Gamma PeG™

Gamma PeG™
Polyethylene Glycol Additive for Antibody Detection Tests

Polyethylene Glycol Additive for Antibody Detection Tests

Harmful, Preservative: 0.1% Sodium Azide
Do not use if turbid. No U.S. Standard of Potency

CAUTION: THE PACKAGING OF THIS PRODUCT (DROPPER BULB) MAY CONTAIN

DRY NATURAL RUBBER.

Immucor, Inc.
3130 Gateway Drive
Norcross, GA 30071 USA

Immucor Medizinische Diagnostik GmbH

Adam-Opel-Strasse 26 A
63322 Rödermark, GERMANY
3026es-4
.
Polyethylene Glycol Additive for
Antibody Detection Tests Aditivo de polietilenglicol para pruebas de detección de Advertencia: La azida sódica puede reaccionar al plomo y cobre para formar
anticuerpos azidas metálicas altamente explosivas. Si se desecha por el desagüe, debe
añadirse un gran volumen de agua para evitar la acumulación de azidas.

USO PREVISTO: Gamma PeG está indicado como un aditivo para mejorar la CAUTION: The packaging of this PRECAUCIÓN: El envase de este
sensibilidad en la detección de anticuerpos de grupos sanguíneos inesperados. product (dropper bulb) may contain producto (ampolla cuentagotas)
dry natural rubber. puede contener caucho natural
RESUMEN DE LA PRUEBA: Varios grupos de investigadores han informado que seco.
la adición de polietilenglicol a la mezcla de prueba mejora la sensibilidad de las
pruebas en la detección de anticuerpos inesperados clínicamente significativos El formato de la fecha de caducidad se expresa como AAAA-MM-DD (año-mes-
mediante el procedimiento de prueba de antiglobulina indirecta[1,2,3,4,5,6,7]. día).
Asimismo, es un hecho conocido que la incubación de muestras de suero o plasma EXTRACCIÓN Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS: No se requiere una
y de hematíes en entorno iónico reducido aumenta la tasa en la que los anticuerpos preparación especial del paciente con anterioridad a la recolección de la muestra.
de los hematíes de la muestra se unen a los sitios receptores de antígenos Se debe extraer la sangre mediante una técnica aséptica y se debe realizar la
específicos en hematíes[8,9,10,11,12]. En la mezcla de prueba, los hematíes prueba del suero o plasma lo antes posible. Si se produce un retraso en la prueba,
tienden a agregarse hasta cierto punto mediante el polietilenglicol, lo que hace la muestra deberá guardarse a entre 1 y 10 °C. En el caso de los receptores
difícil examinar la prueba de aglutinación directa en cualquier estadio de la prueba. potenciales de transfusiones de sangre, la muestra deberá almacenarse durante no
Como resultado, el procedimiento descansa totalmente en la fase de antiglobulina más de lo que permiten los organismos normativos pertinentes.
para la detección de anticuerpos.
El polietilenglicol se puede utilizar también como aditivo al realizar pruebas a PROCEDIMIENTO:
eluidos. Combs y Telen observaron que la sensibilidad del procedimiento de la Materiales suministrados: Gamma PeG
prueba se mejoraba algunas veces lo suficiente como para permitir la detección de Otros materiales necesarios:Tubos de ensayo (12 × 75 mm o 10 × 75 mm),
anticuerpos en un eluido que eran indetectables por los métodos de detección de pipetas, solución salina isotónica o solución salina isotónica tamponada con fosfato
anticuerpos convencionales[13]. (aproximadamente 15 mM) con un pH 6,5-7,5, baño María o incubadora a 37 °C,
El procedimiento del polietilenglicol tal y como se concibió originariamente emplea temporizador, centrífuga, ayuda óptica (como una lupa, un espejo cóncavo o un
una solución de la sustancia en una solución salina tamponada con fosfato con una microscopio), antiglobulina humana que contenga anti-IgG, y hematíes
fuerza iónica normal. Esto requiere la adición de cuatro gotas a una mezcla de dos sensibilizados a IgG.
gotas de suero o plasma, y una gota de suspensión de hematíes. Al disolver el MÉTODO DE LA PRUEBA: En el contexto de prueba de detección de anticuerpos,
polietilenglicol en un medio de baja fuerza iónica, solo se requieren dos gotas de si se desea se pueden omitir los pasos del 4 al 6 del siguiente método de prueba.
solución para conseguir una sensibilidad mejorada en la detección de anticuerpos No obstante, son importantes al cruzar el suero o plasma receptor con los
IgG. hematíes de donantes potenciales como garantía frente al fracaso a la hora de
PRINCIPIO DE LA PRUEBA: El uso de Gamma PeG, como aditivo de pruebas detectar una incompatibilidad ABO importante, ya que se ha informado de que el
para detectar anticuerpos de grupo sanguíneo, mejora la sensibilidad del método de polietilenglicol no detecta de forma consistente anticuerpos IgM.
procedimiento de detección de anticuerpos y crea un entorno de prueba de baja 1. Etiquete un número adecuado de tubos de ensayo para cada suspensión de
fuerza iónica que aumenta la tasa de captación de anticuerpos durante la hematíes que se vaya a examinar.
incubación. 2. Coloque 2 gotas del suero o plasma (o eluido) que vaya a examinar en cada
uno de los tubos.
REACTIVO: Gamma PeG es una solución de polietilenglicol en una solución de 3. Añada una gota de suspensión de hematíes adecuada, lavada previamente y
baja fuerza iónica que contiene glicina en una concentración isoosmótica. Contiene resuspendida en una solución salina a aproximadamente el 3-4 % en cada tubo
azida sódica al 0,1 % como conservante. adecuado. Los hematíes reactivos se pueden emplear directamente desde el
PRECAUCIONES: vial o según las instrucciones del fabricante. NOTA: Si lo desea, se pueden
Para uso diagnóstico in vitro. Debe conservarse a una temperatura de entre 1 y 10 incubar los tubos a una temperatura ambiente de 5 a 30 minutos.
°C cuando no se utilice. No congelar. No diluir. No utilizar después de la fecha de 4. Mézclelo bien y centrifúguelo durante:
caducidad. Debe hacerse todo lo posible para minimizar la contaminación durante (a) 1 minuto a 1000 rpm (rcf de 100 a 125) o
el uso del producto. (b) 15 segundos a 3400 rpm (rcf de 900 a 1000) o
(c) un tiempo apropiado según la calibración de la centrífuga.
Do not use if turbid. No lo use si aparece turbio.
5. Examine en busca de la presencia de hemólisis y regístrela, en su caso.
6. Vuelva a suspender los hematíes agitando suavemente y examínelos en busca
de aglutinación. Registre los resultados.
Este reactivo contiene azida sódica al 0,1 %. Advertencia: H302 Nocivo si
7. Añada 2 gotas de Gamma PeG y mézclelo bien.
se ingiere.
Clave:
Subrayado = Adición o cambio significativo ▲= Eliminación de texto
8. Incube los tubos a una temperatura de 37 ±1 C durante 10-15 minutos. Se procedimiento de prueba del polietilenglicol al realizar la prueba a estas
puede ampliar el tiempo de incubación hasta 30 minutos. La incubación muestras para anticuerpos inesperados.
durante un tiempo cercano al límite superior puede mejorar la reactividad. 4. Se puede observar precipitación de fibrinógeno al realizar pruebas a muestras
9. Los tubos se pueden examinar en busca de hemólisis visible. NOTA: La mezcla de plasma. En tales casos, al igual que con los niveles de globulina elevados,
de prueba no se puede centrifugar ni examinar la fiabilidad de aglutinación puede que sea necesario lavar los hematíes más de tres veces para eliminar
directa tras la fase de incubación. toda la proteína humana sin unir.
10. Lave los hematíes en el tubo al menos tres veces con los tubos llenos de 5. A diferencia de algunas soluciones de baja fuerza iónica (LISS) y de otros
solución salina, con cuidado de decantar la solución salina entre lavados y de potenciadores, Gamma PeG no está indicado como medio de suspensión de
resuspender bien los hematíes cuando añada solución salina para el siguiente hematíes. Debe emplearse únicamente como un aditivo para mezclas de suero
lavado. Decante completamente la solución salina tras el último lavado. y hematíes, tal y como se detalla en estas instrucciones de uso.
11. Añada 1 o 2 gotas de antiglobulina humana Gamma-clone®, anti-IgG a cada 6. El uso de suero o plasma antiguo puede provocar un fallo al detectar los
botón de hematíes o siga las instrucciones del fabricante de antiglobulina anticuerpos dependientes de complementos. El uso de antiglobulina humana
humana. La adición de 2 gotas de antiglobulina humana puede mejorar la anti-IgG puede provocar un fallo al detectar anticuerpos dependientes de
reactividad. NOTA: El uso de antiglobulina humana anti-IgG en lugar de complementos.
antiglobulina humana anti-IgG,-C3d; poliespecífica se recomienda
encarecidamente, ya que los reactivos poliespecíficos de la antiglobulina CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DE RENDIMIENTO: Cuando se emplea
humana pueden dar lugar a reacciones no específicas. según el procedimiento de prueba recomendado, Gamma PeG mejora la
12. Mézclelo bien y centrifúguelo tal y como se describe en el paso 4. sensibilidad de las pruebas para la detección de anticuerpos IgG mediante la
13. Resuspenda los hematíes agitándolos suavemente y examinando la presencia prueba de antiglobulina indirecta. El rendimiento de este producto va ligado al
de aglutinación. Las reacciones negativas pueden examinarse mediante un cumplimiento de los métodos recomendados en este prospecto. Cada lote se
instrumento de ampliación óptica. Registre los resultados. examinar serológicamente con anticuerpos seleccionados y con muestras de
suero inertes para asegurar un funcionamiento óptimo.
Estabilidad de la reacción final. Las fases de lavado de la prueba de antiglobulina
deben realizarse sin interrupción y el resultado final debe interpretarse Para obtener más información o para contactar con el servicio técnico, llame a
inmediatamente una vez finalizada esta. Immucor, al número 855-IMMUCOR (466-8267).
CONTROL DE CALIDAD:
1. Todas las pruebas negativas de antiglobulina deben confirmarse añadiendo BIBLIOGRAFÍA:
hematíes sensibilizados a IgG, como por ejemplo Checkcell ®, y posteriormente, 1. Nance S, Garratty G. A new technique to enhance antibody reactions using
repitiendo la centrifugación y la lectura. Un resultado de prueba positivo en este polyethylene glycol. [Abstract] Transfusion 1985; 25:475.
punto confirma que se añadió antiglobulina (anti-IgG) activa al sistema de 2. Nance SJ, Garratty G. Polyethylene glycol: A new potentiator of red blood cell
pruebas y que estaba presente cuando la prueba de antiglobulina original se antigen-antibody reactions. Am J Clin Path 1987; 87:633-635.
interpretó como negativa. 3. Vengelen-Tyler V, Choy C. A comparative study of antibody enhancement
2. Para controlar la eficacia del producto en la mejora de la reactividad, se techniques. [Abstract] Transfusion 1986; 26:570.
recomienda seleccionar un anticuerpo IgG débil (o que se prepare diluyendo 4. O’Shea K, Slater J, Loga D, Wojtyniak L. Polyethylene glycol: its use as a
uno fuerte en suero humano inerte o equivalente) y que se realice la prueba a special technique for antibody investigation. Can Ass Immunohematol 1987;
intervalos de tiempo adecuadamente regulares. Se puede emplear corQC® 8:176-179.
para la prueba de control de calidad de este producto. 5. Wenz B, Apuzzo J. Polyethylene glycol improves the indirect antiglobulin test.
3. Se recomienda un control autólogo (suero del paciente o plasma y sus propios Transfusion 1989; 29:218-220.
hematíes) para pruebas de identificación de anticuerpos. 6. Slater JL, Griswold DJ, Wojtyniak LS, Reisling MJ. Evaluation of the
polyethylene glycol/indirect antiglobulin test. Transfusion 1989; 29:686-688.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DE LA PRUEBA: La aglutinación o 7. Wenz B, Appuzo J, Shah DP. Evaluation of the polyethylene glycol-potentiated
hemólisis de los hematíes en la fase de centrifugado inmediato de la prueba o la indirect antiglobulin test. Transfusion 1990; 30:318-321.
aglutinación que se produzca en la fase de antiglobulina constituyen un resultado 8. Löw B, Messeter L. Antiglobulin test in low ionic strength salt solution for rapid
positivo e indican que la muestra examinada contiene anticuerpos dirigidos a un antibody screening and crossmatching. Vox Sang 1974; 26:53-61.
antígeno o antígenos presentes en los hematíes. 9. Moore HC, Mollison PL. Use of a low ionic strength medium in manual tests for
La ausencia de aglutinación o hemólisis en cualquier fase de la prueba constituye antibody detection. Transfusion 1976; 16:291-296.
un resultado negativo de la prueba e indica que la muestra analizada no contiene 10. Austin R. An evaluation of a rapid Coombs technique. NZ J Med Lab Tech
anticuerpos dirigidos a antígenos presentes en los hematíes, según determina este 1976; 30:51.
método de prueba. 11. Wicker B, Wallas CH. A comparison of a low ionic strength saline medium with
Una prueba de control autólogo positiva indica la presencia de un autoanticuerpo. routine methods for antibody identifications. Transfusion 1976; 16:469-472.
Habrá que realizar más estudios para garantizar que los aloanticuerpos no están 12. Lincoln PJ, Dodd BE. The use of low ionic strength solution (LISS) in elution
también presentes en el suero. experiments and in combination with papain-treated cells for the titration of
LIMITACIONES: Al igual que en todos los procedimientos serológicos, algunos various antibodies, including eluted antibody. Vox Sang 1978; 34:221-226.
factores tales como los materiales contaminados, el tiempo o la temperatura de 13. Combs MR, Telen MJ. Testing eluates in polyethylene glycol (PEG): A sensitive
incubación, el centrifugado, o el examen de la aglutinación inadecuados, y el technique for detecting early alloimmunization. [Resumen] Transfusion 1989;
incumplimiento del procedimiento de prueba recomendado pueden dar resultados Supplement 58S.
falsos. Además:
1. Los anticuerpos IgM pueden no detectarse en el procedimiento de prueba del
polietilenglicol.
2. Si utiliza el procedimiento del polietilenglicol para el cruce, se recomienda una Código del prospecto: 3026es-4
fase de centrifugado inmediata antes de añadir el reactivo para evitar la 0088 Revisado:02/13
desaparición de algunos ejemplos de IgM de anti-A y anti-B.
3. El polietilenglicol tiene tendencia a precipitar las globulinas del suero. Por
consiguiente, al emplear Gamma Peg para detectar anticuerpos inesperados,
es especialmente importante asegurarse que los hematíes están totalmente
resuspendidos en cada cambio de solución salina durante las fases de lavado
de la prueba. Cuando se realicen pruebas que contengan niveles de globulina
elevados, puede que no sean suficientes tres lavados para eliminar la proteína
no unida. En caso de que la globulina precipitada permanezca atrapada en el
botón de hematíes, puede neutralizar la antiglobulina humana y provocar un
resultado negativo falso. En el caso de muestras que presenten un nivel de
globulina excepcionalmente elevado (como en un mieloma múltiple), la adición
de polietilenglicol puede provocar la formación de gel. Esto excluye el
Clave:
Subrayado = Adición o cambio significativo ▲= Eliminación de texto