Informe Laboratorio 1

UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA
La Universidad Católica de Loja

Titulación Bioquímica y Farmacia
Fitoquímica y Farmacia
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
Carlos Saul Tapia Pinos

cstapia@utpl.edu.ec
Wilmer Alexander Vásquez Cabrera
Wavasquez1@utpl.edu.ec
Katherine Jhuliana Vivanco Mendoza
kjvivanco@utpl.edu.ec
Danilo Michael Yaguana Condoy
dmyaguana@utpl.edu.ec
***Departamento de Ciencias de la salud, Estudiantes de la Titulación de Bioquímica

y Farmacia, Universidad Técnica Particular de Loja, San Cayetano Alto s/n, 1101608
Loja, Ecuador***
Resumen en español
(Máximo 5 líneas que describan claramente los principales resultados obtenidos)
INTRODUCCIÓN
El objetivo del presente informe de laboratorio de Fitoquímica y Farmacognosia es
analizar la mezcla de los componentes que se encuentran en el opio y en la colchicina
semen, además identificar cual es el componente polar y apolar por medio del factor de
retención. La importancia de la cromatografía en capa fina es el método físico de
separación para la caracterización de las mezclas complejas en un producto natural, en
la que se basa la separación debido a la influencia de dos efectos contrapuestos que es la
retención por lo cual es un factor producido sobre los componentes de la mezcla
estacionaria ya sea de un sólido o líquido que se encuentre anclado al soporte sólido y
como segundo contrapuesto se tiene el desplazamiento que ejerce sobre los
componentes de la mezcla por una fase móvil, por lo que a lo largo de la fase
estacionaria se la conoce como elución, donde la mezcla al separarse se deposita sobre
la fase estacionaria, mientras que la móvil atraviesa el sistema de arrastre de los
componentes de la misa, lo cual se desplaza en distintas velocidades dependiendo de la
magnitud de las interacciones relativas de dichos componentes en ambas fases (Corzo,
A. 2019).
Tanto la fase móvil como la estacionaria se elige de manera que los componentes de la
muestra se distribuyan , ya que estos componentes son retenidos fuertemente por la fase
estacionaria, moviendo lentamente con el flujo de fase móvil, por lo que se puede decir
que los componentes que se unan inversamente debilitara la fase estacionaria ejerciendo
que la fase estacionaria se mueva con rapidez junto con la fase móvil, debido a esto se
da la movilidad diferente en la que los componentes se separan en manchas que se
puede analizar de forma cualitativa o cuantitativa, por lo que se da una manifestación
física que influyen de manera directa sobre las constantes de equilibrio de distribución
de los compuestos entre una fase estacionaria y una fase móvil, entre ellos son la
absorción, la adsorción, el intercambio iónico, bioafinidad y diferencias del tamaño
molecular (Corzo, A. 2019).
Describir en máximo dos párrafos el objetivo de la práctica y la importancia de su

realización. Los párrafos deben ser sucintos y basados en bibliografía pertinente y
confiable. (Autor, año, p.35)
Copias textuales: hasta 40 palabras entre comillas

Más de 40 palabras en un párrafo aparte
(Autor, año y página)
MATERIALES Y MÉTODOS
El opio para la preparación del extracto se debe tomar el fármaco en polvo (1g),
mezclarlo con una solución de amoniaco al 10% o en su defecto con Carbonato de
Sodio (Na2CO3) al 10%, luego se debe extraer durante 10min con 5 ml de metanol a
reflujo, a continuación, el filtrado se concentra de acuerdo con el total de los alcaloides
del fármaco especifico, de modo que 100μL contengan entre 50-100μg de alcaloides
totales.
La colchicina semen para la preparación del extracto se toma las semillas en polvo (1 g)
se desgrasan con 20 ml de n-hexano durante 30 min reflujo. Las semillas defiitted se
extraen luego durante 15 min con 10 ml de cloroformo. Después de este, Se añaden 0,4
ml de NH al 10% a la mezcla, se agita vigorosamente y se deja reposar durante unos 30
minutos antes del llenado. El filtrado se evapora a sequedad y el residuo resuelto en 1
ml de etanol; 20p1 se utiliza para la investigación de TLC.
Cromatografía capa fina (TLC)

En el opio se utilizó la fase directa, la placa se debe colocar verticalmente dentro de la
cubeta cromatográfica, que previamente ya debe estar saturada con el vapor del eluente
(fase móvil), que para nuestro análisis se tomara el tolueno-etilo acetato-dietilamida
(70:20:10), luego de introducir la placa cromatográfica el eluente va a migrar a través de
la placa por acción de la capilaridad, separando por migración diferencial los diferentes
componentes a ser estudiados, dejando los de mayor polaridad más cerca al origen y los
menos polares más lejos.
La colchicina semen se utilizó la fase directa, la placa se debe colocar verticalmente
dentro de la cubeta cromatográfica, que previamente ya debe estar saturada con el vapor
del eluente (fase móvil), que para nuestros análisis se tomara para (A) acetato de etilo-
ácido acético glacial ácido fórmico-agua (100: 11: 11: 26) y (B) acetato de etilo-
metanol-agua (100: 13,5: 10) una vez inducida la placa cromatográfica se observa que
eluente migra por la placa separando por migración diferencial los diferentes
componentes a ser estudiados, dejando los de mayor polaridad más cerca al origen y los
menos polares más lejos.
Revelado de las placas TLC

Luego de sacar nuestra placa cromatográfica y dejarla secar hasta que se evapore el
solvente, se procede a aplicar reactivos para que se den reacciones de coloración. Para el
revelado de nuestra placa utilizaremos el reactivo Dragendorff-NaNO2, ya que con este
reactivo los principales alcaloides del opio toman una coloración marrón anaranjado,
cabe mencionar que el Narceine permanece al principio. Finalmente se procede a
calentar la placa en una plancha calefactora o una secadora de aire.
Luego de sacar nuestra placa cromatográfica y dejarla secar hasta que se evapore el
solvente, se procede a aplicar reactivos para que se den reacciones de coloración. Para el
revelado de nuestra placa utilizaremos el reactivo Dragendorff /NaNO2, ya que con la
colchicina y los alcaloides menores reaccionan como zonas marrones con el reactivo
DRC (vis). Artefactos de colchicina (R, -. 0,6) aparecen como una zona azul en R, - 0,5
(vis) y finalmente se procede a calentar la placa en una plancha calefactora o una
secadora de aire.
MECANISMO
En un gráfico y utilizando MarvinSketch u otro programa de dibujo químico se debe
establecer el mecanismo de la reacción realizada:
Gráfico 1. Ejemplo de mecanismo por medio básico de la aspirina
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Realizar los cálculos estequiométricos (se pueden presentar como anexos) y luego
establecer el rendimiento teórico y compararlo con el real para calcular el porcentaje de
rendimiento. Se deben consignar los principales resultados de la práctica y compararlos
con la bibliografía que esté disponible. Se deben centrar los resultados en calidad,
rendimiento y otros resultados que describan al producto deseado. El máximo de esta
sección puede ser de 3 párrafos
CONCLUSIONES
En un párrafo se exponen los principales resultados de la práctica.
INFORMACIÓN ADICIONAL
Los compuestos aislados del opio es la morfina cuyas propiedades fisicoquímicas son de
blanco, cristalino, inodoro y soluble en agua, además su estructura molecular es
C17H19NO3 y su nomenclatura IUPAC es (5α, 6α)-Didehidro-4,5-epoxi-17-
metilmorfinan-3,6-diol, este compuesto se establece como sulfato de morfina, con una
solubilidad de 60 mg/mL siendo su estructura (C 17H19NO3)2 H2SO4 5H20; también se
encuentra la codeína es un alcaloide que se encuentra de forma natural en el opio cuya
finalidad se utiliza con fines terapéuticos como analgésico, sedante y antitusígeno, e
inclusive es considerado un narcótico, este compuesto tiene forma de cristales inodoros
e incoloros, su aspecto es de forma sólida, color blanco, olor inodoro, su punto de fusión
es 155-159°C, solubilidad con cloroformo, acetato de etilo, Metanol, su nombre IUPAC
(5α,6α)-7,8-didehidro-4,5-epoxi-3-metoxi-17-metilmorfinan-6-ol y su fórmula
molecular C18H21NO3; por último se obtuvo la tebaína cuyas propiedades son sólido
blanco, cristalino blanco, inodoro y fino, su fórmula molecular es C19H21NO3, nombre
IUPAC (4R, 7aR, 12bS) -7,9-dimetoxi-3-metil-2,4,7a, 13-tetrahidro-1H-4,12-
metanobenzofuro [3,2-e] isoquinolina.
BIBLIOGRAFÍA
Se establece como mínimo 4 referencias bibliográficas de calidad (papers, libros
científicos, etc), no se aceptan dentro de la cuenta referencias de sitios como buenas
tareas, rincón del vago o sitios web simples sin respaldo. Las referencias se pondrán en
estilo APA.
 Corzo, A. (2019). Técnicas de análisis en química orgánica: cromatografía. In

Universidad Nacional de Santiago del Estero - UNSE.
https://fcf.unse.edu.ar/archivos/series-didacticas/SD-44-Cromatografia-
CORZO.pdf
Formato para libros

- Apellido, Nombre del autor (año de publicación). Título. Ciudad, País de
publicación: Editorial.
ANEXOS
ANEXO I
Fig1. Cromatografía en capa fina de Opium (A. Luz UV; B. Reactivo Dragendorff)
Fig2. Cromatografía en capa fina de Colchici semen (A. Luz UV; B. Reactivo
Dragendorff)
ANEXO II
1. Cálculos
1.1. Factor de retención de Opium
T1A---> Morfina
T3B---> Papaverina
0.25
Rf A= =0.25
1
0.65
Rf B = =0.65
1
1.2. Factor de retención Colchici semen

T1A---> Colchicina
0.60
Rf A= =0.60
1

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Describir en máximo dos párrafos el objetivo de la práctica y la importancia de su

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Revelado de las placas TLC

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1.2. Factor de retención Colchici semen

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