Artículo Informe Lab Mutaciones en Drosophila Melanogaster

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Caracterización fenotípica y dimorfismo sexual en los mutantes White, Yellow, Black, Vestigial

y tipo silvestre de la mosca de la fruta Drosophila melanogaster.


 
Edna Sofía Gómez C1 Diego Andrés Ruiz Muñoz2
1
Estudiante de 7mo semestre de Biología Marina 
2
Estudiante de 7mo semestre de Biología Ambiental 
Universidad de Bogotá Jorge Tadeo Lozano 
Facultad de Ciencias e Ingeniería 
Departamento de Ciencias Biológicas y Ambientales 
1
ednas.gomezc@utadeo.edu.co 2diego.ruizm@utadeo.edu.co 

 
Resumen.  
Drosophila melanogaster, conocida coloquialmente como la mosca de la fruta, es un modelo
biológico en investigaciones genéticas debido a su corto ciclo de vida, fácil mantenimiento en el
laboratorio, número reducido de cromosomas, pero gran número de descendientes y se conoce el
mapa completo del genoma. Por lo tanto, es muy importante en el estudio de mutaciones. Por lo cual,
en este informe se llevo a cabo la caracterización a nivel fenotípico y de dimorfismo sexual para las
mutaciones White (w), Yellow (y), Black (b), y Vestigial (vg) en relación con el tipo silvestre de esta
especie, suministradas en el laboratorio.
Entonces, se observaron los individuos adormecidos con éter de cada mutación y el tipo silvestre para
evitar su fuga y así poderlos analizar en un estereoscopio. Observando que la caracterización
fenotípica para White (w) fue ojos blancos, Yellow (y) cuerpo amarillo, Black (b), cuerpo negro y
Vestigial (vg) alas reducidas casi al mismo tamaño de los halterios. Referente al dimorfismo sexual,
se diferencio que las hembras son de mayor tamaño, poseen un abdomen puntiagudo de coloración
claro con 7 segmentos y los machos son pequeños, de abdomen redondo, oscuro con 5 segmentos y
peine sexual.

Palabras clave: Drsophila melanogaster, caracterización, mutación, herencia mendeliana,


cromosomas.

Abstract 

Drosophila melanogaster, known colloquially as the fruit fly, is a biological model in genetic research
because of its short life cycle, easy maintenance in the laboratory, small number of chromosomes, but
large number of descendants and the complete map of the genome is known. Therefore, it is very
important in the study of mutations. Therefore, in this report we carried out the characterization at the
phenotypic and sexual dimorphism level for the White (w), Yellow (y), Black (b), and Vestigial (e.g.)
mutations in relation to the wild type of this species, supplied in the laboratory.
The ether-numbed individuals of each mutation and the wild type were then observed to prevent their
escape so that they could be analyzed on a stereoscope. Observing that the phenotypic
characterization for White (w) was white eyes, Yellow (y) yellow body, Black (b), black body and
Vestigial (e.g.) wings reduced to almost the same size as the halter. Regarding the sexual dimorphism,
it was differentiated that the females are larger, have a pointed abdomen of light color with 7
segments and the males are small, rounded abdomen, dark with 5 segments and sexual comb.

Key words. Drsophila melanogaster, characterization, mutation, Mendelian inheritance,


chromosomes
 
 

Introducción. 
Drosophila melanogaster, conocida coloquialmente como la mosca de la fruta o del vinagre, debido a
que se alimenta de frutas en proceso de fermentación y descomposición como manzanas, bananas,
entre otros. (Perveen, 2018). Es una especie de díptero braquícero de la familia Drosophilidae,
perteneciente al phyllum Arthropoda, es holometábolo, es decir, tiene metamorfosis compleja.

Su ciclo de vida tiene una duración de 10 a 12 días a una temperatura de 25°C. Comienza alrededor de
un día desde la fecundación, el organismo permanece como embrión, luego de este periodo el huevo
se rompe y de él emerge una larva que atraviesa tres estadios sucesivos de una duración de un día el
primero y un día el segundo, hasta aumentar de tamaño. En el tercer estadio larvario, que tiene una
duración 2-3 días, la larva se vuelve inmóvil y secreta un nuevo tipo de cutícula externa, y se
encapsula en una estructura denominada pupario en el cual permanece por 5 días (periodo el que
transcurre la metamorfosis), transformándose así en una pupa. Desde los nueve días desde que se dio
la fecundación del pupario emerge una mosca adulta como se puede apreciar en la figura 1. (Curtis et
al, 2008)

Figura 1. Ciclo de vida de Drosophila melanogaster. (Curtis et al, 2008)

Genéticamente, D. melanogaster, posee 4 pares de cromosomas (2n=8), de estos cromosomas unos


son politénicos, es decir, sufren rondas repetidas de duplicaciones, pero sin separarse, proceso
conocido como ENDOMITOSIS (Karageorgiou, 2017). Los tipos de cromosomas que tiene esta
especie son: un par de cromosomas sexuales (dos cromosomas X para las hembras, uno X y un Y para
los machos), juntos denominados cromosoma 1, junto con tres pares de autosomas (cromosomas no
sexuales) marcados del 2 al 4. El cromosoma 4 es el más pequeño y también se llama cromosoma de
puntos. Representa solo el 2% del genoma de la mosca. (Elgin et al, 2013). Además,
aproximadamente el 61 % de los genes de enfermedades humanas que se conocen tienen una
contrapartida identificable en el genoma de D, melanogaster, y el 50 % de las secuencias proteínicas
de la mosca tiene análogos en los mamíferos (Reiter et al, 2001).
Por lo tanto, es un organismo modelo utilizado en investigación genética durante más de cien años,
debido a que se emplearon algunos análisis genéticos clásicos de mutaciones y mapeo de mutantes a
cromosomas específicos en Drosophila para determinar las reglas básicas para la transmisión
de genes. Tal fue el caso de TH Morgan y sus estudiantes AH Sturtevant, CB Bridges y HJ Muller,
que llevaron a cabo una serie de análisis genéticos de Drosophila que los llevaron a formular la teoría
cromosómica de la herencia, porque él en 1910, observo que el color de los ojos de una de las moscas
no era el tradicional rojo ladrillo sino blanco y estaba presente en un macho. Cuando cruzó este
mutante con una hembra de ojos rojos, su progenie (la generación F1) estuvo constituida en su
totalidad por individuos de ojos rojos. Después, estas moscas fueron cruzadas entre sí para producir la
generación F2, en la que aparecieron los rasgos recesivos de Mendel. Entonces reapareció el fenotipo
de los ojos blancos, pero solo en cerca de la mitad de los machos y en ninguna de las hembras. Este
resultado parecía indicar que el rasgo del color de los ojos estaba ligado al sexo. (Herdenson, 2014).
Este importante logro condujo al Premio Nobel de Morgan de 1933 (Fernández, et al., 2007).

Por eso, D. melanogaster, se convirtiéndo en uno de los individuos más valiosos en biología, biología
del desarrollo, genética, medicina, enfermedades humanas e investigación con células madre.
(Perveen, 2018); debido a que es fácil de manipular y de mantener en el laboratorio, tiene un número
de cromosomas reducido, se conoce el mapa completo de su genoma, posee un ciclo de vida corto,
son muy fértiles, por lo cual, tienen gran número de descendencia, gran variedad de mutantes (más de
1000 descritos) y presentan cromosomas politécnicos (Karageorgiou, 2017). Las investigaciones van
desde el modelado de enfermedades humanas hasta la disección de la morfogénesis celular y el
comportamiento y el envejecimiento, este tema examina los usos actuales de moscas, y la influencia
de la investigación de moscas en otros modelos (Tolwinski, 2017).

Gracias al descubrimiento de Morgan y posteriores investigaciones, de D. melanogaster, se pudieron


obtener diversidad de mutantes que modificaban en más de un aspecto las leyes mendelianas
(Perveen, 2018). Las mutaciones que se trabajaron en el laboratorio fueron: dos mutaciones recesivas
ligadas al sexo: White (w), se caracteriza por la ausencia de pigmento en los ojos y Yellow (y), por ser
una pigmentación del cuerpo amarilla (Karageorgiou, 2017); y dos mutaciones recesivas autosómicas:
Black (b), que presenta pigmento negro sobre el cuerpo, los tarsos y a lo largo de las venas de las alas,
oscureciéndose con la edad y Vestigial (vg) que presenta alas y halterios muy reducidos (UNMSM,
2019). Por consiguiente, este informe tiene como objetivo caracterizar las expresiones fenotípicas y
dimorfismo sexual presente en los individuos de las 4 mutaciones de D. melanogaster, en relación con
sus individuos tipo silvestre.

Materiales y Métodos. 
En el laboratorio de Óptica e Histología (717-M5) de la sede Bogotá de la Universidad Jorge Tadeo
Lozano, se llevo a cabo la observación y caracterización de las 4 mutaciones de D. melanogaster, en
relación con el tipo silvestre de la especie, que se encontraban almacenadas cada grupo en un frasco
de vidrio sellado con una gasa y en su interior contenía un medio de cultivo compuesto por agar,
banano, levadura, agua y antimicótico. Para su análisis bajo el estereoscopio marca Carl Zeiss™
referencia Stemi™ DV4, se durmieron los individuos humedeciendo un algodón con eter previniendo
de no haberle agregado en exceso debido a que esto podía matarlos instantaneamente y se introdujo en
un embudo que posteriormente fue puesto en la "boca" del frasco, teniendo en cuenta que este
estuviese en posición horizontal, con el fin de que las moscas al quedar anestesiadas, no se pegarán al
medio de cultivo porque podrían sufrir lesiones o la muerte y además fuera más difícil su extracción.
Cuando las moscas ya se encontraron anestesiadas, se depositaron en una caja de petri con ayuda de
un pincel y se observaron al estereoscopio, teniendo en cuenta de no permanecer tanto tiempo con la
lampara encendida debido a que la intensidad de esta, podía quemarles las alas a los especímenes.
Finalmente, se hizo la caracterización fenotípica teniendo en cuenta las características de cada
mutación y de dimorfismo sexual, teniendo en cuenta el tamaño (mayor para las hembras y menor
para los machos), la forma (puntiagudo en hembras y redondeado en machos), pigmentación (clara en
hembras y oscuro en machos) y número de segmentos (5 en hembras y 7 en machos) del abdomen, y
peine sexual (únicamente presente en machos); mediante un registro fotográfico.

Resultados
En los organismos con las respectivas mutaciones y de tipo silvestre, se observaron las siguientes
características fenotípicas: color de ojos, forma y tamaño de las alas y presencia de halterios. En la
mutación Black el color de ojos fue rojo, cuerpo de coloración negra y alas largas con respecto al
cuerpo. Los mutantes white presentaron coloración corporal clara (amarillo pardo), ojos blancos y alas
largas con respecto al cuerpo. Para los individuos con con la mutación vestigial se observó una
coloración amarillo pardo en el cuerpo, ojos rojos y alas cortas en comparación corporal. Para los
individuos con con la mutación yellow se observó una coloración amarilla brillante en el cuerpo, ojos
rojos y alas largas. En cuanto al fenotipo de tipo silvestre, la coloración corporal presentada fue
amarillo pardo, ojos rojos y alas largas y lisas con respecto al cuerpo. 

Tabla 1. Comparación fenotípica de mutantes con silvestre de Drosophila melanogaster. 


Color del cuerpo Color de los Alas Halterios
ojos

Silvestre Amarillo pardo Rojos Largas y lisas Presente

Black Negro Rojos Largas Presente

White Amarillo pardo Blancos Largas Presente

Vestigia Amarillo pardo Rojos Cortas  Presente


l

yellow Amarillo claro brillante Rojos largas Presente

Para la diferenciación sexual se observó una mayor segmentación abdominal en hembras (5


segmentos) y menor en machos (7). Además, s se observó presencia de peines sexuales en el primer
par de patas para machos en todas las mutaciones y en el tipo silvestre. 

Tabla 2. Morfología Sexual en  Drosophila melanogaster. 


Sexo Segmentos Peines Sexuales 
abdominales 

White. Macho  3 presente

Hembr 3 -
a

Silvestre Macho  2 presente

Hembra 3 -

Black Macho  3 presente

Hembra 2 -

Vestigia Macho  1 presente


l
Hembra 5 -

Macho 2 Presentes
Yellow Hembra 4 -

Figura 2. Drosophila melanogaster. mutación vestigial. Dimorfismo sexual (hembra con abdomen
longado y macho con abdomen redondeado y terminación oscura).

Figura 3. Drosophila melanogaster. Dimorfismo sexual en sepa Black (derecha). Presencia de


peinecillo sexual (izquierda)
Figura 4. Drosophila melanogaster, mutación white, derecha hembra, izquierda macho. 

Figura 5. Drosophila melanogaster, mutación yellow, derecha hembra, izquierda macho. 

Figura 6. Drosophila melanogaster, silvestre.


Figura 7. Halterios en Drosophila melanogaster, silvestre

Figura 8. Segmentos abdominales (7) en hembras, white (derecha). Segmentos abdominales (5) en


machos y terminación oscura de Drosophila melanogaster

Discusión de resultados.

La diferenciación sexual se evidenció en el tipo silvestre y en todas las mutaciones estudiadas. Las
moscas machos presentan un peine sexual en la articulación basal del tarso del primer par de patas
mostrado en la figura 3, izquierda. (Salcedo, 2010), una coloración oscura en la zona ventral posterior
del abdomen (placa genital) y una terminación redondeada y menor segmentación (5) y tamaño, con
respecto a la mosca hembra (Tabla 2). Las hembras presentan mayor tamaño que los machos, mayor
segmentación abdominal con terminación elongada (figura 8)
Los individuos de tipo silvestre presentan ojos de forma oval de coloración rojiza, alas con bordes
lisos y alargadas que sobrepasan el abdomen. Además presentan una coloración corporal amarilla
(Tabla 2 y figura 6), coincidiendo con las características dominantes y antiguas de la especie según
Griffiths, Wesler Lewontin y Carroll (2008), exceptuando la coloración corporal, que en los
individuos estudiados presentaba color amarillo pardo a diferencia del gris propuesto por estos
autores.
Los mutantes de la sepa Black mostraban ojos rojos y un tamaño de alas al igual que los individuos de
tipo silvestre. Sin embargo la coloración corporal era negra ( Figura 3), explicada por la mutación
autosómica recesiva situada en la posición 48.5 del cromosoma 2 (Phillips, 2015), este gen es
autosómico recesivo y su herencia puede ser transferida a todos los descendientes de una generación,
pero para expresarse requiere dos copias del gen (Forero, 2017).
En cuanto a los individuos de la sepa White (Figura 4), presentaban color del cuerpo y el tamaño de
las alas iguales al tipo silvestre, pero una coloración blancuzca en los ojos como producto del gen
recesivo y ligado al sexo, situado en la posición 1.5 del cromosoma X. Este cambio se presenta debido
a una ausencia del gen white que acoplado con brown y scarlet transportan moléculas de pigmento a
los gránulos que dan el color rojo característico de los ojos de moscas silvestres, esta ausencia impide
la correcta formación de los gránulos y por tanto la expresión del color dejando los ojos blancos
(Salpietro, 2018).
Los individuos con la mutación yellow (figura 5), presentaban una coloración del cuerpo amarilla
brillante muy característica, respecto a los ojos y las alas estos eran comparables al tipo silvestre, la
coloración del cuerpo se a causa de un gen recesivo ligado al sexo.
Por último, la mutación Vestigial (Figura 6), es una variación genética en la forma y tamaño de las
alas, situada en la posición 67 de cromosoma 2, el mutante resultante es autosómico recesivo.
(Tovilla, 2016). Como se observa en la figura 2, los individuos presentan un primer par de alas
pequeño y rugoso, a diferencia de las alas largas y lisas presentes en los individuos silvestres, ya que
la mutación vestigial es una de las llamadas letales dada su pérdida de funcionalidad. Los genes
vestigial y scalloped son los responsables del desarrollo en alas y halterios en D. melanogaster, las
alas no dependen de genes hox mientras Ubx reprime diversos genes entre ellos vestigial, la ausencia
de este gen en las alas impide que se desarrollen correctamente y queden de pequeño tamaño
(Schoborg, 2013),
En cuanto a los halterios, estuvieron presentes en todos los individuos de estudio. (Tabla 2)

Conclusiones

 Existe diferenciación visible de sexos en Drosophila melanogaster.


 Las moscas Silvestres presentan las características de mayor antigüedad genética; ojos rojos,
cuerpo amarillo pardo y alas largas con respecto al cuerpo.
 Las hembras en Drosophila melanogaster presentan el abdomen mayormente segmentado (7
segmentos) y elongado.
 Los machos tienen una coloración oscura en la parte posterior ventral en el abdomen (placa
genital). Poseen abdomen redondeado y con 5 segmentos
 La mutación White presenta decoloración en ojos.
 Los mutantes de la sepa Vestigial, perdieron en su mayoría la funcionalidad en las alas,
debido a su tamaño reducido.
 Los machos presentan peine sexual y son de menor tamaño.

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