Tema 14: Ciclo de Krebs

1. Definir respiración celular y relacionarla con la respiración fisiológica:

_ La respiración celular es una serie de procesos que abarcan desde la oxidación de
sustancias, generalmente glucosa (Glicolisis), hasta la cadena respiratoria, pasando por el
ciclo de Krebs, la respiración celular tiene como objetivo la producción energética de la
célula en forma de ATP, consumiendo Oxígeno y liberando CO 2 en el proceso, de manera
que la respiración celular está íntimamente relacionada con la respiración fisiológica,
puesto que la misma aporta el oxígeno necesario para los procesos de la respiración y a su
vez se deshace de su principal desecho.
2. Definir el ciclo de Krebs Indicando el nivel celular donde ocurre:
El ciclo del ácido cítrico (ciclo de Krebs, ciclo del ácido tricarboxilico) es una secuencia de
reacciones en las mitocondrias que oxidan la porción acetilo de la acetil-CoA, y reducen coenzimas
que se re oxidan por medio de la cadena de transporte de electrones, enlazada a la formación de
ATP. El ciclo del ácido cítrico es la vía común final para la oxidación de carbohidratos, lípidos y
proteínas porque la glucosa, los ácidos grasos y casi todos los aminoácidos se metabolizan hacia
acetil-CoA o intermediarios del ciclo. También tiene una función fundamental en la
gluconeogénesis, lipogénesis e interconversion de aminoácidos. Muchos de estos procesos ocurren
en casi todos los tejidos, pero el hígado es el único tejido en el cual todos suceden en un grado
significativo.

“Bioquímica de Harpe Ed. 28”, página 143

3. Esquematizar las principales fuentes de Acetil-CoA que alimentan el ciclo de Krebs:
Las principales fuentes de Acetil-CoA que alimentan el ciclo, están representadas por el
Catabolismo de los carbohidratos (Glicolisis), el Catabolismo de lípidos (β-Oxidación de los ácidos
grasos), Catabolismo de proteínas (Metabolismo de los Aminoácidos), que produce tanto Acetil-
CoA como otros sustratos intermediarios del ciclo de Krebs. “Bioquímica de Harpe Ed. 28”,
página 144

Carbohidratos Lípidos Proteínas

Glucosa Ácidos Grasos Aminoácidos

Glicolisis Metabolismo de
β-Oxidación de
los Aminoácidos
los ácidos grasos

Acetil-Coa

Diversos intermediarios

Ciclo del Ácido Cítrico

 4. Realizar un esquema del ciclo de Krebs en los que se indiquen las reacciones de
Descarboxilación, Oxidación (Generación de poder reductivo) y Fosforilacion a
nivel del sustrato:
8va
4ta Oxidación, Se 1ra
genera un NADH

2da
7ma

3ra Oxidación, Se
genera un FADH2 6ta

GTP
5ta Descarboxilación 1ra Oxidación, Se
Fosforilacion a genera un NADH
Nivel de sustrato Pi + GDP
3ra

Intermediario entre el
isocitratro y el αcetoglutarato

4ta
Descarboxilación
2da Oxidación, Se
genera un NADH

 1ra: La reacción inicial entre la acetil-CoA y el oxaloacetato para formar citrato esta catalizada
por la citrato sintasa, que forma un enlace de carbono-carbono entre el carbono metilo de la
acetil-CoA y el carbono carbonilo del oxaloacetato. El enlace tioester de la citril-CoA resultante
se hidroliza, lo que libera citrato y CoASH, una reacción exotérmica.

 2da: La enzima aconitasa (aconitato hidratasa) isomeriza el citrato hacia isocitrato; la reacción
ocurre en dos pasos: deshidratación hacia cis-aconitato, y rehidratación hacia isocitrato.

 3ra: El isocitrato pasa por deshidrogenación catalizada por la isocitrato deshidrogenasa para
formar, en un inicio, oxalosuccinato, que permanece unido a enzima y pasa por
descarboxilación hacia α-cetoglutarato. La descarboxilación requiere iones Mg++ o Mn++.
 Utilizando coenzima NAD, como aceptor de los hidrógenos, mismas coenzimas que luego serán
utilizadas en la cadena respiratoria.

 4ta: El α-cetoglutarato pasa por descarboxilación oxidativa en una reacción catalizada por un
complejo de múltiples enzimas similar al involucrado en la descarboxilación oxidativa del
piruvato. El complejo de αcetoglutarato deshidrogenasa requiere los mismos cofactores que
el complejo de piruvato deshidrogenasa —Difosfato de tiamina, lipoato, NAD+, FAD y CoA—
y origina la formación de succinil-CoA. El equilibrio de esta reacción favorece a tal grado la
formación de succinil-CoA, que debe considerarse unidireccional desde el punto de vista
fisiológico.

 5ta: La succinil-CoA se convierte en succinato mediante la enzima succinato tioquinasa

(succinil CoA sintetasa); se trata del único ejemplo en el ciclo del ácido cítrico de
Fosforilacion en el ámbito de sustrato.

 6ta: La primera reacción de deshidrogenación, que forma fumarato, es catalizada por la

succinato deshidrogenasa, que está unida a la superficie interna de la membrana mitocondrial
interna. La enzima contiene FAD y proteína hierro-azufre (Fe: S), y reduce de manera directa la
ubiquinona en la cadena de transporte de electrones. (Tema 15)

 7ma: La fumarasa (fumarato hidratasa) cataliza la adición de agua a través del doble enlace
del fumarato, lo que produce malato.

 8va: La malato deshidrogenasa convierte a este último en oxaloacetato, una reacción que
requiere NAD+. Aunque el equilibrio de esta reacción favorece con fuerza al malato, el flujo
neto es hacia el oxaloacetato debido a la eliminación continua de este último (para formar
citrato, como un sustrato para la gluconeogénesis, o para pasar por transaminacion hacia
aspartato), y a la re oxidación continua de NADH.

Inhibidores:
 El veneno fluoroacetato es toxico porque la fluoroacetil-CoA se condensa con oxaloacetato para
formar fluorocitrato, que inhibe la aconitasa, lo que hace que se acumule citrato
 la arsenito inhibe la reacción, lo que hace que se acumule el sustrato, αcetoglutarato.
Vitaminas importantes:
Cuatro de las vitaminas B son esenciales en el ciclo del ácido cítrico y, por ende, en el metabolismo
productor de energía:
1) la riboflavina, en forma de flavina adenina dinucleótido (FAD), un cofactor para la succinato
deshidrogenasa.
2) niacina, en forma de nicotinamida adenina dinucleótido (NAD), el aceptor de electrón para la
isocitrato deshidrogenasa, α-cetoglutarato deshidrogenasa, y malato deshidrogenasa.
3) tiamina (vitamina B1), como Difosfato de tiamina, la coenzima para la descarboxilación en la
reacción de α-cetoglutarato deshidrogenasa.
4) ácido pantoténico, como parte de la coenzima A, el cofactor fijo a residuos ácido carboxílicos
“activos” como acetil-CoA y succinil-CoA.
“Bioquímica de Harpe Ed. 28”, páginas 143, 144 y 145
 5. Señalar en un esquema del ciclo de Krebs las enzimas reguladoras explicando cómo
son moduladas:
En casi todos los tejidos, donde la función primaria del ciclo del ácido cítrico yace en el
metabolismo productor de energía, el control respiratorio por medio de la cadena respiratoria y la
Fosforilacion oxidativa regula la actividad del ciclo del ácido cítrico. De este modo, la actividad es
dependiente del aporte de NAD+ que, a su vez, debido al estrecho acoplamiento entre la oxidación
y Fosforilacion, depende de la disponibilidad de ADP y, por ende, finalmente del índice de
utilización de ATP en trabajo químico y físico. Además, enzimas individuales del ciclo están
reguladas. Los sitios más probables para regulación son las reacciones no de equilibrio catalizadas
por la piruvato deshidrogenasa, citrato sintasa, isocitrato deshidrogenasa y α-cetoglutarato
deshidrogenasa. Las deshidrogenasas son activadas por Ca2+, que aumenta de concentración
durante la contracción muscular y secreción, cuando hay aumento de la demanda de energía. En un
tejido como el cerebro, que depende en su mayor parte de carbohidratos para el aporte de acetil-
CoA, el control del ciclo del ácido cítrico puede ocurrir en la piruvato deshidrogenasa. Varias
enzimas se encargan de la situación en cuanto a energía, como se demuestra por las proporciones
[ATP]/[ADP] y [NADH]/[NAD+]. De este modo, hay inhibición Alosterica del citrato sintasa por el
ATP y acil-CoA grasa de cadena larga. La activación Alosterica de la isocitrato deshidrogenasa
dependiente de NAD, mitocondrial, por ADP, es contrarrestada por ATP y NADH. El complejo de
α-cetoglutarato deshidrogenasa está regulado de la misma manera que la piruvato deshidrogenasa
(fig. 18-6). La succinato deshidrogenasa es inhibida por el oxaloacetato, y la disponibilidad de este
último, según se controla por la malato deshidrogenasa, depende de la proporción
[NADH]/[NAD+]. Dado que la Km para oxaloacetato del citrato sintasa es del mismo orden de
magnitud que la concentración intramitocondrial, es probable que la concentración de oxaloacetato
Se acumula cuando
controle el índice de formación de citrato. Queda por resolver cuales de estos mecanismos
el flujo son
de acetil CoA
importantes in vivo. “Bioquímica de Harpe Ed. 28”, página 147” al ciclo es muy baja

ATP, NADH
Ca2+ Acil-CoA

Piruvato DH
Piruvato AMP
NAD, CoA ADP
Al ser una reacción Oxalacetato
equilibrada la misma ATP
Acetil-CoA
está regulada por la Ca2+ Citrato Sintasa succinil-CoA
disponibilidad de Citrato
Malato DH
sustrato Oxalacetato
Citrato

Malato Iso-Citrato

NADH Ca2+
ATP, αcetoglutarato Iso-Citrato DH

NAD
ADP
αcetoglutarato
Ca2+
Fumarato
Ca2+ Oxalacetato
αcetoglutarato DH
Succinato DH
 NADH αcetoglutarato
Succinil-CoA NAD

Succinato Succinil-CoA
Regulación del complejo piruvato Deshidrogenasa “Bioquímica de Harpe Ed. 28”, página 154”

Lehnhinger, principios de
bioquímica 4ed. Pagina 622

Glucagón

6. Calcular el número de equivalentes reductores, que pueden obtenerse por la oxidación completa
de una molécula de acetil CoA

Reaccion Equivalente reductor producido

Isocitrato Deshidrogenasa (oxidacion) NADH
αCetoglutarato Deshidrogenasa (Oxidacion) NADH
Succinato Deshidrogenasa FADH2
Malato Deshidrogenasa NADH
TOTAL: 3NADH y un FADH 2
7. Calcular el número de moles de ATP, que pueden obtenerse por la oxidación completa de una
molécula de acetil CoA
Reaccion Equivalente producido Equivalencia en ATP
Isocitrato DH NADH 2.5
αCetoglutarato DH NADH 2.5
Succinato Tioquinasa GTP 1
Succinato DH FADH2 1.5
Malato DH NADH 2.5
TOTAL: 10ATP según las cuentas de
harpe (redondeado a 12 por algunos otros libros)
 8. Explicar la importancia biologica del ciclo de krebs, A) Como generador de Energía B)
Como proveedor de intermediarios de vías biosinteticas:

El ciclo de krebs oxida las moleculas producidas en las distintas vías convergentes en este ciclo, (la
Glucolisis por exelencia) que producen acetil-coA que es la molecula que será utilizada como
combustible para el ciclo, en el cual dicha molecula es oxidada hasta CO 2 por una serie de
procesos, que liberan una gran cantidad de Energía, misma energia que parte es conservada en los
equivalentes reductores (Transportadores de e-) NADH y FADHH que intervienen en le ciclo, dicha
energia será utilizada más tarde en la cadene respiratoria por un proceso denominada
fosforilacion oxidativa y formara moleculas de ATP. (Lehninger, principios de Bioquimica, pagina
601) por lo cual juega un papel vital en la produccion de energía celular, a pesar de que su funcion
no la de generar energia (esa es la funcion de la cadena respiratoria), sino la de oxidar las
moleculas de acetilCoA y producir equivalentes reductores reducidos.

Además el ciclo de krebs tambien juega un importantisimo papel en otras rutas biosinteticas,
como la lipogenesis, Gluconeogenesis y interconversion de AA, puesto que produce algunos de sus
intermediarios o incluso sustratos iniciales.