PDF. Control Alimentario. Tema 7
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Operaciones básicas de
laboratorio. Análisis de
fisicoquímicos básicos
de los alimentos
7
/ 1. Introducción y contextualización práctica 3
/ 5. Disoluciones 7
/ 6. Diluciones 8
/ 7. Técnicas colorimétricas 9
/ 11. Bibliografía 14
© MEDAC
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Conocer las unidades y medidas del Sistema Internacional.
1. Longitud, cuya unidad de medida básica es el metro (m), y mide la distancia entre dos puntos.
2. Masa. Expresa la cantidad material de un cuerpo. Su unidad de medida básica es el kilogramo (kg).
3. Tiempo. Mide la duración o transcurso de acontecimientos. La unidad de medida básica es el segundo (s).
4. Intensidad de corriente eléctrica. Es la cantidad de electricidad que circula por un circuito en un periodo de
tiempo. Su unidad de medida básica es el amperio (A).
5. Temperatura termodinámica. Tiene como unidad de medida básica el kelvin (K) y es una magnitud física que
indica la energía interna de un cuerpo.
7. Intensidad luminosa. Tiene como unidad de medida básica la candela (cd) y mide la cantidad de luz que
emite una fuente por unidad de ángulo sólido.
Gracias a estas magnitudes podemos traducir el mundo en valores cuantitativos, permitiéndonos comprenderlo
desde un punto de vista analítico.
Enlaces de interés...
Para más información sobre las unidades de medida vigentes:
RD 2032/2009 y RD 493/2020.
https://www.boe.es/buscar/pdf/2010/BOE-A-2010-927-consolidado.pdf
https://www.boe.es/eli/es/rd/2020/04/28/493/dof/spa/pdf
TEMA 7. OPERACIONES BÁSICAS DE LABORATORIO. ANÁLISIS DE FISICOQUÍMICOS BÁSICOS DE LOS ALIMENTOS
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A. Medida de masa. Para medir la masa de forma precisa se utilizan balanzas analíticas, las cuales están provistas
de una campana, para evitar las corrientes de aire y los cambios de temperatura que puedan hacer fluctuar la
medición. Este tipo de balanzas pueden llevar a cabo mediciones de hasta 1 µg. También se pueden utilizar
balanzas de tipo granatario, pero son menos precisas.
» Pesada por diferencia, se pesa un recipiente con la muestra y se resta el peso del recipiente.
» Pesada directa.
B. Medida de volúmenes. Se usa para medir volúmenes de líquidos mediante la utilización de diferentes
instrumentos de medida, que como vimos en unidades anteriores, pueden ser:
C. Medida de la densidad. La densidad es la relación entre la masa y el volumen de una sustancia [ρ = masa (g)/
volumen (mL)]. Existen diferentes métodos para medir la densidad en el laboratorio, dependiendo de la
naturaleza de la sustancia que se quiere medir:
• Control de calidad.
• Estudios para el almacenamiento y la conservación.
• Estudios nutricionales y bromatológicos.
• Estudios microbiológicos y toxicológicos.
• Investigaciones sobre nuevos alimentos.
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El análisis de los alimentos para garantizar la seguridad alimentaria implica someter a cualquier producto alimenticio
a un estricto control antes de ser comercializado, para prevenir posibles riesgos para la salud. Además, gracias a este
análisis se detectan errores en la producción que hagan mejorar a la industria alimentaria, consiguiendo alimentos
de mejor calidad y más rentables.
Como se ha comentado en temas anteriores, las determinaciones fisicoquímicas a las que se someten los alimentos
como parte del proceso de control de calidad, así como los límites que se deben dar respecto a los componentes
presentes en ellos, están reglados en documentos técnicos (RTS y normas de calidad) y varían dependiendo del
tipo de alimento.
Algunos indicadores fisicoquímicos de los alimentos son los mostrados en la siguiente tabla (Tabla 1).
Nudo: ¿Qué técnica se debe utilizar y cómo se aplica dicha técnica? ¿En qué momentos del proceso se debe medir
la densidad?
Desenlace: Durante la elaboración del vino, así como en el caso de la cerveza, la medida de las distintas densidades
del vino (antes y después de la fermentación) es una forma de control que se utiliza para determinar si el proceso de
fermentación se ha completado y conocer el grado alcohólico. Este cambio de densidades ocurre porque, antes de la
fermentación, el mosto de la uva es rico en azúcares (variando según su maduración), y estos carbohidratos simples
le dan una alta densidad (densidad inicial); posteriormente, durante la fermentación, la concentración en azúcares
disminuye, transformándose en alcohol y dióxido de carbono, reduciéndose la densidad (densidad final).
Para realizar estas mediciones de densidad, como hemos visto en apartados anteriores, se utiliza un instrumento de
medición denominado densímetro.
La lectura del densímetro se debe realizar en una probeta con una muestra del vino. Dependiendo de la densidad, el
densímetro se hundirá más o menos en la muestra, de tal forma que cuanto mayor sea la densidad, menos se hundirá
el instrumento de medición.
De esta manera, se determina la densidad inicial y la densidad final, y a partir de estos valores se puede calcular la
cantidad de alcohol mediante la siguiente fórmula:
/ 5. Disoluciones
Una disolución es una mezcla homogénea de dos o más componentes o sustancias químicas que no reaccionan
entre sí, aunque sí pueden modificar sus propiedades físicas, sobre todo en lo relativo a los cambios de fase (fusión
y ebullición). Estos cambios en sus propiedades físicas son los que se utilizan para diferenciar las disoluciones de las
sustancias puras.
También cabe mencionar que no todas las mezclas son disoluciones, ya que hay mezclas no reactivas que se
desfasan con el tiempo, como es el caso de la arcilla en el agua, por ejemplo, mezcla en la que se sedimentan las
partículas de arcilla en el fondo o pueden separarse por filtración, cosa que no ocurre con las disoluciones. A estas
mezclas se las denomina suspensiones.
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Control alimentario /8
• El disolvente, que es el componente mayoritario y determina el estado de la disolución ya sea sólido, líquido
o gas.
Dependiendo de cómo se encuentre el disolvente y el soluto, podemos obtener los tipos de disoluciones que se
muestran a continuación en la Tabla 2:
ESTADO DE LA
DISOLVENTE SOLUTO EJEMPLO
DISOLUCIÓN
Gas Gas Gas Aire
Líquido Gas Líquido Agua carbonatada
Disolución de hidrógeno
Sólido Gas Sólido
en algunos metales
Líquido Líquido Líquido Alcohol etílico
Líquido Sólido Líquido Agua salada
Sólido Sólido Sólido Bronce (Cu/Sn)
Tabla 2. Tipos de disoluciones.
A la hora de expresar la concentración de una disolución, es decir, de reflejar la cantidad de soluto disuelto en una
cantidad de disolvente, se puede hacer de las siguientes maneras:
• Tanto por ciento en peso (% en peso): gramos de soluto en 100 gramos de disolución.
• Gramos por litro (c): gramos de soluto en 1 litro de disolución.
• Molaridad (M): moles de soluto en 1 litro de disolución.
• Molalidad (m): moles de soluto en 1 kg de disolvente.
Hay que tener en cuenta que, para transformar unidades de concentración que hacen referencia al peso en unidades
de concentración referidas al volumen, o viceversa, es necesario saber la densidad de la disolución.
/ 6. Diluciones
Una dilución es la reducción de la concentración de una sustancia química en una disolución, consiguiendo
disoluciones menos concentradas a partir de una más concentrada. Para esto, debe añadirse más disolvente, lo cual
hará que la concentración de soluto disminuya al aumentar el volumen de la disolución.
Esta es una técnica muy utilizada en los laboratorios de análisis, llevando a cabo diluciones seriadas (o banco
de diluciones), en las que se realiza una secuencia de diluciones reduciendo la concentración del soluto de
forma progresiva.
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Para entenderlo mejor, vamos a ver un ejemplo de cómo debe ser el cálculo en una dilución: imaginemos que
tenemos 1 litro de disolución acuosa de sal común (cloruro de sodio, NaCl) y sabemos que el soluto (NaCl) tiene un
peso de 60 gr, por lo que tendremos una concentración de 60 gr NaCl/ 1 L H2O. ¿Qué volumen de esta disolución se
necesitará para preparar 1 litro de una disolución acuosa de 0,5 M de NaCl?
1. Lo primero que vamos a hacer es calcular su molaridad y, para ello, tenemos que fijarnos en el peso atómico
de la sustancia que compone el soluto, en este caso el NaCl. Para conocer este dato solo debemos echar
un vistazo a la tabla periódica y fijarnos en el número con decimales que acompaña al símbolo y al número
atómico de los elementos. En este caso, el sodio (Na) tiene un peso atómico de 22,99 gr/mol, mientras que
el cloro (Cl) es de 35,453 gr/mol. Al sumar ambos átomos tendríamos el peso molecular de la sal común, que
sería de 58,443 gr/mol.
2. Para averiguar los moles que tenemos en 60 gr de NaCl, debemos hacer la siguiente operación:
1mol de NaCl
Moles en 60 gr NaCl = 60 gr NaCl x = 1,027 mol de NaCL
58,443 gr NaCl
3. Una vez tenemos los moles del soluto, los dividimos entre los litros de disolución y ya tendríamos la molaridad
que, en este caso, sería:
4. Una vez tenemos la molaridad que representa la disolución inicial, tenemos que calcular el volumen de esta
disolución para conseguir reducir la molaridad a 0,5 M. Para ello, calcularemos el volumen que debemos
tomar de la disolución inicial de la siguiente manera:
1 L disolución
Volumen Disolución = 0,5 mol NaCl x = 0,486 L disolución NaCl
1,027 mol de NaCl
Según los cálculos, tendríamos que tomar 0,486 L de la disolución inicial (486 mL) y luego añadir agua hasta alcanzar
1 litro para que tenga la molaridad requerida (514 mL).
/ 7. Técnicas colorimétricas
Las técnicas colorimétricas se utilizan para determinar la concentración de compuestos coloreados en una disolución
a partir de la medida de la absorción de la radiación en las zonas visibles de dichas sustancias.
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Gracias a esta técnica se determina la concentración de una gran variedad de moléculas que absorben la luz, como
pueden ser los carotenos, clorofila… También se usa para medir las sustancias no coloreadas, como pueden ser los
azúcares, a través de reacciones que las conviertan en derivados coloreados.
Para realizar este tipo de técnicas es necesario utilizar un espectrofotómetro UV-visible, aparato con el que se
selecciona la longitud de onda de la luz que pasa por la disolución (la cual tendremos que cambiar dependiendo
del componente que queramos detectar) y mide la cantidad de luz absorbida por esta, consiguiendo así conocer la
concentración de soluto en la disolución. Para ello, es necesario realizar una serie de mediciones patrón controladas
(las cuales se realizan “artificialmente” en el laboratorio), aumentando poco a poco la concentración, logrando
relacionar la concentración con la absorbancia. De esta manera, obtendremos una curva patrón que permitirá
situar la concentración de la muestra una vez se haya medido.
A continuación, vamos a ver algunas de las técnicas colorimétricas que se utilizan en la determinación cuantitativa
de proteínas en los alimentos:
• Método de Biuret. Es un ensayo colorimétrico en el que se utiliza el reactivo de Biuret, el cual indica la presencia
de proteínas, para cuantificar la formación de un complejo estable entre enlaces peptídicos y el Cu2+ a pH
alcalino. Este complejo presenta un color violeta característico, que se cuantifica espectrofotométricamente
(540 nm).
• Método de Bradford. Técnica colorimétrica para la cuantificación de proteínas haciendo uso del reactivo
de Bradford (el cual se prepara utilizando el colorante
Coomassie Brilliant Blue G 250). Este método se basa en que
los grupos ácidos o básicos de las proteínas, en condiciones
adecuadas, pueden interaccionar con grupos orgánicos
de colorantes determinados, dando lugar a precipitados
coloreados. Esto hace que los grupos aniónicos del colorante
interaccionen con los grupos amino de las proteínas,
pasando el colorante de una coloración marrón-naranja a
azul intenso. Dicha reacción se mide por absorbancia a 595 Fig.6. Ejemplo de la acción del reactivo de Biuret sobre la
nm en el espectrofotómetro. albúmina.
Sabías que...
La colorimetría aplica la Ley de Lambert-Beer para conocer la
concentración de compuestos coloreados. Gracias a esta Ley, puede
calcularse la absorbancia (I representa la luz emergente de la muestra y
I0 la radiación incidente): A=-log10 (I/I0)
Nudo:
Halla la concentración de la disolución en tanto por ciento en peso, gramos Fig.7. Es importante realizar bien los cálculos
por litro, molaridad y molalidad. antes de realizar la disolución.
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Desenlace: Para calcular la concentración en % de peso debemos, antes de nada, conocer el peso de la disolución:
Para calcular la molaridad, tenemos que conocer el peso molecular del ácido clorhídrico, el cual es de 36,47gr/mol.
Con este dato podemos obtener los moles de HCl que tenemos en la disolución:
1mol
Moles en soluto = 37 gr HCl x = 1,014 mol de soluto
36,47 gr HCl
Por último, la molalidad se calcularía de la siguiente manera: si la disolución tiene una masa total 1190 gr, de donde
37 gr pertenecen al ácido clorhídrico, el peso del disolvente (H2O) será de 1153 gr.
• Determinación del punto de fusión. El punto de fusión es la temperatura a la que se genera un cambio
de estado. Conocer este dato puede ser de ayuda para determinar sustancias durante el análisis, ya que
son característicos de cada sustancia pura, pudiendo ayudar a su identificación y a conocer su pureza. Hay
diferentes equipos para determinar el punto de fusión de un determinado compuesto químico, como el
aparato de Fisher-Johns, por ejemplo.
» La filtración por gravedad, método tradicional que utiliza la gravedad como única fuerza impulsora.
» La filtración al vacío, método más rápido, cuya fuerza impulsora es la que ejerce la presión atmosférica
cuando se aplica el vacío.
• Evaporación. Es el paso de estado líquido a gaseoso que se da, exclusivamente, en la superficie de la masa
líquida. Si el proceso afecta a toda la masa líquida se denomina ebullición. Podemos diferenciar tres técnicas
en el laboratorio:
» Evaporación por aumento de la temperatura. Con el objetivo de evaporar un líquido o concentrar una
disolución se utilizan fuentes de calor como, por ejemplo, un baño de agua. En el caso de trabajar con
disolventes inflamables, nunca se deben someter a la llama directa. Además, si los vapores del disolvente
son tóxicos, se debe trabajar en una vitrina extractora para evitar posibles riesgos. Suele utilizarse para el
secado de un sólido húmedo (secado de sólidos).
Sabías que...
Se suele realizar la filtración por gravedad cuando interesa obtener el
líquido, mientras que la filtración al vacío se emplea cuando se quiere
el sólido.
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También se han presentado las técnicas básicas de medida y los instrumentos más utilizados en el laboratorio para
realizar mediciones, dentro de los cuales hemos destacado las balanzas analíticas (masa), materiales volumétricos
(volumen), densímetros (densidad) y medidores de pH (pH).
Además, hemos estudiado conceptos importantes como el de disolución, la cual puede definirse como una mezcla
homogénea a nivel molecular de una o más sustancias químicas que no reaccionan entre sí, y las diluciones.
Finalmente, se han introducido las principales áreas en las que se aplica la química analítica en los alimentos (control
de calidad, estudios bromatológicos...), las técnicas colorimétricas para medir la concentración de sustancias en los
alimentos, y otras operaciones básicas como la determinación del punto de fusión, la filtración y la evaporación.
pH
• Tiempo:
• Ángulo plano:
• Área:
• Volumen:
• Masa:
/ 11. Bibliografía
Greenfield, H., & Southgate, D. A. T. (2006). Datos de Composición de Alimentos. FAO.
Rodríguez, J. J. (2014). Operaciones básicas de laboratorio de química. Cano Pina, Ediciones Ceysa.
Zumbado Fernández, H. (2004). Análisis Químico de los Alimentos. Métodos Clásicos. Ciudad de la Habana: Editorial Universitaria.