INFORME N4 Bioquimica Bacteriana Cultivo de Hongos

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
Facultad de Ingeniería de Minas

Escuela Profesional de Ingeniería Química
MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL
INFORME DE LABORATORIO Nº 4:
‘‘BIOQUIMICA BACTERIANA – CULTIVO DE
HONGOS’’
Presentado por:
- Baca Rojas, Leonard
- Fiestas Girón, Jhonny Paul
- Lazo Torres, Luis Eduardo
- Neyra Valle, Diana Stefany
Docente:
Mcblgo°. Jorge Bermejo Benites
Piura, Perú
2020
‘‘BIOQUIMICA BACTERIANA – CULTIVO DE
HONGOS’’
I. INTRODUCCION:
El presente trabajo trata sobre el reconocimiento de hongos en Agar-Agar, Agar
Sabouraud. Los hongos son microorganismos eucariotas de mayor tamaño y
complejidad que las bacterias.
Según su morfología los hongos se pueden dividir en dos grupos: mohos (hongos
filamentosos) y levaduras. Las levaduras son unicelulares y generalmente presentan
reproducción asexual por gemación. Los mohos presentan una estructura vegetativa
denominada micelio, el cual está formado por una serie de tubos rígidos ramificados,
dentro de los cuales se encuentra el citoplasma multinucleado. Estos tubos reciben el
nombre de hifas. De esta forma a partir de una espora en germinación se desarrolla una
hifa, esta se ramifica y forma un micelio.
El crecimiento del hongo se prolonga hasta que los nutrientes desaparezcan. Las hifas
pueden ser de dos tipos: vegetativas que penetran el substrato con el fin de absorber
nutrientes e hifas aéreas que son las portadoras de las estructuras reproductoras. La
clasificación de los hongos se hace según las características de las hifas, la formación de
esporas asexuales, las estructuras que contienen éstas y la capacidad de producir esporas
sexuales.
II. OBJETIVO:
Objetivo general:
 Procedimiento para ensayos microbiológicos en el cultivo de hongos.
III. MARCO TEÓRICO:
A. HONGOS:
Los hongos incluyen un conjunto de organismos unicelulares así como multicelulares,
micro o macroscópicos. Pertenecen a los organismos procariotas, son heterotrófos,
inmóviles y de reproducción sexual y asexual.
Descripción:
Los hongos crecen fácilmente en la gran mayoría de medios de cultivo; por ello los
medios de cultivo que se utilizan para hongos y levaduras generalmente tienen como
objetivo la purificación (selectivo) o caracterización (diferenciales) de dicho
microorganismo.
El agar más utilizado para el cultivo de hongos es el agar Sabouraund, tanto para
hongos filamentosos como para levaduras.
Poseen gran capacidad de adaptación y pueden desarrollarse sobre cualquier medio o
superficie, tanto en los bosques como en las ciudades. Se reproducen por medio de
esporas, las cuales son diseminadas principalmente por el viento y por el agua. Juegan
un papel descomponedor, ya que transforman la materia orgánica en sustancias más
simples y asimilables por otros seres vivos. Pero también pueden desarrollarse
formando asociaciones de beneficio mutuo con raíces de plantas (micorrizas) y con
algas dando origen a los líquenes, que son organismos totalmente diferentes a las
plantas y a los mismos hongos, mientras que algunos crecen sobre otros seres vivos
produciéndoles enfermedad o incluso la muerte.
Importancia:
Radica en la producción de compuestos de interés comercial y la capacidad de algunos
de provocar micosis.
Los hongos han jugado y juegan un papel muy importante en la medicina, la industria y
la alimentación. La era de los antibióticos se inicia con el descubrimiento de la
penicilina, obtenida a partir del hongo Penicillium notatum; asimismo algunos hongos
son importantes en la industria de quesos, cerveza, vinos y otros; además de la excelente
fuente de vitaminas, proteínas, fibra y minerales que constituyen los hongos
comestibles.
Aunque no se conoce con exactitud el número de especies, hasta ahora se han descrito
aproximadamente 80.000 en todo el mundo. En Costa Rica se conocen alrededor de
unas 2.000 especies, pero se calcula que en su territorio podrían habitar entre 40.000 y
70.000.
Propiedades:
En general para que un hongo crezca en un medio únicamente se requiere: Una fuente
de carbono orgánico y de nitrógeno. Los medios selectivos para hongos tienen la
característica de un pH bajo (5,6) lo que inhibe el crecimiento de la mayoría de las
bacterias; existen medios diferenciales para levaduras, como el caso del agar Biggy el
cual permite la identificación del género Candida, por la reducción del sulfito de
bismuto.
A algunos medios se les adicionan además antibióticos para inhibir el crecimiento
bacteriano.
B. MEDIO DE CULTIVO:
Definición:
Disoluciones de nutrientes utilizados para cultivar y aislar microorganismos en el
laboratorio.
Clasificación:
 Por composición:
Definidos: Se preparan añadiendo agua destilada, cantidades precisas de compuestos
orgánicos o inorgánicos purificados. Se conoce la composición química exacta.
Complejos: Emplean hidrolizados de productos animales o vegetales, como caseína,
carne, extracto de levaduras.
 Por utilización:
Selectivo: Contiene compuestos que inhiben selectivamente el crecimiento de algunos
microorganismos, y favorece el de otros.
Diferencial: Es aquel al que se añade un indicador, normalmente un colorante, para
permitir diferenciación de reacciones químicas particulares que ocurren durante el
crecimiento.
 Por estado físico:
Sólidos: Inmovilizan a las células, permitiéndoles crecer y formar masas aisladas
visibles llamadas colonias.
Líquidos: Se denominan caldos. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la
obtención de una suspensión de una determinada concentración.
C. MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS COMÚNMENTE:
 Agar Sabouraud.
 Agar Neopeptone-glucose-rose Bengal – Aureomycin.
 Agar Czapek (para Aspergillus, penicillium y hongos relacionados).
 Agar Yeast extract-malt extract-glucose.
 Agar Diamalt (para levaduras).
AGAR SABOURAUD:
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial para el aislamiento de hongos y
levaduras. Este medio tiene un alto contenido de glucosa, cloranfenicol y pH acido,
favoreciendo el crecimiento de hongos por sobre el de las bacterias, además a este
medio de cultivo puede agregársele agentes selectivos para el crecimiento (Bailey &
Scott. 2004).
D. MEDIOS NO SELECTIVOS:
 Agar – Dextrosa – Patata (PDA): Medio utilizado en la mayoria de los hongos.

 Agar – Caldo de Guisantes Sacarosado: Medio adecuado para estudiar especies
de Pythium y Phytophyhora.
 Agar – Harina de Avena (OMA): Es utilizado para Pythium sp., Phytophthora
sp., Fusarium sp y Phoma sp.
 Agar Agua (AA): Es un medio muy pobre en nutrientes, pero muy útil para
estudiar fructificaciones debido al escaso crecimiento miceliar. Se utiliza
también para estudiar Rhizoctonia solani.
E. MEDIOS SELECTIVOS:
 P10 VP.: Medio utilizado para aislar Phytophythora spp.

 La vancomicina y la piramicina inhiben, a los hongos pertenecientes a la familia
Pitiaceas. El PCNB inhibe a otros hongos del suelo.
 Komada: Medio selectivo para especies de fusarium. Se pueden diferenciar las
especies del hongo por el color de sus colonias en este medio de cultivo. F.
oxysporum: salmon, F. solani: rojizo, F. roseum: rojo fuerte.
F. RECONOCINIENTO DE HONGOS:
Según M.J. Pelczar y R.D. Reid (1996).
Afirma que los medios de cultivos permiten el crecimiento y desarrollo de
microorganismos, gracias a que proporcionan sustancias nutritivas. Los hongos crecen
bien en medios artificiales y tienen requerimientos nutritivos simples, una fuente de
carbono orgánico, generalmente azúcar, y de nitrógeno suelen ser los elementos
suficientes para obtener un buen crecimiento. Junto a ellos, un soporte sólido, el agar,
permite a los hongos filamentosos el desarrollo del micelo aéreo, donde se localizan las
estructuras reproductoras y el desarrollo de colonias en el caso de las levaduras.
El medio de cultivo más utilizado para los hongos es el medio de Sabouraud que reúne
estas características y un pH de 5,6, que dificulta el crecimiento bacteriano. No es cierto
que los hongos requieran necesariamente para su crecimiento ser cultivados en el medio
de Sabouraud, la mayoría parte de medios de cultivo utilizados en bacteriología lo cual
permite su desarrollo, pero su utilización está consagrada por la costumbre. De hecho, la
mayoría de las descripciones de crecimiento y características morfológicas de las
colonias fúngicas se han hecho sobre el medio Sabouraud.
IV. MATERIALES Y INSTRUMENTOS:

Materiales:
1. Placas Petri
2. Matraz Erlenmeyer
3. Probetas
4. Pinzas
5. Vaso de precipitación
6. Mechero de alcohol
7. Asa de siembra
Equipos:
1. Autoclave
2. Balanza analítica
3. Incubadora
Reactivos
1. Medio de cultivo Agar Sabouraud
2. Agua destilada
V. PROCEDIMIENTO:
1. Recolección de muestras (hongos).

2. Esterilización de las placas Petri a temperatura y tiempos correspondientes.
3. Preparar los medios de cultivo, según instructivos:
Preparación de muestras solidas – Agar Sabouraud
4. Se lee el envase del polvo de la preparación de Agar Sabouraud, según la cual

por cada 1 litro de preparación deben haber 50gr de polvo de preparación y
luego llevar a la autoclave por 15 minutos a 121ºC.
5. Pesar 2.25g de Agar Sabouraud, en un matraz Erlenmeyer y diluir con 80 ml de
agua a fuego lento.
6. Llevar a la autoclave.
7. Una vez transcurrido el tiempo, proceder a enfriar la muestra hasta los 40 ºC.
8. Sucesivamente verter 20 ml a cada placa Petri.
9. Proceder a sembrar los hongos, previamente triturados.
10. Una vez solidificado el agar, se invierte las placas Petri para así incubar a 37°
por 48 horas.
11. Realizar el recuento en las placas Petri.
VI. RECOMENDACIONES:
 En la práctica, se debe tener en cuenta que a la mala manipulación de

instrumentos y reactivos, combinados con altas temperaturas, harán que se corra
el riesgo del no crecimiento de hongos. Se recomienda que para la práctica de
cultivo de hongos, se tenga cuidado al momento de sembrar, con la finalidad de
poder obtener buenos resultados, a fin de poder observar cómo están
estructurados los hongos.
VII. BIBLIOGRAFIA:
 Madigan, M. T., Martinko, J. M., y Parker, J, 2003.Brock Biología de los

Microorganismos. NUTRICIÓN, cultivo y metabolismo microbiano. Madrid.
pp. 118-123
 https://www.cosmos.com.mx/wiki/medios-de-cultivo-para-hongos-y-levaduras-
gdc3.html
 https://prezi.com/qcojujkyfj8d/medios-de-cultivo-para-hongos/
VIII. ANEXOS:

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III. MARCO TEÓRICO:

C. MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS COMÚNMENTE:

 Agar – Dextrosa – Patata (PDA): Medio utilizado en la mayoria de los hongos.

 P10 VP.: Medio utilizado para aislar Phytophythora spp.

IV. MATERIALES Y INSTRUMENTOS:

1. Recolección de muestras (hongos).

4. Se lee el envase del polvo de la preparación de Agar Sabouraud, según la cual

 En la práctica, se debe tener en cuenta que a la mala manipulación de

 Madigan, M. T., Martinko, J. M., y Parker, J, 2003.Brock Biología de los

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