Determinación de Hemoglobina en Sangre e Inducción de Drepanocitos"

LICENCIATURA:
MÉDICO CIRUJANO
PRÁCTICA DE LABORATORIO:
REPORTE DE PRÁCTICA 4
“Determinación de Hemoglobina en
Sangre e Inducción de Drepanocitos”
Equipo #4
• Díaz Baltazar Nancy
• Espinosa Castillo Laila Fabiola
• Martínez Nicolás Beatriz Berenice
• Ríos Mar Diana Gabriela
• Torres Uscanga Oswaldo Guadalupe
• Villalobos Maldonado Karina Adriana
Docente: Q.F.B Alma Delia Robles Martínez
2°C 20/09/2022
PRÁCTICA 4 DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA EN SANGRE E
INDUCCIÓN DE DREPANOCITOS
OBJETIVO
Que el alumno pueda observar y aprender a determinar la hemoglobina presente en
sangre por medio de la técnica de la cianometahemoglobina.
De igual manera, que el alumno analice y comprenda la manera correcta de realizar

la inducción de drepanocitos.
INTRODUCCIÓN
La molécula de la hemoglobina está compuesta por cuatro grupos hemo y dos pares
de cadenas diferentes de polipéptidos, actúa como vehículo para el transporte de
oxígeno en el organismo.
El análisis de hemoglobina mide los niveles de hemoglobina en la sangre para

detectar posibles trastornos de la sangre.
Este análisis se usa comúnmente para detectar anemia, un

nivel anormalmente bajo de glóbulos rojos en el cuerpo.
Cuando una persona tiene anemia, las células no reciben el
oxígeno que necesitan. Los análisis de hemoglobina también se
hacen comúnmente con otras pruebas, por ejemplo:
• Hematocrito, que mide el porcentaje de glóbulos

rojos en la sangre.
• Conteo sanguíneo completo, que mide el número y

tipo de glóbulos de la sangre.
FUNDAMENTO
El análisis de hemoglobina se usa comúnmente para detectar anemia, un nivel
anormalmente bajo de glóbulos rojos en el cuerpo. Cuando una persona tiene
anemia, las células no reciben el oxígeno que necesitan.
La hemoglobina es una proteína conjugada que sirve para

el transporte de oxígeno y dióxido de carbono. La masa total
de eritrocitos de un adulto contiene unos 600gr. De
hemoglobina capaces de transportar 800ml de oxígeno.
En el ser humano se pueden encontrar las siguientes

hemoglobinas:
• Hemoglobina A: en un adulto normal corresponde a mas del 95% del total.
• Hemoglobina A´: en un adulto sano está en porción menor de 3%.
• Hemoglobina F (fetal): Es la hemoglobina principal en el feto desde el 4° mes

del embarazo hasta aproximadamente los 6 meses de edad. La Hb F tiene
mayor afinidad por el oxígeno.
• Hemoglobina Gower: Desaparece casi por completo en el tercer mes de

embarazo y empieza a aparecer la Hb fetal.
• Hemoglobina S: Consecuencia de una mutación puntual en la posición 6 de

la cadena ß de la globina que resulta en la sustitución del ácido glutámico por
la valina.
VALORES NORMALES DE HEMOGLOBINA
¿QUÉ ES LA ANEMIA?
Es una afección por la deficiencia de hemoglobina. Existe anemia en adultos cuando

la Hb es inferior a 12gr/dl en las mujeres y a 13,5gr/dl en los hombres.
El número de glóbulos rojos no tiene valor para

definir la anemia ya que puede haber un número
normal de glóbulos rojos pero que estén vacíos de
Hb. En ese caso existe anemia con un número de
glóbulos rojos normal.
La inducción de drepanocitos se realiza con

metabisulfito de sodio (Na2S2O3) al 2% es un
agente reductor fuerte y desoxigena el oxígeno
presente en la hemoglobina. Cuando se exponen
eritrocitos que contienen Hb S a esta sustancia, adquieren la forma de medialuna
indicando así que la inducción es positiva.
La anemia drepanocítica es una enfermedad sanguínea hereditaria que hace que

los glóbulos rojos sean deformes (falciformes). Los glóbulos rojos se deforman
porque contienen un tipo anormal de hemoglobina, llamada hemoglobina S, en vez
de contener hemoglobina normal, llamada hemoglobina A. Los drepanocitos son
destruidos por el cuerpo más rápido que las células sanguíneas normales. Esto
causa anemia.
METODOLOGÍA
MATERIAL
• Tubos de ensayo
• Tubo con EDTA
• Espectrofotometro
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Microscopio
HEMOGLOBINA.
La determinación de la hemoglobina se efectuará mediante el método

de la cianometahemoglobina cuyo fundamento es el siguiente: la Hb presente en
la muestra, en presencia de ferricianuro, se oxida a hemiglobina (Hi, también
llamada metahemoglobina) que a su vez se combina con iones de cianuro a
pH 7.2, convirtiéndose en cianuro de hemiglobina (HiCN o
cianmetahemoglobina). Todos los hemocromógenos, a excepción de la
sulfohemoglobina, reaccionan completamente en 3 minutos a una lectura de 540
nm.
1. Se extrae una muestra de sangre preservada con EDTA.
2. Preparar las siguientes disoluciones.
3. En el TUBO 2 se agitará la solución por inversión (3 veces

aproximadamente), de manera que induzca la hemolisis de la muestra.
4. Reposar por un lapso de 5 minutos (TUBO 2).
5. Una vez transcurrido el tiempo de reposo, se mide la absorbancia del

contenido del TUBO 2 en el espectrofotómetro, a una longitud de onda
de 540 nm, ajustando previamente con el blanco reactivo (TUBO1).
6. Efectuar cálculo para determinar la concentración de la Hemoglobina.
INDUCCIÓN DE DREPANOCITOS.
1. En un tubo de ensayo depositar una gota de sangre problema y 3

gotas de metabisulfito de sodio al 2%.
2. Homogenizar.
3. Colocar una gota de la solución en un portaobjetos y cubrirlo con un

cubreobjetos.
4. Sellar los bordes del cubreobjetos con esmalte de uñas o cera de una
vela.
5. Examinar al microscopio a la 1 hora, a las 2 horas y 24 horas para
investigar la presencia de drepanocitos.
6. Informar el resultado de la prueba negativa o positiva según

corresponda.
RESULTADOS
HEMOGLOBINA
36.77g/dL x 0.269 = 9.89113 g/dL
DREPANOCITOS
Negativa
En un principio se obtuvo el resultado de que el paciente

presentaba una sospecha de drepanocitos positivos, se generó
debido al bajo nivel de hemoglobina que arrojaron los
resultados. Pero esta terminó siendo descartada debido a que se decidió dejar la
muestra en observación durante un tiempo prolongado, para poder confirmar o
descartar la sospecha; al mantenerla en reposo si es que la inducción fue correcta
debió haberse incrementado o al menos mantenido la cantidad de drepanocitos en
la muestra, o en caso de ser negativa, debimos observar que la muestra habría
disminuido en la cantidad de drepanocitos observados en el primer análisis, sin
embargo, al volver a observarla obtuvimos que la cantidad de drepanocitos
disminuyo, por ende nuestra inducción fue negativa.
CONCLUSIÓN
Al hacer la práctica notamos que para determinar este volumen que existe de Hb
circulante en la sangre es fácil y sencillo de obtener, ya que a la hora de introducirla
al espectrofotómetro prácticamente nos informa lo que hay que saber de este, solo
hay que obtener el resultado haciendo la operación básica que ya nombramos
anteriormente.
Las siguientes son posibles razones por las que este examen puede realizarse:
• Acidosis láctica
• Anemia de células falciformes
• Anemia por deficiencia de hierro
• Embolia grasa
Existen varios factores para determinar cuándo y con qué frecuencia se pueden
realizar los exámenes. Su duración puede depender de los resultados o terminación
de otros exámenes, procedimientos o tratamientos. Los exámenes pueden ser
realizados inmediatamente en una emergencia o pueden ser demorados conforme
una condición es tratada o monitoreada. Se puede sugerir un examen o llegar a ser
necesario cuando aparecen ciertos signos o síntomas.

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De igual manera, que el alumno analice y comprenda la manera correcta de realizar

El análisis de hemoglobina mide los niveles de hemoglobina en la sangre para

Este análisis se usa comúnmente para detectar anemia, un

• Hematocrito, que mide el porcentaje de glóbulos

• Conteo sanguíneo completo, que mide el número y

La hemoglobina es una proteína conjugada que sirve para

En el ser humano se pueden encontrar las siguientes

• Hemoglobina A´: en un adulto sano está en porción menor de 3%.

• Hemoglobina F (fetal): Es la hemoglobina principal en el feto desde el 4° mes

• Hemoglobina Gower: Desaparece casi por completo en el tercer mes de

• Hemoglobina S: Consecuencia de una mutación puntual en la posición 6 de

VALORES NORMALES DE HEMOGLOBINA

Es una afección por la deficiencia de hemoglobina. Existe anemia en adultos cuando

El número de glóbulos rojos no tiene valor para

La inducción de drepanocitos se realiza con

La anemia drepanocítica es una enfermedad sanguínea hereditaria que hace que

La determinación de la hemoglobina se efectuará mediante el método

1. Se extrae una muestra de sangre preservada con EDTA.

2. Preparar las siguientes disoluciones.

3. En el TUBO 2 se agitará la solución por inversión (3 veces

4. Reposar por un lapso de 5 minutos (TUBO 2).

5. Una vez transcurrido el tiempo de reposo, se mide la absorbancia del

6. Efectuar cálculo para determinar la concentración de la Hemoglobina.

1. En un tubo de ensayo depositar una gota de sangre problema y 3

3. Colocar una gota de la solución en un portaobjetos y cubrirlo con un

6. Informar el resultado de la prueba negativa o positiva según

36.77g/dL x 0.269 = 9.89113 g/dL

En un principio se obtuvo el resultado de que el paciente

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