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    Guia Lambert & Beer

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    Rene Gabriel Chipana Gutierrez
    Este documento presenta una guía de laboratorio sobre una práctica para demostrar la ley de Lambert-Beer. El objetivo es demostrar esta ley de forma práctica para apoyar determinaciones cuantitativas futuras. Se describen los materiales y reactivos necesarios, incluyendo colorantes, matraces, pipetas y un espectrofotómetro. El procedimiento implica preparar soluciones diluidas de colorantes y medir su absorbancia a diferentes concentraciones para graficar los resultados y verificar la ley. Finalmente, se incluyen preguntas

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    Este documento presenta una guía de laboratorio sobre una práctica para demostrar la ley de Lambert-Beer. El objetivo es demostrar esta ley de forma práctica para apoyar determinaciones cuantitativas futuras. Se describen los materiales y reactivos necesarios, incluyendo colorantes, matraces, pipetas y un espectrofotómetro. El procedimiento implica preparar soluciones diluidas de colorantes y medir su absorbancia a diferentes concentraciones para graficar los resultados y verificar la ley. Finalmente, se incluyen preguntas

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    GUIA LAMBERT & BEER

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    GUÍA LABORATORIO QUÍMICA DE ALIMENTOS I M.Sc.

    Virginia Judith Rojas Mercado

    PRACTICA # 2

    DEMOSTRACIÓN DE LA LEY DE LAMBERT & BEER

    OBJETIVO. - El objetivo de esta práctica es la demostración en forma práctica


    de la ley de Lambert & Beer que servirá como apoyo para las
    determinaciones en forma cuantitativa en las prácticas de
    laboratorio.

    FUNDAMENTO TEORICO. - Se vio ampliamente en la teoría

    REACTIVOS Y MATERIAL.-
    20 Tubos de ensayo con tapa de rosca
    2 Gradillas
    2 Picetas
    1 Propipeta
    4 Matraces aforados de 25 ml,
    4 Matraces aforados de 50 ml,
    2 Matraces aforados de 100 ml,
    4 Pipetas volumétricas de 1 ml
    2 Pipetas volumétricas de 2 ml
    2 Pipetas volumétricas de 5 ml
    2 Pipetas volumétricas de 10 ml
    2 Cepillos para tubos
    2 Varillas de vidrio
    4 Vasos de precipitado de 50 ml
    4 Vasos de precipitado de 100 ml
    2 Espátulas
    1 Estabilizador de voltaje
    1 Espectrofotómetro
    2 Cubetas de cuarzo
    1 Balanza analítica
    1 Estufa de secado

    1 Marcador indeleble

    REACTIVOS
    Azul de bromofenol (BPB) (100 mg/litro)
    Naranja de metilo (MO) (100 mg por litro)
    Azul de metileno (100 mg/litro)

    PROCEDIMIENTO. -

    Dilúyase cuantitativamente la solución madre de BPB o MO de forma tal, que


    10 ml de la solución diluida den una lectura de una transmisión aproximada de
    10 % a la longitud de onda de absorción máxima (longitud de onda analítica
    GUÍA LABORATORIO QUÍMICA DE ALIMENTOS I M.Sc. Virginia Judith Rojas Mercado

    encontrada en la práctica Número 1), después de que el instrumento ha sido


    fijado a una transmisión de 100 % empleando como blanco agua.

    Prepárense 6 tubos de cada colorante, según se indica en la tabla siguiente:

    Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6


    BPB o MO 0 2,0 4,0 6,0 8,0 10,0
    diluidos (ml)
    Agua (ml) 10.0 8,0 6,0 4,0 2,0 0,0

    Una vez fijado el instrumento a una transmisión de 100 %, empleando agua


    como blanco antes de cada lectura, determínese la densidad óptica de los
    tubos 1 al 5 a la longitud de onda analítica de cada colorante. Represéntese
    gráficamente la densidad óptica (ordenadas en función de la concentración de
    colorante (abscisa).

    La concentración de colorante en cada tubo se calcula a partir de las diluciones


    cuantitativas de la solución madre y debe expresarse en tanto por ciento.

    CUESTIONARIO. -

    1) ¿Qué tipo de errores se pueden cometer en este experimento?


    2) Bajo qué condiciones la ley de Lambert & Beer sufre desviaciones?
    3) ¿Qué características deben tener el/los compuestos para ser
    cuantificados por
    4) espectrofotometría ultravioleta/visible?
    5) ¿Qué es una curva de calibración? ¿Cómo se prepara y para qué?
    6) ¿Qué fin tiene preparar una serie de soluciones de estándar de
    referencia de
    7) concentraciones distintas? ¿Qué parámetros de la Ley de Lambert-
    Beer se ajustan de esta manera?
    8) ¿Es siempre la absorbancia proporcional a la concentración?
    Explique

    9) Mencione al menos tres aplicaciones prácticas del uso de la


    espectroscopia UV – Vis en la cuantificación de analitos
    10) En qué rangos de concentraciones de cada uno de los colorantes es
    válida la ley de Beer Lambert

    11) Calcular el coeficiente de extinción para cada colorante,


    determinando la inclinación de cada línea en el procedimiento

    12) Indicar cuáles son las respectivas ecuaciones y el factor de


    correlación para cada colorante.

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