Toxicolgia TLC

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Universidad Agraria de Ecuador

Materia: Toxicología

1. GENERALIDADES DE LA PRACTICA
1.1. INFORMACIÓN GENERAL
DOCENTE RESPONSABLE: BLGO. JAIME SANTOS
CARRERA: AGROINDUSTRIA
ASIGNATURA: TOXICOLOGIA
FECHA: 18/07/2024
HORA DE INICIO: 7:00 AM HORA FIN: 9:00 AM
SEMESTRE: 3er PARALELO: D
HORAS PRÁTICAS: 1:30

2. INFORMACIÓN DE LA PRÁCTICA

 TEMA DE LA PRÁCTICA
TLC de toxinas

 OBJETIVO DE LA PRÁCTICA.
Evaluar la capacidad de la cromatografía en capa fina (TLC) para separar y analizar las toxinas presentes en una muestra
determinada.

INTRODUCCIÓN Y DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

La cromatografía en capa fina (TLC) se ha consolidado como una herramienta analítica fundamental
en diversos campos científicos, destacando particularmente en el ámbito de la toxicología. Esta técnica,
caracterizada por su versatilidad, rapidez y costo-efectividad, juega un papel crucial en la separación,
identificación y análisis semicuantitativo de compuestos orgánicos complejos, incluyendo toxinas de
origen vegetal y otros metabolitos secundarios.

En el contexto de esta práctica, nos proponemos explorar la aplicación de la TLC en el análisis de


extractos vegetales provenientes de la flor de campana, solanáceas y tomate. Estas especies vegetales son
conocidas por contener una variedad de compuestos bioactivos, algunos de los cuales pueden presentar
propiedades tóxicas o farmacológicas de interés.

El principio fundamental de la TLC se basa en la distribución diferencial de los componentes de una


mezcla entre una fase estacionaria sólida (en este caso, sílica gel) y una fase móvil líquida. A medida
que la fase móvil asciende por capilaridad a través de la placa cromatográfica, arrastra consigo los
diferentes componentes de la muestra. La separación se produce debido a las interacciones específicas de
cada compuesto con ambas fases, resultando en velocidades de migración distintas y, por ende, en la
formación de manchas separadas en la placa.

DESARROLLO.
a) reparación de muestras:
 Se prepararon tres soluciones: flor de campana molida en metanol 100%, flor de solanáceas
en metanol 100%, y una mezcla de tomate.

b) Aplicación de muestras:
 Se aplicaron gotas de cada solución en el centro de dos placas de TLC utilizando una pipeta
o capilar.

c) Desarrollo de las placas:


 Se colocaron gotas de cada muestra en las líneas dibujadas en las placas.
 Se soplaron suavemente hasta formar círculos.
 Las placas se colocaron en dos vasos de precipitados, uno con acetona-metanol y otro con
metanol como fases móviles.

d) Desarrollo de la cromatografía:
 Se permitió que las fases móviles ascendieran por las placas, separando los componentes de
las muestras.

e) Visualización:
 Tras el desarrollo completo, las placas se retiraron y se guardaron bajo hojas de cuaderno.
 Se observaron bajo una lámpara UV para identificar los componentes separados.

f) Análisis de resultados:
 Se registraron el número de manchas, colores y valores de Rf para cada muestra.
 Se compararon los resultados con estándares conocidos para identificar posibles compuestos..

MATERIALES

 2 vasos de precipitación.
 3 mezclas de flor de campana, pimiento, ají ,tomate
 Una pipeta.
 2 placas de silicón
3. RESULTADOS DE LA PRÁCTICA.

Muestras Número de Colores de las manchas Valores de Posibles compuestos (basado en


manchas RF comparación con estándares
TOMATE 7 MARRON BAJO 0.1 y 1.0 Licopeno ,ácido fólico
mg/kg
PIMIENTO 6 Amarillo, verde claro, 0.1 y 5.0 Capsaicina,carotenoides
mg/kg
FLOR DE 7 Amarillo bajo con 0.1 y 5.0 Antocianina ,flavonoides
CAMPANA marrón poquito mg/kg

AJI 8 Rojo con amarillo 0.1 y 5.0 Capsaicina


mg/kg

3.1. RESULTADOS DE APRENDIZAJE EN LA PRÁCTICA

La práctica permitió a los estudiantes evaluar la capacidad de la TLC para separar y analizar las toxinas presentes
en muestras de diferentes plantas, como la flor de campana, solanáceas y tomate. La TLC se consolidó como una
herramienta analítica fundamental en el campo de la toxicología, permitiendo la separación, identificación y
análisis semicuantitativo de compuestos orgánicos complejos, incluyendo toxinas de origen vegetal y otros
metabolitos secundarios.
Durante la práctica, los estudiantes prepararon extractos de las muestras vegetales y los aplicaron en placas de
TLC. Luego, desarrollaron la cromatografía utilizando diferentes fases móviles, lo que permitió la separación de
los componentes de las muestras. Posteriormente, observaron las placas bajo luz UV para identificar los
compuestos separados y registraron el número de manchas, colores y valores de Rf para cada muestra. Estos
resultados se compararon con estándares conocidos para identificar posibles compuestos, como licopeno, ácido
fólico, capsaicina, carotenoides, antocianinas y flavonoides.
En general, la práctica demostró la efectividad de la TLC como una técnica analítica rápida, versátil y costo-
efectiva para el análisis de toxinas y compuestos bioactivos presentes en extractos vegetales. Los resultados
obtenidos proporcionaron información valiosa sobre la composición química de las muestras estudiadas y su
potencial toxicológico o farmacológico

4. CONCLUSIÓN

La práctica realizada tuvo como objetivo evaluar la capacidad de la cromatografía en capa fina (TLC)
para separar y analizar las toxinas presentes en muestras de diferentes plantas, como la flor de campana,
solanáceas y tomate. La TLC se ha consolidado como una herramienta analítica fundamental en el campo
de la toxicología, permitiendo la separación, identificación y análisis semicuantitativo de compuestos
orgánicos complejos, incluyendo toxinas de origen vegetal y otros metabolitos secundarios.

Durante la práctica, se prepararon extractos de las muestras vegetales y se aplicaron en placas de TLC.
Luego, se desarrolló la cromatografía utilizando diferentes fases móviles, lo que permitió la separación
de los componentes de las muestras. Posteriormente, se observaron las placas bajo luz UV para
identificar los compuestos separados y se registraron el número de manchas, colores y valores de Rf para
cada muestra. Estos resultados se compararon con estándares conocidos para identificar posibles
compuestos, como licopeno, ácido fólico, capsaicina, carotenoides, antocianinas y flavonoides.

En general, la práctica demostró la efectividad de la TLC como una técnica analítica rápida, versátil y
costo-efectiva para el análisis de toxinas y compuestos bioactivos presentes en extractos vegetales. Los
resultados obtenidos proporcionan información valiosa sobre la composición química de las muestras
estudiadas y su potencial toxicológico
Anexos

Imagen #1 Imagen #2
Elaborado por:

EMILIA CEVALLOS

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