 − 𝑆)
𝑙𝑛 = −
𝑡 𝑆 𝐾𝑀 𝐾𝑀 𝑡
y = -28.208x + 0.018

1 𝑆0 (𝑆0 − 𝑆) KM 0.035451 mol/l


𝑙𝑛 = 0.018 − 28.208
𝑡 𝑆 𝑡 Vmáx 0.000638 mol/min.l
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Ejercicio catalasa: Expresión Michaelis Menten

6.38𝑥10−4 (𝑆)
−𝑟𝑆 =
0.035 + (𝑆)

KM 0.035451 mol/l

Vmáx 0.000638 mol/min.l

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Ejercicio catalasa

1 𝑆0 𝑉𝑚á𝑥 1 (𝑆0 − 𝑆) 1 0.02 (0.02 − 𝑆)


𝑙𝑛 = − 𝑙𝑛 = 0.0054 − 28.208
𝑡 𝑆 𝐾𝑀 𝐾𝑀 𝑡 20 𝑆 20
1 𝑆0 (𝑆0 − 𝑆)
𝑙𝑛 = 3 ∗ 0.018 − 28.208
𝑡 𝑆 𝑡

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Ejercicio catalasa
1 𝑆0 𝑉𝑚á𝑥 1 (𝑆0 − 𝑆)
𝑙𝑛 = −
𝑡 𝑆 𝐾𝑀 𝐾𝑀 𝑡
y = -28.208x + 0.018

1 𝑆0 (𝑆0 − 𝑆)
𝑙𝑛 = 0.018 − 28.208
20 𝑆 20

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