Bacteriologia

JUAN PEREZ COCA
ILUSTRACIONES: HERIBERTO R. ILLANEZ ZEBALLOS

DIOGENES MARTINEZ COCA
Manual de Bacteriología Clínica
CAPITULO 1
HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
Introducción Clasificación biológica de los microbios
La historia de la bacteriología forma parte de la Cuando se inició el estudio de los
historia del desarrollo de la microbiología, Por lo que microorganismos (inicios del siglo XIX), los microbios
inicialmente abordaremos los principales antecedentes recién descubiertos, fueron clasificados dentro el modelo
del desarrollo de esta ciencia. familiar de dos reinos: el animal y el vegetal; basándose
en algunas de las siguientes características: su parecido
DESARROLLO DE LA MICROBIOLOGÍA estructural, su capacidad fotosintética, su movimiento,
etc.; Por ejemplo: los protozoarios, por tener un
El desarrollo de la microbiología, comienza en membrana flexible y movimiento activo, fueron
los orígenes de la historia misma del hombre, ya que, clasificados en el reino animal; las algas, por ser
siendo los MICROBIOS, los acompañantes cotidianos fotosintéticas y poseer una pared celular rígida, fueron
del organismo humano como causa constante de considerados dentro los vegetales; los hongos, por su
enfermedades infecciosas y muerte de millones de estructura de crecimiento ramificado también fueron
habitantes en el mundo, obligó su estudio, su registrados dentro los vegetales, así como las bacterias
profundización y como consecuencia su desarrollo. por presentar especies fotosintéticas y de bipartición
A continuación, presentamos un resumen de este transversal igual que los hongos, fueron encajados dentro
proceso: este mismo reino. Esta simple clasificación en plantas y
La palabra microbiología, proviene de los animales, fue motivo de muchas controversias, pues,
vocablos griegos: Micros que significa pequeño, Bios = como es sabido, los hongos y la mayor parte de las
vida y Logos = estudio o tratado. Es una ciencia
bacterias no son fotosintéticos para ser considerados
biológica, que tiene por objeto el estudio de los seres
vegetales, así como también, muchas bacterias son
microscópicos denominados microbios o
móviles al igual que las esporas de los hongos y algas,
microorganismos, su interacción de estos con otros
por lo que también tendrían que ser considerados en el
organismos: animales, vegetales y con el medio
ambiente. reino animal.
El desarrollo y especialización de esta ciencia, Dentro este marco de disyuntivas, se observó
ha sido posible gracias a su clasificación en diferentes que existía un carácter que los definía y a su vez los
ramas del conocimiento microbiológico tales como: diferenciaba de los animales y vegetales, y era su
Microbiología industrial, agrícola, médica, sanitaria, organización biológica elemental, pues la de los animales
veterinaria, etc., todos ellos actualmente estudiados por y vegetales era mucho más compleja que la de los
separado. La microbiología médica a su vez, ha sido microbios.
subdividido en 4 disciplinas: Bacteriología (estudio de Los animales y vegetales son seres pluricelulares
las bacterias), Micología (de los hongos), Virología, (los constituidos por células diferenciadas que se organizan
virus) y Parasitología (trata los protozoarios y formando tejidos con funciones especializadas que
metazoarios). constituyen los órganos, y no pueden considerarse sus
células como unidades independientes. Los microbios, en
MICROBIOLOGÍA cambio, en su gran mayoría son seres unicelulares,
MÉDICA aunque existen microbios con estructura multicelular
compuestas por células indiferenciadas, estos al asociarse
no forman tejidos con funciones especializadas, sino que
cada una de ellas constituye un organismo completo e
BACTERIOLOGÍ MICOLOGÍA VIROLOGÍA PARASITOLOGÍA
A independiente dotado de capacidad de crecimiento y
reproducción. Por ello el zoólogo alemán Haeckel en
Esquema Nº 1. Disciplinas de la microbiología médica 1866 propuso como solución la creación de un tercer
reino biológico denominado Protista, que incluiría a
todos los seres vivos dotados de una organización
Microbios o microorganismos biológica elemental.
Estos términos tienen una acepción muy amplia, Más tarde, con la ayuda del microscopio
porque con ellas se engloban a todos los seres minúsculos electrónico se pudo estudiar la estructura celular de los
difundidos en la naturaleza, como son las bacterias, protistas, llegándose a la conclusión de que estos
protozoos, hongos, algas y virus visibles únicamente con organismos estaban constituidos por dos tipos de células:
la ayuda del microscopio. Procariótica y eucariota. Lo que permitió posteriormente
subclasificarlos en:
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1.- Protistas inferiores los demás microbios. Finalmente en 1969 Whittaker

2.- Protistas superiores propuso un sistema de cinco reinos aceptada actualmente:
1.- Los protistas inferiores, llamados también procariotas
(del latín pro = primero, y del griego karyon = núcleo), se
caracterizan por presentar un solo cromosoma, carecer de
membrana nuclear y organitos citoplasmáticos; están
representadas por las bacterias.
Fig. N° 3. Clasificación biológica de los seres vivos

(Fuente: www.personales.com)
1. Reino Monera.- Está formado por organismos

procariotes, con división celular binaria, comprenden las
Fig. N° 1. Protista inferior o procariota (Fuente: www. Genomasur.com) bacterias.
2.- Los protistas superiores, llamados también eucariotas 2. Reino Protista.- Está constituido por organismos
(del griego eu = verdadero; karyon = núcleo), están eucariotes con división celular por mitosis, lo conforman
constituidas principalmente por un verdadero núcleo, los protozoarios.
múltiples cromosomas, organitos citoplasmáticos y un
aparato mitótico que permite la equipartición 3. Reino Fungi.- Son seres eucariotes, se reproducen por
cromosómica entre los núcleos hijos; están representadas división sexual y asexual y no forman tejidos, aquí se
por los protozoos, hongos y algas. encuentran los líquenes, las algas aclorofíceas y los
hongos, estos últimos por no poseer clorofila ni otro
pigmento fotosintetizante, no formar verdaderos tejidos,
no presentar celulosa en su pared celular y no almacenar
almidón como las plantas, fueron definitivamente
separadas del reino vegetal.
4. Reino Vegetal.- Lo forman organismos autotróficos,

fotosintetizantes, multicelulares y con organización
tisular, aquí se incluyen los vegetales superiores y las
algas clorofíceas.
5. Reino Animal.- Está formado por seres heterotróficos,

multicelulares y con organización tisular altamente
diferenciada, comprende los seres vivos que pasan por el
Fig. N° 2. Protista superior o Eucariota (Fuente: estadio de gástrula.
www.naturalezayespiritualidad.blogspot.com)
Evidenciándose con ello, que los eucariotas tienen una

estructura celular más compleja que los procariotas; por
esto se afirma, que en la relación evolutiva de los seres
vivos, los procariotas son los antecesores a los eucariotas,
cuya brecha evolutiva entre ambas, habría producido las
bacterias verde azules conocidas como cianobacterias,
quienes por su fotosíntesis y la liberación de oxígeno del
agua proporcionaron las condiciones atmosféricas
necesarias para la respiración y supervivencia de los
eucariotas. Fig. N° 4. Haeckel (izq,) y Whittaker (Der.) Zoologos naturalistas
(Fuente: www. Ecologismo.com)
Posteriormente, otros autores propusieron la
creación de más reinos biológicos, como Copelad en
1956, quien introdujo un cuarto reino denominada
Monera, que separaba a las bacterias y cianobacterias de
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Relación evolutiva de los microorganismos, multicelulares complejos y desarrollados como los

plantas y animales animales y plantas actualmente conocidos y otros como
La historia de la microbiología reconoce que las los microbios perfeccionaron su organización estructural
plantas, animales y microorganismos tuvieron una relativamente simple, adquiriendo mayor capacidad de
ascendencia común, es decir que todos los seres vivos se adaptación, supervivencia y reproducción, y de esta
originaron a partir de organismos precelulares comunes manera mantener vigente su especie.
(células primitivas), los mismos que evolucionaron A continuación presentamos una explicación
adaptándose al medio ambiente, se especializaron y esquemática de la relación evolutiva entre los
diferenciaron, para luego unos alcanzar organismos microorganismos, los vegetales y animales:
Fig. Nº 5. Relación evolutiva de los microorganismos, plantas y animales (Fuente: Jawetz, 1985).
Producto de esta teoría, se plantean otras que Oparin en la Unión Soviética y Haldane en Inglaterra.
incluso tratan de explicar el origen de la vida. A Según el cual, el desarrollo de los organismos vivos fue
continuación presentamos una breve referencia de los precedido por un Periodo de evolución prebiótico
mismos. químico, que abarco quizá los 2 primeros de los 4 a 5
billones de años de la tierra. Durante este periodo se
Teoría de la evolución precelular y origen de produjo la interacción de substancias inorgánicas
la vida presentes en la tierra: como los gases, el agua, los rayos
ultravioleta, la luz y el calor volcánico; dando como
La teoría evolutiva de Charles Darwin, producto la formación de una gran variedad de
considera desde un punto de vista lógico, la existencia de compuestos orgánicos.
un proceso inicial de evolución de la vida, el cual no Se cree que las materias resultantes de esta
excluye “la posibilidad de que en condiciones distintas de acumulación orgánica desarrollaron sistemas que
medio ambiente y periodo de tiempo suficiente, la catalizaron lentamente su propia formación a partir de
materia inorgánica pudiera producir seres vivos” substratos más simples, luego con el tiempo la selección
de catálisis más perfeccionadas permitió la creación de
un sistema de creciente complejidad, condensando los
compuestos orgánicos en volúmenes más pequeño,
limitados o recubiertos por una membrana que contenían
un genoma, y que en cuyo interior existía un grupo de
substancias catalíticas que llevaban a cabo tanto la
replicación del material genético como la síntesis de otras
sustancias catalíticas, lo que finalmente produjera la
mínima unidad de vida denominada organismo
Fig. N°6. Charles Darwin, defensor de la teoría evolutiva de precelular, que nosotros conocemos como el tipo más
los seres vivos (fuente: www. lamochila .espectador.com) primitivo de célula; este periodo se denominó Evolución
biológica precelular. Posteriormente estas estructuras
Una explicación general, ahora ampliamente
aceptada, fue presentada independientemente en 1920 por
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precelulares, evolucionaron a organismos mucho más arquitectura compleja conocida como célula. Que en la
complejas, formándose el grupo procariotico ancestral. actualidad se puede observar ese tronco común, por el
legado que dejaron a todos los seres vivos: las moléculas
De esta relación se desprende que el inicio de la de ADN y ARN además del comportamiento y estructura
vida, está muy ligado al origen de los microorganismos celular, por ejemplo las células ciliadas de nuestros
que evolucionaron a partir de estas formas precelulares, epitelios, o los mecanismos bioquímicos anaeróbicos a
que supone la formulación de procesos relativamente los que recurren nuestras fibras musculares luego de un
sencillos o relativamente complejos que permitieron a esfuerzo y falta de oxígeno.
través del proceso evolutivo estructurar toda una
Fig. .Nº 7. Oparin (Izq.) y Haldane (Der.), defensores de la teoría de la evolución precelular y origen de la vida.
(fuente: wwwinformatica4sisante.blogspot.com).
Las hipótesis de Haldane y Oparin recibieron Posteriormente, otras investigaciones similares, han
considerable apoyo cuando Miller y Urey demostraron producido sustancias tan complejas como las bases de los
que era posible la formación de varios aminoácidos en ácidos nucleicos, polinucleótidos y polipéptidos
cantidad detectable mediante la acción de una descarga (Componentes estructurales esenciales de una célula).
eléctrica sobre un gas que simulaba el gas existente en la
atmósfera en las primeras épocas de la tierra (mezcla de
vapor de agua, amonio, metano e hidrógeno).
Fig. Nº 8. Miller (Izq.) y Urey (Der.) Utilizando un instrumento fabricado por ellos, demostraron en laboratorio que era posible la formación de
subunidades constituyentes de una célula, similar a lo que podría haber ocurrido hace varios billones de años en la tierra.
(Fuente: www.experimentosdemiller-urey.blogspot.com).
EVOLUCIÓN PREBIÓTICO EVOLUCIÓN

QUÍMICO BIOLÓGICA FORMACIÓN DEL
(Interacción de gas, agua, rayos PRECELULAR GRUPO
ultravioleta y calor volcánico para (Formación de elementos PROCARIOTICO
formar compuestos orgánicos) precursores. Virus? ANCESTRAL
Esquema Nº 2. Periodos de la evolución precelular y origen de la vida
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Sin embargo la explicación del origen de la vida, Origen de las enfermedades

no solamente se encierra en los planteamientos La gente de aquella época (edad media), tenía
anteriormente citados, sino que actualmente, también se los conceptos y creencias más absurdas sobre las causas,
busca los orígenes en el ámbito extraterrenal, debido a la vías de transmisión y los medios de lucha contra dichas
posibilidad de la caída a la tierra de agua y substancias enfermedades; Por ejemplo, los Hebreos y los Griegos,
prebióticas o microorganismos extraterrestres a través de creían que dichas plagas, eran castigos de Dios, para los
meteoritos y cometas. hombres por sus pecados, donde la curación y lo que es
más importante, la prevención de estas enfermedades se
Datos históricos sobre la evolución de la buscaban por medio de sacrificios y purificaciones
microbiología destinadas a aplacar la furia de los Dioses. Y aquellos
Como datos históricos sobre la evolución de la que cuestionaban estas creencias basados en la ciencia de
microbiología podemos mencionar los antecedentes más la experiencia, eran considerados brujos y por tanto
trascendentales que se relacionan con la acción sujetos a persecución y castigo por parte de la iglesia.
patogénica de algunos microorganismos que marcaron la Sin embargo, incluso en ese entonces, el
vida de nuestros antepasados, y la búsqueda incesante de concepto de contagio y la práctica de las normas de
cada uno de sus agentes causales. Referirnos por ejemplo higiene no eran totalmente desconocidos. Por ejemplo, en
al azote de una seria de enfermedades infecciosas como las escrituras del viejo testamento de la biblia, ya se
el cólera, la viruela, la peste y otras, que en forma señalaba la creencia de que la lepra es contagiosa y puede
epidémica afectó a continentes enteros, como el Asia, transmitirse por contacto de una persona a otra.
África, Europa y América, diezmando la vida de millones Posteriormente destacados sabios de aquella
de seres humanos. época como Hipócrates (460 – 377 a.d.J.), Varrón (116 –
Estas enfermedades microbianas se propagaron 27 a.d.J.), Lucrecio (95 – 55 a.d.J.), Galeno (131 – 201
extensamente en los países de Europa y Asia durante las d.d.J.) y otros; postularon que las enfermedades se
cruzadas; en el que por ejemplo, la peste negra diezmó contagiaba mediante criaturas invisibles, por tanto el
ciudades enteras, provocando la muerte de una cuarta concepto de contagio ya era familiar para los escritores
parte de la población Europea. griegos, romanos y árabes.
No muy lejos de este grupo de epidemias, Roger Bacón en el siglo XIII, postuló que
existieron también otras enfermedades infecciosas como criaturas vivientes e invisibles producían enfermedades.
la tuberculosis, gonorrea, sífilis, lepra, diarreas, En 1546 un veneciano llamado Jerónimo Fracastorius en
poliomielitis, neumonía y otras, que en forma lenta, han su libro: De Contagione, analiza las epidemias de
acompañado al hombre como un problema cotidiano en distintas enfermedades, llegando a la conclusión de que
el transcurso de su desarrollo. estas se transmiten de persona a persona a través de
En esa época, la gente ignoraba la causa de estas gérmenes vivientes llamadas seminaria morbi o
enfermedades y la forma de cómo luchar contra ellas. Por semillas de la enfermedad. Libro con el que nace la
lo que surgieron una serie de explicaciones sobre estas ciencia de la epidemiología.
enfermedades.
Fig. Nº 9. Hipócrates (Izq.) y Galeno (Der.), postularon que el contagio de las enfermedades se producía por criaturas invisibles.
(Fuente: www.asocae.org y www.pt.ars-curandi.wikia.com).
A pesar de los argumentos fundamentados sobre gracias a los logros de la óptica, recién se pudo visualizar
la existencia de dichos seres microscópicos, éstos no la existencia de ese mundo microbiano tan reclamado.
fueron seriamente admitidos hasta que fueron vistos con Así, en 1590, Hans y Saecharias Jansen,
el microscopio. Como quien dice “ver para creer” pulidores de cristal, diseñaron y construyeron un aparato
Al respecto recordar, que a principios del siglo con lentes de aumento, que permitió divisar objetos
XVII, durante el periodo de la revolución industrial y pequeños.
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Sin embargo, quien fue el primero en observar los

microbios con la ayuda de lentes de alta calidad, fue el
Holandés Anthony Van Leewenhoek, en 1677, dándose
Fig.N° 10.Saecharias Jansen (Fuente: www. geschiedeniszeeland.nl). con este hecho, el inicio de la microbiología; aunque
fueron necesarios que pasarán alrededor de 150 años para
En 1609 – 1610, G. Galileo, además de inventar el alcanzar el verdadero desarrollo de ésta ciencia.
telescopio, construyó el primer microscopio simple. Leewenhoek, se caracterizó por su aislamiento
del mundo de la cultura y su falta de formación científica.
Era mercader de paños de la ciudad de Delft (Holanda),
lugar de su nacimiento. La mayor parte de su tiempo lo
dedicaba a pulir pequeños lentes de gran aumento
(probablemente superiores a 300X). Con ellas, este
hombre original y paciente, descubrió una increíble
variedad de estructuras microscópicas, denominadas por
Fig. Nº 11.Galileo (Fuente: www.chrismielost.blogspot.com). él como “animáculos”, entre ellas, bacterias (cocos,
bacilos y espirilos), y otros microbios como protozoos,
Posteriormente, el físico C. Drebbel, construyo algas y hongos, en muestras de agua, sarro dentario,
un microscopio mejorado con dos lentes, con el que M. heces, etc. Estos descubrimientos fueron descritos y
Malpighi, Rober Hooke y otros, estudiaron las células dibujados por Leewenhoek, en una serie de cartas a la
animales y vegetales. Royal Society de Londres (Institución Científica de
Inglaterra), cuyos distinguidos miembros no llegaron
nunca a establecer contacto directo con él, por lo tanto,
no valoraron el aporte significativo de estos
descubrimientos.
Fig. Nº 12.Rober Hooke (Fuente: www.softarchive.net).
Fig. Nº 13. Anthony Van Leewenhoek, fue el primero en observar y dibujar los microbios en movimiento,con la ayuda de un microscopio y lentes de
gran aumento de su propia invención en 1677 (Fuente: www.cienciacuriosa.com).
En posteriores años, el desarrollo de la sustancias orgánicas. Esta postulación fue largamente

microbiología, fue estimulada significativamente por las discutida por mucho autores de aquella época; incluso
ansias de hallar solución a una controversia intensa y Aristóteles (384 – 322 a.d.J.), pensó que los animales
prolongada que surgió en el siglo XVIII referida a las podían originarse del suelo, y durante siglos se creyó que
teorías evolucionistas y creacionistas; ésta última se podían producir gusanos por exposición de la carne al
planteaba la generación espontánea de la vida y su calor y el aire. Esto no fue refutado hasta que Francesco
relación con los procesos de la fermentación de las Redi, (1626- 1697) probó que una gasa colocada en un
sustancias. recipiente que contenía carne, impedía el colocado de
a) Generación espontánea de la vida huevos de las moscas y la formación de gusanos en ella.
Hasta los últimos siglos, se creía que los Las recetas para la producción de ratones y otras formas
organismos vivos podían originarse espontáneamente en similares de vida en la basura y los desperdicios, fueron
el curso de los procesos de descomposición de las gradualmente refutadas y descartadas de una manera
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similar. Sin embargo, la cuestión no fue aceptada por demostrando así, que la fuente de contaminación era el
todos. Cuando se descubrieron los microbios, su relación aire por las partículas de polvo que contenían microbios.
de estos con la putrefacción y la fermentación, hizo que A pesar de ello, Pouchet, inconforme, reclamó el poco
se planteara nuevamente el problema de la generación aire que se aportaba a la infusión; Entonces aparece Luis
espontánea. En ese entonces, John Needhan en 1749, Pasteur (1822- 1895), preparó la infusión de carne
observó la aparición de microorganismos en la carne en hervida en un recipientes que terminaban en tubos en
procesos de putrefacción e interpretó este hecho como cuello de cisne, largos y delgado que dejaban pasar
una generación espontánea. bastante aire, tal como reclamaba Pouchet, en estos tubos
Este problema empezó a resolverse en el siglo las partículas de polvo contaminados con microbios eran
XVIII gracias a los cuidadosos experimentos de un atrapadas por la humedad de la condensación del cuello
monje italiano. Lázaro Spallanzani (1730- 1800), que del matraz; con la que consiguió mantener estériles las
introdujo el uso de medios de cultivo estériles. Este infusiones, pero si se rompía el cuello, facilitando el paso
investigador demostró que un líquido putrescible, tal directo del aire y partículas de polvo, se contaminaba el
como una infusión de carne, podría conservarse medio de cultivo. No conformes sus opositores se
indefinidamente si se hervía y se tapaba bien (ver fig. N° ingeniaron utilizando esta vez como infusión, heno (en
14); estos datos fueron duramente combatidos por tanto que Pasteur empleaba extracto de levadura en sus
Needhan y posteriormente por Pouchet (1859), demostraciones), el heno contenía microorganismos
argumentando que era necesario el acceso de aire para la resistentes al calor, los mismos que no morían con la
generación espontánea de los seres vivientes ebullición, en consecuencia la infusión estaba repleta de
microscópicos. Posteriormente, Schulze, Schwann, microbios. Como respuesta a este nuevo desafío aparece
Schroeder y Von Dusch pudieron comprobar que, si la el físico británico John Tyndall, en 1877, el mismo que,
infusión hervida se protege del aire directo, en un recurrió a un calentamiento y enfriamiento discontinuo
recipiente donde se haga pasar el aire a través de un tubo de la infusión para destruir dichas bacterias
calentado o de un filtro de algodón, colocado en el cuello (tindalización), manteniéndose nuevamente estéril la
del matraz, no se desarrollan microorganismo alguno, infusión
Fig. Nº 14. Needhan (Fuente: www.es.wikipedia.org) y Lázaro Spallanzani (Fuente: www.spallanzani-digestion.skyrock.com) y sus experimentos sobre la
generación espontánea
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Fig. Nº 15. Demostración de Louis Pasteur: los balones con cuello de cisne evitan la Jhon Tyndall (Fuente: www.twitter.com).
Contaminación de las infusiones (Fuente: www.juanmacabrera.wordpress.com).
Ese mismo año (1877), Ferdinand Cohn

demostró la existencia de bacilos esporulados en el heno Teoría microbiana de la enfermedad
(Bacillus subtilis), resistentes a la ebullición, para lo cual Como se sabe a través de la historia, las
se construyó un equipo que además de elevar la enfermedades infecciosas han constituido la carga más
temperatura a 120 grados centígrados, proporcione pesada para la humanidad, porque, no solo era la causa
presión atmosférica y humedad al mismo tiempo principal de muerte, sino, porque éstas principalmente
(autoclave), que destruiría estas formas microbianas afectaban a los niños y jóvenes. Además por su
resistentes. Con lo que se concluye definitivamente esta naturaleza epidémica, las infecciones han desmantelado y
larga historia. aterrorizado a los pueblos y han determinado el destino
de los ejércitos y de las naciones; así, por ejemplo, la
viruela permitió a unas pocas docenas de españoles
destruir la floreciente civilización mexicana.
Para demostrar la teoría microbiana de la
enfermedad hubo que recurrir a una serie de pruebas
experimentales, que se fueron acumulando lentamente a
través de la historia de la humanidad, ésta teoría es
sostenida por tres componentes: Transmisión de la
infección, su prevención y finalmente, la identificación
Fig. Nº 16. Ferdinand Cohn constructor del autoclave de los agentes causales.
(Fuente: www.timerime.com).
1.- Transmisión de la infección.- El famoso cirujano
b) Fermentación de las sustancias John Hunter, al inocularse material purulento procedente
Al haberse demostrado que la vida proviene de de un enfermo con gonorrea, demostró heroicamente en
la vida (Biogénesis) y no es generada espontáneamente a el siglo XVIII la transmisión de la infección. Por
partir de materiales no vivos (abiogénesis), no fue difícil desgracia para él, también paralelamente se transmitió la
probar que los procesos fermentativos no eran más que la sífilis que sufría el paciente. En 1840, el médico Oliver
consecuencia del desarrollo de microorganismos y que Wendell Holmes denunciaba que una forma de transmitir
las diversas fermentaciones se debían a la acción de las indirectamente una infección era cuando los médicos
diferentes clases de microbios obstetras visitaban a varias enfermas seguidas sin lavarse
Más tarde al estudiar las enfermedades del vino las manos, por lo que serían los responsables del
y la cerveza, se observó que éstas se debían a incremento de las sepsis puerperal, que era una causa
fermentaciones secundarias, debido a la contaminación frecuente de muerte materna.
con otros microorganismos. Estas contaminaciones se El empleo de animales de experimentación en
evitaban, sometiendo los caldos del vino y la cerveza a la estos estudios se introdujo algo más tarde; por ejemplo,
acción del calor, procedimiento denominado en 1857 Brauell encontró el bacilo del ántrax en la sangre
posteriormente como pasteurización. de un ser humano y transmitió la enfermedad a una oveja.
La semejanza de los procesos fermentativos con Obermeir, en 1873 observó formas espiraladas
las enfermedades infecciosas hizo que pronto se en la sangre de un paciente con fiebre recurrente y
considerara el papel causal de los microorganismos y se reprodujo la enfermedad en un ser humano al que inyecto
admitió la teoría microbiana de las enfermedades con sangre infectada.
infecciosas, que rápidamente fue admitida por gran En 1854, John Snow, en Londres, investigó y
número de médicos y biólogos. localizó un foco epidémico de cólera en la actualmente
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famosa bomba de extracción de agua llamada Broad médico inglés, observo que los ordeñadores de vacas que
Street y dedujo que esta enfermedad entérica se originaba se habían infectado en las manos con viruela bovina
por la distribución de agua contaminada con materia (cowpox), no padecían viruela humana (smailpox); esto
fecal. Con este hecho, John Snow aporto una prueba le llevó a practicar inoculaciones por escarificación en la
detallada y precisa de la contagiosidad de esta piel de pacientes sanos, con linfa y pústula de viruela
enfermedad. bovina, y observó que se producía una infección
localizada leve que protegía posteriormente contra la
2.- Prevención.- Las medidas preventivas prestaron viruela humana (de este acontecimiento proviene el
también su apoyo a esta teoría. En 1796, Edward Jenner, denominativo de vacuna).
Fig. Nº 17. Niño con viruela (Izq). Edward Jenner (Der), autor de la vacuna contra la viruela, realiza la escarificación en la piel de un niño con pus de
viruela bovina (Fuente: www. dipity.com).
Joseph Lister, en l860, impresionado con los microbios patógenos reconocidos fueron los hongos,
trabajos de Pasteur, sobre la presencia de microbios cuyos tamaños era mayor que el de las bacterias. En
aéreos y de su importancia en la contaminación de los 1836, Agostino Bassi demostró experimentalmente que
medios de cultivo estériles, pensó que una contaminación era un hongo la causa de una enfermedad (de los gusanos
similar podía ser la responsable del frecuente desarrollo de seda llamada Pebrine). En 1843 D. Gruby, descubrió
de pus en los tejidos expuestos durante el curso de las el agente etiológico de la tricofitosis (tiña).
operaciones quirúrgicas, lo que lo llevó a utilizar en La microbiología, como ciencia experimental
forma directa fenol y bicloruro de mercurio, para el evolucionó muy lentamente; para su desarrollo fue
lavado de las heridas, manos y material quirúrgico. necesaria la aplicación de una metodología especial. La
Además de rociar con fenol la sala de quirófano, con lo clave de su evolución fue el uso de materiales estériles y
que pudo disminuir las cifras de mortalidad de técnicas asépticas. El químico define la pureza en
postoperatoria. De esta manera, sentó las bases de la términos de porcentajes de material contaminante, en
desinfección y antisepsia. cambio en microbiología una sola célula contaminante
puede hacer fracasar todo un experimento. Por ello, los
investigadores sólo pudieron reconocer la existencia de
las distintas variedades de microbios, su distribución y
sus principales funciones después de poseer las técnicas
adecuadas para evitar las contaminaciones.
IMPORTANTES DESCUBRIMIENTOS EN
LA EDAD DE ORO DE LA
MICROBIOLOGÍA
A continuación, una breve referencia a los
principales descubrimientos que se lograron, en el
Fig. Nº 18. Joseph Lister fue el primero en utilizar desinfectantes y periodo que se denominó: Edad de oro de la
antisépticos en la curación de heridas quirúrgicas, la descontaminación microbiología: 1875 - 1900, identificando a los autores y
del quirófano y material quirúrgico (Fuente: www.elperiodico.com). hombres de ciencia más destacados que contribuyeron al
desarrollo de la microbiología.
3.- Identificación de los agentes infecciosos.- Las Luis Pasteur, nació en Arbois Lilla, el año de
pruebas epidemiológicas de la contagiosidad, aunque 1822. Hijo de Charles Pasteur, de cuna humilde, estudió
convincentes, no estaban apoyadas por una demostración química en la escuela Normal de Paris, donde se dedica
directa de los agente de la infección. Los primeros al estudio de la isomería del ácido tartárico. Se relaciona
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con el científico Cagñard La Tour, con él conoce las 4.- Descubre la vacuna antirrábica, que consistió en
fermentaciones. Al presentarse algunos problemas que utilizar virus atenuados provenientes de cerebros
lesionaban la economía de su país, se dedicó a la desecados de conejos muertos por rabia, desde 14 días,
investigación y la búsqueda de soluciones. 13, 12, 11, etc., hasta un día de desecado, los mismos
eran inoculados en las personas, primeramente los
desecados por 14 días, luego el de 13 días, hasta llegar al
de un día, de esta manera se lograba inmunizar contra
esta terrible enfermedad. La primera vacuna antirrábica
que realizó Pasteur fue al niño José Meister de 9 años de
edad, el 6 de Julio de 1885.
5.- Descubre 4 métodos para atenuar microorganismos y

convertirlos en vacunas útiles: envejecimiento de los
cultivos (cólera de los polluelos), cultivo a altas
temperaturas (Bacillus anthracis), pases a través de otras
Fig. Nº 19. Luis Pasteur, autor de varios descubrimientos entre ellos la especies huéspedes (erisipela de los cerdos) y secado de
vacuna antirrábica (Fuente: www.biography.com). médula espinal de conejo muerto (rabia), con lo que se
logró seleccionar los mutantes menos virulentos y
1.- Para el denominado torcido de los vinos destrucción de los microorganismos virulentos con
(transformación del vino en vinagre), descubrió, que retención de su capacidad inmunizante.
existían distintos microbios asociados a diferentes tipos Roberto Koch, nació en Wolstein, Alemania en
de fermentación, por ejemplo, unas de forma oval o 1843, y fallece en 1910.
esférica de tamaño variable (llamadas levaduras),
realizaban fermentación alcohólica y otros en forma de
pequeños bastoncitos (lactobacilos), ejecutaban una
fermentación láctica (descubrimiento de la respiración
anaerobia). Llegando a la conclusión de que los
microbios contaminantes del vino (lactobacilos), al
multiplicarse rápidamente y realizar fermentación láctica,
transformaban el vino en vinagre, Por lo que Pasteur
recomendó calentar el vino, para matar los microbios
contaminantes y de esta manera conservar sano el vino.
Todo el mundo conoce hoy día este pequeño truco con el
nombre de pasteurización. De estas observaciones,
Pasteur dedujo, que determinados microbios
desempeñarían cierto papel en las enfermedades que
afectaban al hombre. Fig. Nº 20. Roberto Koch, descubrió al agente causal de la tuberculosis
(Fuente: www.pt.wikipedia.org).
2.- Descubrió la vacuna anti carbuncosa, que consistió en
utilizar bacilos atenuados del propio carbunco (Bacillus Sus principales descubrimientos son:
anthracis), provenientes de cultivos viejos, que eran
administrados a los animales enfermos en dos dosis, la 1.- En 1876, aisló en cultivo puro al bacilos del carbunco
primera dosis de bacilos atenuados tenia escasa (Bacillus anthracis), utilizando como medio de cultivo el
virulencia, solo podía matar ratones, luego de 12 días se humor acuoso del ojo de buey e inoculó en ratones,
administraba la segunda dosis cuya virulencia podía reproduciendo de esta manera la enfermedad del
matar conejillos de indias, ésta dosis lograban inmunizar carbunco, descubrió que dichos bacilos tenían esporas
los animales contra la enfermedad. Y para comprobar su que contaminaban los pastos de las praderas donde se
eficacia Pasteur, el 31 de mayo de 1881 en Pouilly-le- alimentaban los animales, transmitiéndose de esta manera
Fort, inoculó a los animales vacunados una dosis mortal la enfermedad de un animal a otro.
del carbunco, los mismos que resistieron la enfermedad.
2.- El 24 de marzo de 1882, presento su descubrimiento
3.- Otro problema al que se dedicó, fue la enfermedad del del bacilo de la tuberculosis, donde expuso
gusano de seda llamada Pebrine, causadas por un hongo metodológicamente este hecho, lo que actualmente se
denominado Botrytis bassiana (en honor de su conoce como: Los postulados de Koch.:
descubridor: Agostino Bassi), que estaba arruinando la a) El microorganismo se encuentra siempre en las
industria de seda francesa. Al respecto Pasteur lesiones de la enfermedad.
recomendó aislar los gusanos sanos e incinerar los demás b) Puede ser aislado en cultivos puros en medios
y si era preciso, importar otros gusanos de china o Japón. artificiales.
10
c) La inoculación del microorganismo aislado por

cultivo, en animales de experimentación, debe
reproducir la misma enfermedad.
d) El agente patógeno puede recuperarse a partir de
las lesiones producidas en estos animales.
Estos criterios han sido muy valiosos para la
identificación de los agentes patógenos, aunque no todos
ellos se cumplen siempre: Ciertos organismos (entre ellos
los virus) no crecen en medios artificiales, y otros son
Fig. Nº 22. Ilia Méchnikov, expositor de la teoría de la fagocitosis
patógenos tan solo para el hombre. (Fuente: www.probiosalud.com).
Fue el primero en utilizar medios sólidos a base de
gelatina, caldo de carne como base nutritiva, preparado En 1892, Dimitri Ivanovski, descubre que la
por Loeffler. En 1882 la esposa de uno de sus enfermedad, mosaico del tabaco, que provocaba grandes
colaboradores sugiere el uso de agar-agar como pérdidas económicas a Rusia, estaba causada por un
solidificante, y en 1887 R.J. Petri (ayudante de Koch) virus, a partir de este acontecimiento, se estableció la
inventa las cajas petri. explicación de que muchas de las enfermedades estaban
Con la poderosa metodología desarrollada por Koch, causadas por este tipo de microorganismos.
él y los miembros de la escuela alemana, aíslan el bacilo
tífico, diftérico, neumococo, estafilococo, estreptococo,
meningococo, gonococo y bacilo tetánico.
3.- En 1884, descubre el Vibrión Colérico, causante del

cólera en ocasión de una epidemia que se desarrollaba en
Calcuta – Alejandría.
En 1882, Ziehl y Neelsen desarrollan un método
especial (ácido alcohólico) de tinción para
Mycobacterias.
En 1884 Hans Christian Gram, descubre la Fig. .Nº 23. Dimitri Ivanovski (Fuente: Piatkin, 1989).
tinción diferencial que lleva su nombre: “Tinción de
Gram”. En 1891, Paul Ehrlich, demostró que un gran
número de sustancias tóxicas o no, eran capaces de
inducir la formación de anticuerpos. Desarrollando su
célebre teoría de la inmunidad basada en las “cadena
laterales”, según la cual la reacción antígeno-anticuerpo,
base de la inmunidad humoral, se debía a una unión entre
grupos químicos específicos, localizados en la superficie
del antígeno y del anticuerpo, que presentarían
estructuras complementarias.
Fig. N° 21. Hans Christian Joachim Gram, 1852-1938.

(Fuente: www. medbiography.blogspot.com).
Ilia Méchnikov, en 1882 estudia los mecanismos

de defensa del organismo, contra los agentes infecciosos.
Contribuyendo de esta manera a la teoría de la
fagocitosis, mediante un experimento realizado en las
larvas transparentes de las estrellas de mar, en el que sus
células mesodérmicas defendían el organismo de la
estrella de mar, contra las sustancias extrañas que se
introducían en ellas. Dichas observaciones sirvieron de
fundamento para suponer que los leucocitos (fagocitos), y
otras células del organismo humano también cumplen
Fig. Nº 24.Paul Ehrlich y la teoría de la inmunidad basada en la
con esta misma función defensiva. reacción antígeno-anticuerpo (Fuente: www. wandylee.wordpress.com).
En 1883, Méchnikov, expone su teoría de la
fagocitosis, demostrando que la inflamación es una En 1910, Paul Ehrlich, y su colaborador
reacción activa del organismo contra los microbios Berthein, en la búsqueda de la bala mágica que curaría a
patógenos. los hombres de las diferentes enfermedades, después de
combinar arsénico con benzol y otros compuestos, llegó a
11
fabricar su compuesto número 606, que resultó ser un

medicamento que curaba a los enfermos con sífilis, dicho
compuesto se lo llamo más tarde Salvarsán.
Carlos Finlay, (Cubano) descubre el mecanismo

de transmisión de la fiebre amarilla, la misma fue
confirmada en la Habana (cuba), por Walter Reed, Jessé
Lazear, James Carrol y Agromonte, por medio de varias
experimentaciones mediante la picadura de mosquitos
hembras llamados “stegomya” a hombres enfermos con
fiebre amarilla, para que los mismos puedan picar Fig. Nº 26.Alexander Fleming. Descubre la penicilina accidentalmente
posteriormente a soldados norteamericanos voluntarios, en un cultivo de estafilococos contaminados con hongos de la variedad
empleados civiles y emigrantes españoles, en la que Penicillium (Fuente: Schott, 1993)
lamentablemente se produjo la muerte de Lazear y varios
de los voluntarios. A partir de este descubrimiento surgen otras
El ensayo experimental definitivo se realizó el como el de Domagk, que descubre las sulfas, Waksman
21 de Diciembre de 1900, para lo que se dispuso una descubre la estreptomicina, etc.
barraca dividida en dos, por una tela fina que no dejara Posteriormente, otras contribuciones
pasar ningún mosquito, uno de los lados de la barraca se impresionantes son los que llevaron al entendimiento
limpió rigurosamente donde Jhon Moran voluntario, se preliminar del funcionamiento de moléculas en el interior
sometió a la picadura de mosquitos infectados, al otro de la célula viva, campo denominado biología molecular,
lado de la barraca dividida con la tela, se encontraban dos en estos estudios, se han utilizado microorganismos y
voluntarios que dormían entre ropas , sábanas, pijamas virus debido a la simplicidad relativa de su estructura.
sucias, utilizados por los enfermos muertos de fiebre Mas tarde el descubrimiento de la estructura y
amarilla, luego de permanecer varios días, Jhon Morán función del DNA portador del mensaje genético por
enfermó con fiebre amarilla y los dos voluntarios vecinos Watson y Crick en 1953 y los trabajos de Avery,
no lo hicieron. Con lo que W. Reed llegó a la conclusión Lederbergy Tatum (1958), han permitido utilizar a las
de que la picadura del mosquito infectado con fiebre bacterias como modelos, para el estudio del metabolismo
amarilla era la cusa de la transmisión de la enfermedad y y de la genética en general. Esperando en el futuro, que
no el contacto con ropas y enseres del enfermo. toda la información que se logre, permita desarrollar
nuevos métodos de tratamiento, para las diversas
enfermedades que afectan al hombre.
Fig. Nº 25.Carlos Finlay (Izq.), y Walter Reed (Der.): La fiebre amarilla

se transmite por el mosquito Aedes Aegypti“stegomya” (Fuente: www.
Finlay.com).
En 1929, A. Fleming descubre la penicilina, al

contaminar accidentalmente un cultivo de estafilococos
con el hongo llamado: Penicillium notatum, proveniente
del medio ambiente, observándose una inhibición de las
colonias estafilocócicas alrededor del hongo, haciéndole Fig. Nº 27.Watson (Izq.) y Crick (Der.) (Fuente: www. naukas.com).
deducir este hecho, como una acción antibacteriana del
hongo contra el estafilococo.
12
CAPITULO 2
BACTERIOLOGÍA CLÍNICA
Definición de bacteriología Importancia de su estudio
La bacteriología es una disciplina de la Es innegable el aporte de esta disciplina en el
microbiología que tiene por objeto el estudio de los diagnóstico etiológico de numerosas enfermedades
microorganismos llamados bacterias. bacterianas, a través de exámenes directos, cultivos,
antibiograma, pruebas serológicas y otros, que permitan
Bacterias identificar al agente causal y proporcionar el tratamiento
Microorganismos unicelulares denominados correcto, recomendando las medidas profilácticas, para
procariotas que se caracterizan por poseer un solo controlar las enfermedades y precautelar la salud de la
cromosoma, carecer de membrana nuclear, organitos comunidad.
citoplasmáticos y vacuolas digestivas y poseer
reproducción asexual por división binaria transversal. Clasificación de las bacterias de importancia
La bacteriología es una disciplina amplia de la clínica
microbiología, que aborda el estudio de diversas En la Microbiología médica se ha adoptado la
especialidades relacionadas; como la bacteriología clasificación internacional de las bacterias, expuesta en el
clínica, la industrial, la agraria, ambiental y otros. libro titulado: “Bergey Manual of determinative
El contenido programático que nos ocupa, es la bacteriology” por Carlos Bergey, la misma incluye la
bacteriología clínica, encargada del estudio de las clasificación de todas las bacterias del reino Procaryotae,
bacterias, que conviven con el hombre en forma saprófita subdividas en dos divisiones:
o causando enfermedades infecciosas.
I. división. Cianobacterias
Relaciones de la bacteriología con otras II. división. Bacterias
disciplinas
Ninguna disciplina científica puede
desenvolverse aisladamente, se requiere el concurso de
otras disciplinas con las que se relaciona en forma directa
o indirecta; citaremos algunos ejemplos más cercanos: La
bacteriología se relaciona con las demás disciplinas de la
microbiología para estudiar la morfología y
comportamiento, con la historia para rememorar
acontecimientos más importantes que ocurrieron durante
el desarrollo de la bacteriología y que actualmente
permiten luchar de manera más efectiva contra diversos Fig. Nº 28.Carlos Bergey (Fuente: Piatkin, 1989).
agente causales de las enfermedades infecciosas. Con la
química, porque permite conocer la composición Para la Microbiología médica, el mayor interés
química, cambio químicos que sufren y producen al lo representa la II división, compuesta de 19 grupos, que
contactar con el organismo humano, materia orgánica e contiene la descripción de todas las familias, los géneros
inorgánica, con la histopatología y la fisiología, porque y las especies de bacterias patógenas y no patógenas. Sin
nos permite observar las alteraciones celulares, de los embargo gran parte de esta división lo constituyen
tejidos, órganos y sistemas del organismo infectado. Con bacterias no patógenas para el hombre, que se encuentran
la farmacología para proporcionar el tratamiento distribuidas en la naturaleza habitando el suelo, las aguas
farmacológico más adecuado, con las ciencias de la dulces, saladas, servidas y los vegetales, que en general
salud pública (epidemiología, administración sanitaria, no son de gran significación en nuestro estudio; por lo
Bioestadística y saneamiento ambiental), para luchar que en la oportunidad clasificaremos a las bacterias desde
contra los focos de infección de carácter endémico y el punto de vista clínico, acudiendo a un carácter
epidémico, recomendando las medidas profilácticas más exclusivamente didáctico y buscando la mejor
adecuadas. comprensión del tema.
13
Cuadro N° 1. Clasificación de las bacterias de importancia clínica

GRUPOS GENEROS PRINCIPALES ESPECIES
BACTERIANOS
Estafilococos Staphylococcus aureus, S. saprophyticus, S.
COCOS GRAM epidérmidis.
B POSITIVOS Estreptococos Streptococcus pyogenes, S. agalactiae, S.
pneumoniae, Streptococcus grupo viridans,
A Enterococcus.
COCOS GRAM Neisserias Neisseria gonorrhoeae, N. meningitidis, Moraxella
C NEGATIVOS catarrhalis.
T Escherichia Escherichia coli
E Enterobacter
Klebsiella
Enterobacter aerógenes
Klebsiella pneumoniae, oxitoca, ozaenae,
R Shigellas
rhinoscleromatis
Serogrupos: A, B, C, D.
BACILOS
I GRAMNEGATIVOS
Salmonella
Proteus
Serotipos: Typhi, paratyphi, choleraesuis, enteritidis,
Proteus vulgaris, P.mirabilis, P.penneri, P.
(Enterobacterias y otros
O relacionados) Morganella
myxofaciens
Morganella morganii.
L Providencia Providencia stuartii, P. rettgeri, P. alcalifaciens,
P. rustigiani.
O Citrobacter
Serratia
Citrobacter freundii
Serratia marcescens
G Pseudomona
Yersinia
Pseudomona aeruginosa
Yersinia pestis. enterocolítica. Pseudotuberculosis
I Vibrio Vibrio cholerae
BACILOS Helicobacter Helicobacter pylori
A GRAMNEGATIVOS
CURVADOS Campylobacter Campylobacter jejuni
BACILOS Haemophilus Haemophilus influenzae

GRAMNEGATIVOS Haemophilus ducreyi
NUTRICIONALMENTE Bordetella Bordetella pertusis
EXIGENTES Pasterurella Pasteurella multocida
BACILOS GRAM Corynebacterium Corynebacterium diphtheriae
C POSITIVOS Bacillus Bacillus anthracis
BACILOS Clostridium perfringens, C. tétani, C. botulinum
L ANAEROBIOS Clostridium C. difficile
ESPORULADOS
I Bacilos Gram Bacteroides fragilis, Fusobacterium
negativas spp,Porphyromonas
N Prevotella, Mobiluncus.
BACILOS Y COCOS Bacilos Propionibacteriun, Bifidobacterium, Actinomyces
I ANAEROBIOS grampositivas Lactobacillus
NO ESPORULADOS
C Cocos Gram Veillonella, Peptococcus, peptoestreptococcus
positivos y
A negativos
BACILOS ACIDO Mycobacterium tuberculosis, M. bovis ,M. atípicas
ALCOHOL Mycobacterias M. leprae
RESISTENTES
ESPIROQUETAS Treponema Treponema pallidum
BACTERIAS Chlamydia Chlamydia trachomatis

14
INTRACELULARES Y Rickettsias Rickettsi rickettsii

CARENTES DE Mycoplasma Mycoplasma pneumoniae
PARED
CAPITULO 3
15
ESTRUCTURA CELULAR BACTERIANA

La visualización de las estructuras y Estos instrumentos utilizan una equivalencia de las
ultraestructuras de la célula bacteriana, solo es posible dimensiones lineales que debemos conocer:
gracias a la ayuda del microscopio óptico y electrónico.
a) Equivalencia de las dimensiones más utilizadas en el estudio de las estructuras bacterianas:

Cuadro N° 2. Dimensión lineal y equivalencia
DIMENSIÓN LINEAL EQUIVALENCIA
1 mm. 1.000 um.
1 um. 1.000 nm.
1 nm. 10 A
b) Relación comparativa del poder de resolución entre el ojo humano, el microscopio óptico y el electrónico:
Cuadro N° 3. Poder de resolución del ojo humano y el microscopio
INSTRUMENTO PODER DE CAPACIDAD
RESOLUCIÓN
Ojo humano Desde 0.1 mm. Estudios macroscópicos de los organismos
Microscopio óptico Desde 0.2 um. Observación de la estructura general de las

células.
Microscopio electrónico Desde 0.4 nm. Observación de la ultra estructura de las
células (organelos, virus, etc.)
Las bacterias a pesar de su aparente simplicidad a) Diplococos (del griego diplo = doble), se
estructural, son seres vivos extraordinariamente encuentra formando parejas, entre los más
complejos, ya que cumplen con importantes funciones conocidos están los gonococos y meningococos,
como el metabolismo y la reproducción al igual que que se agrupan por sus caras planas o
organismos estructuralmente más complejos como los arriñonadas.
animales y vegetales. b) Estreptococos (del griego strepto = cadena),
Investigaciones microquímicas y observaciones cocos que se agrupan en forma de cadenas de
microscópicas, principalmente con la ayuda del distinta longitud (cortas y largas).
microscópico electrónico, nos permiten conocer con c) Tetracocos (del griego tetra = cuatro), cocos que
bastante precisión la forma, tamaño, estructura, así como se agrupan en grupos de cuatro.
los componentes químicos de la célula bacteriana. d) Sarcinas (del griego sarcio = reuno), cocos que
se agrupan en forma de paquetes compuestos
Morfología de las bacterias por 8, 16 o más células.
La forma y el tamaño de las bacterias no son e) Estafilococos (del griego staphyle = racimo), los
constantes, estas varían de acuerdo a su estado de cocos se agrupan en grupos irregulares, en
desarrollo y la acción del medio ambiente: cambio de forma de racimos de uva.
temperatura, presencia o ausencia de nutrimentos,
cambios de pH (ácido-alcalino), presencia de agentes 2.- Bastonados (del griego bacterion = bastoncito), son
desinfectantes, antibióticos, etc. formas bastonadas o cilíndricas.
Según su aspecto exterior las bacterias se dividen en Estas formas bacterianas, suelen ser cortas y largas,
cuatros formas fundamentales: generalmente tienen lados paralelos y sus extremos
1. Esféricas (cocos) pueden ser redondeados, cortados o puntiagudos.
2. Bastonadas (bacilos) De acuerdo a su morfología de agrupación, los bacilos o
3. Encorvadas (vibriones) bastonados pueden ser:
4. Espiraladas (espirilos) a) Diplobacilos.- Aquellos que se disponen en
parejas a lo largo de la célula.
1.- Cocos (del latín coccus = grano, microorganismo b) Estreptobacilos.- Agrupación bacilar en forma
esférico), son bacterias de forma esférica, oval o de trenes.
lanceolada. c) En paquetes.- Agrupación de bacilos en forma
Según su agrupación, los cocos se dividen en: de paquetes de cigarrillo.
d) Letras.- Agrupación en forma de letras chinas.
16
e) Globias.- Agrupación de bacilos en forma de Las bacterias son los seres con vida libre de
remolino. menor tamaño que existe en la naturaleza. Algunas son
tan pequeñas que tienen el mínimo tamaño posible para
3.- Encorvadas constituir una forma de vida independiente. La gran
Vibriones (del latín vibrión = flexiono), son células que mayoría de las bacterias esféricas tienen un diámetro
tienen forma de coma. entre 0,2 y 2 um y la mayoría de las bacterias alargadas
tienen un ancho de 0,2 y 2 um por 1 a 10 um de largo.
4.- Espiraladas Las bacterias más pequeñas son las rickettsias, las
- Espirilos (del latín spira = espiral), son formas curvas clamidias y los micoplasmas con un promedio de 0,4 um,
que tienen una o varias vueltas en espiral o en forma de coincide con el tamaño de los virus más grandes, como
ondulaciones. los poxvirus; por el contrario existen bacterias alargadas
cuya longitud es semejante al diámetro de una célula
eucariota. Así el largo de un lactobacilo puede sobrepasar
el diámetro de un eritrocito.
Estructura bacteriana
La estructura celular bacteriana observada de
afuera hacia adentro está constituida de:
Cápsula, pared celular, membrana citoplasmática,
citoplasma, núcleo bacteriano, espora, flagelo, pili y
fimbrias.
Fig. Nº 29.Morfología de las bacterias (Fuente:
www.juntadeandalucia.es).
Tamaño de las bacterias
Fig. N°30. Estrutrura general de las bacterias grampositivas y gramnegativas (Fuente: Koneman, 2006).
1. Cápsula Las cápsulas son de mayor espesor durante la

La capsula es una capa que rodea estrechamente fase de crecimiento exponencial disminuyendo en las
la célula bacteriana, tiene un espesor de 0,2 a 1 um, la fases posteriores. Sembrados en medios nutritivos a base
misma varía según su fase de crecimiento, presencia o no preferentemente de hidratos de carbono también
de nutrimentos en su medio y la especie a la que aumentan de espesor. Así mismo, algunas especies como
pertenece. los Streptococcus pneumoniae presentan cápsulas de
mayor espesor, contrariamente otros como los
17
estafilococos, estreptococos poseen microcápsulas

únicamente observables con la ayuda del microscopio
electrónico.
Químicamente la cápsula está compuesta por
polisacáridos y polipéptidos, generalmente tienen una
consistencia viscosa, mucoide o gelatinosa.
a) Polisacáridos.- Los azúcares más habituales que

constituyen los polisacáridos capsulares son: D- glucosa,
D- galactosa y D- manosa. Fig. Nº 31. Cápsulas: A engloban a una sola bacteria. B, engloban 2
Todos ellos unidos al ácido urónico y un 90% de bacterias. C, engloban varios bacilos en cadena. D, engloban grupos de
bacterias (Fuente: Pumarola, 1987).
agua. Entre las bacterias más representativas de este
grupo son el S. pneumoniae, K. pneumoniae y H. Funciones de la cápsula. La capsula protege a la
influenzae. mayoría de las bacterias contra las fagocitosis,
Menos frecuentes son las cápsulas formadas por favoreciendo su multiplicación e invasión al interior del
polisacáridos simples, de un solo glúcido como dextrano organismo infectado. El mecanismo de resistencia a la
o levano. fagocitosis no es bien conocido, según algunos autores
puede ser debida a una carga eléctrica capsular que
b) Polipéptidos.- Son propias del género Bacillus y están rechaza la fagocitosis y al no reconocimiento por el
formadas por polipéptidos de un solo aminoácido, el D- organismo a la cápsula como una sustancia extraña,
glutámico. algunos consideran que la bacteria con la ayuda de su
capsula, adquiere una capacidad deslizante, que impide
Síntesis de la cápsula. Muchas bacterias sintetizan los su adherencia a los fagocitos. Por otra parte, la presencia
componentes químicos capsulares a partir de sustancias de la cápsula impide que los antibióticos y los virus
extracelulares, utilizando para ello enzimas localizadas puedan llegar libremente a la pared bacteriana.
en la superficie externa de la bacteria, las sustancias
sintetizadas se encuentran en forma de polímeros Observación de la capsula. Para revelar la presencia de
(polisacáridos y polipéptidos), los mismos que se la capsula se utilizan métodos especiales, algunas de ellas
adhieren a la pared bacteriana. Por ejemplo, el sirven de diagnóstico. La más utilizada es la tinta china y
Streptococcus mutans utiliza dos enzimas: la la de Burri, permitiendo observar la cápsula, como un
glucosiltransferasa y la fructosisltransferasa, para halo incoloro alrededor de la bacteria de color gris, en un
sintetizar grandes cadenas de dextranas (poli- D- glucosa) fondo negro. La de Quellung, es un método de
y levanas (poli- D- fructosa) a partir de la sacarosa. diagnóstico para neumococos, que se basa en la
observación de la cápsula que se hincha o agranda, al
Formación de glicocalix. Cuando los polímeros ponerse en contacto con un anticuerpo específico.
sintetizados forman una maraña de fibras, que se
extienden fuera de la célula bacteriana, sin formar una
cápsula normal, es conocido como glicocalix, la cual le
2. Pared celular bacteriana
Es una cubierta rígida ubicada entre la
sirve a la bacteria para adherirse a las superficies de su
membrana citoplásmica y la cápsula, constituida de
medio o las células de su huésped, como ocurre con la
varias capas de diferente composición química; tiene un
Klebsiella pneumoniae, el Streptococcus mutans; esta
espesor máximo de 80 nm, que le confiere la forma y
última se adhiere al esmalte de los dientes con su
resistencia a la bacteria.
glicocalix y excreta catabolitos ácidos (obtenidos a partir
El método de tinción de Gram, ha permitido dividir a las
de la fermentación de la sacarosa), que provoca las caries
bacterias en 2 grandes grupos:
dentales. Hay cierto microorganismos que forman
cápsula solo en el interior del organismo humano o  Bacterias Gram positivas
animal (Streptococcus pneumoniae, Bacillus anthracis y  Bacterias Gram negativas
Clostridium perfringens), mientras que otros la forman Cuyas paredes presentan algunas diferencias, que a
tanto dentro como fuera del huésped (Klebsiellas). continuación exponemos:
La capsula no solo rodea una bacteria única
como sucede con la Klebsiella pneumoniae, sino que lo Pared celular de las bacterias grampositivas.
habitual es englobar más de una bacteria, bien en parejas Externamente la pared de estas bacterias tiene
(S. pneumoniae) o en cadenas (Bacillus anthracis) y en un aspecto homogéneo y compacto, con un espesor que
grupos (leucononostoc). fluctúa entre 15 a 80 nm. Constituida de
aproximadamente 40 capas de Peptidoglucano, que se
encuentran entrelazadas con ácido teicoico, juntos
representan el 50 – 80% del peso seco total de la pared,
proporcionándole rigidez a esta estructura.
18
La estructura química del Peptidoglucano está generalmente en el siguiente orden: L – alanina le sigue
constituida por cadenas de aminoazúcares alternantes de D – glutamina, luego L – lisina y finalmente D – alanina;
N – acetilglucosamina (N-A-G) y el ácido N- acetil- estas cadenas se unen a cadenas laterales paralelas, a
murámico (N-A-M ), ambos aminoazúcares se través de puentes peptídicas de pentaglicina, que
encuentran unidos por enlaces B-1-4. El N – acetil conectan el aminoácido D- alanina de una cadena con L.-
murámico a su vez se encuentra unido a 4 aminoácidos lisina de la otra cadena.
Fig. Nº 32. Representación esquemática de la unión entre las cadenas peptídicas del peptidoglucano en las bacterias grampositivas. La unión se produce
mediante puentes interpeptídicos de pentaglicina, que conectan los aminoácidos D-alanina de una cadena con la L-lisina de la otra en Staphylococcus
aureus (Fuente: Jawetz, 1985).
El ácido teicoico se encuentra en 2 formas: 1. donde se extiende hasta la superficie de la pared, pasando
Ácido ribitol teicoico y 2. Acido glicerol teicoico. El a través de los poros de la capa de peptidoglucano.
ácido ribitol teicoico se encuentra en la pared unida en Los ácidos teicoicos al estar unidos a la
forma covalente al peptidoglucano. El ácido glicerol membrana celular y pared, proporcionan estabilidad e
teicoico (ácido lipoteicoico) se encuentra unida a los integridad a la pared.
glucolípidos de la membrana celular bacteriana desde Algunas especies de bacterias Gram positivas
presentan otras capas (proteínas y polisacárido) por
19
encima del peptidoglucano; Por ejemplo los serológicos (A,B,C,F y G). Las paredes celulares de otras
estreptococos B-hemolíticos del grupo A presenta una bacterias Gram positivas (y de algunas Gram negativas),
envoltura llamada proteína M que es un determinante tienen también un componente llamado capa-S como la
importante de virulencia de estas bacterias, así mismo del Bacillus anthracis que es su principal antígeno de su
este grupo de bacterias también presentan el polisacárido pared.
C que les permite clasificarlos en diferentes grupos
Fig. Nº 33. Representación esquemática de la estructura de un segmento de la pared de las bacterias grampositivas.
(Fuente: www.ugr.es).
Pared celular de las bacterias gramnegativas puentes de pentaglicina por consiguiente la unión de las
El aspecto externo de la pared de las bacterias Gram cadenas paralelas es directa entre los aminoácidos D –
negativas es rugosa y cerebriforme, tiene un espesor de 6 alanina de una cadena y el ácido meso-diaminopimélico
a 10 nm, está constituido por 4 componentes: de la otra cadena.
a) Una capa de peptidoglucano La capa de peptidoglucano de las bacterias
b) Lipoproteína gramnegativas es bastante “laxa”, es decir menos
c) Membrana exterior compactas que en los grampositivos, debido
d) Lipopolisacáridos. principalmente a que solo la mitad de las cadenas
peptídicas del ácido N-acetil murámico están unidas a las
a) La capa de peptidoglucano de las bacterias cadenas de peptidoglucano paralelas y como ya
gramnegativas es parecida al de los Gram positivos con mencionamos, esta unión es directa por falta del puente
la diferencia de que el aminoácido L – lisina es de pentaglicina.
remplazado por otro denominado ácido meso-
diaminopimélico (meso-DAP), además no presentan
20
Fig. Nº 34.Representación esquemática de la unión entre las cadenas peptídicas del peptidoglucano en las bacterias gramnegativas. La unión se produce
directamente entre los aminoácidos: ácido meso-diaminopimélico de una cadena y la D-alanina de la otra en Escherichia coli.
(Fuente: www.estructurayfuncioncelularbacteriana.wikispace.com).
Esta capa representa el 10% del peso total de la resistente a los agentes antibacterianos, la membrana
pared Gram negativa. externa es 100 veces menos permeable que en E. coli.
Las proteínas de transmembrana, excretan exoenzimas
b) Lipoproteínas.- Las moléculas de lipoproteínas para el metabolismo, transportan proteínas específicas y
(residuo de ácido diaminopimélico unido a un moléculas de penicilina al citoplasma. Las periféricas
diglicérido) se encuentran entre las capas de trasportan moléculas más grandes como el hierro al
peptidoglucano y la membrana externa. Uno de sus interior de la célula.
extremos se encuentra unida al ácido meso- Entre la membrana citoplásmica y la cara interna
diaminopimélico del peptidoglucano, el otro extremo está de la membrana externa, se encuentra el espacio
anclado en la estructura lipídica de la membrana externa. periplásmico, en ella se encuentran una variedad de
Esta sustancia es la más abundante de las bacterias enzimas degradativas importantes para el metabolismo
gramnegativas y sirve para estabilizar la membrana bacteriano tales como: fosfatasa alcalina, proteasas,
externa. lipasas, polisacaridasas, nucleasas y B-lactamasas. En el
caso de las especies Gram negativas patógenas también
c) Membrana externa.- La membrana externa tiene una posee colagenasas e hialuronidasas.
estructura básica similar a la de la membrana
citoplasmática, compuesta de una capa doble de d) Lipopolisacáridos.- El lipopolisacárido se subdivide a
fosfolípidos en la cual los fosfolípidos de la capa más su vez en tres partes: Una porción lipídica (lípido A), un
externa han sido sustituidos por moléculas de polisacárido central y una cadena glucídica.
lipopolisacáridos (LPS). En esta membrana se encuentran La porción lipídica (lípido A), ocupa el lugar de
proteínas principales de la membrana externa (OMP), los fosfolípidos de la capa doble, está constituido por un
existen tres tipos de OMP: Proteínas porinas, proteínas disacárido glucosamina que se une a ácidos grasos (ácido
transmembrana y proteínas periféricas. Las llamadas B-hidroximirístico y otros). Unido a la porción del lípido
porinas, permiten la libre difusión de pequeñas moléculas A, está el polisacárido central, el cual contiene dos
de menos de 600 daltons (aminoácidos, azúcares, iones) hidratos de carbono particulares denominado: ácido 2-
al espacio periplásmico, evitando la de otras mayores ceto-3-desoxioctonoico (KDO), este a su vez se une más
como los antibióticos, lo que explica su resistencia hacia arriba a la cadena glucídica compuesta por unidades
algunos antimicrobianos de molécula grande. La repetitivas de 3 a 5 monosacáridos (comúnmente:
permeabilidad de la membrana externa varia manosa, ramnosa y galactosa), Este conjunto de unidades
ampliamente de una especie gramnegativa a otra; por repetidas de azúcares (aproximadamente 40 veces)
ejemplo, en Pseudomonas aeruginosa, que es muy constituye el antígeno 0 somático que proporciona a la
21
bacteria su especificidad antigénica permitiendo membrana y estabilizarla. Además es tóxico para el

clasificar a las bacterias en diferentes serotipos. Ejemplo, organismo humano, por lo que es denominado como
Las salmonellas han sido clasificadas en serotipos, enterotoxina (produce diarrea), y solo es liberado cuando
basándose en la diferente estructuración de estos la bacteria es lisada, se conoce que el lipopolisacárido es
azucares; su presencia es importante para la resistencia de una toxina termoestable, que en cantidades mayores en
las bacterias a ciertos antibióticos. sangre produce shock endotóxico irreversible, en
La función del lipopolisacárido en las bacterias cantidades menores produce reacción inflamatoria y
es la de incapacitar las defensas del huésped, fiebre.
proporcionar carga negativa a la superficie de la
Fig. Nº 35. Representación esquemática de la estructura de la pared y membrana de las bacterias Gram negativas
(Fuente: www.biologia.edu.ar).
negativos. Las Mycobacterias son teñidas adecuadamente

por el método de Ziehl-Neelsen que utiliza como
solución decolorante una mezcla de etanol y ácido
clorhídrico. Estos microorganismos una vez coloreados
son resistentes a la decoloración ácido-alcohólica y por
eso se denominan Bacilos Acido Alcohol Resistentes
(BAAR).
Los microorganismos del género
Mycobacterium contienen una membrana citoplasmática
formada por una bicapa lipídica similar a las restantes
bacterias. Por encima de esta membrana se encuentra la
capa de peptidoglucano que se compone de N-
acetilglucosamina en un enlace B- 1,4 con ácido N-
glucolilmurámico. Esta capa está entrecruzada por
Fig. Nº 36 representación esquemática de la estructura del
puentes tetrapeptídicos que contienen residuos L-alanina,
lipopolisacárido (Fuente: Jawetz, 1985).
D-glutamato y el ácido meso diaminopimélico (meso
DAP). Algunos de los residuos de ácido N-
Pared celular de las bacterias ácido-alcohol glucolilmurámico están unidos por enlaces fosfodiéster a
resistente una capa superpuesta de macromoléculas polisacáridos
Los microorganismos pertenecientes al género de cadena ramificada llamadas arabinogalactanos
Mycobacterium se caracterizan por tener una pared (contiene por mitades arabinosa y galactosa). Los
celular completamente diferente a las restantes bacterias. arabinogalactanos en su porción distal se unen a los
La pared de las Mycobacterias posee un alto contenido de ácidos micólicos (ácidos grasos B-hidroxilados en forma
lípidos (hasta un 60% del peso seco de la pared), que la de esteres responsables de la acido-resistencia). Los
hace impermeable a los agentes hidrofílicos, por lo tanto ácidos micólicos se encuentran unidos o intercalados a
estos microorganismos no se tiñen adecuadamente con otros lípidos de ubicación periférica denominados
los reactivos utilizados en la coloración de Gram y no glucolípidos (dimicoliltrehalosa conocido como factor
pueden ser clasificados como Gram positivos o cordón y tetraciltrehalosa presentes en bacterias
22
virulentas de Mycobacterium tuberculosis). La macrófagos. En las cepas de Mycobacterias más

tetraciltrehalosa impide la fusión lisozima-fagosoma virulentas la arabinosa terminal del LAM está recubierta
posterior a la fagocitosis de las Mycobacterias, lo que les con residuos de manosa (manLAM) a diferencia de las
permite a estos microorganismos sobrevivir como cepas no virulentas no están recubiertas (AraLAM).
parásitos intracelulares facultativos. Así mismo la pared Además, el LAM también podría servir como poro para
de estas bacterias presenta lipoarabinomanano (LAM), el paso de los nutrientes a través de la pared celular. En la
es un compuesto que se halla anclado en la membrana pared celular también se encuentran proteínas
citoplasmática para formar parte de la pared. El LAM es inmunoreactivas que son utilizadas con fines
considerado como el equivalente mycobacteriano del diagnósticos (PPD).
lipopolisacárido de las Gram negativas debido a que
provoca una importante respuesta antimicrobiana en
Fig. Nº 37. Esquema de las envolturas de una bacteria Acido-Alcohol Resistente (Fuente: www.webcd.usal.es).
Funciones y propiedades de la pared fagocitosis, tener cierta resistencia al complemento,

bacteriana. evitar la respuesta inmune específica por alteración de la
1.-El peptidoglucano de la pared de los grampositivos, es superficie antigénica y adherirse a ciertas células del
una malla porosa que otorga forma y rigidez a la célula, y hospedador.
evita que la célula estalle en medios hipotónicos. Al ser
porosa permite el paso de nutrientes desde el exterior y el 3. Membrana citoplásmica
movimiento de enzimas catalíticas y productos de Membrana delgada de 7 a 8 nm de espesor,
secreción hacia el exterior de la célula. ubicada por debajo de la pared celular, rodea
2.-En general la pared es una especie de exoesqueleto que completamente a la célula bacteriana. Químicamente está
protege a la célula, asegurando su morfología. compuesto por fosfolípidos y proteínas en proporciones
3.- Participa en la división bacteriana al formar un aproximadas del 40% y 60% respectivamente.
tabique junto con la membrana citoplásmica. La estructura básica de la membrana citoplásmica es una
4.- Actúa como filtro debido a la presencia de poros de 1 doble capa de fosfolípidos, en ella se encuentran plegadas
a 10 nm de diámetro impidiendo la entrada de moléculas o enclavadas de manera irregular ciertas proteínas
grandes. denominadas permeasas, de aspecto globular que
5.- Posee poder patogénico por la endotoxina. atraviesan la membrana de lado a lado y algunas enzimas
6.- Es el lugar donde actúan los antibióticos B- biosintéticas.
lactámicos (penicilinas y cefalosporinas) inhibiendo la La membrana celular bacteriana en esencia es
síntesis de peptidoglucano. una barrera osmótica, selectiva y activa que permite el
7.- La presencia del LPS de la pared de los movimiento de substancias que ingresan y salen de la
gramnegativos le confiere a la célula una efectiva célula bacteriana. Las enzimas presentes en la membrana
protección contra enzimas digestivas y detergentes como participan de manera activa en la fosforilación oxidativa,
las sales biliares, y dota a la superficie bacteriana con una respiración celular (sistema de transporte de electrones),
fuerte hidrofilicidad que le permite a la célula evadir la biosíntesis de lípidos complejos, peptidoglucano,
replicación del DNA y biosíntesis de la membrana
23
externa de las bacterias gramnegativas. Las proteínas pequeñas moléculas en ambas direcciones. A
permeasas están involucradas en el transporte activo de continuación resumimos estos procesos:
Fig. Nº 38. Membrana citoplásmica (Fuente: www.guia.heu.nom.br).
a) Permeabilidad selectiva. La membrana actúa como (por ejemplo, proteínas, polisacáridos, lípidos) excretan
una barrera física entre el citoplasma y el medio ambiente enzimas hidrolíticas que degradan los polímeros a
y ejerce un control selectivo del movimiento de diversas subunidades lo suficientemente pequeñas para penetrar la
sustancias desde y hacia la célula. Existen 2 tipos de membrana citoplásmica. Los animales más
funcionamiento de esta barrera membranal: evolucionados en la escala zoológica excretan tales
 Barrera pasiva enzimas hacia la luz del aparato digestivo; las bacterias
 Barrera activa las excretan directamente hacia el medio exterior (en el
Como barrera pasiva, la membrana es permeable a caso de las bacterias grampositivas) o hacia el espacio
moléculas como los del agua que cruzan fácilmente la periplásmico en el caso de las bacterias gramnegativas. A
membrana porque son suficientemente pequeñas para partir de dichas subunidades que se incorporan se
pasar por los huecos que dejan los ácidos grasos del formaran posteriormente proteínas, lípidos, ácido
fosfolípido al moverse; lo mismo ocurre con el oxígeno, nucleicos y otros componentes estructurales que la célula
dióxido de carbono y nitrógeno, en tanto que las grandes bacteriana requiera. Es también en la membrana donde se
moléculas no lo pueden hacer. producen y de donde se excretan exotoxinas, pigmentos y
La función de barrera activa, requiere la intervención otros factores de virulencia.
de las proteínas permeasas que tienen como función el
transporte activo y selectivo de pequeños sustratos o Mesosomas.- Son estructuras membranosas invaginadas
metabolitos (como glicerol, glucosa, aminoácidos y otros a partir de la membrana citoplásmica, tienen forma
azúcares) que deben llegar desde la membrana hasta el tubular, vesicular o de ovillos, cuyas funciones son:
citoplasma, esta función la cumplen atrapando al sustrato formación de un tabique de separación durante la división
lo cargan e ingresan con él, cruzan toda la membrana y lo binaria de la bacteria, formación de la membrana esporal
depositan en el interior (función de transporte mediado y fijación al DNA, facilitando la replicación de esta
por potadores). última en el momento de la división celular.
La capacidad de la membrana plasmática como
barrera osmótica está demostrada, entre otras cosas, por 4. Citoplasma
la capacidad de las bacterias de concentrar ciertas El citoplasma bacteriano es un compuesto
sustancias en contra del gradiente de concentración. coloidal constituido por agua (en aproximadamente un
Sustancias tales como fosfatos, esteres de fosfatos, 85%), gránulos o inclusiones, ribosomas, enzimas
purinas, pirimidinas y otras sustancias solubles que metabólicas y ácidos nucleicos.
pueden permanecer dentro de la célula en alta
concentración. a) Gránulos o inclusiones. Comprende una serie de
En estas funciones se utiliza gran cantidad de elementos de distinta naturaleza sin estructura uniforme,
energía, la misma se genera por la degradación y constituido por material de reserva alimenticia
formación del ATP membranal. (polisacáridos, lípidos y polifosfátos) y otros
componentes necesarios para la construcción ulterior de
b) Excreción de exoenzimas hidrolíticas y biosíntesis. macromoléculas, todos ellos en cantidades que varían con
Todos los organismos que dependen de polímeros el estado nutricional de la célula bacteriana. Estos
orgánicos macromoleculares como fuentes de nutrientes gránulos no están encerrados por membranas típicas,
24
algunos de ellos se encuentran rodeados por una capa

lipoproteína algo parecida a la membrana, en forma de
vacuolas (por ejemplo, las vacuolas que encierran el
glucógeno); el resto de los gránulos se encuentran libres
en el citoplasma. Las principales inclusiones son las
siguientes:
Gránulos de polifosfatos.- Son grandes reservas de
Fig. Nº 39. Ribosomas: Estrucuras de forma ovoide constituidos de
fosfato inorgánico en forma de gránulos de polifosfatos, a subunidades grandes (50S) y pequeñas (30S) que al unirse forman una
menudo de alto peso molecular. Se encuentran dispersos unidad 70S, cuando están en proceso de síntesis de proteínas forman
en el citoplasma. Pueden alcanzar hasta 1 micra de cadenas de ribosomas llamadas polirribosomas
diámetro, dependiendo del tamaño del microorganismo (Fuente: Pumarola, 1987).
se puede observar en diferentes bacterias como
Corynebacterium dipheriae, Yersinia pestis, 5. Núcleo bacteriano
Mycobacterium tuberculosis y otras. Se tiñen con Se presenta en forma de masas de DNA, en
colorantes básicos como azul de toluidina y azul de número de 1 o 2; se encuentran ubicados en el centro de
metileno, pero al hacerlo adquieren un tono rojo-violeta. las bacterias, de forma redondeada en los cocos y
Este fenómeno se denomina metacromasis; por lo que se alargada paralela al eje mayor en los bacilos.
conocen como gránulos metacromáticos, de Babes-Ernst La molécula de DNA, constituye el único
o de volutina. cromosoma bacteriano, esta molécula presenta doble
Glucógeno.- Muchas bacterias acumulan como reserva cadena circular, cuya longitud aproximada es de 1
energética la glucosa en forma de glucógeno, milímetro (cuando está desenrollado), se encuentra
generalmente enceradas en vacuolas de pequeño tamaño. enroscado alrededor del RNA que sirve para sostener el
Poli-B-hidroxibutirato.- Lípido de elevado peso DNA en su forma compacta. Es difícil obtener DNA
molecular encerrado en una vacuola como material de puro, pues siempre va acompañado de ARN y ARN-
reserva de energía y carbono reutilizable que permite a la polimerasa,
bacteria sobrevivir en medios con bajo contenido de Aunque el DNA bacteriano representa un 2 a
nutrientes. 3% del peso celular, ocupa aproximadamente el 10% del
Azufre molecular.- Ciertas bacterias convierten el volumen total de la célula. Al aislar el cromosoma
exceso de H2S del ambiente en gránulos intracelulares de bacteriano, se puede determinar que el 80% del material
azufre libre. aislado es DNA, el 10% RNA y el 10% restante son
proteínas. La mayor parte de las proteínas son RNA
b) Ribosomas.- Utilizando microscopia electrónica, se polimerasas. Y no se han encontrado proteínas histonas
pueden observar los ribosomas de forma lobular ovoide y (como los que existen en los eucariotas). El DNA está
ligeramente aplanados en uno de sus lados, tienen aprox. unido a la membrana citoplásmica en lugares estratégicos
25 nm de diámetro, constituido por dos subunidades durante la replicación lo que permite separar luego las
(grandes y pequeñas), cada una con coeficientes de copias del DNA replicando en las células hijas. El núcleo
sedimentación de 50S y 30S respectivamente, al unirse bacteriano es responsable de la información genética en
forman una unidad ribosómica que tiene una constante de la división celular y dirección de la síntesis de sustancias.
sedimentación de 70S. La “S” hace referencia a una
unidad Svedberg, medida indirecta del tamaño del Plásmidos.- Son moléculas de DNA extracromosomal, o
ribosoma determinado por su velocidad de sedimentación sea que no pertenecen al cromosoma bacteriano y se
cuando se lo somete a una fuerza ultracentrífuga. multiplican independientemente del mismo. Se pueden
Bioquímicamente están constituidos por una molécula de encontrar en casi todas las especies bacterianas. Llevan
RNA ribosómica y proteínas ribosómicas. Son una pequeña parte de la información genética total, es
estructuras citoplasmáticas muy numerosas pudiendo decir, transportan información genética de gran
detectarse aprox. De 10.000 a 20.000 ribosomas por importancia a sus descendientes como: la replicación
bacteria. El Ácido Ribonucleico Ribosómico (rRNA) autónoma, incompatibilidad, resistencia a antibióticos,
comprende el 70% del total de RNA celular. El RNA resistencia a metales pesados, resistencia a la luz
celular restante se encuentra como ácido ribonucleico de ultravioleta, metabolismo de algunos sustratos orgánicos,
transferencia (tRNA) en un 16% y el ácido ribonucleico producción de toxinas, producción de bacteriolisinas,
mensajero (mRNA) en un 14% restante. producción de factores que aumentan la virulencia y de
La asociación de ribosomas con mRNA formando antígenos celulares de superficie, fijación biológica de
cadenas, se denomina polisomas o polirribosomas, estas nitrógeno, etc. aunque no son esenciales para el
estructuras así juntas contienen todos los componentes crecimiento y reproducción de las bacterias.
del sistema sintetizador de proteínas. Los plásmidos pueden perderse
espontáneamente de las células que los alojan, este hecho
se puede aprovechar en laboratorio sometiéndolos a la
acción de naranja de acridina o bromuro de etidio para
25
evitar su réplica o segregación del plásmido durante la

división celular, de este modo inducir a una “curación” y
evitar la transmisión de algunos caracteres genéticos a
sus descendientes. Con este procedimiento se demuestra
la naturaleza no cromosómica de los caracteres arriba
mencionados.
Fig. Nº 42. Partes de una épora (Fuente: www.webcd.usal.es).
Fig. Nº 40. Plásmidos (Fuente: www. wikipedia.org). Un esporo puede resistir temperaturas de hasta
120 ºC por 30 minutos o varias horas en horno Pasteur,
6. Esporas su termorresistencia está en relación con su escaso
Es una estructura presente en algunas especies contenido de agua y la presencia de iones de calcio en su
de bacterias de forma bacilar. Pueden estar en el interior cubierta.
de la bacteria (endosporas) o permanecer libres como La esporulación se efectúa, cuando las
formas de resistencia de la bacteria. Mide de 0,2 a 2 um condiciones de medio ambiente son adversos: Falta de
de diámetro. nutrimentos, concentración de oxígeno o falta de él,
Es un órgano refringente, esférico u oval, cambios de pH del medio, etc. Primero, el material
termorresistente, que constituye una forma de resistencia nuclear se dispone en forma lineal en la bacteria, luego
bacteriana ante situaciones de deficiencia nutricional, en un extremo de la bacteria se forma un tabique, el
desecación, frío, temperaturas elevadas y determinados mismo que toma una parte del cromosoma. Alrededor del
agentes químicos. material genético se forma el cortex, el mismo que
De acuerdo a su ubicación, estas pueden ser: sintetiza las cubiertas esporales, este al madurar es
centrales, subterminales y terminales, pudiendo o no liberada por la bacteria, en esta forma puede existir viable
deformar la bacteria, según sea el esporo de mayor por muchos años en el medio ambiente, y cuando llega a
espesor que el bacilo. un huésped y las condiciones le son favorables
(existencia de nutrimentos, temperatura adecuada, etc.)
comienza la germinación con la degradación de los
distintos constituyentes externos del esporo por enzimas
hidrolíticas, absorbe agua y comienza la biosíntesis y la
multiplicación.
Fig. Nº 41. Localización de las esporas hiendo de izquierda a derecha:

espora central, espora subterminal, espora subterminal deformante y
espora central deformante.
(Fuente: www.alimentosmanipulacion.blogspot.com).
La estructura de un esporo presenta las

siguientes partes: El exosporio que es una cubierta
externa, le continua la capa cortical o cortex constituida
de gran cantidad de queratina responsable de la
impermeabilidad del esporo; por dentro de esta capa se
encuentra la corteza o pared esporal con los
constituyentes propios de esta estructura Fig. Nº 43. Cambios morfológicos en la formación de una espora:
(peptidoglucano), la membrana citoplásmica, el 1.DNA extendida en la bacteria vegetativa. 2. Formación del septo. 3.
citoplasma y el DNA perteneciente al nucleoplasma. Formación del preesporo. 4. Formación del cortex o capa cortical. 5.
Síntesis de las cubiertas esporales. 6. Maduración del esporo. 7.
Liberación del endosporo de la bacteria vegetativa. 8. Esporo libre. 9.
formación de la bacteria en su forma vegetativa (germinación).
(Fuente: Pumarola, 1987).
26
7. Flagelos El corpúsculo basal, en las bacterias Gram

Son apéndices largos y delgados parecidos al negativas, es formado por dos pares de discos de 22,5 nm
cabello, compuestos de proteína, flagelina; que partiendo de diámetro. El par inferior se sitúa en la membrana
de la membrana citoplásmica se prolongan hasta el citoplásmica: el anillo M se inserta por debajo de la
exterior de la célula bacteriana. Miden hasta 10 um de membrana citoplásmica y el S por encima de ésta
largo por 12 a 25 nm de ancho. (espacio periplásmico). El otro par se adosa en la pared
El flagelo está compuesto por tres partes: el bacteriana: el anillo P en el peptidoglucano y el L en el
filamento (parte externa del flagelo), el gancho o codo lipopolisacárido. En las bacterias Gram positivas solo
(en la superficie celular) y el corpúsculo basal (anclado existe un par de discos, uno de ellos se incrusta en la
en la membrana citoplasmática) membrana citoplásmica y el otro en el peptidoglucano.
.
.
Fig. Nº 44.Partes de un flagelo (Fuente: www.el100ambientologo.blogspot.com).
Fig. Nº 45. Ubicación de los flagelos bacterianos (Fuente: www.hanskrause.de).
27
El crecimiento del flagelo ocurre por el Fimbrias y Pili.- Existe confusión en la literatura sobre
agregado de subunidades de flagelina a la punta del la nomenclatura de los apéndices no flagelares: fimbrias
mismo en forma circular, que le permite dejar un centro y pilis. A aquellos apéndices no flagelares relacionados
ahuecado (autoensamblaje). con la transferencia de material genético, se lo denomina
Los flagelos son responsables de la motilidad de la Pili sexual y a aquellos que no están relacionados con
bacteria, esta puede demostrarse en un medio líquido o dicha transferencia, se los llama fimbrias.
un medio semisólido (medio de SIM). Mostrándose como Las fimbrias son microfibrillas observables en
una humareda o una ramificación a los costados de la bacterias Gram negativas en mayor proporción. El
picadura. número de fimbrias puede ser muy variable (100 a 200
La fuerza que mueve al flagelo parece ser distribuidas en la superficie de una bacteria). Miden de
generada por el anillo M. Este anillo rota en el sentido de 500 nm de largo por 3 a 10 nm de ancho. Se originan en
las agujas del reloj o en sentido contrario, a una la membrana citoplásmica y atraviesan la pared celular.
velocidad aprox. De 2.000 R.p.m. La fimbrias les sirven a las bacterias para adherirse a
Según el número y disposición de los flagelos, las tejidos específicos del huésped, y de esta manera evitar la
bacterias pueden ser: Monotricas, cuando presentan un fagocitosis.
solo flagelo polar. Lofotricas cuando presentan flagelos Los Pili sexuales que se encuentra de 1 a 4 por
en uno de sus extremos de la bacteria. Anfitricas, cuando bacteria, funcionan como tubos huecos a través de los
presentan los flagelos en ambos extremos. Peritricas, cuales puede pasar material genético (DNA) a otra
cuando los flagelos se encuentran alrededor de toda la bacteria durante la conjugación.
bacteria y atricas cuando no presentan flagelos. .
.
Fig. Nº 46.Disposición de los flagelos bacterianos.

(Fuente: www.preuniversidad.blogspot.com).
28
CAPITULO 4
NUTRICIÓN Y METABOLISMO BACTERIANO
Nutrición
En términos generales nutrición es la propiedad b) Bacterias quimiosintéticas.- La fuente de energía
esencial de las bacterias, que consiste en la asimilación y proviene de las reacciones químicas de óxido – reducción
desasimilación de substancias nutritivas. a partir de compuestos inorgánicos para sintetizar sus
Asimilación significa incorporación de nutrientes.
sustancias nutritivas al interior de la célula bacteriana y
por el contrario, desasimilación es la eliminación de 2.- Bacterias heterotróficas.- son bacterias incapaces de
productos de desecho en forma de exotoxinas, pigmentos sintetizar sus propios constituyentes a partir de
colorantes y otros. En otras palabras nutrición es la compuestos inorgánicos, obtienen sus nutrientes a partir
provisión de nutrientes (sinónimo, alimentación). de compuestos orgánicos preexistentes en el medio,
Esencialmente los componentes nutritivos que mediante procesos de óxido reducción; pudiendo ser
requieren las bacterias son: saprófitos y parásitos.
a) Agua, representa el 80 -90% del peso total de la
bacteria. a) Bacterias saprófitas.- Son las que se desarrollan
b) Carbohidratos, son los alimentos energéticos sobre materia orgánica en descomposición del medio
más importantes (glucosa) ambiente.
c) Proteínas, provienen de proteínas complejas,
aminoácidos simples, así como de sales de b) Bacterias parásitas.- Aquellas que viven en la
amonio, nitratos, nitritos, etc. superficie o en el interior de otro organismo huésped y se
d) Lípidos, son utilizados como fuentes de energía. alimenta a expensas de este. Las especies bacterianas
e) Iones y minerales, como el Na+, k+. Ca++, Cl-, patógenas pertenecen a este grupo.
PO4, SO4, NH, CO2, y otros en menor cantidad La nutrición bacteriana se realiza por
como Fe++, Mg++, Zn++, Mn, Co++, Cu++, ósmosis, por ello, los materiales nutritivos deben
etc. encontrarse disueltos en medios líquidos alrededor o en
f) Vitaminas, como las del complejo B y otros contacto con la bacteria, para luego ser incorporados al
como factores X y V. interior de la bacteria, siendo necesario en esta etapa, la
Las bacterias presentan casi todos los tipos de transformación de estas substancias a moléculas más
nutrición que se conocen en biología, principalmente las pequeñas; para ser sintetizadas luego en los componentes
denominadas: Autotróficas y heterotróficas. orgánicos esenciales de la estructura bacteriana. Todo
este proceso se llama Metabolismo bacteriano.
1.- Bacterias autotróficas.- Son aquellas que sintetizan
sus nutrientes a partir de substancias inorgánicas muy Metabolismo bacteriano
simples como el agua, sales minerales y Metabolismo es el conjunto de transformaciones
fundamentalmente del CO2, mediante mecanismos de físicas, químicas y biológicas que sufren las substancias
fotosíntesis y quimiosíntesis. que ingresan a la célula bacteriana, mediante los procesos
a) Bacterias fotosintéticas.- La fuente principal de de catabolismo y anabolismo.
energía que utilizan estas bacterias proviene de la luz,
que tiene la capacidad de unir las moléculas de CO2 y
H2O para formar hidratos de carbono.
29
a) Catabolismo.- Es el proceso de descomposición de las substancias nutritivas en compuestos más simples.
Fig. N°47. Catabolismo: Transformación de compuestos complejos a compuestos orgánicos simples (Fuente: www.santiaparicio.bloqspot.com)
b) Anabolismo.-Proceso constructivo por el que las substancias simples se convierten en compuestos complejos
(biosíntesis).
Fig. N° 48. Anabolismo: Transformación de compuestos orgánicos simples a compuestos complejos.(Fuente: www.santiaparicio.bloqspot.com)
Estos dos procesos (anabolismo y catabolismo), se El proceso metabólico en general comienza con la
encuentran íntimamente relacionados, ya que como hidrólisis de macromoléculas, que se encuentran en el
producto del catabolismo se forman productos medio ambiente bacteriano (moléculas voluminosas de
intermedios (por ejemplo ácido pirúvico, oxalacetato, proteínas, lípidos y glúcidos que no pueden penetrar
Acetil-S-CoA, etc.) los mismos son utilizados luego en el libremente a través de la membrana citoplásmica); estas,
anabolismo, para la síntesis de otros compuestos con la ayuda de enzimas hidrolíticas específicas (lipasas,
macromoleculares (por ejemplo peptidoglucano, carbohidrasas, proteinasas, oxidasas y otras), que la
fosfolípidos, etc.), que irán a formar parte de la estructura bacteria sintetiza y secreta al medio exterior, hidrolizan
celular de la bacteria (pared, membrana, núcleo enlaces estructurales de estas substancias, degradándolos
bacteriano, etc.). De esta manera la bacteria renueva a fragmentos más pequeños como monosacáridos,
continuamente su arquitectura celular, crece y se péptidos cortos, ácidos grasos, etc.; para ser luego
reproduce. transportados al citoplasma, donde serán convertidos en
En el metabolismo participan de manera general productos intermedios (catabolismo). A partir de estos
substancias enzimáticas, como catalizadores de productos y otros que aportan con azufre, fósforo,
reacciones químicas y el adenosintrifosfato (ATP), este nitrógeno, etc. se podrán sintetizar luego nuevos hidratos
último como la fuente principal de energía, responsable de carbono, proteínas, lípidos y ácidos nucleicos que
de la transformación y síntesis de las sustancias formaran parte de la estructura de las macromoléculas
intracelulares. constituyentes de la célula bacteriana (anabolismo).
30
Ejemplo: La glucosa una vez en el citoplasma sufre la

primera etapa de su degradación llamada fosforilación,
Glucosa + Enzima + 2ATP Producto intermedio (ácido que consiste en la acción de la enzima hexoquinasa que
pirúvico)+ 4ATP
se une a la glucosa y al ATP, obligando al ATP a donar
CATABOLISMO
un fosfato (-P) a la glucosa, de esta manera se formará la
Producto intermedio (ácido pirúvico) + ATP + P, S o N proteína glucosa – 6- fosfato. (el ATP al donar su fosfato se queda
ANABOLISMO como adenosin difosfato (ADP).
La glucosa – 6 – fosfato continua su degradación
Metabolismo de los hidratos de carbono a fructosa 1,6-difosfato etapa en la que también se utiliza
Las bacterias utilizan tres vías metabólicas otro fosfato de ATP, luego al formarse el 3-
principales en el catabolismo de la glucosa: fosfogliceraldehido, este compuesto es oxidada a 1,3-
fosfoglicerato y posteriormente a ácido pirúvico por una
1. Vía de Embden – Meyerhof – Parnas (EMP) coenzima llamada nicotinamida-adenin-dinucleótido
2. Vía de Entner – Douderoff (ED) (NAD), que se reduce a NADH2 al recibir los hidrógenos
3. Vía Hexosa Mono Fosfato. Warburg – Dickins (HMP) (H2) de la glucosa que se degrada; luego el NADH2
traslada éstos H2 (electrón) al ácido pirúvico formado, y
1. Vía de Embden – Meyerhof – Parnas (EMP).- Por finalmente por acción de otras enzimas deshidrogenasas
esta vía la glucosa es degradada sin la utilización del presentes, el ácido pirúvico entrega sus hidrógenos al
oxígeno por lo cual es también denominada vía lactato de sodio para formar ácido láctico o a otras sales
glucolítica anaerobia; usada sobre todo por bacterias orgánicas para formar ácido mixtos, alcoholes y CO2.
anaerobias y hasta cierto punto por bacterias anaerobias En el caso de las bacterias anaerobias estrictas
facultativas, el producto intermedio principal que se los aceptores finales de los hidrógenos (H) que se liberan
forma por esta vía es el ácido pirúvico. como producto de la degradación de la glucosa son los
La vía de EMP, es también llamada vía nitratos y fumaratos los que dan lugar a la formación de
fermentativa porque como productos finales de la nitritos y succinatos como elementos finales de
degradación de los hidratos de carbono se producen reducción.
ácidos y alcoholes. Esta, es la vía más usada por las El proceso de traslado o movimiento del
bacterias para metabolizar los hidratos de carbono y hidrógenos del 1-3 fosfoglicerato al NAD y de este al
comienza con la degradación de las macromoléculas de acido pirúvico produce liberación de energía, la misma
hidratos de carbono presentes en el medio ambiente que activa la unión de fosfatos inorgánicos (Pi) al ADP
bacteriano, las mismas difunden en forma de azúcares para formar o generar 4 moléculas de ATP por cada
pequeños (glucosa) al interior de la bacteria pasando a molécula de glucosa (fosforilación a nivel del sustrato),
través de la membrana citoplásmica ya sea en forma dando una ganancia de 2 moléculas de ATP para las
pasiva o activa. Pasivamente a través de los poros de la bacteria, la que será posteriormente invertida en la
membrana, disueltos en agua (hidrosolubles) y en lípidos biosíntesis de substancias bacterianas.
(liposolubles) en forma de moléculas pequeñas.
Activamente por medio de portadores y permeasas,
presente en la membrana citoplásmica.
VIA GLUCOLITICA DE EMP
Glucosa + Hexoquinasa
Utiliza 2 ATP
Glucosa 6 fosfato
Fructosa 1-6 difosfato
1-3 fosfoglicerato + NAD NADH2 Nitratos fumaratos

(Anaerobios estrictos)
Genera 4 ATP
Ácido pirúvico Anaerobios facultativos
Ácido láctico, Ácidos mixtos y alcoholes + CO2
Finalmente, en el anabolismo o biosíntesis se que es usada después para la síntesis de los compuestos
utilizan los productos intermedios que se lograron constituyentes celulares como polisacáridos,
durante el catabolismo de la glucosa, principalmente el lipopolisacáridos, peptidoglucano, etc.
ácido pirúvico, la misma sirve para formar Acetil CoA, la
31
VÍA DE LAS HEXOSAS MONOFOSFATO

DE WARBURG-DICKINS
Glucosa
Glucosa 6-fosfato
RECUADRO N° 1: Efecto de la caída del pH en un medio de 6-fosfogluconato

cultivo.
La formación de ácidos como productos finales del metabolismo Gliceraldehído-3-fosfato
fermentativo de la glucosa por la vía EMP, explican la caída del pH
y en consecuencia el cambio de color del medio de cultivo que
contiene un indicador de pH (ejemplo TSI: amarillo cuando el pH Ácido pirúvico
es ácido y rojo cuando es alcalino) y la formación de grandes
cantidades de gas en las pruebas bioquímicas que se realizan para Ciclo de Krebs Ácidos mixtos y otros
identificar bacterias.
H 2O
2. Vía de Entner- Douderoff.- Esta vía es también
denominada vía aerobia, porque se requiere oxígeno para
la degradación de la glucosa (glucólisis), en este caso,
Metabolismo de las proteínas
aunque con algunas diferencias en cuanto a los productos Las proteínas al igual que otros compuestos de alto
intermedios que se forman en relación a la vía EMP, peso molecular, son convertidas en el exterior de la célula
también se forma ácido pirúvico; sin embargo las en fragmentos permeables, reacción catalizada por
bacterias que utilizan esta vía carecen de enzimas exoenzimas que hidrolizan enlaces peptídicos; los
deshidrogenasas necesarias para oxidar el ácido pirúvico fragmentos peptídicos pasan al interior de la célula y por
a ácido láctico u otros ácidos mixtos por lo que estas la acción de las peptidasas intracelulares son degradadas
bacterias oxidativas transfieren los iones hidrógeno hasta aminoácidos y otros constituyentes intermedios, a
disponibles del ácido pirúvico al ciclo de Krebs, donde partir de los cuales se sintetizarán otras proteínas y
los hidrógenos finalmente se unen con el oxígeno para compuestos necesarios.
formar agua. Por lo tanto, el metabolismo oxidativo de En esencia la síntesis de proteínas es dirigida por el
los hidratos de carbono, se define actualmente, como las DNA y la participación directa de los diferentes tipos de
reacciones productoras de energía que requiere oxigeno ARN:
molecular como aceptor terminal del hidrógeno  RNA mensajero
(electrones).  RNA transferente
Los ácidos que se pueden formar por esta vía  RNA ribosómico
(ácido cítrico, glucorónico) son extremadamente débiles El mecanismo de síntesis de las proteínas comienza
que no tienen la capacidad de virar el pH del medio y no con la orden del DNA nuclear al RNA mensajero de
forman gas (pasan desapercibidos). sintetizar cierto tipo de proteína; el ARN mensajero lleva
En este caso, el movimiento de los iones esta información al ARN transferente para que éste done
hidrógenos del NADH al O2 genera 3 moléculas de ATP aminoácidos, los mismos son llevados a las sedes de los
a partir de ADP y Pi presente en el citoplasma bacteriano. ribosomas, donde es recibido por el ARN ribosómico,
VÍA DE ENTNER-DOUDEROFF este traduce el mensaje enviado por el DNA y procede a
Glucosa la síntesis de proteínas en el interior de los ribosomas.
Glucosa 6-fosfato ADN, RNAm,RNAt y RNAr Proteína

6-fosfogluconato2-ceto-3-desoxi-6-fosfogluconato
Ácido pirúvico
Ciclo de Krebs
H2O
Fig. Nº 49. Estructura de síntesis de proteínas
3.- Vía Hexosa Monofosfato de Warburg- Dikens.- (Fuente: Pumarola, 1987).
Esta vía en realidad es un hibrido de las dos vías
anteriores, es usada por algunas bacterias que tienen la El metabolismo de las proteínas también está
capacidad de crecer en un medio con oxígeno o en un ligada al metabolismo de los hidratos de carbono; porque
medio anaerobio y formar como productos finales agua en la síntesis de proteínas, también se utilizan como
(ED) y ácidos mixtos como en EMP. productos intermedios al ácido pirúvico y otros como el 3
32
fosfo-glicerato, oxalacetato, a cetoglutarato, a los cuales Cuando una sustancia se oxida libera electrones
se va uniendo NH3 para formar la estructura de un (iones hidrógeno: H), que se transfieren a otra sustancia
aminoácido como el ácido glutámico, la prolina, la que las gana, de la que decimos se reduce. Este proceso
arginina, etc. generalmente ocurre durante el catabolismo de la glucosa
Metabolismo de los lípidos donde intervienen diferentes enzimas deshidrogenasas
Los procesos básicos del metabolismo de lípidos (NAD, FAD), en el que el hidrogeno es transferido desde
se realiza con la ayuda de la lipasa y de otras enzimas sustratos orgánicos hasta compuestos inorgánicos, este
lipólicas que se encuentran en el citoplasma bacteriano y movimiento libera energía en Kcal/mol, energía que
que tienen la capacidad de descomponer los lípidos en permite la unión de Pi + ADP para la formación de ATP
ácidos grasos y glicerina, los mismos por acción de otras moneda energética útil para la actividad funcional de la
enzimas son transformadas a Acetil CoA, y a partir de bacteria.
ella, se podrá sintetizar nuevos lípidos estructurales. El mecanismo de respiración aerobia,
técnicamente empieza cuando la coenzima NAD oxida al
METABOLISMO DE LOS LÍPIDOS ácido pirúvico quitándole un electrón de hidrógeno (H),
Lípidos y grasas formandose como consecuencia NAD-H, este último
transfiere el H al FAD (flavina adenosin dinucleótido) el
Ácidos grasos y glicerol cual se convierte en FAD-H, luego los electrones (H) del
FAD-H se transfieren al O2 para formar peróxido de
Acetil CoA hidrógeno (agua oxigenada), finalmente la enzima
catalasa de estas bacterias desdoblan el agua oxigenada a
Palmitato una molécula de agua y O2 libre ( por esta última acción
la bacteria se libera de una substancia dañina que
Acilgliceroles afectaría su sobrevivencia). Entonces, decimos que existe
respiración aerobia, cuando el hidrógeno transferido es
Lípidos estructurales (lipopolisacáridos, captado por el oxígeno. Ejemplo:
lipoproteínas, etc.)
1.- Acido pirúvico + NAD NAD-H2
2.- NAD- FAD-H2 O2 H2 + O2 H2O2
3.- H2O2 + Catalasa H2O + O2
Metabolismo de ácidos nucleicos
Las bacterias sintetizan los ácidos nucleicos
principalmente el DNA, mediante la autorreplicación de Se dice que existe respiración anaerobia,
su propio DNA (copia), utilizando ATP y enzimas como cuando es otro compuesto distinto al oxígeno el que
la ADN polimerasa, helicasas, girasas, ligasas; uniendo recibe el ion hidrógeno (H), como el carbonato,
nucleótidos (desoxirribosa, ácido fosfórico y bases nitrógeno, sulfatos, nitratos que se reducen hasta formar:
nitrogenadas), de esta manera estructurar las dos cadenas CH4, amoníaco (NH3), ácido sulfídrico (H2S) y nitritos.
de DNA (estructura secundaria); luego el DNA se toma Ejemplo:
como molde para sintetizar RNA (ribosa, molécula de
ácido fosfórico y bases nitrogenadas), formando una 1.- Acido pirúvico + NAD NADH2
estructura de una sola cadena (estructura primaria). 2. - NADH2 FADH2 S04 SO4 + H2
3. - S04H2 SH2
Respiración bacteriana
El aire atmosférico contiene aproximadamente
un 78% de nitrógeno, un 20% de oxígeno y un 1% de Composición química de la célula bacteriana
ácido carbónico y otros gases. El oxígeno juega un papel La célula bacteriana al igual de todos los seres
muy importante en la respiración de una gran variedad de vivos elementalmente, está constituida por los siguientes
bacterias. compuestos químicos.
La respiración es un proceso de oxidación –

reducción de sustancias con liberación de energía, la
misma es capitalizada para la formación de ATP.
33
Cuadro N° 4. Composición química de la célula bacteriana

COMPUESTO CONCENTRACIÓN
QUÍMICO
H2O 70 a 80% en la fase evolutiva, 60% en la fase
involutiva y 40% en la de espora.
Hidratos de carbono 20 a 22%.
Proteínas 60 80%; Bacilos de Koch 30 a 35%.
Lípidos 5 a 8%; Bacilos de Koch y Hansen 30 a 40%
Sales y minerales 1% entre ellos: Cl Na, sulfatos, carbonatos, Calcio,
Hierro, magnesio, pigmentos y otros.
Crecimiento bacteriano condiciones de pH, temperatura, aireación, presión

Crecimiento es el incremento ordenado en osmótica y otros factores, que inciden positiva o
tamaño y número de las bacterias. En la práctica se negativamente en el crecimiento bacteriano.
utiliza la curva de crecimiento bacteriano para describir
el ciclo de vida de las bacterias sembradas en un medio a) PH.- La mayoría de las bacterias crecen mejor en un
de cultivo. El crecimiento bacteriano se divide en las pH de 6 a 8, aunque existen bacterias denominadas
siguientes fases: acidófilos que desarrollan en pH de 3, y otros alcalófilos,
desarrollan en pH de hasta 10. Las variaciones de pH,
a) Fase rezagante.- Es la fase de crecimiento retardado, influyen negativamente en el desarrollo bacteriano.
donde las bacterias sembradas empiezan a adaptarse a su
nuevo medio ambiente y desarrollar. b) Temperatura.- Las mayoría de las bacterias requieren
temperaturas óptimas de 30 a 37º C., sin embargo existen
b) Fase exponencial.- Llamada también fase de aquellas que desarrollan a temperaturas bajas de 15 a 20º
crecimiento logarítmica donde las bacterias sintetizan sus C. llamadas psicrófilas y otras pueden desarrollar en
nutrientes a partir del nuevo material nutriente, luego se temperaturas mayores de 50 o 60º C. llamándose
multiplican hasta agotar los nutrimentos del medio. termófilas. La variación brusca en sentido de aumento o
disminución de la temperatura afecta el crecimiento
c) Fase estacionaria.- Cuando los nutrientes se agotan, bacteriano.
se acumulan productos tóxicos y falto de oxígeno, en
estas circunstancias el crecimiento bacteriano cesa por c) Aireación.- Dependiendo de que la bacteria sea
completo y como consecuencia las bacterias empiezan a aerobia o anaerobia, el oxígeno presente en el medio,
morir. puede o no afectar su crecimiento. Por ejemplo si se trata
de una bacteria anaerobia en cuyo medio se encuentra
d) Fase de declinación.- El agotamiento del medio oxígeno, este último al unirse con el hidrógeno también
nutritivo y la concentración de sustancias tóxicas en el presente en el medio formaran peróxido de hidrógeno
medio, determina la muerte rápida de las bacterias. (H2O2) o agua oxigenada, que es dañina para esta bacteria
ya que carece de enzimas (catalasa o
superoxidodisminutasa) que desdoble al agua oxigenada
en moléculas de agua, incidiendo negativamente en su
desarrollo. A diferencia de las bacterias aerobias que al
presentar dichas enzimas evitan la acumulación de H2O2
en su medio.
d) Presión osmótica.- La escasa o mayor concentración

salina en el medio ambiente bacteriano, proporciona
cierta presión osmótica a la bacteria en el sentido de
perder o acumular demasiado líquido celular, de esta
manera puede inhibirse o destruirse la bacteria.
Fig.Nº 50.Curva de crecimiento bacteriano (Fuente: e) Luz.- La presencia de luz en el medio favorece a
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algunos microorganismos como las algas, sin embargo
Factores ambientales que influyen en el las bacterias generalmente son inhibidas o destruidas por
crecimiento bacteriano los rayos ultravioleta de la luz solar.
El medio ambiente bacteriano no solo
proporciona suficientes nutrimentos, si no también
34
CAPITULO 5
INFECCIÓN
Definición 1. Factores inherentes al germen
Infección es la llegada de los gérmenes a un Dentro estos factores se considera a dos tipos de
organismo vivo, existiendo entre ambos una interacción. gérmenes: los saprófitos y patógenos.
En ella, las bacterias se implantan, proliferan, penetran y
diseminan y el organismo reacciona movilizando glóbulo a) Gérmenes saprófitos.-Estos a su vez se clasifican en
blanco y formando anticuerpos para defenderse. accidentales, oportunistas y simbiósidos.
Accidentales.- Son aquellas bacterias que llegan
Clasificación de la infección transitoriamente al organismo, al que no producen daño
Existen tres tipos de infección: Natural, ni beneficio.
experimental y accidental. Oportunistas.- son aquellos que viviendo en forma
saprófita en el organismo, pueden en determinadas
a) Infección natural.- Es la llegada de los gérmenes al ocasiones exaltar su virulencia y producir un proceso
organismo en forma imprevista, pudiendo producirse o infeccioso.
no una acción agresiva, esto dependiendo del tipo de Simbiósidos.- Son aquellos microorganismos que
bacteria infectante (saprófito o patógeno) y de los conviven con otros organismos, beneficiándose ambos,
mecanismos de defensa del organismo. Un ejemplo tal como ocurre por ejemplo con los gérmenes del género
común de infección natural es la que ocurre al beber agua Rhizobium y las leguminosas.
contaminada con bacterias. b) Gérmenes patógenos.- Existen dos tipos de gérmenes
patógenos, los facultativos y los estrictos.
b) Infección experimental.- Este tipo de infección se Patógenos facultativos.- Reciben también el nombre de
realiza con fines de diagnóstico y fines inmunológicos. patógenos latentes, son aquellas bacterias que viven en el
En ambos casos se inoculan bacterias: En el primero, a organismo sin producir rol patógeno, pero que en
animales de experimentación para reproducir la circunstancias especiales como factores físicos, químicos
enfermedad y en el segundo para provocar respuestas o biológicos que afectan al huésped en forma negativa,
inmunológicas defensivas contra dicha bacteria, en su producen la baja de sus defensas locales y generales, tal
forma virulenta (ejemplo, vacunación) situación es aprovechada por estas bacterias para
proliferar y exaltar su virulencia, transformándose en
c) Infección accidental.- Es la que ocurre por descuido, consecuencia en patógenos estrictos, así el Streptococcus
por negligencia o ignorancia. Este tipo de infecciones pneumoniae, el bacilo Haemophilus influenzae, que son
suelen presentarse en los laboratorios que manipulan habitantes normales del trato respiratorio alto, al sufrir el
productos patológicos. organismo cambios bruscos de temperatura
Por descuido.- Es el caso por ejemplo, al extraer sangre (enfriamiento), tabaquismo y otros factores, se
de un paciente con SIDA y pincharse el dedo con la multiplican, invaden las vías respiratorias bajas y
aguja. producen neumonía.
Por negligencia.- Ocurre por ejemplo en los alumnos,
que luego de procesar muestras patológicas en el Patógenos estrictos.- Estos microorganismos actúan
laboratorio, no acostumbran lavarse las manos. mediante dos procesos:
Por Ignorancia.- Se observa, cuando el personal del Su virulencia y su toxicidad. La virulencia es la
servicio de limpieza manipula productos patológicos sin capacidad que tienen las bacterias para penetrar,
conocimiento de su peligrosidad. difundirse y multiplicarse en el interior del organismo. La
toxicidad, es la capacidad de las bacterias para elaborar y
Componentes de una infección segregar determinadas sustancias tóxicas las misma son
Para que se produzca una infección es necesario responsables de la enfermedad. Por ejemplo la
el concurso de dos componentes: Germen y Economía. Salmonella Typhi, llega al organismo, penetra el
Donde al germen o bacteria se la compara con la semilla intestino, difunde por vía hematógena y prolifera en un
y la economía u organismo con el terreno. Por lo tanto determinado tejido del organismo, es un germen
ambos intervienen en la interacción, donde los gérmenes inminentemente virulento. Por otra parte otros gérmenes
tienen que estar en cantidad y calidad y el terreno tiene como el bacilo de la difteria, se acantona en el epitelio de
que ser propicia para que se produzca la enfermedad la faringe, se multiplican en el lugar, elaboran una toxina
infecciosa. Cada uno de los componentes está rodeado de dermonecrotizante y produce su rol patógeno en este
un conjunto de factores, unos inherentes al germen y tejido.
otros inherentes a la economía. Existe una tercera eventualidad donde ambos
factores se suman constituyendo los gérmenes
35
toxovirulentos, propiedad que se presenta en la mayoría características genéticas que hereda el nuevo ser de sus
de los gérmenes patógenos. Estos últimos también progenitores, es decir las condiciones genéticas de
elaboran sustancias enzimáticas complejas que les susceptibilidad o resistencia frente a una determinada
permiten metabolizar compuestos e invadir tejidos enfermedad o proceso infeccioso. Por esta condición se
internos, entre los que podemos indicar por ejemplo la explica porque los niños que nacen de padres sanos son
coagulasa que tiene la capacidad de coagular el plasma más resistentes a contraer una determinada enfermedad,
sanguíneo, la hialuronidasa que hidroliza el ácido que cuando provienen de padres enfermos. El individuo
hialurónico del tejido conjuntivo, la estreptocinasa, que que nace de padres sanos está dotado de mecanismos de
disuelve el plasma coagulado. Estos procesos o atributos protección eficaces (efectiva respuesta celular y
de los gérmenes interactúan con los mecanismos de humoral), que impiden la implantación y colonización de
defensa del huésped, produciendo o no la enfermedad bacterias infectantes, contrariamente al proveniente de
infecciosa. Al respecto Askanasi, establece que existe padres enfermos, cuyas defensas locales y generales son
una relación directa entre el número y calidad de los deficientes y condicionan a corta edad, adquirir una
gérmenes con la resistencia local y general del huésped: enfermedad. Por ejemplo; un niño descendiente de padres
NxC tuberculosos, sobre todo si la madre está afectada por esta
P = ---------- enfermedad, el niño no nace tuberculoso porque esta
RL x RG enfermedad no es congénita, pero si su organismo
presenta mayor predisposición a esta enfermedad, si es
Donde la llegada de gérmenes en gran cantidad expuesto a la acción del Mycobacterium tuberculosis.
(N), con atributos toxovirulentos (C), frente a la
resistencia local (RL) y resistencia general (RG) b) Factor fenotipo.- Es el conjunto de circunstancias que
disminuidos, tiene como resultado un proceso infeccioso. rodea al nuevo ser desde el momento del nacimiento
Sin embargo si las defensas son suficientes y las bacterias hasta la muerte; este factor tiene relación con la
escasas y débiles, la enfermedad infecciosa no se influencia del medio ambiente. Dentro este aspecto
produce. destacaremos los más importantes:
Además de las anteriores se conocen las
propiedades de simbiosis y antagonismo: Temperatura.- Existe una temperatura óptima para el
Simbiosis y antagonismo.- Existen propiedades desarrollo de los seres vivos, que permita desenvolverse
especiales como la simbiosis, propiedad en la que se en un estado fisiológico saludable (15 a 20ºC); el cambio
asocian dos gérmenes combinando sus acciones brusco de esta temperatura, condiciona a un estado de
patógenas tanto in Vivo como in Vitro. Para comprender susceptibilidad a la enfermedad, como ocurre por
mejor esta propiedad daremos un ejemplo: sembrados ejemplo, por excesivo frió, a adquirir gripe, bronquitis,
dos gérmenes estreptococos y salmonellas in Vitro suman bronconeumonía y otros. Así como trastornos
sus caracteres positivos y sus colonias por efecto de estos circulatorios por vasoconstricción exagerada que puede
factores alcanzan dimensiones mayores a las que tendrían determinar la aparición de una gangrena. Por el contrario
si se sembraran aisladamente, igual efecto se obtiene in elevadas temperaturas de 32, 37 o 40º C., permiten la
Vivo donde la enfermedad resultante producto de esta eclosión de otro conjunto de enfermedades, sobre todo
asociación es mucho más grave, que si el organismo las gastrointestinales, fiebre amarilla, peste bubónica.
fuera atacado por solo, uno de ellos. Ahora bien, si la Rabia, dengue, lepra, etc.
simbiosis genera beneficio unilateral recibe la
denominación de satelitismo, como ejemplo podemos Edad.- Es otro factor de gran importancia, ya que los
citar el satelitismo entre el S. aureus y el H. influenzae grupos etáreos, condicionan a un número elevado de
que por esta asociación las colonias del H. influenzae enfermedades que están en relación directa con la edad,
adquieren mayores dimensiones. Un fenómeno inverso o tal el caso de las enfermedades de la niñez o la infancia,
perjuicio ocurre cuando en la asociación de dos gérmenes donde son características las enfermedades eruptivas
uno de ellos actúa inhibiendo el desarrollo del otro, a este como el sarampión, la varicela y antiguamente la viruela,
hecho se llama antagonismo microbiano. y otras como la poliomielitis, la bronconeumonía,
meningitis, etc.
2. Factores inherentes a la economía En la adolescencia, son más características las
El organismo humano experimenta dos enfermedades sociales como la sífilis, gonorrea, el SIDA
situaciones a la hora de enfrentase a una infección: una y otros. En la edad adulta, la fiebre tifoidea, el cólera,
que sea resistente a la enfermedad y otra que sea fiebre amarilla y otros.
susceptible. Estas condiciones dependen de dos factores:
Factor genotipo y fenotipo. El sexo.- Ya no tiene el impacto del pasado, por cuanto la
intensa multitud de actividades que cumple la mujer, ha
a) Factor genotipo.- Es el conjunto de circunstancias roto la barrera que condicionaba cierto tipo de
que experimenta el nuevo ser desde el momento de la enfermedades que eran más frecuentes en el hombre, sin
concepción hasta el nacimiento, este factor se refiere a las embargo, ciertos estados fisiológicos como la
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menstruación y el embarazo, condicionan ciertas desplazar con el polvo debido al movimiento del aire y
enfermedades producidas por gérmenes oportunistas pueden ser inhalados por las personas. Este mecanismo
como las candidiasis y otros. de transmisión es el más eficaz en edificios cerrados y
atestados, y es una fuente importante de infección en
La raza.- Su influencia en la susceptibilidad o hospitales. Las bacterias aéreas también pueden causar
refractariedad de las enfermedades es innegable, así la infección al asentarse en las heridas abiertas durante la
escarlatina es propia de la raza europea Sajona; para la cirugía o cuando se están cambiando vendajes.
fiebre amarilla y paludismo son más susceptibles la raza
blanca que la negra o amarilla. b) Mediante alimentos contaminados. Muchos
microorganismos entran al cuerpo por la ingestión de
Nutrición.- La calidad y cantidad de alimentos, que alimentos, agua contaminada o por objetos contaminados
deben consumir diariamente los individuos para que son llevados a la boca. También los microorganismos
protegerse de diversas enfermedades infecciosas, está son transportados en las patas y el cuerpo de vectores,
relacionado con el nivel fisiológico de calorías del estos al contactar con los alimentos, depositan en ellas las
organismo, la que normalmente debe fluctuar entre 2.800 bacterias patógenas.
a 3.500 calorías diarias,
c) Contacto directo. Los microorganismos también se
La profesión.- Constituye otro factor condicionante para transmiten por contacto directo entre personas, como la
la presencia de ciertas enfermedades. Por ejemplo en sexual o mediante el beso. Una persona con lesión en la
nuestro medio los cooperativistas mineros por falta de piel puede transmitir en forma rápida la infección por
seguridad industrial inhalan gran cantidad de polvo sílice, contacto directo. El contacto indirecto necesita objetos
esta situación conlleva a un proceso inflamatorio alvéolo- como intermediarios, que se llaman fómites. Los fómites
pulmonar y sobre ella una nutrición deficiente además del se contaminan al estar en contacto con los gérmenes
sobre esfuerzo del trabajo de la mina, determina la baja patógenos de un paciente infectado, después de un
de defensas orgánicas, condicionado a un estado de salud tiempo los fómites transfieren gérmenes patógenos al
precario, situación propicia para la infección y estar en contacto con un segundo individuo. En la
multiplicación de varios microorganismos como los práctica las manos, instrumentos hospitalarios, utensilio
bacilos de Koch y producir la tuberculosis pulmonar. de alimentación, juguetes, libros y otros, pueden servir
Este tipo de condiciones también son observadas en otras como fómites, transfiriendo gérmenes entre los pacientes
actividades profesionales, como las fábricas con la e individuos en general. El agua y los alimentos son los
inhalación de cuerpos extraños, los inhumadores de fómites, que con mayor frecuencia participan en nuestro
cadáveres, anátomo patólogos, laboratoristas y otros que ambiente cotidiano.
continuamente corren el riesgo de infectarse, por estar en
contacto con productos patológicos de alta peligrosidad.
Puerta de entrada de las bacterias al
Vías de transmisión de una infección organismo
La mayoría de los microorganismos eliminados Las vías de entrada más frecuentes de las
por una persona sana son los mismos que se encuentran bacterias al huésped son el aparato respiratorio (boca y
en las personas cercanas, por lo que el intercambio de nariz), el aparato digestivo, las excoriaciones en la
estos microorganismos es de poca importancia. Pero si superficie de las mucosas y la piel. A partir de estas
alguien es portador de un germen patógeno o tiene una estructuras las bacterias pueden diseminarse directamente
infección activa, la diseminación de sus microorganismos a través de los tejidos contiguos o puede penetrar a los
puede causar infecciones en un nuevo huésped, algunos vasos linfáticos, llegar al torrente circulatorio y alcanzar
gérmenes patógenos se transmiten al hombre por medio los tejidos de predilección para su multiplicación.
de algunos animales. Las vías de transmisión más
importantes son la aérea, mediante alimentos Selectividad tisular
contaminados y contacto directo. Una vez que los microorganismos lograron
ingresar al organismo, estos buscan un tejido de
a) Transmisión aérea. La mayoría de las enfermedades predilección para acantonarse y anidar, por ejemplo la
del hombre son del tracto respiratorio y la mayoría de salmonella cualquiera que sea su vía de penetración, tiene
ellas se transmiten por el aire. Los microorganismos se gran afinidad por acantonarse en el intestino (es
aerolizan en forma importante debido a la tos, el enterotropa). Otro ejemplo se observa en el virus de la
estornudo y a las secreciones de moco asociados a las rabia que tiene selectividad por las células nerviosas del
infecciones respiratorias. Muchos de los bulbo.
microorganismos aerolizados están asociados al núcleo
de la gota, mientras que otras se depositan en superficies
como el piso, ropa camas, etc., los microorganismos
aerolizados que se encuentran en los objetos se pueden Propagación de la infección
37
Una gran variedad de microorganismos no se acción intensa del calor o del frío sobre la piel; estos
conforman con anidar el tejido u órgano predilecto, y no factores, permiten que las bacterias puedan franquear la
se quedan quietas en el lugar, sino que tienden a piel o las mucosas, invadiendo el interior de la economía
generalizarse por vía sanguínea o linfática. Según el humana. Las más de las veces, se requiere de una
tiempo y tipo de bacterias este proceso recibe varios solución de continuidad, o sea pérdida de partículas de la
nombres como: piel o mucosas, no es necesario que las soluciones de
continuidad sean demasiadas grandes, bastan simples
a) Bacteriemia.- Es la primera etapa de un proceso rasgaduras o erosiones mínimas, a veces ambos factores:
infeccioso sistémico que consiste en la invasión solución de continuidad y transtornos fisiopatológicos
bacteriana al torrente circulatorio por lapsos cortos de locales se combinan. Los gérmenes que han alcanzado un
tiempo (generalmente por minutos a horas), sin lugar de la economía, penetran al interior del organismo,
multiplicarse en ella. Esta invasión puede ser transitoria, recibiendo este lugar el nombre de puerta de entrada, la
intermitente o continua. piel en contacto con las bacterias no reaccionan de igual
manera, debido a la multiplicidad de las bacterias
b) Septicemia.- Es la segunda etapa del proceso existente, tampoco los gérmenes tienen una acción
infeccioso, que consiste en la invasión bacteriana al homogénea o uniforme, sino que actúan de diversa
torrente circulatorio por periodos de tiempo traducidos en manera; desde luego, no actúan a este nivel de la
días, generalmente 7 (de donde deriva su denominación), economía gérmenes saprófitos, actúan los patógenos
multiplicándose en ella. estrictos, cuando están en cantidad y calidad suficientes.
c) Shock séptico.- Representa la vía final común de las

infecciones bacterianas masivas con la diseminación
sistémica generalizada de las bacterias en el organismo.
d) Saprohemia.- Se ha reservado esta denominación

para designar la llegada al caudal sanguíneo de bacterias
anaerobias causantes de procesos pútridos o gangrenosos,
como los producidos por el género clostridium. Fig.Nº51.Mecanismo de una infección (Fuente: Giordano, 2006).
e) Toxemia.- Es el paso de productos metabólicos de los Si llegan gérmenes piógenos (productores de

microorganismos (exotoxinas o endotoxinas) al torrente supuración purulenta) que tienen atracción, predilección
circulatorio. o tropismo por este tipo de lesiones, comienza a segregar
hialuronidasa, substancia enzimática microbiana
Periodo de incubación producida por muchos gérmenes al llegar a los tejidos
Recibe ésta denominación, el tiempo como una manifestación no específica de su biología.
transcurrido desde la penetración del germen en el Esta enzima tiene la particularidad de desintegrar al ácido
organismo del huésped susceptible u hombre sano, hasta hialurónico de algunos tejidos del huésped, para penetrar
la aparición de los primeros síntomas que en forma en ella, además de evitar el tactismo, inhibiendo la
específica traduce el establecimiento de la enfermedad. fagocitosis de los leucocitos (elementos defensivos del
Cada enfermedad tiene su propio periodo de incubación, organismo humano, primeros en acudir ante la presencia
por ello este factor tiempo no puede ser establecido de un elemento extraño), esto favorece la proliferación de
rígidamente, sino que fluctúa dentro de ciertos límites, las bacterias in situ; en una segunda fase los
así el periodo de incubación de las enfermedades agudas microorganismo liberan o segregan una substancia
tiene un promedio de 7 a 14 días, esto ocurre en el fiebre particular a una determinada bacteria denominada
tifoidea. En la neumonía este periodo es de 48 a 72 horas. agresina (toxinas y/o enzimas), que tiene la capacidad de
Este lapso de tiempo está en relación directa con la producir una serie de alteraciones y cambios sobre las
patogenia, virulencia y toxicidad del germen y es células y tejidos, las que al mismo tiempo provocan la
inversamente proporcional a la resistencia local y general atracción de mayor número de leucocitos que migran por
del organismo. En las enfermedades crónicas el periodo vía sanguínea o linfática al lugar de la infección, en este
de incubación es más prolongado así en la tuberculosis, nivel, forman una barrera defensiva, tratando de evitar la
varia de 15 a 90 días en la lepra de 1 a 3 años o más. diseminación de las bacterias, estableciéndose una
verdadera lucha, la acción final de esta batalla dependerá
Mecanismos de la infección de la naturaleza del germen (virulencia, toxicidad) y de la
Para que se inicie la infección, es importante la capacidad defensiva del organismo. El producto final de
presencia de una solución de continuidad de la piel o las este proceso defensivo constituye lo que se denomina en
mucosas o una alteración o condición fisiopatológica microbiología producto patológico, formado por células
local, como la maceración de la piel por el sudor, la vivas y muertas junto a microorganismos vivos y muertos
llamado pus; que es una expresión de éste proceso.
38
Muchas veces estas acciones se traducen en la formación infección, produciendo calor y rubor local, la
de flictenas o productos serosos gelatinosos cubiertos por eliminación de prostaglandinas y leucotrienos celulares
una concreción costrosa de color oscuro. junto con la compresión de los nervios producen dolor y
todo este conjunto produce hinchazón (tumor), que en
Enfermedad infecciosa general son los signos clásicos de Celsius, que
Como producto de este proceso de interacción se caracterizan un proceso infeccioso inflamatorio agudo.
producen alteraciones y lesiones de diversa naturaleza en Otro síntoma común de las infecciones
los tejidos infectados, esto considerando el tipo de bacterianas es la leucocitosis neutrofílica, que alcanza
germen invasor; por ejemplo el meningococo al destruir niveles de 20 a 30.000 leucocitos por mm3, con 70 a 90%
las células meníngeas, producen una reacción de segmentados en la fórmula leucocitaria, cifra que
inflamatoria con la destrucción también de leucocitos disminuye en la fase crónica. También son comunes la
polimorfonucleares que engloban bacterias o cocos hipertrofia de ciertos órganos del sistema retículo
meníngeos, estas bacterias al llenar el citoplasma endotelial, observándose hepatomegalia, esplenomegalia,
leucocitario y vencer su resistencia, estallan, poliadenopatías de los ganglios, modificaciones
observándose los núcleos de los leucocitos, rodeados de hemáticas como eritrosedimentación acelerada, anemia
fragmentos de protoplasma junto a los meningococos hipocrómica ferropénica o al contrario megaloblástica
(piocitos). En otras ocasiones, las reacciones que se hipercrómica, a veces la toxemia infecciosa se manifiesta
presentan no son de tipo piógeno, sino necrótico, por shock, taquicardia, hipotensión arterial, palidez,
destructivo del tejido infectado, el organismo traduce sudoración fría y pulso débil.
estos daños por una serie de síntomas y signos que Existe síntomas propios y característicos de una
reunidos constituyen los síndromes. determinada enfermedad infecciosa, citaremos el caso de
la fiebre tifoidea, caracterizada por septicemia, curva
Principales síntoma de una infección térmica manifiesta, donde la temperatura sube y baja
Existen síntomas comunes en las enfermedades durante 3 o 4 días, alcanza 29 a 40ºC, se mantiene 5 a 7
transmisibles comunicables o de contacto donde se días (septicemia). Se produce pequeñas oscilaciones en
destaca la hipertermia, que es una expresión de la lucha este lapso hasta que cae o desciende por lisis en 3 o 4
bacteria-huésped, casi en todas las enfermedades días, proceso acompañado por abundantes sudación,
bacterianas la fiebre es común, su rango oscila de 37,5 a poliuria, existe cefalea o cefalalgia frontooccipital,
38, 39 o 40ºC. gorgoteo en la fosa iliaca derecha, lengua seca, halitosis,
La Fiebre ciertamente es la manifestación general ulceración del pilar anterior del istmo de las fauces,
observada más frecuentemente en un proceso dicrotismo del pulso (pulso doble en cada latido).
inflamatorio infeccioso. Los mecanismos que la producen Petequias, roséolas, lumbalgia, etc. Las petequias son
se describen a continuación: microhemorragias producidas en la piel de forma
La fiebre obedece a la presencia de endotoxinas lenticular, obedecen a que las salmonellas durante la
bacterianas (lipopolisacáridos), bacterias, virus, hipertermia o septicemia llegan hasta los finos capilares
esteroides y complejos antígeno-anticuerpo en el lugar de de la piel, se acantonan a este nivel, formando trombos,
la infección; estos al ser captados por los granulocitos el flujo constante de sangre por el papel del corazón de
monocitos, macrófagos y quizá otras células, son bomba aspirante y impelente, presionan a los trombos
inducidos a liberar diferentes substancias (parecidas a la que se forman e impiden el libre paso de la sangre, llega
interleucina-1, linfocina) denominados pirógenos- un momento en que estallan los capilares y la sangre se
endógenos. El pirógeno-endógeno, es transportado por la depositan el piel; éstas microhemorragias que reciben el
sangre al centro termorregulador en el hipotálamo, el cual nombre de petequias, pueden ser aisladas o confluentes
inicia la respuesta funcional que originara fiebre, es decir, normalmente se localiza en la piel del abdomen de los
aumento de la producción de calor, conservación del brazos, las piernas etc. Así como éste otras enfermedades
calor y la reducción de la pérdida de calor en el también poseen síntomas propios o característicos que
organismo. Hacen excepción a esta regla algunas permiten su identificación a través del diagnóstico
enfermedades como el cólera donde se detecta hipotermia clínico. Las que posteriormente son corroboradas con el
de 34, 35, 36ºC. diagnóstico del laboratorio clínico.
RECUADRO N° 2: La fiebre en la infección. Salida de los microorganismos

En los seres humanos, no se ha logrado atribuir beneficios Generalmente los microorganismos que se
consistentes de la fiebre en el control de la infección. La encuentran en la boca y el tracto respiratorio se expelen
supresión de la fiebre por medicamentos (por, ejemplo aspirina) al hablar y al respirar. Durante el canto y el grito se
no es nociva durante las infecciones y a menudo hacen que los expelen cantidades masivas al aire. Por lo que muchos
pacientes febriles se sientan mejor. microorganismos patógenos al ser eliminados al exterior
se encuentran dispersos en pequeñas cantidades de moco
Paralelamente a la fiebre se produce el aumento y saliva. La humedad se evapora en un corto periodo de
del flujo sanguíneo por vasodilatación al lugar de la tiempo y la partícula que queda se llama núcleo de la
39
gota (Wells). Este microorganismo sostenido en la gota La orina y algunas secreciones genitourinarias
puede permanecer suspendido en el aire para ser pueden contener algunos microorganismos patógenos,
transmitidos a un nuevo huésped. Además de ser pero en general su transmisión es solo por contacto
aerosolizadas, la saliva sirve de vehículo de transmisión directo. La sangre de una persona sana está libre de
de los microbios mediante el beso y la expectoración. Las microorganismos patógenos, sin embargo estos pueden
bacterias de las escamas de la piel son eliminadas en llegar por transfusiones sanguíneas o por picadura de
forma continua del cuerpo, cantidades masivas de insectos.
microorganismos patógenos se encuentran presente en las Por lo tanto los microorganismos patógenos
heces de pacientes enfermos, los mismos se diseminan luego de multiplicarse y causar enfermedad en un
rápidamente a nuevos huéspedes que viven en huésped, salen de este huésped mediante diferentes vías,
condiciones de saneamiento deficiente. llegan a uno o más huéspedes secundarios y causan en
ellos la enfermedad infecciosa.
CAPITULO 6
40
PROCESOS DEFENSIVOS DEL HUÉSPED

Introducción activando los linfocitos específicos de la respuesta
En el presente tema, vamos a recorrer de modo adaptativa (específica). A partir del 5º día entra en acción
suscito las distintas estrategias del organismo humano la inmunidad específica adaptativa, dependiente de los
frente a una infección microbiana; comenzaremos linfocitos T y B específicos que se han activado y
primero conociendo como los mecanismos naturales (piel proliferado clonalmente para cumplir dos funciones: una
y mucosas) impiden la entrada y colonización de los humoral y otra celular; con la primera se formarán gran
gérmenes durante las primeras horas de la infección; cantidad de anticuerpos que activarán el complemento
continuaremos luego con los mecanismos innatos por la ruta clásica, opsonizarán y neutralizaran a los
(inespecíficos), como la activación del complemento por microbios y con la segunda destruirán células enfermas
las rutas alternativa y lectinas, además de la acción de los infectadas.
fagocitos para destruir los microbios. Luego veremos
cómo las citoquinas secretadas o liberadas por los
macrófagos y células enfermas, amplifican las respuestas
defensivas del organismo y activan a las células
matadoras naturales (NK) respectivamente, manteniendo
de esta manera a raya la infección, mientras se van
FAGOCITOSIS Y ACCION ACTIVACIÓN DEL DESTRUCCIÓN DE FORMACION DE ANTICUERPOS

DE CELULAS NK COMPLEMENTO CELULAS ENFERMAS
Esquema N°3. Inmunidad general del organismo humano
A continuación conoceremos cada una de las etapas del proceso defensivo del huésped considerando el siguiente
esquema:
INMUNIDAD INNATA O INMUNIDAD ESPECÍFICA

MECANISMOS DE DEFENSA Inmunidad específica humoral:
BARRERAS INESPECÍFICOS -Antígenos
NATURALES - Elementos de defensa inespecíficos -Células presentadoras de antígeno
Acciones de la: - Activación del complemento. -Acción de los linfocitos T y B.
- Piel y - Fagocitosis. - Formación de anticuerpos
- Mucosas - Acción de las citoquinas liberadas. - Acción de los anticuerpos en la
- Respuesta sistémica a las inmunidad humoral
citoquinas de la fase aguda. Inmunidad específica celular:
-Resultado de los procesos -Acción citotóxica por LTc
defensivos innatos -Acción citotóxica por células
Esquema Nº 4. Procesos defensivos del huésped
asesinas LK
BARRERAS NATURALES organismo. Corresponden a una etapa previa a la
“inmunidad innata”. Entre las barreras naturales más
Son un conjunto de mecanismos que impiden la importantes podemos mencionar los siguientes:
entrada de los gérmenes al organismo, están constituidos
principalmente por la acción de la piel y las mucosas, 1. La piel. Por la excesiva descamación que sufre la capa
cuando están intactas en su continuidad o no presentan córnea donde se encuentran adheridas grandes variedades
condiciones fisiopatológicas locales, son barreras de de microorganismos (la mayoría perteneciente a la flora
protección contra la invasión de las bacterias al bacteriana normal), son eliminadas continuamente con la
41
renovación de esta capa cada 15 a 30 días. Por otra parte inflamatoria o respuesta inflamatoria en ella, se pone
las glándulas sudoríparas proporcionan un pH ácido a la en marcha lo que se denomina: Sistema de inmunidad
piel, esto impide la proliferación de las bacterias innata, que son los mecanismos de defensa inespecíficos
patógenas. Las glándulas sebáceas también impiden la o innatos del organismo, (no es una respuesta específica a
proliferación de las bacterias englobándolos un germen o antígeno en particular. Es una respuesta de
mecánicamente. carácter general); en él, participan varios elementos de
defensa, como proteínas plasmáticas, leucocitos y
2. Las mucosas: a) La mucosa ocular.- Se encuentra anticuerpos preformados o naturales.
protegida por el movimiento de los párpados que
mecánicamente elimina bacterias que son concentradas a) Proteínas plasmáticas.- Son un conjunto de proteínas
en el ángulo interno del ojo, los mismos son eliminadas presentes en el plasma, que aumentan su concentración
junto con las lagañas, así mismo las lágrimas contienen rápidamente en procesos infecciosos, entre las más
una sustancia llamada lizosima cuya acción bactericida importantes podemos mencionar a las proteínas del
destruye una gran variedad de bacterias patógenas. sistema del complemento (con acción inflamatoria, lítica
y opsonizante), la proteína C-reactiva (se une a la
b) Mucosa nasal.- Que fuera de estar protegida por las proteína C del neumococo favoreciendo su fagocitosis) y
vellosidades y cilios que son filtros groseros que evitan la otras.
entrada de microorganismos contenidos en partículas,
también se encuentra la lizosima que las destruye. Por b) Leucocitos.- Los glóbulos blancos que participan en
otra parte actos mecánicos como el estornudo, y producto esta fase de la defensa, son los polimorfonucleares
del limpiado nasal también se eliminan bacterias. (PMN), los monocitos y los macrófagos. Todos ellos con
actividad fagocítica (ingestión de bacterias y partículas
c) Mucosa bucal.- La exagerada descamación de células extrañas).
epiteliales de la boca arrastran a las bacterias al exterior o Dentro los PMN, se encuentran los neutrófilos,
son deglutidas al estómago donde el ácido clorhídrico de eosinófilos y basófilos, estos incrementan su número por
alrededor de pH 2 destruye a la mayoría de los encima de las cifras normales en los procesos
microorganismos, excepto algunos patógenos (p.ej., H. inflamatorios, adquiriendo diferentes funciones
pylori, Salmonella, Vibrión cholerae, etc.). específicas. Los monocitos que se encuentran circulando
la sangre cuando ingresan a los tejidos se transforman en
d) Mucosa auricular.- Está dotada de vellosidades macrófagos aumentando de tamaño a 25 o 50 micras,
denominadas Bárbula hirce, actúan como filtros groseros, algunos de estos son móviles y se los denomina
por otra parte la presencia de glándulas ceruminosas que macrófagos errantes, se desplazan con movimientos
engloban mecánicamente a los microorganismos impiden ameboideos y se encuentran en todos los tejidos y
su ingreso y multiplicación en el organismo. cavidades del cuerpo. Otros macrófagos están unidos a
las paredes de los capilares sanguíneos y sinusoides, y se
e) La mucosa genital.- En el hombre el surco balano conocen como macrófagos fijos.
prepucial del pene, presenta glándulas ceruminosas que Otro tipo de leucocitos son los denominados
segregan esmegma que engloba mecánicamente Células asesinas naturales (células NK) capacitadas para
bacterias, impidiendo su ingreso al organismo. En la lisar células enfermas cancerosas o infectadas con virus.
mujer la mucosa vaginal contiene los bacilos de
Doderlein que al actuar sobre el glucógeno de las células c) Anticuerpos.- Son las inmunoglobulinas naturales que
epiteliales de la mucosa vaginal, transforman este se encuentran circulando la sangre, participan uniéndose
elemento en ácido láctico que explica el pH ácido que a antígenos o microorganismos invasores, facilitando de
oscila entre 3,8 a 4,5 potencial hidrogénico que neutraliza esta manera la fagocitosis y son los principales actores de
o impide la proliferación de bacterias. la inmunidad adquirida.
f) Microbiota normal.- La flora bacteriana normal del La forma como participan los elementos de defensa se
organismo evita la colonización de microorganismos llaman mecanismos de defensa inespecíficos; estos
exógenos en el huésped. mecanismos son: El sistema del complemento,
fagocitosis, liberación de citoquinas, respuesta sistémica
INMUNIDAD INNATA O MECANISMOS a las citoquinas en la fase aguda y resultados de los
DE DEFENSA INESPECÍFICOS procesos defensivos innatos.
Si el microbio logra atravesar la piel, mucosas,
invade tejidos internos y produce daño tisular, el
organismo reacciona de manera celular y humoral con el
objeto de remover o controlar al agente agresor y reparar
el daño. Esta serie de eventos se llama también reacción Sistema del complemento
42
Se define el complemento como un sistema

funcional de unas 30 proteínas (globulinas) producidas
por el hígado, monocitos y macrófagos, se encuentran en
el suero sanguíneo y otros líquidos orgánicos en forma
inactiva, y que en procesos infecciosos se activan en
forma secuencial e interaccionan entre sí para cumplir las
siguientes funciones:
1. Formación del complejo de ataque a la membrana.

Cuando los anticuerpos IgG se unen a un antígeno como
el que existe en la superficie de una célula infectada por Fig. N° 52. Quimioatracción de los neutrófilos por C5a (Fuente:
virus, se activa la cascada clásica del complemento. A Struthers, 2005).
través de una secuencia específica, las proteínas del
complemento forman un “complejo de ataque de Proteínas del sistema de complemento
membrana” (CAM), que se introduce en la membrana Las diferentes proteínas que conforman el
citoplasmática de la célula infectada, formando unos sistema de complemento han sido asignados con números
canales por donde ingresan agua y otros compuestos que antecedidos por el prefijo “C” (quiere decir
“revientan” la célula, que muere, y de esta manera se complemento), entre estas podemos mencionar al: C1,
evita la replicación del virus en dichas células. Por este C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 y C9. Otro grupo de
mecanismo se pueden lisar también las bacterias proteínas son los denominados factores: B, D y P y
gramnegativas, parásitos, virus encapsulados, eritrocitos finalmente las proteínas de unión a la manosa (MBP o
y células nucleadas. Las bacterias grampositivas son LUM: lectinas de unión a la manosa). Cada uno de ellas
bastante resistentes a esta acción. actúa, según la ruta de activación del complemento, de
manera activa y secuencial.
2. Opsonización de la bacteria con la consiguiente Gran parte de estas proteínas son proenzimas
fagocitosis y destrucción. El C3b (complejo proteico), que requieren rotura proteolítica para convertirse en
es la opsonina principal del complemento. Los antígenos enzimas activas, las que a su vez catalizarán la rotura de
(bacterias) recubiertos con C3b se unen a receptores la siguiente proteína del complemento a manera de una
específicos en células fagocíticas, y así la fagocitosis es “cascada enzimática” (de manera que una proteína
facilitada. (Las opsoninas hacen que las bacterias sean previamente catalizada es un precursor enzimático para
más asequibles a la fagocitosis). catalizar la próxima proteína del complemento), de esta
manera se logra conformar una estructura molecular que
3. Ampliación de los mecanismos inflamatorios, a al adherirse a la membrana celular o bacteriana cumplirá
través de sus efectos anafilácticos estimulando la las funciones antes mencionadas.
contracción del músculo liso y aumentando la
permeabilidad vascular. Los pequeños fragmentos que Rutas o vías de activación del complemento
resultan de la rotura de las proteínas del complemento Las rutas de activación del complemento son las
como son: C3a, C4a y C5a, son llamados anafilotoxinas. siguientes:
Estas se unen a receptores de células cebadas y basófilos, 1.- Ruta alternativa
e inducen la degranulación de estas células, produciendo 2.- Ruta de las lectinas
la liberación de histamina y otras sustancias 3.- Ruta clásica
farmacológicamente activas. Estas sustancias aumentan
la permeabilidad y vasodilatación vascular. Así mismo, Cada una de estas rutas, tiene como principal
inducen a monocitos y neutrófilos a adherirse al endotelio objetivo, la formación de un compuesto denominado
para iniciar su extravasación. “Convertasa de C3”, enzima que actúa sobre el C3, para
producir C3b, este último, es uno de los principales
4. Incremento de la quimiotaxis con la atracción de complementos que se adhiere a la membrana de células
macrófagos y PMN al sitio de infección. infectadas y bacterias para cumplir su acción
El C5a, del complemento es un potente factor de antimicrobiana.
quimioatracción, que hace, que acudan los neutrófilos y La activación de estas rutas se lo realiza en
los macrófagos al punto de infección. diferentes momentos de la infección. En el caso de una
infección bacteriana la primera ruta que se activa es la
alternativa, le sigue la ruta de las lectinas, en ambas el
complemento se une directamente al microorganismo
(pertenecen a la inmunidad innata), en cambio la ruta
clásica es la última en activarse ya que esta necesita la
formación previa de anticuerpos, en este caso el
complemento se une al microorganismo a través del
43
anticuerpo preformado (pertenece a la inmunidad el C2 fragmentandolo en dos partes: un fragmento

específica). Por cuestiones didácticas, las tres rutas de pequeño: C2b (que difunde hacia el plasma), y otro
activación la explicamos en conjunto, empezando por la grande: C2a, queda en la membrana del complejo unido
ruta clásica. al C4b, formando entre ambos el complejo C4bC2a. A
éste se le denomina “Convertasa de C3”.
1.- Ruta clásica
A los componentes de la vía clásica se les asigna
un número de acuerdo con el orden en que fueron
descubiertos (C1,4,2,3,5,6,7,8,9). Es de notar que estas
proteínas actúan en la secuencia numérica excepto el C4,
que es la segunda proteína en actuar en la cascada
enzimática.
La vía clásica comienza casi siempre estimulada
por la formación de complejos antígeno-anticuerpo en el
Fig. N° 53. C4bC2a es Convertasa de C3 (Fuente: Giordano, 2006).
lugar de la infección. Ya se ha visto que tanto la Ig G
como la Ig M pueden activar al complemento. Esta vía
La Convertasa de C3, actúa sobre el C3 (C3 se encuentra
puede separarse en dos etapas, una primera, en el que
en grandes concentraciones en el suero sanguíneo), a
intervienen los complementos: C1 - C2 - C3- C4 y una
quien hidroliza generando C3a y C3b, el C3a difunde al
segunda etapa en común con el resto de las otras vías
suero (con actividad de anafilotoxina) y C3b se ancla a la
donde intervienen: C5 - C6 - C7 - C8 y C9.
membrana del microorganismo junto a C4b-C2a,
generando C4b-C2a-C3b, complejo que recibe el
a) Primera etapa. La activación de la vía clásica
nombre de "Convertasa de C5" por que éste compuesto
comienza por la unión del complemento C1 que circula
hidroliza al C5 en C5a y C5b. El C5a difunde al suero
normalmente en la sangre a inmunocomplejos:
como anafilotoxina activador de neutrófilos y el C5b se
anticuerpos unidos a antígenos presentes en una infección
une a la membrana (es un componente clave para la
(esta ruta como ya dijimos, es posterior a las dos
formación del "sistema de ataque" a la membrana
anteriores, pertenece a la inmunidad específica, ya que,
celular).
tiene que esperar a que se hayan producido anticuerpos).
El complemento C1 está conformada de 3
RECUADRO N° 4: El C3b…
subunidades globulares (C1q, C1r y C1s) cada subunidad Cabe destacar que no toda el C3b generado participa en el
tiene forma de “Y”, estas “Y” se une a la porción Fc de la complemento, también hay una fracción que difunde hacia el
inmunoglobulina (IgG, IgM, etc.) que se encuentra unida plasma para desarrollar actividad de opsonización.
al antígeno (bacteria). Producto de esta unión se forma
serin-proteasa encargada de la rotura catalítica del C4
(que también se encuentra en el lugar), produciendo dos b) Segunda etapa. A partir de esta etapa los
fragmentos del complemento, uno llamado C4a que se acontecimientos que ocurren en la formación del
difunde al medio y el otro denominado C4b, se une complejo de ataque a la membrana coinciden en las tres
covalentemente a la membrana celular o complejo vías.
inmune. Comienza cuando el C5b se adhiere a la
membrana, a este se le une el C6, luego el C7, el C8 y
RECUADRO N° 3: Sobre las IgG e IgM… finalmente varias moléculas de C9, éstos, se activan
La Ig G solo posee un sitio de adhesión por partícula, por tal según la secuencia numérica, sin requerir ruptura previa,
motivo se requieren como mínimo dos moléculas Ig G.
formando entre todas el complejo de ataque a la
La Ig M por su parte, expone más sitios de adhesión cuando se
encuentra en forma de 'grapa'. Esto explica el porqué la Ig M es membrana (C5b678poli9), que son miles de canales
más propensa a activar el sistema. huecos que atraviesan la membrana microbiana de lado a
lado, con unos 10 nm de diámetro interno, por los que
ingresan iones, moléculas, agua y electrolitos
Las moléculas de C4b adheridas no tienen produciendo un notable desequilibrio osmótico; en los
acción enzimática, pero sirve como sitio de unión para la microorganismo Gram-negativos (se inserta en la
próxima proteína de la secuencia, que es el C2. Así se membrana externa) y en los Gram-positivos se inserta en
forma el complejo C4bC2 en la membrana del patógeno, la membrana citoplásmica) provocando en muchos de los
este complejo al unirse al C1s (serinproteasa que se casos el estallido final y muerte del microorganismo.
encuentra en el lugar formando parte del C1, actua sobre
44
Figura N° 54. Activación del complemento por la ruta clásica. Primera etapa (Fuente: Basualdo, 2006).
45
Figura N° 55. Activación del complemento por la ruta clásica.: Segunda etapa (Fuente: Basualdo, 2006).
2. Ruta alternativa C3b), el C3a (tiene actividad anafilotoxina que se difunde

En el mecanismo alternativo de la activación del en el medio) el C3b se une al C3bBb para formar C3bBb-
complemento, dos proteínas se designan como “factores” C3b (convertasa del C5), el mismo que rompe al C5 en
y a cada una se le ha asignado una letra: “B” y “D”. Una C5a y C5b, (el C5a es una anafilotoxina que junto con la
tercera proteína se denomina properdina y puede C3a son los activadores de la fagocitosis). El C5b se
abreviarse “P”. adhiere a la membrana y se une al C6, este al C7, al C8 y
C9 para formar el complejo de ataque a la membrana
Para la activación de esta ruta es necesaria la similar al de la vía clásica.
presencia de C3b que es una proteína del complemento
que se va formando continuamente en el suero sanguíneo
a partir de la hidrólisis del C3 por acción del agua, pero
como este C3b está en la fase fluida, la mayor parte de él,
se hidroliza y se inactiva. Ahora bien si por casualidad
alguna molécula de C3b se topa con una superficie no
propia (p.ej., la membrana de una bacteria,
lipopolisacáridos bacterianos, polisacárido, endotoxinas,
etc.), se une covalentemente a ella, iniciándose un
circuito de ampliación que va a conducir a que muchas
moléculas de C3b se anclen en la membrana bacteriana,
de esta manera se activa y se inicia la ruta alternativa del
complemento.
El C3b recién unido a la membrana microbiana Figura N°56. Ruta alternativa para la activación del complemento
sirve para que espontáneamente se una a él, el factor B. (Fuente: Basualdo, 2006).
El resultante complejo C3bB es a su vez sustrato del
factor D, que es una serin-proteasa (enzima), la cual 3. Ruta de las lectinas
rompe el B unido, generando los productos Ba y Bb, el Dentro de la familia de las lectinas, se encuentra
primero difunde hacia el plasma y el segundo queda la proteína LUM (lectina de unión a manosa), presente en
anclado en el complejo, formando C3bBb. el plasma sanguíneo (es producida por el hígado), ésta
El complejo C3bBb es una convertasa de C3. proteína es capaz de unirse a un amplio espectro de
Para que funcione esta convertasa, requiere de la unión al hidratos de carbono, pudiendo ser: manosa, glucosa, N-
factor P o properdina (que estabiliza la reacción hasta acetilglucosamina o N-acetilmanosamina, otros
unos 30 minutos), este complejo convierte el C3 (a C3a y polisacáridos, etc. Estos hidratos de carbono se
46
encuentran presentes con mucha frecuencia en las como el C1ihn que inhibe al C1 y otras, estos al adherirse
superficies celulares de varios microorganismos. a la membrana celular neutralizan la formación del C3
La ruta de las lectinas comienza con la unión de convertasa de esta manera se evita la formación del C3b
LUM a los compuestos químicos de la membrana y demás complejos enzimáticos.
bacteriana mencionadas, lo cual desencadena la
activación de proteasas asociadas a LUM llamadas Fagocitosis
MASP (proteasas asociadas a membrana); Todo este La fagocitosis es un mecanismo importante de la
complejo es similar al componente C1 de la vía clásica y inmunidad innata. Una vez que el germen patógeno ha
funciona de igual forma, es decir, actúa rompiendo al C4 penetrado más allá de la barrera epitelial y mucosa, la
y C2 respectivamente para formar el C4bC2a que es la primera célula defensiva que lo detecta suele ser un
convertasa de C3. A partir de aquí se desarrolla la vía tal macrófago tisular quien reconoce a las bacterias o
como ocurre en la vía clásica con la formación del moléculas asociados a patógenos (lipopolisacárido,
complejo de ataque a la membrana. peptidoglucano, ácido lipoteicoico, polisacáridos
microbianos ácidos nucleicos bacterianos, etc.) mediante
sus receptores (Rc), como algo no propio y se activan
VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL COMPLEMENTO
para destruirlos por fagocitosis.
Vía CLÁSICA Vía de LECTINAS Vía ALTERNA La primera etapa de la fagocitosis necesita el
Clq acoplamiento de los microorganismos a la superficie
LUM C3b
MASP
rugosa de la membrana celular leucocitario. Algunas
Clr
Cls
B bacterias se adhieren con facilidad a la membrana celular
C4,
D y son fagocitadas rápidamente, mientras que otros al no
C2 P adherirse se dificulta la fagocitosis. Si el
C3 microorganismo está cubierto por anticuerpos
específicos llamadas opsoninas (que no son más que la
C5 acción del complemento C3b anteriormente
C6
C7 explicado), la fagocitosis se hace más eficiente. Una vez
C8 que se ha comido al microorganismo, la membrana
C9
celular que rodea al microorganismo fagocitado se
COMPLEJO DE ATAQUE A LA MEMBRANA fusiona para formar una vacuola intracelular, esta vacuola
se llama fagosoma; el fagosoma después se fusiona con
los lisosomas leucocitario (bolsas que contienen enzimas
Figura Nº 57. Vías o rutas de activación del complemento hidrolíticas: proteasas, nucleasas, lipasas, etc. que derivan
(Fuente: Giordano, 2006).
del aparato de Golgi), estos liberan sus enzimas
digestivas en el fagosoma, destruyéndolo rápidamente al
Regulación del Sistema del Complemento. Se ha dicho
microorganismo, degradándolo a partículas de material
con insistencia que el Sistema del Complemento resulta
orgánico (péptidos, aminoácidos, nucleótidos y azúcares),
sumamente dañino para aquellas células sobre las que
que finalmente son eliminados de la célula por exocitosis.
actúa. Es necesario evitar que su acción se propague más
allá de donde se necesita. Por tal motivo, éste mecanismo
se encuentra sumamente regulado.
Una de la principales formas de su regulación es
que la membrana de las células tiene unos receptores para
proteínas reguladoras de la activación del complemento,
Fig. 58. Reconocimiento del microorganismo y fagocitosis por los macrófagos (Fuente: Giordano, 2006).
La destrucción del microorganismo en los 1.- Mecanismos dependientes del oxígeno.- Por este
fagosomas se produce por dos tipos de mecanismos: mecanismo, se activa una ruta metabólica (hexosa
monofosfato que produce mucho NADH) que consume
47
grandes cantidades de oxígeno, lo que a su vez produce Dentro este mismo mecanismo, podemos mencionar la
grandes cantidades de substancias toxicas intervención de la enzima óxido nítrico-sintetasa, que
antimicrobianas dentro el fagosoma, como el anión combina el oxígeno molecular con el nitrógeno guanidino
superóxido (O2) es tóxico por sí mismo, el H2O2, y el de la L-arginina presentes en el fagocito, para generar
radical oxidrilo OH. Estas substancias al unirse con la óxido nítrico, que también es tóxico para bacterias y
mieloperoxidasa del lisosoma, en presencia de I y Cl células tumorales.
producen compuestos halogenados muy tóxicos como el 2.- Mecanismos independientes del oxígeno.- La
ácido hipocloroso (ClOH), e hipoiodosos (IOH) que presencia de enzimas como la lizosima, proteasas y otros
provocan la destrucción de las bacterias y virus. actúan como bactericidas o bacteriostáticos.
Fig. Nº 59. Destrucción del microorganismo por mecanismos dependientes e independientes del oxígeno (Fuente: Giordano, 2006).
Acción de las citoquinas liberadas principalmente las relacionadas con el aumento de la

Al engullir y procesar al patógeno, el macrófago expresión de moléculas de adhesión, extravasación
se activa y libera varias citoquinas: IL-1 (interleuquina- leucocitaria, reclutamiento de neutrófilos y moléculas del
1), IL-6, TNF-a (factor de necrosis tumoral-alfa), IL-8, complemento e inmunoglobulinas al foco de infección;
IL-12 y IL18, que son responsables de muchas de las además de activar a las células NK.
reacciones localizadas y sistémicas de la inmunidad,
48
Fig. Nº 60. Acción de las citoquinas. (Fuente: Giordano, 2006).
a) Aumento de expresión de moléculas de adhesión.- citoquinas quimioatrayentes (IL-8 y C5a) migran al lugar
Los leucocitos que circulan la sangre interactuando de de la infección.
modo muy débil con las células endoteliales; cuando los c) Aumento de la permeabilidad.- Por vasodilatación
macrófagos; secretan sus citoquinas (IL-1, IL-6 y TNFa), existe permeabilidad capilar lo que permite la entrada al
estas sustancias hacen que aumente la expresión de las tejido de moléculas del complemento, PMN,
moléculas de adhesión del endotelio, como de los inmunoglobulinas y otras proteínas séricas.
leucocitos, primero los leucocitos expresan sus integrinas
(glucoproteinas de membrana) que se adhieren a los d) Drenaje incrementado a los ganglios linfáticos.- El
ligando de integrinas del endotelio y luego se adhieren endotelio de los ganglio linfáticos cercanos a la
las selectinas del endotelio con los ligandos de selectinas infección, también sufren algunos de estos cambios, lo
de los leucocitos, lo que hace que los leucocitos vayan que facilita el pasaje de los macrófagos de la infección a
rodando de una célula a otra célula endotelial lentamente los ganglios linfáticos regionales, que es donde se va a
iniciar la respuesta inmune específica.
b) Extravasación leucocitaria.- El contacto específico e) Coagulación sanguínea local.- Las células
entre los leucocitos y células endoteliales a través de las endoteliales son inducidas a expresar moléculas que
moléculas de adhesión celular (CAM) de estas últimas, desencadenan la cascada enzimática de coagulación
permite a los leucocitos pasar entre las células sanguínea, de modo que los capilares quedan ocluidos.
endoteliales (proceso llamado extravasación o Esto es importante como mecanismo para evitar que el
diapédesis), Luego los neutrófilos producto de las microorganismo entre a circulación y se disemine a todo
el cuerpo.
49
Figura Nº 61. Acción de las moléculas de adhesión del endotelio y de leucocitos, que permitirán a los polimorfonucleares salir de los capilares hacia el
foco de infección (Fuente: Prats, 2012).
f) Activación de las células Natural Killer NK.- una ausencia de señal procedente del otro receptor del
Recordemos que estas células, son un tipo de linfocitos NK, el LY-49.
granulares grandes (LGG). El mecanismo citotoxico de El receptor LY-49 de la célula NK cuando se
las células NK es parecido al de los linfocitos citolíticos une a una célula normal existe una interacción entre este
(CTL) de la inmunidad específica, pero a diferencia de receptor NK y el MHC-1 de la célula normal, que hace
ellos carecen de especificidad y de memoria, y no están que envié una señal al NKR-P1para que detenga su
restringidos por el MHC (no requieren previa mecanismo matador, en cambio cuando la célula está
sensibilización). Poseen un papel importante en los enferma o infectada presenta una baja expresión de
primeros días de una infección, al eliminar células MHC-I por lo que no existe la señal para detener la
infectadas con virus y otros microorganismos de acción matadora del NK produciéndose en consecuencia
multiplicación intracelular a los que no les pueden la acción lítica.
alcanzar los sistemas inespecíficos de defensa descriptos La actividad matadora del NK se activa por IFN-
hasta ahora. Constituye pues un mecanismo efector a (interferon-alfa) e IFN-b (liberado por muchas células
celular temprano, antes de que lleguen los linfocitos Tc enfermas al inicio de la infección), y por IL-12, lo que
(citotóxicos) y especialmente preparado frente a ciertos hace que la NK secrete TNF (factor de necrosis tumoral),
microorganismos que usan la estrategia de inducir un NKCF (factor citotóxico natural asesino) y distintas
descenso del nivel de MHC-I de la célula parasitada. perforinas y granzimas que penetran el interior de la
Recientemente se ha propuesto un modelo de dos célula e inducen su destrucción, o inhiben la
receptores para explicar como reconocen las células NK a multiplicación de microorganismos intracelulares, hasta
las células infectadas por virus o tumorales. Se piensa que lleguen las células citotóxicos (Tc).
que las NK reciben señales de dos receptores de modo 7.- Otros.- Además de las citoquinas mencionadas
que les permite distinguir las células sanas de las debemos recordar la acción anafilotóxica de las proteínas
enfermas. del complemento: C3a y C5a, que estimulan la
Según este modelo, el receptor NKR-P1 de la desgranulación de los mastocitos y de los basófilos con
célula NK se une a oligosacáridos de glucoproteina de la liberación de histamina, provocando la vasodilatación
superficie de la célula enferma, que presenta y aumento de la permeabilidad de los capilares
glucosilaciones anómalas (formación de compuestos sanguíneos, y de factores quimiotácticos para atraer
intermedios anormales en el metabolismo de la glucosa). neutrófilos y eosinófilos, además, las anafilotoxinas
En principio, esta señal le indica a la NK que debe inducen a los mastocitos a eliminar prostaglandinas y
prepararse para matar a la célula con la que ha leucotrienos, substancias que producen dolor,
contactado, pero para ello debe ocurrir simultáneamente quimiotaxis y vasodilatación.
50
a) Proteína C-reactiva.- Esta proteína se une al fosforil-

colina (polisacárido C), que es un componente muy
habitual de las envolturas microbianas, con lo que se
opsoniza la bacteria (esto lo hace susceptible a ser
reconocido por los leucocitos) facilitando la fagocitosis.
Esta unión activa la cascada del complemento en la
ruta alternativa.
b) Proteína de unión a mananos (MBP).- Es una

lectina que se une a la manosa que envuelve a muchas
bacterias. Esta proteína participa en la activación del
complemento por la ruta de las lectinas.
Fig. Nº 62. El C3a y C5a estimulan la degranulación de los mastocitos y c) Fibrinógeno.- Substancia que participa en la
basófilos para que liberen histamina (Fuente: Giordano, 2006).
formación de fibrina, componente que permite el
atrapamiento de microorganismos, facilitando su
Respuestas sistémicas a las citoquinas en la fagocitosis y evitando su diseminación.
fase aguda La IL-1, actúa en el hipotálamo aumentando la
Una de las respuestas sistémicas más temperatura corporal como consecuencia se inhibe el
importantes es la llamada respuesta de fase aguda, se crecimiento bacteriano, incrementa la actividad
debe sobre todo al efecto de la IL-6 del macrófago sobre bactericida de neutrófilos y macrófagos, produce
los hepatocitos del hígado, que hace que el hígado anorexia que minimiza la biodisponibilidad de glucosa
produzca grandes cantidades de proteínas de fase aguda; para los microbios, y somnolencia, que disminuye la
como la proteína C reactiva, proteínas de unión a la demanda corporal del individuo infectado
manosa y el fibrinógeno
Fig. Nº 63. Proteínas de la fase aguda producidas por hepatocitos (Fuente: Giordano, 2006).
51
Resultados de los procesos defensivos innatos puede acelerar a la curación de la lesión, un grano o
Después de varias horas o días de la respuesta forúnculo es un ejemplo de absceso en la piel, si el
inflamatoria, el tejido estará rojo, caliente, edematoso y absceso está localizado en los tejidos profundos y no se
doloroso debido al incremento de sangre y plasma en el puede eliminar el exudado inflamatorio, la cicatrización
área. En este medio, los polimorfonucleares neutrófilos es más lenta. En este estado frecuentemente la infección
se unen en gran número y fagocitan y destruyen muchos se encuentra rodeada de una membrana aislante que
microbios. El plasma que fluye en el área contiene impide la acción de los mecanismos de defensa del
factores de coagulación, entre otros fibrinógeno el cual huésped; al mismo tiempo, puede estar en estado de
comienza a formar una red de hebras de fibrina alrededor inactividad metabólica y por eso los antibióticos no lo
del área de la lesión. La fibrina y los PMN continúan afectan; con frecuencia se necesita drenaje quirúrgico
acumulándose por varios días y se ajustan con otras para limpiar y desbridar el pus. La última fase de la
células para formar una barrera alrededor del área de la respuesta inflamatoria es el desarrollo de células
lesión (barrera inflamatoria). El centro del área se reparadoras que se llaman fibroblastos, células largas que
convierte en un campo de batalla en el que un gran forman una pared de tejido cicatrizal alrededor de la
número de bacterias y PMN muertos empiezan a lesión y al centro de ella hasta llenar el orificio donde se
acumularse en los depósitos de los líquidos, esto se llama destruyen las células normales. Pueden pasar varias
exudado inflamatorio o más comúnmente, pus. Esta semanas desde el inicio de la respuesta hasta que ocurra
acumulación de pues por la barrera inflamatoria se la curación completa.
denomina absceso. A medida que el proceso inflamatorio La formación del tejido de cicatriz es
continua, se van acumulando mayor número de básicamente una respuesta beneficiosa; sin embargo, la
macrófagos para ayudar a la liberación del área afectada formación excesiva de tejido de cicatrización en los
haciendo una limpieza mediante fagocitosis. Si el absceso órganos vitales puede alterar su función, y por razones
se encuentra en la superficie de la piel, se puede romper estéticas una cicatriz exagerada no es deseable en áreas
la barrera inflamatoria y expulsar el pus. Este drenaje se expuestas. La respuesta inflamatoria se presenta en la
llama debridación. Si no se acompaña de lesión entre la mayoría de las lesiones y, si no hay infección microbiana,
barrera inflamatoria del absceso y los tejidos profundos, la curación ocurre sin la formación de pus.
Fig. Nº 64 Resultados de una inflamación (Fuente: Giordano, 2006).
52
INMUNIDAD ADQUIRIDA anticuerpos), y Antigenicidad, relacionada con la

capacidad de reaccionar con los anticuerpos formados.
Cuando la inmunidad innata no acaba con el Generalmente, estas cualidades (a y b) son
proceso infeccioso, y algunos microorganismos escapan a simultaneas en muchos antígenos. Pero es importante
la fagocitosis y lisis celular, el organismo para enfrentar a destacar que son relativamente independientes. Toda
estos invasores, presenta una barrera defensiva adicional, sustancia con capacidad de provocar una respuesta
aún más sofistificada que la anterior, consistente en un inmune (inmunogenicidad) posee antigenicidad. La
tipo de moléculas que se forman y funcionan como inversa no siempre es observada; hay sustancias con
“adaptadores flexibles” llamados anticuerpos, que se antigenicidad o especificidad antigénica, pero no poseen
unen por un lado a los fagocitos, y por el otro al inmunogenicidad. Las mismas son denominadas
microorganismo para neutralizarlos y destruirlos. haptenos (antígenos incompletos). Los haptenos,
En la inmunidad adquirida se observan dos tipos sustancia de bajo PM no son inmunogenos, pero tienen
de respuesta inmunológica frente a la agresión especificidad antigénica (es decir se unen al anticuerpo
microbiana: formado). Sin embargo si el hapteno se acopla a una
1.- Inmunidad específica humoral molécula mayor (transportador o carrier), estimula el
2.- Inmunidad específica celular. sistema inmune (adquiere inmunogenicidad) pero los
anticuerpos formados se fijan solo al hapteno, pues es él
quien porta la antigenicidad (es el determinante
antigénico).
INMUNIDAD ESPECÍFICA HUMORAL A manera de ejemplo podemos mencionar que
las bacterias, son antígenos muy complejos por estar
La inmunidad específica humoral se caracteriza formados por compuestos de elevado peso molecular de
principalmente por la formación de anticuerpos, y la naturaleza proteica y polisacárida. Las bacterias móviles
inmunidad específica celular por la destrucción del presentan antígenos H (flagelar) y antígenos 0
microorganismo; en estos dos procesos participan como (somáticos), otras bacterias como las Klebsiellas
principales actores los antígenos (microbios), las células presentan antígeno K (capsular). Las toxinas microbianas
presentadoras de antígenos (células dendríticas, los también se caracterizan por sus funciones antigénicas de
macrófagos y linfocitos B), y como activadores y carácter extracelular, así también los cilios, membrana,
productoras de anticuerpos: los linfocitos T y linfocitos B citoplasma y enzimas son antígenos intracelulares.
respectivamente. A continuación y para conocerlos mejor
haremos una descripción de cada uno de ellos y su
participación en el proceso.
Fig. N° 66. Antígenos de una bacteria (Fuente: Struthers, 2005).
Fig. N º65. Células presentadoras de antígenos

RECUADRO N° 5: Clasificación de los antígenos
Los antígenos se clasifican en dos grandes categorías. Primero,
1. Antígenos los Ag timodependientes (AgTD). Son los Ag que necesitan de
Se denominan antígenos (Ag) a toda sustancia la participación de los LTh para activar a los LB (y estos
extraña que al penetrar al organismo provoca una produzcan anticuerpos).
respuesta inmunológica que se manifiesta con la Segundo, los Ag timoindependientes (AgTI) constituidas por
estructuras moleculares que por sí solas pueden estimular la
formación de anticuerpos.
producción de Ac sin la colaboración de la células T.
No todas las sustancias pueden ser antígenos si no Los AgTD son los más abundantes en la naturaleza
solamente aquellas que poseen un peso molecular (PM) (ejemplo: proteínas). En su estructura molecular podemos
mayor a 10.000 daltons y químicamente deberán ser diferenciar zonas funcionalmente diversificadas. Algunas se
proteínas, polipéptidos, polisacáridos, ácidos nucleicos, denominan determinantes inmunogénicos y son las
así como también venenos de animales, vegetales, responsables de estimular el sistema inmune (el determinante
bacterias, virus, etc. inmunogénico, es el portador o carrier de los haptenos). En otro
En base a esta definición, un Ag “completo” lugar de la molécula antigénica, encontramos zonas
debe tener dos cualidades: inmunogenicidad, se refiere a denominadas determinantes antigénicas, epítopes o
determinantes hapténicos. Son pequeñas porciones moleculares
la capacidad de provocar una respuesta inmune (formar
del Ag, con la estructura tridimensional adecuada para fijar
53
específicamente un Ac determinado. las encuentra, sobre todo en bazo y en los nódulos

Ambas zonas (determinantes inmunogénicas y linfáticos. En la piel se los denomina células de
antigénicas) son necesarias para una respuesta efectiva a los Langerhans y constituyen entre el 3 y el 8% de las células
AgTD, ya que el receptor del LB es una Ig que reconoce dérmicas.
epítopes nativos sobre proteínas
Las características más importantes de los AgTD son:

3. Macrófagos.- Los monocitos (20 micras de tamaño),
- Necesitan ser procesados por los macrófagos para luego de un período de tiempo (8 a 24 h) en el torrente
poder estimular el sistema. sanguíneo, ingresan en los tejidos y se convierten en
- Deben ser adecuadamente presentados por las células macrófagos. Los macrófagos pueden ser residentes fijos
presentadoras de Ag. en tejidos o libres; como residentes cumplen misiones
- Es necesaria la participación de los LTh para que los concretas en cada uno de los tejidos, pudiendo recibir, en
LB produzcan Ac su caso, denominaciones diferentes según su localización.
- Dejan memoria inmunológica Por ejemplo: células de Kupffer en el hígado, histiocitos
- Son de estructura compleja en el tejido conectivo, células de la microglia en el
- Son fácilmente metabolizados por las células que los
fagocitan
cerebro, osteoclastos en el hueso, macrófagos alveolares
- Es difícil que induzcan tolerancia inmunológica en los pulmones. Cuando están libres se encuentran
- La respuesta del sistema inmune no está directamente estratégicamente situados para atrapar material extraño
relacionada con la cantidad de Ag que penetra en el en órganos linfoides secundarios: como el bazo y
organismo ganglios linfáticos. Entre algunas de sus características
- Estimula una respuesta de Ac mediada, primero por podemos mencionar que son células de vida más larga
IgM y luego por IgG o IgA o IgE. que los neutrófilos (meses e incluso años), posee un
- Por lo tanto, provocan respuestas inmunes fuertes y núcleo arriñonado, abundante retículo endoplásmico
duraderas. rugoso y gran número de mitocondrias en su citoplasma.
Los AgTI poseen una capacidad de estimular los LB sin la
Están especialmente adaptados a luchar contra virus,
intervención de los LTh No son abundantes o frecuentes como bacterias y protozoos intracelulares mediante dos
los anteriores. Son estructuralmente simples, suelen estar funciones principales: La fagocitosis y la producción de
formados por unidades repetitivas a lo largo de la molécula citoquinas. Estas células presentan en su membrana
(ej., polisacáridos del neumococo, dextrano, lipopolisacáridos plasmática diferentes glicoproteínas que actúan como
bacterianos, etc.) receptores, las mismas facilitan su función e interacción
Las características más importantes de los AgTI son: con otras células, participando en el reconocimiento,
- Generalmente no necesitan ser procesados por los presentación de antígenos y función efectora.
macrófagos
- Estimulan directamente al LB. No son presentados y
RECUADRO N° 6: El sistema reticuloendotelial (SER).
no requieren la colaboración de LTh
Es el conjunto de células mononucleares con actividad
- No deja memoria inmunológica prolongada
fagocítica (macrófagos (fijos y móviles), monocitos y otros)
- Son de estructuras más simples que los AgTD
presentes en la sangre, células endoteliales que recubren los
- Son metabolizados con dificultad por las células
sinusoides de órganos como ganglios linfáticos, hígado, bazo,
fagocíticas.
médula ósea, pulmones y otros, que tienen como función
- Inducen fácilmente tolerancia inmunológica
- La respuesta del sistema inmune está relacionada principal la eliminación de partículas y microorganismos
directamente con la cantidad de Ag que penetra en el presentes en estos tejidos.
organismo
- Estimula una respuesta de Ac mediada por IgM o 4. Linfocitos.- Leucocitos pequeños (10 a 20 um de
IgG. tamaño), con una morfología característica, poseen un
- Algunos producen una estimulación policlonal del núcleo prominente (aprox. 90% del volumen celular)
sistema LB rodeado de un fino halo citoplasmático, representan el
- Provocan por lo tanto, respuestas inmunes débiles y 20-30% de los leucocitos circulantes. Se distribuyen
cortas. ampliamente por todo el organismo, adquieren su
competencia inmunológica en los órganos linfoides
primarios (Timo y Médula ósea) y la respuesta frente a la
2. Células dendríticas.- Son células presentadoras de estimulación de un antígeno se desencadena
antígeno por excelencia. Tienen una estructura fundamentalmente en los órganos linfoides secundarios
pleomórfica, podríamos decir que su cuerpo es estrellado (bazo, ganglio linfático, etc.). Son células poco móviles y
(del cuerpo celular salen prolongaciones alargadas como de longevidad variable (desde días hasta meses o años).
los de las células nerviosas) y de gran tamaño (80 um en Según su desarrollo y función, podemos clasificar los
algunos casos). Forman el l-3% de las células linfocitos en dos grupos importantes: LT y LB.
mononucleares circulantes. No son células fagocíticas,
pero fijan el antígeno en su superficie (presentan varios
receptores para los antígenos). Las células dendríticas
desde la sangre migran a los órganos linfoides donde se
54
algunos casos puede ser Ig D y excepcionalmente IgG).

Estos receptores, se encuentran distribuidos al azar en la
superficie del LB y son las encargadas de fijar el antígeno
específico, luego del estímulo y la colaboración de LTh,
el LB activado se diferencia en célula plasmática,
productora de Ac de la misma especificidad de los que
actuaron como receptores del Ag.
En cada individuo existen cientos de miles o
millones de tipos de linfocitos B, cada uno preparado
para originar un clon productor del correspondiente
Fig. Nº 67. Estructura de un linfocito (Fuente: Basualdo, 2006)
anticuerpo.
Dentro de la población de LT, Hay células con
En ausencia de estímulo antigénico, estos
diferentes funciones. En algunos casos pueden actuar
linfocitos B maduros vírgenes mueren por apoptosis, al
como efectores directos, en otros, por intermedio de
cabo de unos pocos días. Si, en cambio, se une por su
secreciones, regulan el funcionamiento o la respuesta de
BCR al Ag complementario específico (y con la ayuda de
otras células. Los linfocitos T incluyen dos grupos
señales de macrófagos y células T), se pone en marcha la
principales los LT CD4 (cooperadores, helper, Th) y los
selección y proliferación clonal de dos Subpoblaciones
LT CD8 (citolíticos o citotóxicos).
de linfocitos B (al cabo de 4-5 días): una de ellas, son las
células plasmáticas secretoras de Ac, que secretan. IgM,
a) Linfocitos cooperadores (LTh).- Estos linfocitos son
IgG, IgA, IgE, e IgD (por esto tendremos diferentes
identificables por su proteína de membrana CD4 (LT
poblaciones de células plasmáticas según el tipo de Ac
CD4), funcionan ayudando o colaborando con otras
que secreten). Constituyen aproximadamente el 90 al
células. Esta actividad la llevan a cabo secretando
95% de los LB. Y otra de linfocitos B de memoria
sustancias denominadas linfocinas o citocinas. Estas
(cebadas). Tienen como característica peculiar poseer en
sustancias al unirse a receptores de membrana de otros
su membrana plasmática una gran cantidad de IgD y
linfocitos, producen la estimulación de estos últimos. Su
menor número de IgM, su función es similar a los LTm.
accionar se efectúa fundamentalmente sobre LB para que
luego produzcan anticuerpos, sobre macrófagos
incrementando su eficacia para destruir los
microorganismos que han fagocitado y activando los
linfocitos T citotóxicos.
Los LT CD4 cuando son activados se diferencian en
subgrupos: Th1, Th2, Th17 y Tfh (Tfollicular helper),
este último es el principal activador del LB.
Fenotípicamente son iguales: LTh1 (inflamatorios o de
inmunidad celular: activan macrófagos) y LTh2 (de
inmunidad humoral o colaboradores: mejoran la
producción de Ig).
También dentro este grupo se encuentran los
Fig. N° 68. Tipos de linfocito B : LB plasmáticas y Linfocitos B de
linfocitos de memoria (LTm). Estos linfocitos al ser memoria (Fuente: Prats, 2012).
activados expresan en su membrana celular la proteína
CDw29. Estas células se instalan en los órganos linfoides Transporte, presentación del antígeno y
secundarios. Cuando el Ag que las activó vuelve a
penetrar en el organismo (segunda exposición), estos activación de linfocitos
LTm inmediatamente desencadenan la respuesta inmune Los microorganismos (Ag) que escaparon de la
que será más rápida y prolongada. inmunidad innata o inespecífica llegan al torrente
sanguíneo, vasos linfáticos y otros tejidos, ahí son
b) Linfocitos citotóxicos.- La acción de los LT CD8 captados por las células presentadoras de antígenos, y es
consiste en destruir las células parenquimatosas de los donde comienza la inmunidad adquirida humoral, cuyo
tejidos y órganos (hígado, riñón, etc.) que están fin es la formación de anticuerpos. Esta etapa presenta las
infectadas por parásitos intracelulares (como los virus, siguientes fases:
clamidias, Rickettsias y esporozoos). Fase 1. El antígeno nativo puede viajar por si solo o
transportado, desde el lugar de la infección, hasta un
Los linfocitos B.- Constituyen del 5 al 15% de los órgano linfoide secundario por una célula presentadora
linfocitos circulantes, reconocen al antígeno en forma de antígenos:
soluble, por medio de sus receptores de membrana Por ejemplo: Cuando las células de Langerhans
(BCR), que son inmunoglobulinas M (mIg), en cada de la piel capta un antígeno (Ag), viaja por los vasos
linfocito hay unas 150.000 moléculas de mIg (que en linfáticos como células “a vela”, y al llegar al ganglio
linfático se convierten en células dendríticas
55
interdigitantes. Allí presentan el antígeno a los linfocitos macrófagos en el lugar (IL-1, Il-6), y sobre todo por el
Th vírgenes, para que se inicie la respuesta inmune. contacto entre la molécula B7 de la célula
En el caso de los macrófagos, luego de fagocitar presentadora, con el CD28 (glucoproteina) del
un antígeno determinado, ponen en marcha una serie de linfocito, hace que los linfocitos eliminen la IL-2
mecanismos enzimáticos que degradan al antígeno. producida y expresen su receptor para esa IL-2. La unión
Algunas pequeñas porciones de la molécula degradada, de la IL-2 y el receptor además del contacto
denominadas determinantes o epitopes, son transportadas intermolecular, provoca la activación y proliferación del
a los ganglios linfáticos y presentados en su membrana linfocito Th, de esta manera se produce grandes
plasmática a los linfocitos Th-1 cantidades de linfocitos activados: Th-1, Th2, Th17 y
La activación se inicia cuando el linfocito Th Tfh. El linfocito Th-1, junto a su IL-2 y el IFN-g
interacciona, a través de su complejo TCR-CD3 (receptor eliminada, activan a los macrófagos y Linfocitos T
del linfocito) con el antígeno peptídico (epitopo), citotóxicos, para que los primeros destruyan a los
presentado por el macrófago o célula dendrítica dentro el antígenos más eficazmente y los segundos busquen las
surco del Complejo Principal de Histocompatibilidad tipo células del organismo que pueden estar expresando
II (MHC-II) presente en la membrana plasmática de estas antígenos en su superficie con objeto también de
células (las proteínas de MHC-II están limitadas a las destruirlas.
células del sistema inmunitario, al contrario de lo que
ocurre con las proteínas MHC-I, que están ampliamente Al mismo tiempo los otros linfocitos (Th-2.
distribuidas entre todas las células del organismo). Esta Tfh), al interaccionar con células B que presenten el
interacción inicial produce una cascada de mismo epitopo anclado en el mismo tipo de MHC-II.
acontecimientos bioquímicos en el citoplasma del (Como la presentada anteriormente por el macrófago). Se
linfocito, con la acción de algunas enzimas como produce la segunda fase del proceso. ¿Cómo ocurre esto?
quinasas y fosfatasas que producen IL-2. Además la Lo sabremos a continuación.
presencia de otras citoquinas secretadas por los
Fig. Nº 69. Activación de un linfocito Th-1(Fuente: Giordano 2006).
56
Fase 2. La otra rama de la respuesta inmunitaria da lugar estructuras denominadas “parches”. Luego los parches
a la producción de anticuerpos, este proceso comienza (conglomerados de IgM que fijaron Ag) migran por la
con la intervención de los linfocitos B, linfocitos Th-2 y superficie celular hacia un lugar determinado de la
otros. membrana, forman un casquete la que posteriormente es
Aunque el linfocito B no es una célula internalizado al citoplasma por endocitosis. Este proceso
fagocítica, puede internalizar antígenos tan grandes como se denomina “coronamiento”, luego el antígeno es
el tamaño de ciertos virus. Cuando fijan el Ag adecuado degradado hasta péptido y colocado en el surco de sus
(específico) mediante su receptor BCR lo acumula en moléculas MHC-II. Para presentarlo a los linfocitos Th-2.
Fig. Nº 70. Linfocito B internaliza un microorganismo para presentarlo al linfocito Th-2 (Fuente: Giordano, 2006).
Fase 3. Los linfocitos Th-2 activadas y proliferadas de la ocurre a las 12 horas del contacto inicial del Ag con la
fase 1 mediante su TCR (receptor) reconocen al péptido inmunoglobulina de membrana: mIg). Entonces el
enclavado en el MHC-II, en la superficie del linfocito B linfocito B, que hasta ese momento estaba en reposo
(ya que este péptido presenta las mismas características (Go), puede entrar por fin en el ciclo celular (G1).
antigénicas que el péptido que fue presentado por los Estamos pues, ante una señal de competencia, que
macrófagos de la fase 1 al linfocito Th). En este caso el participa en la activación del linfocito B.
linfocito B está actuando como célula presentadora para Las citoquinas secretadas direccionalmente por
el Th-2 el linfocito Th-2, se concentran en bolsas distribuidas en
Tras este contacto inicial se forma el conjugado la zona de estrecho contacto intercelular. Cada citoquina
Linfocito Th-2: B, en el que ambas células dejan entre sí va a unirse a su receptor correspondiente situado en la
un estrecho espacio intercelular (unión entre TCR- superficie de la célula B, provocando una serie de
CD3+CD4 y MHC-II + antígeno del Linfocito B). respuestas en dicha célula: La IL-4 y IL-6 producida por
el linfocito Th-2 (junto con la IL-1 secretada por
Fase 4. Producto de esta unión, los linfocitos Th-2 macrófagos) actúan como señales de competencia
activadas excretan moléculas de CD40L y citoquinas (IL- (favorecen la transición Go a G1). Posteriormente, la
4), lo que provocará una serie de cambio en el linfocito misma IL-4 sirve ya como señal de progresión (que
B. Las moléculas CD40L que el linfocito Th-2 expresa favorece el avance del ciclo celular: G1 a S y M), con lo
en su superficie, se unen a las de CD40 del linfocito B que empieza la proliferación clonal. Otras citoquinas que
(que ya estaban preformadas). Esto provoca una señal colaboran en la proliferación son la Il-2. Luego para la
para que el linfocito B sintetice y ensamble en su diferenciación del linfocito B son necesarias la
membrana, receptores para diversas citoquinas (lo cual intervención de las IL-4, IL-5, IL-10 e IFN-g.
57
Fig. Nº 71. Activación del linfocito B (Fuente: Giodano. 2006)
En esta diferenciación se producen dos subclones de linfocitos B:

Uno de células plasmáticas secretoras de anticuerpos, y otro de células B de memoria.
Fig. Nº 72. Diferenciación del linfocito B en células plasmáticas y células de memoria (Fuentre: Giordano, 2006)
Las células B plasmáticas secretoras de Los anticuerpos que producen salen de los vasos
anticuerpos (plasmocitos), carecen de Ig de membrana, linfáticos entran a la circulación sanguínea, de donde son
tienen mayor proporción de citoplasma que las B de las distribuidos a todo el organismo.
que proceden, su retículo endoplásmico está muy Los linfocitos B cebadas de memoria, en cambio
desarrollado. Esto explica la gran cantidad de Ac pueden vivir en reposo (Go), durante largos periodos
secretados que producen; esos anticuerpos poseen la (más de 20 o 30 años). No son iguales que los linfocitos
misma especificidad antigénica que la de las mIg de la B vírgenes: expresan más isotipos en sus membranas
célula B original, es decir que cada célula plasmática (mIgM, mIgG, mIgA, mIgE), que además son de mayor
sintetiza solamente un determinado tipo de anticuerpo afinidad que la mIg original; esto implica que cuando se
para lo que fue formado o programado (pudiendo ser IgM exponen al Ag específico por segunda vez, dan una
o IgG, IgA, IgE o IgD). Las células plasmáticas no respuesta inmunitaria más rápida, más intensa, y con
circulan por la sangre ni por los vasos linfáticos, sino que mayor afinidad en la producción de anticuerpos (activan
se localizan en los órganos linfoides secundarios y los nuevamente la respuesta adaptativa a partir de la unión
lugares de la respuesta inmunológica. Viven unos pocos con el linfocitos Th activada).
días; al ser células en fase de diferenciación terminal, La formación de anticuerpos dura
carecen de capacidad mitótica y mueren por apoptosis. aproximadamente 10 semanas, luego desciende la
58
cantidad de anticuerpos, pero cuando nuevamente se dos livianas (L) unidas por puentes disulfuros
reintroduce el mismo antígeno luego de un periodo de adquiriendo una forma de “Y”; la secuencia de los
tiempo el organismo forma inmediatamente los mismos aminoácidos constituyentes de la parte superior de la “Y”
anticuerpos por el mecanismo anteriormente explicado. de las 4 cadenas polipeptídicas es variable y constituyen
Como producto de este proceso tenemos una los sitios reactivos específicos de los anticuerpos. Estos
variedad de anticuerpos dispuestos a reaccionar con los sitios se llaman la región variable, que se combinará sólo
antígenos por los que han sido formados. A continuación con un determinante antigénico que inició la síntesis de
nos referiremos brevemente sobre la estructura de los los anticuerpos (microorganismos). El resto de la
anticuerpos y sus acciones defensivas. molécula del anticuerpo (parte inferior de la “Y”), no
varía, y se llama región constante; es la parte que se une a
2. Anticuerpos los receptores celulares. Estos anticuerpos denominadas
Son inmunoglobulinas que se forman por la inmunoglobulinas (IgG, IgM, IgA, IgD e IgE), se
presencia de antígenos en el organismo. Estructuralmente encuentran en la circulación sanguínea, linfa, líquido
los anticuerpos están formados por 4 cadenas de sinovial, LCR, en las mucosas, etc. Donde contactan con
polipéptidos, dos de ellas se denominan pesadas (H) y los antígenos para dar inicio con la inmunidad específica.
Fig. Nº 73. Estructura y tipos de inmunoglobulinas (Fuente: Giordano, 2006).
Entre las principales acciones de los anticuerpos aumenta muchísimo la capacidad de fagocitosis por parte
se destacan los siguientes: de los PMN y macrófagos.
a) Inmunoglobulina G.- Constituye la mayor parte de
las Ig circulantes (85%) y es la que con mayor facilidad b) Inmunoglobulina M.- Es el anticuerpo de mayor
pasa a los tejidos del organismo. Es el principal Ac en las tamaño, constituye alrededor de 5 -10% del total de Ig
respuestas secundarias y opsonización y neutralización de circulantes. Su tiempo medio de vida es de 10 días. Esta
toxinas y virus extracelulares. Tiene una vida media de Ig es un pentámero (constituida de 5 “Y”), es el principal
15 a 30 días. Es la única que tiene la capacidad de anticuerpo contra los AgTI. Tiene la capacidad de unirse
atravesar la placenta; por lo tanto, es el Ac materno que a mayor cantidad de antígenos provocando aglutinación,
protege al feto durante el embarazo y los primeros meses lo que facilita la activación del complemento,
de vida. contribuyendo de esta manera a la lisis de la bacteria.
Cuando las regiones variables de la IgG fija un Ag (ej.,
bacteria), se produce una interacción entre la región c) Inmunoglobulina A.- Es de estructura monomérica y
constante de la IgG y los receptores Fc de los PMN o representa el 10% del total de Ig del suero. Con una vida
macrófagos. Entonces, se establece un puente entre el Ag media de 5 días. Se encuentran en las secreciones y
y las células fagocíticas, mediado por la IgG. Este mucosas: saliva, lágrimas, fluido nasal, tracto bronquial,
complejo Ag-Ac que se forma se denomina opsonización tracto genitourinario, tracto digestivo, leche materna y
(“preparar para comer”), mecanismo que facilita y calostro. Estos anticuerpos son capaces de pegarse a
59
epitopos de la superficie de virus y bacterias y de esta procesos inflamatorios como factor de inducción de la
manera evitan la adherencia a los tejidos seromucosos e desgranulación de los mastocitos. Está directamente
inhiben la colonización de estos microorganismos. relacionada con los procesos alérgicos desencadenados
por Ag especiales llamados alérgenos. Es el Ac
d) Inmunoglobulina E.- Constituye menos de 1% de los fundamental en la respuesta inmune a muchos parásitos.
Ac totales, su vida media es de 2 días aproximadamente. La IgE no fija el complemento.
Tan pronto es secretada por las células plasmáticas, la
IgE entra en circulación y rápidamente es fijada a e) Inmunoglobulina D.- representa el 0,2% de las
distintos tipos celulares. Es un Ac fundamentalmente inmunoglobulinas séricas. Vida media de hasta 3 días. Su
citofílico. Algunos macrófagos, neutrófilos, LT, y todos función es de constituir un receptor antigénico de los
los eosinófilos, mastocitos y basófilos, tienen receptores linfocitos B.
Fc para la IgE. Su función es muy importante en los
FUNCIONES DE LOS ANTICUERPOS
Fig. Nº 74. Acciones de los anticuerpos frente a los antígenos (Fuente: Giordano, 2006).
Acción de los anticuerpos en la inmunidad

humoral a) Neutralización directa de ciertas toxinas y virus por
Haciendo un resumen sobre la acción de los la unión del anticuerpo al antígeno para que luego los
anticuerpos podemos indicar que una vez que se ha macrófagos fagociten a los antígenos.
producido la artillería de anticuerpos, estos participaran
en forma directa en las siguientes acciones:
60
b) Opsonización del microbio, es decir el anticuerpo al tanto el Th-1 como el Tc virgen se activan
unirse por un lado al microbio y por el otro al fagocito, simultáneamente al unirse a la misma célula presentadora
facilita en gran medida la fagocitosis y destrucción del (no olvidemos que las células presentadoras de antígenos
microbio. exhiben MHC-I y MHC-II).
Algunas células T CD8 tras activarse, se
c) Activación del complemento por la ruta clásica para transforman en células Tc de memoria. Éstas tienen
formar el complejo de ataque a la membrana y producir menos requerimientos para su activación. De hecho,
lisis microbiana. como ya sabemos, al tener moléculas de adhesión celular
diferentes al correspondiente Tc vírgenes, pueden
encontrarse con el antígeno (epitopo peptídico en
INMUNIDAD ESPECÍFICA CELULAR contexto MHC-I) en tejidos extralinfoides. Por lo que
estas células, no requieren obligatoriamente la señal
La inmunidad específica celular se caracteriza coestimulatoria y tampoco la ayuda de Th, ya que al
por la acción destructora directa por parte de los unirse de modo específico a una célula propia infectada
linfocitos citotóxicos sobre las células del propio que le suministre el péptido adecuado, provoca que el Tc
organismo que se encuentran infectadas con de memoria produzca no sólo receptores de IL-2, sino
microorganismos intracelulares (virus, Mycobacterium y niveles adecuados de IL-2 capaces de auto-activarlas.
protozoos). Se conocen dos tipos de acciones de acuerdo De esta manera, se provoca la proliferación y
al linfocito participante: diferenciación del linfocito en reposo (virgen o de
memoria) hasta que se convierte en linfocito T
citolítico (CTL). Este CTL se caracteriza por poseer algo
1. Acción citotóxica por linfocitos Tc más de citoplasma que el Tc virgen, sobre todo por
Esta subpoblación de linfocitos se reconoce por poseer gránulos densos rodeados de membrana (llamados
la presencia en su membrana plasmática del CD8. Son granulosomas) y un aparato de Golgi.
células efectoras directas, su función se lleva a cabo por
contacto íntimo con la célula blanco a destruir. El b) Segunda etapa: Fase efectora de Ataque y
mecanismo de lisis de la célula blanco puede ser de dos destrucción de la célula diana.- caracterizada por las
tipos. Uno lento (horas), mediado por una serie de siguientes partes:
proteínas tóxicas, que en conjunto se denominan
linfotoxinas. Y uno rápido (minutos), por medio de
 Formación del conjugado.- Tras el
perforinas, proteínas que penetran en la membrana de la
reconocimiento específico, se produce una
célula blanco formando canales, con el posterior
interacción de gran avidez entre moléculas de
desequilibrio osmótico y la muerte celular.
LFA-1 (moléculas de adhesión) del CTL y
Esta acción comienza cuando los linfocitos T
moléculas de ICAM-1 (moléculas de adhesión)
CD8 que se encontraban en reposo, en presencia de
de la célula diana. Esta unión dura unos 5-10
células infectadas, enfermas o diana, se activan
minutos, durante los cuales las señales de la
diferenciándose en linfocitos T citotóxicos con capacidad
unión intercelular se transducen al interior del
destructora. Este proceso se produce en dos etapas:
CTL por medio de cascadas de protein-quinasas
y proteínfosfatasas, que conducen a la
a) Primera etapa.- Activación y diferenciación de los
activación de una serie de funciones del CTL.
linfocitos T citotóxicos. Los linfocitos Tc vírgenes (T
Se dice entonces que el linfocito queda
CD8) parece que se activan solamente en los órganos
programado para la lisis.
linfoides secundarios, únicos entornos en los que reciben
las señales necesarias. Requieren en realidad 3 señales:
 Golpe letal.- El citoesqueleto del CTL se
 La señal específica suministrada por la
reorganiza, de modo que tanto el aparato de
interacción entre su complejo TCR-CD3-CD8
Golgi como los granulosomas se sitúan en el
con el MHC-I de una célula presentadora
polo celular que queda en contacto con la célula
profesional infectada (p. ej., una célula
diana. Entonces, los gránulos se fusionan con la
dendrítica interdigitante).
membrana citoplásmica, produciéndose la
 La señal coestimulatoria suministrada por las exocitosis de su contenido al estrecho espacio
mismas células (unión entre B7 y CD28). intercelular (“beso de la muerte”).
 La presencia de interleucina IL-2.
Parece ser que el Tc virgen, expresa tras la  Disociación del CTL.- Antes de que se
interacción inicial con la célula infectada una pequeña produzca la lisis de la célula diana, el CTL se
cantidad de IL-2, lo que no es suficiente para activarlos. separa, probablemente ayudado por el hecho de
Al respecto, se sabe, que la IL-2 necesaria, proviene tanto que la LFA-1 vuelve al estado de baja afinidad.
de los linfocitos Th-1 cercana, como de la propia célula
Tc virgen, para su activación. De hecho, se piensa que
61
 Destrucción de la célula diana.- Parece ser que se forma un canal (con un diámetro de 5-20 nm)
la destrucción de la célula diana puede ocurrir que es permeable a iones, y que puede provocar
por varios mecanismos, predominando uno u la lisis osmótica de la célula diana. Pero no
otro en función de la naturaleza de la superficie siempre el efecto de la poliperforina es la lisis.
de la célula diana, y del grado de activación que En otros casos parece que el papel de los canales
haya alcanzado el linfocito CTL. Monómeros de es el de permitir la entrada de otras sustancias
porfirina contenida en los granulosomas son del granulosoma que inducen la apoptosis de
eliminadas por el CTL, estas al llegar a la la célula diana. De hecho se ha visto que pueden
membrana de la célula diana y en presencia de entrar fragmentinas (granzimas) que inducen la
Calcio se polimerizan para formar cilindros fragmentación del DNA en múltiplos de
huecos de poliperforina (con unas 20 unidades), nucleosomas lo que determina la muerte de la
que atraviesan la bicapa lipídica. De este modo célula diana.
Fig. Nº 75. Acción lítica de los linfocitos T citotóxicos (Fuente: Giordano, 2006).
2. Acción citotóxica por células asesinas (LK) fija en su superficie IgG, ésta le sirve como ancla para
Son responsables de la citotoxicidad celular unirse a los antígenos superficiales de la célula blanco
dependiente de anticuerpos (CCDA). Como es lógico, (células diana, helmintos y otros) y poder lisarlas. Este
estas células tienen receptores para IgG. Cuando el LK mecanismo no requiere complemento y no está limitado
por el MHC. Recordamos que los LK no pueden actuar
62
sin la presencia de anticuerpos, por lo tanto su acción es

posterior a la formación de los anticuerpos. Los c) Finalmente, dicha célula agresora libera por exocitosis
acontecimientos suelen tener lugar en las siguientes el contenido de sus gránulos, y/o secreta productos
fases: tóxicos, que tienden a matar a la célula enferma o
parásito.
a) Formación de inmunocomplejos (es decir, la célula De este modo, células que son propiamente del sistema
enferma o el helminto se recubre de anticuerpos). inmune natural, y por lo tanto son inespecíficas, pueden
llegar a destruir específicamente mediante el puente de
b) Una célula agresora adecuada (p.ej., eusinófilos), anticuerpos. De hecho actúan como células efectoras
interacciona con la célula enferma o el parásito a través finales del sistema humoral específico (es decir, pueden
de los anticuerpos que se engarzan con el receptor para llegar a ser los “brazos armados” o “verdugos” en una
Fc de la célula agresora. respuesta que se inició con la secreción de anticuerpos).
Fig. Nº 76. Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (Fuente: Giordano, 2006).
CAPITULO 7
63
AGENTES ANTIBACTERIANOS
Si los mecanismos anteriormente considerados, destrucción de las bacterias, logrando que tejidos y
no han podido contener la avalancha de la infección, fluidos corporales queden y se mantenga aséptico y libre
todavía podemos contar con un aliado más en la defensa de infección. Unos actúan contra bacterias grampositivas
del organismo, nos referimos a los denominados agentes y gramnegativas llamadas de amplio espectro, otros solo
antibacterianos. actúan sobre un grupo limitado de bacterias llamándose
En general, los agentes antibacterianos son todos de espectro reducido.
aquellos procedimientos químicos y físicos que impiden
el desarrollo de las bacterias. Dentro los procedimientos
químicos, se encuentra el uso de los antibióticos, los
desinfectantes y antisépticos y como procedimientos
físicos la esterilización, éste último, con propiedad de
destruir a todas las formas microbianas contenidos en
objetos y productos. Fig. N° 77. Muchos antibióticos son producidos por
microorganismos para inhibir o destruir otros
En este capítulo abordaremos el tema de los
microorganismos (Fuente: Centrón, 2006).
antibióticos, realizando algunas consideraciones
generales, sobre los principales antibióticos usados en el Breve reseña histórica
tratamiento de las infecciones bacterianas que son El descubrimiento de la penicilina por Alexander
solicitados a los laboratorios de bacteriología para la Fleming en 1928, y la aplicación práctica de este
realización de los antibiogramas. antibiótico en las infecciones bacterianas, demostradas
por Chain y Florey en 1940, dieron inicio a la era
ANTIBIÓTICOS moderna del antibiótico, que fue seguido por otros
descubrimientos como la estreptomicina por Waksman,
Definición la gramicidina por Dubos, la clortetraciclina por Duggar,
Antibiótico, es una sustancia química producida por etc. Si bien estos antibióticos eran realmente “fármacos
microorganismos (esencialmente bacterias y hongos), maravillosos” para curar infecciones en el momento de su
como ejemplo mencionar la vancomicina, que es introducción, no pasó mucho tiempo para que aparecieran
producida por la bacteria Streptomyces orientalis o la cepas bacterianas resistentes, debido al uso descontrolado
penicilina por el hongo Penicilium notatum), pero de los mismos, obligando en la actualidad a realizar
también, una gran variedad de antibióticos son pruebas de sensibilidad de las bacterias frente a los
producidas por síntesis química en laboratorio. antibióticos para su adecuado uso.
En general los antibióticos tienen dos tipos de
acciones frente a las bacterias: unas son bacteriostáticos y Clasificación
otros bactericidas: a) los bacteriostáticos inhiben el Los antibióticos se clasifican en varios grupos,
crecimiento bacteriano y b) los bactericidas provocan la cuyos representantes se exponen en el siguiente cuadro:
Cuadro N° 5. Familias de antimicrobianos sus grupos y ejemplos de los mismos.

FAMILIAS DE GRUPOS EJEMPLOS
ANTIMICROBIANOS
Betalactámicos: Penicilinas naturales -Penicilina G (bencilpenicilina), P.G. potásica,
Penicilinas P.G sódica. P.G procáinica, P.G benzatínica.
-Penicilina V (fenoximetilpenicilina), P.V benzatínica,
P.V potásica.
Resistentes a la Oxacilina, meticilina, nafcilina, cloxacilina,
penicilinasa dicloxacilina, floxacilina.
Aminopenicilinas Amoxicilina, ampicilina, bacampicilina, ciclacilina,
epicilina, hetacilina, metampicilina, pivampicilina
talampicilina.
Carboxipenicilinas Carbenicilina, ticarcilina.
Ureidopenicilina Piperacilina, mezlocilina, azlocilina.
Combinaciones con Amoxicilina + clavulanato potásico, Ticarcilina +
inhibidores de beta- Clavulanato potásico, amoxicilina + Sulbactam,
lactamasas. Ampicilina + Sulbactam, Piperacilina + Tazobactam,
Cefoperazona + Sulbactam.
64
Betalactámicos: Cefalosporinas de Cefalotina, cefalexina, cefazolina, cefadroxil,

Cefalosporinas primera generación cefaloridina, , cefapirina, cefatrizina, y cefradina.
Cefalosporinas de Cefaclor,cefamandol, cefonicid, ceforanide, cefotetan,
segunda generación cefoxitin,cefprozil,cefuroxime axetil,
Cefalosporinas de Cefotaxime, ceftriaxone, ceftazidime, cefixime,
tercera generación cefmetazol,cefodizima, cefoperazona, cefotiam,
cefpiramide, cefpodoxime, cefsulodin, , ceftibuten,
moxalactam.
Cefalosporinas de Cefepime, cefpirome y cepimide.
cuarta generación
Monobactámicos Aztreonam
Carbapenémicos Imipenem, meropenem, ertapenem
Aminoglucósidos Gentamicina, Amikacina, aminosidina, dibekacina,
estreptomicina, , isepamicina, kanamicina, neomicina,
netilmicina, paromomicina, sisomicina y tobramicina.
Tetraciclinas Tetraciclina, clortetraciclina, oxitetraciclina,
doxicilina, minocilina, metacilina.
Fenicoles Cloranfenicol y tianfenicol
Macrólidos Eritromicina, Azitromicina, claritromicina, ,
diritromicina.
Quinolonas Quinolonas Ácido nalidixico, ácido oxonilico
Fluoroquinolonas Ciprofloxacino, norfloxacino, clinafloxacina,
onoxacina, levofloxacino. Ofloxacina, esparfloxacina,
moxifloxacina pefloxacina.
Glucopéptidos Glucopéptidos Vancomicina teicoplanina
Drogas antituberculosas Acido para-amino-salicílico (PAS), estreptomicina,
rifampicina, etambutol, ethionamida, isoniazida
pirazinamida rifabutina tiacetazona, clofazimina
cicloserina.
Sulfonamidas Sulfametoxazol, Sulfametoxazol + trimetoprima,
sulfacetamida, sulfadiazina, sulfametizol, sulfamexol,
sulfasalazina, sulfisolazol, trisufapirimidina,
sulfamoxol + trimetoprima.
Diaminopirimidinas Trimetoprima, brodimoprim,
Polipeptídicos Bacitracina, colistina, polimixina B
Lincosamidas Clindamicina, lincomicina
Nitrofuranos Nitrofurantoina. Furazolidona, nitrofurazona.
Nitroimidazoles Metronidazol
MECANISMOS DE ACCIÓN DE LOS droga se interrumpe prematuramente, la población

ANTIBIÓTICOS bacteriana puede aumentar de nuevo y producirse una
recaída.
Recordar, que algunos antibióticos bactericidas En general los antibióticos tienen diferentes
destruyen las bacterias, haciendo fácil su eliminación con mecanismos de acción: Actúan inhibiendo la síntesis de
la pared bacteriana, distorsionando la función de la
ayuda de las defensas orgánicas. Si se emplean drogas
membrana, inhibiendo la síntesis de proteínas y ácido
bacteriostáticas (solo detienen el crecimiento bacteriano),
nucleicos, inhibiendo la síntesis de ácido fólico y de otros
la curación y eliminación bacteriana en este caso
componentes estructurales.
dependen mayormente de las defensas del organismo, de
manera que si dichas defensas son insuficiente o si la
65
Fig. N° 78. Mecanismos de acción de los antibióticos (Fuente: Centrón, 2006).
La mayoría de estas drogas, actúan sobre sistemas agregarse a la cadena (por la similitud estructural de las
enzimáticos que rigen funciones vitales de las bacterias. penicilinas se unen al dipeptido D-alanina-D-alanina de
Estas acciones son las siguientes: las cadenas de peptidoglucano), lo que provoca una falla
estructural en los enlaces transversales de la pared (evita
1.- Inhibición de la síntesis de la pared celular. la formación de los puentes peptídicos), evitando de esta
Algunos antibióticos se adhieren a la pared bacteriana, en manera la elongación del peptidoglucano; por lo que el
ella inhiben su sistema enzimático, impidiendo de esta microorganismo se hace osmóticamente sensible, penetra
manera la síntesis del peptidoglucano. Esencialmente lo líquido en su interior, estalla y se lisa. Entre las drogas
que ocurre es que las proteínas fijadoras de penicilina que tienen esta acción podemos mencionar a los
(PBP) de la membrana bacteriana, que tienen función betalactámicos (penicilinas, cefalosporinas,
transpeptidasa (enzima que participa en la biosíntesis de monobactámicos, carbapenémicos), glucopéptidos
peptidoglucano bacteriano), en presencia de antibióticos (vancomicina), bacitracina, etc.
betalactámicos, se unen a estos antibióticos creyendo que
son una unidad estructural del peptidoglucano que debe
Fig. N°.79. Los antibióticos al unirse a las proteínas de unión a las penicilinas (PBPs) de la pared bacteriana, interfieren la síntesis de peptidoglucano de la
pared (Fuente: Koneman, 2008).
Las bacterias que son tratadas con estos antibióticos son los siguientes:
66
Cuadro N° 6. Grupos de antibióticos que inhiben la síntesis de la pared con acción sobre principales bacterias.
BETALACTAMICOS (bactericidas) PRINCIPALES BACTERIAS
Penicilina G y V S. pyogenes, Enterococcus sp., S. pneumoniae, N.
gonorrhoeae, T. pallidum, C. diphtheriae, B.
anthracis, L. monocytogenes, A. israelii.
Las penicilinas resistentes a la penicilinasa (p.ej., S. aureus, S. pyogenes, S. viridans.

nafcilina, Oxacilina, cloxacilina
Ampicilina y amoxicilina E. coli, Salmonellas, Shigellas, P. mirabilis
Enterococcus, H. influenzae.
Cefalosporinas: 1era. Generación, cefalotina, S. aureus y S. pyogenes.
cefazolina, cefalexina.
Cefalosporinas: 2da. Generación. Cefuroxima, Bacterias grampositivas y gramnegativas similar a
cefoxitina la ampicilina y amoxicilina.
Cefalosporinas de 3era. Generación. Cefotaxime, Cefotaxime y ceftriaxona tiene actividad contra
ceftriaxona, ceftazidima enterobacterias, S. pneumoniae, Neisserias, y
hemófilus y Ceftazidima contra Pseudomona
aeruginosa.
Cefalosporinas de 4ta. Generación. Cefepime. S. aureus meticilino resistentes, neumococos
multirresistentes y Pseudomonas.
Piperacilina P. aeruginosa.
Monobactámicos: Aztreonam P. aeruginosa y enterobacterias.
Carbapenémicos: imipenem, meropenem, Estreptococos, estafilococos, enterococos,
ertapenem. Neisserias, enterobacterias y Pseudomonas.
Glucopéptidos. Vancomicina (bactericidas) S. aureus resistentes a meticilina, S. epidérmidis,
Enterococcus resistentes a penicilinas.
2.- Distorsión de las funciones de la membrana celular. En este grupo debemos mencionar a la colistina,
celular. En la membrana bacteriana existen sistemas polimixina, etc. Tiene acción sobre las bacterias
enzimáticos que rigen la permeabilidad a la entrada o gramnegativas multirresistentes como Pseudomona
salida de sustancias nutritivas y otros, el antibiótico altera aeruginosa y Acinetobacter baumannii.
este sistema al ligarse fuertemente a los fosfolípidos
distorsionando la estructura de la membrana lo que
provoca la formación de canales acuosos por donde se
pierde material citoplasmático, como el escape de
proteínas y nucleótidos, lo que produce daño y muerte
Fig. N° 80. Algunos antibióticos como los polipéptidos (polimixina) al unirse fuertemente a los fosfolípidos de la membrana externa, altera su
permeabilidad a los nutrientes provocando la muerte bacteriana (Fuente: Centrón, 2006).
3.- Inhibición de la síntesis de proteínas. Estos que presentan esta acción tenemos a los aminoglucósidos
antibióticos se unen a las subunidades 30S y 50S de los (por ej., gentamicina), tetraciclinas, cloranfenicol,
ribosomas bacterianos, logrando bloquear la síntesis de macrólidos (por ej., eritromicina).
proteínas, con lo que alteran las funciones intracelulares
y la renovación de macromoléculas protoplasmáticas, a) Los aminoglucósidos, se unen al sitio aceptor de
produciendo daño o muerte celular. Entre los antibióticos aminoácidos de la subunidad 30S de los ribosomas, lo
67
que produce una lectura errónea del mensaje y la síntesis de proteínas no funcionales.
Fig. N°81. Los aminoglucósidos como la gentamicina al unirse a la subunidades 30S de los ribosomas bloquean la iniciación de la síntesis de proteínas
(Fuente: Centrón, 2006).
b) Las tetraciclinas se fijan al sitio aceptor de con lo que se interfiere la elongación de polipéptidos en
aminoácidos en la subunidad 30S del ribosoma, lo cual la síntesis de proteínas.
evita que los aminoácidos del RNAt se unan al ribosoma
Fig. N° 82. Las tetraciclinas al unirse con el 30S de los ribosomas, evitan que el RNAt transfiera sus aminoácidos evitando la síntesis de proteínas.
c) El cloranfenicol, se fija cerca al sitio de la fijación de aminoácidos transferidos por el ARNt a la

peptidiltransferasa de la subunidad 50S y bloquea la enzima.
Fig. N° 83. El cloranfenicol al fijarse al peptidiltransferasa del 50S de los ribosomas, bloquea la fijación de los aminoácidos, evitando así la síntesis
de proteínas (Fuente: Centrón, 2006).
68
d) Los macrólidos como la eritromicina, también se fijan a la subunidad ribosómica 50S, en ella bloquean la liberación
de aminoácidos por parte del ARNt
Fig. N° 84. La eritromicina actúa uniéndose al 50S de los ribosomas, con lo que bloquea la unión de los aminoácidos del ARNt a los ribosomas.
Cuadro N° 7. Antibióticos que actúan inhibiendo la síntesis de proteínas.

ANTIBIOTICOS PRINCIPALES BACTERIAS
Aminoglucósidos: Gentamicina, S. aureus, enterobacterias y Pseudomonas.
tobramicina, Amikacina (bactericidas)
Tetraciclinas(bacteriostático): Uretritis por Clamidia, espiroquetas, V. cholerae y
Tetraciclina, doxicilina, minocilina. Rickettsias.
Cloranfenicol (bacteriostático) Salmonellas, meningococos, hemófilus, clamidias.
Macrólidos (bacteriostática): eritromicina, H. pylori, C. jejuni, chlamydia, M. pneumoniae,
Azitromicina, claritromicina (combinados Estreptococos hemolíticos, N. gonorrhoeae, sífilis
son mejores). en pacientes alérgicos.
4.- Inhibición de la síntesis de ácidos nucleicos. Por dihidropteroato sintetasa, (enzima que debía degradar al
inhibición en la síntesis de ácido fólico, inhibición de la PABA para su transformación en ácido fólico),
replicación del DNA y fragmentación del DNA. Los bloqueando de esta manera la síntesis de DNA. Por su
representantes con esta acción son las sulfonamidas, parte el trimetoprima interviene en la siguiente reacción
fluoroquinolonas, nitroimidazoles, etc. enzimática de transformación del ácido fólico en
tetrahidrofolato al unirse al dihidrofolato reductasa
a) Sulfonamidas + Trimetoprima.- El acido para- (enzima que debía transformar al ácido fólico en
aminobenzoico (PABA) que se encuentra en el tetrahidrofolato) como el siguiente paso para la síntesis
citoplasma bacteriano es un metabolito precursor en la del DNA, de esta manera se bloquea la multiplicación
síntesis de ácido fólico, sustancia esencial para la bacteriana. Cuando las sulfamidas y la trimetoprima se
formación del DNA. Las sulfonamidas que ingresan a la administran en combinación se obtiene una acción
célula bacteriana compiten con el PABA en el sinérgica por inhibir dos pasos consecutivos en el
metabolismo del ácido fólico; uniéndose al metabolismo del folato.
69
Fig. N° 85. El cotrimoxazol, al evitar la síntesis del ácido fólico (folato) y tetrahidrofolato, evita la síntesis del DNA y por tanto evita la multiplicación de
la bacteria (Fuente: Centrón, 2006).
b) Las fluoroquinolonas, en el interior del citoplasma se desenrrollamiento del DNA, de esta manera interfieren en
fijan en las enzimas: DNA girasa, topoisomerasa II la replicación del DNA y como consecuencia la muerte
(grampositivo) y topoisomerasa IV (gramnegativos), de la bacteria.
neutralizando su acción enzimática, es decir, inhiben el
Fig. N° 86. Las fluoroquinolonas como la Ciprofloxacino, al unirse a las enzimas de la replicación del DNA, evita la multiplicación de las bacterias
c) El Metronidazol, que es una prodroga al ingresar al se generan unos compuestos intermediarios de corta vida
citoplasma bacteriano, el grupo nitro de este antibiótico muy tóxicos, estos al unirse al DNA cromosómico
se reduce por acción de la nitrorreductasa citoplásmica y bacteriano produce fragmentación del DNA.
Fig. N° 87. El Metronidazol al unirse al DNA produce su fragmentación (Fuente: Centrón, 2006).
70
Cuadro N° 8. Antibióticos que actúan inhibiendo la síntesis de ácidos nucleicos.

ANTIBIÓTICOS PRINCIPALES BACTERIAS
Sulfametoxazol- trimetoprim S. aureus, S. epidérmidis, S. pyogenes, S. pneumoniae,
(bacteriostática) N. meningitidis, H. influenzae, Salmonella, Shigellas.
Fluoroquinolonas: Ciprofloxacino, E. coli, Klebsiellas sp. Enterobacter sp, Salmonella,
norfloxacino, levofloxacino. (bactericidas) Shigellas, Serratia marcescens, H. influenzae, M
catarrhalis, Neisseria sp., P. aeruginosa, Chlamydia
spp, Micoplasma spp.
Nitroimidazoles: Metronidazol (bactericida) Efectiva para bacterias anaerobios: Bacteroides,
Clostridium, Fusobacterium, Peptococcus,
Peptostreptococcus y otros. H. pylori, T. vaginalis, E.
histolytica, G. lamblia.
RESISTENCIA BACTERIANA A LOS Origen de la resistencia a los

ANTIBIOTICOS antimicrobianos
El origen de la resistencia a los antimicrobianos puede
Definición ser no genético o genético:
Resistencia es la capacidad de las bacterias de
soportar la acción farmacológica del antibiótico sin sufrir 1. No genético. Cuando las bacterias no responde a la
inhibición o muerte, por lo tanto la infección que causan acción de los antibióticos, debido a su estado fisiológico
no cesa al tratamiento con dicho antibiótico. funcional inhibido, que impide la interacción esperada
entre ambos (bacterias y antibióticos). Por ejemplo,
Antecedentes cuando las bacterias se encuentran inactivas en su
El optimismo inicial acerca de que los antibióticos metabolismo (no se hallan en fase de multiplicación)
pudieran poner fin a todas las infecciones bacterianas, al pueden ser fenotípicamente resistentes a los fármacos. No
mostrarse lo contrario, ha dado lugar a una aceptación obstante sus descendientes son totalmente sensibles. En
cruda de que los recursos farmacológicos deben ser estas condiciones éstos microorganismos pueden perder
manejados con prudencia. Algunas bacterias como la estructura de blanco de acción específico para un
Streptococcus pyogenes, han mantenido su sensibilidad a determinado antibiótico, durante varias generaciones y
la penicilina. Lamentablemente, esta sensibilidad volverse resistente en forma permanente.
persistente es la excepción en lugar de la regla. Las
bacterias han sido tan inventivas que actualmente se han 2. Genético. La mayor parte de los microorganismos
aislado cepas que incluso necesitan la presencia de un resistentes a los antibióticos surgen a consecuencia de
antibiótico terapéutico para su crecimiento. cambios genéticos y de los procesos subsiguientes de
Este problema empezó con la idea general, pero selección por los antimicrobianos. Los genes para el
errónea, de que cada enfermedad infecciosa mecanismo de resistencia pueden estar localizados sobre
(especialmente las de origen bacteriano) le correspondía el cromosoma, un plásmido o en transposones.
un tratamiento antibiótico, y aun enfermedades
autolimitadas o por solo presentar algo de fiebre, y que a) Genes de resistencia cromosómica. Resultante de la
racionalmente no correspondía tratamiento antibiótico, mutación espontánea en un locus en el cromosoma que
eran utilizados. El empleo de antibióticos en estas controla la susceptibilidad a un determinado
condiciones se transformó en una especie de “reaseguro” antimicrobiano. La presencia del antimicrobiano sirve
como al decir: “por si las dudas, mejor me cubro”; sin como mecanismo selector para la supresión del
intentar un mínimo de diagnóstico microbiológico o microorganismo sensible y permite el desarrollo de
clínico que pudiera justificar su utilización. mutantes resistentes a los antibióticos.
Se debe recordar que no es incorrecto, por si
mismo, el empleo de esquemas empíricos. Lo que es b) Genes de resistencia plasmídica. Las bacterias
incorrecto es no utilizar las herramientas diagnósticas contienen elementos genéticos extracromosómicos
para minimizar el empleo de antibióticos de amplio llamados Plásmidos, (son piezas circulares de DNA que
espectro o antibióticos de uso reservado, para actúan en forma independiente del cromosoma), portan
infecciones que no lo ameriten, ya que, indefectiblemente genes para la resistencia a uno y a menudo varios
se producen procesos de selección de microorganismos antibióticos, estos genes se movilizan con facilidad de
resistentes, que a la larga producirán enfermedades una cepa a otra, una especie a otra o incluso un género a
infecciosas difíciles de tratar, o a tratar a mayor costo otro. Los genes del plásmido para la resistencia,
económico. controlan a menudo, la formación de enzimas capaces de
destruir a los antimicrobianos.
71
c) Transposones. Son elementos genéticos denominados mecanismos son: transducción, transformación y

“genes saltarines”, que transportan genes de resistencia conjugación.
(pedacitos de DNA cromosómico y plasmídico) de una
bacteria a otra, o de un plásmido a un cromosoma dentro a) Transducción: Es el mecanismo de transferencia de
una célula bacteriana. genes de una bacteria a otra por medio de un bacteriófago
como vector, ocurre por ejemplo cuando el DNA
Mecanismos de transferencia plasmídico es encerrado en un virus bacteriano (fago) y
Existen 3 formas con los que las bacterias pueden transferido por el virus al DNA cromosomal de otra
transferir genes de resistencia de una bacteria a otra, estos bacteria de la misma especie.
Fig. N° 88. Los bacteriófagos (virus), transfieren pedacitos de DNA de una bacteria a otra con información de resistencia bacteria (Fuente: Centrón, 2006).
b) Transformación. Es la captura de DNA extracelular c) Conjugación. Es el mecanismo más frecuente para

(cromosomal o plasmídico) por una célula bacteriana y su transferir genes de resistencia. Consiste en la
incorporación a su propio DNA (cromosomal o transferencia unilateral de material genético de una
plasmídico), que es heredable a las células hijas, es decir bacteria a otra del mismo o diferente género. Esta
que el DNA libre en su medio, pasa de una bacteria de transferencia es mediada por un factor de fertilidad, con
una especie a otra bacteria, alterando por lo tanto su la extensión de los Pilis sexuales de la célula donadora
genotipo de resistencia de esta última. Esto puede ocurrir hacia el receptor. El DNA plasmídico o cromosómico es
espontáneamente en forma natural o por manipulación en transferido a través de estos túbulos de proteína. Una
laboratorio (técnicas de recombinación de DNA). serie de genes estrechamente ligados, determina cada
uno, la resistencia a un medicamento, pudiendo entonces
transferirse de una bacteria resistente a una sensible. Este
es el método más común por el cual se propaga la
resistencia a múltiples medicamentos entre los diferentes
Fig. N° 89 Captura de DNA del medio ambiente con información de géneros de bacterias Gram (-).
resistencia (Fuente: Centrón, 2006).
Fig. N° 90. Transferencia de DNA con información de resistencia de una bacteria a otra mediante Pili sexual
72
Un mecanismo de resistencia puede ser expresado de 3.- Alteración en las proteínas de unión a la penicilina
manera constitutiva o inducida. 4.- Impermeabilidad al antibiótico
Es constitutiva. Cuando la transferencia de genes de 5.- Eflujo del antibiótico
resistencia se produce en forma permanente. Es
inducida. Cuando la transferencia de genes de resistencia 1.- Producción de enzimas que destruyen o modifican
es inducida por la presencia de una sustancia incitadora el antibiótico.
que frecuentemente es un antibiótico. Existen numerosas enzimas que pueden hidrolizar o
Por último mencionar que algunas bacterias secretan modificar un antibiótico de manera que este no pueda
enzimas de resistencia al exterior de la célula bacteriana, llegar en forma activa a su blanco de acción. Dentro del
en cambio otros lo hacen al espacio periplásmico y es en grupo de enzimas que hidrolizan al antibiótico se
estos lugares que dichas enzimas ejercen su efecto contra encuentran las B-lactamasas; que, como su nombre lo
el antibiótico. indica, actúan hidrolizando los antibióticos B-lactámicos.
Por otro lado, existen enzimas bacterianas que inactivan a
Mecanismos de resistencia a los los antibióticos mediante la modificación de sus
antimicrobianos estructuras. Así las enzimas modificantes de los
Para que un antimicrobiano sea eficaz, debe llegar aminoglucósidos (EMA) no los hidrolizan pero los
al sitio predeterminado y unirse a él. Las bacterias inactivan por el agregado de grupos fosfato, acetilos o
pueden ser resistentes a un antimicrobiano, porque el adenilos, en distintas posiciones de su estructura
fármaco no llega a su objetivo, ya sea porque el molecular, además de otras como el cloranfenicol
antibiótico es inactivado, se altera la membrana acetiltransferasa para el cloranfenicol.
bacteriana o se altera el objetivo. Por tanto y en
consideración a estos antecedentes, se postulan 5 a) B-lactamasas. La mayoría de las B-lactamasas
mecanismos de resistencia a los antimicrobianos: presentan en su estructura química una serina con
1.- Producción de enzimas que destruyen o modifican el oxidrilo libre (OH), este OH al ceder su H al anillo
antibiótico betalactámico del antibiótico, hidroliza (rompe) su
2.- Modificación del blanco de acción estructura inactivándolo.
Fig. N° 91. La enzima b-lactamasa bacteriana cede su oxidrilo libre (OH) al anillo betalactámico de las penicilinas, lo que provoca la ruptura de la
penicilina al perder su enlace con el nitrógeno para unirse al OH, de esta manera se inactiva el antibiótico (Fuente: Centrón, 2006).
Las B-lactamasas. Son enzimas que tienen codificación B-lactámico. Más tarde Bush-Jacobi-Medeiros,
tanto plasmídica como cromosomal. La producción de B- estudiando las características funcionales (sustrato sobre
lactamasas es el principal mecanismo de resistencia para la cual actúa la enzima), complementaron esta
la mayoría de los antibióticos B-lactámicos en casi todas clasificación incorporando 4 grupos funcionales de
las especies bacterianas (grampositivas y gramnegativas). enzimas B-lactamasas (1, 2, 3 y 4), los mismos se
Las bacterias grampositivas liberan sus B-lactamasas al muestran en el siguiente cuadro:
medio exterior, en cambio los gramnegativos lo hacen al
espacio periplásmico.
Clasificación de las B-lactamasas. Se han propuesto

distintos esquemas de clasificación de las B-lactamasas,
las más aceptadas son los propuestos por Ambler, que
clasifica a las B-lactamasas en base a su estructura
molecular en 4 clases: A, B, C y D. Las clases A, C y D
corresponden a las enzimas que contienen serina en el
sitio activo, mientras que la B corresponde a las
metaloenzimas que utilizan Zn++ para destruir el anillo
73
Cuadro N°9. Clasificación de las B-lactamasas según Ambler, Bush-Jacobi y Medeiros.

GRU CLASE B-LACTAMASAS SUSTRATOS BACTERIAS QUE
PO MOLECULAR REPRESENTATIVAS PREFERENCIALES PRESENTAN ESTAS
ENZIMAS
1 C AmpC* de Gram negativos. Cefalosporinas E. coli, K. pneumoniae,
Confieren resistencia a todos otras enterobacterias y P.
los B-lactámicos excepto aeruginosa.
carbapenemes. No son
inhibidas por ácido
clavulánico.
2ª A Penicilinasas Penicilinas Staphylococcus aureus,
Enterococcus spp.
2b A *TEM-1, TEM-2 y SHV- Penicilinas y Gramnegativos, K
1(inhibibles por inhibidores cefalosporinas pneumoniae.
de B-lactamasa:sulbactam,
clavulánico y tazobactam)
2be A TEM-3; SHV-2 Penicilinas y Klebsiella oxitoca.
cefalosporinas
2br A Derivadas de TEM (TEM- Penicilinas y K. oxitoca.
30) y SHV (SHV-6) cefalosporinas
(resistentes a los
inhibidores)
2c A PSE-1, PSE-3 y 4 Carbenicilina …
2d D OXA-1 PSE-2 Oxacilina, Streptomyces cacaoi.
Cloxacilina
2e A Cefalosporinasa Cefalosporinas, Proteus vulgaris, B. fragilis.
monobactames
2f A IMI-1 Carbapenémicos Enterobacter cloacae
3 B Métalo-B-lactamasas (su Penicilinas, Stenotrophomonas
mecanismo es Zinc- cefalosporinas maltophilia, B. fragilis
dependiente (inclusive 3era y 4ta Enterobacter cloacae,
generación), Serratia marcescens y P.
carbapenémicos aeruginosa.
4 No identificada Penicilinasas Penicilinas Burkhorderia cepacia,
Bacillus cereus.
*AmpC=B-lactamasa de clase C. TEM= iniciales del paciente en el que se encontró este tipo de B-lactamasa por primera vez.
*Las enzimas clásicas TEM-1, TEM-2, SHV-1, entre otras, son clasificadas como B-lactamasas de espectro ampliado o BLEA, por tener actividad
hidrolítica tanto sobre las penicilinas como sobre las cefalosporinas de espectro reducido.
Las B-lactamasas de espectro extendido (BLEE): TEM-3 a TEM-26, SHV-2 a SHV-21 y PER-1 (ceftacidimasas) y CTX-M2 (cefotaximasas) son enzimas
que han ampliado su espectro de resistencia, proporcionan a las bacterias múltiple resistencia a antibióticos como cefalosporinas de hasta tercera o 4ta
generación, monobactámicos e incluso carbapenémicos; algunas de estas B-lactamasas están presentes en P. aeruginosa y Acinetobacter baumannii.
Inhibidores de las B-lactamasas. Los inhibidores de B- b) Enzimas modificadoras de aminoglucósidos. La

lactamasas, son compuestos que se asemejan a los modificación por EMA es el principal mecanismo de
antibióticos B-lactámicos lo suficientemente bien como resistencia a los aminoglucósidos. El mecanismo consiste
para que puedan unirse a las B-lactamasas, evitando con en la transferencia de un grupo fosfatidil, acetil, o adenil
esto que el antibiótico que va junto a él sea destruido proveniente de cofactores como el ATP o N-acetil-CoA
(p.ej., ampicilina+sulbactam). Cuando son más eficaces, por las fosfotransferasas, acetiltransferasas y
sirven como bombarderos suicidas y absorben toda la adeniltransferasas bacterianas hacia los antibióticos
enzima de B-lactamasa disponible, y el antibiótico tiene aminoglucósidos, modificando su estructura y acción
el espacio libre para actuar contra la bacteria. Los tres farmacológica. Este proceso se realiza en el citoplasma
inhibidores de la actividad de la B-lactamasa son el ácido bacteriano principalmente en estafilococos y enterococos,
clavulánico, el sulbactam y el tazobactam. Los tres son confiriéndoles resistencia prácticamente a todos los
eficaces contra la penicilinasa estafilocócica y variables aminoglucósidos disponibles.
contra las B-lactamasas de las bacterias gramnegativas. c) Enzimas modificadoras del Cloranfenicol. El
El clavulanato y el tazobactam son superiores al principal mecanismo de resistencia al cloranfenicol es la
sulbactam de gramnegativos de espectro ampliado. modificación enzimática del antibiótico. La
cloranfenicol-acetiltransferasa es un enzima intracelular
74
que inactiva el antibiótico por acetilación (la enzima

transfiere un grupo acetil al antibiótico). 3. Alteración de las proteínas de unión a la penicilina
Un mecanismo importante de resistencia de las
2.- Modificación del blanco de acción del antibiótico bacterias a los B-lactámicos es la alteración de las
Las bacterias presentan este tipo de mecanismo de Proteínas de Unión a Penicilina (PBP), de modo que el
resistencia frente a B-lactámicos, aminoglucósidos, antibiótico ya no tiene acceso a la cadena de
tetraciclina, cloranfenicol, cotrimoxazol, eritromicina, peptidoglucano en crecimiento (disminuye la afinidad del
quinolonas, clindamicina, vancomicina y rifampicina. PBP por los antibióticos B-lactámicos). Esto confiere
Varios de estos mecanismos incluyen la modificación de resistencia a los Staphylococcus a la meticilina, a los
la proteína blanco de unión al antibiótico, de manera que Streptococcus pneumoniae, Neisseria gonorrhoeae, N.
la afinidad del antibiótico por su sitio de unión sobre la meningitidis y P aeruginosa a la penicilina G, entre otras
bacteria disminuye o desaparece. Un ejemplo de esta especies de alta importancia médica.
acción, es la modificación que sufren los ribosomas al Las cepas de Staphylococus aureus meticilino
unirse a una proteína producida por la bacteria, lo que resistentes (MRSA) se debe a la adquisición de un gen
provoca la pérdida de afinidad del antibiótico por el cromosomal mecA que codifica PBP2a, el cual tiene muy
ribosoma (blanco de acción del antibiótico), dicha baja afinidad por los antibióticos B-lactámicos. En el
alteración impide que la eritromicina, clindamicina, caso del S. pneumoniae y grupo viridans se debe a la
tetraciclina y aminoglucósidos reconozcan sus sitios alteración de múltiples de sus PBPs. En el caso de la N.
“blanco” para inhibir la síntesis de proteinas. Por otra Gonorrhoeae y N. meningitidis las PBPs 1 y 2 de baja
parte la mutación en el sitio diana de la DNA girasa de afinidad son codificados en los genes penA.
las quinolonas es el mecanismo principal para la El mecanismo por medio del cual H. influenzae y
resistencia a este importante grupo de antibióticos, tanto N. gonorrhoeae que no producen B-lactamasa son
en bacterias grampositivas como gramnegativas. En resistentes a los B-lactámicos es también producto de la
algunos géneros p.ej., Staphylococcus aureus o P. alteración de sus PBPs. Otras bacterias gramnegativas
aeruginosa una única mutación es suficiente para también expresan resistencia debido a este mecanismo
conferir resistencia; en cambio en otros, como C. jejuni, como E. coli (presencia de PBP 3) a algunas
E. coli o N. gonorrhoeae se necesitan varias mutaciones. cefalosporinas, al imipenem algunas enterobacterias
como E. aerógenes, A. baumannii.
El Gen de resistencia VanA de los Enterococos
sintetiza el depsipéptido D-al-D-lactato (en lugar del D-
ala-D-ala) que tiene menor afinidad por la vancomicina.
Fig. N° 92. Modificación de los ribosomas (blanco de acción de muchos antibióticos),

provoca la pérdida de la afinidad del antibiótico por los ribosomas,
evitando de esta manera la acción antibacteriana (Fuente: Centrón, 2006).
75
Fig. N° 93. La alteración genética de los PBPs bacterianos disminuye la afinidad de éstas proteinas por los antibióticos, lo que provoca la resistencia de
las bacterias al antibiótico, tanton en bacterias grampositivas como en gram negativas (Fuente: Koneman, 2008)
76
4.- Impermeabilidad al antibiótico moléculas con carga negativa se mueven más lentamente
Para muchos antibióticos, incluidos los B- a través de la membrana que las moléculas con carga
lactámicos, el medio primario de transporte a través de la positiva o cargas equilibradas. La exclusión de los
membrana externa de las bacterias entéricas es un grupo compuestos hidrófobos del medio ambiente acuoso de la
notable de proteínas de membrana, denominadas porinas. porina puede explicar la falta de eficacia del compuesto
Se han identificado dos proteínas porinas: Omp F hidrófobo meticilina contra las bacterias gramnegativas.
(proteína F de la membrana externa) y Omp C (proteína Asimismo, los B-lactámicos con cadenas laterales
C de la membrana externa). Factores como la carga grandes y voluminosas, como mezlocilina, piperacilina y
negativa y la hidrofobicidad del antibiótico, desempeñan cefoperazona, también atraviesan poco la membrana.
un papel importante en la resistencia al antibiótico. Las
Fig. N° 94. Impermeabilidad de la membrana bacteriana a los antibióticos hidrófobos con carga negativa (Fuente: Koneman, 2008).
En un estudio realizado, se observó, que el “mejor antibiótico fuera de la bacteria a una velocidad igual o
rendimiento” entre los B-lactámicos fue el del imipenem, mayor que la velocidad de entrada del mismo. En
un compuesto hidrofílico dipolar con una estructura muy general, los mecanismos de eflujo es facilitada por la
compacta. Se ha propuesto que la explicación de la hidrólisis de ATP y el sistema de intercambio acoplado a
sensibilidad de Enterobacter cloacae al imipenem en protones (H+), en estos procesos intervienen varias
presencia de resistencia a las cefalosporinas de tercera proteínas (MFS: major facilitador super familia, RND:
generación es la mayor accesibilidad del imipenem a las resistance-modulation.cell-division, ABC: ATP-Binding
moléculas diana, mediada por el rápido tránsito cassette, SMR: small multi-drug resistance), ubicados en
probablemente a través de varios canales de porina. la membrana citoplasmática que actúan como
transportadores o extractores de antibióticos. Este es un
5. Eflujo del antibiótico mecanismo de defensa de las bacterias contra las
En algunas bacterias, un importante mecanismo de tetraciclinas y macrólidos (dos grupos de antibióticos que
resistencia es la extracción activa de los antibióticos intervienen en la síntesis proteica a nivel ribosómico). Es
desde la célula bacteriana, de modo que las una forma de resistencia de las bacterias grampositivas
concentraciones intracelulares de estos nunca alcanzan un como estafilococos estreptococos enterococos,
nivel suficientemente alto como para ejercer una corinebacterias y gramnegativos como P. aeruginosa.
actividad antibiótica eficaz; se llama también bombear el
77
Fig. N° 95. El eflujo es la capacidad de algunas bacterias de transportar en forma activa al antibiótico desde su citoplasma hacia afuera, utilizando proteínas
de transporte: MFS, RND, de esta manera evitar su acción farmacológica (Fuente: Centrón, 2006).
RECUADRO N° 7: Resistencia cruzada, acción combinada y antagonismo de los antibióticos.

3.- Resistencia cruzada.- Los microorganismos resistentes a ciertos medicamentos pueden serlo también a otros
medicamentos que compartan algún mecanismo de acción. Esta relación existe principalmente entre agentes con
estructuras químicas análogas o que tienen un modo semejante de acción o fijación.
4.- Asociación de antibióticos.- Es el uso de dos o más antimicrobianos para el tratamiento de una enfermedad.
Cuando dos agentes actúan simultáneamente sobre la población microbiana homogénea, el efecto puede ser uno de los
siguientes:
a) Indiferencia. La adición combinada no es más potente que la del agente más efectivo cuando se administra solo.
b) Adición. La acción combinada es equivalente a la suma de las acciones de cada medicamento cuando se usan solas.
c) Sinergia. La acción combinada es significativamente mayor que la que producían en forma independiente.
d) Antagonismo. La acción combinada es menor que la del agente más efectivo cuando este se usa solo. Esta
francamente limitado por la relación Tiempo –Dosis y por consiguiente es un suceso raro, y poco probable en la
terapéutica clínica antimicrobiana. Se presenta principalmente si un medicamento bacteriostático llega al sitio de
infección antes que uno bactericida.
Las posible razones por las que se emplean 2 o más medicamentos en forma simultánea en lugar de uno solo son:
Tratamiento rápido en pacientes en los que se sospecha una infección grave; para retardar la aparición de mutantes
microbianos resistentes a un medicamento en infecciones crónicas; en el tratamiento de infecciones mixtas y para
llevar a cabo el sinergismo bactericida. En ocasiones el uso simultáneo de dos medicamentos permite una reducción
en la dosis y por lo tanto evita la intoxicación sin perder su satisfactoria actividad antimicrobiana.
78
CAPITULO 8
FLORA MICROBIANA NORMAL DEL CUERPO
HUMANO
El organismo humano alberga gran variedad de
microorganismos saprófitos ubicados principalmente en
la piel y mucosas.
Clasificación
La flora microbiana se clasifica en dos grupos:
Flora transitoria y flora residente.
a) Flora transitoria.- Se hospeda solo durante horas días

o semanas, estas provienen del medio ambiente y no se
restablecen por si mismos cuando son removidos. Los
miembros de esta flora son de poca significación en tanto
que la flora residente no sufra alteración; pero si esto
acurre (disminuye el número de la flora residente), la
flora transitoria aprovecha tal circunstancia para
proliferar y causar enfermedad infecciosa. Fig. Nº 96. Representación esquemática: Función de la flora residente
b) Flora residente.- Esta compuesta por
microorganismos relativamente fijos, los cuales se
encuentran en un lugar y una edad dada y si se trastornan, Flora normal de la piel
se restablece rápidamente. Los microorganismos residentes que
predominan en la piel son los siguientes: Staphylococcus
Papel de la flora residente epidermidis, Streptococcus viridans, Bacillus subtilis,
Estos microorganismos que siempre están Streptococcus faecalis, coliformes, levaduras,
presentes en las superficies del cuerpo como comensales, Corynebacterias, Propionibacteriun acnés, y otros. Ni la
proliferan en un área determinada dependiendo de la sudoración abundante, ni el lavado, ni el baño pueden
temperatura la humedad y la presencia de nutrimentos, su eliminar o modificar significativamente la flora residente
presencia no es esencial en algunos sitios del organismo, de la piel, el cepillado diario de las manos con jabón que
sin embargo a nivel intestinal contribuye en la síntesis de contiene hexaclorofeno por parte de los cirujanos
vitamina K y algunos nutrientes. La flora residente de las solamente disminuye el número de esta flora, la que
mucosas y piel evitan la colonización de bacterias rápidamente se restablece a partir de la flora que se
patógenas mediante la formación de capas bacterianas, encuentra en las glándulas sebáceas.
excretan substancias manteniendo un pH no acorde a las
exigencias de la flora transitoria, pero son susceptibles a
disminuir su número por tratamientos con Flora normal de la boca
antimicrobianos en forma prolongada lo que puede Las mucosas de la boca y de la faringe son
permitir la colonización de la flora transitoria. Ahora si estériles en el momento del nacimiento aunque pueden
en alguna situación son removidos a la circulación contaminarse durante el paso a través del conducto
sanguínea o a los tejidos, pueden volverse patógenos por vaginal, por el contacto del personal que atendió el parto
ejemplo: Los Streptococcus viridans que viven o la madre, estableciéndose Streptococcus viridans para
normalmente en el sistema respiratorio, cuando pasan a la toda la vida, luego se agregan: Moraxella spp,
circulación ya sea por extracción dentario o lactobacilos, espiroquetas, estafilococos no hemolícos,
amigdalotomía, suelen ser frecuentes causantes de Haemophilus, Neumococos, levaduras, Veillonella spp y
endocarditis bacteriana peptoestreptococcus spp, Peptococcus spp y otros.
79
Intestino grueso
Fosas nasales Lactobacilos, Clostridium perfringens,
Corynebacterias prominentes, Staphylococcus Bacteroides sp, enterococos, coliformes, Proteus,
aureus, epidermidis, Streptococcus viridans, Bifidobacterium bifidum, levaduras.
Haemophilus influenzae, Proteus, Neisserias Moraxella Uretra La porción anterior de la uretra de ambos sexos
spp, Streptococcus pneumoniae y otros. contienen un número pequeño de los mismos
microorganismos hallados en la piel. Por esa razón se
Esófago insiste tanto en la necesidad de que tanto el hombre como
El esófago contiene los mismos la mujer se limpien de una forma muy cuidadosa toda la
microorganismos de la boca. zona perineal antes de recoger un cultivo de orina.
Estómago Vagina
El pH ácido del estómago evita la proliferación Bacilos de Doderlein, coliformes, Estreptococos
de las bacterias provenientes de afuera con los alimentos. anaerobios. Veillonella spp, levaduras.
Intestino delgado Conjuntiva ocular

Predominan los lactobacilos y enterococos. Corynebacterium xerosis, Neisserias,
Estafilococos y Estreptococos no hemolíticos.
80
CAPITULO 9
COCOS GRAM POSITIVOS
GENERO ESTAFILOCOCOS
Características generales y morfología Clasificación

Los estafilococos se encuentran distribuidos El género Staphylococcus se compone de más de
ampliamente en la naturaleza (suelo, agua, plantas y 30 especies, la mayor parte de ellas son flora habitual del
animales) y forman parte de la flora normal del hombre, y se localizan preferentemente en la piel y en las
organismo humano, desde donde llegan, ingresan a los mucosas. Atendiendo a la prevalencia de los
tejidos del huésped, alcanzan el torrente circulatorio, se estafilococos en infecciones humanas, las características
diseminan y producen diferentes enfermedades de desarrollo en medios habituales de laboratorio, como
infecciosas en individuos sanos de la comunidad y en el agar sangre y otros, vamos a clasificarlos de la
pacientes hospitalizados. siguiente manera:
Los estafilococos son células más o menos a) Staphylococcus aureus (colonias amarillo naranjas,
esféricas de 0,5 a 1,5 um de diámetro, grampositivas, beta-hemolícas, coagulasa (+)
característicamente se encuentran agrupados en racimos, b) Staphylococcus epidérmidis (colonias blanco
aunque también es posible encontrarlos agrupados en grisáceas, sin hemólis, coagulasa (-)
tétradas, en parejas o solos. Son inmóviles, no forman c) Staphylococcus saprophyticus (colonias blanco
esporas, pueden o no poseer cápsula, son aerobios y opacas, sin hemólisis, coagulasa (-)
anaerobios facultativos, pudiendo oxidar y fermentar
distintos hidratos de carbono, son catalasa positivas.
Resisten la acción del calor, las sales biliares, y otras Staphylococcus aureus
condiciones adversas. Desarrollan a una temperatura
óptima de 35 a 37°C, un pH de 6,9 a 7,4 y una
concentración de cloruro de sodio de hasta un 10%. Rol patógeno
Pudiendo alguno de sus miembros producir hemólisis, Básicamente el rol patógeno esta dada por las
coagulasa y pigmentación amarillo dorado en el medio de enzimas y toxinas extracelulares que producen y secretan
cultivo. al medio externo como: coagulasa, catalasa,
hialuronidasa, beta-lactamasa, lipasas, nucleasas,
estafiloquinasa y diversas toxinas como las hemolisinas
(alfa, beta gama y delta), leucocidina, enterotoxina,
exfoliatina y toxina del shock tóxico. La acción de estos
exoproductos se describe en el cuadro N° 10.
Fig. N° 97. Cocos grampositivos agrupados en racimos: Estafilococos

(Fuente: Nath, 2007).
Cuadro N° 10. Factores de virulencia (exoproductos) del S. aureus

EXOPRODUCTO MECANISMO DE ACCIÓN
Catalasa Enzima que inactiva al peróxido de hidrógeno (substancia dañina que se forma dentro las
células fagocíticas para destruir estafilococos).
Coagulasa Enzima que convierte el fibrinógeno en fibrina coagulando el plasma sanguíneo, de esta
manera, los estafilococos rodeados de fibrina resisten la fagocitosis.
Hialuronidasa y Enzimas que degradan el ácido hialurónico y lípidos para causar daño tisular.
lipasa
Nucleasas Ribonucleasa y desoxirribonucleasa (DNAsa). Enzimas que degradan ácidos nucleicos
celulares.
Beta-lactamasa Enzima que fragmenta el enlace C-N del anillo betalactámico del antibiótico, haciéndolo
inactivo contra estafilococos.
Estafiloquinasa Enzima que produce fibrinólisis favoreciendo la diseminación estafilocócica.
Toxinas hemolisinas Actuan sobre la membrana celular produciendo lisis de eritrocitos.
Leucocidina Toxina que destruye leucocitos polimorfonucleares.
Enterotoxina Esta enzima actúa sobre los receptores neuronales en el tracto gastrointestinal superior y
81
produce estimulación del centro del vómito en el cerebro y aumenta el peristaltismo

intestinal, causando intoxicación alimentaria.
Exfoliatinas Toxinas que producen descamación epitelial y pérdida de las capas superficiales de la
epidermis.
Toxina del síndrome Es una proteína bacteriana que actua como superantígeno y produce shock séptico.
shock tóxico
Las diversas enzimas y toxinas del S. aureus producen c) Celulitis.- Es una infección difusa, que involucra las
una variedad de infecciones en la piel, tejido celular capas profundas de la dermis, presenta áreas eritematosas
subcutáneo, huesos y otros tejidos. Entre ellos los de bordes mal definidos, pueden también presentarse con
siguientes: ampollas, costras y edema asociados con fiebre,
escalofríos y linfadenopatia regional. El diagnóstico es
a) Foliculitis.- Es una infección de los folículos pilosos principalmente clínico. A partir de una localización
que produce una pápula o pústula en la base de un pelo cutánea los estafilococos pueden extenderse localmente
rodeada por un anillo eritematoso. o por vía hematógena y ocasionar una gran variedad de
infecciones secundarias como osteomielitis, artritis,
b) Forúnculo.- Un forúnculo es un absceso, que neumonía, abscesos cerebrales, pulmonares y renales,
comienza en un folículo piloso, con acumulación de pus empiema pleural, endocarditis, etc.
dentro un nódulo firme y delicado que produce dolor,
posteriormente los forunculos se interconectan y d) Impétigo.- Es una infección superficial de la piel que
desarrollan lesiones más grandes y profundas se manifiesta por erupsiones eritematosas, ampollosas
comprometiendo tejido subcutáneo, varios folículos pustulosas o costrosas de 0,5 a 3 cm de diámetro, el
pilosos y glándulas cebáceas constituyéndose un exudado puede ser seroso o purulento y deja una costra
absceso, los cuales drenan pus al exterior del folículo. cuando drenan.
Estas lesiones se cronifican cuando las defensas
inmunitarias contra el microorganismo es nula,
especialmente esto ocurre, cuando los pacientes
presentan deficiencias inmunológicas.
Foliculitis Forunculo Absceso Celulitis Impétigo

Fig. N° 98. Rol patógeno Stasphylococcus aureus (Fuente: Struthers, 2005).
e) Osteomielitis.- Infección localizada en la diáfisis de según la cantidad de toxina ingerida. En el alimento

los huesos largos. A medida que la infección progresa, se guardado, sin una refrigeración adecuada, luego
acumula pus, emerge a la superficie del hueso llegando al calentada, incluso hasta la ebullición la toxicidad
periostio y producir absceso periostial. Los síntomas persiste, dado que la enterotoxina resiste los 100°C
clínicos incluyen, fiebre, escalofríos, dolor del hueso y durante 30 minutos. Los principales alimentos que
contractura muscular en el área comprometida. contienen la enterotoxina tienen olor y gusto normal
como papas fritas, helados, quesos, salchichas, crema,
f) Neumonía.- Generalmente se presenta a partir de una etc.
infección primaria, ya sea por aspiración del contenido de
la cavidad oral, bronquios o contenido gástrico, es una h) Endocarditis.- La propagación bacterémica al
inflamación con presencia de abscesos, cuyos síntomas corazón produce una endocarditis aguda sobre todo en
son tos, expectoración, fiebre, malestar general, etc. adictos a drogas.
g) Intoxicación alimentaria.- Resulta de la ingestión de i) Síndrome estafilocócico de la piel escarlata.-

enterotoxinas estafilocócicas que contaminan los También conocido como enfermedad de Ritter, se
alimentos, se caracteriza por producir vómitos y diarrea produce habitualmente en niños menores de 5 años, la
acuosa, usualmente fiebre, dolor abdominal, calambres, exfoliatina, una toxina estafilocócica, provoca el
luego de un corto periodo de incubación de 2 a 6 horas desprendimento de la piel.
82
j) Toxina de síndrome de shock tóxico (TSST-1).- hisopado, punción etc, incluye pus, liquidos purulentos,
Produce fiebre, erupción cutánea descamativa, orina, sangre, LCR, liquido de punción, esputo y otros.
hipotensión, cefalea, vómitos, diarrea, y fallo orgánico
múltiple, se presenta en mujeres durante su menstruación a) Examen directo.- Una vez tomada la muestra, ésta
por la proliferación de los estafilococos en mucosa debe ser procesada dentro las 6 horas posteriores a la su
vaginal y el paso de su toxina-1 al torrente circulatorio. obtención, debiendo refrigerarse, si no puede ser
procesada en ese lapso. Con ella se realiza un frotis en
Infecciones asociadas a Staphylococcus portaobjeto, se deja secar a temperatura ambiente, se fija
coagulasa negativos a la llama del mechero, se tiñe con Gram y se observa al
microscopio. En el examen se observan cocos
Infecciones urinarias en mujeres jóvenes es grampositivos (escasos, moderado o abundantes,
frecuentemente causada por S. saprophyticus. Las juntamente con leucocitos).
infecciones asociados a sonda vesical en adultos,
osteomielitis, endocarditis, bacteriemia, infecciones por b) Cultivo.- Los estafilococos crecen bien en los medios
catéteres intravenosos y diálisis, meningitis, abscesos e de cultivo habituales de aislamiento primario, como el
infecciones de heridas quirúrgicas son causadas con agar sangre, a las 24 horas de incubación, presentan el
frecuencia por S. epidérmidis. siguiente desarrollo:
Epidemiología  Staphylococcus aureus. Colonias de bordes

redondeados, superficie convexa, aspecto
La especie humana es su hábitat primario. La
húmedo y brillante, consistencia cremosa,
zona con mayor frecuencia de colonización son las fosas
tamaño variable de 2 a 4 mm. Coloración blanco
nasales anteriores (del 20 al 30 % de la población general
gris a 37°C y amarillo dorado (a temperatura 15
tiene S. aureus). Aproximadamente el 60% de las
a 20°C) presenta Beta-hemólisis alrededor de la
personas son portadoras intermitentes y la bacteria puede
colonia después de una incubación prolongada.
localizarse no solo en la nasofaringe, sino también en la
superficie de la piel, y por consiguiente, se puede aislar a
partir de la piel, las glándulas cutáneas y las membranas
mucosas. La mayoría de las infecciones adquiridas en la
comunidad son endógenas. Las infecciones exógenas
pueden originarse en personas con lesiones supurantes, o
exudados purulentos y la transmisión se produce por
contacto con una de estas personas o con un portador
asintomático (habitualmente nasal).
El periodo de incubación es variable e
indefinido, sin embargo el inicio de la enfermedad suele
producirse entre 4 y 10 días después de la adquisición del Fig.N° 99. Colonias betahemolíticos de S. aureus (Fuente: Nath, 2007).
microorganismo. Las personas con mayor riesgo de  Staphylococcus coagulasa negativas. Colonias
infección son los neonatos y los enfermos crónicos. de bordes redondeados, superficie convexa,
También tienen un riesgo alto de contraer la infección los aspecto húmedo y brillante, consistencia
individuos con enfermedades crónicas, como diabetes cremosa, tamaño variable de 2 a 6 mm.
mellitus, neoplasias, así como los quemados, también es Coloracción blanco aporcelanado a 37°C,
un importante patógeno de adquisición hospitalaria, que mismo color a 20°C, no presenta hemólisis
se asocia a infecciones de heridas quirúrgicas. Las manos alrededor de la colonia.
son el vehículo principal de transmisión de estas
infecciones.
Diagnóstico de laboratorio
La identificación del agente causal de la
infección se basa elementalmente en los siguientes
procedimientos laboratoriales: toma de muestra, examen
Fig. N° 100. Colonias no hemolíticas de Staphylococcus coagulasa
directo, cultivo y pruebas bioquímicas. Para negativas (Fuente:Nath, 2007).
posteriormente realizar el antibiograma, como un
procedimiento complementario, que permite determinar c) Pruebas bioquímicas. La identificación de las
la sensibilidad o resistencia de la bacteria identificada diferentes especies de estafilococos se realiza poniendo
frente a los antibióticos. de manifiesto la producción de las diferentes enzimas
La toma de muestra depende del cuadro clínico estafilocócicas, la fermentación del manitol y la
y del sitio de la infección; se lo realiza mediante sensibilidad o no a la novobiocina.
83
Cuadro N° 11. Pruebas bioquímicas para estafilococos

STAPHYLOCOCCUS CATALASA COAGULASA MANITOL DNAsa SENSIBILIDAD A
NOVOBIOCINA
S. aureus + + + + S
S. epidérmidis + - - - S
S. saprophyticus + - V - R
Cuadro N° 12. Prueba de la Catalasa

FUNDAMENTO PROCEDIMIENTO RESULTADOS
Positivo: Aparición de burbujas
La catalasa es una enzima que 1.- Sobre un portaobjetos limpio, (desprendimiento de 02)
presentan los estafilococos que colocar dos gotas de peróxido de
tiene la capacidad de hidrógeno (H202) al 3%.
descomponer el peróxido de
hidrógeno en agua y oxígeno. 2.- Añadir con el asa Negativo: No hay presencia de
H202 + catalasa H20+burbujas bacteriológica una colonia de burbujas.
de 02. gérmenes sospechosos y mezclar.
Cuadro N° 13. Prueba de la Coagulasa

La coagulasa es una enzima 1.- Colocar en un tubo de ensayo 0,3 ml Prueba positiva: Formación de
con actividad semejante a la de plasma fresco humano citratado u coagulo de cualquier tamaño.
protrombina, capaz de oxalatado.
transformar el fibrinógeno 2.- Con el asa bacteriológica traspasar
en fibrina, provocando la una o dos colonias saspechosas al tubo
formación de un coágulo antes mencionado o 0,2 ml de una
visible en plasma sanguíneo. suspensión de estafilococos del BHI
incubada 24 horas a 37°C.
3.- Llevar a incubación a 37°C, tapando
Prueba negativa: No hay
bien el tubo.
formación del coágulo
4.- Leer a las 6, 12 y 24 horas.
Cuadro N° 14. Prueba del Manitol

Evidencia la capacidad de los 1.- Inocule una colonia grande de Prueba positiva: Desarrollo de
estafilococos patógenos para estafilococos problema en el colonias con halo amarillo
fermentar el manitol (medio medio de cultivo que contenga luminoso (2).
chapman) degradándolo a ácido, manitol (Chapman), a través del Prueba negativa: Desarrollo de
provocando de esta nanera el procedimiento del agotamiento. colonias sin halo amarillo (1).
viraje del indicador de pH del 2.- Incubar a 37°C por 18 horas
medio chapman de color rojo
inicial al amarillo.
84
Cuadro N° 15. Prueba de la DNAsa (Desoxirribonucleasa)

FUNDAMENTO PROCEDIMIENTO RESULTADO
La DNAsa, es una enzima 1.- Utilizar una placa de agar La reacción positiva se visializa
estafilocócica que desdobla el nutritivo con acido como un halo de inhibición
ácido desoxirribonucleico en sus desoxirribonucleico. alrededor de la estria, esto
nucleótidos. 2.- Sembrar por estria contínua producto de la precipitación por
los estafilococos problema en el destrucción del DNA.
agar nutritivo. Se considera prueba negativa si
3.- Inundar con acido clorhídrico aparece turbidez en toda la
1N sobre las colonias superficie del medio de cultivo no
desarrolladas hay halo.
Cuadro N° 16. Prueba de la Novobiocina

La novobiocina es un antibiótico 1.- Sembrar masivamente una o Sensible: inhibición del desarrollo
que inhibe el desarrollo del dos colonias de estafilococos con un diámetro mayor a 22 mm.
Staphylococcus aureus y problema (coagulasa negativa) en Resistente: inhibición del
epidermidis el Mueller-Hinton. desarrollo con un diámetro menor
2.- Colocar el disco de o igual a 16 mm.
novobiocina (5 ug).
3.- incubar 24 horas a 37°C
No existen medidas específica útiles para la

Antibiograma prevención de las infecciones estafilocócicas
El antibiograma se realiza por el método de extrahospitalarias en los niños. Las infecciones
difusión en agar Mueller-Hinton. Los antibióticos que hospitalarias se originan habitualmente a partir de
con mayor frecuencia se ensayan para las infecciones gérmenes albergados por el paciente, o pór otros
estafilocócicas son: Penicilina, Oxacilina, vancomicina, pacientes. Para evitar la transmisión de paciente a
ciprofloxacina, gentamicina, eritromicina, clindamicina, paciente se utilizan jabones antiestafilocócicos. Para
ciprofloxacino y otros de acuerdo a la localización de la evitar las infecciones nosocomiales y la diseminación de
infección (leer practica de antibiograma). cepas MRSA entre el personal médico y los pacientes, se
deben adoptar precauciones de contacto (lavado de
manos, uso de batas, barbijos y guantes).
Tratamiento Algunos hospitales han instituido cultivos
En la actualidad, más del 80% de los nasales periódicos, para el personal, a fin de detectar y
estafilococos son resistentes a la penicilina y baja tratar a los portadores de SARM, con el objeto de reducir
afinidad a las cefalosporinas debido a la B-lactamasa que el número de pacientes expuestos, y como consecuencia
producen, esta es la característica de los Staphylococcus las infecciones intrahospitalarias e institucionales.
aureus meticilino resistentes (MRSA), para ellos el
antibiótico que se suele utilizar es la vancomicina. La
combinación con un aminoglucocido, como la GENERO ESTREPTOCOCOS
gentamicina, se utiliza para infecciones sistémicas
graves. Sin embargo el tratamiento debe hacerse siempre
Características generales y morfología
Los estreptococos son microorganismos que
en base al resultado del antibiograma.
pertenecen al género Streptococcus, con amplia
distribución en la naturaleza, pero son usualmente
parásitos del hombre y otros animales. Mientras algunos
estreptococos son patógenos virulentos para el hombre,
Prevención como los Streptococcus pyogenes y S. pneumoniae, otros
85
viven armoniosamente con su huesped como comensales

saprófitos, de la piel y membranas mucosas y son
frecuentemente aislados como parte de la flora normal
del tracto respiratorio y gastrointestinal.
Los estreptococos son células mas o menos
esférica u ovoides de 1um de diámetro, son
grampositivas, característicamente se agrupan en parejas
cadenas cortas y largas. Son inmóviles, no forman
esporas, pueden o no poseer capsula, son anaerobios
facultativos, catalasa negativos. Desarrollan a una Fig. N° 103. Colonias rodeadas de halo verde, pertenecen a
temperatura óptima de 35 a 37°C, un pH de 7 a 7,4 y una estreptococos alfa hemolíticos (Fuente: Nath, 2007).
admósfera que contenga 5 a 10% de CO2. Son
nutricionalmente exigentes, ya que desarrollan bien en c) Estreptococo gamma hemolítico.- Cuando las
agar sangre, donde manifiestan tempranamente sus colonias no presentan hemólisis.
reacciones hemolíticas. Resisten a la acción de las sales
biliares, y otras condiciones adversas. Rebecca Lancefield (1895-1981) realizó estudios
sobre los carbohidratos antigénicos presentes en la pared
de los estreptococos B-hemolíticos, logrando clasificarlos
en diferentes serogrupos, identificándolos como
estreptococos B-hemolíticos del grupo A, del grupo B,
grupo C, hasta la H y de la K hasta la V. De todos estos,
los grupos A, B y D son los que se aíslan con mayor
frecuencia en infecciones humanas. Los principales
estreptococos representantes de cada uno de estos grupos
por la patología que producen son:
a) Grupo A: Streptococcus pyogenes
Fig. N° 101. Cocos grampositivos agrupados en cadenas: Estreptococos b) Grupo B: Streptococcus agalactiae
c) Grupo D: Streptococcus feacalis
Entre los estreptococos alfa hemolíticos y gamma
Clasificación hemolíticos se encuentran los Streptococus pneumoniae y
Inicialmente los estreptococos fueron los del grupo viridans.
clasificados en base a la presencia y tipo de hemólisis que
producen en agar sangre, y que actualmente se sigue
utilizando, por su caracter simplificado y didáctico: Estreptococo grupo A (Streptococcus
pyogenes)
a) Estreptococo beta hemolítico.- cuando las colonias
están rodeadas por un halo claro, donde los hematíes se
han lisado completamente. Rol patógeno
Básicamente el rol patógeno, esta dada por las
enzimas y toxinas extracelulares que producen y secretan
al medio externo, como son la estreptoquinasa,
hialuronidasa, hemolisinas, toxina eritrogénica, proteina
M, así como productos de sensibilización, formados
después del contacto con estreptococos. La acción de
Fig. N° 102. Colonias con halo claro, pertenecen a estreptococos beta estos exoproductos se describe en el siguiente cuadro:
hemolíticos (Fuente: Nath, 2007).
b) Estreptococo alfa hemolítico.- cuando las colonias

están rodeadas de un halo verde, donde los hematíes se
han lisado parcialmente.
Cuadro N° 17 Factores de virulencia (exoproductos) del Strepcococcus pyogenes

EXOPRODUCTOS MECANISMOS DE ACCIÓN
86
Estreptoquinasa Enzima que produce lisis de coágulos de fibrina (cataliza la conversión del
plasminógeno en plasmina substancia que lisa la fibrina) facilitando la invasión de los
estreptococos a los tejidos.
Hialuronidasa Esta enzima degrada el ácido hialurónico, un componente de sostén del tejido
conectivo, lo que facilita el pasaje de la bacteria a través de los tejidos.
La estreptolisina O, es una de las toxinas responsables (aunque en poca medida) de la
Hemolisinas hemólisis en el agar sangre. Esta proteína es antigénica y oxigeno-labil. Participa en la
(responsables de la lisis de leucocitos, células tisulares y plaquetas, formando poros en la superficie.
beta-hemólisis en Durante la infección, se producen anticuerpos anti-estreptolisina O, que son las que
agar sangre) se detectan en la prueba de ASTO.
La estreptolisina S, tiene bajo peso molecular y poco antigénico. Es estable frente al
oxígeno y es responsable de la hemólisis en el agar sangre cuando las placas se cultivan
en aerobiosis. Produce daño en el tejido.
Toxina eritrogénica Es la responsable de las manifestaciones cutáneas de la escarlatina y la fiebre, es

también un superantígeno responsable de la reacción inflamatoria.
Es un antígeno proteico que se encuentra en la superficie de los estreptococos del grupo
Proteína M
A, a manera de fimbria que sobresale de la pared celular. Es su principal factor de
virulencia. En el caso de que en el huésped no existan Ac frente a esta proteína, las
cepas de S. pyogenes con dicha proteína son capaces de resistir la acción fagocítica de
los leucocitos. Además, esta proteína también está implicada en los procesos de
adherencia a células epiteliales.
Infecciones causadas por Streptococcus oclusión de las glándulas sudoríparas le confiere a la piel
pyogenes una textura de lija, la erupción cutánea desaparece en el
a) Faringoamigdalitis. La infección faríngea puede ser curso de una semana y es seguida de una intensa
asintomática o asociarse con dolor de garganta, fiebre descamación. La fiebre escarlatina, está generalmente
escalofríos, cefalea, malestar, nauseas y vómitos. La asociada a infección de garganta y de otros sitios.
faringe puede presentarse levemente eritematosa o
francamente enrojecida, con exudado amarillo-grisáceo, c) Impétigo. Generalmente afecta la epidermis, el
que con frecuencia sangran al toque del hisopo para microorganismo ingresa por traumatismos menores, se
cultivo. La faringoamigdalitis frecuentemente se observa producen grupos de vesículas superficiales, que se abren
con pustulas y muchas veces abscesos amigdalares. y forman una superficie abierta exudativa; las costras
Aunque estreptococo grupo A, no es considerado flora típicamente amarillas son a menudo la principal
normal, la portación faríngea puede ocurrir sin característica de la infección.
sintomatología clínica de la enfermedad. La proteína M, d) Erisipela. Es una infección de la piel que compromete
que poseen ciertas cepas de estreptococos grupo A están la dermis y a la parte superficial del tejido subcutáneo,
asociados con faringitis y fiebre reumática. involucrando además a los ganglios linfáticos
superficiales. Se presenta con dolor, edema e induración.
La principal característica clínica es que los bordes de la
lesión están demarcados en la piel adyacente normal. Se
produce un agudo aumento de fiebre, escalofríos y
linfadenopatía regional. Este proceso afecta con mayor
frecuencia el rostro y también el tronco y las
extremidades. La erisipela facial en general resuelve
espontáneamente en un periodo de 4 a 10 días. En
cambio, una lesión del tronco o extremidades puede
Fig. N° 104. Faringoamigdalitis con pústulas amigdalares (Fuente:
Prats, 2012). afectar grandes zonas y terminar fatalmente.
b) Escarlatina. La erupción aparece casi siempre al e) Celulitis. Afecta a la capa subcutánea adiposa y con
segundo día de la enfermedad como un eritema difuso frecuencia se desarrolla en un punto donde se ha
con puntos rojos que desaparecen con la presión. Se producido un trauma o una lesión de la piel; la piel
localizan en la región superior del torax y luego se afectada, se vuelve dolorosa, roja, caliente e hinchada.
extienden al resto del tronco, cuello y extremidades. La Los pacientes presentan con frecuencia un inicio abrupto
de malestar general, fiebre, escalofríos y cefalea.
87
f) Miositis. Son infecciones de los tejidos profundos El modo principal de transmisión es el contacto
subcutáneos y músculos, caracterizadas por necrosis directo con pacientes enfermos o portadores mediante las
extensa de progresión rápida, gangrena de la piel y gotitas de saliva que se eliminan al hablar, al toser y
estructuras vesinas. estornudar o el contacto de la piel (principalmente
manos).
g) Sepsis puerperal. Comienza como una infección de la
mucosa vaginal, útero como consecuencia de un parto o
de un aborto y puede evolucionar desde la infección Diagnóstico de laboratorio
uterina hasta una peritonitis produciendo en algunos La muestra requerida se obtiene por hisopado
casos cuadros de septicemia. El sídrome clásico se faringoamigdalar. La identificación del agente causal se
caracteriza por escalofríos, fiebre, enrojecimiento facial, realiza mediante diferentes procedimientos laboratoriales
distención abdominal con sensibilidad pelviana y que se especifican a continuación:
secreción vaginal sero-sanguinolenta.
h) Fiebre reumática. Es una enfermedad inflamatoria no

supurativa que generalmente se presenta en niños entre 6
y 15 años y suele aparecer durante los meses más fríos
del año, clínicamente se presenta con carditis, poliartritis,
nódulos cutáneos y fiebre, generalmente estos síntomas
aparecen de 1 a 5 semanas después de que la infección
original haya desaparecido. Es una complicación o
secuela tardía de una faringitis estreptocócica de tipo
autoinmune. Los mecanismos por los cuales se produce
esta enfermedad es producto de la acumulación de Ags
bacterianos en las articulaciones y el corazón y como
Fig. N° 105. Toma de muetra por hisopado faríngeo (Fuente: Koneman,
consecuencia la formación de anticuerpos contra ellos, 2008).
originando complejos antígeno-anticuerpos, que a) Examen directo. Una vez tomada la muestra, en lo
producen una reacción inflamatoria local que da origena posible se debe procesar inmediatamente. Con ella se
a esta enfermedad. realiza un frotis en portaobjeto, se deja secar a
Los Ags estreptocócicos dan una reacción temperatura ambiente, se fija a la llama del mechero, se
cruzada con componentes del músculo cardiaco que tiñe con Gram y se observa al microscopio. En el examen
induce a la producción de Ac que posteriormente se observa cocos grampositivos (escasos, moderados o
lesionan el corazón. abundantes, juntamente con leucocitos), con la
característica morfología de agrupación (en pares,
i) Glomerulonefritis. Es una enfermedad inflamatoria pequeñas o largas cadenas).
aguda del glomérulo renal. Se caracteriza anatomica y
patológicamente por lesiones glomerulares difusas y
clínicamente por edema, hipertensión, hematuria y
proteinuria y fiebre leve. La glomerulonefritis es una
secuela tardia de la infección faríngea o cutánea
producida por Streptococcus pyogenes. El probable
mecanismo de patogénesis de la glomerulonefritis
posestreptococica se relaciona con el fenómeno Fig.N° 106. Tinción de gram, donde se observa cocos grampostivos en
inmunológico que involucra la reacción de complejos cadenas cortas y largas (Fuente: Nath, 2007).
inmunes presentes en el glomérulo. Constituidos por
b) Cultivo. Los estreptococos precisan de medios de
productos estreptocócicos tales como proteinasas o
cultivo enriquecidos, debiendo usarse de preferencia el
estreptoquinasas y antígenos glomerulares que activan el
agar sangre, así mismo es indispensable el dotarles de 5 a
complemento y producen una reacción cruzada de
10% de CO2 a través del método de la vela, que consiste
anticuerpos que se manifiesta por una reacción
en colocar dentro de un recipiente cualquiera, la caja petri
inflamatoria con daño glomerular.
con la siembra ya verificada, debiendo situar una vela
NOTA: En las enfermedades postestreptocócicas no supurativas el
encendidad sobre esta y dejando arder la misma 15
Estreptococo no se encuentra en el lugar de la lesión, sino que ésta, se segundo para luego cerrar herméticamente con su
origina por unos complejos que se producen como consecuencia de la respectiva tapa; de esta manera la vela aún arderá unos
interacción entre antígenos y anticuerpos (reacciones de segundo más, apagándose luego cuando tengamos
hipersensibilidad).
aproximadamente 10% de CO2 en el interior del
recipiente.
Epidemiología
88
Colonias de bordes redondeados, superficie

convexa, aspecto húmedo y brillante, consistencia
cremosa o mucoide, de 1 a 2 mm de diámetro, blanco
pálidas con zona de beta hemólisis alrededor de las
colonias (anillo de color amarillo pajizo intenso).
c) Pruebas bioquímicas. La principal prueba bioquímica

para la identificación del S. pyogenes es la de bacitracina.
Cuadro N° 18. Pruebas bioquímicas

Fig. N° 107. Frasco de boca ancha con tapa a rosca o sierre hermético
que proporiona una admosfera de 5 a 10% de CO2 al interior del frasco BACTERIA HEMÓLISIS BACITRACINA SXT
(método de la vela).
S. pyogenes Beta S R
Todo este conjunto es incubado a 37°C durante 24 horas,
tiempo después se observa el siguiente desarrollo:
Cuadro N° 19. Prueba de la bacitracina

La bacitracina es un antibiótico 1.- Con un asa bacteriológica Reacción positiva: presencia de un

que inhibe el desarrollo de realizar una siembra masiva en halo de inhibición alrededor del disco
algunos estrepreptococos a bajas agar sangre. de cualquier tamaño (Izq.).
concentraciones (0,04 unidades), 2.- Colocar el disco de bacitracina Reacción negativa: No existe
esta propiedad se usa para (0,04 unidades) en el centro de la presencia de halo alrededor del disco
diferenciar a los estreptococos B- siembra. (Der.).
hemolíticos del grupo A. 3.- Incubar a 37°C durante 24
horas.
La prueba del cotrimoxazol (SXT) se realiza para Estreptococo grupo B (Streptococcus

descartar a algunos estreptococos B- hemolíticos de los agalactiae)
grupos C y F que son sensibles a la bacitracina pero
también al cotrimoxazol. La prueba se realiza junto con Los estreptococos Beta-hemolícos con antígeno
la bacitracina en la misma placa colocando disco de de Lancefield grupo B se denominan Streptococcus
trimetroprim-sulfametoxazol (1,25ug/23,75ug). Los agalactiae. Son causa importante de infección neonatal
resultados se leen igual (por la presencia o no de un halo severa, caracterizada por sepsis, neumonía y meningitis.
de inhibición alrededor del disco de SXT). La colonización densa con este microorganismo del
tracto genital y gastrointestinal inferior de la mujer
Tratamiento embarazada constituye un riesgo de enfermedad neonatal,
Aun no han sido comunicadas en el mundo, que puede irrumpir precozmente en los primeros días
cepas de Streptococcus pyogenes resistentes a la después del parto (24 hrs. a 7 días) frecuentemente con
penicilina; por lo tanto estos microorganismos siguen neumonia. La aparición tardía usualmente ocurre una
siendo sensible a la penicilina G. A los pacientes semana a 3 meses después del parto, caracterizada
alérgicos a éste antibiótico se les puede administrar predominantemente por meningitis, bacteriemia y sepsis.
eritromicina o clindamicina, siempre de acuerdo a los La infección ocurre por ascenso de la bacteria a la cavidd
resultados del antibiograma. amniótica seguida de amnionitis y aspiración por el feto
del fluiodo amniótico infectado. Alternativamente el
Prevención recién nacido puede aspirarlo en el momento del parto. El
Las infecciones hospitalarias son producidas, índice de transmisión vertical durante el parto en una
habitualmente, por microorganismos del propio paciente, madre colonizada es de 50%, de ellos el 2% desarrollan
o de otros pacientes. La prevención de la transmisión infección sintomática.
entre pacientes y el personal médico se logra mediante el Las infecciones maternas se manifiestan con
lavado de manos, uso de guantes y barbijo. bacteriemia (sobre todo tras cesaria), abortos sépticos,
endometritis y sepsis puerperal que pueden ser mortales.
En adultos no gestantes se manifiesta con infección
89
urinaria, infección de la piel, bacteriemia, neumonía o realiza un frotis en portaobjeto, se deja secar a
meningitis sobre todo en paciente mayores a 65 años con temperatura ambiente, se fija a la llama del mechero, se
diabetes mellitus o inmunodeprimidos. tiñe con Gram y se observa al microscopio. En el examen
El polisacárido capsular del Streptococcus agalactiae es se observa cocos grampositivos: escasos, moderados o
el principal factor de virulencia evita la fagocitosis abundantes, agrupados de dos en dos o en pequeñas
favoreciendo su multiplicación y diseminación. cadenas.
Epidemiología
La infección por este estrepcococo es la
principal causa bacteriana de enfermedad y muerte en
neonatos en EEUU. Es frecuente su presencia
asintomática en portadores en los tractos gastrointestinal
y genital. Hasta un 40% de mujeres gestantes porta el
Streptococcus agalactiae en su tracto genital y
aproximadamente la mitad de las madres colonizadas
transfieren el microorganismo a sus hijos. Los riesgos
maternos asociados con enfermedad grave en neonatos Fig.N° 109 Tinción de Gram de una muestra de hisopado vaginal: cocos
grampositivos agrupados de dos y en pequeñas cadenas.
son: Partos prematuros, ruptura de membrana 18 horas o (Fuente: Nath, 2007).
más antes del parto, fuerte colonización materna vaginal
más de 105 UFC/ml y anticuerpos maternos contra el b) Cultivo. Los estreptococos precisan de medios de
estrepcoco deficientes en el momento del parto. cultivo enriquecidos, debiendo usarse de preferencia el
agar sangre, así mismo es indispensable el dotarles de 5 a
Diagnóstico de laboratorio 10% de CO2 a través del método de la vela. Todo este
Se realiza un hisopado rectovaginales de conjunto es incubado a 37°C donde al cabo de 24 horas
embarazadas, sangre y LCR de neonatos para S. veremos el siguiente desarrollo:
agalactiae. La identificación del agente causal de ésta Colonias de bordes redondeados, superficie
infección, se realiza mediante los siguientes convexa, aspecto húmedo y brillante, consistencia
procedimientos laboratoriales que se especifican a cremosa o mucoide, de 1 a 2 mm de diámetro, blanco
continuación: pálidas con zona de beta hemólisis alrededor de las
colonias (anillo de color amarillo pajizo intenso).
c) Pruebas bioquímicas. Además de la beta hemólisis el

S. agalactiae es CAMP tes (+) e hidrolisa el hipurato.

BACTERIA HEMÓLISIS CAMP HIDRÓLISIS
DE
HIPURATO
Fig. N° 108 Toma de muestra por hisopado vaginal
S. Beta + +
agalactiae
a) Examen directo. Una vez tomada la muestra, en lo

posible se debe procesar inmediatamente. Con ella se
90
Cuadro N° 21. Prueba del CAMP tes

Sinergismo en la producción de 1.- Hacer en el centro de una placa Prueba positiva: desarrollo de
hemolisis en agar sangre entre el de agar sangre de cordero una sola colonias con presencia de
S. agalactiae (productor de estria, en línea recta con S. aureus. hemólisis aumentada en la
CAMP proteína: fosfolipasa) y el 2.- Sembrar en la misma placa cercanía entre ambas estrías en
S. aureus (productor de dos estrias del estreptococo forma de punta de flecha.
hemolisina) al ser sembrados en la problema, en forma perpendicular Prueba negativa: no hay presencia
misma placa. a la anterior, pero sin tocarla. de este fenómeno.
3.- Incubar a 37°C.24 horas. Estrias de S.
agalactiae
Estria de S.aureus
Cuadro N° 22. Prueba de la hidrólisis del hipurato

Algunos estreptococos producen la enzima hipuricasa, 1.- Sembrar un tubo de caldo Reacción positiva:
capaz de hidrolizar el hipurato en sus componentes con 1% de hipurato de sodio, precipitado persistente
glicina y ácido benzoico. Para la prueba se incuba la con el organismo a investigar e en la mezcla que se
bacteria sospechosa en caldo de hipurato de sodio, incubar a 37°C durante 48 torna de color azul con
luego al agregar al cultivo cloruro férrico, se forma un horas. el agregado de la
precipitado entre la glicina, el ácido benzoico y el 2.- Centrifugar el caldo y ninhidrina.
clururo férrico, luego cuando añadimos ninhidrina al transferir 0,8 ml de
precipitado la glicina reacciona con la ninhidrina sobrenadante claro a un tubo
formando un color purpura en el caldo. limpio
3.- Añadir al tubo 0,2 ml de
Hipuricasa bacteriana + Hipurato de sodio glicina + Acido revelador: cloruro férrico al 2%.
benzoico
Mezclar bien y leer después de
Glicina + Acido benzoico + cloruro férrico Precipitado
Precipitado + ninhidrina Formación de un color 5 minutos. Observandose un
purpura precipitado en el tubo, luego
añadimos 1 gota de ninhidrina al
sobrenadante para detectar Reaccion negativa: la
glicina libre, lo que da lugar a la mezcla del tubo se
aparición de un color azul del mantiene de color claro.
caldo.
91
Tratamiento infecciones complicadas con bacteriemia. La mayoría de

La penicilina G es el antibiótico de elección. éstas son de origen intrahospitalarios. En general, las
Entre los alternativos se tiene la ampicilina, la bacteriemias enterocócicas son el resultado de la
vancomicina y las cefalosporinas de tercera generación. infección en otros sitios (p.ej., infecciones urinarias, de
La gentamicina se añade con frecuencia en las las vías biliares, gastrointestinales/genitourinarias). Los
infecciones graves, para conseguir un efecto sinérgico.; factores de riesgo para su desarrollo son edad avanzada,
pero siempre en relación a los resultados del inmunosupresión, prematuridad, diabetes, neoplasias,
antibiograma. insuficiencias cardíacas, insuficiencia renal, infeciones
profundas, instrumentación gastrointestinal,
Prevención genitourinaria o del aparato respiratorio previa,
La administración de ampicilina intravenosa en hospitalización prolongado y el uso de antibióticos de
el inicio y durante el parto a las mujeres colonizadas por amplio espectro, que tienen poca o ninguna actividad
el Streptococcus agalactiae, bloquea la transmisión al antienterocócica(p. ej., cefalosporinas)
niño.
Epidemiología
Estreptococos grupo D (Enterococcus) Los enterococos forman parte de la flora normal
gastrointestinal. Las infecciones pueden ocurrir a partir
Antes clasificados en el grupo D Lancefield, de la propia flora endógena y en los pacientes
actualmente separado del género Streptococcus para hospitalizados esta bacteria se puede adquirir de otros
formar un género propio: Enterococcus, agrupa a más de pacientes, o de las manos del personal médico.
20 especies, de las cuales, los más importantes desde el
punto de vista clínico son: Enterococcus faecalis Diagnóstico de laboratorio
asociado a 80-90% a infecciones de humanos por Se trabaja con muestras de orina, exudados
enterococos, Enterococcus faecium se ubica en el purulentos y otras muestras provenientes de sitios
segundo lugar y se aisla en 10-15% de las infecciones y anatómicos donde asientan las lesiónes. La identificación
otros de menor importancia. del agente causal de la infección se realiza mediante
Son cocos grampositivos que se agrupan en diferentes procedimientos laboratoriales que se
pares o encadenas cortas, que se distinguen de los especifican a continuación:
estreptococos por su capacidad para crecer a 10°C y
45°C, por su crecimiento en presencia de NaCl al 6,5%, a) Examen directo. Una vez tomada la muestra, se
por su crecimiento a un ph de 9,6, su capacidad para realiza un frotis en portaobjeto, secar, fijar, teñir con
hidrolizar esculina en presencia de bilis al 40% y la Gram y observar al microscopio. En el examen se
producción de pirrolidonil arilamidasa (PYR). observa cocos grampositivos con la característica
morfología de agrupación (escasa, moderada o
abundante, junto a leucocitos).
b) Cultivo. Estas bacterias precisan medios de cultivo

enriquecidos, debiendo usarse de preferencia el agar
sangre, así mismo es indispensable el dotarles de 5 a 10%
de CO2, a través del método de la vela. Todo este
conjunto es incubado a 37°C donde al cabo de 24 horas
veremos el desarrollo de las siguientes colonias:
Fig. N°110. Cocos grampositivos en pares y pequeñas cadenas: E.
faecalis (Fuente: Nath,2007).
 Colonias alfa hemolíticas. Colonias de bordes
redondeados, superficie convexa, aspecto
Rol patógeno húmedo y brillante, consistencia cremosa, de 1 a
Algunas cepas de E. faecalis producen una 2 mm de diámetro, blanco grisáceas opacas con
citolisina/hemolisina que actua sobre los eritrocitos zona de alfa hemólisis alrededor de las colonias
humanos, conejo, bovino pero no de ovejas. Producen (anillo difuso de color verde).
una proteína de superficie que permite evadir al
 Colonias gamma hemolíticas. Colonias de
enterococo de los anticuerpos.
bordes redondeados, superficie convexa, aspecto
Los Enterococcus causan infecciones urinarias
húmedo y brillante, consistencia cremosa, de 1
complicadas, bacteriemia, endocarditis, infecciones
mm de diámetro, translúcidas o ligeramente
intraabdominales y pelvianas, infecciones de heridas y
grisáceos sin zona de hemólisis.
tejidos blandos, sepsis neonatal y, pocas veces,
b) Pruebas bioquímicas. La identificación de
meningitis. Las infecciones urinarias constituyen las
Enterococcus se basa principalmente en las
infecciones enterococicas más frecuentes e incluyen
cistitis, pielonefritis, prostatitis, abceso perinéfrico e
92
pruebas de bilis esculina, desarrollo en caldo Cuadro N° 23. Pruebas bioquímicas

con Cl Na al 6,5% y PYR. BACTERIA HEMÓLISIS NACL PYR BILIS
AL ESCULINA
6,5%
Enterococcus Alfa o + + +
gamma
Cuadro N° 24. Prueba de Bilis Esculina

Esta prueba se basa en la capacidad de 1.- Inocular la superficie Prueba positiva: desarrollo de colonias en la
ciertas bacterias, en particular los del pico de flauta del superficie y ennegrecimiento del medio.
estreptococos del grupo D y especies de medio de bilis esculina Prueba negativa: desarrollo de colonias en la
Enterococos, de hidrolizar la esculina con colonias de superficie del medio con ausencia de
en presencia de bilis al 4%. estreptococos a investigar ennegrecimiento o ausencia de desarrollo.
Las bacterias al hidrolizar las esculina 2.- Incubar 24- 48 horas a
producen glucosa y esculetina, la 37°C y observar.
esculetina reacciona con una sal de
hierro (iones férricos) que contiene el
medio, formando un complejo negro
que tiñe el medio de cultivo.
Esculina Hidrólisis Glucosa +
esculetina
(Glucósido)
Esculetina Complejo negro
4fe+
DESARROLLO EN CALDO CON CON 6,5% DE ClNa

Algunos cocos grampositivos catalasa negativos tienen la capacidad de desarrollar en caldo infusión de corazón
con altas concentraciones de ClNa.
Resultado. Reacción positiva: Desarrollo en caldo con 6,5% de ClNa después de 48 horas de incubación a 37°C.
Cuadro N° 25. Prueba PYR

El sustrato utilizado para la 1.- Se prepara una suspensión de Prueba positiva: aparición de un color rojo en
prueba PYR es la l-pirrolidonil- la bacteria en estudio en solución el tubo o en el disco
B-naftilamida. Este compuesto fisiológica estéril, con una Prueba negativa: aparición de un color
es hidrolizado por una turbidez equivalente a 2 de la amarillo, naranja o rosado.
aminopeptidasa específica escala Mc Farland, en tubo de
bacteriana. La hidrólisis del hemólisis.
sustrato por esta enzima libera 2.- Se agrega a la suspensión un
b-naftilamida libre, que se disco PYR.
detecta por el agregado de 3.- Incubar 2 horas a 37°C.
N,N- 4.- Agregar al tubo dos gotas del
dimetilaminocinnamaldehído. revelador (N,N-
Este reactivo de detección se dimetilaminocinnamaldehído) y Reacción positiva (prueba directa en disco).
une a la naftilamida libre para mezclar.
formar un compuesto de color
rojo.
Tratamiento o ampicilina y un aminoglucócido. El surgimiento de

En general, las infeciones graves asociadas con resistencia elevada a los aminoglucócidos no son
enterococos se tratan con una combinación de penicilina destruidas por la actividad sinérgica del agente B-
93
lactámico junto con un aminoglucósido, la vancomicina Los neumococos son diplococos ovalados o
se convirtió en un agente de primera línea para esta lanceolados, grampositivos, poseen cápsula que envuelve
bacteria. a cada diplococo. Son inmóviles, no forman esporas,
desarrollan a un pH de 7,2 - 7,6 una temperatura optima
Prevención de 37°C. Son aerobios, sensible a las sales biliares, la
Por la rápida resistencia adquirida a los optoquina y son alfa hemolíticas.
antibióticos por esta bacteria, es fundamental prevenir la
diseminación de estas cepas; para lo cual es importante
su rápida detección en laboratorio, con la utilización de
técnicas perfectamente estandarizadas. Es recomendable
limitar la diseminación hospitalaria, con rigurosas
medidas de aislamiento de los pacientes infectados con
enterococos.
Streptococcus pneumoniae
Fig.N°111. Tinción de Gram: cocos grampositivos agrupados de dos en
Caracteristicas generales y morfología dos, con presencia de cápsulas: S. pneumoniae
S. pneumoniae, es un habitante del tracto (Fuente: Nath, 2007).
respiratorio superior del hombre (60%) y causa infección
primaria, en las vías aéreas superiores y otras áreas Rol patógeno
cercanas a ella. El S. pneumoniae o neumococo es causa El rol patógenos de los neumococos esta dada
frecuente de neumonía extrahospitalaria, meningitis, por algunos componentes estructurales del
otitis media y sinusitis. Con menos frecuencia causa microorganismo como su capsula.
endocarditis, artritis séptica y peritonitis.
Cuadro N° 26. Factores de virulencia del S. pneumoniae

FACTORES DE MECANISMOS DE ACCIÓN
VIRULENCIA
Cápsula
Compuesta por un polisacárido de alto peso molecular, es el principal factor de virulencia que
protege a la bacteria de la fagocitosis. El efecto antifagocitario ocurre por interferencia con el
efecto opsonizante de C3b y anticuerpos dirigidos contra antígenos de la pared bacteriana, y que
la cápsula cubre totalmente a la bacteria e impide la unión de dichos anticuerpos o de los
componentes del sistema del complemento con los receptores de la superficie bacteriana.
Neumolisina Son proteínas citoplasmáticas que actúan cuando se lisan los neumococos. La neumolisina
incrementa el proceso inflamatorio por su capacidad de activar el complemento y destruye el
epitelio del tracto respiratorio
a) Neumonia. A partir de la colonización de las vías Las bacterias encapsuladas aspiradas hacia el
respiratorias altas, las bacterias deben ser capaces de pulmon, tienen un encuentro inicial con los macrófagos
adherirse a las células epiteliales del tracto respiratorio alveolares que los fagocitan escasamente, debido a la
superior. Sin embargo los anticuerpos IgA secretorios protección de la cápsula, entonces proliferan en los
con especificidad de serotipo capsular, producidos por las pulmones produciendo una reacción inflamatoria con la
células epiteliales respiratorias, impiden la adherencia y liberación de neumolisina, que son citotoxicas para las
colonización bacterianas. Entonces la proteasa IgA células pulmonares y la patología transcurre de la
generada por las bacterias, degrada los anticuerpos IgA y siguiente manera: Producto de la proliferación bacteriana
facilita la colonización de la mucosa. Las adhesinas existe movilización de PMN, produciendo una
neumocócicas se unen a los receptores de las células congestión vascular y extravasación de eritrocitos que
epiteliales, luego, estas bacterias son aspiradas hacia el ocupan los espacios alveolares formándose un exudado
pulmon del paciente, cuyas funciones del moco y cilios inflamatorio. Lo cual produce dolor toráxico, fiebre
están alteradas, por factores predisponente como: niños elevada, escalofríos mialgias, tos y expectoración
menores a dos años, individuos mayores a 50 años, saguino-purulenta.
infecciones virales previas, alcoholismo, tabaquismo,
diabetes, desnutrición y defectos en la fagocitosis.
94
médula ósea) la meningitis puede llevar a schock séptico

y muerte. Como producto de un traumatismo craneal los
microorganismos pueden ingresar al LCR desde una
sinusitis, mastoiditis y otitis media.
Fig. 112. Patogenia de la neumonía: los neumococos adheridos a la

mucosa de las vías respiratorias superiores son aspiradas hacia los
alveolos pulmonares donde se producirá la reacción inflamatoria
causando la neumonía (Fuente: www.encorewiki.org).
Fig.N° 113. .Meningitis por S. pneumoniae (Fuente:
b) Meningitis. Frecuente en lactantes y niños pequeños y www.encorewiki.org).
adultos mayores. En general, la meningitis por S.
pneumoniae, ocurre como resultado de la siembra durante
la bacteriemia y los microrganismos probablemente c) Otitis media aguda. Existe una alta frecuencia de
entran por el plexo coroideo para colonizar las meninges. otitis media aguda en niños pequeños, que pueden ser
Los síntomas de presentación en alrededor del 60 – 70% causa de alteraciones auditivas permanentes, en estos
de los adultos son: fiebre, rigidez de la nuca y cambios pacientes, la membrana timpánica aparece inflamada,
del sensorio. En los lactantes y niños pequeños: llanto, inmóvil y abonbada con formación de exudado purulento
irritabilidad, malestar general, alimentación insuficiente, que frecuentemente comienza en una faringitis (viral o
vómitos, y convulsiones, se desarrolla un abonbamiento bacteriana), con el ingreso de los nemococos a la trompa
de la fontanela solo en un tercio de estos niños. En de eustaquio y alcanzar el oído medio, que puede
ancianos, en inmunodeprimidos o en ambos produce complicarse con una perforación de la membrana
somnoliencia y poca fiebre, sin embargo en pacientes timpánica, mastoiditis, parálisis del nervio facial,
inmunosuprimidos (p.ej., pacientes con trasplante de bacteriemia y artritis séptica.
Fig. N° 114. Aspecto del oído medio normal (izq.) y del oído medio durante una otitis media (der.). Notese la inflamación de la trompa de Eustaquio y su
obstrucción por secreción purulenta, que presiona sobre el tímpano y provoca su distensión hacia afuera (flecha). (Fuente: Sordelli, 2007).
d) Endocarditis. El tejido cardíaco es una localización

frecuente de la infección neumocócica diseminada, con
predilección de la válvula aórtica, donde se observa
abscesos perivalvulares, con una tasa de mortalidad de
hasta un 50%.
Epidemiología
La colonización es más frecuente durante los
meses de invierno, en situaciones de hacinamiento, como
ocurre en guarderías, prisiones, y tras las infecciones
Fig. N°115. Una gripe viral de la faringe condiciona al oido medio a víricas respiratorias. S. pneumoniae, es la causa más
una infección bacteriana (Fuente: Struthers, 2005).
frecuente de neumonía extrahospitalaria y afecta a
95
personas de cualquier edad. Las bacterias que causan - Estreptococos alfa hemolíticos. Colonias de bordes
colonización, se transmiten de persona a persona redondeados, superficie convexa, aspecto húmedo y
mediante gotas de saliva en aerosol. Los transtornos que brillante, consistencia mucoide, de 1 a 3 mm de diámetro,
predisponen a la infección por S. pneumoniae son blanco grisáceas opacas con zona de alfa hemólisis
aquellas que comprometen el sistema inmunológico alrededor de las colonias (anillo difuso de color verde) o
como el alcoholismo, enfriamiento, enfermedades francamente verduscas.
debilitantes, etc.
Diagnóstico laboratorial
Las muestras frecuentemente requeridas son:
esputo, sangre, LCR, exudados purulentos e hisopado
faringoamigdalar. La identificación del agente causal de
la infección se realiza mediante diferentes
procedimientos laboratoriales que se especifican a Fig. N°116. Colonias alfahemolíticas de consistencia mucoide,
continuación: caracterizan el desarrollo del S. pneumonia (Fuente: Nath,2007).
a) Examen directo. Una vez tomada la muestra, en lo

posible se debe procesar inmediatamente. Con ella - Estreptococos gamma hemolíticos. Colonias de
realizar frotis, tinción de Gram y observar al bordes redondeados, superficie convexa, aspecto húmedo
microscopio. Se observan diplococos grampositivos con y brillante, consistencia cremosa, de 1 mm de diámetro,
presencia de cápsulas, éstas últimas, se las distingue translúcidas o ligeramente grisáceos sin zona de
como halos claros alrededor de los diplococos al mover hemólisis.
el micrométrico del microscopio. Los criterios para
considerar significativo el frotis de esputo teñidos con c) Pruebas bioquímicas. La identificación del S.
Gram, son aquellas en los que se observa la presencia de pneumoniae se realiza mediante las pruebas de la
menos de 10 células epiteliales planas por campo, más de optoquina y la solubilidad de bilis.
25 polimorfonucleares por campo y el microorganismo
predominante (neumococos). Cuadro N° 27. Pruebas bioquímicas
BACTERIA HEMÓLISIS OPTOQUINA SOLUBILI
b) Cultivo. Los estreptococos precisan de medios de DE BILIS
cultivo enriquecidos, debiendo usarse de preferencia el S. Alfa S +
agar sangre, así mismo, es indispensable el dotarles de 5 pneumoniae
a 10% de CO2 a través del método de la vela. Todo este Grupo Alfa o R -
conjunto es incubado a 37°C, donde al cabo de 24 horas, viridans gamma
veremos el siguiente desarrollo:
Cuadro N° 28. Prueba de la optoquina

La optoquina (clorhidrato de 1.- Sembrar con asa bacterilógica Reacción positiva: halo de inhibición alrededor
etildihidrocupreina), inhibe 3 o 4 colonias de neumococos en del disco (P) de 16 mm o más.
selectivamente el desarrollo del la mitad del agar sangre. Aquellas cepas de estreptococos alfa
Streptococcus pneumoniae a 2.- Colocar un disco de optoquina hemolíticos que presentan un halo de inhibición
muy bajas concentraciones: en el centro de la superficie menor a 14 mm deben ser evaluados con la
5ug/ml sembrada. prueba de solubilidad en bilis.
3.- Incubar a 37°C 18 a 24 horas, Reacción negativa: No hay halo.
en una admósfera de 10% de CO2.
Prueba positiva de optoquina
96
Cuadro N° 29. Prueba de solubilidad en bilis

La prueba se basa en que las Procedimiento en tubo: Reacción positiva: existe un aclaramiento
sales biliares, como el 1.- Preparar una suspensión en 3 visible del tubo N° 1
desoxicolato de sodio lisan ml de solfis, del estreptococo Reacción negativa: no hay cambio en la
selectivamente a los S. desarrollado, 24 horas antes en turbidez de la suspensión del tubo N°2.
pneumoniae agar sangre, de la misma,
traspasar a 0.5 ml a dos tubos de
hemólisis.
2.- Agregar 0,5 ml de
desoxicolato de sodio al 10% al
tubo N° 1
3.- Agregar 0,5 ml de solución
fisiológica esteril al tubo N° 2
4.- Agitar ambos tubos e incubar
a 35°C durante 3 horas
Cuadro N° 30. Prueba de solubilidad de bilis en placa de agar sangre

1.- Colocar una gota de desoxicolato de Positivo (soluble en bilis): Las
Fundamento sodio al 2% sobre unas pocas colonias colonias sobre las cuales se ha
bien aisladas del microorganismo por colocado el reactivo desaparecen y
El mismo del anterior probar desarrollado en agar sangre de dejan una zona parcialemente
cordero. hemolizada.
2.- Sin invertir la placa incubar a 35 °C Negativo (insoluble en bilis): Las
durante 30 minutos. colonias sobre las cuales se ha
colocado el reactivo permanecen
intactas y visibles.
Tratamiento trato genital femenino, sin embargo, bajo ciertas

El antibiótico de elección ha sido la penicilina, circuntancias de oportunidad se las encuentra causando
pero desde hace unos años, el S. pneumoniae, ha diferentes enfermedades infecciosas. Su nombre deriva
aumentado gradualmente su resistencia a este antibiótico, del latin viridis que significa verde (generalmente
por lo que los médicos suelen realizar un tratamiento producen colonias con halos verdes). Estas bacterias no
empirico, usando una cefalosporina de tercera generación forman parte de la clásica seroagrupación de Lancefield;
(cefotaxima) más un macrólido o una de las nuevas el estudio de su RNAribosómico a permitiso
quinolonas (levofloxacino). Frente a las cepas de subdividirlos en los subgrupos: mutans, mitis, salivarius
neumococos fuertemente resistentes se puede administrar y anginosus.
vancomicina. Sin embargo siempre es recomendable Dentro el subgrupo mutans, el Streptococcus
utilizar el perfil de susceptibilidad del antibiograma para mutans, es el principal responsable de las caries dentales.
realizar el tratamiento. El Streptococcus mitis es un patógeno
importante de la endocarditis bacteriana sub aguda
Prevención (coloniza frecuentemente la válvula del corazón). Siendo
La prevención de esta enfermedad en los un habitante normal de la boca puede por ejemplo por
pacientes de riesgo elevado se puede realizar mediante manipulación de los dientes ingresar al torrente
vacunación. Se administra una vacuna polivalente que circulatorio y acontonarse en la válvula cardíaca
contiene los polisacáridos capsulares de los 23 tipos más causando una alteración en su funcionamiento,
frecuentes de neumococos a niños y adultos. posteriormente la formación de absceso y diseminación
de la infección hacia miocardio, produciendo
inmunocomplejos que al acantonarse en los riñores son
Estreptococos del grupo viridans causa frecuente de glomerulonefritis, así también la
formación de émbolos infectados que pueden alojarse en
Los estreptococos del grupo viridans, son el cerebro con consecuencias graves.
habitantes normales de la cavidad oral, tracto intestinal y
97
Fig. N° 117. Los estrepococos del grupo viridans: S. mitis, S anginosus pueden infectar la válvula del corazón (a) y de aquí afectar otros órganos (b y c).
(Fuente: Struthers, 2005).
El Streptococcus salivarius, es causante El diagnóstico e identificación de este grupo, se basa

frecuente de septicemias en pacientes neutropénicos. en las pruebas bioquímicas en relación con S.
Los del subgrupo anginosus son causantes pneumoniae. Lo mismo que el tratamiento y prevención.
frecuentes de faringitis, endocarditis e infecciones
purulentas de diversa localización.
Cuadro N°31. Resumen pruebas bioquimicas de los estreptococos
Bacterias Hemólisis Bacitracina SXT CAMP Hidrólisis Bilis NaCl PYR Optoquina Solubilidad
de esculina al de bilis
hipurato 6,5%
S. pyogenes Beta S R - - - - + R -
S. agalactiae Beta R R + + - V - R -
Enterococo Alfa o R R - - + + + R -
gamma
Spneumoniae Alfa V S - - - - - S +
Grupo Alfa o V S - - - - - R -
viridans gamma
RECUADRO N° 8 DIAGNÓSTICO MÉDICO DE NEUMONIA

En el caso de la neumonia frecuentemente el paciente yá llega al consultorio médico con un diagnóstico propio. Cuando el médico le
pregunta ¿que es lo que tienes? el paciente responte inmediatamente: tengo costado, que es un termino popular para denominar a la
neumonía. Entonces el médico confirmará éste diagnostico con la sintomatología aguda de fiebre, tos, expectoración
mucusanguinolenta, dolor toráxico agudo al respirar, el antecedente de que el paciente habría sufrido un enfriamiento corporal 24 – 48
horas antes y los resultados del laboratorio clínico respectivamente.
98
CAPITULO 10
COCOS GRAMNEGATIVOS
GÉNERO NEISSERIAS
Características generales y morfología entidades clínicas muy diferentes. N. gonorrhoeae causa

Dentro de la familia Neisseriaceae, existen dos gonorrea, una de las enfermedades de transmisión sexual
géneros de importancia médica; Neisseria y Moraxella. de mayor incidencia en el mundo, mientras que N.
Las especies más importantes del primero son: N. meningitidis es el agente causal de meningitis purulenta
gonorrhoeae y N. meningitidis y del segundo Moraxella epidémica.
catarrhalis (antes llamada Branhamella catarrhalis). El
género Neisseria, está integrado por cocos gramnegativos
que típicamente se agrupan de a pares con sus lados
adyacentes aplanados, dando la característica forma de
“riñón o granos de café”. Miden de 0,6 a 1um de
diámetro, se encuentra generalmente en forma
Fig. N° 118. Diplococos gramnegativos (Fuente: Nath, 2007).
intracelular en muestras purulentas (dentro los PMN);
Las saprófitas son extracelulares. Todas las especies de
Neisseria son oxidasa y catalasa positivas, son inmóviles, Clasificación
no forman esporas a veces encapsuladas. Desarrollan en 1.- Neisseria gonorrhoeae
una admósfera de CO2 de 5 a 10%, un pH 7,2 – 7,6 y una 2.- Neisseria meningitidis
temperatura 35 -37°C y son aerobios estrictos, fermentan 3.- Moraxella catarrhalis
varios carbohidrados con formación de ácido pero no de 4.- Otras Neisserias
gas. Son destruidos rápidamente por la desecación, la luz
directa del sol y el calor húmedo, mueren a 60°C en Rol patógeno Neisseria gonorrhoeae
pocos minutos. La patogenia esta dada por algunos componentes
Las dos especies de importancia médica: N. estructurales de la Neisseria (cuadro N° 32).
gonorrhoeae y N. meningitidis están genéticamente
bastante relacionadas, pero son responsables de dos
Cuadro N° 32. Factores de virulencia o patogenia de la N. Gonorrhoeae.

COMPONENTE MECANISMOS DE ACCIÓN
ESTRUCTURAL
Fimbrias Estructuras filiformes, constituidas de pilina, con función de
adherencia en las células epiteliales del huésped.
Proteinas de membrana externa Contribuyen en la adherencia de las fimbrias, favorece la unión
(PME) entre gonococos para formar microcolonias en el tejido,
previene la fusión del fagolisosoma del PMN.
IgA proteasa Degrada a la IgA presente en la superficie de las mucosas,
protegiendo al microorgansimo de la acción de estos
anticuerpos IgA.
Lipooligosacáricos (LOS) Responsables de la reacción inflamatoria intensa.
Patogenia de la Neisseria gonorrhoeae, inicia la alrededor de las mismas, permite a N. gonorrhoeae entrar
infección mediante la colonización del epitelio mucoso: en las células epiteliales por endocitosis, donde es
uretra, conductos y glándulas periuretrales de ambos transportada por una vacuola a la base de estas células, y
sexos, como también la mucosa cervical, conjuntival y de aqui por exocitosis, penetra al tejido subepitelial,
rectal, que actuan como puerta de entrada. En ellas, se donde inicia una reacción inflamatoria, con reclutamiento
unen a las células epiteliales cilíndricas por medio de sus de abundantes polimorfonucleares que los fagocitan. Los
fimbrias o pilis y de sus proteínas de membrana externa gonococos fagocitados liberan lipooligosacáridos (LOS),
(PME). Los anticuerpos que elabora el huésped frente a que producen mayor reacción inflamatoria, con
las fimbrias y a las PME, no protegen la infección liberación de factores de necrosis tumoral (TNF) en el
gonocócica, ya que la IgA proteasa gonocócica, hidroliza lugar, causando daño tisular y provocando microabsceso
los anticuerpos IgA de la mucosa del huésped e inhibe la submucosos y exudado de pus con diversa sintomatología
opsonización necesaria para la destrucción del de acuerdo al tejido afectado.
microorganismo mediante fagocitosis. En consecuencia,
la invasión local a través de las células epiteliales o
99
en el 70 - 90% de mujeres con cervicitis. No infecta la

vagina. La detección de gonorrea no complicada en la
mujer es difícil, por que en el 50% de los casos es
asintomática. Cuando están presente los sítomas son:
exudado endocervical, dolor al orinar, anormalidades
menstruales y dolor abdominal.
b) Faringitis.- Generalmente es asintomática y es

adquirida mediante contacto sexual oral.
c) Proctitis.- Puede adquirir por contacto sexual anal o

más comúnmente por diseminación desde el tracto
genital. Los síntomas son iguales que los que sufre el
hombre.
Fig. N° 119. Los gonococos se adhieren a las células epiteliales de la
mucosa uretral, cervical y otros mediante sus fimbrias para luego d) Salpingitis.- El gonococo puede ascender desde el
colonizar estos tejidos produciendo una reacción inflamatoria.
(Fuente: Struthers, 2005). tracto genital bajo, hacia las trompas de Falopio y causar
1. Gonorrea en el paciente masculino endometritis, salpingitis, abscesos ováricos y peritonitis,
afección llamada en su conjunto enfermedad inflamatorio
a) Uretritis.- Es la manifestación más común en el
pélvico (EIP). Sus síntomas son dolor abdominal,
hombre y la adquiere por contacto sexual vaginal o
exudado endocervical, fiebre y leucocitosis. Entre el 10 y
anorectal. También puede adquirir de una faringe
20% de las mujeres con gonorrea desarrollan EIP. La
infectada. El riesgo para un hombre de adquirir gonorrea
recuperación del gonococo en cultivo mejora cuando la
luego de un contacto con una mujer infectada es del
muestra se toma poco tiempo después de la aparición de
20%, pero para la mujer a partir de un hombre es del
los síntomas. Como complicación de la salpingitis puede
40%. El periodo de incubación es de 2 a 4 días, pero
ocurrir infertilidad por oclusión de las trompas de
puede llegar a ser de 10 días. Los síntomas más comunes
Falopio.
son, disuria y exudado purulento uretral. Pueden ocurrir
infecciones asintomáticas en el 1 – 3% de los casos.
e) Absceso en glándulas de Bartholino.- Es la segunda
complicación más frecuente de la gonorrea en la mujer.
b) Faringitis.- Se adquiere luego de un contacto
Los abscesos se pueden detectar por palpación en la parte
orogenital. Generalmente es asintomática (90% de los
posterior de los labios mayores.
casos) y desaparece espontáneamente en 3 meses. Los
pacientes pueden desarrollar faringitis o amigdalitis. La
f) Infección gonocócica diseminada.- Luego de una
incidencia de faringitis es mayor entre los homosexules,
infección en las mucosas genitourinarias, rectal o
ya que se adquire con más frecuencia por contacto sexual
faríngea, puede ocurrir una bateriemia y producirse una
oral con un hombre que con una mujer.
infección gonocócica diseminada (IGD) tanto en el
hombre como en la mujer. Entre el 0,5 y el 3% de los
c) Proctitis.- Manifestación clínica frecuente en
pacientes con gonorrea no tratada desarrollan IGD. Se
homosexuales masculinos. Los síntomas son: exudado
manifiestan principalmente por artritis aguda y
rectal mucopurulento, tenesmo, constipación y prurito.
dermatitis. La artritis generalmente involucra 1 o 2
articulaciones pricipalmente rodilla y muñeca. Cuando el
d) Prostatitis.- La prostatitis crónica bacteriana puede
recuento de leucocitos en el líquido sinovial es menor a
ser causada por varias bacterias, entre ellas N.
20.000/mm3 los cultivos para N. gonorrhoeae
gonorrhoeae. El diagnóstico microbiológico es muy
difícilmente son positivos. Sin embargo la recuperación
difícil ya que el porcentaje de recuperación del gonococo
mejora cuando el recuento es mayor a 40.000/mm3 el
en fluido prostático es muy bajo.
hemocultivo es positivo solo en un 20-30% de los casos
en paciente con IGD. La dermatitis es una manifestación
e) Epididimitis.- Ocurre como complicación de una
común de la IGD. Se observa en las extremidades
uretritis, causada por distintas bacterias, incluido el
superiores (cerca de la pequeñas articulaciones de la
gonococo. Es generalmente unilateral y más frecuente en
mano) comenzando con pequeñas pápulas o petequias
menores de 35 años. En el 50% de los casos puede haber
que rápidamente se transforman en pustulas.
exudado uretral. Se presenta con severo dolor escrotal e
Frecuentemente las lesiones sangran o se necrotizan. La
inguinal.
observación de la tinción de Gram y cultivo de la lesiones
son generalmente negativos para N. gonorrhoeae.
2. Gonorrea en pacientes femeninos
a) Cervicitis.- Se manifiesta con exudado mucopurulento
en el canal endocervical. La infección uretral se presenta
100
3. Gonorrea en el paciente neonatal presencia de típicas bacterias intracelulares. Como

a) Conjuntivitis.- Existen tres modos de transmisión de complicación puede producirse úlceras en la córnea y
N. gonorrhoeae de la madre infectada al neonato: a) en el pérdida de la visión.
útero, b) durante el parto y c) en el periodo post-parto. La
manifestación clínica más frecuente es la conjuntivitis. b) Sepsis y artritis.- La infección gonocócica de la
La incidencia de la infección en recién nacidos expuesto, conjuntiva en el neonato no tratado puede alcanzar otras
que no han recibido profilaxis es del 2 al 30%. Esta mucosas y aún deseminarse y producir artritis séptica.
incidencia disminuye al 0 – 5% cuando reciben Los síntomas aparecen entre 1 y 4 semanas luego del
tratamiento con un colirio de nitrato de plata. Sin nacimiento, afectando varias articulaciones. Cualquier
embargo, puede ocurrir una conjuntivitis química como infección gonocócica en niños antes del año de edad se
reacción al colirio. Por este motivo y porque la causa más considera adquirida no sexualmente de sus familiares en
frecuente se debe a S.aureus y Haemophilus spp. Se un ambiente de bajas condiciones higiénicas. El
recomienda el uso uso tópico de tetraciclina o diagnóstico de gonorrea en niños de dos a 10 años puede
eritromicina. La conjuntivitis ocacionada por N. deberse a abuso sexual por un adulto infectado, la
gonorrhoeae produce intensa inflamación en ambos ojos, enfermedad también puede transmitirse por contacto con
con exudado y abundantes leucocitos PMN. Una tinción ropas húmedas que han sido contaminadas por otros
de Gram de una muestra de este exudado revela la miembros de la familia.
Fig.N° 120. Principales patologías causadas por N. gonorrhoeae: a) cervicitis, b) uretritis masculino,
c) uretritis femenina, proctitis y faringitis (Fuente: Struthers, 2005).
Epidemiología En cambio el 95% de los varones presentan síntomas

La incidencia de gonorrea es alta sobre todo en agudos.
poblaciones densas con bajos niveles educativos y
socioeconómicos y sexualmente activos, particularmente Diagnóstico de laboratorio
entre adolescentes y adultos jóvenes con múltiples Las muestras con las que se trabaja, para aislar
parejas sexuales y que no usan métodos protectores al agente causal de la gonorrea, meningitis e infecciones
durante el contanto sexual y que además ejercitan la por moraxella, básicamente son: Secreción uretral,
prostitución o toman contacto con personas que la secreción de canal endocervical, mucosa anorrectal, orina
ejercen. En los últimos años declinó la prevalencia de (primera micción), orofaringe, secreción de glándulas de
gonorrea, particularmente entre la comunidad bartolino, aspiración del endometrio, sangre, líquidos
homosexual y bisexual, en respuesta a las articulares, hisopado faríngeo.
recomendaciones sobre el SIDA. Los factores que pueden
contribuir a la persistencia y diseminación de la gonorrea a) Examen directo. La tinción de Gram de la secreción
se dan por las infecciones asintomáticas, particularmente uretral, usalmente muestra leucocitos polimorfonucleares
en mujeres (50% de asintomáticas) abundantes, con diplococos gramnegativos intra y
extracelulares. Raramente se observan otras bacterias en
101
estos extendidos. En el hombre este resultado tiene un selectivos, como el Thayer Martin. Se debe proveer de
98% de sensibilidad y un 100% de especificidad para 10% de CO2 (método de la vela) y la incubación se
gonococos. En cambio en la mujer tiene un 60% de ajustará a 37°C, debiendo realizar la lectura a las 24
sensibilidad ya que en la mucosa vaginal existe flora horas de incubación.
bacteriana como veillonella spp, moraxella spp, que Observandose colonias de bordes redondeados,
también son diplococos gramnegativos, por lo que, debe superficie covexa, aspecto húmedo y brillante,
confirmarse el hallazgo mediante cultivo. En las muestra consistencia mucoide, de 1 a 2 mm de diámetro,
anorrectales, endocervicales, faríngeas pueden estar tranlúcidos (como gotitas de rocio), o a veces ligéramente
colonizadas por microorganismos con morfología grisáceas, no hay hemólisis alrededor de la colonia.
parecida por lo que se recomienda también confirmar con
cultivo.
Fig. N° 122. Colonias blanco grisáceas de 2 mm de diámetro en agar

Fig.N° 121. Tinción de Gram: diplococos gramnegativos intracelulares chocolate, pertenecientes a N. gonorrhoeae
y extracelulares (Fuente: Nath, 2007). (Fuente: Koneman, 2008).
b) Cultivo. Procesar inmediatamente la muestra, pues las c) Pruebas bioquímicas. Las más importantes pruebas
neisserias poseen enzimas autolíticas (indofenoloxidasa) para la identificación de N. gonorrhoeae son la oxidasa, y
que las autodestruyen. Realizar el frotis y cultivo la fermentación de azúcares.
simultáneamente.
Estos microorganismos son exigentes y precisan de
medios de cultivo enriquecidos (agar chocolate) o

BACTERIA CATALASA OXIDASA AGAR GLUCOSA MALTOSA SACAROSA
NUTRITIVO 35°C
N. gonorrhoeae + + - + - -
Cuadro N° 34. Prueba de la Citocromo oxidasa

Los citocromos son proteínas que forman parte 1.- Sobre un portaobjeto Reacción positiva: aparición rápida
de la cadena respiratoria de algunas bacterias colocar el disco de de una coloración azul violácea
aerobias y anerobias facultativas, actúan oxidasa (papel filtro encima del disco.
transfiriendo electrones (H) al oxígeno, con las impregnado con
formación de agua. Esta prueba sirve para diclorhidrato de
determinar la presencia o ausencia de estas tetrametil para
proteínas en las bacterias. Por ejemplo las fenilendiamina al 1%) y Reacción negativa: Ausencia de
enterobacterias no presentan estas proteínas humedecer con agua color.
por lo tanto son oxidasa negativas en cambio destilada estéril
las Neisserias, Pseudomonas, Campylobacter 2.- Colocar 1 o 2
son oxidasa positivas. colonias desarrolladas
En esta prueba se utiliza colorantes reactivos en agar chocolate con
como el dihidrocloruro de tetrametil-para- un aplicador de madera
fenilendiamina que sustituye al oxígeno como o asa de platino.
aceptor artificial de electrones en la
respiración; en este estado reducido el
colorante es incoloro; sin embargo en presencia
del citocromo oxidasa de la bacteria y el
oxígeno admosférico el colorante se oxida y
forma azul de indofenol.
102
Cuadro N° 35. Fermentacion de azúcares

Esta prueba determina la 1.- Inocular por picadura con asa Reacción positiva: presencia de color
capacidad que tienen las en hilo una o dos colonias amarillo del medio de cultivo, indica
Neisserias de fermentar algunos desarrolladas en cultivo de 24 fermentación del azúcar.
hidratos de carbono (azúcares) horas a cada uno de los tres Reacción negativa: no hay
contenidos en un medio de medios de cultivo con azúcares fermentación del azúcar, no hay cambio
cultivo, produciendo ácido o diferentes: Glucosa, maltosa y de color en el medio de cultivo (se
ácido con gas visible. Este medio sacarosa. mantiene de color rojo).
de cultivo tiene como indicador 2.- Incubar a 37°C durante 24
al rojo fenol, el cual es rojo en horas.
pH alcalino y amarillo cuando el
pH es menor a 6,8 (ácido).
Tratamiento de aquí pasan a través de las células epiteliales hasta la

Durante mucho tiempo la penicilina, fue el submucosa, y luego al torrente sanguíneo, la capsula
antibiótico de elección para el tratamiento de la gonorrea. polisacárida es antifagocitaria, lo que protege a la
A fines de la década del 70, surgieron en todo el mundo bacteria de la fagocitosis; luego se produce la invasión
cepas de N. gonorrhoeae productoras de penicilinasa. del SNC mediante las posibles siguientes vías: a)
Estas cepas producen B-lactamasa, por lo que transporte intercelulas a través de la ruptura de la barrera
actualmente se usa una cefalosporina de tercera hematoencefálica causada por PMN, b) Transporte en el
generación como la ceftriaxona para su tratamiento, interior de las células fagocíticas como los monocitos, c)
aunque siempre es conveniente basarse en los resultados Transporte intercelular dentro de vacuolas de las células
del antibiograma (donde se ensayan generalmente: endoteliales. La agresión al SNC se debe a la respuesta
penicilina, cefotaxima, ciprofloxacina y tetraciclina). inflamatoria mediada por las citocinas proinflamatorias:
factor de necrosis tumoral (TNF), interleucina (IL-1) e
Prevención IL-8 que son activadas por las endotoxinas asociada al
La mejor medida para evitar la transmisión de LOS. El aflojamiento de las uniones intercelulares
esta enfermedad es la abstención del coito. Los permite que los neutrófilos, la albúmina y otras proteínas
preservativos de latex utilizados en forma correcta plasmáticas alcancen el LCR. El resultado final es el
brindan una protección contra la transmisión y cuadro clásico de la meningitis bacteriana, con un
adquisición de la gonorrea. No hay ninguna vacuna. elevado número de bacterias y neutrófilos, y con
concentraciones incrementadas de proteínas. El
metabolismo de la glucosa por parte de los leucocitos y
Neisseria meningitidis de las bacterias causa una disminución significativa de la
Meningitis concentración de glucosa en LCR. Todo este proceso
provoca fiebre, edema cerebral y la presión intracraneal
La invasión de los meningococos a las células elevada, con cefalea intensa y rigidez de nuca, nauceas y
mucosas, ocurre por un mecanismo similar al observado vómitos.
con los gonococos, por su parecido y componente En otros pacientes, la infección afecta sólo al
estructural: como fimbrias, proteínas de membrana torrente sanguíneo (meningococemia), en el que los
externa, IgA proteasa, lipooligosacárido con el microorganismos se multiplican en el mismo, con
aditamento de que los meningococos presentan además extrema rapidez y alcanzan concentraciones en sangre
una cápsula que les permite resistir la fagocitosis y superiores a las de cualquier otro patógeno sanguíneo.
multiplicarse en el medio. Los pacientes con meningococemia fulminante presentan
La enfermedad invasiva se produce tras la habitualmente niveles sanguíneos elevados de TNF e IL-
colonización de la nasofaríngea humana (hábitat natural) 1. En la mayoría de casos de miningococemia aparecen
por los microorganismos. Los miningococos se fijan lesiones cutáneas hemorrágicas (petequias y púrpura) en
selectivamente a las microvellosidades del epitelio la piel.
columnar no ciliado mediante su pili y la ayuda de su Las siguientes figuras muestran los 5 pasos con
proteasa de IgA, colonizan el tracto respiratorio superior, los que los meningococos llegan al LCR:
103
Los miningococos que llegaron a la sangre, se adhieren

a la pared capilar, traspasan ésta y se introducen en el
Los macrófagos locales son estimulados por los
LCR en cantidades pequeñas.
productos de la destrucción de las bacterias con la
producción de TNF y de IL-1
1 2
El TNF, IL-1 y IL-8, aumentan la expresió de la Los neutrófilos se adhieren al endotelio y se

selectina de las células endoteliales y las integrinas de introducen en el LCR. La rotura de la barrera
los neutrófilos. hematoencefálica permite la entrada de albúmina
al LCR. 4
3
Ahora el LCR contiene bacterias, neutrófilos y proteínas en

cantidades importantes y una disminución de la glucosa.
5
Fig.N° 123. Proceso de invasión de los meningococos al LCR (Fuente: Struthers, 2005).
Epidemiología ambientes cerrados. La transmisión sería a través de

La meningitis meningocócica tiene distribución aerosoles de secreciones respiratorias eliminadas por la
mundial y su aparición varía, desde casos esporádicos en tos o estornudos, o por contacto salivar o a través de
escuelas, residencias universitarias o instalaciones objetos inanimados (vasos, cubiertos, etc).
militares, hasta epidemias comunitarias. Se ha
comprobado una baja tasa de portación de 5%, cifra que Diagnóstico de laboratorio
se incrementa al final del invierno y principios de la Una de las principales muestras con las que se
primavera, y en comunidades cerradas. N. meningitidis, trabaja, es el LCR.
sobrevive solo durante periodos muy cortos en el medio
ambiente y el hombre es el único huésped conocido. Por a) Examen directo. El LCR debe centrifugarse a 2000
lo tanto el estado de portación nasofaríngea del adulto es RPM durante 5 minutos, y con el sedimento realizar la
fundamental en la transmisión del miningococo; desde siembra y la tinción de Gram; observándose al
donde el microorganismo se disemina rápida y fácilmente microscopio diplococos gramnegativos intracelulaes.
al resto de grupo familiar o a individuos dentro de
104
b) Cultivo. Estos microorganismos comparten las

mismas características de cultivo y desarrollo de colonias
con las otras neisseiras (recordar lo anteriormente leído).
c) Pruebas bioquímicas. La oxidasa y la fermentación

de azúcares son también las pruebas empleadas para el
diagnóstico de N. meningitidis.
Fig.N° 124. Tinción de Gram (sedimento del LCR), donde se observan

cocos gramnegativos intracelulares (Fuente: Nath, 2007).
Cuadro N° 36. Pruebas bioquimicas

Bacteria Catalasa Oxidasa Agar nutritivo 35°C Glucosa Maltosa Sacarosa
N. menigitidis + + - + + -
Tratamiento cardiopulmonar. M. catarrhalis es causa importante de

El tratamiento de elección para las infecciones exacerbación de neumonía en pacientes con enfermedad
meningococicas es la penicina G. algunos antibióticos pulmonar obstructiva crónica.
alternativos son la cefotaxima o ceftriaxona y el
cloranfenicol. La actividad antimeningocócica de la Diagnóstico de laboratorio
penicilina G es exelente y puede penetrar a través de la Una de las principales muestras con las que se trabajan es
meninges inflamadas. La resistencia por B-lactamasa es el obtenido por hisopado faringeo.
todavía escasa.
a) Examen directo. Realizar el frotis y tinción de Gram
Prevención con la muestra obtenida por hisopado faríngeo, observar
Existe vacunación contra esta enfermedad. al microspio diplococos gramnegativos generalmente
abundantes y extracelulares juntamente con leucocitos.
Moraxella catarrhalis
b) Cultivo. Directamente con el hisopo sembrar en agar
El microorganismo en principio llamado sangre, chocolate. Estos microorganismos comparten las
Neisseria catarrhalis, luego Branhamella catarrhalis y mismas características de cultivo y desarrollo con las
ahora Moraxella catarrhalis, es un diplococo otras neisserias.
gramnegativo, oxidasa y catalasa positivo, comensal del Las moraxellas desarrollan colonias de bordes
tracto respiratorio superior, y en ocaciones del trato redondeados, superficie covexa, aspecto húmedo y
genital femenino. Ha despertado interés en los últimos brillante, consistencia cremosa, de 1- 2 mm de diámetro,
años como pátógeno del tracto respiratorio de pacientes las colonias son generalmente blancos grisáceos opacos y
inmunosuprimidos y hospitalizados. Puede producir lisos. No producen hemólisis.
sinusitis, faringitis, laringitis infecciones
broncopulmonares, septicemia y endocarditis. Se la
BACTERIA CATALASA OXIDASA AGAR
reconoce también como agente importante de otitis media NUTRITIVO
aguda. 35°C
M. catarrhalis + + +
a) Otitis media.- Aproximadamente el 80% de los niños
experimentan un episodio de otitis media antes de los tres
años de vida. Para el diagnóstico de los casos de otitis
media crónica o recurrente se trabaja con muestras Tratamiento
obtenidas por timpanocentesis. Los principales agentes En la actualidad el 90% de las cepas de
etiológicos de otitis media y crónica son H. influenzae, S M.catarrhalis produce B-lactamasa. La mayoría de los
pneumoniae y M. catarrhalis. aislamientos en laboratorio son sensibles a amoxicilina-
clavulánico, cefalosporinas de tercera generación,
b) Infecciones respiratorias bajas.- Los pacientes que eritromicina, tetraciclina y cotrimoxazol.
desarrollan una infección respiratoria baja por M.
catarrhalis, lo hacen porque presentan una condición
predisponente. La más frecuente es la enfermedad
105
Cuadro N° 38. Resumen de pruebas bioquimica de las neiserias

BACTERIA Catalasa oxidasa Agar nutritivo glucosa Maltosa Sacarosa
35°C
N. gonorrhoeae + + - + - -
N. menigitidis + + - + + -
M. catarrhalis + + + - - -
106
CAPITULO 11
BACILOS GRAM NEGATIVOS
ENTEROBACTERIAS Y OTROS RELACIONADOS
Características generales de las proporción en la flora normal (fuera del intestino) de

enterobacterias individuos hospitalizados, particularmente en aquellos
Las enterobacterias son bacilos gramnegativos, con enfermedades graves y debilitantes. Entre las
pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae, son las enterobacterias la Escherichia coli es la especie más
bacterias que se recuperan con mayor frecuencia en las comúnmente encontrada en la flora normal, le sigue, en
muestras clínicas, estos microorganismos se encuentran orden de importancia las klebsiellas, Enterobacter y
ampliamente distribuidos en la naturaleza: tierra, agua, Proteus; los géneros Salmonella, Shigella y Yersinia son
sobre las plantas, y como lo indica el nombre de la generalmente patógenas y no forman parte de la flora
familia, en el tubo digestivo de seres humanos y los normal.
animales. Aunque habitualmente forman parte de la flora La clasificación taxonómica de las
normal del colon, debe aclararse que solo un pequeño enterobacterias es muy complicada, según el manual de
porcentaje de la flora intestinal son de la familia determinaciones bacteriológicas de Bergey, agrupa a las
Enterobacteriaceae. En efecto más del 99% de dicha enterobacterias en géneros, especies, grupos y biogrupos
flora está compuesta por bacterias anaerobias, la mayoría reconociendo a más de 20 géneros y más de 100 especies,
de ellas pertenecientes al género Bacteroides. Las de los cuales solo alrededor de 49 especies son
enterobacterias pueden ser encontradas como flora considerados patógenos para el hombre. Nosotros
normal transitoria en la piel (especialmente en la región consideraremos principalmente la clasificación de
perineal), tracto genital femenino y, raramente, el tracto géneros y especies más importantes desde el punto de
respiratorio superior. Estas bacterias aparecen en mayor vista médico clínico.
Cuadro N° 39. Clasificación de géneros y especies de enterobacterias de importancia médica

GENEROS ESPECIES DE IMPORTANCIA MÉDICA
Escherichia coli, blattae, fergusonii, hermanii y vulneris.
Enterobacter aerógenes, cloacae, agglomerans y otros.
Klebsiella pneumoniae, oxitoca, ozaenae, rhinoscleromatis.
Shigella Serogrupos: A(dysenteriae),B(flexneri) C(boydii) y D(sonnei).
Salmonella Antes conocidas como especies: Typhi, paratyphi, choleraesuis,
enteritidis, actualmente se conocen como serotipos.
Proteus Vulgaris, mirabilis, penneri, myxofaciens.
Morganella Morganii y subespecies.
Providencia Stuartii, rettgeri, alcalifaciens, rustigiani y heibachae.
Citrobacter Freundii y otras especies.
Serratia Marcescens y otros.
Caracteristicas morfológicas y estructurales

de la enterobacterias
La familia Enterobacteriaceae está formada por
bacterias, en forma de bacilos, gramnegativos de 0,4 a
0,6 um de ancho y 2 a 4 um de largo, con lados paralelos
y extremos redondeados, pero varía de tal manera que
puede encontrarse desde formas cocobacilares hasta
largos filamentosos. Las cepas móviles tienen flagelos
peritricos y la mayoría presenta fimbrias sobre su
superficie. No forman esporas, algunas presentan
cápsula, son anaerobios facultativos (su metabolismo es Fig. N° 125. Bacilos gramnegativos: Morfología típica de
respiratorio y fermentativo), catalasa positivas, oxidasa enterobacterias (Fuente: Nath, 2007).
negativas y fermentan azúcares.
Estructura antigénica.- La envoltura de las
enterobacterias, poseen una variedad de antígenos,
algunos de los cuales se han utilizado para clasificarlos
en serotipos. Por ejemplo, Salmonella y Escherichia coli
107
han sido clasificadas en cientos de serotipos basados en E. coli también puede ser clasificado por
la presencia de distinta combinación de antígenos. serotipificación mediante antisueros específicos contra
Existen tres grupos de antígenos que se han usado en los antígenos de superficie bacteriana como son: O
estas clasificaciones: somático, H flagelar y K capsular. En la actualidad se
reconocen más de 170 serogrupos diferentes de antígeno
a) Antígenos flagelares “H”.- Son temolábiles, O (resultado de la reacción entre antígenos O somático y
constituido por proteínas que conforman los flagelos. antisuero). La combinación de reactividad entre
antígenos O, H y antisueros específicos define un
b) Antígeno capsular “K”.- Constituido por “serotipo” de un aislado; por ejemplo, E. coli O157:H7
polisacáridos de la cápsula. es un serotipo de una cepa virulenta de E. coli asociado
con colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico.
c) Antígeno somático “O”.- Es termoestable, constituido Recientemente se ha propuesto un nuevo esquema de
por el lipopolisacárido (LPS). La porción constante del clasificación basado en los factores de virulencia o
LPS, que está próximo al lípido A produce ractividad virotipificación. La virotipificación analiza los patrones
cruzada entre las distintas especies patógenas de de adherencia de la bacteria a las células del huésped, los
enterobacterias (E. coli, salmonellas, shigellas efectos de la adherencia sobre las células del huésped, la
Klebsiellas), por ello durante una infección por producción de toxinas y las características de invasividad
enterobacterias se generan anticuerpos dirigidos de la bacteria, según esta característica se conocen 6
mayormente contra el entígeno somático “O” (lo cual no virotipos definidos: E. coli enterotoxigénica (ECET),
muestra una respuesta inmunológica especifica del E.coli enteropatógena (ECEP), E. coli enterohemorrágica
organismo contra alguna de las bacterias arriba (ECEH), E. coli enteroinvasiva (ECEI), E. coli
mencionadas). Existen algunos antígenos que se enteroagregativa (ECEA) y E. coli de adherencia difusa
identifican con nombres específicos con Vi de (ECED).
Salmonella typhi cuya presencia se asocia a virulencia.
Escherichia coli

E. coli es la especie de bacteria recuperada con
mayor frecuencia en los laboratorios clínicos y ha sido
incriminada en enfermedades infecciosas que afectan
casi a cualquier tejido y sistema orgánico humano,
principalmente se encuentra comprometido como agente
causal de infecciones en vías urinarias y la de las heridas,
neumonía en pacientes hospitalizados inmunosuprimidos,
Fig.N° 126. Estructura antigénica de las enterobacterias (Fuente: www
meningitis en recién nacidos, sepsis y shock por sus
higieneialiments.blogspot.com). endotoxinas, además de infecciones gastrointestinales.
Son bacilos gramnegativos rectos de 1 a 1,5 um
de ancho por 2 a 6 um de largo. Se presentan asilados o
Factores de virulencia.- Las enterobacterias poseen en pares y pueden poseer cápsula, como la mayoría de la
ciertos componetes y atributos que les permiten producir enterobacterias son oxidasas negativas, anaerobias
la infección tales como: Fimbrias o adhesinas, capsula, facultativas y fermentan la glucosa, la lactosa y otros
exotoxinas o exoenzimas (hemolisinas), endotoxinas carbohidratos.
(LPS), sideróforos (enterobactina y eubactina: captan el
hierro que necesita la bacteria) y plásmidos (son los que Rol patogeno
transfieren factores de patogenecidad y resistencia a los E. coli, es una bacteria que frecuentemente es
antibióticos de una cepa a otra. aislado en diferentes procesos infecciosos debido a su
amplia distribución en el medio ambiente y su variado
GENERO ESCHERICHIA mecanismo de acción.
Clasificación
El género Escherichia contiene cinco especies,
siendo la principal Escherichia coli. Las otras especies
son E. blattae, E. fergosonii. E. hermannii y E. vulneris.
108
Cuadro N° 40. Factores de virulencia de E. coli

VIRULENCIA
Fimbrias Dos tipos de fimbrias: Tipo 1 y fimbria P, son adhesinas que permiten a
la bacteria adherirse a las células uroepiteliales, seguida de colonización,
daño tisular, invasión y diseminación.
Hemolisina Es una toxina proteica citolítica que tiene capacidad para lisar eritrocitos
contribuye en la inflamación y daño tisular.
Polisacárido K1 Antígeno capsular resiste la fagocitosis e incrementa su virulencia.
Aerobactina Molécula secretada por al bacteria para captar hierro de su medio y
facilitar su desarrollo.
a) Infección urinaria. La infección de las vías urinarias uretra desde la zona perineal se facilita por el roce sobre
por E. coli en varones son poco frecuentes. Existe sin la uretra durante el acto sexual. La micción luego del
embargo ciertas condiciones que la predisponen, como la acto sexual es una medida preventiva eficiente para
compresión uretral por enfermedad prostática, práctica de prevenir la infección urinaria. La E. coli, al estar
sexo anal, pareja con colonización coliforme vaginal, equipada de fimbrias (tipo 1 y fimbrias P), estas, le
infección concomitante (prostatitis, epididimitis). Estos permiten adherirse al uroepitelio, lo que estimula
pacientes no solo pueden sufrir cistitis sino infecciones respuestas inflamatorias locales, incluyendo la secreción
ascendentes como prostatitis y pielonefritis. La cistitis es de interleucina IL-6 y IL-8 que inducen la descamación
una enfermedad bastante frecuente en mujeres de las células epitelilaes locales y la llegada de
sexualmente activas. Los factores de riesgo son aumento polimorfonucleares, que son reclutados para enfrentar la
del pH vaginal con disminución de la flora lactobacilar e bacteriuria. La inflamación piógena local contribuye a los
incremento de la flora coliforme vaginal y meato síntomas y signos de la infección del tracto urinario
urinario, relación sexual, retraso en la micción (ITU). En la ITU no tratada la E. coli, asciende hasta los
(especialmente post-coito), uretra pequeña. Estas urétere y los riñones. El desplazamiento de las bacterias
enfermedades se dan también con cierta frecuencia en en dirección cotraria al flujo urinario es facilitado por sus
niños/as de corta edad (- de 1 año), debido al reflujo flagelos. El polisacárido capsular (antígeno K) evita la
urinario después de la micción. fagocitosis y la destrucción de las bacterias. El LPS
(endotoxina) liberada por las bacterias destruidas y la
b) Cistitis en la mujer en edad fértil.- No hay lugar a hemolisina incrementan la respuesta inflamatoria piógena
duda de que el origen de E. coli es fecal. La bacteria a nivel renal, produciendo lisis celular y daño epitelial,
puede haber ingresado al huésped mucho tiempo antes y donde E. coli capta hierro mediante su aerobactina. En
puede haber estado formando parte de la flora normal por las infecciones graves la respuesta inflamatoria acasiona
un largo periodo. Desde allí la bacteria se disemina hacia fiebre elevada (39°C), escalofríos, dolor localizado en la
áreas contiguas y coloniza la piel, comensando por la región lumbar o parte baja de la espalda. La elevación de
región perineal. Una higiene insuficiente o deficiente de los niveles de proteína C reactiva acompaña con
los genitales contribuye al establecimiento de la flora frecuencia a la leucocitosis por neutrófilos (desviación
circundante. Por ejemplo, la deficiente higiene que a izq.). Si aparecen cilindros en la orina, la infección
veces las niñas hacen con el papel higiénico (de atrás posiblemente sea una pielonefritis (ITUcomplicada). La
hacia adelante), lleva las bacterias entéricas hacia los infección debe confirmarse con un recuento de más de
genitales. En la mujer adulta el ascenso de E. coli por la 100.000 UFC/ml de un urocultivo.
109
Fig.N° 127. Fimbrias o adhesinas de E. coli (Izq.). Cistitis con emisión de orina con leucocitos y bacterias abundantes (Der.). (Fuente: Struthers, 2005).
Epidemiologia multiplicación y d) daño. La caraterística más conservada

La importancia de esta especie como patógeno de las cepas patógenas de E. coli es su capacidad de
urinario radica en que E. coli causa el 90% de todas las colonizar la superficie de la mucosa intestinal a pesar del
infecciones urinarias de individuos con vías urinarias peristaltismo y de la competencia por los nutrientes con
estructuralmente normales. La ITU es mucho más otros miembros de la flora normal del intestino. La
frecuente en mujeres que los hombres, debido a las presencia de fimbrias de adherencia es una característica
diferencias en sus estructuras anatómicas y a las de todas las cepas de E. coli patógenas o no. Sin
modificaciones introducidas por la maduración sexual, el embargo, las cepas de E. coli que son patógenas entéricas
embarazo y el parto. E. coli es un microorganismo poseen antígenos fímbricos especiales que aumentan su
habitual en el intestino grueso y, por tanto, la forma capacidad de colonizar el intestino y le pemiten adherirse
habitual de transmisión es endógena. La inoculación al intestino delgado, sitio anatómico que normalmente no
masiva debida al coito y la obstrucción del flujo de la esta colonizado. Una vez establecida la colonización, las
orina secundaria a cualquier causa subyacente estrategias que exiben las diferentes cepas diarreogénicas
constituyen factores de riesgo importantes para la ITU, de E. coli para aproducir enfermedad son variadas.
las enfermedades prostáticas pueden comprimir la uretra Básicamente pueden describirse tres: a) producción de
obstruyendo la salida normal de la orina. enterotoxinas, b) invasión, c) adherencia íntima a la
célula intestinal y multiplicación.
Tratamiento
Generalmente los médicos utilizan un
antibiótico vía oral como la amoxicilina o una
cefalosporina, o cotrimoxazol, sin embargo por el
incremento de la resistencia a estos antibióticos debemos
regirnos a los resultados del antibiograma donde se
ensayan otros como Ac. Nalidixico, norfloxacino,
nitrofurantoina, etc.
Prevención
En las mujeres sexualmente activas, una medida Fig.N° 128. Colonización, invasión y multiplicación de E. coli en el
preventiva útil es la de realizar la micción tras el coito, lo intestino
que reduce en número de bacterias en la uretra. En los
pacientes hospitalizados se debe limitar o eliminar el uso 1. E. coli enterotoxigénica (ECET).- Las ECET se
de catéteres urinarios, lo que reduciría la incidencia de adhieren al intestino delgado y producen enfermedad no
ITU. por invadir la mucosa sino por la producción de toxinas,
que actúan sobre las células del epitelio intestinal
Diarreas por virotipos de E. coli causando diarrea. Estas bacterias poseen varios tipos de
Las enfermedades causadas por los virotipos de adhesinas como las fimbrias tipo 1, antígenos del factor
E. coli incluyen diarrea, disentería y síndrome urémico de colonización (CFA), pili tipo 4 (largo de 20-40 um)
hemolítico. La estrategia de infección a nivel intestinal responsble de la adherencia entre bacterias.; además
sigue las siguientes etapas: a) colonización de la mucosa elaboran dos tipos de enterotoxinas una termolábil y
intestinal, b) evasión de las defensas del huésped, c) termoestable que inducen a la excreción aumentada de
110
sodio, cloruros y bicarbonato hacia la luz intestinal con el producen la destrucción de las microvellosidades (efecto
consiguiente arrastre de agua semejante a la toxina de adherencia y borrado) similar al producido por ECEP.
colérica. Por lo tanto se observa diarrea acuosa, profusa, Los factores de adherencia esta producido por la proteína
que se autolimita en pocos días cuando aparece una intimina cuyo receptor estaría en las células epiteliales
respuesta inmune antitóxica. El enfermo puede presentar del intestino grueso. Las ECEH elaboran una potente
también fiebre, náuceas, vómitos y dolor abdominal, pero citotoxina semejante a la toxina de Shiga parecida en su
la característica es la pérdida de fluido intestinal. Estas modo de acción a la toxina de Shigella dysenteriae tipo 1.
diarreas normalmente no requieren tratamiento Esta toxina es la responsable del sídrome urémico
antibiótico, sino que se controlan con la administración hemolítico (SUH) que afecta hasta un 10% de los
de sales de rehidratación oral, los casos de deshidratación individuos infectado por ECEH, el serotipo de O157:H7
severa pueden requerir administración parenteral de agua de ECEH es el responsable de SUH.
y electrolitos. Los individuos adultos inmunológicamente El principal reservorio de ECEH es el tracto
vírgenes para ECET son susceptibles a la infección. De intestinal de los bovinos. La transmisión se produce por
ahí que las cepas de ECET son las que causan más la ingestión de una variedad de alimentos contamindos
frecuentemente la diarrea de los viajeros. La diarrea se con la materia fecal de estos animales. La carne vacuna
produce después de ingerir agua y alimentos mal cocida (especialmente la carne picada) es el vehículo
contaminados. La ausencia de diarrea entre los individuos de la transmisión más importante, aunque existen otros
adultos de la zona endémica se debe probablemente a la alimentos como la leche y los jugos de frutas no
inmunidad que estos individuos desarrollan por pasteurizados, los vegetales crudos (no lavados o lavados
exposición contínua al agente intectante. con agua contaminada) que dan origen a brotes
epidémicos. La dosis infectante es muy baja (100 a 200
2. E. coli enteropatógena (ECEP). La enterocolitis microorganismos) lo que explica la transmisión de
causada por ECEP es bastante frecuente. Las cepas de persona a persona observada durante algunos brotes de la
ECEP causan diarrea infantil. No son invasivas, se enfermedad.
adhieren fuertemente a las células de la mucosa del
intestino delgado y producen la destrucción de las RECUADRO N° 9: ECEH serotipo O157:H7
microvellosidades (efecto de adherencia y borrado El síndrome urémico hemolítico (SUH), es una enfermedad
similar a ECEH). Dos adhesinas participan en esta acción trombótica de la microvasculatura renal en la cual la célula
(pili tipo 4 y una proteína externa llamada intimina). La endotelial es el sitio primario de daño, se manifiesta por una
diarrea es producto de la pérdidad de la capacidad de triada de características: 1) aparición de eritrocitos
fragmentados (anemia hemolítica), 2) reducción del recuento de
absorción de la mucosa intestinal por efecto de la plaquetas (trombocitopenia) y 3) insuficiencia renal aguda que
adherencia y borrado de la microbellosidades causada por se pone en evidencia por un índice de filtración glomerular
la bacteria. La diarrea suele esta acompañada de malestar reducido y volumen urinario bajo. El Síndrome urémico-
general, vómitos y frecuentemente fiebre. Las heces hemolítico es la causa principal de insuficiendia renal aguda en
contienen mucus, pero no contienen sangre. Los adultos los niños, en su forma más frecuente este síndrome está
crean inmunidad por lo que tienen baja probabilidad de precedido por una enfermedad diarréica causada por ECEH:
sufrir la enfermedad en cambio los niños de corta edad, serotipo O157:H7. La toxina Shiga producida por esta bacteria
son los que más sufren esta enfermedad, pudiendo la llega a la circulación sanguínea viaja hasta los riñones donde se
diarrea ser prolongada y grave. Las ECEP causan brotes une, penetra a las células endoteliales glomerulares y células
epiteliales tubulares, provocando en ellas la inhibición de
epidémicos en niños de corta edad en países síntesis de proteínas, tumefacción de las células endoteliales y
subdesarrollados. glomerulares, activación de plaquetas y coagulación lo que
provoca el estrechamiento de los capilares por el depósito de
3. E. coli enteroinvasiva (ECEI). Estas cepas colonizan fibrina en estos y en consecuencia la fragmentación de los
el intestino grueso, invaden activamente las células eritrocitos al pasar por estos capilares estrechos, el consumo de
colónicas y se diseminan lateralmente a las células plaquetas causa trombocitopenia, anemia y flujo sanguíneo
adyacentes parecidas a las Shigellas, pero no producen restringido en los riñones, lo que deriva en una insuficiencia
toxinas. La enfermedad se caracteriza por fiebre y por renal. No existe ningún tratamiento comprobado fuera de la
presencia de sangre y pus en la materia fecal. Las asistencia de sostén. El tratamiento antibiótico de los niños con
infección por E. coli 0157:H7 aumenta el riesgo de síndrome
enterocolitis producidas por ECEI no son tan frecuentes urémico-hemolítico y, por lo tanto debe evitarse.
como las producidas por ECET.
4. E. coli enterohemorragica (ECEH). Causa una 5. E. coli enteroagregativa (ECEA). Las cepas de
colitis hemorrágica cuadro caracterizado por diarrea ECEA causan diarreas persistentes en niños. Las
acuosa, dolor abdominal grave, vómitos y presencia bacterias se adhieren entre si formando agrupaciones en
manifiesta de sangre en heces, con muy escasa cantidad o forma de fila de ladrillos característica, se adhieren
ninguna de leucocitos fecales y fiebre escasa o nula. Las también al epitelio del intestino delgado en forma de
cepas de ECEH no son invasivas colonizan el colon parches como ECEP. Las infecciones por ECEA se
transverso y ascendente, se adhieren a los enterocitos y caracterizan por un aumento en la secreción de mucus en
111
le epitelio intestinal. En efecto, las ECEA están coloración verdosa por la presencia de mucus,
literalmente embebidas en una película de mucus: esto generalmente sin sangre ni glóbulos blancos fecales,
explica la prolongada colonización y la persistencia del aunque algunas veces es posible observar leucocitos
cuadro clínico que provocan. escasos indicando cierto grado de inflamación de la
Las cepas de ECEA poseen fimbrias tipo 4 que mucosa.
le permitena dherirse entre las bacterias y entre bacterias
y epitelio, producen una toxina termoestable (EAST) y 6.- E. coli de adherencia difusa (ECAD). Este virotipo
una citotoxina. El mecanismo de producción de la diarrea ha sido uno de los últimos descriptos, aparece dispersa
por la ECEA tiene tres etapas: a) adherencia al epitelio sobre la superficie celular. La interacción de las cepas
intestinal o mucus, b) aumento en la producción de ECAD se caracteriza por la formación de proyecciones
mucus y formación de la película de mucosa conteniendo largas de la membrana de la célula eucariota que
bacterias lo que provoca mala absorción y finalmente envuelven a la bacteria. Provoca diarrea acuosa sin
daño de la célula intestinal por acción de la citotoxina. sangre ni leucocitos fecales.
Produce una diarrea acuosa que puede presentar una
Fig.N° 129. Patogenenia por virotipos de E. coli (Fuente: Sordelli, 2007).
Epidemiologia los síntomas del enfermo a acortar el tiempo de

Las enfermedades diarréicas causadas por los diseminación de la bacteria por heces (según la
distintos tipos de E. coli son muy frecuentes. La puerta recomendación de la OMS el tratamiento antibiótico es
de entrada de E. coli al huésped es la vía oral y el modo con ampicilina, cotrimoxazol y como alternativa
de transmisión es fecal-oral, desde individuos portadores. cloranfenicol y ácido nalidixico según la edad. En la
La ingestión de aguas y alimentos contaminados infección por ECEH no se recomienda el uso de
constituye una causa frecuente de infección. antibióticos porque podría incrementar la expresión de la
toxina Shiga y complicar más el cuadro.
Tratamiento
El tratamiento de los cuadros diarréicos se Prevención
limitan por lo general a la reposición de agua y Evitar la contaminación de la carne, lavar muy
electrolitos por vía oral o parenteral, según la gravedad bién los alimentos de consumo crudo, vigilancia
del cuadro clínico. En el caso de la disentería por ECEI el epidemiológica sobre la población general para detectar
tratamiento antibiótico puede ser aconsejable para aliviar los casos de SHU. Practicar higiene personal y colectiva.
112
Otras enterobacterias con parecido Neumonia por Klebsiella. Las bacterias presentes en el
comportamiento que E. coli tejido orofaringeo del huésped por diferentes factores
Aunque no son tan frecuentes en la clínica como como alcoholismo o durante la introducción del tubo
E. coli, los miembros de los géneros Klebsiella, y endotraqueal, el paciente puede aspirar las secreciones de
Enterobacter, también causan infecciones oportunistas. las vías respiratorias altas y el arrastre de flora faríngea
Estas bacterias se pueden encontrar libres en la naturaleza hacia los pulmones, en ella las Klebsiellas, se adhieren a
y también forman parte de la flora normal del colon las células epiteliales del tracto respiratorio inferior por
humano. Las distintas especies de estos tres géneros, medio de sus adhesinas o fimbrias. La defensa del
poseen características bioquímicas no muy diferentes huésped frente a la invasión bacteriana depende de la
entre sí (por ello se los denomina COLIFORMES). Estas fagocitosis realizada por los macrófagos y
enterobacterias no producen exotoxinas y habitualemente polimorfonucleares, así como del efecto bactericida del
no causan enfermedad a individuos sanos, sino que suero, mediado en gran medida, por las proteínas del
afectan a aquellos que ya tienen una enfermedad de base. complemento. La vía alternativa del complemento que no
No es de extrañar entonces que estas enterobacterias se requiere la presencia de inmunoglobulinas dirigidas
aíslan más frecuentemente de pacientes hospitalizados. contra los antígenos bacterianos, contribuye a la defensa
En ellos éstas enterobacterias son agentes etiológicos del huésped frente a las bacterias invasoras, que pueden
frecuentes de infecciones respiratorias agudas, superar la inmunidad innnata del huésped. Las bacterias
infecciones urinarias y otros. poseen un polisacárido capsular (PSC) que es su
principal determinante de virulencia. Este polisacárido
tiene estructura fibrilar que cubre la superficie de la
GENERO KLEBSIELLAS bacteria, protegiendo así, a las bacterias de la fagocitosis
Morfología por polimorfonucleares. También el PSC inhibe la
Klebsiella es un bacilo gramnegativo activación o captación de los componentes del
encapsulado (por lo que forman colonias mucoides) mide complemento, especialmente C3b, y da lugar a un
1 a 3 um por 0,3 a 0,5 um, inmóvil, no forma esporas, fenómeno de imitación antigénica (apareciendo como un
desarrolla a un pH de 7,2 a 7,4 a una temperatura optima autoantígeno) a través del depósito selectivo de C3b en
de 37°C. Es anerobio facultativo, ureasa positiva e indol las moléculas del LPS. Así, se produce la inhibición de la
negativo. formación del complejo de ataque a la membrana, lo que
impide la lesión de la membrana y la muerte bacteriana.
Clasificación Los infiltrados inflamatorios agudos que pasan
a) Klebsiella pneumoniae desde los bronquios hasta los alvéolos adyacentes a
b) Klebsiella rhinoscleromatis consecuencia de la infección pulmonar por Klebsiella
c) Klebsiella ozaenae inducen generalmente a una bronconeumonía, con
d) Klebsiella oxytoca afectación de uno o más lóbulos. El absceso pulmonar,
e) Otros causado por las bacterias capsuladas en la infección,
Rol patógeno produce la destrucción de los espacios alveolares y dan
Estas especies, principalmente Klebsiella lugar a la formación de cavidades y a la producción de un
pneumoniae, produce infecciones urinarias, infecciones esputo manchado con sangre por la lesión endotelial,
pulmonares, septicemia, meningitis, otitis, infecciones fiebre, tos, dolor toráxico. Esta infección sin tratamiento
intrahospitalarias, y otros. puede producir septicemia y meningitis.
Fig. N° 130. Proceso de infección desde las vías respiratorias altas hasta el parenquima pulmonar por Klebsiella pneumoniae
113
Epidemiología infecciones de heridas y bacteriemia, septicemia,

Uno de los patógenos aislados con mayor meningitis en recién nacidos e infecciones hospitalarias.
frecuencia en la neumonía causada por gramnegativos es
el género klebsiella. Estas bacterias viven en el agua, la Diagnóstico de laboratorio
tierra y, ocacionalmente, en los alimentos pueden formar El diagnóstico microbiológico de las infecciones
parte de la flora intestinal del ser humano con infecciones causadas por enterobacterias en general radica en la
subsiguientes de los tractos urinarios, respiratorio y observación directa de la muestra, el aislamiento del
biliar, y de las heridas. Los alcohólicos y las personas agente etiológico en cultivo y su posterior identificación
con antecedentes de convulsiones muestran un aumento mediante pruebas bioquímicas.
en el riesgo de infección. Klebsiella, es un patógeno
nosocomial frecuente; los pacientes hospitalizados a) Examen directo. Las muestras con las que vamos a
pueden presentar colonización y riesgo de infección trabajar elementalmente son: orina, heces, esputo, sangre
nosocomial. La neumonía por K. pneumoniae, induce una LCR, que deben ser procesadas casi de inmediato,
tasa de mortalidad elevada incluso con el tratamiento teniendo la precaución de refrigerarlas si es que se va a
apropiado. El pronóstico es peor en los pacientes con retardar la labor. La tinción de Gram es poco orientativa
alcoholismo y bacteriemia. sobre el agente etiológico. Se observaran bacilos
gramnegativos (juntamente con leucocitos: escasos,
Tratamiento moderados o abundantes).
Las penicilinas de amplio espectro (p.ej.,
piperacilina y ticarcilina), los aminoglucósidos, las b) Cultivo. Estas bacterias también denominadas
quinolonas y otros antibióticos son útiles en el COLIFORMES (E. coli, Klebsiellas y Enterobacter)
tratamiento de la neumonía causada por Klebsiella. La tienen características parecidas de desarrollo, crecen bien
adquisición de plásmidos transferibles portadores de en los medios de cultivo habituales de aislamiento: como
genes que codifican B-lactamasas de amplio espectro, es MacConkey y otros. Incubado a 37°C en 24 horas
cada vez más frecuente en Klebsiella, ofreciéndoles tendremos el siguiente desarrollo:
resistencia frente a cefalosporinas de tercera generación. Colonias de bordes redondeados, superficie
Estas cepas resistentes se detectan generalmente en las convexa, aspecto húmedo y brillante, consistencia
infecciones hospitalarias. cremosa (francamente mucoide en klebsiella), tamaño
variable entre 2 y 8 mm de diámetro, coloración que va
Prevención de rosado intenso a rojo.
No existen vacunas. La prevención de las
infecciones hospitalarias es difícil; el lavado de las manos
es importante.
GENERO ENTEROBACTER
Morfología Fig. N° 131. Desarrollo de coliformes en McConkey: Son lactosas

Es un bacilo gramnegativo, mide de 0,8 a 3 um positivas (Fuente: Koneman, 2008).
por 0,2 a 0,4 um, son móviles y no poseen cápsula (por lo
que no forman colonias mucoides), desarrolan a un pH c) Pruebas bioquímicas. Las pruebas bioquímicas va
7,2 a 7,5, temperatura 37°C., son anaerobias facultativas. permitirnos diferenciar entre las especies de Escherichia
coli, Klebsiella peumoniae y Enterobacter aerógenes
Clasificación (principales representantes de sus géneros y del rol
a) Enterobacter aerógenes patógeno que producen), ya que como mencionamos
b) Enterobacter cloacae anteriormente, sus características de desarrollo,
c) Enterobacter agglomerous comportamiento bioquímico y rol patógeno tienen alguna
d) otros similitud.
Los medios de cultivos utilizados para la
Rol patógeno identificación de las enterobacterias en general son: TSI,
Se distribuyen ampliamente en el agua, las aguas LIA, CS, SIM y UREA, a estos se agregan otros medios
cloacales, el suelo y las verduras forman parte de la flora diferenciales que se utilizan según las necesidades de
normal del intestino. Son agentes oportunistas de diferenciación entre ellos.
infecciones pulmonares, meningitis, infección urinaria,
114
El procedimiento de pruebas bioquímicas para la

identificación de los coliformes consiste en:
1.- Inocular por picadura y estriado en los medios de TSI
y LIA, por estriado en CS y UREA y por picadura en
SIM y MIO una colonia aislada en cada uno de estos
medios, con la ayuda de un asa en hilo.
2.- Incubar a 37°C durante 24 horas.
3.- Observar los resultados del comportamiento
bioquímico.
Figura N° 132 Bateria bioquímica para identificar coliformes
constituida de: TSI, LIA, SIM,CS Y UREA(caldo). 4.- Identificar las bacterias de acuerdo a los resultados de
este comportamiento.
Cuadro N° 41. Resultado del comportamiento bioquímico de los coliformes

COLIFORMES TSI SIM LIA CS UREA RM RESULTADOS
G L GAS I M
H2S
Escherichia + + ++ + + - + - - +
coli
Klebsiella + + ++ - - - + + + -
pneumoniae
Enterobacter + + ++ - + - + + - -
aerogenes
facultativos, desarrollan en un pH de 6,7 a 7,2 y a una

GENERO SHIGELLA temperatua de 37°C, fermentan glucosa sin producir gas,
no fermentan lactosa. Son bacterias poco activas
bioquímicamente.
Caracteristicas generales y morfología
El género Shigella es el agente etiológico de la
disentería bacilar, infección localizada y ulcerativa del Clasificación
colon. Son microorganismos patógenos primarios que no El género Shigella, esta clasificado en cuatro
integran la flora normal, aunque puede existir un estado grupos en base a sus antígenos somáticos (cadena
de portación de días o semanas de duración en individuos polisacárida específica O de sus LPS):
convalecientes, que no han sufrido la enfermedad, Son 1.- Shigella dysenteriae (grupoA)
bacilos gramnegativos miden de 0,2 a 0,4 um de ancho 2.- Shigella flexneri (grupo B)
por 0,6 a 3 um de largo a veces son cocobacilares. Son 3.- Shigella boydii (grupo C)
inmóviles, no esporulados, no capsulados, anaerobios 4.- Shigella sonnnei (grupo D)
115
Cada uno de estos grupos incluye algunos serogrupos. Rol patógeno

La patología principal que causan estas bacterias
es la disentería bacilar, principalmente producida por
Shigella dysenteriae producto de sus factores de
virulencia.
Cuadro N°. 42. Principales factores de virulencia de las Shigellas.

VIRULENCIA
Genes plamídicos y Proteinas que proporcionan a la bacteria la capacidad de invadir
cromosómicos (invasinas), multiplicarse y diseminare hacia otras células epiteliales
vesinas del intestino y sobrevivir en ellas.
Toxina shiga Con actividad citotoxico, enterotóxico y neurotóxico. Inhibe la síntesis
de proteínas cuando la toxina se une a los ribosomas 60S provocando la
destrucción del epitelio intestinal y del endotelio.
Disenteria bacilar. Un paso crucial en el rol patógeno de

la shigelosis es la invasión de la mucosa del colón. La
invasión implica penetración de la bacteria en las células
epiteliales, multiplicación intracelular, diseminación
intracelular e intercelular y debido a la acción de su
toxina produce muerte celular y necrosis epitelial.
La capacidad invasiva, y de sobrevivencia de
las Shigellas se debe a la presencia de un plásmido, genes
cromosómicos y sideróforos que codifican proteínas
invasivas, con ellas las Shigellas se adhieren a las células
epiteliales del intestino (células M), se internalizan, luego
cuando son endocitadas por una vacuola citoplasmática Fig. N° 133. La patogenia de Shigella spp. Empieza con la penetración
de la célula huésped, las lisan y se multiplican en el de la bacteria en las células epiteliales, multiplicación y diseminación
citoplasma, causando la destrucción de la células intracelular e intercelular, la acción de su toxina produce muerte celular
epitelial, y sobrevivir en el medio extracelular con la y necrosis epitelial, acompañada de reacción inflamatoria y ulceración
de la mucosa con exudado de sangre, pus y moco a la luz intestinal y
captación de hierro necesario, en ella, son fagocitados por pérdida de líquido (Fuente: Giordano, 2006).
macrófagos, de los cuales escapan induciendo apoptosis;
luego continúan con la infección de células adyacentes Los aspectos clínicos sobresalientes de la
con la ayuda de los filamentos de actina que empujan a shigelosis son: al principio las heces son pastosas o
las Shigellas através de la membrana celular. Esta acción acuósas, luego son deposiciones con sangre, mucus y
es potenciada por la producción de la toxina Shiga con elementos inflamatorios, principalmente leucocitos PMN,
actividad enterotóxica, citotoxica y a veces neurotóxica. dolor abdominal, tenesto y prolapso rectal. La fiebre se
Que actúan sobre los ribosomas, al cual se unen para presenta en la mitad de los casos. La enfermedad
inhibir la síntesis de proteínas y llevar a la muerte celular, comienza después de un periodo de incubación de 2 a 3
necrosis epitelial, acompañada de reacción inflamatoria, días, generalmente con diarrea aguda. Después de 24 a 48
descamación, vasculitis y ulceración de la mucosa con horas la disentería disminuye y la enfermedad se
exudado de sangre pus y moco a la luz intestinal. En autolimita. Los pacientes con un buen estado físico se
estas condiciones se inhibe la absorción de agua a través recuperan sin tratamento en una semana. Sin embargo los
del colon. casos graves principalmente causados por Shigella
Por lo general la bacteria no invade los tejidos dysenteriae, pueden alcanzar una mortalidad del 10 al
subyacentes o los ganglios linfáticos regionales y no 20% durante una epidemia principalmente en niños.
alcanza el torrente sanguíneo.
Epidemiologia
Como ocurre con las otras enfermedades
diarréicas, la shigelosis se asocia a pobres condiciones
sanitarias, y malnutrición y hacinamiento. La baja dosis
necesaria para causar la infección (menos de 100 bacilos)
y el corto periodo de incubación favorece la
diseminación de la infección en la población.
116
La shigelosis es endémica en muchas regiones Son bacilos gramnegativos con características

del mundo. Se disemina por excretas de individuos estructurales y metabólicas similares a las otras
infectados, ya sea directamente por vía fecal oral o por enterobacterias. Son móviles por poseer flagelos
alimentos, agua o insectos contaminados. La incidencia peritricos, no forma esporas, no fermentan la lactosa y
es baja en lactantes pero aumenta con el destete y el uso producen ácido sulfídrico, y otras características
de biberones. Las higellas pueden aislarse de la materia bioquímicas. Las salmonellas virulentas poseen cápsula
fecal de individuos no tratados, hasta un mes después de (Vi), resisten varios años en suelos contaminados, varias
haber sufrido la enfemedad, son éstos los individuos los semanas en el agua, algunos días en la verduras y frutas.
que diseminan la enfermedad a través de los alimentos
que manipulan. Las infecciones por S. dysenteriae son
comunes en los países subdesarrollados de las regiones
tropicales y escasos en países con alto estándar de vida,
en estos últimos se aíslan los otros grupos de shigella.
Tratamiento
Los casos leves y autolimitadas, se resuelven Fig. N° 134. Estructura antigénica de las Salmonellas
(fuente: Jawetz, 1985).
favorablemente con la reidratación oral, sin tratamiento
antibiótico. Los casos más graves requieren rehidratación
parenteral y antibiótico; las Shigellas, generalmete son Clasificación
sensibles al cotrimoxazol y ampicilina; sin embargo al Las salmonellas han sido clasificadas en
aparecer cepas resistentes a estos antibióticos serotipos, considerando las diferencias de su estructuras
frecuentemente se recurre al ácido nalidixico y las antigénicas “O” somático (cadena polisacárida O del
quinolonas, siempre en base a los resultados del LPS) y del antígeno “H” (flagelar). De acuerdo a esta
antibiograma. clasificación los serotipos de salmonellas mas
comúnmente aisladas en muestras clínicas son:
Prevención 1.- Salmonella typhi
El medio de prevención de la shigelosis es la 2.- Salmonella paratyphi A, B y C
interrupción de la transmisión fecal-oral. Para ello es 3.- Salmonella enteritidis
necesario el lavado de la manos, lavado de los alimentos, 4.- Salmonella Typhimurium
evitar regar las plantas con aguas servidas, control de los 5.- Salmonella choleraesuis
insectos (moscas), evitar la contaminación de las aguas El antígeno Vi (capsular) pertenece a cepas de alta
de consumo humano, dotación de servicios de virulencia, se encuentra fundamentalmente en el serotipo
alcantarillado y otros. No hay vacuna para esta Typhi y Paratyphi C.
enfermedad.
GENERO SALMONELLAS Rol patogeno

Las salmonellas son causa frecuente de una
variedad de enfermeddes como: la fiebre tifoidea (S.
Caracteristicas generales y morfología typhi), fiebre paratifoidea (S. paratyphi), enterocolitis
Las salmonellas son bacterias virulentas, tanto (conocida como salmonelosis) producida por los demás
para el hombre como para los animales, son causa de serotipos de salmonella. Los factores de virulencia que
morbilidad y mortalidad significativas, unas están exiben las salmonellas son:
comprometidas con infecciones localizadas en la mucosa
gastrointestinal y otras con enfermedades sistémicas
febriles.
Cuadro N° 43. Factores de virulencia y mecanismos de acción de las Salmonellas.
FACTORES DE MECANISMO DE ACCIÓN
VIRULENCIA
Fimbrias Adhesinas que permiten adherirse a las
microvellosidades del enterocito.
Proteinas SPI Facilitan la internalización de las salmonellas al
interior de células entéricas.
Antigeno Vi Capsula polisacárida de la S. typhi que previene
la fagocitosis y facilita la sobrevivencia
intracelular fagocítica.
117
a) Enterocolitis. La cantidad de bacterias necesarias para ancianos o individuos en tratamiento con antiácidos) son
iniciar la infección varía según la especie de salmonella. susceptibles a la infección.
Por lo general la dosis infectiva es alta (105 bacterias) ya El mecanismo de la patogénesis de la enterocolitis por
que gran parte del inóculo ingerido es inactivado por el salmonella se basa en la llegada de las bacterias al
pH del estómago. La dosis infectante disminuye cuando intestino, su adherencia a los enterocitos, el patógeno es
Salmonella spp., es ingerida con alimentos que atraviesan envuelto por una invaginación de la membrana celular y
el estómago rápidamente (líquido por ejemplo) o con posteriormente en una vacuola en el interior de la célula
alimentos que neutralizan el pH gástrico (queso, leche). epitelial y posterior invasión de la mucosa intestinal. Este
Los individuos con pH gástrico aumentado (como los proceso se produce en 4 pasos siguientes:
La bacteria se multiplica en
Las Salmonellas son el interior de la vacuola,
La Salmonella alcanza el La membrana celular envueltas en una vacuola.
epitelio entérico escapa de la vacuola e
proyecta evaginaciones y se invade la mucosa intestinal.
adhiere a las Salmonellas. 3 4
1 2
Fig. N° 135. Patogenia de la Salmonella spp. (Fuente: Sordelli, 2007).
A diferencia de S. typhi, la S. enteritidis no pasa a la Epidemiología

circulación sanguínea, sino que, en el individuo La transmisión de S. enteritidis a humanos se
inmunocompetente, la infección se limita a la submucosa produce generalmente por consumo de alimentos
del epitelio intestinal donde produce la inflamación. contaminados, pero también puede tener lugar la
Precisamente el proceso inflamatorio es la causa de la transmisión interhumana y la transmisión animal
diarrea. Es frecuente que el paciente sufra fiebre, humano. Las fuentes más comunes de S. enteritidis y
náuseas, vómitos, dolor abdominal y escalofrios. Otros otros no tíficos son los huevos, el pollo y la carne vacuna.
síntomas como mialgias y cefaleas pueden estar Estas salmonellas colonizan el intestino de las aves y
presentes. Los síntomas comienzan entre 6 y 48 horas puede contaminar huevos a través de quebraduras en la
después de la ingestión de los alimentos contaminados. cáscara. También es posible la contaminación de huevos
Salmonella spp, es capaz de generar inflamación por vía transovárica en animales con ovarios u oviductos
directamente por acción del LPS, e indirectamente por infectados por salmonella. Son frecuentes las
inducir la liberación de citoquinas. Las proteínas de intoxicaciones por consumo de mayonesa casera
Salmonella spp., que son inyectadas en la célula del preparada con huevos que contienen Salmonella spp., en
epitelio intestinal inducen (además del desarreglo de los su interior. La bacteria no cambia el gusto o el aspecto de
microfilamentos de actina) la secreción de citoquinas y los alimentos que contamina y la enfermedad se declara
otros mediadores de la inflamación que atraen leucocitos usualmente al día siguiente de su ingesta, dependiendo de
PMN. la dosis ingerida.
La característica de la diarrea es variable y va a
depender entre otras cosas de la dosis del patógeno Tratamiento
ingerido y del estado inmunológico y nutricional del Las enterocolitis no complicadas causadas por
paciente. La diarrea se presenta en una forma intermedia Salmonellas spp., rara vez requieren hospitalización o
a la copiosa diarrea acuosa del cólera y la diarrea tratamiento antibiótico. La terapia de reemplazo de
disentérica de la shigelosis (con fuertes dolores líquidos y electrolitos perdidos es suficiente. Sin
abdominales). Las heces pueden contener sangre, embargo en personas con inmunosupresión, los recién
leucocitos y mucus. La infección tiende a ser común, nacidos y las personal mayores de 50 años, se puede
severa y prolongada en infantes, ancianos e individuos administrar antibióticos como las quinolonas siempre en
desnutridos o con ciertas enfermedades de base. En base al antibiograma.
individuos previamente sanos la enfermedad es
frecuentemente autolimitada y no se disemina más alla
del tracto intestinal. Sin embargo la bacteria puede ser Prevención
diseminada por materia fecal al medio ambiente durante Correcta higiene de los alimentos y de las manos,
meses. correcta cocción y conservación de los alimentos,
provisión de agua potable, correcta eliminación de
excretas, provisión de alcantarillado, educación para la
salud y otros.
118
b) Fiebre tifoidea y paratifoidea. La entrada por vía

oral de un número imporante de salmonellas (102
bacterias), una vez que la bacteria supera exitosamente la
barrera ácida gástrica, llega al intestino, se adhiere, se
introduce y atraviesa la célula epitelial de la submucosa,
donde es fagocitada por macrófagos de la placa de peyer
y ganglios linfáticos, sobrevive dentro los macrófagos
gracias a su cápsula (Vi), escapan de ella, para
diseminarse hacia la circulación (periodo de incubación 7
a 14 días). En este periodo se multiplican las bacterias,
habiendo movilización de fagocitos mononucleares, La
primera semana que corresponde al periodo de invasión,
los síntomas son: fiebre, malestar general, constipación,
cefalea anorexia, la fiebre tiene un patrón cíclico
acompañado de la descarga de salmonelas desde los
órganos invadidos hacia la circulación.
En la segunda semana los microorganismos son Fig. N° 136. En la patogenia de la S. typhi, la bacteria llega al intestino,
fagocitados y se multiplican intracelularmente, luego se adhiere, es endocitada por las células epiteliales del intestino,
entran nuevamente a la corriente sanguínea produciendo atraviesa estas células llegando a la submucosa, donde es fagocitada por
bacteriemia llegando a la médula ósea, bazo, hígado y macrófagos de la placa de peyer y ganglios linfáticos, sobrevive dentro
los macrófagos gracias a su cápsula (Vi), escapan de ella, para
por via biliar nuevamente llega al intestino y reinfectan diseminarse hacia la circulación sanguínea (Fuente: Struthers, 2005).
las placas de peyer causando diarrea. En la tercera
semana, si no se ha tratado el paciente aparecen
complicaciones como perforación intestinal, colecistitis o Epidemiologia
formación de abscesos y septicemias, pudiendo producir La Salmonella typhi presenta una distribución
osteomielitis, neumonía, meningitis, infecciones universal. El reservorio es el hombre, la transmisión es a
urinarias, trombocitopenia (lesiones maculopapulares través de la contaminación fecal del agua y de los
eritematosa o manchas rosadas en el torax), etc. alimentos. Prevalente en viajeros y generalmente en
La excreción de salmonella puede continuar por niños pequeños que viven en condiciones de pobreza en
unas pocas semanas, después de la desaparición de los países en vías de desarrollo.
síntomas. Los pacientes se encuentran en el llamado
estado de portador convaleciente. Dado que S. typhi no RECUADRO N° 10. CURIOSIDAD: Maria Tifoidea.
puede ser considerado un miembro de la flora normal por Habia nacido en Irlanda el 23 de septiembre de 1869. Con
apenas quince años decidió probar suerte en los Estado Unidos.
tratarse de un patógeno primario ni que la vesícula biliar Esto, lamentablente se tradujo en un hecho muy desgraciado
pueda tener una flora comesal, se considera que el porque Mary Mallon, además de una exelente cocinera, era
portador en realidad sufre una enfermedad subclínica ¡portadora de Salmonella typhi! En 1903, Mary fue la
(que puede durar más de un año), estos son los responsable de iniciar una epidemia de fiebre tifoidea en Ithaca,
reservorios a partir de los cuales otros individuos se New York, donde se registraron al menos 1300 casos.
infectaran y sufrirán la enfermedad (la erradicación a este Rapidamente cambió de domicilio, pero a la semana de estar en
nivel se torna difícil solo con la colecistectomia por su nuevo trabajo seis de los integrantes de la casa enfermaron y
cálculos biliares es posible eliminar el estado de una niña falleció a causa de la enfermedad. Mary huyó en busca
portación). de un nuevo trabajo. Usando un nombre falso (Mary Brown)
comenzó a trabajar para una familia en la ciudad de New York,
al tiempo, dos de los miembros de la familia sufren la fiebre
tifoidea y uno de ellos muere. Mary abandonó el lugar pero esta
vez el Departamento de salud de la ciudad de New York le
sigue los pasos. Las autoridades sanitarias al encontrarla
trataron de realizarla un coprocultivo, pero ella se negó
rotundamente. Entonces Mary fue llevada por la policía a un
hospital en una isla del East River, donde es obligada a
realizarse los análisis de laboratorio. Los resultados del
coprocultivo confirmaron que Mary era portadora de S. typhi,
presumiblemente por tener colonizada su vesicula biliar. Como
en ese tiempo no se disponía de antibióticos (y no los habría
hasta fines de la década del 1940) la única forma de terminar
con el estado de portación era la remoción quirúrgica de la
vesícula. Mary, quien no creía en los microbios (y menos en los
cirujanos) se negó a la operación y por ello fue sentenciada a
reclusión en el hospital. Tres años después fue liberada bajo la
promesa de que no volvería a trabajar como cocinera. Incapaz
119
de refrenar sus impulsos culinarios, Mary ingresó como GENERO MORGANELLA

cocinera al Hospital de Mujeres Sloane en la ciudad de New
York. El resultado era previsible: veinticinco casos de tifoidea,
ocho fatales. Y la consecuencia inevitable: reclusión perpetua. La especie representativa del género Morganella
Mary Mallon, bautizada Maria Tifoidea murió el 11 de es la M. morganii por estar comprometido con
Noviembre de 1938 pero su recuerdo vive en la mayoría de los infecciones de las vías urinarias, de heridas quirúrgicas y
textos de Microbiología. diarreas. Presenta características, morfológicas similares
a los de la familia Enterobacteriaceae.
Tratamiento
El tratamiento estándar de la fiebre tifoidea GENERO PROVIDENCIA
durante varios decenios ha sido la administración de
cloranfenicol, ampicilina o cotrimoxazol. Durante los Se reconocen actualmente cinco especies de
últimos años han aparecido cepas resistentes por lo que Providencia: P. alcalifaciens, P. stuartii. P. rettgeri, p.
en la actualidad el antibiótico de elección en el rustigianii y P. heimbachae. Presenta similares
tratamiento empírico es con ciprofloxacino, en espera del características de las enterobacterias. Las infecciones
antibiograma. producidas por las especies del género Providencia son
infrecuentes, esporádicas. Todas las especies pueden ser
Prevención aisladas de las heces sin compromiso patógeno; sin
Se recomienda las mismas medidas preventivas embargo se reconoce su participación como agente causal
que para Salmonella enteritidis. de infecciones urinarias generalmente crónicas,
infecciones de heridas quirúrgicas, respiratorias y
bacteriemia.
GENERO PROTEUS
GÉNERO CITROBACTER
Caracteristicas generales y morfología
El género Proteus se encuentra en el suelo, el Constituido de 11 especies, de los cuales la
agua y los materiales con contaminación fecal. Son especie más aislada es el C. freundii. Con características
bacilos pleomórficos (cambiantes de tamaño y forma), estructurales y metobólicas similares a enterobacterias.
gramnegativos, de 0,4 a 0,6 um de ancho por 1 a 3 um de Se las ha aislado de infecciones gastrointestinales,
largo, son móviles (en agar sangre presentan motilidad urinarias, de heridas quirúrgicas de piel y tejido celular
ascendente a menera de oleadas que tienden a ocupar subcutáneo, septicemia y meningitis. Las infecciones
todo el medio de cultivo), no forman esporas, no son respondieron satisfactoriamente al tratamiento con
capsulados, desarrollan a un pH de 6,9 a 7,2, temperatura ampicilina, cefotaxima y cotrimoxazol.
37°C, son anaerobios facultativos, lactosa negativas,
ureasa positivos (es su principal característica GENERO SERRATIA
bioquímica de identificación).
Los miembros de este género son 10 especies
Clasificación reconocidas, 7 de las cuales fueron recuperadas de
En la actualidad el género Proteus comprende muestras clínica humanas. La especie más aisla de este
cinco especies: P. vulgaris, P. mirabilis, P penneri, P. género es la Serratia marcescens, es el miembro más
myxofaciens y P. hauseri. importante que se asocia con distintas infeciones
humanas como neumonía, septicemia, meningitis e
Rol patógeno infecciones intrahospitalarias. En una época, el
Las especies de Proteus más aisladas en microorganismo se utilizaba como comensal inofensivo
muestras clínicas son: P.mirabilis, P. vulgaris, las para rastrear la contaminación ambiental, sobre todo por
restantes tres especies son de hallazgo esporádico, p ej., la pigmentación roja intensa característica de sus
P. hauseri es un patógeno de lagartos y no ha sido colonias. Sin embargo, en la actualidad el
aislado en muestra humanas. Proteus mirabilis es la microorganismo es reconocido como un patógeno
especie aislada con mayor frecuencia como agente causal importante con propiedades invasivas y una tendencia a
tanto en infecciones urinarias como de heridas. P. resistir a muchos antibióticos de uso frecuente. En
vulgaris se recupera comúnmente en heridas de general comparte las características morfológicas con los
huéspedes inmunosuprimidos, sobre todo en aquellos gérmenes antes descritos.
pacientes que recibieron regímenes prolongados de
antibióticos. En el tratamiento se recomienda Diagnóstico de laboratorio: Enterobacterias
cefalosporinas de amplio espectro.
a) Examen directo. Las muestras con las que vamos a
trabajar elementalmente son: heces, sangre, alguna veces
120
puede ser necesaria exudados purulentos de heridas,

LCR, esputo y otros; los mismos que deben ser
procesadas de inmediato, teniendo la precaución de
inocular en medio de transporte si es que se va a retardar
la labor. La tinción de Gram es poco orientativa sobre el
agente etiológico. Se observarán bacilos gramnegativos.
Además debe examinarse el moco fecal: cantidad,
presencia de pus, sangre, leucocitos y eritrocitos.
Informar cuantitativamente o cualitativamente (escasos,
moderados o abundantes).
La manera más común para diagnosticar Fig. N° 137. Colonias lactosas negativas en MacConkey (Fuente:
Shigellas spp es por aislamiento del organismo de www. Fotolog.com).
materia fecal en medios de aislamiento primario y la
 Caracteristicas de desarrollo de las
posterior identificación por reacciones bioquímicas y
salmonellas. En medio de MacConkey da
serotipificación con antisueros específicos. Los
colonias claras transparentes, bordes
especímenes para cultivos deben ser obtenidos antes de la
redondeadas, circulares, convexas, de aspecto
administración de antibióticos, mediante hisopado fecal
húmedo brillante, consistencia mucoide.
de la muestra que contiene sangre o mucus y colocado en
En medio de SS las colonias son claras con
un recipiente esteril; mejor si la muestra es obtenida por
bordes bien definidos circulares convexas, de aspecto
hisopado rectal, pero no anal. Shigella spp., son bacterias
húmedo brillante, consistencia mucoide con un centro de
extremadamente sensibles. La mejor manera de aislarlos
color negro como ojos de pez (esto debido al precipitado
es por medio de cultivo de las muestras recientemente
de H2S presente en las colonias).
obtenidas e incubadas inmediatmente a 37°C.
b) cultivo. Los medio de cultivo apropiados para el

aislamiento de Shigella spp., son: MacConkey, eosina
azul de metileno, SS y XLD y un medio de
enriquecimeinto como selenito o tetrationato.
Respecto al diagnóstico de la Salmonella spp.,
indicar que durante el estado agudo de gastroenteritis (a
partir de la segunda semana) el número de Salmonella Fig. N° 138. Colonias lactosa negativas con presipitado negro en el
spp., en heces es grande y la materia fecal es la muestra centro (ojos de pez) en medio de SS,
Pertenecen a Salmonella spp. (Fuente: Konemen, 20089).
de elección para efectuar el diagnóstico de salmonelosis
mediante coprocultivo (los coprocultivos son positivos  Caracteristicas de desarrollo de Proteus. En
desde la segunda o tercera semana de la infección), Se MacConkey da colonias claras redondeadas,
emplean los mismos medios utilizados por Shigella spp., superficie convexa, aspecto húmedo brillante de
luego la identificación se efectúa mediante su sonsitencia cremosa de 4 a 6 mm de diámetro.
comportamiento en la batería bioquímica que se utiliza En SS presenta las mismas características que en
para el efecto. Y la identificación definitiva mediante Mac Conkey, con el aditamento de que también
inmunosueros para serotipos específicos. Los se observa un precipitado negro, pero irregular y
hemocultivos representan la mejor muestra para el abundante sobre las colonias.
asilamiento del agente etiológico en septicemias y fiebres  Caracteristicas de desarrollo de las demás
entéricas durante las dos primeras semanas de la enterobacterias. Colonias claras pequeñas y
enfermedad. grandes con características generales parecidas a
las anteriores.
 Caracteristicas de desarrollo de las Shigellas.
En MacConkey las Shigellas desarrollan c) Pruebas bioquímicas. El procedimiento de pruebas
colonias pequeñas, redondas de bordes bioquímicas para la identificación de enteropatógenos
definidos, superficie convexa, aspecto húmedo y lactosa (-) consiste en:
brillante, consistencia cremosa claras 1.- Inocular por picadura y estriado en los medios de TSI
translucidas, 2 a 6 mm de diámetro. En el medio y LIA, por estriado en CS y UREA y por picadura en
de SS desarrollan con características parecidas. SIM y MIO una colonia aislada en cada uno de estos
medios, con la ayuda de un asa en hilo.
2.- Incubar a 37°C durante 24 horas.
3.- Observar los resultados del comportamiento
bioquímico.
4.- Identificar las bacterias de acuerdo a los resultados de
este comportamiento.
121
Cuadro N°. 44. Resultados de las Pruebas bioquímicas

GÉNEROS TSI SIM LIA CS UREA RM RESULTADOS
G L Gas I M H 2S
Shigella spp. + - - -/+ - - - - - +
Salmonella spp. + - + - + + + + - +
Proteus spp. + - + - + + - +/- ++ +
Morganella spp. + - + + + - - - ++ +
Providencia spp. + - +/- + + - - + - +
122
Citrobacter spp. + - + - + + - + +/- +
Serratia spp. + - + - + - + + - -/+
d) Serologia.- La mayoría de los pacientes con tifoidea de este grupo es la Pseudomana aeruginosa. Es un bacilo
desarrollan anticuerpos aglutinantes para los antígenos gramnegativo, mide de 1 a 3 um por 0.2 a 0.4 um; Es
“O” y “H” entre la segunda y la cuarta semana de móvil, no forma esporas, no es capsulado, desarrolla en
evolución de la enfermedad, y su determinación se un pH de 7,2 y una temperatura de 37°C, son aerobios
realiza por la prueba de Widal. Aunque la determinación obligados. No fermenta azúcares, es oxidasa positiva,
de anticuerpos aglutinantes anti”O” pueden contribuir al produce pigmentos solubles: piocianina y pioverdina
diagnóstico, su uso está bastante limitado porque:1) el (caracteristicas importantes que facilitan su
patrón de aparición de los anticuerpos es variable; 2) solo identificación).
se produce la cuatruplicación del título de anticuerpos en
el 50% de los pacientes no tratados. 3) la vacunación Clasificación
antitifoidea previa puede inducir altos títulos basales de La familia Pseudomonadaceae se clasifica en cinco
cuerpo. 4) la presencia de falsos positivos y falsos grupos cada uno con diferentes géneros y especies, de
negativos. Los anticuerpos anti -”H” no tienen ninguna ellos el género mas aislado en muestra clínica es el
utilidad en el diagnóstico. género pseudomonas constituido de tres especies:
Pseudomona aeruginosa, P. fluorescens y P. putida. De
las tres especies la P. aeruginosa tiene importancia
GENERO PSEUDOMONAS patógena, los dos siguientes aparecen como flora faríngea
normal y son patógenos oportunistas raros en los seres
humanos.
Caracteristicas generales y morgología
En los últimos 20 años, se ha observado un
constante incremento de las infecciones ocacionadas por Rol patógeno:
bacilos gramnegativos no fermentadores, en particular las
adquiridas dentro el hospital. El patógeno más conocido
Cuadro N° 45. Factores de virulencia de Pseudomona aeruginosa

VIRULENCIA
Fimbrias (pili) Apendices de superficie que permiten la adherencia del microorganismo a los
receptores de las células epiteliales del huésped.
Neuraminidasa Elimina los recíduos que cubren las células epiteliales facilitando la unión de las
fimbrias pili.
Alginato Polisacárido capsular, que permite a las bacterias infectantes, adherirse a las
superficies celulares epiteliales pulmonares, le protege de la acción de los
antibióticos y defensas del organismo.
Lipopolisacárido Produce endotoxinas, causa síndrome de sepsis: fiebre, shock, oliguria,
leucopenia o leucocitosis, coagulación intravascular diseminada y anomalías
123
metabólicas.
Exotoxina A Destrucción tisular por inhibición de la síntesis proteica, interrumpe la respuesta
de los macrófagos.
Enterotoxina Interrumpe la actividad gastrointestinal normal y provoca diarrea.
Exoenzima S Inhibe la síntesis de proteínas.
Fosfolipasa C Destruye la membrana citoplasmática pulmonar e inactiva las opsoninas.
Elastasa Degrada inmunoglobulinas y componentes del complemento, interrumpe la
actividad de los neutrófilos.
Leucocidina Inhibe la función de los neutrófilos y linfocitos.
Piocianina Interrumpe la actividad de los cilios respiratorios.
Pseudomona aeruginosa, es un patógeno endoscopios, nutrición enteral, etc. En la comunidad se

oportunista. Rara vez es resposable de infecciones en las puede hallar, además, en piletas de natación,
huéspedes sanos, si bien es un saprófito humano hidromasajes, floreros, lentes de contacto. A veces, puede
relativamente común. En muchos de los casos, la formar parte de la flora habitual de individuos sanos que
enfermedad comienza con la alteración de las defensas no han sido previamente hospitalizados con tasas
naturales del huésped: barrera muco-cutanea, por relativamente bajas: heces 3 a 24%, fauces 1 a 6%,
traumatismo, heridas, quemaduras, por uso de mucosa nasal 0,3 a 3% y piel o a 2%. Por el contrario, en
dispositivos intravasculares, sondas urinarias, tubo los pacientes hospitalizados las tasas de colonización
endotraqueal y otros. Cualquier maniobra invasiva puede aumentan significativamente, en particular en la piel, las
ser un factor de riesgo para la adquisición de la infección vías respiratorias, el tracto gastrointestinal especialmente
por este microorganismo. En otros casos, la infección se en las unidades de cuidados intensivos de adultos,
asocia con una disfunción de los mecanismos inmunes neonatos y pediátricos, salas de urología y de oncología.
específicos por neutropenia, hipogamaglobulinemia, Esta colonización se ve aún más favorecida por los
deficiencia de complemento o inmunosupresión tratamientos antibióticos y a menudo es el inicio de una
yatrogénica. Los tratamientos antibióticos prolongados infección invasiva.
son también uno de los factores predisponentes más P. aeruginosa, es uno de los principales agentes
importantes para el desarrollo de infecciones por P. de infecciones oportunistas en pacientes hospitalizados.
aeruginosa. Es responsable de alrededor del 20% de las neoinfeciones
La acción patógena de P. aeruginosa es el nosocomiales.
resultado de sus factores de virulencia (invasivas y En la actualidad es la tercera causa de neumonía
toxigénicas). El mecanismo de infección es el siguiente: hospitalaria en pacientes ventilados, la tercera causa de
las adhesinas, le permiten adherirse y colonizar el tejido, infección urinaria nosocomial y la cuarta causa de
produciendo una reacción inflamatoria, en ella, su infección del sitio quirúrgico. Se halla además, entre los
alginato, toxinas , exoenzimas y otros factores de primeros agentes más frecuentes de bacteriemia por
virulencia, neutralizan la acción defensiva del huésped, gramnegativos y se asocia con una alta tasa de
inhiben la síntesis de proteínas provocando la muerte de mortalidad. Las manos del personal son un importante
las células infectadas y como consecuencia lesiones del vehículo para la transmisión paciente-paciente, pero a
tejido, estableciéndose una infección crónica y menudo difícil de demostrar.
localizada, luego una bacteriemia, causando infecciones
pulmonares, endocarditis, meningitis, infecciones Diagnóstico de laboratorio
osteoarticulares, infección en quemaduras, queratitis
(individuos que usan lentes de contacto), infecciones a) Examen directo. Las muestras con las que vamos a
urinarias, otitis y otros. La mayoría de estas trabajar elementalmente son: esputo, sangre, piel
enfermedades ocurren en ambientes hospitalarios. necrotizada (pacientes con quemaduras), orina (pacientes
con sonda vesical), y otros.
Epidemiología En la orina P. aeruginosa se multiplica rápidamente
Pseudomona aeruginosa se aila del suelo, del y, al no fermentar los azúcares, eleva el pH por encima
agua, de las plantas y de los animales, incluyendo al del valor neutro (pH 7 a 8). Otras bacterias también
hombre. La epidemiología de esta especie refleja una pueden alcalinizar rápidamente la orina por lisis de la
predilección por ambientes húmedos. Su identificación urea y liberación de amoniaco. Siempre conviene que el
en plantas y la colonización humana está en función de la médico indique al bacteriólogo si tiene la sospecha que la
humedad. Perineo, axilas y oídos son los sitios donde infección pueda esta causada por P. aeruginosa. Las
ocurre la colonización. La humedad también es un factor muestras deben ser procesadas de inmediato, teniendo la
crítico para el reservorio hospitalario: equipos de precaución de inocular en medio de transporte si es que
asistencia respiratoria, soluciones de limpieza, jabones, se va a retardar la labor cuando se trata de un hisopado.
desinfectantes, mezcladoras de alimentos, incubadoras,
124
La tinción de Gram es poco orientativa sobre el agente las colonias son blanquecinas planas con brillo
etiológico. Se observaran bacilos gramnegativos. metalizado con zona de beta-hemólisis. En agar nutritivo
o Mueller Hinton o tripticasa soya exibe un pigmento
b) Caracteristicas de cultivo y desarrollo. P. verde, que es el resultado de la mezcla de dos pigmentos
aeruginosa en MacCconkey desarrolla formando hidrosolubles: la piocianina (azul) y la pioverdina
colonias claras translúcidas (lactosa negativas) con (amarillo fluerescente).
bordes más o menos regulares, superficie plana, aspecto
húmedo y brillante, consitencia mucoide con c) Pruebas bioquímicas. Para la identificación de P.
pigmentación verde, de 4 a 6 mm de diámetro, con olor auriginosa también se utiliza los mismos medios de
dulzón, a frutas olor a uvas. En agar sangre y chocolate, cultivo que para las enterobacterias.

GÉNERO TSI SIM LIA CS UREA OXIDASA RESULTADOS
G L I M H2S
Gas
P. aeruginosa - - - - + - - - V +
V: 11 a 89% son positivas.
El método más práctico para poner en evidencia Prevención

la presencia de un bacilo no fermentador como P. No hay ninguna vacuna para la prevención de la
aeruginosa es la inoculación de agar TSI. Este se incuba enfermedad. El mantenimiento adecuado de los
durante 24 horas a 37°C. y la ausencia de fementación de reservorios de agua constituye una medida importante
la glucosa se evidencia por la falta de acidificación del para reducir la posibilidad de diseminación del
fondo del tubo (no produce cambio de color); en tanto microorgnismo desde las fuentes ambientales. En el
que el pico de flauta se alcaliniza por la utilización hospital, para impedir la infecciones nosocomiales, son
aerobia de las peptonas contenidas en el medio (por ello importantes la precauciones en el contacto y en la
todo el tubo de TSI se mantiene de color rojo). eliminación de gotas de saliva, con lavado regular de las
manos tras el contacto con los pacientes. Otras medidas
Tratamiento para reducir el riesgo son la realización de una técnica
De todas las bacterias que causan infección en el aséptica detallada durante los procedimientos clínicos y
hombre P. aeruginosa es una de las que más quirugicos, y la limpieza y desinfección de los equipos de
consistantemente presenta resistencia a los antibióticos terapia respiratoria, sondas de diálisis, vesicales y otros.
como penicilina, ampicilina y cefalotina, cefotaxima
merced a la presecia de plásmidos que codifican la
aparición de B-lactamasas que degradan el antibiótico. El GENERO YERSINIA
tratamiento de las infecciones por P. aeruginosa puede
ser dificil. Un espectro relativamente estrecho de
antibióticos es eficaz e incluye las carboxipenicilinas Caracteristicas generales y morfología
(carbenecilina, ticarcilina), las ureidopenicilinas El género Yersinia comprende varias especies
(mezlocilina, piperacilina), las cefalosporinas patógenas para el hombre y los animales. Son
(ceftazidima, los monobactámicos (aztreonan), los principalmente parásitos de los roedores, pero otros
carbapenémicos (imipenen, meropenem), las quinolonas mamíferos y aves de corral también suelen ser afectados.
(ciprofloxacina, levofloxacina), y los aminoglucócidos Las Yersinias son bacilos ovoides
(gentamicina, tobramicina amikacina). gramnegativos, miden 1 a 3 um de longitud por 0,3 a 0,6
um de ancho. Les caracteriza la coloración bipolar al ser
125
teñidas con la tinción de Wright-Giemsa y Gram en enterocolítica y Y. pseudotuberculosis. La primera es el

muestras de pus provenientes de bubones. Desarrolla en agente causa de la peste bubónica y las dos siguientes
forma de colonias puntiformes, en MacConkey entre 25 y están comprometidas con procesos de gastroenteritis,
32 °C; en agar sangre colonias blanco grisáceas convexas ileitis, linfoadenitis intestinal y septicemias.
de 1 a 2 mm de diámetro; son inmóviles a 36°C y
móviles a 22°C.
Yersinia pestis
Clasificación
El género Yersinia esta actualmente clasificado Rol Patógeno:
dentro la familia Enterobacteriaceae, incluye tres
especies de importancia médica: Yersinia pestis, Y.
Cuadro N° 47. Factores de virulencia de Yersinia pestis

FACTOR DE MECANISMO DE ACCIÓN
VIRULENCIA
Proteasas: Fracción-1 (F1) Proteinas codificadas en los plásmidos de la bacteria, con
capacidad de disolver coágulos, coagulasa e interferir la
fagocitosis.
Toxina: Endotoxina de naturaleza lipopolisacárida, produce
hemoconcentración y shock endotóxico.
Peste. Existe tres formas clínicas de la peste: 1) bubónica caracteristicos. Los bacilos que se multiplican se hacen
(infección de los ganglios linfáticos); 2) septicémica resistentes a la fagocitosis, produciéndose la
(infección del torrente sanguíneo, la forma más diseminación al torrente sanguíneo provocando focos
mortífera), y 3) neumónica. bubónicos en los ganglios linfáticos de la piel (axilas,
El bacilo de la peste ingresa al organismo la inguinales, etc), pulmon, bazo, hígado y SNC). Las
mayoría de las veces vehiculisado por la picadura de la hemorragias difusas o lesiones petequiales diseminadas
pulga infectada con la sangre succionada de un roedor se producen por la coagulación intravascular diseminada
infectado. Otras veces puede adquirirse por inhalación o y la necrosis vascular, esto va seguido de toxemia
inoculación de mucosas. Desde la puerta de entrada el progresiva que lleva a la muerte. El nombre de
microorganismo alcanza rápidamente los conductos “enfermedad negra o muerte negra” con que se denominó
linfáticos y con la ayuda de sus mecanismos de acción a la peste por mucho tiempo, surgió posiblemente por los
(proteasas y toxinas) llega a los ganglios linfáticos cambios difusos o necróticos hemorrágicos de la piel y a
regionales donde se multiplica activamente, produciendo la marcada hipoxia y cianosis que resultan de la
una inflamación, agrandamiento, edema, trombosis y neumonía.
necrosisi hemorrágica y forma los bubones
Fig. 139. Trasmisión de la peste desde la rata, mediante la picadura de la pulga al hombre y rol patógeno (bubones en el muslo) con presencia
de bacilos azulados (tinción de Whirht) en sangre (Fuente: Nath, 2007, Koneman, 2008).
Las distintas formas clínicas que pueden incubación de la forma bubónica es inferior a una
presentarse en el hombre se superponen, pero puede semana. Previo a la aparición del bubón pueden
decirse que es posible agruparlas como producirse escalofríos, fiebre, malestar, náuseas y dolor
predominantemente bubónicas, septicémicas o de espalda y extremidades. Clínicamente, el bubón
neumónicas. debido a la peste no es fácilmente distinguible de otras
linfadenitis agudas de distinta etiología. Por lo general se
a) Bubónica.- Es la más común, se manifiesta por comprueba bacteriemia en aproximadamente la mitad de
inicialmente por tumefacción e inflamación aguda y los hemocultivos tempranos. En los casos severos es
dolorosa de los ganglios linfáticos que drenan en el sitio frecuente el compromiso pulmonar, que es generalmente
de inoculación inicial. La ingle es la región que se la causa inmediata de muerte.
encuentra más comúnmente afectada, siendo raros los
bubones en más de una localización. El periodo de
126
b) Septicemia.- En esta forma el paciente experimienta ellos la pulga al intentar alimentarse regurgita el material
un alto nivel de bacteriemia, antes de la evolución de los infectado en el momento de la picadura produciendo la
bubones. Se manifiesta por fiebre alta, pulso rápido infección a un nuevo hesped; dado que al encontrarse
hipotensión arterial, postración, delirio shock y coma. La hambrienta se hace menos selectiva con respecvto al
tasa de mortalidad es alta, en casos tratados y no tratados, huésped animal, pudiendo atacar fácilmente al hombre.
con colapso vascular periférico rápido. Otra característica Tambien se puede transmitir por manipulación de
es la aparición de trombos intravasculares en todas las tejidos o contacto con pus de animales infectados en
áreas del cuerpo, más común en niños que en adultos. laboratorio; y como anteriormente indicamos en el caso
de una peste neumónica la transmisiónes aérea por
c) Neumonia.- Generalmente tiene su origen en la contacto con gotitas de esputo del paciente eliminadas al
embolización séptica de los pulmones. Esta forma puede toser, estorunudar y hablar. El contagio interhumano es
adquirirse: posible cuando actua como vectores la pulga del hombre
 Como consecuencia de infección faríngea y (pulex irritans) o más raramente por Pediculus humanus
diseminación directa del microorganismo (piojo).
infectante hacia el pulmon, a partir de los
bubones amigdalinos y cervicales. Reseña histórica de la peste. Se produjeron tres
 Por inhalación de microorganismos pandemias a lo largo de la historia del hombre: 1) la peste
transportados por núcleos de gotitas dispersas justiniana a finales de la antigüedad (año 544) causo la
por la persona infectada que lleva a una muerte de 100 millones de personas en Egipto, Medio
inoculación directa del parénquima pulmonar. Oriente y Europa. 2) la muerte negra a finales de la edad
En este caso, el periodo de incubación es de tres media (1351) dismando la vida de 25 millones de
a cuatro días. Es altamente contagiosa. europeos., la 3) denominada pandemia moderna comenso
La peste neumónica es la más grave. Se presenta en 1885 en Hon Kon y termino en 1910 causando un total
como epidemia localizada y muy contagiosa entre de 10 millones de victimas en toda Asia.
personas que viven en condiciones de hacinamiento. Actualmente existe brotes de esta enfermedad en todo el
Cursa con fiebre, síntomas y signos progresivos de mundo, según la OMS se notifican 3000 casos cada año
insuficiencia respiratoria El esputo es sanguinolento y en diferentes regiones como India, China, EEUU, Africa
espumoso, con grandes cantidades de bacilos. y sudamerica.
Epidemiologia Diagnóstico de laboratorio

Los reservorios principales de la bacteria son los Muestra.- Exudados de pus de bubones, esputo, sangre,
roedores: Rattus rattus (rata negra de casas y barcos) y hisopado faríngeo, materiales de autopsia (órganos,
Rattus norvegicus (rata gris de alcantarillas). ganglios linfáticos, etc) y cadáveres de roedores y pulgas.
Habitualmente, la infección entre las ratas se transmite a) Examen directo. Tinción de Gram y Writ-Giemsa,
por pulgas que actúan como vectores. Probablemente el observación de cocobacilos con corpúsculos polares
vector más importante por su frecuencia es la pulga de la (polos más teñido que la parte central de la bacteria). Se
rata de la India (Xenopsylla cheopis). parecen a los ganchos.
Como reservorios salvajes intervienen animales
variados, como ardillas, perros de pradera, conejos
liebres y otros como perros gatos, coyotes y ratones de
campo.
También se constituye como reservorio de esta bacteria el
suelo húmedo y rico en sustancias orgánicas (basurales,
redes cloacales), allí la bacteria se mantiene viva y
virulenta e incluso puede multiplicarse. Por lo tanto su
fuente de infección principal son los roedores salvajes y
el suelo orgánico. Fig. N° 140. Forma típica de los bacilos de la peste parecidos a los
El mecanismo de transmisión principal es ganchos (Fuente: Basualdo, 2006).
mediante la picadura de la pulga a un reservorio
infectado portador del bacteria en su sangre; la sangre b) Cultivo. La siembra en Agar sangre y McConkey a
absorbida juntamente con los microorganismo pasan al 28°C durante 48 -72 horas y realizar un hemocultivo. En
estómago de la pulga, donde es coagulada por la acción agar sangre desarrollan colonias de bordes irregulares,
de la coagulasa de este microorganismo, de esta manera superficie convexa, aspecto brillante, consistencia
las bacterias quedan atrapadas en una matriz de fibrina en mucoide de color blanco grisáceo 2 a 4 mm. Rodeado de
el proventrículo de la pulga, en ella se multiplican un borde festoneado y parecido a huevo frito.
obstruyendo totalmente el proventrículo, y cuando la rata c) Pruebas bioquímicas
muere las pulgas infectadas buscan un nuevo huésped
que puede ser otra rata, perros, gatos o el hombre, en
127

Yersinias Indol Motilidad urea Ornitina, Sorbitol
28°C. sacarosa
Y. pestis - - - - V
Y. enterocolítica V + + + +
Y. pseudotuberculosis - + + - -
V: 11 a 89% de cepas positivas
Tratamiento Si invade el sistema porta aparecen lesiones en

El antibiótico de elección para el tratamiento de hígado, pulmón, de tipo nodular y supurativo. Puede
todas las formas clínicas de peste es la estreptomicina. ocacionar meningitis y septicemias.
Los antibióticos alternativos son la gentamicina, la El periodo de incubación de esta enfermedad es
tetraciclina y el cloranfenicol. Debido a que la peste sin de tres días. Las manifestaciones clínicas por Y.
tratamiento presenta una elevada mortalidad, una vez enterocolitica, son dolores abdominales, fiebre y diarrea,
extraidas las muestras para cultivo, se debe proporcionar que puede variar en su severidad desde pocas
el tratamiento de forma inmediata. evacuaciones diarias hasta enterocolitis fulminante, con
lesiones ulcerativas en el tracto gastrointestinal (más
Prevención comunes en niños pequeños).
Cualquier sospecha de infección por Y pestis, se En una fase más avanzada de la enfermedad,
debe notificar de inmediato a las autoridades sanitarias puede presentarse ileítis terminal y severa inflamación de
locales y nacionales. Las medidas preventivas incluyen el los nódulos linfáticos mesentéricos, con síntomas que
control de los roedores y la fumigación con insecticidas sugieren apendicitis aguda, entidad con la que puede
en zonas con posibles brotes condundirse con frecuencia. La artritis y el eritema
nodoso son las principales complicaciones de episodios
abdominales (generalmente en adultos).
Yersinia enterocolitica
Diagnostico
Caracteristicas generales y morfología Las muestras válidas pueden ser: heces, sangre,
Este organismo se encuentra estrechamente nódulos linfáticos mesentericos, líquido peritoneal, etc.,
relaciondo con Y. pseudotuberculosis en cuanto a de acuerdo con le sitio donde se presenta la lesión.
características morfológicas y culturales, pero difieren Una vez obtenida las muestras, éstas pueden ser
por una serie de reacciones bioquímicas, composición conservadas a 4°C., en refrigerador por algunas horas,
antigénica y virulencia. Ambas son consideradas pero es mejor si son sembradas inmediatamente.
enteropatogénicas a diferencia del Y. pestis. En el examen directo, la tinción de Gram muestra bacilos
Y. enterocolítica, ha sido encontrado en heces de gramnetativos.
animales sanos, y enfermos (roedores, peros, gatos, En el cultivo y la identificación se utilizan los
cerdos, bovinos y caballos); pacientes con enterocolitis, mismos procedimientos aplicadas para las
contaminan la leche, carne, helados y en general los enterobacterias (ver cuadro N°44).
alimentos y el agua.
Son bacilos gramnegativos, que se encuentran
Tratamiento
aislados o en cadenas. En cultivos jóvenes e incubados a
Resulta susceptible a: cefalosporinas de tercera
25°C., tienen formas cocobacilares, presentan motilidad
generación, quinolonas, aminoglucósidos, tetraciclina,
(son peritricos). No presentan cápsula ni espora. Son
cloranfenicol, cotrimoxazol. Algunos serogrupos pueden
anaerobios facultativos, desarrolan a una temperatura
producir beta- lactamasas cromosómicas por ello se
óptima entre 28-30°C. Desarrollan en agar sangre,
recomienda realizar antibiograma.
McConkey, SS son lactosa negativas.
Rol patógeno Prevención

Eliminación sanitaria de heces humanas y
caninas; protección y purificación de abastecimiento de
Enterocolitis. Los gérmenes ingresan al organismo
agua; aseo de manos antes de manipular y comer
humano con el agua y alimentos contamindas
alimentos; preparación higiénica de alimentos, sobre todo
(comúnmente con la ingestión de productos de cerdo mal
los que se consumen crudos.
cocidos), invaden la mucosa íleo-cecal y alcanzan el
interior de la célula epitelial, nódulos linfáticos de la
pared y mesentéricos. Luego de un corto tiempo, aparece Yersinia pseudotuberculosis
maceración de la mucosa intestinal, necrosis de las placas
de peyer y linfoadenitis mesentérica purulenta. Caracteristicas generales y morfología
128
Es un microrganismo que se presenta también en Una vez que el microorganismo ingresa en el

una variedad de mamíferos y aves de corral, es indivíduo a través del agua o los alimentos contaminados,
responsable de linfadenitis mesentérica, sobre todo en causa ulceraciones en el íleon terminal, compromete las
niños en los cuales se manifiesta una enfermedad clínica placas de Peyer y produce lesiones granulomatosas y
que simula una apendicitis. supurativas en los ganglios linfáticos ileocecales.
Es muy similar, en cuanto a morfología, Es responsable de la linfadenitis mesentérica
características tintoriales y culturales a Y. enterocolítica, (seudoapendicitis), diarrea y septicemia.
diferenciándose de la misma por una serie de reacciones En la linfadenitis mesentérica, la enfermedad
bioquímicas. Las cepas virulentas aparecen en la comienza generalmente en forma no específica con
coloración de Gram como cocobacilos o bacilos cefalalgia, artralgia y fiebre. Luego se instala el dolor en
relativamente grandes; miden entre 0,8 – 6 um. Es la zona apendicular. Suele por esto confundirse con
anaerobio facultativo, móvil a 25°C, e inmóvil a 37°C. apendicitis.
Rol patógeno Diagnostico, tratamiento y prevención

Similar a la de Y. enterocolítica
129
CAPITULO 12
BACILOS GRAMNEGATIVOS CURVADOS
GENERO VIBRIO
Caracteristicas generales y morfología Vibrio cholerae

El género Vibrio, tienen tanto interés histórico
como contemporáneo, ya que una de las especies más Vibrio cholerae, es el agente etiológico del
representativas de este género: V. cholerae, es el agente cólera, enfermedad infecciosa aguda, de etiología
causal del cólera, una enfermedad infecciosa aguda bacteriana, de naturaleza tóxica y no invasiva, capaz de
diarréica grave, que ha sido un azote para la humanidad generar epidemias, que se caracteriza por causar rápida y
durante siglos. masiva pérdida de líquidos gastrointestinales, gran
Los vibrios, son bacilos curvos en forma de pérdida salina, acidosis y shock. El índice de mortalidad
coma de 0,5 por 1,5 a 3 um de largo, gramnegativos, no en los pacientes no tratados abarca más del 60%. El
esporulados, no capsulados, móviles por la presencia de mismo se revierte al 1% con el pronto reemplazo de
un único flagelo polar, aerobios/anaerobios facultativos, líquidos y electrolitos. Es una enfermedad endémica en la
con una temperatura óptima de crecimiento entre 18- región bengalí de India y Bangladesh, desde donde se ha
37°C. Su metabolismo es respiratorio y fermentativo. diseminado a otros países en una ola de pandemias.
Son oxidasa positiva, desarrollan mejor en pH de 8 a
9,5, son extremadamente sensibles a pH ácido por debajo Estructura antigénica.
de 6. Sobrevive algunas horas en heces, siete días fuera El V. cholerae presenta dos antígenos: a) el
del organismo, dos semanas en agua dulce y alimentos antígeno somático lo constituye el LPS semejante al de
refrigerados, un año en agua de mar, 2 a 3 días en el las enterobacterias, b) el antígeno flagelar H común a
hielo, muere a la pasteurización y temperaturas de más de todos los serotipos de Vibrio (no presenta mayor
56°C por 30 minutos o ebullición por 5 minutos y a la importancia).
acción del cloro libre de 0,5 a 1 g/litro de agua. De acuerdo al antígeno 0 somático del V.
cholerae, existen 139 serogrupos diferentes, de los
cuales solo los serogrupo 01 y 0139 son causantes de
epidemias del cólera. El serogrupo 01 incluye dos
biotipos o formas bioquímicas del V. cholerae: el biotipo
“clásico” y el biotipo “El tor”. A su vez el serogrupo 01
también puede diferenciarse en serotipos (a diferencia de
otros patógenos entéricos para los cuales el “serotipo”
define una cierta combinación de antígenos 0 y H, para
V. cholerae”serotipo” refiere a distintas variantes
Fig. N° 141. Bacilos gramnegativos curvados con flagelo polar
pertenecentes a Vibrio cholerae (Fuente: Nath, 2007). antigénicas del antígeno 01). De esta forma, el V.
Clasificación cholerae serogrupo 01 presenta tres determinantes
La familia Vibrionaceae hasta hace algunos años antigénicas (A,B y C) que de acuerdo a la forma en que
atrás abarcaba cuatro géneros: Vibrio, Aeromonas, se combinan, definen los tres serotipos conocidos:
Photobacterium y plesiomonas, actualmente por estudios Ogawa (A,B), Inaba (A,C) e Hikojima (A,B y C). La
de sus ácidos nucleicos, los géneros de esta familia han cepa del V. cholerae causante del cólera en sud América
sido reubicados en otras familias, quedando la familia y Bolivia fue identificado como serotipo Inaba 01,
Vibrionaceae en proceso de restructuración filogénica. biotipo el Tor. Actualmente se reconoce al vibrión El Tor
Dentro el género Vibrio, están reconocidas más como el biotipo de V. cholerae responsable de la mayoría
de veinte especies, de las cuales diez se relacionan con de los brotes epidémicos del cólera, debido a los
cuadros clínicos: V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. siguientes aspectos: presenta más portadores sanos de la
vulnificus, V. fluvialis, V. mimicus, V. hollisae, V. enfermedad, los pacientes excretan por mayor tiempo
furnissii, V. alginolyticus, V. damsela y v. metschnikovii; V.cholerae biotipo El Tor que el biotipo clásico, la dosis
de ellas V. Cholerae es el principal patógeno; los demás infectante par el biotipo Clásico es de 108-109 mientras
vibrios son agentes ocacionales de gastroenteritis, que para el biotipo El Tor es de aproximadamente 103.
infecciones de heridas, oído externo, peritonitis, Actualmente el biotipo Clásico casi ha desaparecido,
septicemia y otros. salvo raros aislamientos en la India.
130
Cuadro N°49. Clasificación de serogrupos y biotipos del V. Cholerae.

MÉTODO DE VIBRIONES VIBRIONES NO
CLASIFICACIÓN ASOCIADOS CON ASOCIADOS CON CÓLERA
CÓLERA
Serogrupos 01 y 0139 No 01 (serogrupos 02 a 0138)
Biotipos Clásico, El Tor No existen biotipos
Serotipos Inaba, Ogawa, Hikojima No existe clasificación
Toxina Producen toxina del cólera No producen toxina colérica
Rol patógeno
El rol patógeno del V. cholerae esta favorecida por su motilidad, su adherencia, secreción de proteasa y
principalmente por su toxina colérica.
Cuadro N° 50. Factores de virulencia del Vibrio cholerae.

FACTOR DE MECANISMOS DE ACCIÓN
VIRULENCIA
Motilidad V. cholerae, posee un flagelo polar que le permite alcanzar y penetrar la
mucosa intestinal.
Adherencia Presenta largas fimbrias de unos 7 nm denominada Tcp (Toxin-Co-
regulated-Pilus) para adherirse en el intestino.
Musinasa Proteasa que degrada las proteínas de la mucosa intestinal, para permitir
que V. cholerae se adhiera a las células epiteliales libres de mucus (El
aspecto de agua de arroz de las deposiciones de los individuos
infectados se debe a la presencia de mucus degradado por esta enzima).
Toxina Potente enterotoxina constituida por dos subunidades: A (activa) y B
colérica (fijadora) que al penetrar a la célula epitelial intestinal produce la
eliminación de abundante agua electrolitos en heces.
Cólera. Los microorganismos ingeridos en aguas actividad tóxica) y una subunidad B (fijadora, con cinco
contaminadas, alimentos y otros, deben pasar primero las unidades por molécula de toxina). La unidad B une la
secreciones altamente ácidas del estómago. Se calcula molécula de toxina (A) a los receptores gangliósidos Gm1
que se necesitan 109 microorganismos por mililitro para que se encuentra en la membrana de la célula epitelial
sobrevivir el pasaje gástrico en las personas sanas y 100 intestinal. La toxina A actua sobre la proteína G también
microorganismos por ml en personas hipoclorhídricas por presente en la membrana obteniendo ADP ribosilación la
gastrectomía o uso de antiácidos. Las bacterias gracias a misma activa a la enzima adenilciclasa de la membrana
su movilidad se adhieren a las células epiteliales de la celular lo que produce una elevación intracelular de AMP
mucosa gástrica e intestinal, en ellas secretan musinasa cíclico. El Amp cíclico impide la reabsorción de iones
que degrada la musina que reviste la superficie de la sodio y produce la hipersecreción de cloruros, potasio,
mucosa gastroentérica, luego excreta la enterotoxina bicarbonatos y agua hacia la luz intestinal, cuya
compuesta por dos subunidades: una subunidad A (con expresión patológica es la diarrea líquida profusa.
131
Fig. N° 142. Acción de la exotoxina colérica (Fuente: Koneman, 2008).
Aspectos clínicos.- La enfermedad presenta un periodo hundidos, la voz débil y ronca. El paciente generalmente
de incubación de horas a días, con un promedio de dos a se mantiene lúcido. Las heces líquidas del paciente
cinco días. El comienzo es brusco con aparición de contienen concentraciones de sodio idénticas a las que se
náuceas, vómitos, diarrea y espasmos abdominales encuentran en el plasma normal, concentraciones de
(calambres), sin fiebre. En los casos severos las heces son bicarbonato dos veces superiores a las plasmáticas
líquidas y voluminosas, claras y opalescentes tomando un normales y concentraciones de potasio cinco veces
aspecto llamado “en agua de arroz”. Contienen moco, superiores al plasma; como resultado existe déficit de
células epiteliales y grandes cantidades de vibriones. líquidos extracelular, acidosis metabólica e hipocalcemia,
La perdida de líquido intestinal puede alcanzar esta alteración general lleva al shock y a la muerte. La
los 10 a 15 litros diarios, lo que lleva a una mortalidad en los casos no tratados es del 60%,
deshidratación extrema y desequilibrio electrolítico. El disminuyendo al 1% si el paciente es rehidratado
paciente presenta la piel arrugada, naris afilada, ojos adecuadamente.
Fig. N° 143. Manifestación clínica a nivel intestinal y gástrico causada por el V. cholerae
Epidemiología relaciones comerciales, sobre todo a nivel alimentario y

El cólera es un problema mundial. A pesar de la turístico de los países.
existencia de muchos microorganismos que son causales El reservorio de la enfermedad es el hombre,
de diarrea, inclusive con mortalidad elevada, el cólera aunque en periodos en los que hay infecciones humanas
cobra interés porque: deshidrata a adultos y niños, se han encontrado vibriones en animales domésticos. La
aparece como brotes súbitos, produce pandemias y bacteria del cólera puede vivir en los ríos salobres y
acarrea serios problemas económicos cortando las aguas costeras. Según algunos investigadores, ciertos
132
copépodos y algas marinas actuarían como reservorio de en zonas endémicas, por carecer de inmunidad natural.
la bacteria entre los períodos de epidemias. La morbilidad por edades varía según el cólera sea
Las fuentes comunes de infección comprenden epidémico o endémico. Cuando la enfermedad aparece en
agua de beber contaminada con heces humanas. En forma una zona virgen de cólera, los primeros afectados son los
indirecta pueden contaminar alimentos, como verduras de adultos, mientras que en zonas endémicas, los niños son
hoja y frutas al ser lavadas con aguas contaminadas (uso los más afectados, ya que en estas áreas el adulto iría, a lo
de aguas servidas). El tipo de provisión de agua (servicio largo de su vida, adquiriendo cierta inmunidad natural.
de red de agua potable, agua de pozo, etc), cobran
importancia en la transmisión de la enfermedad. Diagnóstico
Los alimentos susceptibles a contaminarse Cuando se inicia el brote de la enfermedad es
suelen ser leche, arroz, lentejas, papas, huevos, pollo, importante realizar el diagnóstico microbiológico con
dulces, etc., pero el pescado y en particular los mariscos, rapidez para precisar las características epidemiológicas
provenientes de aguas contaminadas y preparados crudos del mismo y establecer las medidas para controlar su
(seviche) o insuficientemente cocidos, son una de las propagación epidémica. La experiencia previa demuestra
fuentes más importantes. Los mecanismos de transmisión que una vez comenzada la epidemia, ésta abarcará un
suele ser indirecto, a través de la ingesta de agua o mayor o menor número de habitantes. El diagnóstico de
alimentos contaminados, y también mediante las moscas la enfermedad durante una epidemia es clínico, y se
que transportan deyecciones a los alimentos. Con menos tratará dentro de lo posible de obtener la confirmación
frecuencia se han descrito casos de contagio directo microbiológica del diagnóstico. Ante un caso sospechoso
(médicos, laboratoristas). con las características clínicas del cólera, se iniciará el
En las vías de eliminación se debe considerar al tratamiento, aún sin diagnóstico microbiológico.
individuo enfermo y el portador humano. El enfermo El diagnostico microbiológico se realiza por
juega un papel muy importante, ya que elimina por cada aislamiento de V. cholerae de una muestra de materia
mililitro de líquido entre 107 y 109 vibriones, fecal e hisopado rectal; pero en el caso de una epidemia
acompañados de la flora normal del intestino. se trabaja con diferentes muestras como agua potable,
Recordemos que un enfermo de cólera elimina por día de alimentos (lechugas), hisopados de agua contaminada
10 a 15 litros de heces, de allí que, el número de (hisopo de Mur) y otros.
microorganismos eliminados por heces sea altísimo. El
portador asintomático sirve como fuente de nuevos casos, a) Examen directo.- Con las muestras fecales se realiza
eliminado en sus heces, aparentemente normales entre tinción de Gram, observándose gran cantidad de bacilos
102 y 105 vibriones por gramo. Existen dos tipos de curvos gramnegativos entremezclados con
portadores: el portador convaleciente y el portador enterobacterias.
crónico. Los primeros son individuos que infectan por un Tratamiento de la muestra. Las muestras de heces e
corto plazo, entre 6 meses y 1 año, y suelen ser personas hisopado rectal se debe directamente sembrar o trasladar
menores de 50 años. Los segundos son aquellas personas a un medio de transporte adecuado como el de Cary Blair
que en la vesícula biliar transportan el microorganismo y de aquí al APA (agua peptonada alcalina) que es un
sólo lo eliminan en forma intermitente por la materia medio de enriquecimiento líquido en tubo, incubar 6 a 8
fecal, durante el curso de diarreas naturales. Estos horas a 37°C, tiempo después sembrar una asada de la
portadores suelen ser mayores de 50 años de edad y superficie del tubo con asa bacteriológica por
difíciles de detectar (tasa de portador 1 a 20% en zonas agotamiento en medio de TCBS (tiosulfato citrato bilis
endémicas). sacarosa) e incubar 24 horas a 37°C. Las muestras de
La cuna del cólera son los ríos Ganges y agua potable, alimentos, hisopos de Mur (gasa doble de
Bramaputra de la India y de Bangladesh. El cólera es una 15 cm sopados en agua de cantarilla) y otros, se
enfermedad que se conoce desde el siglo XVI, es enriquece en APA 6 a 8 horas a 37°C de aquí sembrar en
causante de siete pandemias a partir de 1817. La última TCBS a 37°C durante 24 horas.
pandemia y la más larga empieza en 1961 en Indonesia, b) Caracteristicas de desarrollo bacteriano en TCBS.
en 1970 invade Africa, años más tarde EE.UU. y México. Colonias medianas 2 a 4 mm, bordes redondeado,
En los comienzos de los años 90 ingresa a america del superficie convexa, aspecto húmedo, consistencia
sur con los primeros casos en las zonas costeras de Lima- cremosa, coloración amarillas lisas con un centro opaco y
Perú, que luego se extiende a Ecuador, Argentina, Brasil, una periferie transparente. Se resiembra algunas colonias
Bolivia, Colombia y otros países, causando millones de del TCBS en agar nutritivo, incubar 24 horas a 37°C;
muertes hasta nuestros días. Los principales factores para algunas pruebas bioquímicas.
predisponentes son, bajo nivel socioeconómico de los
pueblos, el movimiento de masas humanas en el mundo,
nivel de contaminación de los ríos y costas marinas,
grupo sanguíneo 0 Rh (+). Son más susceptibles los
individuos que sufren de hipocloridria o acloridria, los
que padecen de gastritis crónicas y los niños sobre todo
133
c) Pruebas bioquímicas. La identificación del V.

cholerae se realiza utilizando algunos medios de la
batería bioquímica para enterobacterias, la prueba de
oxidasa, aglutinación en suero polivalente y otros.
Fig.N° 144. Desarrollo de colonias amarillas en TCBS: V. cholerae


GÉNERO TSI LIA OXIDASA CATALASA PRUEBA AGLUTINACIÓN HEMÓLISIS EN
G L S DEL CON SUERO AGAR SANGRE
COLLAR POLIVALENTE CLÁSIC EL TOR
V. cholerae
+ - + + + + + serogrupo 01 +
En TSI V. Cholerae es glucosa (+), lactosa negativa, pero como es sacarosa (+), la fermentación de este azúcar acidifica
todo el tubo tornándolo de color amarillo todo el medio por tanto el fondo es ácido y superficie ácido (A/A).
Cuadro 52. Prueba de la oxidasa en tubo de hemólisis

1.- Se coloca 1 ml de solución
Ya escripto anteriormente fisiológica en el agar nutritivo Reacción positiva: el disco se torna
donde día antes desarrollaron de color lila o morado.
colonias de V. cholerae, se mezcla Reacción negativa: no cambia de
con una pipeta pasteur. color.
2.- Se traslada 0,5 ml de la mezcla a
un tubo de hemólisis,
3.- Se agrega a este tubo un disco
de oxidasa (contiene diclorhidrato
de tetrametil para fenilendiamina al
1%) con la ayuda de un pinza, y se
espera 30 segundos
Cuadro N° 53. Prueba de la cuerda

La mezcla de unas colonias de V. 1.- Colocar una gota de Prueba positiva: Se observa una
cholerae en una gota de desoxicolato de sodio al 0,5% en cuerda larga que se hace más fuerte
desoxicolato de sodio al 0,5%, un portaobjetos. a los 60 segundos
produce una suspensión viscosa, 2.- Agregar algunas colonias del Prueba negativa: desaparece la
que al tacarla y lavantarla con un medio de agar nutritivo con la escasa cuerda a los 45 segundos.
asa bacteriológica se forma una ayuda del asa bacteriológica.
especie de cuerda. 3.- Con la misma asa, realizar un
movimiento de levantamiento de
la mezcla.
Cuadro N° 54. Prueba de aglutinación con suero polivalente

1.- Se coloca algunas colonias Prueba positiva: Presencia de aglutinación significa que
V. cholerae del agar nutritivo en un el Vibrio pertenece al serogrupo 01
presenta portaobjeto con la ayuda del Prueba negativa: Ausencia de aglutinación, significa
aglutinación asa bacteriológica. que el Vibrio no es del serogrupo 01, petenece a otros
cuando entra en 2.- Se agrega una gota del serogrupos (no 01).
contacto con suero polivalente
antisuero O 3.- Se mezcla y se observa
polivalente.
134
Cuadro N° 55. Hemólisis en agar sangre

V. cholerae biotipo el 1.- Se siembra algunas Prueba positiva: presencia de colonias beta-
Tor producen beta- colonias del TCBS en agar hemolícas en agar sangre.
hemólisis en agar sangre por agotamiento. Prueba negativa: desarrollo de colonias sin
sangre. 2.- Se incuba 24 horas a 37°C. hemólisis.
Tratamiento es el principal representante como bacteria patógena para

Se debe restituir el agua y electrolitos en las el hombre. Entre las demás especies podemos mencionar
cantidades perdidas. En los casos severos por vía al H. cinaedi, H. fennelliae, H. canadensis, H. heilmannii
endovenosa, en los moderados por vía oral. La doxicilina y otros, que se asocian en forma oportunistas con
es el antibiótico de elección. Puede ser reemplazada por gastroenteritis y bacteriemia. Todas ellas incluyendo al
la tetraciclina, cotrimoxazol, ciprofloxacina o H. pylori, han sido aisladas principalmente de estómagos
norfloxacina. En embarazadas ampicilina y en niños o intestinos de mamíferos como monos, perros, gatos
menores de 9 años cotrimoxazol, eritromicina; siempre ratones y el hombre.
considerando los resultados del antibiograma.
Helicobacter pylori
Prevención
Capacitación en el diagnóstico y tratamiento Es un microorganismo microaerófilo, curvado o
adecuado de las diarreas agudas. Educación sanitaria en espiralado en muestras de biopsia, bacilos normales en
la población en general sobre la transmisión y el control tinción de cultivos y cocoides en cultivos prolongados,
de la enfermedad. Saneamiento ambiental dirigida a la son gramnegativo; de 2,5 a 5 um de longitud y 0,5 a 1 um
disposición de las heces humanas, la higiene personal, la de ancho. Posee 4 a 6 flagelos envainados y dispuestos en
seguridad de los alimentos y la disponibilidad de agua penacho en un extremo de la bacteria; son además
potable (hervir o colocar 3 gotas de lavandina catalasa, oxidasa y ureasa positivas.
concentrada por litro de agua, reposo 30 minutos antes de En lo referente a los requerimientos nutricionales,
consumo). No existe vacuna para esta enfermedad. H. pylori aparece como un microorganismo incapaz de
fermentar u oxidar carbohidratos, pero cuando se
utilizan medios de cultivo más complejos pueden
degradar azucares y metabolizar aminoácidos por
GENERO HELICOBATER fermentación como los anaerobios, será por eso que estas
Caracteristicas generales y morfología bacterias desarollan mejor en el mucus del epitelio
Por mucho tiempo el estómago humano ha sido gástrico que contiene bajos niveles de O2. Por lo que
considerado un ambiente inhóspito para el crecimiento también necesitan medios de cultivo con algunos
bacteriano a causa de su pH ácido. Sin embargo, en 1982 suplementos como sangre total de carnero y la incubación
los australianos Marshall y Warren, lograron aislar una en CO2 al 10%, O2 al 5% y N2 al 85% a 37°C durante 5 a
bacteria espiralada microaerófila de la mucosa gástrica 10 días.
humana y mostraron la asociación entre la presencia de
este microorganismo y la inflamación gástrica.
Rol patogeno
Clasificación La patogenia y factores de virulencia se detallan
El género Helicobacter comprende 23 especies en el cuadro en el siguiente cuadro.
validadas formalmente, de los cuales Helicobacter pylori,
Cuadro N° 56. Factores de virulencia del H. pylori.

VIRULENCIA
Flagelos Proporcionan movimientos de tirabuzón a la bacteria, para evitar la
luz estomacal ácido e introducirse en el mucus gastrico para
sobrevivir.
Ureasa Neutraliza la acidez del medio e induce la inflamación.
Citotoxina vacuolizante Altera el funcionamiento intracelular de las células epiteliales con la
(VacA) formación de grandes vacuolas.
135
Gastritis crónica, úlcera gástrica y duodenal. El eliminación de ureasa a su medio para hidrolizar la urea
proceso de infección para que H. pylori pueda colonizar presente formando amoniaco y acido carbonico,
el estómago y persistir en éste, es necesario la substancias que alcalinizan el medio (neutralizan la
intervención de varios factores. Entre los más acidez), protegiendolo a la bacteria. Estos componentes y
importantes se destacadas los siguientes: otros como la toxina VacA, inducen a una reacción
a) La infección comúnmente sólo se presenta en el inflamatoria crónica con la movilización de PMN,
epitelio gástrico linfoctos T y B en el tejido submucoso.
b) No invade las células Aproximadamente el 10% de estos individuos infectados
c) Induce una inflamación intensa en el estómago desarrolla úlcera péptica mientras que el riesgo de sufrir
(gastritis crónica) con respuesta inmunitaria. úlcera duodenal aumenta marcadamente cuando se aísla
d) No suele desaparecer espontáneamente H. pylori del duodeno. La inflamación prolongada que
Las bacterias que llegan al epitelio gástrico, son acompaña a las infecciones por esta bacteria podría
sensibles a la acidez de la luz estomacal, por esta razón contribuir al desarrollo de adenocarcinoma de estómago
no permanecen es este sitio, si no que invade la mucina y más aún, H. pylori podría inclusive estar involucrado
que recubre la mucosa gástrica, mediante la activa en el desarrollo de linfomas del tejido linfoide asociado a
movilidad de tirabuzón otorgada por los flagelos y la la mucosa gástrica.
Fig. N° 145. Acción patógena del H. pylori mediante: La producción de citotoxina y ureasa (a), la motilidad y la permanencia del H. pylori en la mucina
del epitelio gástrico (b). (Fuente: Struthers, 2005).
Epidemiologia humanos sanos.

La primera asociación entre H. pylori y Frustrado por no poder infectar animales de laboratorio,
enfermedad en el hombre fue la observación de que este Marshall decidió probar su teoría en humanos y eligió para ello
a su más fiel y confiable seguidor: ¡él mismo! Luego de
microorganismo casi invariablemente estaba ligado a confirmar por examen endoscópico que su mucosa gástrica
gastritis crónica superficial. Actualmente existen estaba sana Marshall bebió un cultivo de H. pylori que había
sobradas evidencias de que H. pylori es el agente causal aislado recientemente de un paciente. A las pocas horas su
de ese proceso inflamatorio crónico (ver viñeta: Los estómago comenzó a “gruñir”. Una semana más tarde se sintió
postulados de Koch). nauseoso y vomitó. Durante este período se sentía inusualmente
hambriento y cansado. A las dos semanas se sometió a un
RECUADRO N° 11: H. pylori y los postulados de Koch segundo examen endoscópico y se le tomó una muestra. El
Barry Marshall fue uno de los primeros en proponer la resultado de la biopsia demostró que Marshall sufria de
hipótesis de que la mayoría de las úlceras pépticas y duodenales inflamación gástrica y se encontró H. pylori en la capa de
eran causadas por bacterias. Este joven internista australiano mucina y sobre la lesión: ¡se cumplia el tercer postulado de
trabajaba junto a J.R. Warren, el descubridor del H. pylori. Koch!
Marshall y sus colaboradores habían demostrado que H. pylori
estaba asociado con lesiones ulcerosas y que la bacteria podía Las infecciones por H. pylori, ocurren en todas
ser aislada en cultivos puros de esas lesiones (primero y las regiones geográficas del mundo. En todas las
segundo postulados de Koch). Para demostrar que H. pylori no
era simplemente una bacteria oportunista que colonizaba
poblaciones estudiadas, la prevalencia de la infección
lesiones ya existentes era necesario demostrar también que la aumenta con la edad. Las infecciones tienen lugar en
bacteria aislada de lesiones producía úlceras en animales o los primeros años de vida y son más prevalentes en los
136
países subdesarrollados. Aproximadamente el 40% de los El modo de transmisión de una persona a otra es
individuos de países desarrollados y el 80% de los mediante las tres vías siguientes:
individuos de países en vías de desarrollo están a) Fecal – oral frecuentemente la fuente de infección es
infectados al llegar a la edad adulta. Esto hace que la el agua y los alimentos contaminados. Es la vía más
infección por H. pylori sea una de las infecciones común.
bacterianas más comunes en el hombre. Una vez b) Vía oral – oral, demostrada por ej., en mujeres que
adquirida la infección se hace crónica y persiste, proporcionan alimentos premasticados a sus hijos
probablemente de por vida, si no es tratada. pequeños.
H. pylori es un microorganismo bien adaptado c) Vía yatrogénica a través del endoscopio.
para sobrevivir durante largos periodos en el ambiente
gástrico. La infección por H. pylori es un factor de riesgo Diagnostico de laboratorio
para el desarrollo de úlcera péptica y cáncer de estómago. Las muestras con las que se trabaja para realizar el
Sin embargo, la mayoría de las personas infectadas diagnóstico de esta infección son: Biopsias gástricas,
toleran la infección por décadas, con muy pocos o ningún jugo gástrico, sangre y heces. Con los que se realizan 2
síntoma. Las diferentes manifestaciones clínicas pueden tipos de métodos: directos e indirectos.
depender en parte a las diferencias entre las cepas de H. a) Métodos directos: con la biopsia gástrica se realiza la
pylori o a diferencias en el huésped. prueba rápida de la ureasa, examen histológico, examen
bacteriológico y PCR, con la muestra de heces se realizan
En 1999 en la Argentina se realizo una encuesta cultivo y PCR.
epidemiológica sobre la prevalencia de pacientes b) Métodos indirectos: con la muestra de suero
infectados con H. pylori en 645 individuos entre 6 meses sanguíneo se realiza la prueba de ELISA, y con la
y 50 años, teniendo como resultado una prevalencia administración de carbono reactivo se realiza la prueba
general de infección de 45%. Otros estudios mostraron del aire espirado.
un 82%.
Cuadro N°57. Prueba rápida de la urea.
Está basada en la capacidad 1.-Se coloca un Reacción positiva: cambio
de H. pylori de hidrolizar la fragmento de biopsia de color del caldo de
urea en amoníaco y dióxido en un tubo con caldo amarillo a rosado.
de carbono, produciendo un urea de Christensen al Reacción negativa: No hay
aumento en el pH del 2%. cambio de color.
medio, que se detecta con 2.-Se incuba algunas
un indicador de pH. horas a 37°C.
c) Examen histológico.- Primeramente se debe dividir el Incubar a 37°C en jarra de Gas Pak a los 3 a 5 días, las
tejido de biopsia en dos partes; una parte colocar en colonias tienen las siguientes caracteriasticas:
formol al 10% y la otra en solfis esteril. Para esta prueba Colonias pequeñas, grises, translúcidas y
se utiliza el tejido en formol con el que se realiza el corte débilmente B-hemolíticas. La tinción de Gram muestra
histológico y la tinción con Hematoxilina eosina, en el se bacterias gramnegativas curvas y de tinción pálida con
observan las bacterias curvadas o enforma de S formas de alas de gaviota y “U”
adheridas a las células epitelilaes gástricas o en los
espacios intercelulares. c) Pruebas bioquímicas.
Examen bacteriológico Bacteria Catalasa Oxidasa Ureasa Nitrato
a) Examen directo.- El fragmento de biosia se frota a H. pylori + + + -
presión en la supeficie de un portaobjeto, se deja secar,
fijar y teñir con Gram, observandose las formas típicas de Prueba de la ureasa en el aliento. El paciente ingiere
presentación de la bacteria. urea marcada con 13C o 14C, disuelta en agua o en tableta;
la ureasa del H. pylori, hidroliza la urea ingerida y se
b) Cultivo.- Moler la muestra en un mortero esteril, o forma dióxido de carbono marcado (13CO2) a los 60
picar el tejido o frotar la muestra sobre el medio de minutos, es absorbido por la sangre y eliminado por los
cultivo. Se cultiva en agar sangre de carnero pulmones mediante la espiración. El 14C se detecta en un
suplementado (CO2 al 10%, O2 al 5% y N2 al 85%). contador de centelleo y el 13C por espectrometría de
masa.
137
Fig. N°. 146. Pruebas de endoscopia, ureasa en el aliento y estudio serológico para el diagnóstico de una infección con H. pylori (Fuente: Struthers, 2005).
Métodos serológicos. Las pruebas serológicas para omeprazol incrementa la eficacia de los antibióticos al
detectar anticuerpos contra H. pylori se han utilizado aumentar el pH; además, elimina el microorganismo.
principalemte para estudios epidemiológicos, pero
también pueden utilizarse para controlar la eficacia del Prevención
tratamiento. Para este efecto se realiza la prueba de Evitar la transmisión vía fecal – oral hirviendo y
ELISA con la detección de IgG. Para la interpretación lavando bien los alimentos antes de consumirlos. No
correcta de los resultados es necesario establecer un valor existen actualente vacuna contra esta infección.
basal de positividad, dado que, en ciertas poblaciones, la
prevalencia de títulos elevados de anticuerpos es
relativamente alta. Por ejemplo en un estudio de reclutas
GENERO CAMPYLOBACTER
del ejercito se encontró una tasa de positividad global de
26%, esta tasa aumento del 24% en el grupo de 17 – 18 Caracteristicas generales y morfología
años al 43% en el grupo de 24 a 26 años. La mayoría de las especies se las encuentra en el
tracto gastrointestinal de animales domésticas y silvestres
Tratamiento (vacunos, porcinos, aves) y contaminando el medio
Actualmente, existen regímenes antibióticos ambiente (agua, alimentos). Producen enterocolitis en el
apropiados que permiten erradicar con buenos resultados hombre y abortos en los animales (ovejas y vacas).
la infección gastrointestinal causada por H. pylori, con Las campylobacterias en general son
una curación permanente de las úlceras en una elevada microorganismos que tienen formas curvadas, en “S” (en
proporción de pacientes. Los regímenes más adecuados alas de gaviota cuando están unidas de a dos y formas
son los que consisten en una combinación de dos alargadas) y espiraladas gramnegativas; las formas
antibióticos más un inhibidor de la bomba de protones cocoides se las observa en cultivos viejos sometidas a
(IBP), cuya administración dura 2 – 4 semanas. El temperatura ambiental. Miden de 0,2 – 0,9 um de ancho
objetivo del tratamiento es la erradicación, más que la por 0,5 – 5,0 um de longitud. Son móviles por medio de
eliminación temporal. El régimen terapéutico más eficaz un único flagelo polar (en uno o en ambos extremos de
es la administración de metronidazol o tetraciclina, o dos a tres veces más grande que el cuerpo bacteriano),
amoxicilina más claritromicina y omeprazol (un IBP). El observados en fresco muestran un movimiento en
tirabuzón. No forma esporas tienen un metabolismo no
138
fermentador ni oxidativo, obtienen su energía al microaerófilas necesitan O2 al 5%, CO2 al 10% y

degradar aminoácidos. Son resistentes a la cefalotina. nitrógeno al 85%.
Clasificación
El género Campylobacter incluye 17 especies de
los cuales las más aisladas de cuadros clínicos humanos
A son: C. jejuni, C. fetus, C. coli, C. lari, C. hyointestinales,
de los cuales la primera es la más patógena para el
hombre.
Fig.N° 147. Formas curvadas (A), en “S” o alas de gaviota Campylobacter jejuni
(B), y espiraladas(C), carácterísticos del campylobacter (Fuente: Nath,
2007).
Rol patógeno:
Desarrollan en medios especiales a 42°C, pH En el proceso de infección intervienen algunos
6,9 a 7,2 en 24 a 48 horas de incubación, son factores de virulencia o patogenesis, como los siguientes:
Cuadro N°. 59. Factores de virulencia o patogénesis de C. jejuni.

FACTOR DE VIRULENCIA O MECANISMOS DE ACCIÓN
PATOGÉNESIS
Flagelo Proporciona a la bacteria la capacidad de
invadir y translocarse al interior del intestino.
Proteina CadF (citoadesin – Adhesina bacteriana que se une a la
fibronectina) fibronectina del epitelio intestinal.
Toxina Cdt (citoletal distending toxin) Produce lisis celular.
Enterocolitis. La dosis infecciosa de C. jejuni es baja; la Epidemiología

ingestión de tan sólo 500 microorganismos, que se La campilobacteriosis es una zoonosis de
pueden encontrar fácilmente en un sola gota de jugo de distribución mundial. Las fuentes de la infección
pollo crudo, puede ocacionar la enfermedad humana. El incluyen especies domésticas y silvestres, como también
periodo de incubación tras la ingestión del alimento es de podrían ser los vegetales y peces contaminados. Se
2 – 5 días, según la dosis engerida. Los microrganismo acepta que las aves silvestres son el principal reservorio.
microaerófilos están adaptados para sobrevivir en la Las especies denominadas termófilas (C.jejuni, C. coli,
mucosa gastrointestinal la colonización se produce C. lari), se encuentran corrientemente en porcentajes
primero por la acción de los flagelos que le permite muy elevados en las aves, lo que estaría relacionado con
moverse hacia el epitelio intestinal para luego adherirse a la temperatura óptima de crecimiento de aquelllas
ella mediante su proteína CadF, para luego penetra y especies, que es de 42 – 43°C.
translocarse al interior del epitelio intestinal provocando La transmisión de los microorganismos al
de esta manera una reacción inflamatoria, con la hombre ocurre en forma directa por contacto, o
movilización de PMN y mononucleares, donde la acción indirectamente por consumo de alimentos contaminados,
de la toxina Cdt produce lisis celular local y diarrea con principalemte carne y leche. La dosis infectiva puede ser
fiebre, malestar general, dolor de cabeza, náuseas, tan baja como 500 bacterias o tan alta como 1000. Otros
anorexia. En la fase aguda aparece dolor abdominal. Este vehículos incluyeron aves, huevos y carne. EEUU a
cuadro suele durar de cinco a ocho días, siendo comienzos de cada primavera sufre una enteritis
autolimitante. bacteriana de 1000 caso /100.000 cada año. En países en
Las heces son acuosas, a veces sanguinolentas y desarrollo se aíslan entre 3 – 15% de C. jejuni de
en ocaciones simula una apendicitis aguda. Se han pacientes que sufren diarrea, siendo los niños los más
descripto otras manifestaciones clínicas por infecciones afectados. En Argentina se aislo C. jejuni del intestino de
extraintestinales y secuelas, como bacteriemia, artritis, un 40% de los pollos destinados al consumo humano y en
endocarditis, peritonitis, pancreatitis, meningitis, el 80 – 100% de los pollo ya faenados.
raramente mortales. Se han observado también la
asociación con el síndrome de Guillain-Barre Diagnótico de laboratorio
(caracterizada por neuritis periférica y debilidad
muscular, por desmielinización del sistema nervioso a) Examen directo. Se trabajan con muestras de heces
periférico). obtenidas por deposición o por hisopado rectal. Realizar
la tinción de Gram para la observación de las formas
típicas de presentación de la bacteria.
139
b) Cultivo. Se utilizan varios medios de cultivo para su bordes redondeado, brillantes tienden a desarrollar
aislamiento e identificación por ej., agar sangre de formando un crecimiento confluyente a lo largo de las
Skrrow, se incuba en una jarra de anaerobiosis de donde líneas de siembra sobre la superficie del agar, no hay
se extrajo el 75% de aire, con un 10% de CO 2 y 90% de hemósis.
N2 en varias placas. Luego de 48 horas observar las
siguientes características: colonias medianas de bordes c) Pruebas bioquímicas. Son varias las pruebas
irreglares planas de color gris, secas o húmedas, también bioquímicas que se realizan para la identificación de las
puede desarrollar como colonias pequeñas, convexas, campylobacterias, las principales son:

Especies catalasa Oxidasa Nitrato Desarrollo en 42°C. Hipurato cefalotina
C. jejuni + + + + + R
C. fetus + + + - - S
Otras especies de Campylobacter sensible a eritromicina, tetraciclina,cloranfenicol,

Las otras especies que han sido aisladas aminoglucósidos y quinolonas. La droga de elección es la
producen ocacionalmente enfermedades por ej., C. fetus, eritromicina y como alternativa ciprofloxacina. Se estima
es causante de abortos en animales y algunas veces que un 5% de las cepas de C. jejuni pueden ser resistentes
septicemia, meningitis, endocarditis en pacientes a eritromicina, por lo que es conveniente regirse a los
humanos con bajas defensas, entre otros mencionar a C. resultados del antibiograma.
coli. C. lari, C hyointestinales, C. curvus y otros, la
mayoría de ellos no están comprometidos con roles Prevención
patógenos para el hombre La medida de prevención más efectiva de la
enteritis por Campylobacter spp. Es el control de los
Tratamiento alimentos, especialmente de origen animal, carnes, leche
La rehidratación constituye la medida cruda, evitar la infección de las especies de animales de
terapéutica principal en la enteritis por Campylobacter consumo humano, control durante el procesamiento de
debido a que la infección es autolimitada, pero en casos los alimentos. No existen vacunas.
severos se recurre al uso de antibióticos; C. jejuni es
140
CAPITULO 13
BACILOS GRAMNEGATIVOS NUTRICIONALMENTE
EXIGENTES
GENERO HAEMOPHILUS
Caracteristicas generales y morfología importante por ser el principal agente causal de

El género Haemophilus está integrado por enfermedades tanto en niños como en adultos.
pequeños cocobacilos gramnegativos pleomórficos con
requerimientos nutricionales exigentes para su cultivo, es Haemophilus influenzae
una bacteria que tiene afinidad por la sangre, por ello en
griego Haemophilus significa “que ama la sangre”, ya Esta bacteria generalmente en muestras clínicas
que en ella encuentra los factores para su crecimiento: se observa en forma de pequeños cocobacilos o bacilos
factor X (hemina) y factor V (NAD). Algunos miembros largos y filamentosos. Su pared celular tiene estructura
de este género forman parte de la flora normal del tracto típica de las bacterias gramnegativas, en cuya membrana
respiratorio superior, otros son importantes patógenos externa también presenta lipopolisacáridos (LPS) y
humanos capaces de provocar enfermedades graves, tales proteínas, además presenta fimbrias de naturaleza
como faringitis, sinusitis, epiglotitis, neumonía, proteica, que participan en la adherencia. Algunas cepas
bronquitis, meningitis, artritis piógenas, endocarditis y de H. influenzae producen polisacárido capsular, mientras
otros. que otras son no capsuladas. Las cepas capsuladas
Los Haemophilus tienen forma bacilar, pertenecen al grupo 1 y se subdividen en seis subtipos (a,
cocobacilar o pleomórfica, de 0,4 um de ancho por 1 um b, c, d, e y f), en función al tipo de polisacárido capsular.
de largo, gramnegativa y Gram variable en cultivos Las cepas no capsuladas pertenecen al grupo 2 y se
viejos; es inmóvil, no esporulado puede agruparse en denominan H. influenzae no tipificable (HiNT). El
cadenas cortas, es aeróbica o anaerobia facultativa. polisacárido capsular es un importante factor de
Desarrollan óptimamente a 35°- 37°C, pH 7,4- 7,8, virulencia, especialmente el de tipo b. La cápsula del H.
preferentemente en admósfera de 5% de CO2. influenzae tipo b (Hib) está compuesta químicamente por
un polímero de ribosa, ribitol y fosfato, llamado
Clasificación polirribitol-fosfato (PRP). El Hib está asociado a
El género Haemophilus pertenece a la familia infección sistémica seria: meningitis, neumonía, artritis
Pasteurellaceae, que también incluye los géneros séptica, epiglotitis y celulitis, las cuales están
Actinobacillus, Pasteurella, Mannheimia, acompañadas por bacteriemia y ocurren generalmente en
Phocoenobacter y Lonepinella; los miembros de estos niños pequeños. Las cepas de H. influenzae no tipificable
últimos, son principalmente cepas animales que en pueden ser portadas asintomáticamente en la nasofaringe
escasas ocaciones se aíslan de seres humanos. y están asociadas a infecciones menos serias que ocurren
El género Haemophilus incluye nueve especies por diseminación contigua en el tracto respiratorio, otitis
que se encuentran en seres humanos y cinco en animales. media, sinusitis, conjuntivitis y neumonía.
Las que se relacionan con el hombre son: Haemophilus
influenzae, H. parainfluenzae, H. haemolyticus, H. Rol patógeno
parahaemolyticus, H. aphrophilus, H. paraphophilus, H. El rol patógeno del H. influenzae esta favorecida
paraphrophaemolyticus, H. segnis y H. ducreyi. De todas por su cápsula, adherencia, proteasa IgA y
estas especies Haemophilus influenzae es la más lipooligosacárido.
Cuadro N° 61. Factores de virulencia del Haemophilus influenzae

FACTOR DE MECANISMOS DE ACCIÓN
VIRULENCIA
Cápsula Permite al germen resistir la acción del complemento y fagocitosis y sobrevivir
en la circulación, es responsable de la invasividad.
Fimbrias Son adhesinas que les permite adherirse a las células humanas (epiteliales,
orofaríngeas, eritrocitos y PMN).
Proteasa IgA Enzima que hidroliza la IgA humana facilitando la colonización de la mucosa.
LPS Es cilioestático, evita el movimiento ciliar del tejido infectado, facilitando la
colonización del tracto respiratorio superior e inferior.
Patogenia.- Haemophilus influenzas que se encuentran de la nasofaringe invaden la mucosa mediante su IgA
adheridas mediante sus fimbrias a las células epiteliales proteasa, su cápsula evita la fagocitosis por macrófagos,
141
coloniza la mucosa e ingresa al torrente sanguíneo para adultos, en quienes la fiebre, la odinofagia, y la dificultad
alcanzar otros tejidos. respiratoria son los signos y los síntomas de presentación.
c) Otitis media. La otitis media se refiere a la

inflamación del oído medio y se divide quirúrgicamente
en dos síndromes: otitis media aguda (líquido en el oído
medio acompañado por signos y síntomas de infección
aguda) y otitis media con derrame (líquido en el oído
medio sin signos ni síntomas). La otitis media aguda
puede ser clasificada a su vez como no complicada,
persistente, recurrente o crónica. La otitis media ocurre
principalmente en niños de 6 meses a 5 años, con la
incidencia máxima entre los niños menores de 3 años. La
alta incidencia de esta infección en los niños pequeños
refleja los mecanismos protectores subdesarrollados de la
trompa de Eustaquio. La otitis media aguda suele ocurrir
como complicación de una infección viral (p. ej., virus
sincicial respiratorio, virus parainfluenza). Los síntomas
son dolor ótico, hipoacusia y, a veces, secreción desde el
Fig. N° 148. Patogenia de Hemophilus influenzae conducto auditivo externo. Los signos son fiebre,
irritabilidad, cefalea y, en ocasiones, náuseas y vómitos.
En los pacientes con otitis media aguda, la otoscopia
a) Meningitis. La invasión nasofaríngea previa en un neumática pone en evidencia una membrana timpánica
huésped sensible (niños menores a 5 años), conduce a la abonbada roja y opacificada relativamente inmóvil. En la
invasión del torrente circulatorio y la posterior siembra otitis media con derrame, se observa abombamiento o
en las meninges. Los síntomas de infección de las vías disminución de la movilidad de la membrana, pero ésta
respiratorias altas por virus y de otitis media parece sólo ligeramente inflamada. El diagnóstico
frecuentemente anteceden la aparición de la meningitis etiológico definitivo requiere la aspiración con aguja del
por H. influenzae. El inicio de los signos y los síntomas líquido de oído medio (timpanocentesis), que no se
puede ser brusco e insidioso. Los niños presentan fiebre, realiza de rutina. Sin embargo, cuando hay secreción,
malestar general y, en ocaciones vómitos, rigidez de la debe recogerse para cultivo. Puede ser necesario el
nuca (en algunos suele estar ausente). Algunos niños cultivo simultáneo de LCR y sangre si aparecen signos y
pueden sufrir parálisis de nervios periféricos, craneales o síntomas sistémicos.
ambos. Las causas bacterianas más frecuentes de otitis
Las enfermedades subyacentes debilitantes, media aguda son S. pneumoniae, H. influenzae y
como diabetes, alcoholismo crónico, neumonía, infección Moraxella catarrhalis, el 25 al 66% son causadas por H.
por HIV y otros estados de inmunodeficiencia influenzae. Más del 90% de las cepas de H.influenzae
predisponen a los adultos a la meningitis por H. aisladas de muestras apropiadamente recogidas son no
influenzae. Alrededor del 50% de los casos se deben a tipificables y el 10% resultantes son de tipo b. Hasta el
cepas no tipificables de H. influenzae y el otro 50% son 25% de los niños con otitis media causada por
causados por cepas tipo b y otras encapsuladas. microorganismos tipo b también tienen una bacteriemia
simultánea, meningitis o ambas. Las complicaciones
b) Epiglotitis. H. influenzae tipo b, ha sido asociado incluyen otitis media aguda recurrente, persistencia de los
históricamente con epiglotitis, una celulitis de los tejido derrames del oído medio que requiere la inserción de
supraglóticos, que conduce a edema laríngeo obstructivo. tubos de drenaje, deterioro auditivo, mastoiditis,
La epiglotitis pocas veces ocurre en lactantes y se meningitis, otitis media crónica, absceso encefálico y
observa típicamente en niños de 2 a 7 años y en varones sepsis. Cabe destacar que solo el 20 – 30% de las
de 20 a 30 años. En general, la presentación es aguda, muestras de líquido de oído medio recogídas de niños
con odinofagia intensa, disfagia, fiebre y tumefacción de con otitis media con derrame tienen cultivos bacterianos
la epiglotis por encima de la laringe en la base de la positivos; aunque actualmente se está asilando con más
lengua. A medida que la enfermedad progresa, la frecuencia otros microorgansimo como el Alloicoccus
deglusión se torna cada vez más difícil y se asocia con otitidis como agente causal de esta infección.
sialorrea, estridor inspiratorio y dificultad respiratoria por
obstrucción de la vía aérea. En estos casos la intubación d) Sinusitis. La sinusitis aguda se caracteriza por
endotraqueal y la administración de antibióticos son síntomas de resfriado persistente, secreción nasal y nasal
necesarias. La epiglotitis también puede aparecer en los posterior purulenta, tos fiebre, cefalea y, a menudo, dolor
facial. Esta presentación aguda se mezcla con un
transtorno denominado sinusitis crónica, caracterizado
142
por la persistencia de los signos y los síntomas anteriores epiglotitis, bacteriemia, otitis media), esta neumonía es
más allá de una duración de 3 meses, con la tos y la lobular, segmentaria y purulenta, características similares
secreción nasal purulenta como los síntomas principales. a la neumonía neumocócica. En estos casos, los
Una sensación de plenitud facial o la presencia de edema microorgnismos de tipo b encapsulados constituyen los
o cambio de color alrededor de los ojos puede indicar la agentes etiológicos habituales. H. influenzae no
extención del proceso infeccioso desde los senos tipificable son causa importante de neumonía con
paranasales a los tejidos blandos de la órbita. En los bacteriemia o sin ella sobre todo en paciente ancianos
estudios de los cuales se obtuvieron muestra quirúrgicas con transtornos respiratorios subyacentes, como
o mediante aspiación con aguja de los espacios de los bronquitis crónica, EPOC y bronquiectasias o con
senos maxilares, H. influenzae y S. pneumoniae fueron enfermedades sistémicas, que incluyen
los microorganismos aislados más a menudo. Los inmunodeficiencia, diabetes, alcoholismo y enfermedad
estudios bacteriológicos cuidadosos de pacientes con neoplásica. El diagnóstico definitivo de neumonía por H.
sinusitis aguda, han demostrado con claridad que H. influenzae se dificulta por la presencia del
influenze es el agente etiológico principal en el 20 – 25% microorganismo en las vías respiratorias altas de los
de los adultos y en el 36 – 40% de los niños, individuos sanos, Las muestras de esputo expectoradas y
respectivamente. Estos agentes suelen ser invasores tosidas pueden proporcionar resultados insuficientes o
secundarios luego de una infección sinusal viral (p. ej., engañosos; pueden ser necesarias muestras de lavado
rinovirus). La mayoría de la cepas de H. influenzae bronquial, broncoscopia o lavado broncoalveolar para
aisladas en pacientes con infeciones sinusales agudas son obtener un diagnóstico definitivo del cultivo.
no tipificables. H. influenzae desempeña un papel menor
en la patogenia de la sinusitis crónica. g) Bacteriemia. La bacteriemia es una manifestación
frecuente y temprana de la meningitis por H. influenzae
e) Bronquitis y enfermedad pulmonar obstructiva tipo b, pero algunos lactantes pueden tener bacteriemia
crónica (EPOC). La bronquitis crónica, es una entidad sin evidencia de meningitis. La bacteriemia puede
clínica mal definida, que comprende la inflamación de sembrar tejidos blandos, articulaciones y hueso, y
los bronquios sin afectación pulmonar importante y que conducir a celulitis, artritis séptica y osteomielitis,
se caracteriza por una tos por lo general no productiva y respectivamente. La celulitis amenudo aparece en los
persistente, sibilancias y disnea. Este transtorno es niños como tumefacciones violáceas o azul rojizas sobre
extraordinariamente frecuente, sobre todo entre los las mejillas y las áreas perioritrarias del rostro. También
varones de 40 años que fuman. Los factores ambientales se describió la celulitis en los adultos en asociación con
(p. ej., contaminación del aire) y las infecciones virales bacteriemias por H. influenzae tipo b y no tipificables. La
concurrentes irritan e inflaman la mucosa respiratoria, la artritis séptica se caracteriza por dolor, tumefacción y
exponen más a la colonización bacteriana y conducen a la disminución de la motilidad de la articulación infectada.
producción de esputo purulento. En los pacientes con La osteomielitis se presenta con tumefacción y dolor
bronquitis crónica estable, las vías aéreas inferiores óseo. Si bien H. influenzae tipo b aun es revindicado
suelen estar colonizadas por numerosas cepas de H. como la causa iniciál de artritis séptica, en los niños más
influenzae no tipificable; durante las exacerbaciones allá del périodo neonatal, pero de menos de 2 años de
agudas la cantidad de estos microorganismos aumenta. edad.
La persistencia de tos crónica y producción de esputo por
lo menos durante 3 meses consecutivos durante más de h) Endocarditis. H. parainfluenzae, H.aphrophilus y H.
dos años en sucesión se denomina enfermedad pulmonar paraphrophuilus son las especies de Haemophilus ailadas
obstructiva crónica o EPOC. Los paciente con con mayor frecuencia de pacientes con endocarditis en
exacerbaciones graves de bronquitis crónica y EPOC infecciones intravasculares; H. influenzae tipificable y no
tienen disnea, hipoxia y habitualmente hipertermia leve. tipificable son relativamente infrecuentes. En general los
Durante las exacerbaciones, la producción de esputo está pacientes tienen una evolución clínica subaguda con
aumentada y la consistencia cambia de mucoide a fiebre leve, malestar general, escalofríos y síntomas
mucopurulenta o purulenta. La tinción de Gram de respiratorios. Se observa enfermedad vascular
muestras de esputo correctamente recogidas suelen preexistente o subyacente sólo en un 50% de los casos, y
mostrar muchos PMN asociados con un morfotipo la presencia de un soplo cardíaco es el único hallazgo
bacteriano particular (p. ej., los cocobacilos de H. sugestivo es estos pacientes. Los factores de riesgo para
influenzae de tinción pálida). Los agentes más frecuetes endocarditis con las especies de Haemophilus son la
aislados del esputo purulento son cepas no tipificables de presencia de lesiones dentales o bucales (periodontitis,
H. influenzae seguidas de S pneumoniae y M. catarhalis traumatismo, heridas bucales penetrantes),
manipulaciones dentales, o cirugía bucal, válvulas
f) Neumonia. La neumonía por H. influenzae puede ser cardíacas enfermas o dañadas.
otra manifestación de la infección sistémica por H. Las otras especies de Haemophilus como H.
influenzae o una complicación de la EPOC. En los parainfluenzae, H. aphrophilus y H. paraphrophilus son
pacientes con enfermedad sistémica (meningitis, agentes infrecuentes de epiglotitis
143
bacterémica,bronquitis, sinusitis, otitis media EPOC, adulto, mientras que las cepas del grupo 1 lo hacen en los
neumonía, peritonitis, sinusitis, osteomielitis, niños. Los adultos con EPOC muestran riesgo, si además
endoftalmitis, meningitis, infecciones en heridas y otros. si son fumadores o alcohólicos, presentan alto riesgo.
Epidemiologia Diagnostico
H. influenzae, es una bacteria que está altamente De acuerdo con el cuadro clínico se toma la
adaptada al huésped humano, que es parásita estricta del muestra. Se trabaja con hisopado faríngeo, LCR, sangre,
hombre y que coloniza principalmete las vías aéreas líquido articular, esputo o lavado bronqueoalveolar. La
superiores. Se la encuetra en la nasofaringe de hasta el muestra debe ser procesada inmediatamente después de
75% de niños y adultos sanos, de ellas las cepas no obtenida. Algunas veces es necesario tomar muestra con
capsuladas son las que más prevalecen. Los individuos el método de “placa de tos”. La toma de muestra de la
que son portadores intermitentes de Hib en el tracto placa de tos, consiste en colocar una placa de agar
respiratorio superior son los que frecuentemente chocolate a 15 cm de la boca del paciente para luego en
transmiten la infección de un huésped a otro, que puede el momento del acceso de tos del paciente recibir esta
ser en forma directa mediante las secreciones (muestra) directamente en la caja de petri abierta.
respiratorias (gotitas de saliva eliminadas por estornudos
y tos). a) Examen directo.- A partir de la muestra realizar la
La distribución de la enfermedad por H. tinción de Gram, ésta nos orienta hacia el diagnóstico de
influenzae tipo b varía considerablemente entre países. una infección por Haemophilus, Esta presunción debe
En general, la incidencia es baja en países confirmarse por aislamiento de la bacteria mediante
industrializados y alta en aquellos en vías de desarrollo, cultivo para ello se debe sembrar en agar chocolate, pero
en América del sur se estima entre 17 y 25 casos cada no en agar sangre (excepto alrededor de una colonia de S.
100.000 niños menores de 5 años. La tasa de mortalidad aureus). La identificación de las distintas especies se
en casos de meningitis por Hib es del 5 al 10% afectando realiza por análisis de los factores necesarios para el
más a niños de entre 1 mes a 2 años de edad; otro factor crecimiento: factores X y V (ver cuadro N° 60). Se puede
es la asistencia a guarderías, orfanatos, salas de lactantes, también utilizar pruebas bioquímicas (producción de
el hacinamiento e individuos de bajos recursos indol, ureasa, ornitina-decarboxilasa, producción de
económico. Las cepas del grupo 2 (HiNT) causan la ácidos a partir de azucares) para subdividir a H.
mayor parte de las infecciones por H. influenzae en el influenzae en biotipos.
Cuadro N° 62. Requerimiento de factores y producción de hemólisis por especies del género Haemophilus.
Especie Requerimiento Requerimiento Hemólisis
factor X factor V
H. influenzae + + -
H. paraifluenzae - + -
H. haemolyticus + + +
H. parahaemolyticus - + +
H. aphrophilu - - -
H. paraphrophilus - + -
H. ducreyi + - -
b) Caracteristicas de cultivo y desarrollo. El agar Agar chocolate.- El agar chocolate se perepara

sangre de carnero convencional no es apropiado para el agregando sangre de carnero a una base de agar
cultivo de especies de haemophilus que requiere factor V enriquecido (tripti soya agar autoclavado), calentar a
para el crecimiento, debido a que la sangre ovina 80°C hasta tornarse de color café (ésta temperatura
contiene naturalmente enzimas que inactivan el factor V. produce la lisis de los globulos rojos con la consiguiente
La sangre de conejo o de caballo no contiene estas liberación del factor NAD. También se puede agregar a
enzimas y el agar preparado que contiene algunos de este preparado isovitales al 1% (suplemento
estos productos hemáticos apoya el crecimiento de la enriquecedor).
mayoría de las especies de Haemophilus. Cualquiera que Técnica de siembra en estria para estafilococos.-
sea el medio utilizado, el aislamiento del Haemophilus Muchas bacterias y levaduras sintetizan y secretan NAD
requiere la incubación a 35°- 37°C y un medio ambiente durante el crecimiento en medios bacteriológicos. En
húmedo con CO2 al 5%. El aislamento primario de cultivos mixtos, las especies de Haemophilus que
especies de Haemophilus de muestra clínicas se logra requieren factor V pueden crecer como colonias
utilizando agar chocolate o la estria de estafilococos en puntiformes alrededor de las colonias de estos otros
agar sangre. microorganismos. Este fenómeno se denomina
144
satelitismo. El satelitismo proporciona una técnica para Las hemófilos dependientes del factor X también crecen
detectar estos mocroorganismos en cultivos mixtos y una como colonias satélites, porque se liberan hemina y
prueba presuntiva para la identificción del género. Una hematina de los eritrocitos lisados por la acción de las
colonia de una especie de Haemophilus posible es hemolisinas estafilocócicas. Este método se puede
subcultivada en una placa de agar sangre de carnero y se utilizar para la identificación presuntiva de especies de
siembra en estría como un césped. Utilizando un asa, se Haemophilus cuando no se requiere ni es esencial la
hace una única siembra en estría de un microorganismo identificación de especie (p. ej., muestras del aparato
productor de NAD, como S. Aureus, a través del inóculo respiratorio).
del posible Haemophilus. Después del crecimiento En agar chocolate, las colonias de H. influenzae
durante toda la noche en un medio ambiente enriquecido son lisas convexas de 1 a 2 mm y de color gris azulado;
con CO2 a 35 – 37°C, pueden observarse colonias grises las cepas muy encapsuladas pueden parecer mucoides.
húmedas pequeñas de los hemófilos dentro del área Para la identifición de Haemophilus, se debe realizar la
hemolítica adyacente al crecimiento de los estafilococos. prueba de requerimiento de factores.
Cuadro N° 63. Prueba de requerimiento de factores X y V.

1.- Suspeder en 0,5 ml de solfis esteril un Si el desarrollo solo se presenta
La prueba se cultivo fresco (24 hrs.) del microorganismo alrededor del factor V se trata del H.
basa en que H. obtenido en agar chocolate. parainfluenzae y otros.
influenzae 2.- Embeber un hisopo estéril en dicha Si el desarrollo se presenta en el medio
requiere para suspensión y sembrar en toda la superficie de de ambos factores (discos) X y V es H.
desarrollar factor una placa de agar Mueller Hinton o Agar influenzae.
X y V en su tripticasa soya. Si el desarrollo se presenta alrededor del
medio de cultivo 3.- Agregar los discos que contienen los factor X, se trata del H. ducreyi.
factores X y V separados a una distancia de
1,5 cm.
4.- incubar 24 – 48 horas en atmosfera de 5 a
10% de CO2.
Fig.N° 149. Prueba de requerimiento de factores: Desarrollo en XV es H. influenzae.

Si desarrolla en alrededor de V es H. parainfluenzae (Fuente: Struthers, 2005).
Tratamiento clavulánico o cloranfenicol para las cepas que la

La ampicilina ha sido la droga de elección, pero producen (principalmente en la meningitis). De todas
en la actualidad más del 20% de los aislamientos clínicos maneras el antibiograma rige el tratamiento.
de H. influenzae son resistentes a este antibiótico debido
a la producción de una B-lactamasa mediada por Prevencion
plásmido. El tratamiento recomendado sigue siendo la No existe ninguna vacuna frente a la enfermedad
ampicilina para las cepas no productoras de B-lactamasa, causada por HiNT, que sigue siendo muy frecuente en
y una cefalosporina de tercera generación (cefotaxima o ciertos grupos de pacientes. No obstante, hay una vacuna
ceftriaxona), también se puede usar amoxicilina + ácido Hib conjugada muy eficaz par la prevención de la
145
enfermedad causada por H. influenzae tipo b. Esta vacuna Como las lesiones genitales y los ganglios supurados o
ha sido la responsable de una reducción espectacular en los abscesos pueden sobreinfectarse con otras bacterias
la incidencia de la infección invasora causada por este (sobre todo fusobacterias, estafilococos y estreptococos),
patógeno (especialmente, la meningitis en los niños), así el diagnóstico mediante frotis teñido con Gram es difícil
como de la desaparición del estado de portador y se debe intentar el cultivo. Es difícil el cultivarlo, se
nasofaríngeo de Hib en los países desarrollados. Sin puede utilizar agar base GC con suplemento de
embargo, todavía son necesarios los protocolos de hemoglobina al 2% suero fetal de ternero al 5% e Iso
vacunación generalizada en los países en vías de Vitalex al 1% se incuba igual que el agar chocolate
desarrollo para proteger a los niños frente a las durante 10 días. Las colonias son pequeñas, no mucoides,
infecciones potencialmente mortales causadas por H. color gris, amarillo u ocre. Con asa son difíciles de
influenzae tipo b. recoger. En la tinción de Gram se parecen a cocos
gamnegativos son catalasa (-) y oxidasa (+). El
Haemophilus ducreyi Requerimiento de factores ver en el cuadro N° 63.
Es el agente causal del chancroide o chancro

blando, una infección de transmisión sexual altamente
contagiosa caracterizada por úlceras genitales y
perianales dolorosas y linfadenopatia inguinal sensible a
la palpación. El cancroide es la causa principal de
enfermedad ulcerosa genital en América latina, África,
este y Sudeste Asiático e India. Se han comunicado
brotes de chacroide en algunas ciudades costeras en los
Estado Unidos y Canadá. En estos brotes, las prostitutas
han sido el reservorio habitual, un factor de riesgo Fig.N° 150. Cocobacilos gramnegativos agrupados en cardúmenes o
conductual importante es el intercambio de sexo por vías de ferrocarril, pertenecientes a H. ducreyi
dinero o drogas. Tratamiento
Las lesiones genitales causadas por este H. ducreyi, tiene una amplia gama de resistencia
microorganismo también se denominan “chancros a los antibióticos como ampicilina, tetraciclina,
blandos” porque, al contrario de la lesión primaria sulfaminas, cloranfenicol y los aminoglucócidos más
(chancro) de la sífilis, los bordes de la lesión son antiguos. Las cefalosporinas de tercera generación
irregulares y plegados y no están bien demarcados e (cefotaxima, ceftriaxna), ciprofloxacino, eritromicina
indurados. Despues de un periodo de incubación de 4 a 7 muestran buena actividad contra el germen.
días, las lesiones comienzan como pápulas eritematosas
sensibles a la palpación que se vuelven pustulosas, GENERO BORDETELLA
erosionadas y ulceradas en las siguientes 48 a 72 horas.
En los varones, las lesiones del chancroide suelen ser
sensible a la palpación, dolorosas y éstan cubiertas por un Caracteristicas generales y morfología
exudado gris amarillento que cubre una base sangrante y El género Bordetella está compuesto de bacilos
dura. Suelen aparecer una a tres lesiones sobre los gramnegativos que infectan el epitelio ciliado del tracto
genitales extenos. En las mujeres, se pueden presentar respiratorio del hombre y algunos mamíferos,
múltiples lesiones sobre los labios genitales, dentro de la produciendo enfermedades respiratorias como
vagina y en la región perianal. Las lesiones pueden unirse coqueluche o tosferina en el hombre y rinitis y neumonía
para formar grandes áreas ulcerativas que pueden en los animales.
sobreinfectarse. Excepcionalmente se pueden presentar Las bacterias que conforman este género son
dichas lesiones en la boca y sobre la conjuntiva. Las bacilos cortos pequeños (cocobacilos) gramnegativos, no
adenopatías pueden supurar y formar grandes abscesos esporulados, de 0.2 de diámetro y 0.5 a 2 um de largo,
inguinales y fístulas. que se presentan solos, en pares y raramente en cadenas.
En el aislamiento primario las bacterias son de tamaño
uniforme, pero en los subcultivos se observan formas
Diagnostico laboratorial filamentosas. Son aerobias y desarrollan a 37°C entre 2 a
a) Toma de muestra y examen directo. Con la ayuda de 6 días, algunos de sus miembros son móviles; son
un hisopo o un asa bacteriológica recoger la muestra de la sensible a la luz directa del sol, a 56°C se destruyen en 15
base la úlcera chancroide, con lo que se realiza un frotis y minutos.
tinción de Gram, en ella se observa cocobacilos
gramnegativos de tinción pálida a menudo agrupados “en
cardúmenes” o dispuestos en cadenas paralelas Clasificación
largamente enrolladas “en vía de ferrocarril”. Se pueden Al género Bordetella pertenecen cuatro especies,
encontrar en el interior o exterior de las células PMN. pertusis, parapertusis, bronchiseptica y avium. De todas
ellas Bordetella pertusis es el más importante por ser el
146
agente causal de la tos convulsa o coqueluche fisión binaria. En su nutrición oxida aminoácidos, pero
principalmente en niños. no fermenta hidratos de carbono, requiere como nutriente
básico NAD y un agregado de sangre. Por este motivo, se
Bordetella pertusis recomienda el medio de agar Bordet-Gengou enriquecido
con 13 -20% de sangre sin el agregado de CO2.
Es una bacteria aerobia estricta, inmóvil,
gramnegativo, frecuentemente se observa coloración Rol patógeno
intensa bipolar (presencia de corpúsculos metacromáticos El rol patógeno de Bordetella pertusis esta
bipolares). En general su morfología es parecida a los favorecida por su capacidad de adherencia al epitelio
Haemophilus. No forma esporas, desarrolla a un pH de ciliado de las vías respiratorias superiores y liberacion de
6,8 a 7,4 a una temperatura de 35 a 37°C y se divide por toxinas.
Cuadro N°. 64. Factores de virulencia de Bordetella pertusis.

FACTORRES DE MECANISMO DE ACCIÓN
VIRULENCIA
Adhesinas: Proteinas filamentosas que envuelven a la bacteria que le permite adherirse a las
Hemaglutinina células ciliadas del epitelio del tracto respiratorio superior y pegarse e introducirse
filamentosa (FHA) a los macrófagos para sobrevivir.
y fimbrias
Toxinas: Toxina Exotoxina parecida a la toxina colérica y Shiga tiene capacidad de inducir a las
pertusis células epiteliales ciliadas del tracto respiratorio a producir gran cantidad de
adenilato ciclasa AMPc con capacidad de producir hemólisis, inhibir la
quimiotaxis, fagocitosis de los PMN y apoptosis de macrófagos. Esta toxina es la
responsable del incremento de las secreciones respiratorias y de la producción del
mucus en la tos convulsa y la diseminación de la bacteria.
Tos ferina o coqueluche. Las bacterias inhaladas se postulado que adultos asintomáticos o con formas leves
unen a los cilios respiratorios comensando en la de la enfermedad actúan como reservorios de la
nasofaringe y finalizando en los bronquios y bronquiolos. enfermedad. Los individuos inmunizados pueden
La fijación está mediada por las proteínas adhesinas y presentar formas leves con síntomas del tracto
fimbrias de la envoltura de la bacteria. Alli se multiplican respiratorio superior o bronquitis leve. La susceptibilidad
y por la acción de su toxina pertusis producen adenilato de los lactantes y niños pequeños no vacunados es
ciclasa (AMPc), responsable de la destrucción de las universal. La transmisión tiene lugar con mayor
células ciliadas respiratorias, aumento de la secreción de frecuencia por vía respiratoria mediante el contacto e
mucus, disminución de la actividad de los neutrófilos inhalación de gotas respiratorias que elimina el indivíduo
produciendo un cuadro clínico caracterizado de tos seca infectado mediante la tos.
de duración mayor a dos semanas con paraximos (acceso
de tos prolongada e intensa con ruido inspiratorio) Diagnostico de laboratorio
seguido en muchos de los casos con vómito. En el tracto El diagnóstico laboratorial consiste en un cultivo
respiratorio se forma un exudado mucopurulento y de hisopado faríngeo o la placa de tos, en el medio de
sanguinolento que afecta a las vías respiratorias de agar Bordet Gengou y Mac Conkey.
calibre pequeño (especialmente en lactantes) y que La toma de muestra de la placa de tos, consiste
predispone a los episodios de tos paroxística. Pueden en colocar una placa de agar Bordet Gengou a 15 cm de
ocurrir complicaciones (infecciones secundarias y la boca del paciente para luego en el momento del acceso
alteraciones del sistema nervioso central), presentadose de tos del paciente recibir esta (muestra) directamente en
con hemorragia respiratoria, neumonía, otitis media, la caja de petri abierta.
encefalopatía y muerte.
a) Examen directo. En la tinción de Gram observamos
Epidemiología bacilos, cocobacilos gramnegativos parecidos a los
A pesar de que es una enfermedad que se puede haemophilus.
prevenir mediante vacuna, la tos ferina, sigue
constituyendo un problema de todo el mundo. Los b) Cultivo. Luego de 3 a 6 dias de incubación el
adultos y los adolescentes representan una reserva desarrollo de las colonias tiene las siguientes
importantante de este patógeno y son a menudo la fuente características:
de la infección para los lactantes y niños pequeños. La Colonias de bordes redondeados, superficie
mortalidad es mayor en niños menores de un año. Se ha convexo aspecto húmedo y brillantes, consistencia
147
mucoide, de 1mm de diámetro, grisáceo con lustre c) Pruebas bioquímicas. La diferenciación de las
perlado (a manera de gotitas de mercurio); producen un especies de bordetella se realiza mediente las siguientes
halo de hemólisis estrecho. pruebas bioquímicas:

Bacterias Desarrollo en Motilidad Reducción Ureasa oxidasa
McConkey de nitrato
B. pertusis - - - - +
B. parapertusis +/- - - + -
B. bronchiseptica + + + + +
Tratamiento Clasificación
Varios antibióticos pueden ser efectivas para el Según el Manual de Bergey, se conocen cinco
tratamiento de esta enfermedad entre ellos la especies P. multocida, P.pneumotrópica, P. haemolytica,
eritromicina, cotrimoxazol, tetraciclina y el cloranfenicol. P. aerógenes y P. gallinarum. De todas ellas P.
De todos ellos la eritromicna y los nuevos macrólidos multocida es la que se ha asilado más frecuentemente de
(azitromicina, raxitromicina) son los de elección por su los procesos patológicos humanos.
capacidad para ingresar a las vías respiratorias.
Pasteurella multocida
Prevención
El uso de la vacuna contra B. pertussis ha Es la especie tipo del género y el principal
prácticamente erradicado la tos convulsa de los países patógeno humano. El nombre que recibe deriva de su
desarrollados. Las vacunas cuyo uso están más amplia variedad de huéspedes en el que se encuentra.
difundidos en la actualidad, están compuestas por B.
pertussis enteras muertas combinadas con toxoides de Rol patógeno
difteria y tétanos (vacuna DPT o comúnmente llamada Cuando el animal muerde a una persona, las
vacuna triple). Que se adminsitra en tres dosis cada dos pasteurelas penetran en la herida e inician la infección.
meses empesando a los dos meses del recién nacido, más La mayoría de la infecciones por mordeduras son
dos dosis de refuerzo al un año y 6 años de edad. polimicrobianas, pudiendo presentar toda una variedad de
bacterias anaerobias facultativas y estrictas, además de P.
multocida. La cápsula y la endotoxina inducen una
GENERO PASTEURELLA intensa inflamación, acompañada de una descarga
purulenta. Las mordeduras en la mano, ya sean de gatos u
Caracteristicas generales y morfología otros animales, son peligrosas, debido a la estructura
El género Pasteurella, está formado por un anatómica de la misma. En la mano hay muchos huesos,
grupo heterogéneo de bacterias patógenas para los tendones y articulaciones y hay menos sangre circulando
animales, capaces de ocasionar diferentes cuadros que en otras área del cuerpo. Los primeros signos de
clínicos en el hombre que pueden abarcar desde abscesos infección por pasteurela se suelen producir entre 2 y 12
locales a cuadros de sepsis o endocarditis. horas después de la mordedura, y se suelen presentar
Los microorganismo integrantes del género como dolor, enrojecimiento e hinchazón del área
Pasteurella se caracterizan por presentarse en forma de alrededor del punto de la mordedura, seguida a veces de
células esféricas, ovoide o bacilares de 0,3 – 1 um de linfangitis regional, tendosinovitis u osteomielitis.
diámetro por 1 – 2 um de longitud. Generalmente Otras veces, como consecuencia de
aparecen aisladas y es poco frecuente su agrupación en sobreinfección del aparato respiratorio, puede aparecer
pares o cadenas cortas. Es común su coloración bipolar, cuadros neumónicos o bronquiales, ya sea por uno u otro
especialmente en preparados provenientes de material mecanismo. P multocida puede pasar a sangre y dar
infeccioso. Son gramnegativos, no móviles, anaerobio bacteriemia con focos metastásicos en otros órganos
faculttivos, desarrollan óptimamente a 37°C. Son (meninges, articulaciones, oído, senos paranasales, etc.).
catalasa, oxidasa, indol, sacarosa positivos; gelatinasa,
rojo de metilo y Voges proskauer negativos; no producen Epidemiología
lisina ni arginina decarboxilasa. La glucosa y otros El reservorio de la infección es probablemente
sustratos fermentables son metabolizados con producción un portador sano, ya que P, multocida no sobrevive por
de ácido, generalmente sin gas. mucho tiempo fuera del huésped. Mamíferos, aves y
personas pueden ser reservoro del P. multocida.
P. multocida, ocupa un nicho ecológico en la
nasofaringe del gato (produciéndose algo similar a lo que
148
ocurre con el estreptococo B-hemolítico en el hombre). Desarrollando tres tipos de colonias según su virulencia:
También suele colonizar amígdalas del perro; la lisas, mucosas y rugosas; las primeras son las más
sobrevida del microorganismo es escasa en agua y suelo, virulentas. La identificación de la bacteria se realiza
siendo transmitida más comúnmente por contacto directo. mediante las pruebas bioquímicas, considerando las
En general, las infecciones humanas se características de comportamiento bioquímico arriba
adquieren por mordeduras de animales como perros o mencionadas.
gatos. En el 80% de las infecciones por arañazos de gato
la infección es causada por esta bacteria. También se ha Tratamiento
aislado de gargantas de individuos sanos que están en La penicilia G es el antibiótico de elección,
contacto con animales infectados, de allí que se debe aunque se suele utilizar antibióticos de amplio espectro,
considerar la posibilidad de que el microorganismo se si se sospecha la presencia de otros microorganismos que
difunda a través de contacto interhumano por gotitas de concomiten la infección, la amoxicilina/ácido
nasofaringe, esputo, orina o heces. clavulanico, las cefalosporinas, tetraciclina pueden ser
utilizadas. Como en otros casos de infección piógenas los
Diagnóstico de laboratorio abscesos locales deben drenarse. Al producirse la lesión
Las muestra con las que se trabaja son: exudados por mordedura, la herida debe limpiarse cuidadosamente,
purulentos (arañazo o mordedura de animales), esputo evitando la sutura de la misma,
matinal o hisopado nasal (compromiso del tracto
respiratorio), LCR (meningitis) y hemocultivos repetidos Prevención
(septicemia). Tras la mordedura por un gato o un perro, se
recomienda la administrar amoxicilina/ácido clavulánico
a) Examen directo, cultivo y pruebas bioquímicas.- como profilaxis de la infección por P. multocida.
Con estas muestras realizar la tinción de Gram,
hemocultivo y el cultivo en agar sangre y agar chocolate.
149
CAPITULO 14
BACILOS GRAMPOSITIVOS
GENERO CORYNEBACTERIUM
Caracteristicas generales y morfología Rol patógeno

Las corynebacterias son bacilos grampositivos, C. diphtheriae, llega a las vías respiratorias altas
no esporulados. No poseen cápsula y, por carecer de del huésped susceptible, se aloja en la nasofaringe, de
flagelos son inmóviles, catalasa positivos. Son bacilos aquí, se disemina a la laringe y traquea, donde se
pleomórficos (formas variadas) que muestran extremos multiplica y produce una exotoxina con acción local y
abultados (debido a la mayor intensidad de tinción por la general. El proceso es el siguiente: Después de un
presencia de corpúsculos metacromáticos, que son periodo de incubación de 2 a 4 días la difteria se presenta
polifosfatos denominados cuerpos de Babes-Ernst), se como una faringitis o amigdalitis. El paciente sufre
parecen a una clava o una maza. Miden entre 2 a 8 um de malestar general, dolor de garganta y fiebre, con la
longitud y 0,5 a 1 um de diámetro. Como estas bacterias aparición simultánea de un exudado o seudomembrana
permanecen parcialmente adosadas luego de la división que puede cubrir parte de las amígdalas, úvula, palaladar
bacteriana, al microscopio generalmente se observan blando y faringe. Esta membrana blanco-grisácea, que se
agrupadas en empalizada, en forma de L, X, Y, V o letras produce por la acción de la toxina diftérica sobre el
chinas. epitelio, está compuesta por un coágulo de fibrina,
Mientras que otras corynebacterias pueden crecer leucocitos, eritrocitos, células epiteliales necrotizadas,
en condiciones microarófilas o anaeróbicas, C. otros detritus celulares y bacterias. La membrana se
diphtheriae es un aerobio estricto; pH 7,2 a 7,4 a 37°C. adhiere a la submucosa y puede aparecer en forma
localizada en las zonas descriptas o puede extenderse
ampliamente y recubrir la cavidad orofaringea y la
tráquea, a través de la faringe.
La remoción mecánica de esta seudomembrana
revela una submucosa sangrante y edematizada. Es
común encontrar en las formas severas de la difteria
inflamación de los ganglios cervicales y, en los casos
severos, esta adenitis cervical se acompaña de edema y
Fig. N° 151. Bacilos grampositivos con extremos abultados y produce un aspecto característico de “cuello de buey”. En
agrupación en letras típico de C. diphtheriae (Fuente: Nath, 2007).
los niños de corta edad la seudomembrana puede
producir dificultad respiratoria. Las complicaciones de la
Clasificación difteria son causadas por obstrucción respiratoria o por
El género Corynebacterium contiene gran el efecto sistémico de la toxina diftérica. La obstrucción
cantidad de especies que han sido aisladas en muestras mecánica de la vía aérea producida por la
clínicas humanas, animales y el medioambiente. seudomembrana, el edema y la hemorragia puede
Corynebacterium diphtheriae, es el patógeno clásico de aparecer en forma abrupta y causar la muerte por asfixia,
este grupo causante de la difteria. Otras especies, como especialmente si una gran porción de seudomembrana se
C. jeikeium, C. striatum, C. pseudodiphthericum y C. desprende y es aspirada. Específicamente la toxina
urealyticum, se aíslan con más frecuencia que las otras diftérica es una proteína compuesta de dos fracciones A y
corynebacterias y se comportan principalmente como B. La fracción B adhiere la toxina a la membrana celular
agentes oportunistas. Otro grupo de corynebacterias del tejido del huésped, esto facilita el transporte o
como C. xerosis, C. haemolyticum y C. ulcerans, se penetración de la fracción A en la célula. Luego la
denominan comúnmente difteroides y son habitantes fracción A se separa de la B y se fija al factor de
normales de las mucosas del aparto respiratorio, urinario elongación (FE-2) de la célula infectada y lo inactiva,
y de la conjuntiva y no causan enfermedad. originando como consecuencia inhibición de la síntesis
proteica, lo que provoca la muerte de la célula y la
necrosis local (mecanismo de acción similar de la
exotoxina de P. aeruginosa, toxina colérica, toxina
pertusis y E. coli).
150
Fig. N° 152. Adhesión, penetración y liberación de la toxina diftérica sobre la célula de la mucosa faríngea.(micro basada en resolución de
problemas). (Fuente: Nath, 2007).
La toxina diftérica que llega a la circulación afecta a un individuo sea portador. C. diphtheriae se transmite
todas las células del organismo, pero los efectos más por medio de aerosoles de microgotas respiratorias y por
serios ocurren sobre el corazón y sistema nervioso. El contacto con secreciones respiratorias o exudado de
riesgo asociado a las complicaciones cardíacas y lesiones cutáneas. La difteria afecta básicamente a los
neurológicas es proporcional a la extensión y severidad niños y todavía causa problemas en países
de la enfermedad local. La miocarditis diftérica puede subdesarrollados. Esos problemas pueden reducirse
aparecer durante la segunda y tercera semana en el 10 a notablemente por medio de la vacunación. La
25% de los pacientes. Mientras que los primeros signos enfermedad es rara en los países donde se vacuna a los
de toxicidad neurológica suelen aparecer dentro de los niños y solo se presenta en forma esporádica o en brotes
primeros días de establecida la faringitis. Esta toxicidad en pequeñas comunidades que no recibieron la
comúnmente comienza con la parálisis local del paladar inmunización adecuada. P.ej., en 1990 en Rusia, solo se
blando y la pared faríngea posterior, por lo que el vacuno a un 68% de sus niños, producto de ello apareció
paciente regurgita por vía nasal los líquidos deglutidos. una epidemia de difteria que tambien afectó a Ucrania, de
Los signos son variados, de acuerdo a la gravedad de la ellos, se conoce que solo en el Rusia ubieron más de
intoxicación y puede llegarse a la parálisis total cuando 1000 casos fatales.
los nervios motores se hallan afectados.
En las regiones tropicales del planeta C. Diagnóstico de laboratorio
diphtheriae puede causar infecciones cutánea a) Examen directo. La muestra se obtiene por hisopado
caracterizadas por úlceras crónicas que no cicatrizan faríngeo, de la base de la seudomembrana trantando de
fácilmente, y están cubiertas por una membrana gris desprender levemente, evitando el sangrado. Con ella
oscura frecuentemente asociada a Staphylococcus aureus realizar frotis y tinción de Gram. La observación de
y Streptococcus del grupo A., son úlceras indoloras, rara bacilos grampositivos con las características morfologías
vez se asocian con toxicidad; afecta a pacientes individuales y de agrupación, no es suficiente para
alcoholicos, y que viven en hacinamiento. La infección diferenciar C. diphtheriae de un difteroide, por lo que es
por C. diphtheriae en otros sitios es muy infrecuente. Se necesario realizar el cultivo.
ha descripto infección clínica en oídos, conjuntiva y
vagina. b) Cultivo. C. diphtheriae, desarrolla en agar sangre con
telurito de potasio, observándose las siguientes colonias
de acuerdo al biotipo de C. diphtheriae:
 C. diphtheriae gravis.- Colonias de bordes

irregulares, superficie convexa con radiaciones
en la periferie de la colonia, aspecto húmedo y
brillante, consistencia cremosa, 4 a 6 mm de
diámetro, de color gris en la parte central y
Fig. N° 153. Pseudomembranas blanco grisáceas que cubren la faringe
negro en la periferie, no hay hemólisis alrededor
y las amígdalas producidas por C. diphtheriae de la colonia.
 C. diphtheriae intermedius.- Colonias de bordes
Epidemiología redondeados, superficie con una ligera elevación
El hombre es el único reservorio conocido de C. en la parte central, aspecto húmedo y brillante,
diphtheriae. Algunos individuos convalecientes de la consistencia cremosa, de 1 mm de diámetro, de
enfermedad pueden portar la bacteria por semanas, meses color negro intenso, no hay hemólisis alrededor
y aún años. La vacunación no reduce la probabilidad de de la colonia.
151
 C. diphtheriae mitis.- Colonias de bordes  Las otras colonias pertenecientes a otras

redondeados, superficie convexa con una ligera especies presentan variadas formas algo
elevación en la parte central, aspecto húmedo y diferentes a las anteriores. Por ej., las de C.
brillante, consistencia cremosa, de 2 a 4 mm de pseudodiphthericum presentan colonias de
diámetro, de color negro intenso (parece ojos de bordes lisos bien definidos, convexos, húmedos
pez), hay hemólisis alrededor de la colonia. y brillante, consistencia cremosa, de menos de 1
mm de diámetro, de color blanco o gris.
Cuadro N°. 66. Pruebas bioquímicas para la identificación de corynebacterias.

Especie y biotipo Glucosa Maltosa Sacarosa urea Patógeno
C. diphtheriae gravis + + - - +
C. diphtheriae + + - - +
intermedius
C. diphtheriae mitis + + - - +
C. xerosis + + + - -
C. pseudodiphthericum - - - + -
La fermentación de hidrados de carbono se realiza en los localización central, subterminal y terminal); Por lo
diferentes medios de cultivo que se preparan para el tanto, presentan dos fases: una vegetativa y otra
efecto utilizando los diferentes azucares necesarios, esporulada.
siendo la reacción positiva el cambio de color de rojo a Por lo general su tamaño es variable,
amarillo (ver fermentaciónde azucares en neisserias). comprendido entre 2 a 9 um de longitud por 0,2 a 2 um
de ancho. Se agrupan en diplo o en cadenas de diferente
Tratamiento longitud, o se disponen simplemente de a uno. Algunas
Se basa en dos principios: antitóxico y especies adoptan la formación de largos filamentos.
antibacteriano. En el primer caso se utiliza antitoxina Tienen los extremos cortados, las especies móviles tienen
diftérica, en el segundo caso varios antibióticos son de flagelos peritricos, desarrollan bien en agar sangre,
elección para su tratamiento entre ellos la penicilia G algunas son B–hemolíticas, producen gas a partir de la
sódica y, en casos de alergia se administra eritromicina. glucosa. Son catalasa (+), aerobios y anaerobias
La enfermedad tiene una letalidad del 5 – 15%. facultativas.
La esporulación ocurre en aerobiosis. Las
Prevención esporas de Bacillus resisten la ebullición por periodos
La prevención de esta enfermedad se realiza muy largos y son tan resistentes al calor que algunas
mediante la vacunación de la población infantil (6 especies, como B. stearothermophilus, se utiliza como
semanas hasta 7 años de edad) con la vacuna DPT que indicador biológico de la eficacia de esterilización por
previene la difteria, tétanos y coqueluche o tosferina. calor. Las formas vegetativas de Bacillus, en cambio, se
destruyen por acción del calor húmedo durante una hora
a 55°C.
GENERO BACILLUS Clasificación

Dentro de este género se han descripto 42
El genero Bacillus, incluye varias especies de especies diferentes, de ellas la especies más conocidas
bacilos grampositivos, distribuidos por toda la geografía son: B. anthracis, B. cereus ,B. subtilis, B. megaterium,
mundial. A excepción de Bacillus anthracis, que es un B. thuringiensis, etc. El patógeno primario de este grupo
reconocido patógeno primario, todas las demás especies es B. anthracis, los otros son generalmente saprófitas,
son bacterias de baja virulencia que se encuentran aunque B. cereus suele estar comprometido con
comúnmente en suelo, agua, polvo ambiental, productos infecciones intestinales.
animales en descomposición y también suspendidos en el
aire. Bacillus anthracis, es el agente etiológico del
ántrax, carbunclo o carbunco, una enfermedad zoonótica
que puede ser ocasionalmente transmitida al hombre. Las Bacillus anthracis
otras especies de Bacillus son agentes causales de
infección oportunista en huépedes Son bacilos grampositivos, encapsulados, con
inmunocomprometidos o en huéspedes en los que se da extremos recortados. Miden 2 – 5 um de largo por 0,8 –
una condición fortuita como ruptura de la barrera epitelial 1 um de ancho. Tiene forma característica de agrupación
y contacto con altas dosis de la bacteria. en “cañas de bambú” o “vagones de tren enganchados”,
Una característica relacionada a este género, es en largas cadenas.
su capacidad en la formación de endosporas (de
152
anchas que el germen, no se tiñen con Gram, aunque a

veces presentan un ligero tono rojizo.
Este bacilo es inmóvil, desarrolla en pH 7,2 –
7,4, 37°C, son aerobios, las formas vegetativas son
sensibles a la temperatura de ebullición en cambio las
esporas pueden resistir más de 30 años.
Rol patógeno
Fig.N° 154. Bacilos grampositivos esporulados en cadena: Los principales factores de patogenicidad o
B. anthracis (Fuente: Koneman, 2008). virulencia y sus mecanismos de acción de B. anthracis se
detallan en el siguiente cuadro:
Cuando esporulan, las esporas adoptan formas
ovales, situados en el medio de la bacteria y no son más
Cuadro N° 67. Pricipales factores de virulencia de B. anthracis.

FACTORES DE VIRULENCIA MECANISMOS DE ACCIÓN
Cápsula Está compuesta por un péptido de ácido poli-D-glutámico.
Evade la fagocitosis. No es antigénica.
Toxinas: factor letal (FL) FL, es una endopeptidasa que unido a AP (antígeno
protector), interfiere con la señalización intracelular, actúa
sobre los macrófagos, produciendo necrosis hemorrágica en
los ganglios linfáticos.
Toxina: factor edematizante (FE). FE, es una adenilatociclasa, unido a AP, produce edema
cutáneo.
Antígeno protector (AP) Proteina portadora de las toxinas (FE) y (FL)
Ántrax. Los términos ántrax, carbunco y carbunclo son regionales. La lesión cutánea cicatriza luego de la caída
sinónimos. Los principales factores de patogenicidad de de la escara. Con una frecuencia muy baja, la enfermedad
B. anthracis se debe a la presencia de cápsula y la puede progresar con edema local masivo, toxemia y
producción de toxinas. En general, casi el 95% de los bacteriemia, que puede llevar a un desenlace fatal, si no
casos de ántrax descriptos tienen presentación cutánea, y es tratada adecuadamente.
solo el 5% corresponde a la forma pulmonar; en países El ántrax pulmonar se contrae por inhalación de
subdesarrolados se han descripto casos de ántrax esporas, al manejar forrajes o lanas contaminadas en
gastrointestinal, por ingestión de carnes contaminados, ambientes cerrados. Se han descripto casos de ántrax por
también se han descripto algunos casos de meningitis contaminación accidenta en el laboratorio. La aspiración
secundaria a una infección primaria de ántrax. de esporas del B. anthracis para producir la enfermedad
En la patogénesis del ántrax, intervienen tres ha sido estudiada como arma biológica y utilizada por
factores de virulencia bacteriana: Una capsula terrorista contra la población en 2001. Este tipo de
antifagocítica y dos toxinas (FL y FE), estas últimas para armamento ha sido prohibido por leyes internacionales,
que actúen necesitan ser internalizados en las células del aunque los mismos países que la prohiben probablemente
huésped por una proteína portadora (AP); ya en el la tengan en sus arsenales. La enfermedad en su primera
interior de las células, estas toxinas, actúan interfiriendo fase se presenta habitualmente con malestar genereal,
la síntesis de las proteínas, lo cual provoca necrosis y cefalea, fiebre, mialgia, con tos no productiva que se
edema del tejido (algo parecido a los que produce la confunde con una gripe que parece curar
toxina diftérica). espontáneamente en 3 a 4 días. Pero al cabo de 5 – 6 días
El ántrax cutáneo usualmente comienza 2 a 5 el paciente sufre un distres respiratorio con cianosis y
días después de la inoculación con esporas en una parte disnea. En los casos severos se ha observado edema
expuesta del cuerpo, como antebrazos, manos, cuello y masivo del cuello, mediastino y tórax. Si no se la trata, la
cuero cabeludo por el roce de chamarras y sombreros de enfermedad es rapidamente fatal.
cuero contaminados con esporas de B. anthracis. El ántrax gastrointestinal se produce por ingestión de
La primera lesión es una pápula eritematosa, que alimentos contaminaedos con B. anthracis, tras un
puede confundirse con una picadura de insecto. La periodo de incubación de 3 a 7 días. Existen 2 formas de
pápula evoluciona hacia una vesícula y más tarde hacia presentación: abdominal y orofaringeo. Los síntomas
una úlcera, para forma entre los 7 y 10 días, una escara iniciales de la forma intestinal son inespecíficos incluyen
negra rodeada por una zona de edema. La apariencia de náuseas, vómitos, anorexia y fiebre. Luego sobreviene
ésta lesión típica, le ha dado a la enfermedad su nombre dolor abdominal, hematemesis, diarrea sanguinolenta y
actual (de antrac: carbón). Puede haber otros signos de la ascitis. Si la enfermedad avanza se prodecen toxemia,
enfermedad, como linfangitis y linfoadenopatías shock, cianosis y muerte a los 2 a 5 días. La forma
153
orofaringea se presenta con edema y necrosis tisular disminuido progresivamente por algunas ténicas
cervical. Se ha descripto lesiones en la cavidad oral, que implementadas como la cuarentena, sacrificio de rebaños
comprometen las amígdalas o el paladar duro, cuyos infectados, campañas de inmunización y mejoramiento
síntomas son dolor de garganta, disfagia, fiebre, de la higiene de la industria de los derivados de los
linfadenopatia regional cervical y toxemia. La mayoría animales. En los países que no aplican estas medidas,
muere con toxemia y sepsis. todavía existe la enfermedad, que afecta en principio a
los animales y que se extiende a granjeros, cardadores de
Epidemiología lana, veterinarios, matarifes y otros trabajadores
B. anthracis, es un patógeno de los animales, dedicados a labores con herbívoros.
principalmente de los herbívoros. Las especies más
afectadas son los caballos, ovejas y las vacas, que Diagnóstico de laboratorio
desarrollan una enfermedad septicémica letal. El a) Examen directo. Las muestras con las que se trabaja
reservorio de la bacteria son los animales enfermos, los son pústulas, esputo o sangre. Las que se extienden en
cadáveres de los animales muertos por la enfermedad y portaobjetos, tinción de Gram, con la observación de los
los suelos con los que ellos están en contacto. bacilos caracteristicos.
La puerta de entrada parecen ser microlesiones de la piel
y mucosas, a través de los cuales ingresarían las esporas b) Cultivo. Desarrollan bien en agar sangre formando
de B. anthracis. La subsecuente germinación de las colonias de las siguientes caracterisca:
esporas en el huésped generan las formas vegetativas, Colonias de bordes rizoide “en Cabeza de Medusa” (en
que se multiplican para producir infecciones tanto alusión a la hechicera griega cuya cabellera estaba
localizadas como sistémicas, dependiendo del sitio de compuesta por serpientes), en el que también se
inoculación. La enfermedad se disemina a otros distinguen algunas prolongaciones en forma de coma,
individuos por medio de las esporas que están en los superficie rugosa áspera como vidrio esmerilado, de color
forrajes y pasturas frescas contaminados con exudados de blanco ó despigmentados, de 2 a 6 mm de diámetro.
animales infectados vivos o muertos. Característicamente no hay hemólisis.
El hombre generalmente se infecta por contacto Cuando se incuba en 10% de CO2 se manifiesta
con animales infectados o productos de esos animales. la cápsula, así como también cuando se incuba en 20 a
Debido a la resistencia de las esporas y a su prolongada 30 °C en cultivos viejos en aerobiosis se manifiestan las
supervivencia, la infección puede transmitirse por esporas.
pellejos (pieles sin curtir), lana, huesos y aún productos Otros Bacillus, desarrollan formando colonias
procesados como fertilizantes a base de hueso molido. La algo parecidas pero produciendo hemólisis.
incidencia del ántrax humano en países desarrollados ha c) Pruebas bioquímicas

Especies Hemólisis Motilidad capsula Muerte de ratones
B. anthracis - - + +
B. subtilis + + - -
B. cereus + + - -
B. megatherium + + - -
Tratamiento muertos con ántrax deben ser incinerados, o enterrados

Para tratar el ántrax, la droga de elección es la con cal viva en huecos profundos. Todo animal enfermo
penicilina, en pacientes con alergia a esta droga, se puede debe recibir tratamiento y el rebaño debe ponerse en
utilizar eritromicina, tetraciclina o cloranfenicol. cuarentena y vacunarse.
La desinfección del naterial contaminado en la industria
Prevención (lana, cueros, etc.), uso de guantes y mascarilla cuando se
El control del ántrax implica medidas de trabaja con productos de animales. Actualmente existen
prevención tanto en animales como en el hombre. en el comercio vacunas contra el ántras para el hombre.
Como primera medida sanitaria se debe realizar la
vacunación del ganado, los restos de los animales
154
CAPITULO 15
BACILOS GRAMPOSITIVOS ANAEROBIOS
Generalidades de anaerobios catalasa y peroxidasa pero poseen flavoproteinas que, en
A los fines prácticos, una bacteria es anaerobia presencia de O2, permiten la generación de peróxido de
cuando no puede crecer sobre la superficie de un medio hidrógeno, que es altamente tóxico para las bacterias.
sólido expuesto a aire (18% de O2). Un anerobio es Ademas, algunos anaerobios producen bajas
estricto cuando no puede crecer en una concentración de concentraciones de superóxido-dismutasa y pueden ser
O2 mayor al 0,5%, y es aerotolerante cuando puede inhibidos o muertos por otros peróxidos y radicasles
crecer en concentraciones de O2 del 2 al 6%. libres derivados del O2 que ello mismo producen.
Existen distintas hipótesis para explicar porqué La aparición de uno de estos posibles
existen bacterias que no pueden desarrollar o mueren en mecanismos o la combinación de varios de ellos es
presencia de pequeñas concentraciones de O2. Algunas de responsable de que una bacteria sea anaerobia estricta. La
las hipóteis más aceptadas se describen a continuación: inhibición del crecimiento puede ser reversible, cuando
median otras substancias como reductoras.
1.- Efecto del O2 en el potencial redox. La bacteria A pesar que el hombre se encuentra inmerso en
anaerobia estricta crece en un medio con bajo potencial una admosfera de aire, muchas especies anaerobias
redox (significa que el H+ circulante en el lugar es pueden colonizar microambientes del cuerpo humano que
captado por substancias inorgánicas, por lo que no se son deficientes o carentes de O2. En algunos casos, el
requiere la presencia de O2). En presencia de O2 este bajo potencial redox está producido por la presencia de
potencial es elevado y se inhibe el crecimiento bacteriano otras bacterias facultativas, cuyo desarrollo consume todo
en forma reversible. el O2 disponible. Entre estos microambientes, podemos
citar las glándulas cebáceas de la piel, las hendiduras
2.-Inhibición de enzimas. Las bacterias anaerobias gingivales, la luz de los tractos gastrointestinal y genital.
estrictas contienen enzimas críticas para su metabolismo La flora anaerobia de estos microambientes normalmente
que son sensibles al O2 como la fumarato-reductasa. En vive en una relación de comensalismo sin causar daño al
su sitio activo la enzima contiene grupos sulfidrilo, que huésped. Sin embargo, estas bacterias pueden causar
se oxidan en presencia de O2 con la consecuente infecciones mortales cuando se trasladan desde su
inactivación de la enzima y la inhibición del desarrollo reservorio hacia tejidos faltos de vitalidad debido a
bacteriano. traumatismos, neoplasias, inflamación o isquemia
(detención de la circulación arterial).
3.- Diversificación de la actividad reductora. Uno de Una característica de la mayoría de las
los productos de la fermentación es el NADPH que actúa infecciones causadas por anaerobios es que son
como dador de electrones. En aerobiosis el NADPH frecuentemente polimicrobianas y son causadas por
pierde los electrones (se oxida) que el O2 captura. Se diferentes especies anaeróbicas y facultativas. Los
desvía así el camino metabólico con una disminución de anaerobios que son estrictamente sensibles al O2 casi
la concentración de productos de fermentación, menor nunca se aíslan de estas infecciones polimicrobianas,
disponibilidad de energía para procesos biosintéticos y la porque son inactivados por las muy pequeñas
consiguiente inhibición del crecimiento bacteriano. concentraciones de O2 disuelto en los fluidos tisulares. A
excepción de algunas infecciones causadas por
4.- Generación de productos tóxicos. Las bacterias Clostridium del medio ambiente, casi todos los anaerbios
anaerobias estrictas carecen de citocromos y por ello no que causan infección provienen de la flora normal del
pueden utilizar al O2 como aceptor de electrones en los mismo huésped humano. La transmisión de individuo a
procesos generadores de energía. La mayoría de las individuo es muy rara, excepto la transmisión del C.
especies de clostridium, aunque no todas, carecen de difficile en el medio hospitalario.
Cuadro N° 69. Localización de anaerobios oporutunistas en el cuerpo humano

Bacteria Boca y Intestino Tracto Piel
faringe urogenital
Bacteroides spp +
Prevotella + + +
melaninogénica
Clostridium +
Fusobacterium + +
Peptoestreptococcus + + +
Propionibacterium +
155
Clasificación Clasificación
Los anerobios se clasifican en anaerobios Existen al menos 125 especies de Clostridium.
esporulados y no esporulados Por fortuna para la microbiología Médica, sólo algunas
de ellas causan enfermedades al hombre, al ganado y
animales salvajes.
ANAEROBIOS ESPORULADOS En el presente capítulo nosotros abordaremos el estudio
de las especies de clostridium con mayor importancia
GENERO CLOSTRIDIUM médica. Ellos son el C. perfringens, C. tetani, C.
botulinum y C. difficile.
El género Clostridium está integrado por bacilos
formadores de endosporas, generalmente anaerobios Clostridium perfringens
estrictos, grampositivos, mayormente móviles y
encapsulados (excepto C. perfringens), productores de C. perfringens, es un bacilo corto, largo y
enzimas y exotoxinas. Los Clostridium se encuentran algunas veces filamentoso (cultivos viejos), de extremos
ampliamente distribuidos en la naturaleza, existen en el redondeados, es grampositivo. Su tamaño es de 1,3 – 19
aire, suelo, polvo, estiércol así como en agua de los um de largo por 0,6 – 2,4 um de ancho. Forman esporas
lagos, torrentes y ríos. Se ha aislado de vegetales, leche, ovales, subterminales raramente centrales (observables en
grasa, alimentos enlatados, carne fresca, mariscos y medios especiales). Posee cápsula, la cual puede
moluscos. Es un integrante constante del contenido observarse en los exámenes directos, pero desaparecen en
intestinal del hombre y los animales, distribuyéndose en los medios comunes de cultivo. Es una bacteria inmóvil,
su medio ambiente. Producen enfermedades generalmente reduce nitratos, fermenta la glucosa, lactosa
toxiinfecciosas, gangrenosas, septicémicas febriles de maltosa, sacarosa y otros azúcares y licua la gelatina. Es
curso subagudo o agudo. anaerobio estricto, desarrolla en pH 5,5 – 8, temperatura
óptima 37°C a 45°C. Es de crecimiento rápido 12 a 16
horas.
Las formas vegetativas (bacilos) son destruidos
rápidamente a temperatura de ebullición y por los
desinfectantes. Las esporas son resistentes a la ebullición
y desinfectantes. Resisten temperaturas de hasta 100°C
por una hora, por lo que pueden sobrevivir en alimentos
cocidos.
Rol patógeno
Fig.N° 155. Bacilos grampositivos esporulados pertenecientes al C. perfringens, presenta varios exoproductos
género Clostridium (Fuente: Nath, 2007). (toxinas) que son las causantes de la enfermedad.
Cuadro N° 70. Exoproductos o factores de virulencia de C. perfringens.

EXOPRODUCTOS O MECANISMO DE ACCIÓN
TOXINAS
Toxina –a (alfa) Degrada la esfingomielina y la lecitina. Destruye la
membrana celular de eritrocitos, leucocitos y células
musculares.
Toxina-B (beta) Necrosis intestinal
Toxina épsilon (E) Neuro tóxica, afecta la permeabilida vascular
produce edema cerebral.
Toxina-i (iota) Dermonecrótica, produce diarrea.
Toxina-0 (theta) Citolítica, responsable del halo de hemolisis en agar
sangre.
a) Gangrena gaseosa. Se puede considerar una vía de intestinal habitual donde se desarrollaba como comensal,
entrada del microorganismo desde una fuente exógena o por la inducción a la patología a partir de una fase de
(contaminación de lesiones por polvo, tierra, materia colonización intestinal en el huésped. Puede considerarse
fecal, etc.) o endógena, en caso de desbalance de la flora un periodo invasivo tradicional cuando C. perfringens
156
penetra en los tejidos, ya sea a través de una herida, es corta (18 horas) y suele desapararecer en forma
fracturas, etc., generando cuadros de necrosis o gangrena espontánea. Es un cuadro benigno.
gaseosa. Cualquiera sea el mecanismo de entrada, el c) Enteritis necrótica. La absorción de la toxina por las
tejido traumatizado, falto de oxigeno por falta de células de la mucosa intestinal produce la muerte celular.
circulación, proporciona un medio adecuado para el La acción necrosante con destrucción de los pili
desarrollo de Clostridium. Si el potencial de óxido- intestinales es el principal factor de patogenia en el
reducción de la zona lesionada es suficientemente bajo, enteritis necrosante. El pasaje de la toxina desde el lúmen
las esporas pueden germinar y la enfermedad puede intestinal a la circulación ocaciona la muerte. En estos
declararse rápidamente, apenas unas horas después de casos la inhibición en la producción de tripsina
ocurrido el traumatismo. La presencia de numerosas (substancia intestinal que degrada a la bacteria) en el
especies de bacterias anaerobias facultativas que huésped facilita la reproducción del microorganismo.
acompañan al Clostridium contribuye a crear un Esto ocurre frecuentemente en pacientes desnutridos. El
microambiente con condiciones para su desarrollo. Por cuadro clínico se caracteriza por un periodo de
este motivo las infecciones gangrenosas son siempre incubación de 24 horas, dolor abdominal, diarrea
mixtas. La presencia de la toxina-a contribuye al daño del sanguinolenta, vómitos y shock. Es de mortalidad
tejido y a la generación de nuevas áreas necróticas aptas elevada.
para el crecimiento de Clostridium. La fermentación de
hidratos de carbono alojados en el tejido muscular Epidemiologia
(glucógeno) genera grandes depósitos de gas en los El C.perfringens, se encuentra ampliamente
tejidos subcutáneos, que pueden ser reconocidos a la difundido en la naturaleza gracias la a propiedad de
palpación, pues producen crepitación. A medida que la formar esporas resistentes (medio ambiente, animales y el
enfermedad progresa, el aumento de la permeabilidad hombre), la infección puede producirse en forma exógena
vascular, sumado a la acción de las toxinas y la falta de o endógena. La vía exógena por gérmenes que provienen
oxigenación debido al edema, conducen a una del medio ambiente es bastante frecuente. Sin embargo,
enfermedad sistémica severa. Si no se trata, la gangrena resulta más común la infección de heridas por
es siempre fatal. Por invasión y destrucción del musculo contaminación a partir de la propia flora del individuo
existe dolor localizado, edema y la piel se torna de color (vía endógena). Las enterotoxemias se producen
bronceado. Existe exudado fétido de tipo serohemático, generalmente por un desbalance de la flora comensal y
la necrosis se hace progresiva, existe fiebre, toxemia con origina un cuadro infeccioso.
hipotensión, shock y muerte. Vía de eliminación. Al formar parte de la flora normal
gastrointestinal del hombre y animales, estas bacterias
b) Toxiinfección alimentaria. Esta forma de son eliminadas en forma normal. Concetraciones de 105
intoxicación se produce como consecuencia de ingerir bacterias por gramo de heces en dos o más individuos
alimentos contaminado con altas concentraciones de C. confirman un brote de enfermedades transmitidas por
perfringens. Este microorganismo puede contaminar alimentos.
alimentos como pollos, carnes o pescado antes o después
de la cocción. En el primer caso se contaminan durante Diagnostico de laboratorio
su elaboración, y la cocción, si bien elimina las formas a) Examen directo. Las muestras con las que se trabaja
vegetativas, permite la viabilidad de las esporas y son: Tejido necrosado de heridas, exudados purulentos,
favorece su posterior germinación. Se necesita que heces, etc.
transcurra un tiempo para que las bacterias alcancen una La tinción de Gram muestra bacilos grampositivos que
concentración adecuada en el alimento para producir pueden estar junto con otras bacterias gramnegativas.
enfermedad (105-106 por gramo). Este tiempo está dado
por el proceso de enfriamiento y almacenaminto. b) Cultivo. Se puede sembrar en caldo tioglicolato o en
Tanto el alimento que se sirve frío luego de su agar sangre, incubar en anaerobiosis (eliminan el oxígeno
cocción o aquel que luego de preparado y almacenado se del interior del recipiente ej., jarra Brewer) a 37°C.
calienta insuficientemente puede ser vehículo del En agar sangre produce colonias de bordes
microorganismo. Las bacterias presentes en estos redondeados, superficie convexa, aspecto húmedo
alimentos, luego de ser ingeridas, se multiplican y en el brillante, consistencia mucoide. 3 – 6 mm de diámetro,
nuevo proceso de esporulación, liberan la Enterotoxina usualmente se observa una doble zona de hemólisis
responsable de originar el cuadro clínico. Luego de un alrededor de la colonia, la zona interna (hemólisis
periodo de incubación promedio 10 a 12 horas, existe completa) es causada por la toxina theta y la externa,
dolor abdominal agudo y diarrea acuosa acompañados o incompleta, por la toxina alfa.
no de náusea. No existe síntomas generales, su duración
c) Pruebas bioquímicas:
157

Bacteria Zona doble Motilidad Lecitinasa Reducción
de hemólisis de nitratos
C. perfringens + - + +
Cuadro N° 72. Prueba de la lecitinasa

Reacción positiva:presencia de una amplia
La capacidad que 1.- Realice una siembra de zona opaca u opalescente alrededor de la
tienen algunos algunas colonias de colonia
clostridios de clostiridios en una caja Reacción negativa: ausencia de zona opaca
producir lecitinasa petri con Agar nutritivo alrededor de la colonia.
(toxina-alfa), la con 5% de yema de huevo.
cual opacifica la 2.- Incubar 24 horas a
yema del huevo. 37°C.
Tratamiento Clostridium tetani

En casos de gangrena realizar curación,
desbridamiento y drenaje quirúrgico es esencial para el Caracteristicas generales y morfología
control inicial de la infección. En el caso de las diarreas Bacilos largos y delgado, mide de 2 – 4 um de
rehitratación. La mayoría de los anaerobios son sensibles diámetro hasta 8 um de longitud. Si bien son
a la penicilina, que se considera el antibiótico de grampositivos, en el material extendido de heridas se
elección. Entre otros también se pueden utilizar el pueden observar gramnegativos. Es capaz de producir
metronidazol, clindamicina, piperacilina/tazobacta. una espora con localización terminal que no se tiñe y
Imipenem. El estudio de la sensibilidad in vitro a los deforma el bacilo, dando el típico aspecto de palillo de
antibióticos es complicado y está indicado sólo para tambor. Es una bacteria móvil por la presencia de
algunos aislados de infección grave (de zonas flagelos peritricos. Las esporas son bastante resistentes al
normalmente estériles) etanol, fenol y formalina, agua oxigenada, soporta el
autoclave por 15 minutos. Son anaerobios obligados.
Prevención Temperatura de crecimiento es de 37°C, pH óptimo 7,4,
No existen vacuna para C. perfringens, el desarrollan en medios enriquecidos.
desbridamiento y la irrigación inmediata de las heridas
traumáticas son importantes. Para evitar la diseminación Rol patógeno
de la bacteria, a veces es necesaria la amputación del C. tétani mediante sus toxinas es causante del
miembro. tétanos
CuadroN° 73. Toxinas patogénicas del C. tétani

TOXINAS MECANISMO DE ACCIÓN
PATOGÉNICAS
Tetanoespasmina Proteína tetánica, produce contracciones musculares.
Tetanolisina Hemolisina, no se conoce su función.
Tétanos. Las esporas de C. tetani se encuentran en el La condición que requieren las esporas de C.
suelo, especialmente si es tierra cultivada y contaminadas tétani para germinar es un área de baja tensión de O2, que
con heces de animales y el hombre. Las bacterias llegan puede ser por la presencia de un cuerpo extraño, un área
hasta las heridas por medio de la tierra o cuerpos de necrosis debido a la introducción de suciedad donde se
extraños. Las heridas son habitualmente pequeñas y produce bajos potenciales de óxido reducción. Se
contienen astillas o partículas de suciedad, o se producen producen así las condiciones favorables para que
por contaminación de quemaduras o fracturas expuestas. germinen las esporas de C. tetani y para que las células
En los países subdesarrollados muchos de los casos de vegetativas se multipliquen y liberen la tetanoespasmina
tétanos se producen en recién nacidos o sus madres como por la autólisis de la bacteria. La tetanoespasmina se
consecuencia de la contaminación de placenta o el adhiere a las terminaciones de los nervios motores
ligamento del cordon umbilical (tétanos neonatorum), periféricos y viaja a lo largo de los nervios hacia el
también en abortos mal practicados, tatuajes, etc. sistema nervioso central. Luego la toxina se une a los
158
gangliósidos en la médula espinal y al tallo encefálico en

este lugar inhibe la liberación de nuerotransmisores Diagnostico de laboratorio
(glicina y acido gamma aminobutírico: GABA), lo que a) Examen directo. Las muestras con las que se trabaja
provoca el bloqueo de los impulsos inhibitorios desde el son exudados purulentas de la lesión obtenida por
SNC hacia las neuronas motoras de los espasmos hisopado o directamente con el asa bacteriológica.
musculares flexores y extensores; por lo que los pacientes Realizar la tinción de Gram con la observación de los
presentan, contracciones musculares prolongados, bacilos grampositivos o gramnegativos caracteristicos
convulsiones, dificultad para abrir la mandíbula (llamada (con espora terminal).
tétanos, trismus), una sonrisa característica llamada “risa
sardónica” y contracciones de los musculos de la espalda
que provoca una curvatura hacia atrás (opistotonos). Los
pacientes son muy irritables y sufren accesos tetánicos,
que consisten en contracciones musculares dolorosas y
violentas posteriores a algunos estímulos menores, como
un ruido o una brisa de aire.
Las contracciones se vuelven generalizadas e
incluyen musculos de la respiración y deglución. El
paciente pierde el conocimiento, en los casos fatales la Fig. N° 156. Bacilos grampositibos con esporos terminales:
muerte llega por agotamiento y falla respiratoria. La Clostridium tétani (Fuente: Jawetz 1982)
mortalidad de pacientes sin tratamiento oscila entre 15 y
el 60% y depende de la edad del paciente es mas grave en b) Cultivo. Se puede cultivar la muestra en dos medios
recién nacidos y ancianos. de cultivo. Uno en caldo tioglicolato y otro en agar
sangre. Este último debemos incubar en jarra de Brewer
durante 48 – 72 horas.
Epidemiologia
En agar sangre las colonias tienen bordes rizoides,
Las esporas del C. tetani son ubicadas en el
superficie plana, aspecto húmedo brillante, consistencia
ambiente del suelo. Las bacterias se encuentran en
cremosa. Producen hemólisis.
abundancia en el tracto gastrointestinal de los animales
En caldo tioglicolato desarrollan produciendo turbidez,
(p.ej., caballos). La transmisión tiene lugar por una lesión
floculación y gas.
o traumatismo (heridas punzantes, laceración) con
contaminación de la herida con material del suelo.
El tétanos neonatal es una causa importante de
mortalidad en algunas naciones en vías de desarrollo.
Cuadro N° 74. Pruebas bioquímicas.
Bacteria Zona doble Motilidad Lecitinasa Reducción de
de hemólisis nitratos
C. tetani - + - +
Tratamiento Clostridium botulinum

En algunos países todavía se utiliza la antitoxina
tetánica. Las benzodiacepinas se utilizan para controlar Son bacilos rectos o ligeramente curvos, con los
los espasmos y la rigidez. Es necesario realizar la extremos redondeados, de 3 – 20 um de largo por 1 – 2
inmunización pasiva con inmunoglobulinas antitetánicas um de ancho; grampositivos, aunque se tornan
humana y también a la inmunización activa con toxioide gramnegativos en cultivos viejos; se presentan aislados y
tetánico. El antimicrobiano de elección es el a veces en pares o en cadenas cortas. Son móviles por
metronidazol, debido a que la penicilina puede actuar flagelos peritricos; no poseen cápsula. Las esporas son
como antagonista del GABA. ovales, subterminales, en general deforman el soma
bacteriano. Son termorresistentes (hasta 10 minutos a
Prevención 120°C) y germinan en 10 – 45°C, su pH óptimo es 6,6 –
En niños la vacuna DPT y los adultos la vacuna 7,2. Crecen en anaerobiosis.
antitetánica.
Rol patógeno (Factores de virulencia):
159
Cuadro N° 75. Factores de virulencia de C. botulinum.

TOXINA MECANISMO DE ACCIÓN
Neurotoxina botulínica (NTBo) Produce paralisis muscular flácida del cuerpo.
NTBo, es una metaloproteasa de cinc. Existen varios tipos de NTBo, las que frecuenemente causan
Botulismo en el hombre son los tipos: A, B, E y F. Estas toxinas son termolábiles, se destruyen a
85°C en 10 minutos.
Patogenia síntomas comienzan entre las 12 – 36 horas y 8 días de la

Una vez que las esporas ingresan al organismo, ingestión de los alimientos contaminados. Aunque las
estos germinan y colonizan el tejido del huésped, en ella náuceas y vómitos son frecuentes, en general los
C. butulinum sintetiza la toxina, que se acumula primeros síntomas característicos son debilidad muscular,
intracelularmente y solo se libera luego de la muerte y laxitud, mareos, sequedad de la boca, lengua y faringe.
autolisis de la bacteria. Tras su liberación, la toxina se A medida que la enfermedad progresa aparecen
activa por acción de enzimas proteolíticas (tripsina) los síntomas oculares: visión doble, visión borrosa y
provenientes de la misma bacteria o del huésped. La fotofobia, dificultades en la deglusión y el habla seguida
NTBo se absorbe rápidamente en el duodeno, alcanza el de debilidad en extremidades y compromiso de musculos
torrente sanguíneo llega al sistema nervioso periférico respiratorios. Puede existir retención urinaria, distención
(incluyendo las uniones nueromusculares), aquí la toxina abdominal y debe llamar la atención, la ausencia de
se introduce en las neuronas presinapticas, luego se unen fiebre. En los casos graves la muerte puede ocurrir por
a las vesículas sinápticas, lo que impide la liberación de paro respiratorio súbito.
acetilcolina a la terminaciones nerviosas periféricas
(incluidas las conecciones neuromusculares) e hidrolizan 2.- Botulismo de heridas. Esta presentación es rara, se
las proteínas encargadas de la neurotransmisión produce por la infección con esporas en una herida, el
(proteínas de unión sináptica), con lo que se desarrolla cuadro es similar al del botulismo por alimentos, solo que
parálisis descendente, flácida y aguda. La parálisis además puede haber fiebre por la infección de la herida.
comienza con el deterioro bilateral de los nervios
craneales y deriva en parálisis de los músculos de la cara 3.- Botulismo infantil. Es una forma común de la
(incluidos los de los párpados), la cabeza y la faringe. enfermedad en países subdesarrollados. Sobreviene con
Luego desciende en forma simétrica para comprometer más frecuencia en niños de entre 3 y 20 semanas de vida.
los músculos del tórax, el diafragma y los miembros. Los Se ha determinado que C.botulinum ingresa a la vía
pacientes pueden morir de parálisis respiratoria a menos digestiva y coloniza el intestino, en donde produce la
que reciban cuidado intensivo respiratorio adecuado, toxina, que luego del proceso patológico lleva a un 50%
como ventilación mecánica; la muerte también pude de los casos al paro respiratorio y muerte. La fuente más
resultar de neumonía secundaria (causada por habitual es la miel de abejas contaminadas con esporas de
microorganismos no botulínicos). la bacteria, con la que se acostumbra endulzar los
chupetes. Por este motivo se recomienda no dar miel a lo
1.- Botulismo por intoxicación alimentaria. La fuente niños de menor de años de vida.
de contaminación son los suelos, los sedimentos
acuáticos y las aguas que contienen esporas de C. Epidemiologia
botulinum, como así también el intestino de los En estudios microbiológicos efectuados sobre la
mamíferos. El tipo más común de botulismo es el miel se ha observado que el 4 – 25% de las muestras
causado por ingestión de NTBo preformada. En general contienen esporas de C. botulinum. El botulismo en
aparece como un brote epidémico cuando un grupo de adultos está frecuentemente asociado al consumo de fruta
individuos ingiere el mismo alimento contaminado. En la enlatada (latas hinchadas), productos de pescado,
mayoría de los casos el botulismo se asocia con embutidos con un pH superior a 4,6. Ocacionalmente la
alimentos conservados que no han sido sometidos persona puede sufrir el botulismo de heridas por
suficientemente al calor para destruir las esporas de C. contaminación de ampollas cutáneas.
butulinum, como vegetales en escabeche o conservas de
pescado. La bacteria se desarrolla en el alimento y RECUADRO N° 12 Bioterrorismo:
produce la NTBo sin cambiar las propiedades La toxina botulínica se ha utilizado como agente de guerra
organolépticas (gusto y aroma) del alimento biológica y puede ser un arma de bioterrorismo si los terroristas
contaminado. Los productos cárnicos son los más la pueden diseminar en forma de aerosol. Es la toxina más
frecuentemente asociados al botulismo, mientras que los potente que se conoce.
alimentos ácidos como tomates y cítricos, no se asocian a
la enfermedad. El periodo de incubación depende de la
cantidad de NTBo ingerida. La mortalidad del botulismo
puede llegar al 20% aún con el tratamiento adecuado. Los
160
Diagnóstico de laboratorio Gram se obsevan las formas típicas de presentación

a) Examen directo. Se trabaja con muestras de (bacilos grampositivos esporulados).
contenido intestinal (heces por deposición espontanea o
enema), vómitos o contenido gástrico obtenido por b) Cultivo. En agar sangre desarrollan colonias de bordes
sondeo de todos los comensales. En el caso del botulismo irregulares, supeficie rugosa, consistencia cremosa de 3 a
de heridas con exudados purulentos. Con tinción de 6 mm de diámetro, tranlucidas. Produce beta-hemólis.
C. botulinum - + + -
En laboratorios más equipados se realiza la demostración de la toxina botulínica en suero, heces,
Contenido gástrico o vómitos y restos de alimentos consumidos por el paciente.
Tratamiento El C. difficile son bacilos grampositivos

El tratamiento estándar del botulismo grave es la esporulados similares a los descriptos anteriormente.
aplicación de medidas de sostén con ventilación
mecánica. Administracíon del suero antibotulínico que Rol patógeno
neutralice la toxina. En el botulismo infantil están
contraindicados los antibióticos debido a que los Cuadro N° 77. Factor de virulencia del C. difficile.
fármacos pueden incrementar las concentraciones de FACTOR MECANISMO DE ACCIÓN
toxina en el intestino a consecuencia de la lisis PATOGÉNICO
bacteriana. En el botulismo alimentario del adulto se Toxinas A y B Producen aumento de la
pueden utilizar purgante para eliminar el alimento permeabilidad vascular causan
retenido. En el botulismo de las heridas, el hemoragia y diarrea.
desbridamiento de la herida y la administración de
antibióticos (penicilina, metronidazol) pueden ser Diarrea asociada a C. difficile. Es un proceso mediado
medidas terapéuticas eficaces. por toxinas. C. difficile es suprimido habitualmente por la
flora colónica normal, que impide su crecimiento
Prevención excesivo. Los antibióticos de amplio espectro suprimen
Los lactantes no deben tomar miel, la la flora normal. La clindamicina, que inhibe el
preparación y el almacenaje adecuado de los alimentos crecimiento de muchas especies distintas de bacterias
son métodos eficaces para la prevención del botulismo, el anaerobias del colon, no actua sobre C. difficile. El
hervido de los alimentos puede inactivar las toxinas crecimiento excesivo de los microorganismos vegetativos
aunque la destrucción de las esporas es más difícil. de C. difficile induce la producción de al menos dos
toxinas: toxina A y toxina B. Ambas toxinas parecen
Clostridium difficile actuar a través del mismo mecanismo, dañan las
vellocidades intestinales produciendo un fluido intestinal
acuoso y sanguinolento.
Caracteristicas generales y morfología La infección por este microorganismo se
Se creyó que C. difficile, aislado por primera vez observa principalmente en pacientes hospitalizados,
en1935, no era potógeno para los seres humanos, en la generalmente sometidos a tratamientos con antibióticos.
actualidad se conoce que esta bacteria está implicado Esta enfermedad puede ocurrir en un espectro amplio de
como causante de diarrea asociada con antibióticos severidad, desde una colitis pseudomembranosa,
(DAA) y colitis seudomembranosa (CSM). En algunos moderada o severa, hasta una colitis pseudomembranosa
casos estas enfermedades pueden ser leves y cesan al a veces fatal. Se manifiesta con diarrea acuosa explosiva,
interrumpir el tratamiento antibiótico, sin embargo en acompañada de dolor abdominal, algunas veces con
otros los síntomas pueden ser más graves y producir leucocitosis y fiebre.
colitis asociada a antibióticos y colitis seudomembranosa
potencialmente mortal.
161
Fig. N° 157. Las esporas de Clostridium difficile germinan produciendo células vegetativas que sintetizan la toxina A y B. El crecimiento execesivo del
microrganismo puede causar diarrea asociada a antibióticos (Fuente: Struthers, 2005).
Epidemiología clases y los antineoplásicos. Los agentes antimicrobianos

C. difficile existe de forma asintomática y incriminados con mayor frecuencia son la clindamicina,
normal como parte de la flora del intestino grueso en el las cefalosporinas y la ampicilina.
50% de todos los recién nacidos sanos, durante su primer
año de vida. La incidencia del estado de portador Diagnostico de laboratorio
disminuye hasta al menos del 4% en los adultos. Y esta a) Examen directo. Se trabaja con muesra de heces. La
tasa se mantiene constante en la población. Entre los presencia de bacilos grampositivos no es un dato que
adultos hospitalizados con antecedentes de tratamiento ayuda a su identificación (puede ser cualquier miembro
antibiótico, las tasas de portador pueden llegar al 46% de la flora bacteriana normal del intestino).
(especialmente durante los brotes). Los casos primarios
tienen lugar por vía endógena en pacientes b) Cultivo. Sembrar la muestra en agar sangre en
precolonizados expuestos a antibióticos. Los casos anerobiosis (o en agar yema de huevo). En 48 horas
secundarios se producen por la transmisión exógena de desarrolla colonias de bordes rizoides, planas o convexas,
esporas en el contexto del hospital y a través de las translúcidas, grisáceas, opalescentes, de 2 a 4 mm de
manos de los profesionales sanitarios, con brotes diámetro. No hemolíticas.
nosocomiales. Como agentes potenciales de diarrea c) Pruebas bioquímicas:
asociada a C. difficile, están los antibióticos de todas las

C. difficile - + - -
En laboratorios más sofistificados el diagnostico Prevencion

se realiza mediante la detección de la toxina de C. La limitación del uso de antibióticos de amplio
difficile en heces y ELISA. espectro constituye una medida importate para reducir el
riego de colitis por C. difficile. Las medidas para
Tratamiento controlar la propagación de la infección en le hospital son
El tratamiento se basa en los siguientes el lavado de las manos, la eliminación de los guantes
procedimientos: 1.- Suspensión del o los agentes antes de atender a un nuevo paciente,
antimicrobianos que estuviera recibiendo el paciente y BACTERIAS ANAEROBIAS NO
cambiarlos por otros. 2.- Mantener el equilibrio líquido
electrolítico. La vancomicina se considera el tratameinto ESPORULADOS
de elección, el metronidazol también es efectivo. Caracteristicas generales y morfología
Las bacterias anaerobias no esporuladas son un
grupo de microorganismos de variada morfología
grampositivos y gramnegativos que se las estudia juntos
162
porque comparten características similares con respecto infecciones de la piel y de los tejidos blandos, abscesos
al nicho ecológico que habitan, tipo de enfermedad que pulmonares, neumonías por aspiración, infecciones del
causan y métodos que se usan para su identificación. aparato genital, peritonitis y otros. La mayoría de estas
Sobre lo primero podemos afirmar que si bien los infecciones tiene un origen endógeno (bacterias que
anaerobios están presentes como flora normal en todo el conforman la flora normal), y con frecuencia son mixtas
organismo, los sitios principales de colonización son la (es decir que en la infección están compronetidos varios
mucosa de la cavidad oral, tracto respiratorio, el tracto anaerobios). Con respecto a su identificación, todos se
intestinal y tracto genital femenino, éstos pueden aíslan por anaerobiosis, observando sus características
atravesar barreras epiteliales alteradas debido a bioquímicas de comportaminto.
traumatismo u otras condiciones patológicas, p. ej.,
perforación del colon espontánea o traumática para Clasificación
alcanzar el torrente circulatorio y producir infección en La clasificación de las bacterias anaerobias no
los sitios de predilección. Sobre lo segundo, estas esporuladas cambia con frecuencia por los análisis
bacterias se caracterizan por causar infecciones genéticos que se realizan. Nosotros por conveniencia
supurativas o formación de abcesos y la producción de tomares en cuenta las bacterias más comunes que se
necrosis de tejidos. Estando comprometidos con aíslan en muestras clínicas.
infecciones orales, dentales, sinusitis crónicas,
Cuadro N° 79. Anaerobios no esporulados más comúnmente aislados en muestras clínicas.

BACILOS BACILOS COCOS COCOS
GRAMNEGATIVOS GRAMPOSITIVOS GRAMNEGATIVOS GRAMPOSITIVOS
- Bacteroides fragilis - Propionibacteriun - Veillonella - Peptococcus
- Fusobacterium spp - Bifidobacterium - peptoestreptococcus
- Porphyromonas - Actinomyces
- Prevotella - Lactobacillus
- Mobiluncus
Morfología. Teniendo en cuenta la diversidad de gramvariables, como así también organismos

géneros, es posible encontrar una variedad de morfotipos; pleomórficos; pueden presentar flagelos, cápsula y
bacilos y cocos grampositivos, gramnegativos y fimbrias.
Cuadro N° 80. Factores de virulencia de los anerobios no esporulados.

FACTORES DE FUNCIÓN
VIRULENCIA
Polisacárido capsular Inhibe la opsonofagocitosis, promueve la formación de abscesos,
promueva la adherencia a células epiteliales. Está presente en
Bacteroides y Prevotella.
Pili y fimbrias Promueve la adherencia a células epiteliales y al mucus. Presente en
Bacteroides y Porphyromonas.
LPS Endotoxina de menor actividad biológica, causante de coagulación
intravacular. Presente en Bacteroides, fusobacteriun y Veillonella.
Exoenzimas Contribuyen al daño del tejido y promueven la diseminación e
invasión. Incluye: Hialuronidasa, hemolisinas, fibrinolisina, B-
lactamasa, peroxidasas, proteasas, heparinasa, superóxido dismutasa.
Presente en muchas especies.
Las bacterias en forma individual no cuentan de decúbito, enfermedades malignas, defectos en la

con todos los factores de virulencia para provocar la irrigación sanguínea. Debido a que estas infecciones
enfermedad, lo que se compensa con otros, dando lugar a forman parte de la microflora normal del organismo, las
infecciones polimicrobianas con microorganismos de infecciones son endógenas y se las considera patógenos
igual o diferente tipo respiratorio. Esto establece un oportunistas. Estas infecciones se localizan generalmente
sinergismo que da por resultado la disminución del en zonas próximas a su hábitad: piel, mucosas, aparato
potencial de óxido-reducción en los tejidos, aporte de digestivo, etc.
factores de crecimiento y metabolitos tóxicos que
potencian la infección. Por otra parte a este proceso
contribuyen los factores predisponentes del huésped
como: traumatismos, heridas, actos quirúrgicos, úlceras
163
Bacteroides grupo fragilis Mobiluncus

Son los microoganismos más numerosos de la Son bacilos gramnegativos o gramvariables, de
flora indígena del colon (1011/g de heces). Junto con otros 0,5 um de diámetro por 3 a 5 um de largo, se encuentran
integrantes del intestino juega un papel fundamtneal en el solos o en pares con una apariencia de “alas de gaviota”
metabolismo nutricional, procesando moléculas son anaerobios no formadores de esporas, curvados,
complejas (fermentación de hidratos de carbono, móviles. Mobiluncus significa: mobilis=movimiento y
utilización de sustancias nitrogenadas y uncus (gancho). El rol patógeno de la bacteria todavía no
biotransformación de los ácidos biliares y circulación de esta claro. Catalasa e indol negativas.
estos a través del intestino).
Son bacilos gramnegativos pálidos, inmóviles,
con extremos redondeados, de 0,5- 0,8 um de diámetro
por 1,5 – 4,5 um de largo, con cierto pleomorfismo. La
mayoría posese cápsula de naturaleza polisacárida
(observada con tinta china).
Son anaerobios obligados algunos son
aerotolerantes. En agar sangre, tienen colonias brillantes
de 1-3 mm de diámetro, no hemolíticas. Estos
microorganismo junto con otros evitan la colonización
intestinal de diversos agentes patógenos a través de
alguno de los siguientes mecanismos: competición por Fig. N° 158. Bacilos gramvariables curvados o alas de gaviota
nutrientes o por el sitio de unión a la pared intestinal y característico de Moviluncus (Fuente: Prats, 2012).
liberación de ácidos biliares.
B. fragilis, presenta fimbrias que desempeñan un Los Mobiluncus junto con otros anerobios, está
importante papel de la adherencia. La capsula presente en muestras vaginales de mujeres con vaginitis
polisacarida le confiere resistencia a la fagocitosis y inespecífica (vaginosis bacteriana). La vaginosis
puede inhibir la migración de macrófagos, induce la bacteriana implica un sobrecrecimiento de bacterias
formación de abscesos. El LPS tiene poca actividad múltiples, incluidas Gardnerella vaginalis, Mycoplasma
endotóxica; la exoenzima contribuye en invasión de la hominis, especies de Mobiluncus, Prevotella bivia,
bacteria en heridas quirúrgicas del tracto gastrointestinal, Peptoestreptococcus anaerobius, más bacilos
apendicitis, etc. grampositivos anaerobios como propionibacterium. Por
Estas bacterias son potencialmente resistentes a lo tanto es probable que la vaginosis sea una infección
los antibióticos como: tetraciclina, Kanamicina, sinérgica en la que participan muchos microorganismos.
vancomicina, penicilina y otros B-lactámicos (producen El diagnostico de vaginosis bacteriana se basa en la
B-lactamasa de codificación cromosomal). Son sensibles demostración de tres de los siguientes cuatro criterios:
al cloranfencol, clindamicina y metronidazol. 1.- Secreción vaginal fluida (pero profusa)
2.- pH mayor de 4,5
Porphyromonas y prevotella 3.- Olor a pescado (test de aminas)
4.- Presencia de “células clave” en el examen
Se encuentran principalmente en la cavidad oral microscópico.
causando infecciones mixtas en abscesos periodontales, Las especies de Mobiluncus crecen en agar
gingivales e infecciones de vías respiratorias inferiores. sangre en anaerobiosis y agar chocolate en 3 a 5 días de
Producen colonias pigmentadas de color negro son incubación las colonias son chatas lisas incoloras
resistentes a varios antibióticos como los anteriores. translúcidas de 2 a 4 mm de diámetro
Fusobacterium Propionibacterium
Bacilos con los extremos afilados (forma de Es un habitante normal de la piel, folículos
huso), habita la cavidad oral, vías respiratorias pilosos y glándulas sebáceas; se la encuentra también en
superiores, el colon y en algunos casos el tracto genital la mucosa nasal, boca, intestino, tracto urogenital,
femenino. Provoca infeciones en la boca, aparato incluyendo la uretra masculina.
respiratorio, abdomen y tracto genital femenino. En agar Son bacilos grampositivos aunque se colorean
sangre producen colonias no hemolíticas, opacas, planas irregularmente. Inmovil, de 0,5 – 0,8 um de diámetro por
y convexas, bordes irregulares (aspecto huevo frito) de 1 1 -5 um de longitud; fino, levemente curvado tipo
mm de diámetro. Son resistentes a la vancomicina, difteroide, en cultivos viejos tiende a ser cocoide, no
kanamicina y colistina. posee cápsula. En agar sangre para anerobiosis las
colonias son de 1 – 2 mm bordes circulares, enteras,
164
convexas brillantes, pardo amarillentos y opacas, catalasa Lactobacillus

positivas, como los otros son nitratos positivas, son Los lactobacilos son bacilos grampositivos que
sensible a la kanamicina, vancomicina y resistentes a la forman parte de la vagina, el tubo degestivo y la
colistina. orofaringe humanos. Estan ampliamente distribuidos en
Es causantes del acné, para ello produce la naturaleza, aguas servidas, etc. También se la
enzimas, Hialuronidasa, lipasa. Esta última da lugar a la encuentra en alimentos como productos lácteos, granos,
lisis del sebo cutáneo liberando ácidos grasos que son peces, etc. Algunas especies de lactobacillus se agregan a
irritantes, que contribuyen en la formación de pústulas alimentos como prebióticos, por sus efectos beneficiosos
del acné. La cantidad de sutancia grasas producidas en para la salud.
diferentes regiones del cuerpo, a veces influidas por Son bacilos largos delgados, pueden observarse
factores hormonales, parece determinar la colonización y en forma corineforme o cocobacilares. Pueden observarse
proliferación de P. acnés. formando cadenas largas de bacilos. La mayoria de las
especies son inmóviles. Las mayoría son aerobias
Bifidobacterium facultativas, microaerofilas o anaerobias. Los
Las bifidobacterias son poco patógenas y no lactobacilos se denominan así porque más del 50% de
suelen estar involucradas en infecciones. Constituyen un los productos terminales de la fermentación de la glucosa
componente dominante de la flora fecal del hombre y es ácido láctico; algunas especies producen ácido acético,
algunas se hallado en otras localizaciones. fórmico y CO2. Son catalasa, oxidasa negativos, no
Bifidobacterium dentum, es el único agente que se ha reducen nitrato no producen indol ni H2S y no forman
aisldo de cuadros pulmonares graves, caries dentales y esporas.
vagina humana, es un bacilo grampositivo filamentoso,
inmóvil; tipo difteroide de 1 um de diámetro por 2 – 4
um de largo. En agar sangre desarrolla 28°C, colonias de
1 mm, de borde regular, convexo, blancas y brillantes.
Catalasa, nitrito negativo. Sensible a vancomicina y
resistentes de colistina.
Veillonella
Cocos anaerobios gramnegativos, que puede
confundirse con Neisseria en una tinción de Gram.
Algunas veces son aisladas de muestras clínicas pero no Fig. N° 159. Lactobacillus
se conoce bien su papel en la producción de infecciones.
Estan presentes en la cavidad oral, tracto gastrointestinal, Aunque los lactobacilos son de baja virulencia,
urogenital. en raras ocaciones pueden producir infeciones sobre todo
Son cocos gramnegativos de 0,5 um de diámetro en pacientes inmunosuprimidos como: endocarditis,
aparecen en pares, cadenas cortas y racimos. Desarollan abscesos dentales, bacteriemia con infecciones
en 37°C, pH 6,5 a 8. La mayoría de las cepas no ginecológicas (endometritis) y pleuropulmonares.
fermentan carbohidratos, son resistentes a vancomicina;
sensibles a kanamicina y colistina. Las colonias en agar Diagnósticos de lactobacillus
sangre dan colonias blanco grisáceos no son hemolíticas, Las muestras de exudados son cultivadas en agar
son oxidasa y catalasa negativas. sangre, luego de 24 horas de incubación en anaerobiosis
desarrollan colonias pequeñas de 2 – 5 mm convexas,
lisas con bordes regulares, alfa-hemolítico o de
Peptoestreptococcus coloración gris. Son resistentes a la vancomicina.
Cocos grampositivos pequeños que se agrupan En general los Lactobacilos son sensibles a
en largas cadenas. Son miembros de la flora normal de la penicilina G, ampicilina, cefalosporinas y clindamicina,
boca, el colon y el tracto genital femenino. Son bacterias aunque actualmente se están informando resistencias a
oportunistas. En forma oportunista son causantes de estos antibióticos.
infección puerperal, peritonitis pélvica, abscesos
cerebrales, celulitis y otros. Las lesiones suelen tener
presencia de gas y mal olor. Pueden coexistir con S. Pruebas bioquímicas para la identificación
aureus. Estas bacterias son resitentes a la penicilina y
otros antibióticos. de bacterias anaerobias no esporuladas:
165

Bacterias Morfología Gram Catalasa Desarrollo Nitritos Resistencia antibiótica
en bilis 20%
Bacteroides fragilis Bacilos - + + - K(r), C(r), V(r)
Fusobacterium spp Bacilos - - - - V(r)
Porphyromonas y Bacilos - - - - K(r),C(r) y V(r)
Prevotella
Mobiluncus Bacilos - - V
Propionibacteriun Bacilos + + - + C(r)
Bifidobacterium Bacilos + - + - C(r)
Lactobacillus Bacilos + - V(r)
Veillonella Cocos - - + V(r)
peptoestreptococcus Cocos + - K(r) y C(r)
Kanamicina (K), Colistina (C) y Vancomicina (V). Resistente (r).
166
CAPITULO 16
BACILOS ACIDO ALCOHOL RESISTENTES
GENERO MYCOBACTERIAS
Caracteristicas generales y morfología Mycobacterium tuberculosis

Las Mycobacterias son bacilos acido-alcohol Este bacilo mide de 1 a 4 um por 0,3 a 0,6.
resistentes (BAAR), que se tiñen de color rojo con la Algunas veces se las ve con abultamientos pequeños en
tinción de Zielh Neelsen. Este grupo de microorganismo los extremos, presentan un gran polimorfismo (bacilos
comprende varias especies, de ellos sobresalen los largos, cortos fragmentados). Debido al contenido
causantes de la tuberculosis y la lepra. elevado de ácido micolico se tiñen mal con Gram, pero
bastante bien por el método de Ziehl Neelsen.
Morfológicamente, son bacilos delgados, rectos Desarrollan óptimamente en un pH de 6,8 a 7,2 a 37°C,
o ligeramente curvos, algunas veces se las ve son aerobios estrictos. Se dividen por fisión binaria en 12
filamentosos, ramificados o fragmentados en bacilos a 30 horas. Pueden vivir en el agua hasta un año, en los
cocoides. Miden de 1 a 10 um de largo por 0,2 a 0,6 um esputos desecados hasta dos meses y en el jugo gástrico
de ancho. Son inmóviles, no presentan cápsula, no hasta 6 horas. Son muy sensibles a la luz solar.
forman esporas y son aerobias estrictas. Estas bacterias,
por contener un 60% de lípidos en su pared bacteriana no
se tiñen fácilmente por el método de Gram, pero sí, con
el método de Ziehl Neelsen, ya que su propiedad de
ácido-alcohol resistente, le permite retener el colorante de
fucsina, tiñiendose por tanto el bacilo de color rojo.
Clasificación
El género Mycobacterium comprende varias especies
(se conocen en total 72), de las cuales las que tienen Fig. N° 160. Bacilos Acido alcohol Resistetes: M. tuberculosis (Fuente:
importancia médica son: Nath, 2007).
a) Mycobacterium tuberculosis Rol patógeno

b) M. bovis M. tuberculosis, no poseen sustancias virulentas
c) M. atípicas muy importantes, tampoco exotoxinas ni endotoxinas. Al
d) M. leprae penetrar el germen en nuestro organismo, da lugar al
desarrollo de un importante proceso inflamatorio. Los
tejidos pueden ser dañados gravemente por la violencia
de la respuesta inmunitaria.
Cuadro N°. 82. principales determinantes o factores de virulencia del M. tuberculosis.

VIRULENCIA
Factor cordon Son glucolípidos de trehalosa 6-6´ dimicolato. Activa la vía alterna del complemento,
provoca la formación de granulomas y en el cultivo produce la aglomeración de
bacilos en forma de cuerdas.
Lipoarábinomanano (LAM) Glucolípido bacteriano que se une a los receptores de manosa de los macrófagos y
promueve la penetración dentro de los mismos. Estimula la liberación de IL-8 que
induce la quimiotaxis de granulocitos que contribuye al daño de tejido. Inhibe la
activación de lo macrófagos por supresión de la proliferación de los linocitos T.
Sulfátidos Inhibe la fusión entre los lisosomas y fagosomas y permite la supervivencia de M.

tuberculosis dentro los macrófagos. Promueven la liberación de TNF-a, que induce
daño celular y provoca ciertos signos en el enfermo (pérdida de peso).
167
Ureasa, arginasa, Enzimas que producen la liberación de amoniaco dentro el macrófago, que alcaliniza el
glutaminasa y asparaginasa contenido fagolisosomal. Además el amoníaco inhibe la fusión entre el fagosoma y los
lisosomas. Así la micobacteria asegura su supervivencia intracelular.
1.- Tuberculosis. La tuberculosis puede afectar a de la enfermedad, es la pulmonar. Los pasos involucrados
cualquier órgano, pero dado que la vía de ingreso más en la patogénesis de la tuberculosis se presentan de
frecuente es la inhalatoria, la presentación más habitual manera muy simplificada en el esquema Nº 5
Esquema N° 5. Patogénesis de la tuberculosis pulmonar
a) Primiera etapa. Las micobacterias inhaladas transitan infección, para actuar contra los fagocitos infectados que
a través del tracto respiratorio superior y se depositan en expresan moléculas de superficie marcadoras de
el pulmón. Los macrófagos alveolares son las células que activación. Al entrar en contacto con estas moléculas de
inicialmente fagocitan a las micobacterias en un proceso superficie, las células NK liberan INF-g que promueva la
en que intervienen una variedad de receptores del producción de óxido nítrico y TNF-a por los fagocitos,
macrófago (CR1, CR3, CR4, receptores para manosa que inactiva al M. tuberculosis. Lo que ocurra luego
(LAM) y otros). Posteriormente, se produce la fagocitosis dependerá de las características de la cepa de M.
de la bacteria por células dendríticas y fagocitos tuberculosis infectante, el tamaño del inóculo y de la
derivados de los monocitos circulantes que llegan al sitio condición inmunitaria del huésped. Cepas poco
de infección. Una vez fagocitadas, las micobacterias se virulentas, en un inóculo de escasa magnitud,
alojan dentro los fagosomas. Los sulfátidos, ureasa y normalmente son eliminadas en este estadío y la
otras enzimas de la envoltura bacteriana, producen la infección es abortada. Sin embargo las micobacterias de
liberación de amoníaco, alcalinizando el interior del alta virulencia con un inóculo de mayor magnitud y en un
macrófago, lo que impide la fusión de los lisosomas con huésped susceptible (sin inmunidad adquirida contra la
los fagosomas, por lo que las micobacterias no son micobacteria) no pueden ser contenidas y el huésped no
atacadas y así pueden multiplicarse dentro de los podrá detener la replicación intracelular de las
fagosomas y destruir al macrófago. Este proceso da paso micobacterias; en esta situación, las células NK, están
a nuevos ciclos de fagocitosis por los macrófagos, obligadas a destruir a los macrófagos infectados, ya sea
replicación de las micobacterias y lisis celular. En estas por mecanismos de apoptosis o por citotoxicidad.
circunstancias se pone de manifiesto la inmunidad innata
del hombre contra M. tuberculosis, mediante la b) Segunda etapa. La persistencia de la infección; es
movilización de las células NK, que arriban al sitio de la decir; la presencia de bacilos (que no han sido
168
destruidos), los detritus celulares y factores ello se debe, que la prueba de la tuberculina, es positiva
quimiotacticos del huésped (ej., el componente C5a del por varios años).
complemento que activan el complemento por la vía
alterna), obligan a los macrófagos pulmonares a liberarar c) Tercera etapa. Como consecuencia de la baja de
IL-8 y otras citoquinas proinflamatorias para atraer defensas, desnutrición, inmunosupresión, que condiciona
linfocitos T, monocitos y polimorfonucleares al sitio de a una débil movilización de los macrófagos, granulocitos
la infección. El producto histológico de este foco es la y células epitelioides, permite que las micobacterias que
formación de células gigantes multinucleadas que se encontraban en forma latente en el organismo se
resultan de la fusión de varios macrófagos (las llamadas multipliquen, por lo tanto fracasa la barrera del tubérculo,
células de Langhans) como una manifestación de la posteriormente la reacción inflamatoria se exacerba y
activa defensa del huésped contra las micobacterias; en conduce a la formación de un tubérculo macroscópico de
ese proceso algunas micobacterias escapan del sitio mayor tamaño con necrosis central (lleno de
inicial de infección y migran hacia los ganglios linfáticos micobacterias) que pueden descargarse en un bronquio y
regionales, donde son recaptadas por otros macrófagos, de aquí hacia la vía aérea y exterior en forma de masa de
éstos macrófagos infectados y microorganismos libres, caseum y esputo mediante la tos, estornudo y vómito. El
se diseminan hacia el torrente sanguíneo y otros tejidos vaciamiento del tubérculo deja en su lugar una cavidad
(ej., médula ósea, bazo, riñones, hueso o sistema nervioso tuberculosa con un alto número de micobacterias viables
central), donde es posible que produzcan focos que pueden diseminarse en todo el organismo.
infecciosos, pero generalmente prefieren acantonarse en Clinicamente los enfermos sufre tos crónica
una región apical de los pulmones. (más de 15 día, son sintomático respiratorios) y
Al cabo de 4 a 6 semanas desde el ingreso de M. expectoración (a veces con sangre), sudación nocturna,
tuberculosis y cuando la masa de linfocitos, es episodios febriles y fatiga, pérdida de peso, anorexia y
suficientemente numerosa, comienza a manifestarse los malestar general. La enfermedad sin tratamiento se
efectos de la inmunidad adquirida contra los antígenos cronifica pudiendo causar la muerte.
micobacterianos. A medida que la reacción inmune se
hace más intensa, inducido por los factores liberados por 2.- Mycobacterium y SIDA. En los últimos 20 años se
macrófagos activados y el factor cordon de M. ha observado que la tuberculosis es muy frecuente en
tuberculosis, en el sitio de infección, se producen unos individuos que sufren infección por el virus de la
nódulos con zonas de necrosis central rodeados de una inmunodeficiencia humana (VIH). En la mayoría de los
corona de células mononucleares (monocitos, y casos podría tratarse de una reactivación del M.
linfocitos), rodeados de tejido fibroso (fibroblastos), tuberculosis que permanecia latente en el individuo y no
llamándose en conjunto granulomas. El granuloma de una nueva infección exógena. Sin embargo se conocen
aumenta de tamaño, merced al incremento de casos de epidemias intrahospitalarias, en donde a partir
macrófagos, linfocitos y células epitelioides formándose de un individuo enfermo se han infectado los demás
de esta manera un tubérculo blando en cuya parte central internos de la misma sala. Los individuos VIH –
se acumulan detritus celulares, micobacterias y productos positivos sin expresión clínica o en las primeras etapas
de exudación, formando un contenido de color del SIDA generalmente desarrollan lesiones pulmonares
blanquecino, con apariencia de queso blando. De allí el con clara tendencia a la generalización. No debe
nombre de caseum. La lesión resultante es el tipo descartarse que en algunos casos también puedan
exudativo. La tensión de 02 en la zona de necrosis producirse reinfecciones con bacilos recientemente
caseosa es muy baja; por ello el desarrollo de las adquiridos. Los signos carácterísticos de la reactivación
micobacterias en este sitio cesa. En otras palabras, en este tuberculosa aparecen durante los primeros estadios del
periodo el huésped detiene la multiplicación intracelular SIDA, cuando aún pueden manifestarse fenómenos de
del M. tuberculosis a expensas del daño celular y hipersensibilidad que posibiliten la expresión de la lesión
liberación de micobacterias hacia un medio extracelular característica. Si el individuo infectado con el VIH ya ha
poco propicio. En este momento, la respuesta inmune alcanzado el estadio de inmunodeficiencia clínica severa,
contra los antígenos micobacterianos puede verificarse la micobacteria no podrá generar fenómenos de
por la aparición de hipersensibilidad retardada a PPD hipersensibilidad ni las lesiones tuberculosas típicas. En
(reacciónde Mantoux positiva), y las lesiones estos casos las micobacterias se diseminan rápidamente y
calcificaficadas del material caseoso en el sitio inicial de causan una enfermedad sistémica que puede llevar al
la lesión se pueden observar en una radiografía de torax y paciente a la muerte en tan sólo 8 a 12 semanas.
el grupo de lesiones se reconocen como complejo de
Ghon. Se dice que el indivíduo que ha completado este Epidemiología
ciclo patológico, ha sufrido la primoinfección La tuberculosis es un gran problema de salud
tuberculosa. Pero no siempre las lesiones tuberculosas se mundial que repercute en países en vías de desarrollo
esterilizan y, M. tuberculosis puede permanecer viable más que en los desarrollados, en términos generales
en el centro de la lesión calcificada, en donde queda podríamos mencionar que el riesgo actual de infección es
alojado suspendido en minúsculas masas de caseum (a de 50 personas por cada l000 para el primer caso y 2 por
169
cada 1000 en el segundo. Entre los factores principales susceptible. Las microgotas pueden también causar
que favorecen la infección y luego la enfermedad son: la infecciones al ingresar al huésped a través de
pobreza, desnutrición, hacinamiento, mala higiene, microlesiones cutáneas. Esta puerta de entrada reviste
enfermedades debilitantes, etc. importancia en la contaminación accidental con M.
Estadisticas recientes de la Organización tuberculosis del personal médico, paramédico y de
Mundial de la Salud demuestran que la incidencia laboratorio, aunque la mayor parte de los casos de
mundial de tuberculosis oscila entre 8 y 12 millones de tuberculosis en los equipos de salud se da por transmisión
casos de tuberculosis activa por año, que la prevalencia aerogena. El personal que trabaja con bovinos también
supera los 20 millones y que las muertes alcanzan los 3 puede adquirir M. bovis al manejar animales infectados.
millones por año. Se estima que el 25 al 50% de la Otra puerta de entrada es la gastrointestinal, que cobra
población mundial está infectado por el M. tuberculosis. importancia cuando se ingieren las micobacterias
Estar “infectado” significa que la persona alberga el presentes en materiales contaminados, como por ejemplo
bacilo de la tuberculosis, que por factores de en utensilios de mesa, o cuando se consumen productos
inmunocompetencia del huésped (buenas defensas, cierta no pateurizados derivados de bovinos enfermos.
protección de la vacuna), mantiene a raya la acción
virulenta del bacilo, evitando producirse la enfermedad,
sin embargo la posibilidad de desarrollarse la
tuberculosis se encuentra latente, esto debido a factores
desfavorables que pudiera sufrir el paciente (bajas
defensas, desnutrición, inmunosupresión, etc.), que
permita la multiplicación y diseminación de la bacteria en
el organismo.
La transmisión de M. tuberculosis ocurre más
frecuentemente por vía aerógena, a través de microgotas
que se producen y expelen al toser, estornudar y hablar. Fig. N° 161. La Transmisión de la tuberculosis pulmonar es por vía
Particulas de un diámetro de hasta 10 um (que contengan aerógena, mediante microgotas de esputo que el paciente enfermo
varios bacilos), pueden atravesar el tracto respiratorio elimina al toser, esturnudar y hablar (Fuente: Struthers, 2005).
superior, depositarse en el pulmón, e iniciar la infección.
Una expectoración de un paciente con tuberculosis Diagnóstico general de la tuberculosis
pulmonar activa (paciente bacilífero) puede generar hasta pulmonar
3.000 microgotas infectantes y apenas 10 bacilos son
capaces de iniciar la infección en un individuo
Fig. N° 162. Diagnóstico clínico y laboratorial de una tuberculosis pulmonar (Fuente: Struthers, 2005).
Diagnóstico de laboratorio a) Examen directo. Frotis y tinción de Ziehl Neelsen es

Las muestras con las que se trabaja en muy útil porque nos permite ya establecer un diagnóstico
laboratorio son: esputo, orina, LCR, exudados laboratorial (procedimiento práctico pag. N° 281).
purulentos, etc.  Orina.-Se debe obtener muestra de orina de 24
horas, dejar reposar 4 horas, desechar el
sobrenadante y centrifugar el sedimento de la
170
orina a 2000 rpm durante 20 minutos. Con el

sedimento realizar la siembra en el medio de
cultivo Lowenstein - Jensen y el extendido en
porta objetos para la tinción de Ziehl Neelsen.
 LCR. Se centrifuga a 3000 rpm durante 15
minutos con el sedimento sembrar en tubos de
Lowenstein – Jensen y realizar el frotis para
tinción de Ziehl Neelsen.
 Esputo. Generalmente se realizar una
baciloscopia directamente de la muestra de
esputo. Para el cultivo es necesario realizar la
descontaminación del esputo por el método de
Petroff (pag. N° 262) y sembrar en el medio de Fig.N° 163. Medio de cultivo Lowenstein Jensen con desarrollo de
Lowestein Jensen. colonias de Mycobacterium tuberculosis (Fuente: Prats, 2012).
Resultados: La presencia de BAAR en la muestra es
indicativa de una tuberculosis renal, meningitis M. tuberculosis. Colonias de bordes irregulares finos,
tuberculosa o tuberculosis pulmonar respectivamente en superficie rugosa, aspecto seco, céreo, consistencia
cada uno de los casos. butirosa, color amarillento, 2 a 4 mm de diámetro,
aparentan pequeños coliflores o verrugas (desarrollo
b) Cultivo. Los tubos sembradas incubar a 37°C., en eugónico).
posición horizontal las primeras 24 horas; luego
colocarlos en posición vertical el resto del tiempo a M. bovis. Colonias de bordes bien definidos, circulares,
incubar. La lectura del desarrollo de colonias se realiza a superficie plana, aspecto húmedo y brillante, consistencia
los 8 días, 15 días hasta 60 días. cremosa, no pigmentadas a veces se observan con una
Se utilizan dos tubos de Lowenstein Jensen para el ligera tendencia a dar colonias umbonadas de 2 a 6 mm
cultivo de las muestras, una que contenga glicerina y otra de diámetro (desarrollo disgónico).
no. De acuerdo a la preferencia el M. tuberculosis
desarrolla mejor en el medio con glicerina, y el M. bovis c) Pruebas bioquímicas:
en el medio sin glicerina.

Microorganismo Catalasa Reducción de nitrato Niacina
M. tuberculosis - + +
M. bovis - - V
Cuadro N° 84. Prueba de reducción de nitrato a nitrito

Las micobacterias que 1.-Inocule una asada del germen Reacción positiva: aparición de color rosado a
producen problema en un tubo de hemólisis rojo el tubo.
nitrorreductasa son con 2 ml de sustrato (contiene Reacción negativa: no hay cambio de color. Esta
capaces de reducir los NO3), agitar e incubar a 37°C última confirmar con el agregado de Cinc en
nitratos a nitritos: durante 2 horas. polvo, si aparece rojo intenso entonces es
NO3 NO2 2.-Agregar al tubo una gota de positiva, si no, negativa.
HCl concentrado, luego 2 gotas
de sulfanilamida al 0,2% y 2 gotas
de diclorhidrato de N-(l-naftil)
etilendiamina al 0,1%.
3.-Dejar reposar 5 minutos y
observar.
171
Cuadro N° 85. Prueba de la acumulción de Niacina

1.- Colocar 1 ml de agua destilada
Todas las especies de esteril en el tubo de Lowestein – Prueba positiva: desarrollo de color
Mycobacterium producen Jensen donde desarrollaron amarillo en la tira de papel.
ribonucleótido de niacina y lo micobaterias, punzando en el medio Prueba negativa: no cambia de color.
convierten en nicotinamida de cultivo con la pipeta pasteur para
adenina dinucleótido (NAD) permitir el ingreso del agua al medio
excepto M. tuberculosis, de cultivo.
M.simiae y M. chelonae, 2.- Inclinar el tubo de tal forma que el
acumulándose la niacina en el agua cubra todo el pico de flauta y
medio de cultivo, la prueba dejar reposar 30 minutos.
identifica la presencia de ésta 3.- Rotar el tubo de modo que el agar
niacina, lo que permite inclinado mire hacia abajo y extraer
diferenciar al M. tuberculosis 0,6 ml a otro tubo esteril, al cual
del M. bovis y otros. colocar una tira de papel filtro para
niacina con la flecha hacia abajo,
agitar y observar a los 15 minutos.
3.- Prueba de la tuberculina, Mantoux o PPD. Cuando Interpretación. Una reacción positiva significa que el
ocurre una infección tuberculosa el individuo presenta indivíduo está (o ha estado) infectado con M.
hipersensibilidad contra M. tuberculosis, que puede tuberculosis. La prueba no da una indicación temporal
ponerse de manifiesto a través de la inoculación acerca de la infección. También es positiva cuando el
intradérmica de proteínas purificas derivadas, obtenidas individuo ha sido vacunado con BCG, en este caso la
del M. tuberculosis (PPD), esta prueba también llamada positividad dura 3 a 7 años.
tuberculina, Mantoux o propiamente PPD. Una reación es negativa en los siguientes casos:
Se administra 0,1 ml de PPD en forma a) cuando el individuo no está ni ha estado nunca
intradérmica, frecuentemente en el antebrazo; a las 48 a infectado con M. tuberculosis. b) cuando el individuo
72 horas se observa un eritema o induración de 10 mm o está infectado pero todavía no ha desarrollado
más de diámetro en el lugar de inoculación, producto de hipersensibilidad retardada c) cuando el individuo
una reacción inflamatoria local esto debido a la desarrolla anergia debida a una tuberculosis masiva o a
movilización de linfocitos T de memoria, macrófagos y cierta enfermedad de la infancia como sarampión,
factores quimiotacticos pro inflamatorios por la presencia enfermedad de Hodgkin, o medicamentos
de antígenos ya conocidos. inmunosupresores.
Fig. N° 164. Prueba de Mantoux o tuberculina consiste en una inyección de derivado proteico purificado (PPD) en la parte anterior del antebrazo. La
intensidad de la induración (tamaño en milímetros), determinaina la posibilidad de una infección con el Bacilo de la tuberculosis (Fuente: Struthers, 2005).
172
Tratamiento para niños menores de 5 años con reacción positiva al

El tratamiento de la tuberculosis se realiza con PPD y niños que han estado en contacto con enfermos de
agentes quimioterápicos. Históricamente estos agente se tuberculosis.
han clasificado en drogas de primiera línea, como Erradicación de la tuberculosis del ganado bovino,
isoniacida, rifampicina, pirazinamida, etambutol, pasteurización de la leche vacuna.
estreptomicina y fluoroquinolonas; o de segunda línea,
como etionamida, protionamida, cicloserina, kanamicina, Micobacterias atípicas
capreomicina, tioacetazona, viomicina y claritromicina,
esta última para micobacterias no tuberculosas. Caracteriasticas generales
El tratamiento más efectivo en la actualidad, se La existencia de otras micobacterias distintas de
realiza con un esquema de 4 drogas: isoniacida, los agentes etiológicos de la tuberculosis y de la lepra fue
rifampicina, pirazinamida y etambutol o estreptomicina, reconocida hace mucho tiempo. Sin embargo, durante
los dos primeros meses, seguido de dos drogas: muchos años, su presencia fue considerada como un
isoniacida y rifampicina, por los siguietes 4 meses. resultado de contaminaciones.
Cuando este esquema, no da resultado por resistencia El papel de estos organismos en las
microbiana, entonces se requiere realizar antibiogtrama, enfermedades humanas no fue claramente reconocido
para tratar con antibióticos de segunda línea. Sin hasta la década de 1950. En los últimos treina años, la
embargo todo tratamiento contra la tuberculosis, se debe importancia relativa de otras especies de micobacterias,
basar en los esquemas aprobados en los ministerios de ha progresado en formas simultáneas con el uso de
salud de cada país. métodos microbiológicos más específicas para su
identificación.
Prevención
La prevención actual contra esta enfermedad, se Clasificación
realiza mediante la vacuna BCG. La eficacia de esta Runyon, presentó evidencias convincentes del
vacuna es un tema de discusión puesto que hay estudios papel de estas micobacterias en enfermedades humanas, y
que demuestran una protección del 80% y otros han propusieron un método útil para su clasificación. Este se
demostrado una protección nula. Un hecho cierto que basó en la producción de pigmento, velocidad de
merece ser destacado es que cuando se produce la crecimiento y características de la colonia de
enfermedad tuberculosa en un niño vacunado, ésta microorganismos. Los cuatro grupos principales se
generalmente tiene una presentación más leve. Y más denomina: fotocromógenos, escotocromógenos, no
importante aún, se ha comprobado que la incidencia de fotocromógenos y micobacterias de crecimiento rápido.
meningitis tuberculosia en individuos vacunados
disminuye a valores insignificantes. En otros países como
Argentina, utilizan la quimioprofilaxis con isoniacida
Cuadro N° 86. Pruebas bioquímicas y significación clínica de micobacterias atípicas

Microorganismo Niacina Reducción Significación clínica
de nitrato
Fotocromógenas
(colonias de color -Infección pulmonar parecida
Amarillo cuando son a TB.
expuestas a la luz)
M. kansasii - +
M. marinum V - -Infecciones cutáneas se

encuentran en picinas.
Escotocromógenos
(colonias amarillas
cuando crecen en la -Linfadenitis cervical en
oscuridad) - - niños.
M. scrofulaceum
M. szlgai - + -Enfermedad pulmonar y

extrapulmonar.
M. gordonae - - -Oportunista.
No fotocromógenos - -Infecciones pulmonares en
173
(colonias de color - pacientes con SIDA, también

canela) puede ser un comensal sin
M. avium-intracellulare relevancia clínica.
De crecimiento rápido + -Infecciones cutaneas y

(colonias de color beis) - pulmonares.
desarrollan a las 72
horas.
M. fortuitum
M. chelonae V - -Generalmente son saprófitos.
M.Abscessus - - -Infecciones cutaneas y

pulmonares.
Mycobacterium leprae periféricos y produce pérdida de la sensibilidad cutánea.

Las lesiones tubercúloides son granulomatosas y presenta
una marcada infiltración con céluas epiteliodes, células
Caracteristicas generales y morfología gigantes y linfocitos.
Mycobacterium leprae, es el agente etiologíco La lepra lepromatosa presenta maculas, pápulas
de la lepra, enfermedad infecciosa crónica, ataca con y nódulos eritematosos de mayor extención. Las lesiones
predilección a la piel, mucosas, sistema nervioso pueden deformar estructuras nasomaxilares. El
periférico y, en forma grave otros órganos: hígado, bazo, engrosamiento de los tejidos blandos de los labios, la
ganglios linfáticos. Ojos, genitales, laringe, etc. frente y las orejas le dan al paciente un aspecto leonino
Desde el punto de vista morfológico, el bacilo característico, la perdidad de la sensibilidad cutánea es
de Hansen y el de Koch no muestran diferencias irregular. La inmunidad celular es deficiente por tanto los
importantes, salvo que el primero de ellos tiene tendencia bacilos crecen sin inhibición alguna y las lesiones son
a agruparse adoptando la disposición en paquetes de ricas en bacilos. Por lo que estos pacientes con lepra
cigarrillos, y de menor longitud. Son bacilos filamentosos lepromatosa son bacilíferos.
que rápidamente fragmentan en formas bacilares cortos o
cocoides. Su tamaño es de 1 a 8 um por 0,2 a 0,5 con
lados paralelos y extremos redondeados. Son
intensamente ácido-alcohol resistente, tiñiendose en
forma uniforme. En los tejidos se disponen en masas
(globias) o en grupos de bacilos unos al lado de otros
dentro de las células, ya que parece ser un parásito
intracelular obligado. A pesar del tiempo transcurrido
desde su descubrimiento y de haberse realizado
numerosos intentos por cultivarlos, hasta el momento M.
leprae no ha podido ser cultivado y desarrollado in vitro.
Rol patógeno Fig. N° 165. Bacilos de Hansen, agrupados en remolino.

Lepra. Es una enfermedad infecciosa, que se transmite (Fuente: Nath, 2007).
en forma directa de una persona enferma bacilífera a otra Epidemiología
susceptible (con bajas defensas) por contacto estrecho y En general, se considera que los pacientes que
prolongado, que se produce principalmete en un medio eliminan el bacilo constituyen la única fuente de
familiar; dando lugar a una lesió primaria indeterminada infección, sin embargo se ha encontrado similar
que puede persistir por meses y años y desaparecer o enfermedad en los armadillos y algunas especies de
pasar las formas más graves como la tuberculoide y monos africanos. Los mecanismos de transmisión de un
lepromatosa. individuo a otro es por contacto directo, mediante la piel
Los paciente con lepra tuberculoide desarrollan o más propiamente por las secreciones nasales o
máculas o grandes placas achatadas, con bordes pequeñas gotitas de saliva que se eliminan al hablar y
eritematosos y el centro seco, hipopigmentados y sin estonudar, estas secreciones contienen aproximadamente
vello, que aparecen en la cara, tronco y extremidades. M. 1x108 bacilos ácido-alcohol resistentes por mililitro, lo
leprae, desarrolla mejor en los tejidos a temperaturas más que es equivalente al número de M. tuberculosis en el
bajas que la corporal, por los que no se observan lesiones esputo de los pacientes con tuberculosis pulmonar
en las áreas de mayor temperatura como axilas, ingle y cavitaria.
perineo. La bacteria, invade los nervios sensoriales
174
Schaffer ha determinado que un lepromatoso positiva es la formación de un nódulo en el lugar de la

disemina después de 10 minutos de conversación, más de inoculación de más de 5 mm y, la otra lectura se realiza a
200.000 bacilos por intermedio de gotitas de Pffugger la 3 o 4 semanas (reacción de Mtsuda), formación de un
proyectadas hasta 1,20 metros de distancia. nódulo lenticular que puede ulcerarse de más de 5 mm, es
Otras posibles fuentes de infección son la leche positiva. La ausencia de nódulos significa lepromina
materna, que en paciente lepromatosos contienen gran negativa.
número de bacilos, y la picadura de insectos, de los Otra forma de diagnostico es la inoculación de
cuales se ha recuperado BAAR viables, después de lesiones de lepra en la almohadilla plantar del ratón
haberse alimentado 72 horas de un lepromatoso. donde los bacilos se multiplican.
La puerta de entrada del bacilo en el huésped
receptor es también materia de controversia, pero tiene Tratamiento
más importancia la piel que las mucosas. Esta puede ser Existen sólo unos pocos agentes quimioterápicos
penetrada por el bacilo estando aún intacta. La vía para el tratamiento de la lepra. La dapsona tiene bajo
digestiva es poco probable por la barrera gástrica. costo, baja toxicidad y las cepas no resistentes de
La lepra llego a América traido por los M.leprae son exquisitamente sensible a su acción, como
españoles en la época de la invasión. Esta enfermedad inhibidor de la síntesis bacteriana de ácido fólico. La
aparece con mayor frecuencia en países subdesarrolados. rifampicina actúa a baja dosis y proporciona un efecto
Se estima que en el mundo entero existen millones de bactericida. La etionamida y la protionamida son más
personas con lepra. efectivos que la dapsona, pero son más caros y
hepatotoxicos y solo se utilizan cuando hay resistencias.
Diagnóstico de laboratorio Los tratamientos son prolongados desde 6 meses hasta de
a) Examen directo. Las muestras con la que se trabaja, por vida.
son los raspados cutáneos de la zona afectada, como
lóbulos de la oreja o mucosa nasal, con los cuales realizar Prevención
la tinción de Ziehl Neelsen. Los bacilos se las encuentran La prevención consiste en el diagnóstico y
intracelularmente aislados o en cúmulos. tratameinto de los enfermos y el rápido diagnostico de los
La prueba de la lepromina es una contactos próximos del enfermo. La quimiprofilaxis con
intadermoreacción con antígenos que se preparan a partir dapsona se utiliza para los niños que han estado en
de bacilos obtenidos del armadillo mezclados con solfis contacto con el enfermo.
esteril, se inocula 0,1 ml en la cara anterointerna de los
brazos y en hombros. Leer el resultado en dos etapas una
a los 24 y 48 horas (reacción Fernandez), la reacción
175
CAPITULO 17
ESPIROQUETAS
GENERO TREPONEMA
Caracteristicas generales y morfología Debido a su pequeño tamaño, las treponemas no

Las espiroquetas (familia Spirochaetaceae) en pueden ser observadas con el microscopio óptico por
general, son bacterias helicoidales (en forma de tinción de Gram, pero pueden observarse por técnicas de
sacacorcho) y, a diferencia de otras bacterias, presentan inmunofluorescencia o por métodos que incrementen su
una pared celular flexible que se encuentra enrrollada por ancho, como la impregnación argéntica, como también
un endoflagelo que le proporciona un movimiento mediante la técnica del campo oscuro. Este
rotatorio y de flexion. La pared celular y los endoflagelos microorganismo no puede ser cultivado en medios
están a su vez recubiertos por una membrana externa artificiales, solo se ha logrado reproducir a la bacteria
semejante a la de los gramnegativos. Al igual que otras mediante la inoculación en testículos de conejos de
bacterias se dividen por fisión transversal. Algunas muestras obtenidas del chancro de un paciente con sífilis.
espiroquetas son muy finas y solo pueden ser observadas
con microscopio de fondo oscuro, microscopia Rol patógeno: patogenia
electrónica o por la utilización de técnicas especiales de La membrana externa del T. pallidum contiene
tinción. muy poca proteína y en consecuencia es débilmente
Otras como las del género Borrelia son más inmunogénica (debil formador de anticuerpos). Sin
gruesas y pueden ser fácilmente observadas por tinción embargo durante el curso de la infección, la presencia de
con Giemsa o con el Gram. Las espiroquetas patógenas la bacteria y su pared compuesta de polisacáridos, ejercen
crecen lentamente o no lo hacen en medios artificiales. una fuerte acción sobre las células linfoides y endotelio
Algunas son anaerobias estrictas, otras son microaerófilas de las arterias, donde se produce un estado
y otras son aerobias. Algunas espiroquetas tienen vida proinflamatorio local produciendo lesiones múltiples con
libre, otras son miembros de la flora normal. degradación de tejido y células endoteliales; formándose
como consecuencia una mezcla de antígenos
Clasificación treponémicos junto con productos degradados del tejido
Las espiroquetas se clasifican en tres géneros: atacado entre ellos escasa cantidad de cardiolipina, lo que
Treponema, Borrelia y Leptospira. De ellos, el género genera una respuesta inmunológica específica sumada a
Treponema es la más importante, por el rol patógeno que una cuota de respuesta “autoinmune” del huésped, contra
produce. Principalmente hablando de la especie esta mezcla antigénica, con la formación de anticuepos
Treponema pallidum. (reaginas) compuesta de IgM e IgG.
Treponema pallidum (subespecie pallidum) Sifilis. De acuerdo a la evolución de la sífilis, esta

enfermedad se puede dividir en varias fases: Primaria,
Es una espiroqueta muy fina, de 0,18 um de secundaria, latencia y terciaria.
diámetro con una longitud de 6- l5 um. Posee de 6 a 14
espiras con un largo de 1um entre espira y espira. Los
extremos son aguzados (afilados). Su estructura incluye,
de adentro hacia afuera: citoplasma, membrana
citoplásmica, una pared de peptidoglucano a la que se
encuentra adosada y enrrollada el endoflagelo que recorre
toda la bacteria, por ensima se encuentra una capa de
periplasto mucopeptidico, una membrana lipoproteica
con lipopolisacarido y una fina capa externa anfolítica.
Fig. N° 166. Estructura del T. pallidum (Fuente: Prats,

2012).
Esquema N° 6. Fases de evolución de la sífilis (Fuente: Sordelli, 2007).
176
a) Sifilis primaria. Entre 10 y 60 días después del enfermedad. Esta etapa pude durar de tres a seis meses.
contacto sexual de contagio, en el sitio de entrada de la En este periodo el tratameinto con penicilina en dosis
treponema, principalmente en alguna de las regiones adecuado, permite su curación. Sin embargo la falta de
mucosas del área del pene, uretra, vagina y labios, cérvix, tratamiento y los controles respectivos conducen al
región ano-rectal, pezones, boca y fauces, se desarrolla desarrollo de las etapas posteriores de la evolución.
una lesión muy característica a la que se llama chancro
duro. Con mucho menos frecuencia, el chancro puede c) Sifilis latente. Individuos no tratados que sufren el
aparecer en alguna región de la piel. estado replicativo y diseminado de la bacteria (primera y
El chancro es generalmente único, pero puede segunda fase), logran un estado de equilibrio en el
darse casos de ser más de uno. Se inicia con una organismo, los signos y síntomas específicos cesan por
induración, que se eleva sobre el resto del tejido sano y se un periodo de varios años. En este periodo existe gran
expande unos milímetros en forma de un círculo más o cantidad de anticuerpos (reaginas) contra cardiolipina
menos regular. Continúa con una ulceración central, (detectables mediante VDRL y/o RPR) y contra
formando una zona excavada, con bordes netos “duros” antígenos treponémicos (esta etapa se llama sífilis
en la periferie. El fondo de la región ulcerada es liso, serológica).
todo el material del área del chancro y fundamentalmente Un 25% de los individuos con sifilis secundaria
los bordes indurados contienen una alta concentración de muestran reversión de la serología y nunca presentan otro
treponemas infecciosos. La evolución en la región central signo de la enfermedad. Un 45% queda con serología
del chancro es la necrosis celular, con liberación de positiva pero no aparece otra complicación. Un 30%
fibrina e infiltración de leucocitos polimorfonucleares. desarrolla manifestaciones terciarias entre 1 y 30 años
Todo el proceso de evolución del chancro es indoloro. después. Esta etapa también llamada sífilis terciaria o
Esta es una de las razones epidemiológicas, que hace que tardía.
en muchas mujeres, la lesión permanezca “invisible” por
su localización intravaginal, siendo que otros síntomas y d) Sifilis terciaria. Es una enfermedad inflamatoria
signos no son suficientes para alertar sobre la infección. crónica en la que prácticamente todos los tejidos están
Otra localización que ´puede pasar inadvertida es la anal. afectados. Una manifestación corriente es la patología
En estos casos la enfermedad avanza a estadios mucho aórtica producto de la vasculitis obliterativa (obstrucción
menos controlables. El otro problema de valor de los vasos). Sin embargo la manifestación más
epidemiológico es que el chancro aparte de indoloro, corriente de la sífilis tardia es la presencia de lesiones
“cura” espontáneamente en tres a cinco semanas o antes, características llamadas gomas sifilíticas relacionada con
a veces, sin dejar cicatrices. El dolor y la inflamación de la vasculitis, estas pueden aparecer en piel, huesos,
los ganglios linfáticos de la región anexa a la localización sistema nervioso central, corazón y vasos. Las lesiones
del chancro son síntomas y signos de la sífilis primaria, gomatosas contienen muy pocos treponemas, excepto en
que también pueden pasar inadvertidos a la percepción las lesiones severas de la corteza cerebral, que conllevan
individual. El chancro, además de tener una localización problemas neurológicos y a veces psiquiátricos. La sífilis
que lo hace pasar inadvertido, puede ser de dimensiones terciaria no es contagiosa. Actualmente esta etapa de la
muy pequeñas y por sus características no llamar la enfermedad es rara, debido a los medios terapéuticos
atención al enfermo. Si no hay tratamiento en esta fase la actuales (antibióticos) con que se cuentan.
sífilis pasara a la segunda fase.
e) Sífilis congénta o connatal. La madre con sífilis no
b) Sifilis secundaria. Entre una y cinco semanas diagnosticada y no tratada, transmite por vía
posterior a la “curación” del chancro, aparecen en el transplancentaria al feto las treponemas, frecuentemente
individuo infectado una erupción de maculas de 3 a 10 en los estadíos iniciales de la enfemedad. Los resultados
mm en las palmas de las manos, los pies y todo el cuerpo, pueden ser los siguientes: 1.- Aborto temprano, 2.-
luego estas lesiones se vuelven papulosas, Muerte al nacer, 3.- Nacido vivo con claros signos y
desarrollándose llagas en áreas genitales y anal, lesiones síntomas de la infección sifilítica, 4.- Nacido vivo
ricas en treponemas, por lo que son altamente infectado sintomático.
contagiosas, el paciente presenta fiebre, dolores de
garganta, cabeza y articulaciones. Cuando este período se Epidemiologia
cumple con todos los síntomas y signos relatados, es un La sífilis es una enfermedad netamente asociada
indicador de la amplia distribución sistémica de la a la sexualidad y no existen reservorios narturales de T.
bacteria. Existen paciente, siempre en el marco de palludum fuera de la especie humana. Es una enfermedad
ausencia de tratamiento, que no manifiestan signos y asociada a una conducta sexual en la que el mayor riesgo
síntomas, en muchos de los casos estos pacientes están es mantener relaciones sexuales (coito vaginal, oral y/o
realmente curados de la enfermedad, pero el destino y el anal) en forma habitual con muchas parejas ocacionales,
estado real de la persistencia de la treponema es un omitiendo o ejerciendo mal uso de condones. A esto se
problema incierto, puede que después de pasado mucho agregan otros factores como la falta de educación,
tiempo (años) puede tener una reactivación de la hacinamiento, bajo o nulo acceso a la atención médica
177
(sobre todo en el área rural), lo que es coincidente con la Se trabaja con muestras obtenías de las lesiones de úlcera
pobreza y malos programas de prevención. o chancro (contienen alta concentración de treponemas).
Salvo datos recientes de Suiza, que indican la La muestra se obtiene con la ayuda de una pipeta pasteur
ausencia de casos autóctonos de sífilis en su territorio, o asa bacteriológica.
ningún país ha logrado todavía la erradicación de la - Eliminar toda escara o costra que cubra la lesión
enfermedad. - Se erociona en el borde de la lesion y se obtiene el flujo
La sífilis puede transmitirse por las siguientes vías: 1.- seroso libre de eritrocitos. Si es una pápula, presionar
contacto sexual, 2.- Via transplacentaria desde la mujer para extraer el flujo. Si se trata de una úlcera cervical o
infectada al feto. 3.- transfusión de sangre. 4.- por vaginal, obtener la muestra con la ayuda de un espéculo y
contacto cutáneo directo con las lesiones infecciosas. un asa bacteriológica eliminando previamente el moco
A pesar del tratamiento antitreponémico exitoso cervical.
y del conocimiento de la epidemiología durante décadas, - Colocar una gota o una asada de la muestra en un
el problema de la sífilis persiste y la incidencia de la portaobjeto, cubrir con un cubreobjeto presionando para
infección está en aumento a nivel mundial. eliminar las burbujas de aire.
- Observar inmediatamente en microscopio de campo
Diagnóstico laboratorial por métodos oscuro, encontrando la imagen con 10X y revisar la
directos muestra con 40X y examinar la estructura sospechosa con
a) Examen directo: Campo oscuro. La detección de aumento 100X.
espiroquetas en campo oscuro permite el diagnóstico Resultado. Treponema pallidum: Tiene forma de
presuntivo de sífilis durante el periodo primario, antes de delicadas espiroquetas en tirabuzón de 6- 14 um, se
que se desarrollen los anticuerpos. Existen pocas observan claras y refringentes en un fondo oscuro, con
espiroquetas contaminantes en los genitales, de modo que separación de espiras 1 – 1,5 um, movimiento lento hacia
la detección de espiroquetas de morfología compatible adelante y atrás, rotación lenta a rápida tirabuzón y
con Treponema pallidum (subespecie pallidum), flexiones suaves.
representa un diagnóstico firme. La prevalencia de Treponemas saprófitas (T. refringens): Espiras flojas, 8-
espiroquetas en la boca requiere mayor precaución (en 20 um, movimiento rápido contorsivo, rotación activa en
este caso mejor es realizar métodos inmunológicos serpentina y flexiones rápidas.
específicos).
Fig.N° 167. Toma de muestra de úlcera genital y observación por método de campo oscuro: T. Pallidum en forma espiral de color claro en un fondo
oscuro (Fuente: Koneman, 2008).
b) Inmunofluorescencia directa. Un método alternativo Diagnóstico por métodos indirectos

más satisfactorio que la microscopia de campo oscuro, es El diagnostico se basa en la determinación de
demostrar la presencia de espiroquetas en las muestras de anticuerpos en muestras serológicas. Estos métodos
lesiones, por inmunofluorescencia. serológicos pueden dividirse en dos grupos: pruebas no
treponémicas (VDRL y RPR) y pruebas treponémicas
Procedimiento. Se trabaja con material obtenido de la (FTA-ABS y MHA-TP).
lesión, la misma se extiende en un portaobjeto, se deja Las pruebas no treponémicas son útiles como
secar, encima de la muestra echar un compuesto estudios de cribado, las pruebas treponémicas deben
constituido de un anticuerpo anti-treponema monoclonal reservarse como estudios confirmatorios cuando una
conjugado con fluoresceína y observar en un microscopio prueba no treponémica es positiva o cuando la sospecha
de fluorescencia. clínica de sífilis es alta, a pesar de que una prueba no
Resultado. Presencia de treponemas pallidum de un treponémica sea no reactiva (sin embargo muchos autores
color amarillo con un fondo negro consideran a VDRL tan específica como la FTA-ABS
cuando la prueba se realiza en las fases primaria y
secundaria de la sífilis (ver cuadro N° 87).
178
Cuadro N°87. Procentaje de positividad en las fases del estado infeccioso de la sífilis.
Prueba Tipo Primario Secundario Terciario
VDRL No treponémico 70% 99% 1%
RPR No treponémico 80% 99% 0%
FTA-ABS Treponémico 85% 100% 98%
MHA-TP Treponémico 65% 100% 95%
VDRL: Venereal Diseases Research laboratory, RPR: regain plasmática rápida,
FTA-ABS: Fluorescent treponemal antibody with absorption,
MHA-TP: Microhemoaglutinción del Treponema pallidum.
Cuadro N° 88. Prueva de VDRL (Laboratorio Winer)

Las “reaginas” (anticuerpos), 1.-En una placa de serología
presentes en individuos colocar 50 ul del suero del Reactivo: presencia de floculación
infectados por T. pallidum se paciente. No reactivo: ausencia de floculación.
detectan en suero por la 2.-Añadir al suero 1 gota del
reacción con un antígeno reactivo de VDRL.
cardiolipina (obtenido de 3.-Agitar horizontalmente la placa
corazón de buey), purificado y a 180 rpm durante 4 minutos.
establizado con lecitina y 4. Observar inmediatamente en
colesterol. Si la muestra microscopio con aumento de 50 a
contiene reagina, ésta se unirá 100X.
al antígeno produciendo una
floculación visible en el
microscopio.
Complementariamente, es conveniente realiza la Tratamiento

prueba semicuantitativa, que consiste en preparar La penicilina benzatinica es eficaz en la sífilis
diluciones del suero con solución fisiológica: 1:2, 1:4, primaria, secundaria y latente. Un tratamiento alternativo
1:8, 116, 1:32 y realizar para cada dilución la prueba en los pacientes con alergia es la doxiciclina (solamente
como se describe anteriormente. En este caso informar la en adultos). O la ceftriaxona (en la sífilis congénita), en
última dilusión que se observe reactiva. mujeres embarazadas con alergia a la penicilina se puede
La prueba da falsos positivos en enfermedades usar eritromicina. Se puede controlar la evolución
que cursan con mucha destrucción de tejido o con positiva del tratamiento realizando VDRL, observando la
compromiso hepático, como el lupus eritematoso reducción de los anticuerpos no espécíficos.
sistémico, hepatitis viral, lepra, malaria, cáncer, Felizmente este microorganismo no ha creado
tuberculosis. Estos casos presentan reacciones con títulos resistencia a la penicilina, debido a que tiene una
bajos y una historia clínica que no coincide con las capacidad de bloquear la incorporación hacia su
características de la sífilis. citoplasma de moléculas informacionales (DNA, RNA)
FTA-ABS, es una prueba de plasmídicos o transposónicos (genes saltarines),
inmunofluorescencia indirecta, en el que el suero del provenientes de otras bacterias resistentes a antibióticos.
paciente se mezcla primero con treponemas no pallidum Esto ha mantenido a que la bacteria sea sensible a los B-
para absorber los anticuerpos no específicos que el suero lactámicos.
pudiera contener. Luego el suero se centrifuga se coloca
una gota del sedimento sobre un portaobjeto que Prevención
previamente se coloco una gota de un líquido seroso La sífilis es fácilmente prevenible, si se
(muestra directa) con T. pallidum otenido del testículo de observan las siguientes conductas:
un conejo. La presencia de los anticuerpos del paciente Abstinencia sexual, monogamia, utilización de condon en
ahora fijados en el T. pallidum se revelan con anticuerpos todo coito ocacional, evitar el coito anal. Lo que también
marcados con fluoresceina. En una reacción positiva evitara contraer SIDA.
aparecen los treponemas fluorescentes en la microscopia Es importante el diagnóstico temprano y el
de fluorescencia. tratamiento adecuado para prevenir esta enfermedad.
179
CAPITULO 18
BACILOS GRAM VARIABLES
GENERO GARDNERELLA
Caracteristicas generales y morfología a 7,2 en medios enriquecidos. Fermentan varios azucares

Los estudios ultraestructurales de G. vaginalis y son catalasa y oxidas negativos.
indican que este microorganimo tiene una pared
grampositiva, pero la capa de peptidoglucado es mucho Clasificación
más delgada que la de otras especies grampositivas como En la actualidad, este género contiene una sola
por ejemplo los estafilococos y otros. El contenido de especie y no es asignada a ninguna familia bacteriana
peptidoglucano de la pared celular de G. vaginalis existente.
constituye apenas el 20% del peso de la pared celular
total. En consecuencia diferentes cepas de esta bacteria Rol patógeno
pueden aparecer como grampositivas, gramnegativas o Las Gardnerellas vaginalis, producen su rol
gramvariables. Son cocobacilos inmóviles, no patógeno merced a los siguientes factores de virulencia o
capsulados, no forman esporas y son anaerobias patogénesis.
facultativas. Desarrollan en 24 – 48 horas, a 37°C, pH 6,9
Cuadro N°89. Factores de virulencia o patogénesis de G. vaginalis.

FACTOR DE MECANISMO DE ACCIÓN
VIRULENCIA O
PATOGÉNESIS
Pili Estructura que le permite adherirse a las células
epiteliales de la mucosa vaginal y uretral
Citolisina (hemolisina) Proteina que produce lisis de eritrocitos
humanos, células epiteliales y PMN.
Vaginosis bacteriana. La vagina normal de la mujer controlado rápidamente con el tratamiento adecuado.
adulta contiene una flora normal compuesta por Para ello, es menester realizar el diagnóstico
numerosas especies bacterianas. La composición de esta microbiológico de certeza, que muchas veces puede
flora varía muy poco durante el embarazo, y solo se realizarse durante la primera consulta de la paciente.
observan pequeñas variaciones durante el ciclo Se llama vaginosis bacteriana por que no hay
menstrual. Las secreciones endocervicales, sumadas a la ningún microorganismo como el único responsable y no
presencia de células epiteliales que descaman de los se observan células inflamatorias de significación.
epitelios y las bacterias de la flora normal conforman una La vaginitis bacteriana se caracteriza
descarga vaginal fisiológica. La descarga de este material clínicamente por secreción maloliente asociada con un
habitualmente pasa desapercibida, aunque puede llegar a aumento importante de la cantidad de G. vaginalis y
ser aparente, lo que se conoce como una leucorrea distintos anaerobios estrictos (p.ej., Mycoplasma y
sintomática o flujo vaginal. La magnitud del flujo vaginal Mobiluncus), que en conjunto se los denomina: complejo
puede verse incrementada durante el embarazo o con el GAM, existiendo como consecuencia una disminución
uso de anticonceptivos orales. Bajo ciertas circunstancias, simultanea de la cantidad de lactobacilos vaginalis.
algunas especies de microorganismo pueden alcanzar el La vaginosis bacteriana es común en mujeres
epitelio vaginal, desplazar parte de la flora normal, que utilizan un dispositivo intrauterino. En el paciente
romper el equilibrio homeostático y crear condiciones masculino, G. vaginalis puede recuperarse de la uretra y
patológicas para la vagina y la vulva. Se distinguen una puede causar enfermedad si alcanza la próstata o la
variedad de circunstancias que pueden crear un desenlace vejiga, especialmente en pacientes que deben someterse a
ecológico local para que tales microorganismos puedan procedimiento urológicos, Asociada con bacterias
progresar, entre las que deben citarse alteraciones anaerobias puede ocasionar balanopostitis (inflamación
hormonales, tratamiento antibiótico, enfermedades que del glande y el prepucio).
comprometen las defensas del huésped (como diabetes),
utilización de ciertas jaleas espermaticidas, presencia de Patogénesis. Los cambios clave que caracterizan a esta
cuerpos extraños en la vagina, falta de higiene, entre enfermedad son la disminución de la acidez de la vagina
otras causas. En tales circunstancias se observa un franco (aumento del pH de la secreción vaginal), alteración
aumento de la leucorrea e inflamación local, lo que manifiesta de la flora normal y aparición de las células
constituye un síndrome definido como vulvovaginitis. Se “clue”. Estas son células epiteliales planas poligonales
trata de un sindrome muy común que puede ser recubiertas de gran cantidad de G. vaginalis en su forma
180
de pequeños cocobacilos que cubren los bordes y en Ademas estos microorganismos no solo se adhieren si no
general toda la superficie de la célula epitelial. que penetran en el citoplasma de las células epiteliales de
Normalmente no se observan signos de inflamación, a la vagina y de la uretra masculina. Por este hecho los
menos que existan una infección sobrecargada caudada investigadores Villegas y cols., sugirieron que la
por otro microorganismo. colonización asintomática del aparato genital masculino
Las G. vaginalis juntamente con las demás inferior por G. vaginalis puede tener cierta relevancia en
bacterias anaerobias colonizadoras, para nutrirse, relacion con el papel del compañero masculino en la
descarboxilan aminoácidos presentes en el medio “recolonización” (“reinfección”) de la vagina.
produciendo la liberación de aminas: putrecina,
cadaverina y otros, que dan un fuerte olor ha pescado al Diagnostico de laboratorio
flujo vaginal. a) Examen directo. Se trabaja con muestras de secreción
La vaginosis bacteriana se caracteriza por la vaginal o uretral en el caso de los varones. Realizar la
aparición de un flujo vaginal blanco, con presencia de tinción de Gram, se observan cocobacilos gramvariables
pequeñas burbujas y con un fuerte olor a pescado. Para abundantes. Estos bacilos generalmente se encuentran
muchas pacientes, el olor de la descarga es la causa de la adheridos en gran cantidad sobre el borde y superficie de
consulta, antes que el flujo en si mismo, que muchas las células epiteliales, por lo que se denominan “células
veces es leve. Aún más, la mitad de las pacientes clave”. El test de aminas es positivo, la presencia de
infectadas son asintomáticas. abundantes células epiteliales con escasos o mederados
leucocitos.
Epidemiología
La vaginosis bacteriana causada por G.
vaginalis, es una patología de alta prevalencia en mujeres
en edad gestacional. A esta enfermedad se la denomina
vaginosis en vez de vaginitis debido a que se caracteriza
por la ausencia de una franca reacción inflamatoria. Se ha
descripto que la mujer embarazada que sufre esta
patología tiene un riesgo siete veces mayor que la mujer
sana de tener un parto prematuro o de sufrir otras
complicaciones.
Utilizando medio semiselectivos, G. vaginalis Fig.N° 168. Células epiteliales en los que se encuentran adheridas
puede hallarse en el 14 – 70% de las mujeres sin cocobacilos grampositivos o gramvariables, se denominan “células
vaginosis bacteriana. Entre el 93% y el 100% de las clave” (Fuente: Prats, 2012).
mujeres infectadas tienen una colonización abundante de
G. vaginalis. G. vaginalis, ha sido también aislada de b) Cultivo.- El medio de cultivo que básicamente se
muestras rectales del 56% de 148 mujeres con vaginosis utiliza es el CNA, es un agar sangre de carnero al 5% con
bacteriana. Este último dato sugiere que G. vaginalis no el aditamento de colestinina, acido nalidixico, luego de
se transmite sexualmente, sino que es probable que 24 – 72 horas de incubación se observan colonias
colonice la vagina por vía endógena desde el tubo pequeñas grisaseas con ligero B-hemólisis.
digestivo. Por otra parte tambien se encontró G. vaginalis
en el 50% de las muestras de semen de los varones. c) Pruebas bioquímicas:
Bacteria Catalasa Oxidasa Hemólisis Test de aminas Presencia de
ligera en CNA células clave
G. vaginalis - - + + +
Tratamiento
Las cepas de G. vaginalis, por lo general son Prevención
sensibles a penicilina, ampicilina, eritromicina,
clindamicina, vancomicina, metronidazol. Esta última No existen medidas realmente efectivas para
droga es el fármaco de elección para el tratameinto de las prevenir la enfermedad. El tratamiento preventivo de las
vaginosis bacteriana, ya que no afecta a los lactobacilos parejas de las mujeres que padecen la enfermedad, no
que logran recolonizar la vagina. previene la recurrencia de la misma.
181
CAPITULO 19
BACTERIAS INTRACELULARES Y CARENTES DE
PARED BACTERIANA
GENERO CHLAMYDIA
Características generales y morfología huésped a un extremo, son visibles con la tinción de lugol
Estos microorganismos son párasitos observándose de color azul.
intracelulares obligados, que en principio fueron
confundidos con virus grandes que podían atravesar las
bujías (filtros) de esterilización y por no poder ser
cultivadas en medios convencionales bacteriológicos, se
nutren y se dividen unicamente dentro el citoplasma de la
célula parasitada del huésped. Se las considera bacterias
gramnegativas, porque presentan una pared celular Fig.N° 169. Cuerpo elemental (izq), cuerpo reticulado (der). (Fuente:
semejante a los gramnegativos, con la diferencia de que Basualdo, 2006).
las Chlamydiales carecen de peptidoglucano en su pared,
y que no le permiten teñirse claramente con la tinción de El genoma de este microorganismo es apenas
Gram. una cuarta parte del genoma de una enterobacteria y es
Las chlamydias, son bacterias pequeñas, uno de los más pequeños entre las células procariotas. Es
redondeadas, que experimentan una serie de cambios metabólicamente deficiente por lo que utilizan el ATP de
morfológicos durante su ciclo de replicación. Las dos la célula huésped para su actividad.
formas más comunes en que se presentan las clamidias
son los cuerpos elementales (CE) y los cuerpos Clasificación
reticulares (CR). El cuerpo elemental es la forma o Las principales especies del género Chlamydia
unidad infectante y tiene la capacidad de sobrevivir fuera son: Chlamydia trachomatis, C. psittaci y C.
de las células del huésped. Es un cuerpo denso, esférico, pneumoniae. C. trachomatis, tiene 15 serovariedades
de 0, 2 a 0,4 um de diámetro, de pared similar al de los (L1,L2, L3, A, B, C, D,E, F, G H, y K)
gramnegativos con la diferencia anotada anteriomente, en
su lugar presenta un elevado contenido de proteínas,
entre las que se distingue las proteínas mayores de la
Chlamydia trachomatis
membrana externa (MOMP), que cumplen el papel
estructural semejante del peptidoglucano (proporciona Patogenia. Para establecerse la infección, las clamidias
rigidez y protección de lisis osmótica a la bacteria). El en su forma de cuerpos elementales se adhieren a las
cuerpo reticulado tiene un diámetro de 0,5 a 0,8 um de células del huésped, inducen su internalización, impiden
diámetro, tiene una localización intracelular y constituye la fusión de los lisosomas con la vacuola endocítica,
la forma de reproducción de las chlamydias. Durante su dicha vacuola contienen cuerpos elementales que luego
formación, los cuerpos reticulados acumulan a su se transforman en cuerpos reticulados, estos se replican
alrededor gran cantidad de material rico en glucógeno, por fisión binaria y posteriormente se, retransforman en
llamándose en conjunto cuerpos de inclusión, que a cuerpos elementales y en esta forma escapan de la célula
medida que crecen desplazan al núcleo de la célula huésped, al tiempo que eluden los mecanismos de
defensa del huésped.
182
Fig.N° 170. Ciclo replicativo de C. Trachomatis (Fuente: Struthers, 2005).
Este proceso produce una reacción inflamatoria,

con la movilización de PMN, linfocitos y macrófagos y b) Conjuntivitis de inclusión. Es una infección aguda de
la concentración de citoquinas proinflamatorias, la conjuntiva que sufren frecuentemente lo adultos
produciendo diferentes patologías de acuerdo al tejido causada por serotipos (D – K) por contagio a partir de
infectado, tales como uretritis no gonocócica en el secreciones genitales contaminadas.
hombre, infecciónes del tracto genital femenino, tracoma,
conjuntivitis de inclusión y linfogranuloma venéreo. c) Conjuntivitis del recién nacido. Se produce en
neonatos, el pasaje por el canal del parto de la madre
a) Tracoma. La enfermedad es muy frecuente en los infectada, puede ocacionar dentro de las dos primeras
países pobres de África, Medio Oriente y la India. El semanas de vida el cuadro de oftalmia neonatorum o
tracoma, es una de las causas mundiales más importantes conjuntivitis del recién nacido; también puede
de ceguera permanente que puede ser prevenida. Se presentarse produciendo infecciones de la vías
estima que la prevalencia de tracoma es de 500 millones respiratorias altas y bajas.
de enfermos, con 9 millones de ellos que sufren ceguera
total permanente (causada por serotipos A, B y C). El d) Uretritis y cervicitis. C. trachomatis (serotipos D-K),
tracoma se adquiere usualmente en la infancia inician la infección a través de abrasiones diminutas (tras
(frecuentemente niños menores de 2 años) por contagio el coito) existentes en la superficie mucosa, en forma de
de la madre u otros contactos próximos del mismo nucleo cuerpos elementales (CE) metabólicamente inertes que se
habitacional (por manos contaminadas). La enfermedad adhieren al epitelio y estimulan su captación por las
es una queratoconjuntivitis folicular crónica, que células del huésped. Los CE se unen a receptores
comienza usualmente en forma abrupta con inflamación existentes en las células epiteliales cilíndricas del cérvix
de la conjuntiva. Esta inflamación progresa y al cabo de y se introducen en ellas. Los CE intracelulares
unas semanas se observa la formación de folículos permanecen en el interior de una vacuola elaborada por la
necróticos blando bajo la superficie de la conjuntiva. La célula huésped y denominada inclusión citoplasmática, se
enfermedad puede curar espontáneamente sin dejar puede observar con la tinción de Giemsa o en el frotis
mayores secuelas. La persistencia de las chlamydias y la evaluado mediante fluorescencia directa, donde se
inflamanción crónica que resulta de la presencia de la diferencian con formación de cuerpos reticulares (CR)
bacteria conducen a una vascularización progresiva de la metabólicamente activos. Los CR se multiplican
córnea y un proceso de cicatrización que produce mediante fision binaria y, al cabo de 8 - 12 ciclos de
deformaciones de la conjuntiva y córnea que pueden multiplicación, se reorganizan para transformarse en CE.
llevar a la ceguera permanente, lo que ocurre al cabo de A las 30- 84 horas de la infección, la célula huésped
15 a 20 años de la primera infección. Este proceso se ve elimina abundantes CE e inicia un nuevo ciclo de
agravado por la sobreinfección con otras bacterias. infección.
183
Las lesiones genitales primarias que aparecen en la trachomatis puede causar uretritis y epididimitis en el
infección por chlamydias se deben a la destrucción de las hombre y cervicitis, salpingitis en la mujer. Además es
células epiteliales cilíndricas durante la fase aguda, con causa de linfogranuloma venéreo. Las infecciones del
liberación de citocinas proinflamatorias que inducen tracto genital son más prevanlente en jóvenes adultos, en
quimiotaxis de neutrófilos y células mononucleares. En individuos de bajo nivel social y en individuos que
primer lugar aparecen las células de la inflamacion aguda mantienen relaciones sexulaes promiscuas. Los varones
(leucocitos polimorfonucleares) y después de la son portadores asintomáticos en un 25%. La edad
inflamación crónica (macrófagos y linfocitos), y se inicia temprana, cuando se realiza el primer coito, las parejas
una respuesta humoral ineficaz con anticuerpos. La sexuales múltiples, el uso de dispositivos intrauterinos,
presencia de Interferón g, puede inducir un estado de son algunos de los factores que inciden en estas
enfermedad persistente en que los CR siguen creciendo, patologías.
aunque con mayor lentitud, Se producen necrosis tisular e
infiltración posterior por agregados de células Chlamydia psittaci
mononucleares rodados por células endoteliales. C. psittaci, es el agente etiológico de la
La extensión en dirección ascendente de las Psitacosis, una enfermedad zoonótica que se adquiere por
chlamydias desde el endocérvix hasta el endometrio y la inhalación de secreciones respiratorias a partir del
endosálpinx depende de numerosos factores endógenos y enfermo o de polvo de deyecciones secas de aves
exógenos (p.ej., el efecto de los estrógenos sobre el moco infectadas (loros, cotorras y otras aves). Afecta a los
cervical: fluidez, la unión de los microorganismos a los individuos que esta en contacto con estos animales y sus
espermatozoides con movimientos ascendentes hasta las heces. La enfermedad afecta al tracto respiratorio bajo,
trompas de falopio, la viginosis bacteriana, el dispositivo que se presenta con fiebre, malestar general, cefalea,
intrauterino). Al llegar al tracto reproductor superior, C. mialgias y tos seca luego de un período de incubacioón
trachomatis infecta las células epiteliasles cilíndricas de de 7 a 15 días. La mortalidad de la infección sin
las trompas de Falopio, pero causa pocos daños por tratamiento es de 20 al 40% mientras que con el
efecto directo (las chlamydias no producen toxinas). Los tratamiento adecuado, disminuye al 1%. El diagnostico se
síntomas sistémicos son los transtornos inflamatorios realiza por serología: debe demostrarse una
progresivamente crónicos que causa lesiones en el útero, cuadruplicación de los anticuerpos fijadores de
trompas de Falopio y estructuras pélvicas adyacentes, que complemento dirigidos contra el antígeno. En el cultivo
son frecuentemente causa de esterilidad. Este cuadro se recomienda estricto bioseguridad debido al riesgo de
generalmente se produce por algunos factores de riesgo contaminación e infección personal.
como la promiscuidad sexual, edad, higiene, falta de
educación sexual, etc. Chlamydia pneumoniae
Agente etiológico de neumonía. Se estima que al
e) Linfogranuloma venéreo. Causado por diferentes menos el 10% de los casos de neumonía intra y
serotipos (L1, L2, L3), es una enfermedad de transmisión extrahospitalario es causada por C. pneumoniae. La
sexual, que se presenta con significativa incidencia en enfermedad la sufren individuos de todas las edades, a
Sudamérica, Asia y Africa. Es una enfermedad de excepción de niños menores de 5 años de edad en países
manifestación local y sistémica. Se presenta en tres fases: tropicales. Se transmite entre humanos a través de
fase primaria aparición de una lesión transitoria de aerosoles infectantes. Su periodo de incubación parece
aspecto vesicular o ulceroso, en la puerta de entrada de la prolongado y practicamente todos han padecido la
bacteria al huésped. La fase secundaria se caracteriza por enfermedad y reinfecciones durante el curso de sus vidas.
una linfadenopatia supurativa, que involucra a los La infección aparece como una faringitis o una
ganglios de la región cerca a la lesión primaria. Durante enfermedad del tracto respiratorio inferior, El diagnóstico
esta etapa aparecen síntomas generalizados como fiebre, se realiza mediante la microinmunoflurescencia, cultivo y
escalofríos, cefalea, mialgias u artralgias, entre otros. Los PCR, ELISA con determinación de IgG para la fase
ganglios afectados generalmente son los inguinales y se aguda e IgA específica para la crónica.
producen fistulas que supuran. La fase tardía se relaciona
con cambios fibróticos y anormalidades en el drenaje
linfático, que conducen a alteraciones funcionales Diagnostico de laboratorio (Clamydia
localizadas. trachomatis)
a) Examen directo. Las muestras con las que se trabaja
son obtenidas por raspado con hisopo de la conjuntiva
Epidemiología ocular, de la uretra (introducir 3 a 5 cm dentro la uretra) y
Las estadísticas muestran que a nivel mundial C. cérvix, mantener durante 10 a 20 segundo y sacar con un
trachomatis es la causa más frencuente de enfermedad de ligero giro del hisopo. Con ellas realizar Tinción de Gram
transmisión sexual. El espectro clínico de las solo para descartar Neisseria gonorrhoeae que se
enfermedades de transmisión sexual causadas por C. encuentra en leucocitos en forma intracelular.
trachomatis es similar al de Neisseria gonorrhoeae. C.
184
b) Cultivo. Se cultivan las muestras sobre células, la más M.orale, M. hominis, M. genitalium, M bucale. La
utilizada es Mc Coy (fibroblastos de ratón), entre las 48 y primera es la especie frecuentemente aislada en
72 horas ya se puede observar los cuerpos de inclusion infecciones respiratorias.
citoplasmáticas en dichas células cultivadas, en los cuales
pueden observarse el glucógeno de estas bacterias al Mycoplasma pneumoniae
colorealas con yodo (inclusiones de color azul). Para una Rol patógeno
mejor observación de estas inclusiones pertenecientes a Las párticulas de aerosol menores de 3 a 5 um
C. trachomantis se tiñen las células con anticuerpos pueden atravesar las vías respiratorias superiores y
monoclonales conjugados con fluoresceína contra una depositarse en el tracto respiratorio inferior. Los
proteína de la membrana (MOMP) de C. trachomatis, microorganismos presentan ciertas proteínas en su
observándose al microscopio con fluorescencia células membrana bacteriana que actuan como adhesinas, que se
con inclusiones de color verde brillante. adhieren a moléculas de glucoproteinas (receptores) de
las células ciliadas del epitelio respiratorio, en ellas los
microorganismos elaboran peróxido de hidrógeno
citotóxico, causando la desestructuración celular de la
mucosa respiratoria e inhibición del movimiento ciliar
con la consiguente tos prolongada de la enfermedad.
La enfermedad tiene un periodo de incubación
de 1 a 3 semanas y una presentación clínica muy
Fig. N° 171. Observación intracelular de C. trachomatis con
Inmunofluorescencia (Fuente: Prats, 2012). variable, desde una infección asintomática a una
faringitis, una traqueobronquitis o una neumonía
Tambien dichas células pueden teñirse con generalmente benigna que se produce en alrededor del
giemsa para observar las inclusiones intracelulares. Para 10% de los casos de infección (en la radiografía de torax
poder realizar el diagnostico serológico debe se observan infiltración parcheada bilateral en los
demostrarse la presencia de IgM específica. En la pulmones). Se acompaña de tos no productiva y
actualidad se considera que la determinación de regiones febrícula. La neumonía por M pneumoniae se ha
específicas del genoma de Chlamydia por amplificación denominado neumonía atípica, porque presenta
(PCR) es más sensible y más rápido que el aislamiento en características clínicas que la diferencian de la neumonía
cultivo celular que, además de ser costoso, requiere un neumocócica o típica: en particular su curso benigno y su
laboratorio adecuado y personal entrenado en cultivo de buen pronóstico. La tos seca puede persistir largo tiempo.
tejidos. En jóvenes se sexo masculino puede producir erupciones
Tratamiento cutáneas en las mucosas y piel.
Los antibiótico más usados para el tratamiento Epidemiología

de las infecciones por C. trachomatis son: tetraciclina, M. pneumoniae es una causa frecuente de
eritromicina, azitromicina, son resistentes a los infección aguda de los tractos respiratorio superior e
aminoglucócidos y vancomicina. inferior de los niños y adultos jóvenes, y el responsable
del 15 - 20% de las infecciones del tracto respiratorio
Prevención inferior de los adultos adquiridos en el medio
Uso de preservativos, relación monógama, extrahospitalario. Estas infeccioes aparecen
tratamiento de todos los contactos del paciente y esporádicamente a lo largo de todo el año y la forma
mantener buenos hábitos de higiene. principal de contagio es la transmisión de persona a
persona por la inhalación de partículas en aerosol o por el
contacto con las secreciones respiratorias de personas
GENERO MYCOPLASMA infectadas. Las infecciones adquiridas en el hogar se
deben a menudo al contacto con hermanos o niños
Caracteristicas generales y morfología infectados. El grupo de mayor riego es el constituido por
El género micoplasmas está costituido por las personas de 5 a 20 años. Los brotes son frecuentes
bacterias más pequeñas (0,2 - 2 um), carecen de pared entre los adultos jóvenes, especialmente en escuelas,
(peptidoglucano), están envueltas por una membrana colegios, centros de trabajo, campamentos militares
plasmática rica en esteroles, son muy pleomóricos, donde se encuentren hacinados.
presentando formas irregulares tanto cocoides como
bacilares. No se tiñen con la tinción de Gram.
Clasificación Diagnóstico de laboratorio

Las especies de micoplasma relacionados con Las muestas con las que se trabajan en el
infecciones en el hombre son: Mycoplasma pneumoniae, diagnóstico de estas infecciones son: hisopados
185
faríngeos, esputo, secreciones bronquiales, lavados

bronco-alveolares.
a) Examen directo, la tinción de Gram no es útil para su

visulización, ya que la ausencia de pared no retiene los
colorantes de la tinción.
b) Cultivo, Su cultivo es algo difícil se requiere medios

especiales que contengan glucosa, arginina, urea esteroles
y otros compuestos (agar SP-4). El desarrollo es lento 1 a
Fig. N° 172. Cocobacilos de Rickettsia intracelulares (Fuente: Nath,
2 semanas en aerobiosis. Las colonias son pequeñas hasta 2007).
100 um de diámetro que solo pueden ser visualizadas con
lupa o microscopio a bajo aumento.
Clasificación
El diagnóstico de laboratorio de elección se realiza El género rickettsia está conformado por varias
por serología: Fijacion de complemento, un incremento especies: Rickettsia prowazekii, R. rickettsii, R. akari, R.
de 4 veces en el título de aticuerpos IgG durante el Typhi y otros.
transcurso de la enfermedad (1:128 o mayor), permite el
diagnóstico de enfermedad activa por M pneumoniae. Epidemiología
La mayoría de las Rickettsias tienen reservorios
Tratamiento animales en la naturaleza (roedores, perros, hombre, etc),
La neumonía atípica causada por M. y se transmiten por medio de insectos vectores. Las
pneumoniae suele tratarse con tetraciclina o eritromicina. especies con mayor importancia médica se dividen en dos
Los antibióticos que inhiben la síntesis de la pared como grandes grupos, basados en los síndromes que producen y
los B-láctamicos son ineficaces por que esta bacteria el insecto vector. Uno es el grupo tífico, en donde se
carece de pared. Aunque el microorganismo aún puede descaca Rickettsia prowazekii, es el agente etiológico del
estar presente en las vías respiratorias altas durante el tifus epidémico. El otro es el grupo de la fiebre
tratamiento y después de éste, las manifestaciones manchada, que incluye a R. rickettsii, el agente etiológico
clínicas de infección por lo general mejoran y los de la fiebre púrpura de las montañas rocosas.
infiltrados observados en el radiografía de torax suelen
desaparecer durante el tratamiento. Dada la dificultad de Rickettsia prowazekii
cultivar a este microorganismo y su lento desarrollo, no
se recomienda realizar antibiograma. Ya que se conoce Rol patógeno:
que en general son sensibles también a las quinolonas y Causante del tifus epidémico, enfermedad aguda
otros macrólidos. transmitida por el piojo del cuerpo (Pediculus humanus).
La enfermedad apareció en épocas de guerra, hambre,
Prevención pobreza, desnutrición, hacinamiento, condiciones
No hay ninguna vacuna para prevenir el favorables para su transmisión (hombre-piojo-hombre).
contagio de persona a persona de esta enfermedad La cadena de infección del tifus epidémico comienza con
transmisible. la circulación de la bacteria en la sangre de un individuo
durante la etapa aguda febril de la enfermedad. El piojo
se infecta al succionar la sangre del enfermo y al cabo de
5 a 10 días de incubación, la bacteria aparece en grandes
GENERO RICKETTSIAS números en las heces del piojo. Las Rickettsias
contenidas en las heces penetran a través de las lesiones
Caracteristicas generales y morfología cutáneas provocadas no tanto por la mordedura del
Las rickettsias son un grupo de bacterias ectoparásito, sino, por el rascado y abrasión de la zona
pequeñas de 0,3 a 2 um que comparten un conjunto de afectada.
características: poseen una estructura de pared semejante Las Rickettsias contenidas en las heces secas del
al de las bacterias gramnegativas, formas cocobacilares, piojo también pueden encontrar una puerta de entrada en
son parásitos obligados de células eucariotas, por lo que las mucosas oculares y el tracto respiratorio superior. En
son incapaces de desarrollar vida libre y se transmiten ambos casos el ciclo epidemiológico se completa, el
por artrópodos (pulgas, piojos, garrapatas o ácaros). paciente se infecta y la enfermedad clínica comienza
entre 1 y 2 semanas después de la penetración de las
Rickettsias. Los piojos mueren entre 1 y 3 semanas
después de ser infectadas por las Rickettsias, y no
transmiten la infección transováricamente a su progenie.
Las Rickettsias una vez que ingresan a la piel
infectan células del endotelio vacular por endocitosis,
186
escapan del fagosoma al secretar fosfolipasa de superficie de plasma, producen fallo orgánico, encefalitis, colapso
que debilita la membrana del fagosoma y se rompe; por vascular y fallo renal y/o cardíaca.
lo que se multiplican en el citoplasma de la célula
endotelial produciendo la lisis de dicha célula y Diagnóstico de laboratorio
parasitosis de otra célula endotelial diseminandose así a a) Examen directo.- Las muestas con las que se tabajan
través de la vasculatura; produciendo una vaculitis y son biopsias de lesiones periféricas, la tinción de Gram
trombosis con obstrucción de pequeños vasos sanguíneos tiñe muy levemente por tener poco peptidoglucano, se
y posterior derrame capilar en la piel de todo el cuerpo, prefiere la tinción con giemsa. Las Rickettsias se
produciendo máculas eritematosas, petequiales (manchas observan abundantes en en el interior de la célula
hemorrágicas), acompañadas de cefalea, fiebre, parasitada.
escalofríos, vómitos y dolor muscular.
RECUADRO N° 13. REFERENCIA HISTORICA: b) Cultivo.- No se recomienda el aislamiento en cultivo
En 1812 Napoleó al mando de 500.000 soldados con el de las Rickettsias debido a su alta infectividad y riesgo de
propósito de invadir Rusia, llegaron a los alrededores de dicha infección para el personal de laboratorio (se cultiva en
ciudad, cansados, hambrientos y muchos de ellos enfermos con
fiebre, escalofríos, vómitos, dolor muscular y erupsiones en la
laboratorios de referencia con alta bioseguridad). Un
piel , tubieron que acampar en chozas pobres y llenas de método recomendable de diagnóstico es la prueba de
insectos antes del ataque final. A los pocos días los enfermos se aglutinación de látex para rickettsia.
multiplicaron, tanto que diezmaron a gran parte de los soldados,
obligándoles a una retirada forzosa, siendo hostigados y Tratamiento
perseguidos por los rusos. Por este hecho, se habla de que a El antibiótico de elección es la doxiciclina,
Napoleón no lo derrotó la estrategia de algún iluminado general puede también utilizarse la tetraciclina. El cloranfenicol
ruso, sino ni, más ni menos que una Rickettsia.
es la alternativa para los niños menores de 8 años y las
mujeres gestantes.
Rickettsia rickettsii
Las Rickettsias son inoculadas directamente en Prevención
la piel mediante la picadura de la garrapata (generos No existen vacunas disponibles. Las medidas
Dermocentor y Amblyomma), que son sus reservorios y preventivas se basan en evitar la picadura de garrapatas y
vectores. R. rickettsii no mata al artrópodo vector, por lo la eliminación de los piojos, control de los perros
que este pasa las bacterias de generación en generación parasitados.
por transmisión transovárica (de una garrapata a sus
crias). El periodo de incubación es de 2 días a 2 semanas.
El rol patógeno es parecida al de R. prowazekii. La
hipotensión y la hipoproteinemia causadas por la perdida
187
CAPUTULO 20
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
Definición
El laboratorio es un conjunto ordenado de salas c) Piso.- Lavable, preferentemente de cerámica de color
o ambientes asentados sobre una infraestructura y claro con un declive central para el desague, que facilite
dotados de un equipamiento mínimo que nos permite la limpieza con agua.
cumplir una adecuada atención al paciente. Está
constituido por dos componentes: el estructural y el d) Techo.- Revocado con estuco, pintado de color
funcional. blanco.
Componente estructural de un laboratorio e) Paredes.- Revocado con estuco, pintadas

Se refiere a las características de cada una de los preferentemente de color blanco o tonos claros, con
ambientes y su distribución. Dentro los primeros nos pintura lavable, además de contar con azulejos o
referiremos a su dimensión, tipo de piso, paredes, techo, cerámica blancos o claros, colocados desde la base hasta
puertas, mesones, iluminación, instalación eléctrica y 1,5 m de altura aproximadamente, lo que facilitará
otros, en lo referente a la distribución, consideraremos el también su lavado.
área central y el periférico.
Cabe hacer notar que no se pretende dar f) Energía eléctrica.- El que corresponde al sistema
especificaciones para un laboratorio grande, básico de administración domiciliaria (institucional) de
multidiscipinario o de investigación, sino tan solo, 220 de voltaje.
algunas características elementales de un laboratorio de
microbiología común, perteneciente a un hospital de g) Iluminación.- Tanto natural, como artificial, con
segundo a tercer nivel. Los requisitos mínimos de ventanas amplias y lámparas de neón respectivamente.
construcción que se toman en cuenta para este tipo de
servicios, son la ubicación, calidad de los materiales de h) Lámparas Ultra Violeta.- Que servirán para
construcción, resistencia, hormigón armado, etc. esterilizar el ambiente requerido, mientras no exista
personal humano, generalmente se esteriliza durante la
noche, hasta el día siguiente, pudiendo estar ubicadas al
1.- Caracteristicas de los ambientes o salas ingreso y/o salida del labortorio o como una lámpara
convencional, ubicada al centro del techo.
a) Dimensiones.- Dependerá de su utilidad,
número de pacientes y personal de servicio. Por i) Toma corrientes.- Correctamente identificadas, a la
ejemplo un laboratorio médico periférico (nivel vista del usuario y protegidas los cables
I), anexo a un Centro de Salud podrá limitarse a correspondientes.
un solo ambiente, en cuyo in
b) terior se repartirán las direrentes secciones para j) Alcantarillado.- Componente básico con que debe
su funcionamiento. Este laboratorio tendrá una contar un laboratorio para el uso del agua necesario.
superficie de por lo menos 5 x 6 m2.
k) Lavamanos.- Que deberá contar básicamente con un
RECUADRO N° 14. CURIOSIDADES: grifo, un recipiente, jabón y/o detergentes y toalla.
Otros centros laboratoriales como el CDC (Centro de
Diagnóstico, Control y Prevención de Enfermedades
Infecciosas) de Atlanta, Giorgia – EE.UU., cuenta con miles de l) Fregaderos.- Para el lavado de material diverso del
metros cuadrados y varios pisos y subsuelos. laboratorio.
En cambio el laboratorio tipo que nosotros pretendemos ll) Duchas.- Para la protección en casos de accidentes
armar tendría mayores dimensiones al de nivel I, que con reactivos u otros.
como dijimos dependerá de la necesidad de su uso.
m) Servicio higiénico.- Para el uso del personal, en
b) Puertas.- Las puertas que tienen relación con el algunos casos también para la toma de muestra.
exterior, se recomiendan que sean de madera y los de
ambientes internos del laboratorio, tengan corredizas de n) Sistema de G.L.P.- Gas licuado de petróleo, necesario
vidrio transparente de 1 a 2 cm de grosor y con marcos de para el uso del mechero de Bunsen, con el uso de una
aluminio. garrafa. Mejor si se cuenta con Gas domiciliario.
188
ñ) Ventilación.- Mediante extractores de aire eléctricos con balanza, mechero, hornalla, probetas graduadas,
ubicados en las ventanas o paredes que comuniquen con frascos de Erlenmeyer, morteros, además de los reactivos
el exterior. y medios de cultivo respectivos.
o) Mesones.- De cemento revestidos de azulejo o h) Depósito.- Ambiente donde se guarda material diverso
cerámica de color blanco, con 1,20 m de altura, que del laboratorio.
facilite la limpieza.
Area periférica
2.- Distribución de los ambientes de
laboratorio a) Incinerador.- Ambiente donde se encuentra un equipo
Dependiendo de la infraestructura, la distribución se incinerador que sirve para eliminar desechos biológicos,
realiza en diferentes ambientes bajo el parámetro general muestras biológicas infecciosas, materiales infecciosos
de dos áreas o sistemas, denominados central y como jeringas, hisopos baja lenguas recipientes con
periférico. muestras purulentas, etc. Se halla fuera del área central
precisamente para no contaminar por la presencia de
Área central humo y gases irritantes.
a) Sección informaciones.- Ambiente de recepción al b) Bioterio.- Cuentan los laboratorios de investigación,

paciente, donde se proporcióna información básica sobre ambiente que sirve para la crianza de animales de
los pasos a seguir para la atención al cliente y el cobro laboratorio, como ratones blancos, conejos, hámsters,
económico por los servicios. cobayos, para experimentos y elaborción de sueros.
b) Sala de recepción de muestras.- Es el ambiente c) Sala de conferencias.- El personal de laboratorio

donde ha de llegar en primera instancia el paciente y/o la también puede acceder a la utilizaciónde la sala de
muestra, básicamente aquí vamos a conocer la paciente; conferencias para la capacitación, formación y
es decir, que haremos la recolección de datos actualización de estudiantes y personal profesional,
informativos de una persona (nombre, edad, sexo, mediante cursos, conferencias con temas inherentes al
ocupación, procedencia, domicilio, nombre del médico laboratorio.
tratante, tipo de muestra, solicitud de examen
laboratorial, etc.), a la vez determinaremos el d) Biblioteca.- Ambiente par la lectura o prestación de
procedimiento que se va a practicar con las muestras. libros, textos y revistas actualizadas además de servicio
Esta sala debe contar con el material mínimo para la de internet y correo electrónico.
filiación o registro del paciente como cuadernos, Kardex,
material de escritorio. e) Porteria.- Ambiente que se encuentra al ingreso del
labortorio, pero fuera de éste, donde está el personal que
c) Sala de toma de muestra.- Este es el lugar donde se cuida el laboratorio las 24 horas del día.
practicará la toma de muestra del paciente, para este fín
tendremos todo el material que sea preciso debidamente Componente funcional
esterilizado y/o desinfectado (jeringas, asas
bacteriológicas, hisopos, baja lenguas, espéculos) además 1.- Personal
de una camilla. Constituido por los profesionales que prestan sus
servicios, internos y estudiantes de práctica.
d) Sección procesamiento de muestras.- Ambiente a) Funciones del personal:
separado o lugar del laboratorio donde se realizan los  Otorgar una atención personal al paciente
diferentes procedimientos y análisis de las muestras. Es  Brindar información pertinente del servicio al
restringido para el paciente. paciente
 Realizar los diagnósticos microbiológicos en el
e) Sección microscopia.- Lugar específico del tiempo correspondiente.
laboratorio donde se observa al agente patógeno.  Aplicar normas y manuales de laboratorio
 Realizar control de calidad de los
f) Sala de Esterilización.- Ambiente donde se realiza la procedimientos de laboratorio.
esterilización de los materiales y medios de cultivo, con
el uso de autoclave y estufas de esterilización. b) Vestimenta del personal.- El trabajo en laboratorio
requiere el manejo de bioseguridad con el uso del mandil,
g) Sección de preparación de medios de cultivo.- Lugar pijama, gorro, barbijo y guantes.
del laboratorio donde se preparan los medios de cultivo, En esta parte, cabe recomendar, no llevar las uñas
colorante, reactivos químicos. Para este fin contamos crecidas, pues también se vuelven óptimos depósitos de
189
microbios, Así como está prohibido fumar y comer en el 2.- Manejo de normas
laboratorio. Lo que nunca deben olvidarse es lavarse la Todo el personal esta regido a las normas,
manos con jaboncillo desinfectante, antes y después de reglamentos y manuales de funciones institucionales, que
cada trabajo de laboratorio. precautelen el buen funcionamiento del laboratorio,
buscando el mejor servicio a la población.
190
CAPITULO 21
EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS DEL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA
Definición k) Baño Maria para bacteriología.- Cámara parecida al

Conjunto de aparatos, instrumentos, utensilios y baño maria común, solo que éste proporciona calor
sustancias químicas que se utilizan en laboratorio para húmedo o seco, cumple la misma función que la
realizar el diagnostico bacteriológico. incubadora solo que con temperaturas mayores a 37°C.
l) Centrifugadora.- Sirve para separar la parte sólida de

1.- Equipos la líquida en una muestra, por acción de la fuerza
centrífuga y centrípeta (que se dirige al centro),
a) Microscopio óptico y microscopio simple (lupa) obteniéndose dos fases: líquida (sobrenadante) y sólida
instrumentos destinados a la obsevación de (sedimento).
microorganismos y la ampliación de estructuras pequeñas ll) Hornalla o Hornilla eléctrica.- Suministra calor sirve
respectivamente. para la preparación de medios de cultivo.
b) Autoclave.- Aparato de esterilización que funciona a m) Potensiómetro.- Instrumento que sirve para medir el
base de calor húmedo y presión para destruir toda forma pH de una substancia. Utiliza procedimientos químicos.
de vida microbiana contenida en materiales y medios de
cultivo. n) Destilador.- Purificador de agua corriente de grifo,
sirve para obtener agua destilada.
c) Pupinel.- Llamado también Horno de Pasteur, cuyo
principio de esterilización es el calor seco. o) Desionizador.- Aparato complementario al destilador
de agua, con la finalidad de eliminación de iones, cargas
d) Cabina de Rayos Ultra Violeta.- Su acción es eléctricas del agua u otros elementos líquidos.
producir desorden o alteración genética de las bacterias,
produciendo dímeros pirimídicos de timina de
monómeros de ADN; así mismo se produce Ozono (O3) 2.- Material de vidrio
como también peróxido de hidrógeno que funcionan El vidrio doméstico común solo tiene en su
como agentes oxidantes. Se utiliza para esterilizar composición silicatos, como el silicato de calcio, esto le
ambientes físicos, material plástico. proporciona al material tres características: ser
transparentes, sin color y manipulables; pero no son
e) Mechero Bunsen.- Instrumento que esteriliza por resistentes a altas temperaturas y muy quebradizos.
fuego directo. Cuando se agrega la anterior composición ácido bórico se
obtendrá un vidrio de borosilicato de calcio, que aparte
f) Refrigerador.- Identico al doméstico, con un rango de de ser menos quebradizo es: resistente a altas
temperatura entre 2° a 8°C. Sirve para preservar temperaturas, hasta 500°C (termo resistente), resistente a
elementos de uso bacteriológico; no sirve para esterilizar. bajas temperaturas hasta -300°C (crio resistente), no se
modifica el pH de la sustancia que alberga el recipiente,
g) Congelador o Freezer.- Con un rango de temperatura es resistente a los álcalis y ácidos, no se deforma y son
entre -20° a – 40°C y puede alcanzar a -273°C. Su transparentes. Las marcas más comunes son: Pyrex,
utilización es para preservar insumos liofilizados. Kimax, Duran, Cimax, etc.
h) Balanza de precisión.- Para pesar sustancias en a) Vaso precipitado.- Que tiene un grado de variación
cantidades pequeñas (p.ej., medios de cultivo). de +- 5% (que de acuerdo a la capacidad volumpetrica
ese porcentaje varia en el contenido del recipiente).
i) Estufa incubadora.- Proporciona temperatura
permanente e uniforme entre 20° a 37°C para el b) Erlenmeyer.- Con la misma variación que la anterior,
desarrollo de bacterias. sirve para ebullición de líquidos y preparación de medios
de cultivo.
j) Estufa para anaerobios, estufa con dióxido de
carbono.- Posee las mismas funciones que el anterior, c) Matraz o balón.- Caracteristica similar al anterior.
solo que éste sirve para el desarrollo de bacterias Puede tener base plana o esférica
anaerobias.
191
d) Placas Petri.- se utiliza para el desarrollo de cultivos, e) Mechero o lámpara de alcohol.- De metal o vidrio,
posee una tapa y una contratapa. que sirve para producir energía calórica o fuego.
f) Hay materiales resistentes a altas temperaturas como
e) Pipeta Pasteur.- Tienen un extremo distal muy frascos o gradillas que soportan el autoclavado.
delgado, sirve para obtener muestras líquidas de difícil
acceso. h) Baja lenguas.- De madera, plástico o metal, sirve
para presionar la lengua y obtener la muestra
f) Tubos de ensayo.- Para contención de líquidos y faringoamigdalar.
medios de cultivo sólidos, preparación de reactivos y
diversas pruebas bioquímicias. i) Aplicadores.- Varilla de madera para diversos usos.
g) Pipetas graduadas.- están calibradas de 1 a 10 ml, se j) Hisopos.- aplicadores de madera o polietileno con
pueden medir líquidos en gotas o ml. Su extremo punta de algodón o alginato de calcio que sirve par
proximal tiene un estrangulamiento para colocar algodón obtención de muestras y para siembra.
y no aspirar reactivos corrosivos, y su extremo distal es
cónico para la salida del contenido. k) Espátula.- De madera, metal o polietileno, sirve para
transportar sustancias sólidas al pesaje.
h) Pipepetas volumétricas.- Similares a las anteriores
pero poseen un aforo que permiten un margen de error l) Gasa.- Trama de algodón, sirve para filtración,
específico. retención o apósitos.
i) Probetas graduadas.- De vidrio o plástico para medir ll) Papel Kraft, papel madera grueso.- Sirve para
volúmenes de reactivos líquidos. cubrir material a esterilizar.
j) Embudo.- De vidrio o plástico para filtración y m) Papel de aluminio.- Para envoltura de materiales que
traslado de sustancias líquidas a otro recipiente. se van a esterilizar.
k) Espátula de Drigalski.- De vidrio, con un extremo n) Piolín.- Cordon que sirve para amarrar los capuchones
doblado como gancho o triangular, sirve para extender del material a esterilizar.
muestras líquidas en el medio de cultivo.
ñ) Marcadores.- Para codificar los datos del paciente.
l) Portaobjetos.- De vidrio para realizar frotis
o) Asa bacteriológica.- Instrumento que sirve para la
ll)) Cubreobjetos.- De vidrio. Sirve para proteger los siembra por estriado en general. Está formado por un
frotis y preserva la muestra mango de ebonita (aislante del calor) y un hilo de platino
o de aleación de niquel y cromo llamado Nicrom que
3.- Otros materiales de vidrio, plástico, termina en un asa circular.
madera y metal
p) Aguja bacteriológica.- Instrumento que sirve para la
a) Varillas.- de vidrio o plástico sirven para siembra por punción y estriación en general. Está
homogeneizar soluciones. formado por un mango de ebonita (aislante del calor) y
un hilo de platino o de aleación de niquel y cromo
b) Frascos ambar.- Paca contener reactivos que pueden llamado Nicrom que termina en punta.
degradarse con la luz. q) Termómetro.- Mide la temperatura del líquido con el
que se trabaja.
c) Cubetas de Koplin.- De plástico o vidrio, sirven como
cubetas de tinción para portaobjetos. r) Reactivos.- Alcoholes para la preparación de
reactivos, colorantes, desinfectantes, agua destilada,
d) Portaobjetos excavados.- Plástico o vidrio, para solución fisiológica isotónico, Medios de cultivo, discos
realizar la “gota pendiente”. de antibiograma y otros.
s) Papel filtro.- De diverso grado de porosidad para

retener para secar placas teñidas.
192
Fig.N 173. Equipos y materiales de Bacteriología (Fuente: Trigoso, 1992).
193
CAPITULO 22
ESTERILIZACIÓN
Definición
Esterilización es el conjunto de procedimientos 2.- Calor húmedo.- Su fundamento de acción es de
físicos y químicos que destruyen a todas las formas disgregar enlaces no covalentes, como los de hidrógeno
microbianas que se encuentran asentadas en forma que conservan unidas las proteínas en sus estructuras
definitiva o transitoria sobre objetos o productos. secundaria y terciaria de la pared de la célula bacteriana.
Por este procedimiento, mueren más rápidamente los
Esterilización por medios físicos microorganismos, por que el calor se distribuye en forma
Por este método la esterilización se realiza uniforme por todas las partes del recipiente de
utilizando el calor, la filtración, la centrifugación el esterilización. Los métodos mas utilizados son los
ultrasonido, etc. siguientes:
1.- Esterilización por calor. El calor actúa fragmentando a) Ebullición.- Este es el método más elemental dentro el
las membranas citoplásmicas y desnaturalizando las calor húmedo, se basa simplemente en someter a
proteínas bacterianas. La aplicación del calor es el ebullición el material que se desea esterilizar, empero
método más simple para esterilizar a una temperatura de debemos dejar constancia que este es el método más
más de l00ºC., matará a todas las formas vegetativas de ineficaz para destruir microorganismos, ya que a 3.600
las bacterias en 2 o 3 minutos, excepto a los esporas, las msnm., el agua hierve a +- 80ºC., temperatura
que serán destruidas por otros métodos. El calor se divide insuficiente para esterilizar en corto tiempo, pero que
en calor seco y calor húmedo. sometiendo a ebullición más de 15 minutos mueren todas
El calor seco, se clasifica en: fuego directo y aire las bacterias termolábiles y no así las termorresistentes y
cliente. esporas. Se pueden esterilizar utensilios metálicos
(quirúrgicos), de vidrio o plástico termorresistente.
a) Fuego directo.- Uno de los métodos de esterilización
es el denominado flameado, que consiste en someter b) Tindalización.- El procedimiento por este método
directamente a la llama de un mechero a alcohol o consiste en someter el material a tres tiempos de
bunsen, el objeto que se desea esterilizar, como las asas, ebullición de 80ºC., durante 15 minutos cada vez con un
agujas, pinzas, bisturí, etc., todos al rojo vivo. En el intermedio o tiempo de incubación de 18 horas a 37ºC.,
flameado debemos considerar que la llama tiene cuatro durante 3 días sucesivas.
partes, de afuera hacia adentro: a) zona oxidante o de Con este procedimiento básicamente destruimos
combustión completa, b) zona de máximo calor, c) zona bacterias esporulados, pues el primer día nos deshacemos
reductora o combustión incompleta y d) zona fría. La parcialmente de las bacterias vegetativas, en el primer
correcta colocación del asa por ejemplo es entre la zona tiempo de incubación, logramos la germinación de las
oxidante y la de máximo calor, donde se podrá obtener el bacterias esporuladas que son destruidas por la segunda
flameado al rojo vivo. ebullición, y luego de la segunda incubación las restantes
Dentro éste método se encuentra la bacterias que germinaron, serán destruidas por la tercera
incineración, que es el quemado de los materiales ebullición, de esta manera se garantiza la esterilización.
desechables o descartables (que no se pretende recuperar) Básicamente podemos tindalizar, sueros, vitaminas,
ya que la temperatura de los llamados cremadores o productos biológicos, etc.
incineradores oscila entre 800 a 2000°C, lo que reduce a
cenizas el material sometido a su acción. Generalmente c) Pasteurización.- Consiste en someter el producto a
se utiliza para muestras procesadas, ropa contaminada, una temperatura de 64ºC., durante 30 minutos seguida de
cadáveres de animales de experimentación, líquidos un enfriamiento rápido, logramos con este procedimiento
biológicos contaminados o infectados. destruir las formas vegetativas de las bacterias, pero no
las esporas ni las termorresistentes. Este procedimiento,
b) Por el método del aire caliente, se utiliza el horno o se utiliza para eliminar bacterias contaminantes de
estufa que lleva el aire interior a una temperatura de 150 productos alimenticios y otros como la leche, productos
– 190 o 200ºC., por un tiempo de 1 a 2 horas. Ej., horno lácteos, vino, cerveza, sidra, etc.
de Pasteur (pupinel). Son cámara metálicas de doble
cubierta y al centro de éstas se encuentran las d) Autoclave.- El fundamento por este procedimiento se
resistencias. Los materiales que pueden ser sometidos a basa en someter el material a la acción del calor a vapor y
esterilización por este procedimiento son materiales presión. Esteriliza a 121ºC., por un lapso de tiempo de 15
metálicos, de vidrio, porcelana y otros. Tiempo de a 30 minutos a una presión de 1,5 atmosferas. Los
exposición: 160°C = 2 horas, 180°C = 1 hora. materiales que requieren ser autoclavados son mandiles,
194
pijamas, barbijos, material de vidrio, medios de cultivo, por medio de filtros porosos que tienen diámetros
soluciones, etc. inferiores a los que presentan las bacterias de manera que
El autoclave es un aparato generalmente cilíndrico estas se quedan retenidas y el líquido filtrado queda
(vertical u horizontal), en forma de recipiente con tapa. esterilizado. Existen varios tipos de filtros:
En la tapa presenta el manómetro que sirve para medir la Bujías de chamberland, son cilindros huecos con
temperatura y la presión admosférica, y también se diversos grados de porosidad que van desde L1 a L13, el
encuentra la válvula llamada Spita (deja salir el aire número menor corresponde al tamaño de poro de mayor
interno y evita el escape del vapor). El interior del diámetro y los números mayores corresponden a los
autoclave posee una regilla, al centro de ella, se poros de menor diámetro.
encuentra la resistencia en forma circular, asentada en la Filtros de Berkefeld, tienen poros denominados W que
regilla se encuentra el tambor de esterilización (caja corresponden a 3 a 4 micras de diámetro, V=5 a 7 micras
redonda metálica como una olla) en cuya base interna se y N= 8 a 12 micras.
encuentra una lámina de aluminio con orificios llamada
criba funciona como aislante de calor. En la parte 4.- Ultrafiltros.- Es un procedimiento de esterilización
superior del autoclave se encuentran las manijas de que permite separar partículas coloidales de productos
seguridad (sirven para asegurar la tapa) y, en la parte como medios de cultivo, suero, toxinas bacterianas, etc.
inferior se encuentra el sistema de encendido y apagado, Sin el uso del calor para evitar su descomposición.
además del botón de seguridad y control de la
temperatura y presión. Su funcionamiento está basado en 5.- Centrifugación.- Mediante este método se aprovecha
los siguientes procedimientos: la gravedad que se crea a través de un movimiento
 Enchufar el autoclave al terminal de energía circular centrífugo y centrípeto, al que se somete el
eléctrica. producto a esterilizar, en ella las partículas del producto
 Colocar el material a esterilizar dentro el precipitan al fondo del tubo cónico, quedando un líquido
tambor. claro y estéril (sobrenadante) y un sedimento donde
 Tapar el autoclave y asegurar ésta, con las quedan las bacterias.
manijas en forma cruzada
 Dejar abierta la Spita 6.- Ultrasonido.- Son cámaras que utilizan frecuencias
 Encienda el equipo superiores a 15.000 vibraciones por segundo,
 Observe que a medida que va calentando el agua produciendo la desnaturalizar las proteínas y un desorden
y se va transformanado en vapor, empieza a en la arquitectura molecular y como cosecuencia la
abandonar el interior del autoclave, pero sale destrucción de las bacterias. Se puee esterilizar material
también el aire interior (todo esto se manifiesta quirúrgico, de vidrio o plástico.
por la salida de un vapor discontínuo)
7.- Esterilización por flujo laminar.- Son cabinas de
 En el momento que el vapor sale en forma
contínua y junto con gotitas de agua, debemos protección que sirve para otorgar seguridad laboral. En
estas cabinas ingresa el aire no esterilizado y sale aire
cerrar la valvula de Spita.
esterilizado.
 El instante en que la presión sea igual a 1,5
atmósferas y una tempertura de 121°C
8.- Esterilización por radiaciones de Rayos ultra
visualizados en el manómetro, debemos
violeta.- Su fundamento de acción es producir desorden o
controlar 15 minutos.
alteración genética de la célula procariótica, produciendo
 Después de cumplido este tiempo, apagar el
dímeros pirimídicos de timina de monómeros de ADN;
aparato y abrimos lentamente la Spita para el
así mismo se produce Ozono (O3) como también
escape total del vapor y disminuido la presión
Peróxido de Hidrógeno (H2O2) que funcionan como
hasta cero.
agentes oxidantes. Se utilizan en cámaras o en ambientes
 Abrir la tapa desaflojando las manijas en cruz y abiertos. Se utiliza para esterilizar ambientes físicos,
abra lentamente la tapa. como material de plástico. Estos rayos deben tener una
Para certificar que la esterilización se realizó longitud de onda de 2.200 a 2800 A° (Angstron), siendo
adecuadamente (indicador de esterilización), se utilizan la óptima de 2600 A° (260 nm) y como el poder de
unas cintas de color (venta en el comercio), éstas por la penetración por este tipo de longitud de onda es poco,
acción de la temperatura y presión cambian de color. Se entonces se debe esterilizar por un lapso contínuo de 12
colocan dentro el autoclave y se controlan al terminar el horas.
autoclavado, p. ej., papel control de franja color celeste,
luego de esterilizado correcto cambia de color a oscuro.
Esterilización por medios químicos
3.- Filtración.- Es la esterilización de algunas
substancias como la urea, hidratos de carbono, suero, Desinfección. Es el conjunto de procedimientos físicos y
plasma, líquido ascítico, mediante la succión o aspiración químicos destinados a destruir gérmenes patógenos
contenidos en tejidos (piel y mucosas), intrumental
195
médico quirírgico, ambientes de laboratorio, ambientes a) Destrucción o daño del DNA.- Es la capacidad que
de quirófano o ambientes médicos (consultorios), como tienen ciertas sustancias para dañar el DNA de las células
también materila textil (ropa de quirófano, batas, bacterianas contenidas en objetos y sustancias químicas.
mandiles, etc.). b) Desnaturalizan las proteínas.- Actuan fragmentando
los enlaces proteicos inutilizándolas funcionalmente.
Otras definiciones c) Ruptura de la membrana o pared celular, es la
Desinfectante.- Sustancia química, en una concentración capacidad de estas sustancias químicas de concentrarse
generalmente mayor al 3%, utilizada para eliminar o en la superficie de las células bacterianas, alterando las
matar microorgnismos sobre superficies (piel sin propiedades físicas y químicas de la membrana,
solución de continuidad), objetos inanimados (pinzas, impidiendo su función normal, matando e inhibiendo de
tijeras, mesones, pisos, etc.). La aplicación sobre tejidos esta forma a las bacterias.
vivos (piel con solución de continuidad, heridas, úlceras, d) Modificación de la permeabilidad celular.- Por
escoriaciones y mucosas), causa dolor e irritación, siendo destrucción de la pared modifica y se altera la ósmosis
muy tóxicos. Entre los más importantes indical al formol, produciendo la lisis bacteriana.
fenol, DG-6, hipoclorito de sodio, etc.
1.- Destrucción o daño del DNA.- Formol, Sustancia
Antiseptico.- Sustancia química, en una concentración muy tóxica para la piel y mucosas como también durante
menor a 3%, se utiliza para eliminar o matar la inhalación, se expende en forma líquida generalmente
microorganismos, sobre superficies animadas, y tejidos al 40%. Se puede preparar soluciones entre el 5 al 10%
vivos (piel y mucosas), con presencia o no de solución de (formaldehido) para desinfectar ambientes (quirófanos,
continuidad. Como ejemplos de antisépticos mencionar al laboratorio), tanto para pisos como para desinfectar el
alcohol etílico, alcohol yodado al 0,5 o 1%, mercurio aire mediante la emanación de vapores (gases).
cromo, mertiolate, agua oxigenada, etc.
2.- Desnaturalización de proteínas.- a) Fenol. Puro
Séptico o sepsis.- Presencia de microorganismo mata las bacterias pricipalmete por coagulación de sus
patógenos en tejido vivo y superficies inertes. proteínas y lisis celular. Es muy caústico y perjudicial a
los tejidos (irritante), estos se emplean como
Antisepsia.- Es el conjunto de procedimientos físicos desinfectantes en concentraciones mínimas 1 al 3% en
(lavado) y químicos (desinfectantes) que nos llevará al solución acuosa. Se utiliza como desinfectante de piso,
estado de asepsia. paredes, mesones, o inactivar agentes bacterianos de
algunos materiales descartables (aplicadores) o muestras
Asepsia.- Es el estado de ausencia de microorganismos como esputo. Se recomienda usar guantes cuando utiliza
patógenos del tejido vivo o superficies inertes. este producto. La fucsina fenicada por contener fenol en
su composición actua también como bactericida,
Esteril.- Elemento, instrumento, ambiente, o ropa exento fungicida y virucida.
o libre de microorganismos.
b) cresol.- Son más activos que el fenol; a
Germicida.- Sustancia que tiene la propiedad de matar a concentraciones del 1 al 3% se utilizan para desinfectar
cualquier germen en general. pisos de ambientes hospitalarios.
Bacterioestático.- Sustancia que tiene las propiedades de c) Iones de metales pesados.- Nitrato de plata, Es una
inhibir la multiplicación o metabolismo bacteriano, solución bactericida al 1% como solución oftálmica, para
mientras permanesca la sustancia productora; cuando éste prevenir la oftalmia gonocócica en recién nacidos.
se retira, su acción desaparece siendo un proceso
reversible. d) Mercurio Cromo, en solución al 2% tiene uso tópico
como antiséptico leve, pero que gracias a su color rojo
Bactericida.- Sustancia que tiene la propiedad de brillante cuando es utilizado, el efecto psicológico
eliminar a las bacterias o inhibir la multiplicación o proporciona apoyo adicional a sus propiedades
metabolismo bacteriano, si se retira al agente en cuestión, antimicrobianas tenues.
la acción continua, siendo un proceso irreversible.
e) Merthiolate, en una concentración inferior al 1% se
Mecanismos de acción de los agentes utiliza como antiséptico bacterioestático.
quimicos f) Alcohol etílico, El alcohol etílico absoluto (90 –
Se considera en forma general cuatro formas de 99,5%), no es bactericida, pero si lo es al 70% (alcohol
acción para poder eliminar o destruir microorganismos blanco, alcohol medicinal), actúa por coagulación de
mediante desinfectantes y antisépticos. proteínas. Son tóxicos si se utilizan directamente sobre
heridas o mucosas.
196
formado en la degradación del H2O2 por la catalasa

3.- Ruptura de la membrana o paredes celulares.- tisular.
Detergentes, como los jabones comunes y de tocador,
para lograr la antisepsia, el lavado de manos, debe ser e) Tintura de yodo, es un germicida eficaz en una
enérgico y prolongado. concentración al 2%, es el antiséptico más eficaz para la
piel intacta, pero puede ocacionar irritación de la piel en
a) Hexaclorofeno, forma parte de los detergentes y pacientes hipersensibles (si fuera así, limpiar con alcohol
jabones en una concentración de 3% son bacteriostáticos, etílico), en heridas cortantes o superficies quemadas no
eficaces para retardar o prevenir la colonización de se utiliza, porque se precipita el yodo y esa superficie
bacterias en la piel de los recién nacidos, infecciones con cutánea queda tatuada cuando se restablece.
Staphylococcus aureus. Su uso es restringido por la
toxicidad que produce al SNC. f) Alcohol yodado, alcohol etílico (70%) más el yoduro
de potasio forma una solución de alcohol yodado
b) Clorhexidina, anticéptico, contra grampositivos, (alcohol etílico 47% y yodo al 2-3%), es desinfectante y
forma parte de los jabones desinfectantes para las manos antiséptico, se utiliza la piel antes de un inyección.
y endoscopios, también para el lavado de heridas
(Hibiscrub o Hibitane). g) Polivinilpirolidona, esta sustancia más se conoce
como Povidona yodada o yodopovidona, se utiliza como
c) Cloruro de éster alifático de etilaminoetanoil antiséptico cutáneo preoperatorio como desinfectante de
piridonio, conocido como DG.6 o cloruro de piridonio, manos y también para el aseo intimo de la mujer al 0,5%.
es un desinfectante bactericida fungicida, actúa como Es tan eficaz, que elimina a las dos formas evolutivas de
germicida a los 30 segundos, se expende en solución con las bacterias, la vegetativa y la esporulada.
agua destilada al 10% y se utiliza en diluciones al 3%
para desinfectar utensilios de laboratorio y como h) Hipoclorito de sodio, compuesto clorinado,
antisépticos en heridas o superficies intactas del 0,5 - 1%. bactericida de uso doméstico utilizado como blanqueador
(lavandina o lejía) en una concentración entre el 5 – 8%,
d) Peróxido de Hidrógeno (agua oxigenada: H202), es el cual es muy tóxico y corosivo, pero disuelto es muy
un agente oxidante que inactiva a las bacterias oxidando útil para desinfectar material de vidrio, instrumental,
grupos sulfídricos libres. De uso muy común, se expende superficies de mesones, pisos y también desinfectar el
como solución antiséptica y germicida al 3%, para aire par ambientes de quirófano entre el 1 al 3%. El
limpiar heridas y manchas de sangre o material necrótico, hipoclorito es inestable y se disipa con rapidez, la
también para desinfectar lentes de contacto, las burbujas solución debe prepararse a diario.
que se producen al desinfectar heridas son oxígeno
197
CAPITULO 23
PREPARACION DE COLORANTES Y REACTIVOS
Para preparar los colorantes se necesita: probetas 2. Colorantes para tincion de ziehl – Neelsen
graduadas, balanza de precisión, mortero, pilón y
recipientes color caramelo para guardar los colorantes.
1. Colorantes para tinción de Gram

Violeta de genciana o cristal violeta 100 ml Fig. N°. 174. Colorantes de la tinción de Ziehl Neelsen
Cristal violeta……………….. 1 g.
Alcohol de 95°…………….. 20 ml Fucsina fenicada 100 ml
Agua destilada…………….. 80 ml Fucsina básica…….…………………..0,5 g.
Alcohol de 95°………………………..10 ml
Forma de preparar.- Hechar el alcohol a un recipiente Fenol acuoso………………………….5,5 ml
de vidrio, pesar el cristal violeta y mezclar con el alcohol, Agua destilada………………………..84 ml
homogeneizar con una varilla de vidrio y agregar el agua
destilada. Filtrar y guardar en un recipiente color Forma de preparar.- Primero preparar el fenol acuoso
caramelo. al 10% (mezclar 10 g. de fenol cristal en 90 ml de agua
destilada). Luego mezlar la fucsina con el alcohol en un
Lugol 300 ml recipiente aparte, homogeneizar con la varilla de vidrio, y
Yodo metálico………………. 1 g. agregar el agua destilada y el fenol acuoso. Filtrar y
Yoduro de potasio.....……….. 2 g. guardar en un recipiente color caramelo.
Agua destilada……………..300 ml
Alcohol ácido 100 ml
Forma de preparar.- Primero, mezclar el agua destilada Acido clorhídrico………………….. 3 ml
con el yoduro de potasio en un frasco de vidrio, luego Alcohol 95°………………………..97 ml
moler el yodo metálico en un mortero, agregar al yodo Mezclar y guardar.
metálico molido, la mezcla del yoduro de potasio, poco a También se puede utilizar ácido sulfúrico 20 ml más 80
poco, esto, según se va moliendo y diluyendo el yodo ml de alcohol.
metálico en el mortero. La solución, filtrar y guardar en
un recipiente color caramelo. Azul de metileno
Azul de metileno…………………….300 mg
Alcohol acetona 100 ml Alcohol 95°………………………… 20 ml
Alcohol de 95°………………….. 70 ml Agua destilada………………………. 80 ml
Acetona…………………………. 30 ml
Mezclar y guardar en un frasco. Forma de preparar.- Lo mismo que el cristal violeta.
Fucsina básica 100 ml 3. Otros colorantes

Fucsina básica………. .………. 300 mg.
Alcohol 95°……..………………....20 ml
Agua destilada…..……………….. 80 ml Safranina 100 ml
Safranina……….………………….. 1g.
Forma de preparar.- Proceder igual que el preparado Alcohol 95°………………….…... 20 ml
del cristal violeta. Agua destilada…………………… 80 ml
Verde de malaquita 100 ml

Verde de malaquita…………….…300 mg.
Alcohol 95°………………………. 20 ml
Agua destilada……………………. 80 ml
198
CAPITULO 24
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
Definición de medios de cultivo b) Extractos.- Son sustancias nutritivas que se extraen de

Los medios de cultivo son un conjunto de ciertos órganos o tejidos animales o vegetales (p.ej.,
nutrientes, preparados en forma esteril, que sirven para el carne, hígado, cerebro, semillas), por la acción del agua y
desarrollo y multiplicación de las bacterias. Son en estos calor y posteriormente, son concentrados hasta la forma
medios donde se estudian las propiedades de crecimiento, de polvo. Son ricos en proteínas, hidratos de carbono y
actividad bioquímica y acción patógena, para la vitaminas como el extracto de carne (proteínas), extracto
identificación de estos microorganismos. de levadura (vitamina B), extracto de malta (maltosa).
Componentes habituales de los medios de c) Productos biliados.- Como bilis de buey, sales
biliares como desoxicolato de sodio y otros.
cultivo
Basicamente los medios de cultivo pueden tener d) Carbohidrados.- Como la glucosa y otros.
los siguientes componentes que según su finalidad
varían: Peptonas, extractos, productos biliados, e) Colorantes.- Colorantes: actúan como agentes
carbohidratos, productos bioquímicos, colorantes e bacterioestáticos, como inhibidores del crecimiento
indicadores, solidificantes, sales, minerales, vitaminas, bacteriano (se encuentran en medios selectivos). Los
agua, etc. colorantes más comúnmente utilizados son: fucsina
básica, verde brillante, cristal violeta, eosina, azul de
a) Peptonas.- Son sustancias hidrolizables que se metileno.
obtienen por digestión enzimática o química de proteínas
animales o vegetales (soya, carne, gelatina, caseína, etc.). f) Indicadores.- Substancias derivados de sulfontaleina
Las peptonas son muy ricas en péptidos y aminoácidos. que proporcionan color al medio de cultivo, según éstas
sean, ácidas o alcalinas, como ejemplos podemos indicar
los siguientes:
Cuadro N° 91. Grupo de indicadores que se usan en pruebas bioquímicas

INDICADORES EN PH ÁCIDO EN PH ALCALINO
Rojo fenol Amarillo Rojo (p.ej., TSI)
Púrpura de bromo cresol Amarillo Púrpura (p.ej., LIA)
Azul de bromo timol Verde Azul (p.ej., CS)
Verde bromo cresol Amarillo Azul
Púrpura meta cresol Amarillo Púrpura
Azul de bromo fenol Amarillo Azul
Azul de timol Amarillo Azul
Púrpura meta cresol Rojo Amarillo
Fenolftaleina Incoloro Rojo
Rojo neutro Rojo Amarillo
g) Otros colorantes e indicadores.- Tornasol, verde de ebullición, que enfriado a 32°- 40°C., se solidifica en
malaquita, rojo de metilo, rosa de bengala, resazurina. forma de gel estable. El Agar – agar resiste perfectamente
la temperatura de esterilización de 121°C., sin
h) Agentes solidificantes: Agar – agar.- Substancia descomponerse.
hidrofílica de carácter coloidal, procedente de diversas Por su capacidad de retener agua y no perder
especies de algas marinas especialmente del tipo líquido con facilidad, los medios de cultivo pueden
gelidium (G. spiniforme, G, corneum, G. japonicum, conservarse por largo tiempo a 4°C., de temperatura.
etc.). Químicamente el Agar – agar, es un polisacárido
de cadena larga (dependiendo de su tamaño su poder de Acondicionamiento de los medios de cultivo
gelificación). En el laboratorio se emplea para solidificar Todos los medios de cultivo deben estar
los medios de cultivo y facilitar la siembra y desarrollo acondicionados de acuerdo a las exigencias nutricionales
de las bacterias en su superficie. de las bacterias, tomando en cuenta además otros factores
En el comercio se vende en forma granulada o de crecimiento como: oxígeno, concentración salina,
en polvo de color amarillento, inodoro insoluble en agua humedad, pH, temperatura y luz.
fría y alcohol y solo se disuelve a temperatura de
199
a) Oxígeno, de acuerdo al tipo de respiración de la c) Líquidos, no tienen agar en su composición (caldo

bacteria, el medio de cultivo debe estar acondicionado o lactosado).
incubado en aerobiosis o en anaerobiosis.
3.- Finalidad bacteriológica: a) Medios básicos, son
b) Concentración salina.- Es la cantidad de clorudo de medios simples, por que no cuentan con un gran aporte
sodio que requiere el germen para su desarrollo, la nutricional, entre ello podemos mencionar al agua de
mayoría requiere una concentración óptima de 0,4%, peptona, caldo nutritivo, agar de peptona, agar nutritivo,
otras requieren como mínimo un 10% de ClNa, a éstas se etc. Se utilizan para el cultivo primario de
los denomina halófilas y, aquellas que requieren una microorganismos no exigentes nutricionales.
máxima de concentración de 10% de ClNa, se los
denomina halodúricas. b) Medios enriquecidos, son medios de cultivo que en
su composición además de tener medios básicos, tienen
c) Humedad.- Factor necesario para el desarrollo de elementos nutricionales, tales como sangre de cordero,
muchas bacterias, es aportado por la cantidad de agua del conejo, etc., suero, glucosa, líquido ascítico, bilis de
medio de cultivo y el aditamento en el momento de la buey, infusión cerebre corazón, etc., obteniéndose
incubación. diferentes caldos y agares enriquecidos para el desarrollo
de diferentes especies de bacterias exigentes. Estre estos
d) pH.- (concentración de hidrogeniones) El pH más medios están: caldo lactosado, caldo sangre, caldo
utilizado varía entre 6,5 a 7,5 aunque el pH óptimo es de ascítico, caldo bilis Buey, caldo BHI (Brain Heart
7,2. Sin embargo otras bacterias como los del género Infusión), agar sangre, agar chocolate.
Thiooxidans requieren un pH de 2 para desarrollar, otros
en cambio de hasta un pH de 8,5 como el V. cholerae. c) Medios de cultivo selectivos, son medios que además
de ser enriquecidos contienen ciertas sustancias
e) Temperatura.- De acuerdo a la temperatura requerida inhibidoras como el cristal violeta o el azul de metileno
las bacterias pueden ser: psicrófilos a los que desarrollan presentes en el Mac Conkey y el EMB respectivamente,
en temperaturas inferiores a 15°C, mesófilos entre 30° a estos colorantes inhiben el desarrollo de las bacterias
40°C. (Óptima 37°C.) y termófilos a los que desarrollan grampositivas que se encuentran también en la muestra,
en temperaturas superiores a 50°C. además contienen lactosa, que permite dividir a las
enterobacterias en lactosa (+) y lactosa (-) según formen
f) Luz.- Es imprecindible para algunos microorganismos colonias de color rosado (lactosa positivas) o colonias
por que les permite producir pigmentación de sus incoloras (lactosa negativas).
colonias denominadose fotocromógenos, y aquellos que Otros como el SS y XLD que se utiliza para el
no requieren luz para pigmentarse se llaman desarrollo de Salmonellas y Shigellas al contiener verde
escotocromógenos. A los que no presentan pigmentación brillante, inhibe el desarrollo de coliformes. Con
tanto en presencia como en ausencia de luz, se los llama parecidas características el medio de Lowenstein Jensen
no fotocromógenos. al contener verde de malaquita, inhibe flora bacteriana de
la muestra, dejando desarrollar solo a mycobacterias. El
g) Presión osmótica.- La mayoría de las bacterias crecen agar Chapman (agar manitol) es específico para
en un medio con una elevada presión osmótica (aprox. Staphylococcus contiene ClNa al 7,5% inhibe el
300 mOsm), por ello son denominadas osmófilas. desarrollo de otros microorganismos. Thayer Martin,
permite exclusivamente el desarrollo de Neisserias por
h) Otros.- Minerales o elementos como: Hierro, contener antibióticos como vancomicina, colimicina y
magnesio, calcio, potasio, fósforo, azufre nitrógeno, Zinc, nistatina (VCN) este medio inhibe el desarrollo de la
cobre, etc. flora grampositiva y gramnegativa presente en la
muestra.
Clasificación
Los medios de cultivo se clasifican por su d) Medios de enriquecimiento, como el caldo
origen, estado físico y finalidad bacteriológica. tetrationate, selenito, caldo verde brillante, se utilizan
para el cultivo primario de heces con el fin de
1.- Origen: a) natural, proveniente de animales o incrementar el desarrollo de algunos microorganismos,
vegetales, como leche de vaca, infusiones de vegetales, sin favorecer la de otros, es decir inhiben el crecimiento
etc., de los grampostivos y limitan el crecimiento de los
b) artificial; productos químicamente elaborados y coliformes.
presentados en forma de polvos y granulados.
2.- Estado físico: a) Sólidos, que tienen en su e) Medios de transporte, El Stuart, Amies y Cary Blair,
composición más de 1% de agar (agar sangre) son medios que sirven para prolongar la supervivencia de
b) Semisólidos, que tienen en su composición menos de los microorganismos en general, se utiliza cuando existe
1% de agar (p.ej., SIM).
200
una demora entre la recolección y el cultivo de las  Si existen burbujas, destruir estos, con la ayuda
muestras. de un asa esteril.
f) Medios diferenciales, son medios que en su interior Preparacion del agar sangre (5% sangre de
tienen sustancias denominadas indicadores, cuya cordero).
característica es hacer virar el color del medio de acuerdo
Este medio se emplea para cultivo de gérmenes
a las reacciones metabólicas producidas por las bacterias;
exigentes y detección de reacciones hemolíticas. El
estos medios nos sirven para diferenciar e identificar las
medio de cultivo base mantiene los glóbulos rojos en
bacterias. Entre ellos tenemos: TSI, LIA, UREA, CS,
exelente estado de conservación.
SIM y otros. También el Mac Conkey y el EMB son
En la fórmula se puede usar agar base tripticasa soya:
consideradas dentro este grupo.
Cuadro N°. 92. Formula agar tripticasa soya
Preparacion de medios de cultivo Triptona 14.0 g
Materiales: Peptona 4.5 g
 Frascos de Erlenmeyer Extracto de levadura 4.5 g
 Balones de base plana Cloruro de sodio 5.0 g
 Probetas Agar 12.5 g
 Jeringas Agua destilada 1000 ml
 Tubos de ensayo Placas Petri Sangre fresca de cordero 50 ml
 Gradilla pH 7.3
 Pipetas volumétricas
 Medios de cultivo Procedimiento:
 Agua destilada  Pesar 40 g de Agar base tripticasa soya y
Equipos: supender en un litro de agua destilada
 Balanza  Calentar hasta ebullir para disolver
 Mechero de bunsen completamente
 Autoclave  Esterilizar a 120°C, 1,5 atmosferas por 15
 Hornalla o estufa minutos
 Enfriar a 56°C en baño maria
Procedimiento:
 Añadir en forma aséptica los 50 ml de sangre de
 Tarar y pesar el medio de cultivo
cordero desfibrinada (preferentemente)
 Medir el agua necesaria
 Mezclar bien sin formar burbujas y repartir en
 Hechar ambos en el frasco Erlenmeyer
cajas de Petri (25 ml para cada placa)
 Llevar al calor de la hornalla hasta su total  Guardar a 2 – 8°C en refrigerador.
disolución mediante la ebullición y bajar el En este medio se ve bien el alfa-hemólisis del S.
medio a la mesa encima de una tohalla. pneumoniae y beta-hemólisis del S. pyogenes.
 Esterilizar en autoclave a 121°C., durante 15 Agar chocolate.- Si al agar sangre sometemos a una
minutos a 1,5 atmosferas. temperatura de 80°C en baño maria, se convierte en agar
 Dejar ligeramente enfriar y servir: prender el chocolate (la hemoglobina se transforma en
mechero, tomar el frasco con el medio o matraz metahemoglobina con un aspecto a chocolate).
con la mano derecha, sacar el tapón con el dedo
meñique de la mano izquierda, flamear la boca Preparación de otros medios.- Para la preparación de
del matraz, abrir ligéramente la tapa de la caja otros medios de cultivo utilizados en laboratorio, se
Petri con la mano izquierda, echar el medio de siguen los mismos pasos anteriores, tomando en cuenta
cultivo hasta un poco menos de la mitad de la en todos los casos, que cada frasco del medio de cultivo,
caja Petri (25 ml aproximadamente). presenta la literatura que indica la composición química
 Tapar y dejar solidificar a medio ambiente. del medio de cultivo, así como la cantidad del medio que
debe utilizarse para un litro de agua destilada.
201
Autoclavar
Fig. N° 175. Preparación de medios de cultivo (Fuente: Diaz, 1999).
PREPARACIÓNDE MEDIOS DE  Autoclave

CULTIVO PARA PRUEBAS  Hornalla o estufa
BIOQUÍMICAS
Los pasos que se siguen para la preparación de estos Procedimiento:
medios, básicamente no difieren de los anteriores.  Enjuagar las paredes del matraz con el agua
destilada medida
Material:  Pesar el medio en la cantidad requerida
 Matraz o frascos Erlenmeyer  Mezclar el agua con el medio en el matraz
 Pipetas  Llevar al calor de la hornalla hasta su disolución
 Medios de cultivo en polvo total
 Probetas  Pipetear 3 ml del medio de cultivo a los tubos de
hemólisis
 Agua destilada
 Tapar los tubos con algodón
 Tubos de hemólisis
 Atoclavar a 121°C 15minutos
 Algodón
 Sacar del autoclave e inclinar los siguientes
 Gradilla
medios: TSI, LIA, CS y UREA, dejar solidificar
en pia al SIM.
Equipos:  Guardar en refrigerador 2 – 8°C
 Balanza
 Mechero de bunsen
AUTOCLAVAR
Fig. N° 176. Preparación de medios de cultiva para pruebas bioquímicas (Fuente: Diaz, 1999).
202
CAPITULO 25
TOMA DE MUESTRA
Definición en el momento de la toma de muestra. Estos sitios son los

La toma de muestra es el conjunto de siguientes: boca, nariz, faringe, colon, vagina, piel (con
procedimientos destinados a obtener una parte variantes de acuerdo a la zona), extremo distal de la
representativa del producto patológico presente en el uretra, pabellón auditivo externo, conjuntiva y superficie
paciente o en el medio ambiente, con el objetivo de ocular. El resto de los sitios anatómicos son normalmente
realizar diagnóstico o investigación. estériles.
Las muestras más comúnmente obtenidas para fines de
diagnóstico clínico son: sangre, orina, heces, secreciones, Clasificación de la toma de muestra
LCR, etc. obtenidas por punción, obtención directa,  Muestras superficiales
hisopado, raspado, etc.  Muestras de cavidades
 Muestras especiales
Condiciones para una buena toma de Muestras superficiales
muestra Son aquellas que se obtienen de la parte superficial del
a) Muestra como material real de la infección.- organismo como la piel, pelos y uñas. La muestra de piel
Verificar que la obtención de la muestra problema sea del se obtiene generalmente por raspados de la piel con la
lugar requerido y que efectivamente se encuentren los ayuda de un bisturí obteniéndose como muestras restos
agentes infecciosos, lo cual puede determinarse por de las capas superficiales o escamas de piel, las que serán
ejemplo con la presencia de pus. depositados entre dos portas, en sobres tipo filatelista o
b) Momento óptimo para la obtención.- Con el objeto en placas Petri.
de tener la mejor probabilidad de recuperar La toma de muestras de pelo se realiza con el
microorganismos causales, debe establecerse el momento arrancado del pelo con la ayuda de un depilador o el
óptimo de la recolección de muestras. Por ejemplo en un cortado del mismo con una tijera. Depositar éstas en el
síndromo febril donde se sospecha de bacteriemia se mismo material que el de la piel.
tendrá que obtener muestra sanguínea en el momento del Las muestras de uñas se las obtienen del lecho
pico febril. de la uña con un asa o hisopo cuando presenta exudado,
si se sospecha de micosis, utilizar un visturí para el
c) Obtención de cantidad adecuada.- se debe obtener respado de las uñas y una tijera para cortar las partes
una cantidad suficiente de acuerdo al lugar de la infectadas.
obtención de muestras para efectuar adecuadas técnicas
de cultivo e identificación de patógenos. Muestras de cavidades
El tipo de muestras que se obtienen son de las mucosas,
d) Uso de material adecuado para la recolección.- Para conjuntiva ocular, conducto auditivo externo, nasal,
la recolección de muestras deben utilizarse materiales de esputo, orina y heces.
recolección adecuados (recipientes estériles de boca
ancha con cierre hermético, de vidrio o plástico etc.); 1.- Mucosas
para su mejor transporte y conservación, evitando a) Conjuntiva ocular.- Se efectua con un hisopo estéril.
envases que pueden producir contaminación y producir Se presiona con el dedo púlgar, por debajo del párpado
resultados erróneos (falsos positivos o falsol negativos). inferior, hacia abajo, para retraer al exterior la conjuntiva
ocular con un movimiento firme pero suave, hisopar o
e) Obtención de muestras previo al tratamiento frotar en una sola dirección. Se sugiere desde el ángulo
antibacteriano.- Deben obtenerse muestras antes de la externo hacia el fondo de saco lacrimal, no volver a
administración de antibióticos para evitar resultados realizar la maniobra con el mismo hisopo. Se debe
falsos negativos, si así fuera, recomendar al paciente realizar la toma en ambas conjuntivas y sembrar por
dejar la administración de los mismos por un lapso de 3 a separado para su comparación respectiva (en la
5 días. conjuntiva sana y en la enferma).
f) Rotulación del envase correspondiente.- Deberá b) Mucosa ótica.- No nos reviste mayor problema, al ser
indicar nombe del paciente, edad, lugar de la obtención secretada al exterior, introducir el hisopo con un
de muestra, tipo de muestra, hora, fecha y médico movimiento ratatorio un máximo de 2 cm para no
solicitante. producir perforación de la membrana timpánica, en caso
Recordar que hay sitios anatómicos del necesario también se puede utilizar un asa bacteriológica.
organismo, que presentan una flora bacteriana normal,
esto para considerar la metodología y material a utilizar
203
c) Mucosa nasal.- Se utiliza un hisopo esterilizado, se cm en la uretra con un movimiento circular no brusco, se
visualiza la lesión, se introduce 2 a 3 cm sin tocar las retira el material purulento con mucho cuidado. Cuando
paredes de la mucosa, con un movimiento suave y firme el exudado es abundante tomar este con el hisopo para
se gira el hisopo y se obtiene la parte purulenta de la directamente sembrar y realizar el examen directo. Si se
muestra. observa lesiones chancroides (úlceras) en la mucosa
prepucial, escroto y otros, brevemente lavar con agua
d) Mucosa faríngea.- Solicitar al paciente hacer destilada y puncionar con una aguja estéril o pipeta
“buchadas” con suero fisiológico tibio y esteril, a pasteur para obtener el líquido semiturbio que será la
continuación pedir la apertura de la cavidad oral y muestra con la que trabajaremos.
extender la lengua, posterormente se utiliza bajalenguas,
para comprimir ésta hacia abajo, para aliviar el reflejo
vomitivo o de arcadas, solicitar al paciente la emisión del
sonido (AH-AH-AH) mientras dure el procedimiento. El
mismo consistirá en un FROTAJE O HISOPADO con
movimiento rotatorio sobre la superficie de la faringe y
amígdalas, sin tocar con el hisopo ninguna estrutura más
de la cavidad oral, esto para evitar la contaminación con
flora normal existente.
Fig. N° 178. Toma de muestra uretral
Mucosa genital femenino.- En este tipo de muestras

considerar dos situaciones: pacientes nulíparas con himen
intacto y multíparas. En las primeras solo debemos
esperar brevemente la salida de secreciones al exterior
para tamarlas éstas, siempre con la ayuda de un hisopo.
En el caso de las multíparas utilizaremos el espéculo
vaginal, con las valvas cerradas y de manera lateralizada
se introduce, para luego cambiar la posición de las
Fig.N° 177. Toma de muestra por hisopado faríngeo (Fuente: Koneman, mismas girándolas, para luego separar las valvas (abrir) y
2008). visualizando el cuello uterino, introducir 1 a 2 cm en éste
para obtener la muestra con el hisopo. La toma de
e) Mucosa genital.- A diferencia de los que acontece con muestra uretral se procede introduciendo un hisopo de 1 a
las muestras de vías urinarias, en este caso NO SE 2 cm en la uretra, realizar un giro y obtener la muestra
REALIZA HIGIENE DE LA ZONA por siquiera 24 deseada. Al igual que en el anterior caso, ante la
horas. Los materiales que se utilizan son: espéculos presencia de lesiones chancroides proceder de la misma
vaginales, hisopos estériles, asa bacteriológica. manera.
Varones.- Cuando el exudado es escaso, se introduce un
hisopo o asa bacteriológica a través del meato urinario 2
Fig. N° 179. Toma de muestra uretral femenina (Izq.) y de cuello uterino (Der.)
204
2.- Esputo a) Forma natural.- La toma de muestra por la forma

El esputo es una muestra adecuada para el diagnóstico natural de eliminación del esputo se reliza en pacientes
bacteriológico de la tuberculosis y neumonía en que pueden entender y cumplir las instrucciones que se le
individuos de la comunidad (extrahospitalarias). A pesar pueda dar (es la técnica más utilizada). Primero el
que la laringe, la tráquea, los bronquiolos y los alvéolos paciente debe ejuagarse la boca con suero fisiológico
pulmonares carecen de flora endógena, el esputo debe esteril y tibio, luego cuando el paciente experimente la
atravesar la orofaringe. Esta contiene una flora residente venida de una tos productiva, deberá aguantar la
normal como así también bacterias potencialmente respiración por unos segundos lo que llevará a que se
patógenas de las vías respiratorias bajas que pueden ser produzca un acceso de tos, ocacionando, la expulsión del
portadas transitoriamente (S. pneumoniae, H.influenzae moco proveniente del árbol traqueo bronquial, que será
tipo b, S. aureus). Pero al igual que en el hisopado depositada dentro un recipiente de boca ancha (cierre
faríngeo, en el esputo representativo de una hermético o tapa a rosca), un aproximado de 5 ml de
expectoración profunda el agente etiológico de la esputo (más o menos tres expectoraciones). Como yá
infección respiratoria baja se encuentra siempre en muy dijimos anteriormente, el envase debe ser rotulado:
alta proporción con respecto a la flora normal o a los nombre completo, edad, sexo, fecha, número, etc.
potenciales patógenos en estado de portación.
Existen criterios para la aceptación o rechazo de b) Forma postural.- Util en pacientes que no pueden
una muestra de esputo. Estos criterios analizan la eliminar en forma espotánea la muestra de esputo.
cantidad de células epiteliales bucales (indicativo de alta Paciente en decúbito ventral sobre una camilla (o
contaminación con saliva y por ende con flora endógena), cualquier superficie que cumpla la misma función) con
en relación a los leucocitos polimorfonucleares una almohada debajo del abdomen, quedando la cabeza
(indicativos de infección baja), así como también la colgado en uno de los extremos de la camilla, y por
presencia mayoritaria de un tipo de morfología gravedad las secreciones se saldrán al exterior y al
bacteriana. Tal control de calidad de la muestra se lleva a recipiente.
cabo mediante un extendido de la muestra coloreada con
la tinción de Gram. Uno de los criterios de rechazo de la c) Punción transtraqueal.- A partir de la sonda
muestra es la presencia en el extendido coloreado de más endotraqueal, se aspira con la ayuda de una jeringa la
de 10 células epiteliales y menos de 25 leucocitos por secreción, para depositar en tubo con 1ml de solfis esteril
campo (100X). Este criterio válido para el diagnóstico de o medio de transporte para bacterias anaerobias.
las bacterias que habitualmente causan neumonías
adquiridas en la comunidad (S pneumoniae, H. d) Lavado bronqueoalveolar.- Mediante un
influenzae, S. aureus) no se aplica para la investigación broncoscopio de fibra óptica con catéter envainado se
del Mycobacterium tuberculosis, ya que esta bacteria introduce 20 a 40 ml de solución fisiológica estéril a la
nunca forma parte de la flora endógena. El esputo no es región bronqueoalveolar, la cual es aspirada y colocada
una buena muestra para el diagnóstico de neumonias en un recipiente estéril para su cultivo respectivo. Un
causadas por bacterias anaerobias, ya que la recuento de más de 1000 UFC/ml de una especie
contaminación que sufre el esputo con flora normal de la bacteriana se considera clínicamente representativo.
cavidad orofaringea, en el momento de la toma de
muestra, no permite diferenciar del verdadero patógeno e) Cepillado bronquial.- Una vez colocado el
causante de la neumonía. broncoscopio se introduce un cepillo protegido por un
El esputo tampoco es útil para el diagnóstico de catéter (cepillo envainado), en la región bronquial, se
las neumonías intrahospitalarias (aquellas que se empuja el cepillo, este queda libre de la vaina, luego se
desarrollan luego de las primeras 48 horas de internación retira el cepillo con la muestra nuevamente dentro la
del paciente en el hospital). En este caso, los agentes vaina, se corta el cepillo con tijera estéril y se coloca en
etiológicos (K. pneumoniae, P aeruginosa, un tubo con 1 ml de solfis esteril para su posterior
Staphylococcus spp y otros.) llegan al sitio de la cultivo. El aislamiento de una bacteria particular en el
infección con posterioridad a una importante orden de 1.000 UFC/ml se considera clínicamente
colonización de las fauces (área de la cavidad oral representativo.
profunda situada entre los pilares tonsilares o
amigdalinos). Por tal motivo el cultivo del esputo
tampoco diferencia entre bacterias patógenas y
colonizantes. Para lograr el correcto diagnóstico
microbiológico en estos casos se utilizan otras técnicas de
toma de muestra como la punción transtraquel,
broncoscopia, lavado bronqueoalveolar y el cepillo
envainado.
205
3.- Toma de muestra de orina

a) Método del chorro medio.- Se debe realizar la
descontaminación de los genitales externos mediante el
lavado con agua tibia y jabón del meato urinario y
regiones vecinas. Luego se elimina la primera parte de la
micción unos 20 a 50 ml al inodoro o bacin (Con este
procedimiento estamos lavando la uretra colonizada por
flora bacteriana normal; y evitando la alteración del
resultado final del cultivo); y recien obtener el resto de la
orina en forma directa al recipiente esteril. En el caso de
mujeres se debe utilizar un tapon vaginal de algodón,
Fig. N° 180. Toma de muestra mediante los métodos del aspirado para evitar la contaminación con la flora vaginal. El
endotraqueal (a), lavado bronquial o bronquioalveolar (b) y cepillado momento óptimo para la toma de la muestra es por la
bronquial (c). (Fuente: Struthers, 2005) mañana, es cuando existe una mayor cantidad de orina
retenida, pero también se acepta la recolección de orina
f) Lavado gástrico.- Se utilizan en pacientes que no en otros horarios cuando se trata del método de las bolsas
pueden expectorar libremente como por ejemplo los colectoras y el acecho. La cantidad es 100 a 200 ml para
niños, enfermos mentales y mujeres (degluten el esputo). adultos y 50 a 100 ml para niños, en recipientes de boca
Mediante una sonda nasogástrica se introduce 50 ml de ancha estériles.
solfis, y luego se extrae el mismo volumen.
Colocar un tapon vaginal para evitar contaminar Tomar la muestra directamente en el

la orina recipiente, luego de haber desachado la
primera parte de la micción.
Fig.N° 181. Toma de orina. Método del chorro medio (Fuente: Koneman, 2008).
b) Bolsa recolectora.- Realizar higiene de genitales e) Orina de 24 horas.- En un recipiente de más de dos
externos, colocar esta bolsa que es de polietilieno litros se recolecta toda la orina eliminada durante las 24
esterilizado, dependiendo si el bebé es varón o mujer horas. Se usa cuando la patología está situada en los
tiene un orificio ubicado en la región correspondiente. riñones. La cantidad de orina mayor nos permite
Las bolsas deben cambiarse a los 45 minutos ya que son aumentar las posibilidades de encontrar al agente causal
susceptibles de contaminación con flora normal. de la enfermedad.
c) Por punción suprapúvica.- Mediante una jeringa se 4.- Toma de muestra de Heces
realiza un punción directamente a la vejiga para tomar la a) Por evacuación de heces espontánea, En un bacin o
muestra de orina se realiza en pacientes con retención chata pulcramente limpios para evitar contaminación de
urinaria niños y ancianos. microorganismos coprozoicos y sin orina, trasladar a un
frasco de vidrio boca ancha con tapa hermética o a rosca,
en lo posible estéril o bien lavado. Es preferible tomar la
parte que contiene moco, pus y sangre, ya que son en
estas muestras donde frecuentemente se encuentran
microorganismos patógenos como Shigellas o amebas
patógenas. La cantidad es de 2 a 10 ml para muestras
diarréicas y 2 a 10 gramos (tamaño aproximado de una
Fig.N° 182. Toma de muestra: Punción suprapúvica (Fuente: Koneman,
2008). pepa de durazno) para heces formadas o sólidas.
d) Al acecho.- Mediante la vigilancia contínua del niño, b) Hisopado rectal.- En el caso de los niños menores se
se toma la muestra inmediatamente que se observa que el recomienda el hisopado rectal, introducir con mucho
niño/a empieza a orinar para tomar la muestra en un cuidado en el orificio anal un hisopo uno dos cm (más
recipiente esteril. alla del esfínter rectal) mediante un movimiento giratorio
206
sacar la muestra y depositar directamente al medio de (aguja calibre N° 20) entre la tercera y cuarta vertebra
cultivo y el hisopo a un tubo para otros exámenes. lumbar, previamente realizado la asepsia con tintura de
yodo de 10 a 15 cm2 en forma centrífuga (de adentro
c) Muestra de heces en pañañes.- Excepcionalmente se hacia afuera) dejar secar dos minutos luego retirar el
acepta la recolección de heces en pañales de personas que exedente de tintura con alcohol al 70%. Para evitar el
no controlan sus esfínteres, pudiendo ser bebés o adultos dolor de la punción se suele utilizar anastésicos locales
con incontinencia rectal. Con un traslado no más de 30 (lidocaína al 1%) en forma intradérmica y subcutánea.
minutos al laboratorio. Nunca se debe aspirar el LCR por el peligro a succionar
una raíz nerviosa, ésta debe fluir libremente (por
Muestras especiales diferencia de presión) a un tubo estéril entre 3 a 5 ml NO
a) Líquido Céfalo Raquídeo.- Es la muestra más SE DEBE obtener mayor cantidad, por el riesgo a
delicada y compleja que se obtiene en procesos producir hipertensión intracraneana. No refrigerar pues el
infecciosos meníngeos, realizado por médico especialista. frio inactiva a algunas bacterias como por ejemplo
La toma se realiza con el paciente sentado flexionando el Neisseria meningitidis, y procesar lo más pronto posible.
dorso sobre las rodillas, mediante la punción lumbar
Fig. N° 183. Toma de muestra de LCR (Fuente: Koneman, 2008).
b) Recolección de muestra sanguínea.- Es una de las una torunda de algodón con alcohol al 70% en el lugar de
muestras más comunes que se toman en los laboratorios, la punción y pedir al paciente que presione ésta para
por lo tanto su práctica y destreza son parte del trabajo producir hemostasia y evitar que flexione el antebrazo
del laboratorisca clínico. Generalmente la toma se realiza para evitar hematomas.
de las venas superficiales de la flexuda del codo, la “M” La cantidad para un hemocultivo es de 1ml para
venosa (vena mediana cefálica, v. mediana basílica y neonatos, 5 ml en niños y 10 ml en adultos. Las mismas
otros). Se palpa la vena más adecuada, luego se realiza la se siembran en los frascos de hemocultivo respectivos.
asepsia con una torunda de algodón empapada con tintura
de yodo al 2% en forma centrífuga, esperar 2 minutos y c) Ganglios.- Realizar la asepsia como en el caso anterior
quitar el exedente con alcohol al 70%. Colocar la en este caso de los ganglios linfáticos, puncionar con una
ligadura por encima de la flexura del codo a 4 o 5 cm del geringa y obtener la muestra necesaria.
mismo. Introducir la aguja N° 20 o 21, con el bicel hacia
arriba, penetrar la piel (la aguja debe estar casi paralela al d) Articulaciones.-realizar la asepsia, puncionamos con
brazo del paciente) hasta alcanzar la vena. Suavemente una aguja trocar en la región escogida y obtenemos la
retraer el émbolo de la jeringa hasta completar la muestra necesaria.
cantidad requerida de sangre, quitar la ligadura. Colocar
207
CAPITULO 26
TINCIONES EN BACTERIOLOGIA
Definición Tinción bacteriológica.- En bacteriología vamos a
Una tinción bacteriológica, es el conjunto de utilicar esencialmente colorantes BASICOS, ya que los
procedimientos destinados a poner de manifiesto la elementos que vamos a teñir corresponden a células
morfología y estructura bacteriana a través de sustancias procariotas, es decir aquellas que no poseen membrana
químicas llamadas colorantes. nuclear que delimite el material del núcleo ni estructuras
membranosas. De esta manera hallamos al cromosoma
Colorantes. Substancia química que tiene la propiedad bacteriano desnudo en la matriz citoplasmática, luego
transferir el color a una sustancia o material sobre el cual entonces ADN y ARN y sus variedades se hallarán
actúa. Este proceso se llama tinción o coloración (acción dispersos en esa región citoplasmática. Determinando un
y efecto de colorear microorganismos o tejidos). estado de ionización ácida, lo que dará por resultado una
apetencia de estas estructuras por los colorantes básicos.
Componentes químicos de los colorantes. Todo
colorante tiene dos componentes o grupos químicos: Lo que significa, que los colorantes básicos, en
grupo auxocromo. Son substancias químicas los cuales la parte colorante de la molécula está cargada
constituidas por nitrocompuestos, sales sódicas de ácido positivamente, entran más activamente en la unión con la
carboxílicos y sulfónicos, que poseen la capacidad de célula bacteriana cargada negativamente.
disociación y reacción, para actuar como substancias
ácidas o alcalinas. Estos están unidos a grupos Clasificacion de los metodos de coloracion
cromóforos (compuestos nitrogenados: -N02, -NO y a) Coloración directa.- Es una tinción simple en el que
otros) que son los que llevan el color. Por la acción de interviene tan solo un colorante. Ejemplo: coloración con
ambos grupos se produce la coloración a la bacteria. azul de metilino (Loeffler), Fucsina fenicada diluida,
Cristal violeta, safranina, etc., son coloraciones de
Clasificación naturaleza química básica.
a) Colorantes ácidos.- constituidos por compuestos
ácidos (ácidos carboxílicos, nitrocompuestos), que tienen b) Coloración indirecta.- También llamada tinción
afinidad para teñir estructuras de carácter básico como el negativa. En este caso no se tiñe a la bacteria si no
protoplasma bacteriano. levemente se tiñe el fondo donde se encuentran ellas
(medio circundante oscuro) y se las observa por
b) Colorantes básicos.- constituidos por grupo amino contraste, de manera que las bacterias se ven grises u
que se unen a los ácidos para formar sales, tienen opacas en un fondo oscuro o negro. Si la bacteria posee
especial afinidad por los ácidos nucleicos bacterianos. cápsula también se visualiza ésta, como un halo
Mordientes. Es toda substancia química que permite fijar transparente alrededor de la bacteria. Esto con el
el colorante a la estructura bacteriana; es decir, actúa colorante de tinta china.
como un puente químico entre el colorante primario y la
pared bacteriana, formando un complejo químico que c) Coloración selectiva. Permite colorear una
resista la decoloración. Los mordientes pueden ser sales determinada estructura bacteriana como flagelos, esporas,
metálicas, de potasio como la solución diluida de yodo. cápsula, etc., mediante métodos de coloración específicos
como Fulto: esporas, Leiffson: flagelos, Albert: gránulos
Teoría de la coloración de volutina metacromáticos, etc.
La teoría de la coloración más aceptada es la que
plantea, que la tinción de una estructura, se produce en d) Coloración diferencial. Tinción en la que intervienen
base a fenómenos físicos y químicos; que tienen que ver dos colorantes (uno primario y otro secundario), la
principalmente con la estructura y funcionalidad participación de un mordiente y una substancia
bacteriana (absorción, ósmosis, etc.); donde las proteínas decolorante, que permite diferencia a los
y aminoácidos que la conforman, se comportan como microorganismos entre sí, proporsionandonos
ácidos o como bases (anfóteras), que se ionizan información básica para el diagnóstico bacteriológico,
produciendo reacciones químicas al entrar en contacto como son la tinción de Gram, Tinción de Ziehl-
con los colorantes ionizadas en forma de átomos o Neeelsen.
moléculas con carga positiva, tiñiendo las estruturas
celulares que poseen carga negativa y viceversa. Además TINCION DE GRAM
aprovechando el mismo sentido de la reacción, podemos Fundamento
indicar que los colorantes que se ionizan como bases, La estructura de la pared bacteriana tiene una
reaccionan con porciones celulares ácidas. importancia práctica y directa para diferenciar a las
208
bacterias en dos grandes grupos mediante la tinción de decolore. En las bacterias gramnegativas, el complejo
Gram: bacterias grampositivas y bacterias de violeta–lugol desaparece o sale de la célula (las
gramnegativas. En el procedimiento de esta tinción, las células se decoloran) debido por una parte a la rotura de
bacterias 1) se tiñen con violeta de genciana (cristal la membrana externa rica en lípidos causada por el
violeta de color azulviolácea), 2) se tratan con lugol solvente orgánico alcohol-acetona y por otra a la fina,
como mordiente, para formar un complejo violeta - lugol laxa, discontinua y única capa de peptidoglicano de su
dentro de la célula, 3) se lava con un solvente orgánico pared (no todos los azúcares de N-acetimurámico se
(alcohol acetona) y 4) se tiñe de nuevo con el colorante entrelazan entre sí como en los grampositivos) (figura
de contraste safranina o fucsina (de color rojo). En las N°184), lo que ofrece débil resistencia a la extracción del
grampositivas, el complejo de violeta–lugol es retenido cristal violeta por el solvente; por lo tanto, estas células
dentro de la célula después del lavado con alcohol- decoloradas deben ser sometidas a una tinción de
acetona, porque por una parte, la gruesa capa de contraste con safranina o fucsina para ser observadas y
peptidoglucano que se encuentra adherido al colorante y reconocidas al microscopio. Las bacterias grampositivas
ambos al lugol como mordiente, forman un complejo aparecen azulvioláceas, mientras que las gramnegativas
resistente que no permite que sea extraído de la célula, y se tiñen de rojo.
por otra a la deshidratación y reducción del tamaño de los
poros de la pared por la acción del solvente evita que se
Figura N° 184. Estructura del peptidoglucano de bacterias gramnegativas (Izq.), donde se observa la discontinidad de los enlaces entre azúcares de N-
acetilmurámicos de su cadena de peptidoglucano, diferente al de los grampositivos (der.), cuya estrutura de enlace de estos azúcares es más contínua
(Fuente: Jawetz, 1985).
Procedimiento  Decolorar con alcohol acetona 15 a 20 segundos

 Preparar un frotis  Lavar con abundante agua para eliminar el
 Fijar al calor exeso de decolorante
 Teñir con cristal violeta 1 minuto  Teñir con fucsina básica 20 segundos
 Lavar con abundante agua el exeso de colorante  Lavar con abundante agua el exeso de colorante
 Cubrir con lugol 1 minuto  Secar la preparación
 Lavar con abundante agua el exeso de lugol  Observar
209
Fig. Nº 185. Técnica de tinción Gram (Fuente: www.octaviofranco.blogspot.com).
210
Fig. N° 186. Procedimiento de la tinció de Gram (Fuente: Diaz, 1999).
211
TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN componentes celulares de la muestra menos las

Definición Mycobacterias que se quedan de color rojo.
Es el conjunto de procedimientos tintoriales
destinados a poner de manifiesto a los microorganismos Procedimiento de la tinción
denominados Bacilos Acido Alcohol Resistentes  Preparar un frotis
(BAAR).  Fijar al calor
 Cubrir completamente la placa con fucsina
Fundamento de la tinción fenicada
Los bacilos ácido-alcohol resistentes  Calentar la preparación con el fuego de un
(B.A.A.R.), se tiñen de rojo con el colorante básico hisopo 3 veces durante 5 minutos, evitanto que
fucsina fenicada y son resistentes a la decoloración con hierva la muestra (precipitan los cristales
alcohol-ácido. Debido a la hidrofobicidad de la pared adoptando formas de agujas que pueden
celular micobacteriana, la penetración del colorante confundir con BAAR). Cuando se seca el
fucsina hacia el interior de la célula se mejora con el colorante, agregar más fucsina a la placa.
tratamiento con calor (método de Ziehl-Neelsen), ya que  Lavar con abundante agua el exeso del colorante
produce la dilación y cierta apertura de los lípidos de la  Decolorar con una solución de acido–alcohol
pared (ácidos micólicos) y permite que el colorante (HCl) al 3% por 1 minuto, si es necesario
fucsina ingrese y tiña el peptidoglucano de estas agregar un tiempo más, hasta que la muestra
bacterias. Luego cuando la bacteria es sometida a la quede de un color rosa claro.
acción del alcohol-ácido; debido al cambio de  Lavar con abundante agua
temperatura, la pared de los BAAR se retrae o cierra los  Teñir con azul de metileno 3 minutos
poros de los ácidos micólicos evitando su decoloración,  Lavar con abundante agua el exeso del colorante
para luego el contraste de azul de metileno tiña todos los  Secar la preparación
 Observar
Fig. Nº 187. Técnica de tinción ziehl Neelsen (Fuente: www.campus.usal.es).
212
Fig.N° 188. Procedimiento de la técnia de Ziehl Neelsen (Fuente: Diaz, 1999).
213
TINCION NEGATIVA DE CAPSULAS Procedimiento

Fundamento  Seleccionar un portaobjetos limpio
Las cápsulas, por sus características químicas,  Colocar una colonia de bacterias productoras de
no se tiñen normalmente con colorantes básicos como el cápsula
cristal violeta o la fucsina. Sin embargo, se pueden  Añadir una gota de tinta china y mezclar bien
observar directamente mediante tinción negativa con tinta con el asa bacteriológica
china. Este colorante está compuesto por partículas finas  Colocar encima del preparado un cubreobjetos.
de carbón suspendidas en agua formando un coloide. Las Evitando que se formen burbujas
partículas son demasiado grandes para penetrar a través  Eliminar el exeso del preparado con la ayuda de
de la matriz de la cápsula, por lo que sólo se teñirá el un papel filtro, presionando levemente.
medio circundante. Para distinguir bien la cápsula del  Desechar el papel en un decontaminante y
resto de la célula se debe aumentar el contraste cerrando lavarse las manos con jabón desinfectante
el diafragma del condensador. La cápsula se verá como  Examinar al microscopio. Trabajar con el
un halo transparente alrededor de la célula de color diafragma del condensador cerrado para
grisáceo con el medio circundante de color negro. aumentar el contraste de las bacterias para
visualizar mejor la cápsula.
Fig. N° 189. Tinción negativa de cápsulas (Fuente: Diaz, 1999).
214
TINCION DE ESPORAS  Teñir con verde de malaquita. Colocar un

Fundamento pedacito de papel filtro encima de la muestra
Las endosporas poseen unas cubiertas exclusivas sobre el portaobjeto. Añadir el colorante hasta
que las hacen resistentes a los factores ambientales empapara bien el papel de filtro. De esta forma
adversos. Además, estas cubiertas hacen que las esporas se evitará que el colorante salpique y manche
aparezcan en el microscopio óptico como estructuras toda la zona de trabajo. Con una pinza de
refringentes y de difícil tinción. La tinción específica de madera colocar la muestra encima de la llama
esporas requiere dos colorantes: del mechero de forma que el colorante humee
1.- verde de malaquita: capaz de teñir las esporas en durante 5 minutos.
caliente.  evitar que la muestra hierba. Añadir más
2.- Safranina: colorante de contraste que tiñe las formas colorante si éste se evapora; es importante que la
vegetativas. muestra no se seque.
Las endosporas, tras la primera tinción, no perderán el  Lavar con abundante agua
colorante en el lavado con agua, y sí lo harán las formas  Teñir con safranina
vegetativas, que quedaran teñidas con el segundo  Lavar con abudante agua
colorante.  Secar la preparación
 Observar y anotar la morfología de las
Procedimiento endosporas.
 Preparar frotis bacteriano, colocando una gota
de solfis en un portaobjeto, sobre ella colocar
una colonia de la bacteria y homogeneizar.
Fig. N° 190. Tinción de esporas (Fuente: Diaz, 1999).
215
COLORACIÓN DE CORPÚSCULOS
METACROMÁTICOS (GRANULOS DE
VOLUTINA)  Frotis
 Fijación al calor
Fundamento  Cubrir la placa con azul de metileno 1 minuto
Los corpúsculos metacromáticos tienen especial  Lavar con agua corriente
afinidad por los colorantes básicos, resaltando en el  Teñir con lugol, calentando 3 vapores en 5
citoplasma mucho más intensamente coloreados que el minutos
resto del microorganismo (Bacilos con granulaciones  Lavar
azuladas en el citoplasma de color ligereramente
 Secar
amarillo).
 Observar
Procedimiento (método de Neisser - Del vecchio):
216
CAPITULO 27
SIEMBRA Y LECTURA DE COLONIAS
Definición Clasificación de los métodos de siembra

Siembra es el procedimiento laboratorial que - Siembra en medios sólidos (agares)
consiste en colocar o depositar la muestra sobre la - Siembra en medios líquidos
superficie o contenido de un medio de cultivo, con el
objetivo de hacer desarrollar y aislar colonias. La siembra en medios sólidos
Colonia, es una familia de bacterias similares, que Se realiza mediante estriación, que consiste en
proceden de uno viable e independiente como resultado utilizar asa bacteriológica para realizar movimientos
de su multiplicación; se presentan en forma lateralizados continuos (en zig-zag) para desprender la
macroscópica para ser leidas a simple vista o con la muestra sobre la superficie del agar.
ayuda de una lupa.
Fig. N° 191. Esterilización del asa bacteriológica, toma de muestra y siembra en medio sólido.
1.- Siembra en placa Petri zag sobre la superficie en un solo trazo abarcando una
a) Por agotamiento, con el asa bacteriológica cuarta parte de la superficie del medio, continuar con los
previamente flameada al rojo vivo a la llama del siguientes dos trazos tomando unas estrías del anterior,
mechero y enfriada en la parte interna de la tapa de la este procedimiento consiste en agotar la muestra a través
placa petri, se toma una parte representativa de la del estriado, logrando en el último trazo del estriado se
muestra, se deposita en en extremo del medio de cultivo, depositen germenes aislados o independientes, que luego
para después con movimientos suaves y delicados de la incubación desarrollaran colonias aisladas.
proceder a desparramar la muestra sobre el medio en zig-
Fig. N°. 192. Siembra por agotamiento en agar
b) Por cuadrates, también es una técnica basada en el incubamos y vemos las colonias individualizadas en el
agotamiento; solo que en este caso dividimos la caja petri tercer y cuarto cuadrante.
en 4 cuadrantes, de igual forma flameamos y enfriamos el
asa bacteriológica y tomamos la muestra, para luego c) Por radios, de igual forma que en el anterior se
proceder a sembrar por agotamiento en el primer deposita la muestra en un extremo del medio de cultivo, a
cuadrante, luego el segundo cuadrante, sin volver a partir del cual se estria la muestra al otro extremo de la
cargar el asa, luego al tercero y cuarto cuadrantes, placa, varias veces realizando trazos independientes y
paralelos hasta cubrir toda la superficie del medio.
217
d) En pentágono, Igualmente con el asa flameada y tomando algunas estrias del anterior trazo se realiza
enfriada depositar la muestra en un extremo de la caja estriados rectos y paralelos en diferente sentido, así
petri a partir del cual se realizan estriados en trazos al sucesivamente (sin volver a cargar el asa) hasta formar
otro extremo de la placa ocupando una cuarta parte de la un pentágono, este método es muchas veces usado en
caja petri, luego se quema y enfria el asa, después, siembras de heces.
Siembra por
agotamiento Siembra por Siebra por radios
cuadrantes
Fig.N° 193. Métodos de siembra por agotamiento en agar (Fuente: Trigoso, 1992).
e) Método de inundación, Con un asa bacteriológica Siembra en medios de cultivo líquidos.

descargamos la muestra mediante una estria al centro del a) Por depósito, se utiliza un hisopo para depositar la
medio de cultivo; luego mediante estriaciones en zig-zag muestra en el fondo del tubo con caldo de cultivo, sin
en varias direcciones desmarramamos la muestra en toda olvidar de romper el extremo del hisopo para luego tapar
la superficie del agar. el tubo para evitar contaminación.
f) En tubos en pie, mediante picadura, se utiliza el asa en b) Por agitación, mediante el asa bacteriológica, tomar
hilo para depositar la muesta introduciendo en la parte la muestra para luego depositar en el caldo de cultivo
central del tubo hasta el fondo sin tocar la base. realizando movimientos lateralizados para desprender la
muestra.
g) En pico de flauta, la siembra se realiza depositado la
muestra por punción en la parte central del tubo hasta el c) Métodos especiales. Placa de tos, consiste en hacer
fondo del tubo (sin tocar la base) y luego realizar el expectorar al paciente con tos directamente sobre la placa
estriado en la superficie inclinada del agar. de agar.
Lectura de colonias
Es la observación macroscópica de las diferentes
características que presentan las colonias luego del
cultivo de la muestra, para esto a veces es necesario
utilizar una lupa.
a) En cajas Petri.- Se observa la forma, aspecto,

consistencia, tamaño, pegmentación y el halo, además de
persibir el olor.
Siembra por
picadura
Siembra en pico de flauta
Fig. N° 194. Siembra por picadura y pico de flauta
Cuadro N° 93. Características utilizadas para la identificación de las colonias bacterianas.

FORMA Putiforme, circular, filamentosa, irregular, rizoide.
SUPERFICIE Plana, elevada, convexa, cóncava, umbonada y

umbilicada.
BORDE Definido, irregular, aserrado, filamentoso, rizoide
y ondulado.
ASPECTO Humedo, seco, brillante, transparente y opaco.
CONSISTENCIA Mucoide, cremosa, pulverulenta y otros.
218
PIGMENTACIÓN Blanca, amarilla, negra, naranja y otros.

TAMAÑO Diámetro en milímetros
HALO Beta, alfa o gama hemolisis.
OLOR Fecaloide, dulzón, amoniacal, etc.
Superficie:
Forma:
Fig. N° 195. Forma, borde y superficie de las colonias (Fuente: Trigoso, 1992).
b) Medios líquidos b) producción de turbidez en todo el tubo y c) formando

En medios líquidos no podemos observar sedimento en el fondo del tubo.
colonias, pero si podemos ver el desarrollo y crecimiento
bacteriano observando lo siguiente: a) formación de
película en la parte superior del medio de cultivo,
219
CAPITULO 28
LECTURA E INTERPRETACIÓN DE LAS PRUEBAS
BIOQUÍMICAS PARA ENTEROBACTERIAS
Lo que ocurre elementalmente es lo siguiente:

Los diferentes medios de cultivo en los que han La concentración de ácido que se produce en el medio es
sido sembradas las enterobacterias, podrán o no ser baja (por la baja cantidad de glucosa en el medio 0,1%).
modificados químicamente, esto de acuerdo a las Al principio durante las primeras 8 a 12 horas de
caracteristicas de comportamiento bioquímco de cada una incubación, esta cantidad de ácido puede convertir el
de ellas. Nosotros en base a la observación de estas color de la profundidad y de la porción inclinada al
características, podremos identificar a las enterobacterias amarillo. Sin embargo, en las horas siguientes, el aporte
presentes en las muestras. de glucosa se agota por completo, las bacterias en esas
circunstancias, realizan la degradación oxidativa de la
Agar triple azúcar-hierro (TSI) peptona y aminoácido dentro la porción en pico de flauta
del tubo donde hay oxígeno. Esto libera las aminas
Fundamento
(amoniaco-alcalino), que pronto contrarrestan las
El TSI es un medio de cultivo diferencial que
pequeñas cantidad de ácido presentes en la porción
sirve para determinar la capacidad de un microorganismo
inclinada; a las 18 a 24 horas, la totalidad del pico de
para fermentar o no los hidratos de carbono presentes en
flauta vira a un pH alcalino y el color retorna al rojo. No
el medio, con producción o no de gas. También permite
obstante, en la profundidad (porción anaerobia) del tubo,
visualizar la producción o no de ácido sulfídrico (SH2).
la degradación de aminoácidos es insuficiente para
Para este efecto el TSI contiene los siguientes
contrarrestar el ácido formado y el medio permanece
componentes:
amarillo. Por lo tanto, la reacción alcalina del pico de
CuadroN° 94. Composición del medio de TSI
flauta y profundidad ácida es un indicador de que el
Peptona 20 g microorganismo, es lactosa negativa y glucosa positivas
Cloruro de sodio 5g
Lactosa 10g
Sacarosa 10g
Glucosa 1g
Sulfato de amónio ferroso 0,2g
Tiosulfato de sodio 0,2g
Rojo de fenol 0,025g
Agar 13, 0g
Agua destilada 1000 ml
pH 7,3 A LAS 24 HORAS
El microorganismo sembrado en el tubo de TSI Fig. N°196. Fermentación de la glucosa y no de lactosa

fermenta la glucosa, básicamente por la vía Embden-
Meyrrhof, con la producción de ácidos mixtos (ácido
láctico, acético y fórmico); estos ácidos son los Pero cuando la bacteria además de fermentar la
encargados de virar el color rojo inicial del indicardor glucosa también fermenta la lactosa, significa que estas
(rojo fenol) del TSI al color amarillo como producto del bacteria tiene la capacidad de transportar la lactosa a
cambio del pH de este medio. (El TSI es de color rojo través de su pared (mediante una enzima B-galatosido
cuando tiene un pH alcalino 7,3 y cambia al color permeasa al interior de la célula bacteriana), para luego
amarillo cuando el pH es ácido por debajo de 6,8). Esta hidrolizar y romper la unión del disacárido lactosa en
fermentación se realiza en anaerobiosis por lo que el glucosa y galactosa (mediante la enzima B-galatosidasa),
viraje de color se observa solo en el fondo del tubo luego la glucosa liberada es degradada a ácidos mixtos,
(porción anaerobia), esto debido también a la baja mediante la misma vía y producir los mismos efectos en
concentración de la glucosa cuya acidez no abarca todo el el TSI explicados anteriormente, es decir ahora por
tubo por lo tanto la bacteria es fermentador de glucosa, existir mayor cantidad de ácido formado en el medio de
pero no de lactosa. cultivo, este vira del color rojo al amarillo todo el tubo
(ver figuras 197 y 198).
220
RECUADRO N° 15. FERMENTACIÓN DE LA GLUCOSA

Y LACTOSA.
Como la fermentación de la lactosa finalmente prosigue por
medio de la degradación de glucosa a través de la vía de
Embden.Meyerhoff, cualquier microorganismo incapaz de
metabolizar glucosa no puede formar ácido a partir de lactosa.
Esto explica por que se omite la glucosa de las fórmulas de los
medios de aislamiento primario como el agar de Mac Conkey y
el agar eosina-azul de metileno: si no se omitiera, se perderia la
habilidad para detectar la capacidad fermentadora de lactosa de
las bacterias de prueba. En el medio de prueba, el parámetro de
fermentación de lactosa es la detección de producción de ácido.
Un microorganismo no fermentador de lactosa es aquel que
carece de una o de ambas enzimas necesarias para el
metabolismo de la lactosa o que carece de la capacidad para
atacar la glucosa. Se cree que los denominados fermentadores
tardíos de lactosa son microorganismos que muestran actividad
de B-galactosidasa, pero una actividad perezosa de B-
galactosido (permeasa transportan lentamente la lactosa).
Cuando el microorganismo sembrado no

fermenta la glucosa ni la lactosa el medio de cultivo no se
acidifica (no es una enterobacteria) por lo tanto la
bacteria en esta situación, desde el principio se alimenta
Fig. N°. 197. Fermentación de la lactosa mediante la enzima
B-galactosidasa con liberación de la glucosa que luego será degrada a
de las peptonas, produciéndose amoniaco, alcalinizando
ácido mixtos, los mismos que cambiaran el pH del medio tornándola a aun más el medio tornándolo de color rojo todo el tubo.
color amarillo (Fuente: Koneman, 2008). Las bacterias que causan este tipo de reacción se conocen
como no fermentadoras.
A LAS 24 HORAS
Fig. N°198. Fermentación de glucosa y lactosa A LAS 24 HORAS
Fig. N° 199. .Microorganismo lactosa y glucosa negativas
221
Cuadro N° 95. Procedimiento y resultados de la siembra en TSI

PROCEDIMIENTO RESULTADOS
1.- Inocular por 1.- Pico de flauta alcalino (rojo)/fondo ácido
picadura y estriado (amarillo) = Glucosa positiva/ lactosa y sacarosa
una colonia aislada negativa.
con un asa en hilo en 2.- Pico de flauta ácido (amarillo)/fondo ácido
un tubo de TSI. (amarillo) = Glucosa positiva/ lactosa y sacarosa
2.- Incubar a 37°C positiva.
durante 24 horas. 3.- Pico de flauta alcalino (rojo)/ fondo del tubo
alcalino (rojo) = no hay fermentación de azúcares.
1 2 3
* Si la bacteria fermenta la lactosa generalmente también fermenta la sacarosa excepción

hecha para la Yersinia enterocolítica fermenta sacarosa pero no lactosa, por lo tanto esta
bacteria en TSI, la reacción será A/A y en Kligler K/A (Kliger no tiene sacarosa).
Cuadro N° 96. Producción de gas

Una gran mayoría de los Mismo
microorganismos al fermentar los procedimiento Positiva: formación de un
azúcares generalmente produce anterior espacio vacio en el fondo o
gas, la misma fundamentalmente ruptura el cuerpo del TSI
es una mezcla de hidrógeno y Negativa: Ausencia del
dióxido de carbono que resulta de espacio o ruptura del TSI.
la degradación del ácido pirúvico.
Espacio vacio
Producción de sulfuro de hidrógeno o ácido

sulfídrico (SH2)
Algunas bacterias al actuar sobre el tiosulfato de
sodio del TSI, mediante la enzima tiosulfato reductasa
Fig. N° 200. Producción de SH2 en TSI (Fuente: Koneman, 2008).
producen la liberación de sulfito (S2), el mismo que se
une a un ión hidrógeno (H1) para formar H2S (ácido
sulfidrico: compuesto incoloro), entonces las sales de Sulfuro indol motilidad (SIM)
hierro (sulfato ferroso) presentes en el medio se une al Fundamento
H2S formando entre ambas un precipitado negro (sulfuro En el medio de SIM se detecta: La formación de
ferroso) visible alrededor de la picadura o en el fondo ácido sulfídrico, formación de indol y motilidad.
del tubo cuando es positiva (siempre en un medio ácido)
y ausencia del precipitado negro cuando es negativa.
222
Cuadro N° 97. Composición del medio de SIM

Peptona de caseína 20 g Detección del ácido sulfídrico.- Tiene el mismo
Peptona de carne 6,6 g fundamento ya explicado anteriormente. Cuando es
Citrato de amonio y hierro 0,2 g positiva existe ennegrecimiento alrededorde la picadura o
Tiosulfato de sodio 0,2 g en el fondo del tubo.
Agar 3g
Agua destilada 1000 ml Detección de la motilidad e indol:
Cuadro N° 98. Prueba de la motilidad
El SIM es un medio 1.- Con un asa en hilo Reacción positiva: turbidez difusa alrededor
semisólido que inocular por picadura de la picadura o crecimiento visible que se
contiene poca una colonia aislada aparta de la línea de picadura hacia las
concentración de en el medio de SIM. paredes del tubo.
agar (0,3%) para 2.- Incubar a 37°C 24 Reacción negativa: El crecimiento de la
permitir la libre horas. bacteria se limita a la línea de picadura, no
diseminación de los habiendo inturbiamiento difuso.
microorganismos en
el medio.
Positivo Negativo
Cuadro N° 99. Determinación del indol

El indol, es uno de los productos
de degradación metabólica del 1.- Colocar 2 gotas Reacción positiva: Presencia de un anillo
aminoácido triptófano (presente del reactivo Kovac rojo en la superficie del tubo de SIM.
en las peptonas del SIM). Las o Ehrlich en el tubo Reacción negativa: ausencia de indol; no
bacterias que poseen la enzima de SIM. hay cambio de color en la superficie.
triptofanasa son capaces de
hidrolizar y desaminar el 2.- Observar la
triptófano con producción de superficie del tubo.
indol, ácido pirúvico y amoníaco.
El indol, desdoblado de la
molécula de triptófano es
detectado con un reactivo
revelador: para-dimetilamino
benzaldehído (Kovac o Ehrlich)
como un complejo de color rojo. Positivo Negativo
223
Fig. N° 201. Las bacterias degradan al triptófano del SIM en indol amoniaco y piruvato, luego el indol es detectado por el reactivo de Kovac (Fuente:
Koneman, 2008).
Lisina hierro agar (LIA) La producción de sulfuro de hidrógeno se visualiza

Fundamento por el ennegrecimiento del medio debido a la formación
de sulfuro de hierro (mismo mecanismo anterior).
Es un medio donde se detecta la producción de
Las cepas del género Proteus y Providencia,
Lisina-descarboxilasa y ácido sulfídrico
desaminan la lisina y producen ácido alfa-ceto-carbónico.
simultáneamente.
Este compuesto al unirse a la sal de hierro presente en el
La lisina presente en el LIA puede ser
medio y bajo la influencia de oxígeno forma
descarboxilada por los microorganimos que poseen la
combinaciones pardo-rojizas en la región superficial del
enzima lisina-descarboxilasa transformándola en amina
medio de cultivo (a eso se denomina desaminación).
cadaverina y CO2 (compuesto alcalino), que produce un
viraje del color lila inicial al violeta del indicador de pH
Cuadro N° 100. Composición del medio de LIA
púrpura de bromocresol en todo el tubo de LIA. Como la
Peptona 5,0 g
descarboxilación sólo tiene lugar en medio ácido (pH
Extracto de levadura 3,0 g
inferior a 6), es necesario que el microorganismo
produzca previamente la acidificación del medio de Glucosa 1,0 g
cultivo por fermentación de la glucosa. (por este motivo Púrpura de bromocresol 0,02 g
este medio de cultivo sólo debe utilizarse para la L-lisina 10,0 g
diferenciación de cultivos que fermentan la glucosa). Los Citrato férrico-amonio 0,5 g
microorganismos que no producen lisina- Tiosulfato de sodio 0,04 g
descarboxilasa pero que son fermentadores de la Agar 15,0 g
glucosa, fermentan la pequeña cantidad de glucosa que Agua destilada 1000 ml
existe en el medio acidificando el fondo, por este hecho pH 6,7
solo el fondo del tubo se torna amarillo y el pico de flauta
se mantiene alcalino por lo tanto de color lila inicial.
224
Cuadro N° 101. Descarboxilación de la lisina

1.- Inocular por picadura 1.-Resultado positivo: pico de flauta
una colonia aislada en el violeta/ fondo violeta: Descarboxilación
medio de LIA. de la lisina
2.- Incubar a 37°C durante 2.-Resultado negativo: pico de flauta
24 horas. violeta/fondo amarillo: no se produce
descarboxilación de la lisina
3.-Pico pardo rojizo/fondo amarillo:
desaminación de la lisina.
1 2
Citrato Simons CS) Cuadro N° 102. Composición del medio de Citrato Simons.
Fundamento Fostato de amonio dihidrogenado 1g
Algunas bacterias utilizan el citrato de sodio, Fosfato depotásico 1g
como única fuente de carbono, para obtener energía y, Cloruro de sodio 5g
fosfato de amonio, como única fuente de nitrógeno. Estas Citrato de sodio 2g
bacterias que pueden utilizar el citrato también pueden Sulfato de magnesio 0,20 g
extraer nitrógeno de la sal de amonio, con producción de Agar 15 g
amoníaco (NH3) lo que alcaliniza el medio de cultivo, Azul de bromotimol 0,08 g
provocando que el indicador de pH: azul de bromotimol Agua destilada 1000
inicialmente de color verde se torne a color azul. ml
pH 6,9
Cuadro N° 103. Utilización de citrato de sodio

Prueba positiva: Desarrollo de color azul
1.- Estria una colonia intenso
aislada en la superficie del Prueba negativa: El medio conserva el color
tubo de Citrato Simons. verde original y hay ausencia de desarrollo
2.- Incubar a 37°C bacteriano.
durante 24 horas.
Positivo Negativo
UREA
Fundamento dando como producto final amoníaco. Este último
alcaliniza el medio con el consiguiente viraje del
Determina la capacidad de un microorganismo
indicador de pH rojo fenol del amarillo al rojo.
de hidrolizar la urea, por acción de la enzima ureasa,
225
Cuadro N° 104. Composición del medio base de urea

Peptona 1g
Glucosa 1g Agregar al medio de cultivo base esterilizado, solución
Cloruro de sodio 5g de urea, en concentración final 2% y fraccionar en tubos
Fosfato 2g en forma de “pico de flauta”.
monopotásico
Rojo fenol 0,012 g
Agar 15 g
Agua destilada 1000 ml
pH 6,8
Cuadro N° 105. Hidrólisis de la urea

1.- Reacción positiva: degradadores rápidos de la
1.- Sembrar con asa urea (especies de Proteus): color rojo en todo el tubo.
bacteriológica una colonia 2.-Reacción positiva lenta: degradadores lentos de la
aislada en el pico de flauta urea (especies de Klebsiella): inicialmente color rojo
del medio de urea. sólo en el pico de flauta, que gradualmente se
2.- Incubar a 37°C durante extiende a todo el tubo.
24 horas. 3.-Reacción negativa: ausencia de hidrólisis de la
urea: el medio conserva su color amarillo original.
Rojo de metilo (RM) microorganismos que pueden mantener este pH bajo

Fundamento después de incubaciones prolongadas (48 a 72 horas),
El rojo de metilo es un indicador de pH con un venciendo el sistema amortiguador de fosfatos del medio,
rango entre 6 (amarillo) y 4,4 (rojo). El pH al cual el rojo pueden ser llamadas positivas para rojo de metilo.
de metilo detecta los ácidos es mucho más bajo que el pH
Cuadro N° 106. Composición del caldo RM/VP
correspondiente a otros indicadores utilizados en medio
Polipeptona 7g
de cultivo bacteriológicos. Por lo tanto, para provocar un
cambio de color, el microorganismo en estudio debe Glucosa 5g
producir grandes cantidades de ácido del sustrato de Fosfato dipotásico 5g
hidratos de carbono que se utilice. Agua destilada 1000 ml
La prueba del rojo de metilo es una prueba pH final 6,9
cuantitativa de la producción de ácido, que requiere que Indicador de pH rojo Rojo de metilo 0,1 g en
los microorganismos positivos produzcan ácidos fuerte de Metilo 300 ml de etanol al 95%
(láctico, acético, fórmico) de la glucosa a través de la vía Agua destilada: 200 ml
de fermentación ácida mixta. Como muchas especies de
la familia Enterobacteriaceae pueden producir Intervalo de pH Entre 6 (amarillo) y 4,4
suficientes cantidades de ácidos fuertes que pueden (rojo).
detectarse mediente el indicador rojo de metilo durante
las fases iniciales de la incubación, solo los
226
Cuadro N° 107. Prueba del rojo de metilo

Prueba positiva: desarrollo de color rojo
1.- Inocular al caldo RM/VP una estable en la superficie del medio
colonia a investigar. (pH:4,4)
2.- Incubar a 37°C durante 48 horas Prueba negativa: desarrollo de color
3.- Añadir 0,5 ml del indicador rojo amarillo o naranja (pH: 6).
de metilo.
227
CAPITULO 29
PRUEBAS DE SENSIBILIDAD Y RESISTENCIA A LOS
ANTIBIÓTICOS
Introducción infección que causa cesa al tratamiento con dicho
En general, la función básica de quienes trabajan fármaco.
en el laboratorio de bacteriología clínica es proporcionar
información, con la cual los médicos puedan diagnosticar Resistente.- Este término indica la capacidad del
y tratar enfermedades infecciosas. Ante una enfermedad microorganismo de soportar la acción farmacológica del
transmisible, la identificación de un patógeno específico antibiótico sin sufrir inhibición o muerte bacteriana, y
es de suma importancia para el epidemiólogo de un que la infección que causa no cesa al tratamiento con
hospital o el trabajador de salud pública. La dicho antibiótico.
identificación de un microorganismo que ha sido aislado
en una muestra clínica a menudo beneficia al paciente, al Intermedio.- Es el periodo de transición entre las cepas
identificar en forma precisa una enfermedad hasta sensibles y las resistentes, donde las bacterias, son
entonces incierta, y ayuda al médico a elegir la moderadamente sensible a un antibiótico, dicho
antibioterapia inicial para el tratamiento. Sin embargo, antibiótico puede utilizarse en el tratamiento en dosis más
los dos elementos de información más importantes para altas, por ser poco tóxicos o porque se concentran bien,
un médico son: 1) si está o no presente un agente en el foco de infección (por ejemplo, en la orina).
infeccioso y 2) cuál es el antibiótico que proporcionaría
un tratamiento adecuado.
ANTIBIOGRAMA
Principios generales
Las pruebas de sensibilidad a los Concepto
antimicrobianos, evalúan la capacidad de un antibiótico u El antibiograma es un procedimiento
otro fármaco antimicrobiano para inhibir in vitro el laboratorial, que consiste en determinar la sensibilidad o
desarrollo de las bacterias. Esta capacidad puede resistencia, que presentan las bacterias, cuando son
determinarse en laboratorio por dos métodos: el de sometidas a la acción de los antibióticos. Es obvio que la
difusión y el de dilución. respuesta que exiban las bacterias frente a los
Antes de ingresar al desarrollo de estos métodos, es antimicrobianos nunca será similar a lo que ocurre en el
necesario recordar la definición de algunos términos organismo humano; sin embargo como fruto del análisis
frecuentemente utilizados, como: antibiótico, toxicidad estadístico, de la información derivada de muchos
selectiva, sensible, resistente, intermedio, mecanismos estudios y a partir de la normalización de los
de acción de los antibióticos, mecanismos de resistencia. procedimientos laboratoriales, es que los resultados
Además de hacer mención a los diferentes grupos de obtenidos in vitro alcanzan un valor significativo de
antimicrobianos conocidos. orientación para que el médico, realice el tratamiento
antimicrobiano más adecuado en las infecciones causadas
Antibiótico.- Es una sustancia química derivada o por bacterias.
producida por microorganismos, que tienen la capacidad Las bacterias pueden exhibir un comportamiento
en bajas concentraciones de inhibir el crecimiento, matar de susceptibilidad que básicamente consiste en aquella
bacterias y otros microorganismos presentes en un capacidad potencial para poder interactuar con los
paciente infectado, logrando que tejidos y fluidos antimicrobianos, produciéndose a consecuencia de este
corporales queden y se mantegan asépticos y libres de la fenómeno alteraciones reversible o irreversible en el
infección. crecimiento bacteriano; por otra parte implica también en
un sentido más general que el proceso infeccioso causado
Toxicidad selectiva.- Este término implica que un por una cepa bacteriana en estudio puede ser tratada
antibiótico es nocivo para un microorganismo sin serlo apropiadamente con la dosis del antimicrobiano
para el paciente, es decir que el medicamento en una recomendada para el tipo de infección y la especie
concetración tolerable para el paciente, puede dañar al infectante, a menos que hubiera contraindicaciones.
microorganismo. En algunos casos es posible detectar en el
laboratorio, cepas que presentan una respuesta
Sensible.- Un microorganismo se considera “sensible” a intermedia, lo que significa que estas pueden ser
un antibiótico cuando la acción farmacológica del inhibidas por concentraciones más elevadas del
antibiótico inhibe o impide su desarrollo; y que la antimicrobiano, siempre que las dosis usadas puedan ser
aumentadas o que sean concentradas fisiológicamente en
228
el tejido infectado. Finalmente existen otros casos en los entonces se ha popularizado por su costo y la
que bacterias exhiben un comportamiento resistente, lo reproductibilidad de sus resultados, de hecho en nuestro
que significa que se estaría manifestando la capacidad país también se utiliza este método.
potencial de mostrar un estado refractario a la acción de
los antimicrobianos, causado por fenómenos genéticos o Norma para la ejecución del antibiograma
no genéticos; siendo posible verificar en el laboratorio Para normalizar todos los procedimientos
que estas cepas no son inhibidas por las concentraciones laboratoriales de susceptibilidad en general y el de Bauer-
séricas normalmente alcanzadas a dosis habituales. Kirby en particular, existen normas que rigen en
Llegados a este punto es también necesario determinadas regiones geograficas, por ejemplo la norma
referirnos a los llamados puntos de corte (breakpoint), para Francia está dada por la Sociedad Francesa de
téminos usados para explicar que los diámetros de los Microbiología, en Inglaterra rige la norma de la Sociedad
halos de inhibición determinados por el método de Británica de Antimicrobianos y en América y otras
difusión, correlacionan inversamente con la CIM regiones del área, rige la norma del National Committee
(Concentración Inhibitoria Mínima). Cuanto más baja es for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), actualmente
la concentración del antibiótico para inhibir el desarrollo denominada, Comité del Clinical Laboratory Standards
de la bacteria (CIM), mas grande es el halo de inhibición Institute (CLSI). A través de su Subcommittee on
del antimicrobiano (método Kirby- Bauer). Antimicrobial Susceptibility Testing, publica cada uno o
. dos años las normas actualizadas para ejecutar estos
Reglas de oro procedimientos.
Para desarrollar cualquier método que permita Bolivia trabaja con estas normas desde el año 1997,
detectar la respuesta bacteriana frente a los siguiendo además las orientaciones que emite el Instituto
antimicrobianos in vitro, se debe respetar un conjunto de Nacional del Laboratorios de Salud “Dr. Nestor Morales
reglas que imprescindiblemente se deben seguir, de Villazon” –INLASA a través de sus laboratorios
manera que se asegure una correcta interpretación de los nacionales de referencia tanto en bacteriología clínico
resultados obtenidos. Estas reglas han sido llamadas de como en el de Mycobacterias (tuberculosis).
oro por su carácter de obligatoriedad y aplicabilidad en
beneficio de un trabajo idóneo: METODO DE DIFUSION BAUER –
1.- Para llevar a cabo un antibiograma, siempre se debe KIRBY
trabajar con cepas puras (aislados) e identificadas
apropiadamente. Antes de iniciar el procedimiento es necesario
2.- El antibiograma se debe ejecutar con cepas comentar acerca de los medios de cultivo que se utilizan
bacterianas que se hallen en la fase de crecimiento en este procedimiento. Dado que este método se halla
exponencial. estandarizado para bacterias no exigentes desde el punto
3.- Las cepas bacterianas serán estudiadas por métodos de vista nutricional (salvo contadas excepciones) es que
de difusión (con discos) y deben corresponder a bacterias se utiliza el medio de Mueller – Hinton, debido a su baja
aeróbias o anaerobias facultativas. cantidad de ácido para amino benzoico, residuos de
4.- Así mismo estas cepas deben ser de crecimiento timina–timidina, en algunos casos cationes divalentes
rápido y aislamiento sencillo, salvo algunas excepciones. ajustados, transparencia para la correcta lectura de halos
y buena reproductibilidad de lote a lote.
Clasificación de los métodos En aquellos casos de bacterias nutricionalmente
En el laboratorio podemos utilizar dos grande exigentes (aislamiento fastidioso) se utilizan: Agar HTM
opciones para ejecutar pruebas que detecten la (Haemophilus Test Medium) enriquecido con hematina
susceptibilidad y/o resistencia de las bacterias frente a los bovina y NAD para el desarrollo de Haemophilus
antimicrobianos. influenzae, Agar GC enriquecido con un suplemento de
composición definida (cisteína, guanina, tiamina, vit. B
1.- Métodos de difusión: 12, NAD, adenina, L-glutamina, glucosa y nitrato férrico:
a) Método de Bauer – Kirby gran parte de este suplemento contiene el Isovitalex),
b) Método de E- test (epsilón test) todo esto para el desarrollo de Neisseria gonorrhoeae,
Agar Mueller – Hinton enriquecido con 5% de sangre
2.- Métodos de dilución: desfibrinada de carnero para el desarrollo de
a) Método de la macrodilución Streptococcus pneumoniae y eventualmente otros
b) Método de la microdilución estreptococos.
Es importante apuntar que la profundidad de esto
Sin duda alguna, el método de antibiograma más medios de cultivo ya dispensados en las cajas petri de
utilizado y difundió en todo el mundo es el de Bauer- tamaño normal (100 mm de diámetro) debe ser igual a 4
Kirby, estos autores junto a Sherris y Turck, publicaron mm (25 a 30 ml por cada caja).
las directrices de este procedimiento en 1966 y desde
229
Dentro de los programas de control de calidad interno en con diámetro de 150 mm se puede colocar hasta 12
la preparación de estos medios se debe considerar: el pH, discos. También es necesario considerar que entre disco y
optimo: 7.2 a 7.4, humedad, efecto de residuos de timina disco debe existir una distancia mínima de 2.5 cm. Para
o timidina y variación en la composición de cationes facilitar esta disposición se puede marcar con un lápiz
divalentes (Ca++ y Mg++ principalemente). graso en la parte externa de las cajas petri (contratapa) los
puntos en los cuales luego se colocarán los discos.
Procedimiento Existe también “despachadores automáticos de
1.- A partir de un cultivo primario o puro (aislado) e discos de antibiograma, que presentan cartuchos con los
identificado, tómese con un asa bacteriológica 3 a 5 discos que se pueden utilizar, de manera que
colonias dependiendo del tamaño de estas, suspenderlas simplemente se coloca este aparato sobre las cajas ya
en un tubo de hemólisis que contenga 3 a 5 ml de suero sembradas y se procede a presionar el contro de
fisiológico, caldo Mueller – Hinton o agua destilada. despacho, con lo cual caerán los discos sobre la caja.
2.- De acuerdo al microorganismo, en algunos casos se
ajusta directamente la turbidez y en otros casos se incuba IMPORTANTE.- Guardar los discos a 4°C y extraerlos
hasta alcanzar la turbidez necesaria. Esta turbidez debe por lo menos 2 horas antes de utilizarlos para que se
ser igual a 0.5 de la escala de McFarland (1 a 2 x 108 atemperen.
UFC de enterobacterias/ml), para lo cual se debe ajustar 5.- Incubar las cajas petri invertidas a 35°C dentro de los
visualmente utilizando una tarjeta blanca que contiene 15 minutos posteriores a la colocación de los discos. Sólo
líneas negras de diferente grosor (tarjeta de Vickerham) en el caso de Haemophilus influenzae, Neisseria
que servirán de contraste para la comparación simultanea gonorrhoeae y Streptococcus pneumoniae se deberán
con el tubo patrón de turbidez y el inóculo preparado. incubar con un 5% de CO2 (método de la vela).
Este patrón de turbidez está compuesto por sulfato de 6.- Lectura e interpretación.- Despues de 18 horas de
bario (BaSO4) que se prepara mezclando 99.4 ml de incubación a 35°C se procede a medir los halos que se
H2SO4 al 1%(10 ml/l) y 0.6 ml de Cl2Ba al 1% (10 G/l), hubieran presentado, para lo cual se utiliza una regla. En
el mismo se coloca en un tubo idéntico al que se prepara el caso de que el microorgansimo estudiado sea un
el inóculo y conservados en la oscuridad a temperatura estafilococo o un enterococo incubar hasta las 24 horas
ambiente; estos patrones deben ser renovados por lo para leer la oxacilina y la vancomicina respectivamente.
menos cada año. Para confirmar la densidad se puede A veces es posible observar en cepas de Proteus spp un
utilizar un espectrofotómetro en el que la lectura de velo del “swarming” en el interior de los halos. Este debe
absorbancia con filtro de 625 nm debe ser igual a 0.08 – ser ignorado; en el caso de que existan algunas colonias
0.10. En la actualidad también se utiliza un colorímetro en el interior del halo, estas pueden ser colonias
de fácil uso (VITEK) que permite ajustar el inóculo en mutágenas, en este caso se mide el diámetro sin
forma rápida a 0.5 de McFarland. considerarlas, sin embargo es conveniente realizar un
3.- Con un hisopo esteril, previamente humedecido con el Gram de dichas colonias e identificarlo para descartar
inóculo y presionando el mismo contra las paredes del que sea la misma bacteria que ha creado resistencia o una
tubo para desechar el exceso de muestra, proceder a contaminación de otra bacteria.
depositar la muestra en el medio de cultivo ralizando una
X, luego diseminar la muestra en toda la superficie del 7.- La interpretación se realiza con tablas provistas por la
medio de cultivo, realizando la siembra en tres NCCLS: National Committee for Clinical Laboratory
direcciones (siempre junto a la llama del mechero) Standars. Ahora CLSI: Comité del Clinical Laboratory
intentando no volver a pasar por donde ya se sembró standards Institute., de maera que en estos documentos se
(hacer rotar la caja 60° en cada siembra), dejar reposar 5 pueden encontrar todos los puntos de corte, lectura de
a 15 minutos las cajas a temperatura ambiente. halos, su correlación con los valores de CIM, y la
4.-Proceder a colocar los discos de antibiograma (discos interpretación (susceptible, intermedio o resistente) para
de papel filtro impregnados con un antimicrobiano, y a cada grupo bacteriano. Es importante también establecer
una concentración establecida), utilizando una pinza que todo el procedimiento, así como las lecturas se debe
anatómica flameada levemente a la llama del mechero. realizar con el correspondiente control de calidad interno.
En las cajas petri con un diámetro de 100 mm se debe
colocar como máximo hasta 5 discos y en las cajas petri
230
Fig.N° 202. Resultado de un antibiograma donde se observa la sensibilidad y resistencia de la E. coli frente a tres antibióticos. Cepa A, es sensible a los
tres antibióticos y cepa B es sensible a gentamicina y cefotaxina pero resistente a la amoxicilina
.
Cuadro N° 108. Ejemplo de una tabla de interpretación de los resultados de un antibiograma
Antibacteriano Carga Diámetro (mm) Comparación con el
Disco (ug) CIM (ug/ml)
R I S R S
Ampicilina 10 ug <13 14-16 >17 >32 <8
Cefotaxime 30 ug <14 15-22 >23 >64 <8
Cuadro N° 109. Antibioticos de uso más frecuente en el antibiograma

ESTAFILOCOCO ENTEROCOCOS NEISSERIAS UROCULTIVO COPROCULTIVO INFECCIONES
(adultos y niños) Y NO (adultos) (Salmonellas POR
ENTEROCOCOS Shigellas, adultos, COLIFORMES
DEL GRUPO D niños y gestantes) (secreción vaginal
(niños y adultos) adultos)
Penicilina Cloranfenicol Penicilina Ampicilina (exc. Ampicilina Ampicilina (exc.

Oxacilina Vancomicina Tetraciclina Klebsiella y Cotrimoxazol Klebsiellas y
Vancomicina Tetraciclina Ciprofloxacino Enterobacter) Ac. Nalidixico Enterobacter)
Cloranfenicol Ciprofloxacino Beta lactamasa Norfloxacino Cloranfenicol Cotrimoxazol
Eritromicina Gentamicina de Cotrimoxazol Cefotaxime Ciprofloxacino
Clindamicina alta carga Nitrofurantoina Cefotaxime
Gentamicina (exc. Proteus) Gentamicina*
Ciprofloxacino Cefotaxime Cloranfenicol*
A.Nalidixico
Cefalotina
231
NEUMOCOCOS ENTEROCOCO MORAXELLA UROCULTIVO COPROCULTIVO INFECCIONES

(adultos, niños (secrecion SPP (niños y (E. coli, adultos, POR
gestantes) vaginal) gestantes) niños gestantes) COLIFORMES
(niños y gestante)
Oxacilina Vancomicina Beta lactamasa Ampicilina Ampicilina Ampicilina

Vancomicina Ac. Nalidixico Etest Cotrimoxazol Cotrimoxazol Ampi+sulbactam
Eritromicina Norfloxacino Ac. Nalidixico Ac. Nalidixico Cotrimoxazol
Tetraciclina Gentamicina de Ampi+sulbactam Cloranfenicol Gentamicina
Cotrimoxazol alta carga Cefotaxime Cefotaxime (exc.
Cloranfenicol Ampi +sulbactam Klebsiellas y
Clindamicina Enterobacter)
Cloranfenicol*
HAEMOPHILUS GARNERELLA UROCULTIVO INFECCIONES PSEUDOMONAS

SPP VAGINALIS CON EXTRA Y
ENTEROCOCOS INTESTINALES ACINETOBACTER
(Salmonellas, SPP (adultos y
adultos, niños niños)
gestantes)
Beta lactamasa Son sensibles Nitrofurantoina Ampicilina Ciprofloxacino
Cloranfenicol al Vancomicina Cotrimoxazol Gentamicina
Cefotaxime Metronidazol y Norfloxacino Cloranfenicol Cefotaxime
Ampicilina Tinidazol. Tetraciclina Cefotaxime Tetraciclina
Ampi+sulbactam Ciprofloxacino Amikacina
Ciprofloxacino Ceftacidima*
Cefoperazona*
Norfloxacino*
No se conoce cepas de estreptococos beta hemolítico resistente a la penicilina, ampicilina, cefotaxime, ceftriaxone, cefipime
y meropenem.
* Multirresistencia.
BREVE COMENTARIO SOBRE LOS forma decreciente en mg/l o ug/ml (cualquiera sirve), en
MÉTODOS DE DILUCION nuestro ejemplo el primer tubo contiene 32 mg/l, el
segundo tubo tendrá la mitad de esta concentración: 16
mg/l, el tercer tubo 8 mg/l así sucesivamente hasta el
Concentracion minima inhibitoria (CIM) désimo primer tubo, con 0,03 mg/l. Luego, añadimos a
por macrodilución cada tubo una suspensión calibrada de microorganismos
a evaluar (0,5 MacFarland), se incuba a 35°C durante 18
La concentración mínima inhibitoria (CMI), es horas. Al final del periodo de incubación, se examinan
un procedimiento laboratorial, que consiste en determinar visualmente los tubos para detectar turbidez. Se podrá ver
la mínima concentración de antibiótico que inhibe el primero que algunos tubos con caldo, que tienen mayor
desarrollo de una determinada bacteria. concentración de antibiótico se encuentran transparentes
debido a la inhibición del crecimiento bacteriano, Otros
Procedimiento tubos en cambio, que tienen menor concentración de
Para determinar la CIM de un antibiótico para antibiótico presentan turbidez. Por lo tanto, el tubo con la
una bacteria por la técnica de macrodilución primero, se menor concentración de antibiótico que ha inhibido el
prepara una serie de tubos que contienen una cantidad desarrollo de la bacteria indica la concentración
determinada de caldo de cultivo Mueller-Hinton, a los inhibitoria mínima (CIM), en el ejemplo indicado es el
que se incorpora una cantidad de antibiótico diluida en tubo con 0,25 mg/l. (CIM=0,25mg/l).
232
Fig. N° 203. Procedimiento de la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI). En este ejemplo la CIM es 0.25 mg/l
(Fuente: Struhetrs, 2005).
Un antibiótico se considera adecuado para tratar Concentracion minima inhibitoria (CIM)

un infección causada por una bacteria cuando, por difusion: Epsilon- test
administrado en dosis terapéuticas (es decir, no tóxicas), Es una prueba de difusión en gradiente, llamada
alcanza en el foco de infección concentraciones cuatro o también Etest. Esta prueba utiliza una tira de plástico de
cinco veces superiores a la CIM (1 mg/l, siguiendo con el 50 mm de longitud por 5 mm de ancho que contiene un
ejemplo anterior). antimicrobiano calibrado con valores de concentración
Basandose en diferentes investigaciones en inhibitoria mínima (CIM) que abarca 15 diluciones
animales y humanos, se han podido determinar las dobles en ug/ml, cuando se coloca en un medio sólido de
concentraciones que alcanzan los antibióticos en los Mueller-Hinton, sembrado previamente con una bacteria,
diversos órganos o tejidos (sangre, pulmón, riñón, LCR, y luego incubado, el antibiótico se difunde al medio
huesos, etc); por tanto, bastará conocer la concentración desde la tira (en forma similar a lo que sucede en la
inhibitoria mínima (CIM) de un antibiótico para el prueba de difusión con discos), de manera que la
microorganismo aislado para saber si es superior o concentración del mismo va de una mayor hacia una
inferior a la esperada en el lugar de la infección y, por menor concentración a medida que nos acercamos al
tanto, si cabe una respuesta terapéutica o no. Sin extremo distal de esta cinta. Con este procedimiento no
embargo, en la práctica, una bacteria se considera se obtendrá halos de inhibición circulares, sino elipses de
sensible cuando las concentraciones plasmáticas (sangre) las zonas de inhibición, y allí donde se corten los dos
del antibiótico son cuatro veces superiores a la CIM, ya brazos de la elipse se podrá leer el valor impreso en la
que las concentraciones plasmáticas se alcanzan en la tira de Etest que corresponde a la contración inhibitoria
mayoría de los tejidos, excepto algunos como el LCR, los mínima (CIM).
huesos, la próstata o el globo ocular, en los que sólo
alcanzan concentraciones terapéuticas determinados
antibióticos. Procedimiento
Entre los antimicrobianos activos frente a un 1.- Atemperar las tiras Etest (30 minutos antes del
microorganismo, los que por razones de eficacia procedimiento).
terapéutica, farmacocinética y ausencia de toxicidad, son 2.- Sembrar el Mueller-Hinton con el inóculo (0,5
los más adecuados para ser administrados se denominan MacFarland) preparado de la bacteria a estudiar y dejar
“de elección”. secar 10 a 15 minutos.
2.- Colocar la tira de Etest al agar Mueller-Hinton con la
ayuda de una pinza con la escala de CIM hacia arriba.
3.- Incubar 35°C. 18 horas.
233
Resultado: ampicilina+sulbactam, amoxicilina+ácido

Leer la CIM en el punto en el que un halo de inhibición clavulánico o piperacilina+ tazobactam. En la
bien definido intersecciona la tira; éste es el valor de la actualidad también se debe asumir que casi
CIM. todas las cepas son penicilino- resistentes.
 En los laboratorios hospitalarios o de centros de
salud, en el caso de hemófilos, neiserias y
moraxelas, es suficiente con realizar pruebas de
detección de beta-lactamasa (Prueba de
Cefinase), dado que sólo el laboratorio de
referencia posee la tecnología y los medios para
poder desarrollar sistemas de difusión en agar o
de dilución. Es obvio que si la cepa en estudio
es beta-lactamasa POSITIVA, no se podrá
utilizar terapeúticamente penicilina, ampicilina
o amoxicilina.
Fig.N° 204. Ejemplo de la CIM del antimicrobiano para la bacteria  En el caso de Enterococus, se puede investigar
analizada es de 0,032 mg/l. (Fuente: Struthers, 2005). la resistencia a los aminoglucósidos (altos
niveles de resistencia) con discos que tienen
El Etest es un método alternativo para el estudio cargas altas de estos antimicrobianos, por
cuantitativo de la sensibilidad antimicrobiana del que ejemplo, de manera rutinaria se utilizan
cabe destacar su sencillez y buena correlación con la discos de gentamicina con una carga de 10
técnica estándar de dilución. Se considera adecuado para ug, para enterococos se debe utilizar discos
el estudio de muy diversas bacterias, entre las que con 120 ug (R=6, I=7-9 y S=>10); Por otra
destacan, además de las bacterias no exigentes parte los enterococos son resistentes naturales a
(enterobacterias, bacilos gramnegativos no las cefalosporinas, por lo tanto no deberán
fermentadores, estafilococos, enterococos), bacterias figurar en el antibiograma. A la clindamicina y
exigentes (Neisserias, hemófilos, estreptococos, entre el cotrimoxazol pueden parecer activos in vitro
otras), bacterias anaerobias nocardias y micobacterias. pero no son eficaces desde el punto de vista
clínico y no deben ser comunicados como
INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA sensibles.
 El método de Bauer-Kirby solo puede ser  Enterococcus spp y Klebsiellas spp son
utilizado para los siguientes microorganismos: resistentes naturales a la ampicilina, por lo tanto
Enterobacterias, estafilococos, algunos no deben ser probados en pruebas de
estreptococos (neumococos), enterococos, antibiograma de rutina con este antimicrobiano.
Pseudomonas, acinetobacter, vibrio cholerae,  Proteus spp, Morganella spp y Providencia spp
Haemophilus influenzae y Neisseria en infecciones urinarias no deben ser
gonorrhoeae. confrontados con nitrofurantoina, dado que estas
 Para otras bacterias por ejemplo, cepas son fuertemente productoras de ureasa, lo
corynebacterias, etc, se puede realizar pruebas que alcaliniza su medio inactivando esta droga.
de concentración inhibitoria mínima (CIM) por  En Streptococcus pyogenes no se realiza
macro dilución. antibiograma de rutina ya que es uniformemente
 Solo se debe poner un representante de cada susceptible a la penicilina, lo mismo que en
grupo de antimicrobianos, salvo aquellos casos Gardnerella vaginalis dado que es
en los que es necesario añadir alguno otro más, uniformemente susceptible al metronidazol y el
debido a que no se puede predecir la tinidazol.
susceptibilidad o resistencia de manera cruzada.  En Stretococcus pneumoniae se debe realizar un
 En el caso del Staphylococcus aureus, si este tamizaje de oxacilina para predecir cepas con
resultara meticilina-resistente (probado con susceptibllidad disminuida a la penicilina (SDP),
oxacilina), se debe asumir que esta cepa también todo esto dentro del sistema de Bauer-Kirby.
es resistente a todos los betalactámicos Así mismo se puede incluir en el panel de discos
actualmente desarrollados, y con un alto grado a la eritromicina, tetraciclina, vancomicina y
de certeza también serán resistentes a los cloranfenicol (en algunos casos y solo bajo
aminogucósidos, macrólidos, tetraciclinas y estricto control de calidad se puede incluir un
lincosaminas. disco de cotrimoxazol).
 Si el Staphylococcus aureus es meticilino  En el caso de los macrólidos solo es necesario
susceptible pero penicilino-resistente, se podrá poner un disco de eritromicina, los resultados se
utilizar cualquier betalactámico asociado con un
inhibidor de beta-lactamasa. Por ejemplo
234
pueden extrapolar a la claritromicina, tercera generación. Los aminoglucósidos y las

roxitromicina y la azitromicina. cefalosporinas de primera y segunda generación
 En el caso de las tetraciclinas, sólo se puede pueden aparecer activos in vitro pero no son
poner un disco de este antimicrobiano, los efectivos clínicamente.
resultados se extrapolan a la doxiciclina y  En el caso de Haemophilus influenzae se puede
minociclina. investigar además de la producción de beta
 Para Streptococcus pneumoniae aislado del LCR lactasa, la producción de cloranfenicol acetil
sólo debe evaluarse contra uno o más de los transferasa (CAT), que si está presente
siguientes antibióticos: penicilina, cefotaxima, automáticamente descarta al coloranfenicol del
ceftriaxona, meropenem y vancomicina. esquema terapéutico.
 En el caso de Salamonella y Shigella spp, sólo  Es inadecuado el uso del cloranfenicol para las
se debe poner discos de ampicilina, una infecciones de las vías urinarias porque no se
quinolona y cotrimoxazol excreta por la orina.
(sulfametoxazol+trimetoprim); en procesos
severos o extraintestinales se puede añadir un
disco de cloranfenicol y una cefalosporina de
235
CAPITULO 30
UROCULTIVO
Introducción Riñones.- Órgano de filtración de la sangre, encargado
Urocultivo, es un procedimiento laboratorial que de eliminar compuestos azoados (Ácido úrico,
consisten en el cultivo, identificación y antibiograma del compuestos nitrogenados, etc), mantiene el equilibrio de
agente causal de una infección urinaria. agua y electrolitos; para un equilibrio ácido base y la
Las infecciones urinarias pueden afectar la regulación de la presión arterial.
vejiga, los uréteres y los riñones. Las infecciones de la La Pelvis renal, Los Uréteres, Vejiga y uretra; son
vejiga urinaria, denominadas cistitis, dan lugar a un conocidas como vías urinarias, su función es conducir la
síndrome caracterizado por micción dolorosa frecuente orina formada en los riñones hacia el exterior del cuerpo.
(disuria y polaquiuria) con sensación contínua de
necesidad de orinar (tenesmo); generalmente cursan sin ¿Como llegan las bacterias a las vías
fiebre y con escasa afectación general. Las infecciones urinarias?
que afectan a los uréteres y los riñones, denominadas
l.- Contaminación ascendente: La mayoría de las
pielonefritis, se manifiestan por fiebre, escalofríos , dolor
infecciones urinarias se da por este mecanismo, es decir
lumbar y afectación del estado general, que se asocia a
que las bacterias ascienden o suben desde la uretra, hacia
disuria, polaquiuria y tenesmo urinario cuando existe,
la vejiga, uréteres y culminan en la pelvis renal, pudiendo
como es habitual, una cistitis concomitante.
con el tiempo también invadir parénquima renal
Las infecciones urinarias están causadas, en su
(infección crónica que produce cicatrización con fibrosis
mayoría, por bacterias de la flora intestinal, como
que reduce la función renal). Por ejemplo: Escherichia
Escherichia coli, y son una de las causas más frecuentes
coli, de la región anal, invade introito, vagina, uretra, de
de bacteriemia, que se manifiesta por fiebre, escalofríos,
aquí asciende hasta llegar a la vejiga y producir cistitis.
y ocacionalmente hipotensión y shock séptico.
El estudio microscópico del sedimento centrifugado de la
orina, permite constatar la infección al visualizar las
bacterias abundantes y los leucocitos. La confirmación de
la infección y la posibilidad de realizar un antibiograma
del agente causal requiere efectuar un urocultivo.
Las vías urinarias estan constituidos por los
siguientes componentes:
Fig.N° 206. Varios microorganismos ingresan a las vías urinarias por

contaminación con heces.
2.- Via hematógena: de manera menos frecuente las

bacterias durante una bacteriemia o septicemia llegan al
parénquima renal, vencen al glomérulo y se instalan en el
intersticio renal, las bacterias involucradas en este hecho
Fig. N° 205. Componentes de las vías uriarias (Fuente: Struthers, son generalmente las Salmonellas spp; S. Aureus,
2005).
Mycobacteriun tuberculosis, Brucella spp.
Cuadro N° 110. Factores que influyen en al colonización e infección de las vías urinarias
FACTORES - Coito
FISIOLÓGICOS - Embarazo
FACTORES - Uretra corta en mujeres, lo que se constituye en una barrera
FÍSICOS Y nada eficaz, a diferencia de la uretra masculina que es una
MECÁNICOS barrera eficaz.
- El prepucio húmedo y falto de higiene contiene abundante
flora bacteriana.
- Obstrucción de las vías urinarias, hipertrofia prostática,
función vesical defectuosa como en el caso de los
236
parapléjicos.
- Reflujo vesicoureteral, favorece el ascenso de las bacterias.
- Cateterismo vesical, facilita el ascenso de las bacterias de
la uretra hacia la vejiga.
FACTORES - En pacientes diabéticos, la glucosuria, es un factor que

METABÓLICOS favorece la proliferación de las bacterias.
FACTORES - En pacientes inmunosuprimidos o tratamiento prolongado
INMUNOLÓGICOS con antimicrobianos, sus defensas están disminuidas,
favoreciendo el desarrollo de bacterias patógenas.
FACTORES - La presencia de antígenos capsulares de la bacteria inhiben
DEPENDIENTES la fagocitosis.
DE LOS AGENTES - La producción de hemolisinas en forma de exotoxinas
MICROBIANOS producen daño renal.
- La producción de ureasa (proteus) desdobla el ácido úrico
de la orina produciendo amoniaco alcalinizando el medio
favorable para su desarrollo.
- La presencia de pili en su estructura favorece a la bacteria
para su adhesión al epitelio uretral y vesical.
Fig. N° 207. La uretra corta en mujeres, se constituye en una barrera nada eficaz, a diferencia de la uretra masculina que es una barrera eficaz que impide la
llegada de las bacterias a la vejiga (Fuente: Struthers, 2005).
Fif. N° 208. Ascenso por vía uretral de la Eschrichia coli y desarrollo de una cistitis en una mujer (Fuente: Struthers, 2005).
237
Los agentes causales más frecuentemente aislados de  Cerrar muy bien el colector, colocar en un
infecciones urinarias son los siguientes: recipiente con boca ancha, identificando
previamente, para llevar inmediatamente al
 Escherichia coli. laboratorio.
 Proteus mirabilis Algunos laboratorios actualmente ya no utilizan este
 Staphylococcus aureus procedimiento, por lo que recomiendan tres alternativas:
 Staphylococus coagulasa negativos
 Klebsiella pneumoniae a) Al acecho.- Al desconocer cual será el momento en
 Enterococcus faecalis que el niño miccionará, el operador luego de realizar el
 Pseudomona aeruginosa aseo al niño, deberá estar atento el momento en que este
empieza a miccionar para tomar la muestra que
 Cándida albicans.
seguramente será el segundo chorro.
Recoleccion de la de muestra b) Punción suprapúvica.- preferentemente para
Toma de muestra de orina en la mujer neonatos graves con retención urinaria. Es realizado por
adulta: médicos entrenados. Son suficientes 10 ml de orina.
 Recolectar la primera orina de la mañana
(tiempo de retención mínima, 3 horas). c) Cateterización.- En pacientes con retención urinaria,
 Lavar la zona genital con agua y jabón, de La orina se toma con una jeringa, pinchando la sonda en
adelante hacia atrás (utilizar preferiblemente el fragmento de goma existente para este propósito.
torundas de algodón). Jamas debe tomarse la muestra de la bolsa. Si embargo
 Secar áreas genitales con toalla limpia. este procedimiento presenta el inconveniente del riesgo
 Colocar en la vagina un tampax (tapón vaginal de una infección por ascenso de microorganismos por la
de algodón o gasa). sonda.
 Abrir con cuidado el frasco esteril, colocando la
tapa con la boca hacia arriba.
 Con los dedos de la mano izquierda, abrir los
labios vaginales.
 Eliminar el primer chorro de la orina
aproximadamente10 ml a un bacin.
 Recolectar el siguiente chorro (chorro medio)
20 a 50 ml.
 Llevar el frasco con la orina inmediatamente al
laboratorio.
Toma de muestra en hombres: Fig.N°. 209. La introducción de una sonda vesical tiene el riesgo de
 Se debe retraer el prepucio e higienizar el glande introducir microorganismo de la piel hacia la vejiga y causar una cistitis
y meato uriario con agua y jabón. (Fuente: Struthers, 2005).
 Secar con toalla limpia.
 Se elimina el primer chorro (10 ml.) Conservación de la muestra
 Se recolecta en frasco esteril la siguiente La muestra de orina debe ser inmediatamente
fracción de orina (20 a 50 ml.) procesada, sin embargo si esta tiene que sufrir algún
retraso, se debe refrigerar a 4 a 6 grados centígrados
Toma de muestra en niños que no retienen la (Heladera) por un máximo de 24 horas.
Para el correcto procesamiento de la muestra es
micción: (varones y mujeres) conveniente considerar algunos datos del paciente y la
 Lavar áreas genitales con agua y jabón. muestra: Edad, sexo, síntomas, antecedentes de infección
 Secar bien las áreas genitales. urinaria, medicación previa con antibióticos, conocer las
 Colocar el colector, evitando que toque con condiciones de toma de muestra: chorro medio, punción
otras áreas. suprapúvica, sondaje y conservación y otros.
 Cambiar el colector cada 2 horas haciendo
previamente una nueva limpieza. Examen directo
 Después de la micción, retirar con cuidado el Consiste en la observación directa del sedimento de la
colector, desprendiendo de arriba hacia abajo, orina, que nos pemitirá definir si corresponde o no
nunca al revés. realizar el cultivo.
238
Se considera que un sedimento de orina no es normal  homogenizar la orina.

cuando una gota del centrifugado de 10 ml de orina (5  Tomar una ansada de orina con el asa
min. a 2.500 rpm.) observada entre porta y cubre, bacteriológica calibrada (cap. 0.01 ml.)
contiene más de 5 leucocitos por campo y abundantes  Inocular en el agar sangre realizando una estria
bacterias (objetivo 40X). Esta pude estar relacionada con al centro del agar.
una Infección Urinaria.  El inóculo se disemina en ángulos rectos de un
extremo de la placa al otro.
Tinción de Gram. El frotis del sedimento teñido con  Se gira la placa 90 grados y se disemina la
Gram, en el que se visualiza abundante flora muestra hasta cubrir toda la superficie.
monomicrobiano (correlacionada con un recuento de  Se gira 45 grado y se procede de la misma
>105 UFC) junto con abundantes leucocitos y ausencia de manera.
células epiteliales es sugestivo de una infección urinaria  Incubar a 35 grados centígrados durante 24
(la morfología bacteriana encontrada en esta observación
horas.
ayuda al control de calidad respecto a la bacteria que
desarrolle en el cultivo, que desde luego debe tener la
misma morfología).
Tira reactiva. Complementariamente, se puede mojar

una tira reactiva de orina para observar la positividad o
no de leucocitos y nitritos. La observación de nitritos (+),
puede se debida a la presencia de enterobacterias como E.
coli que degradan los nitratos a nitritos de la orina, lo
cual puede ser indicativo de infección urinaria, sin
embargo un resultado de nitritos negativo no debe
descartar una infección urinaria ya que algunas bacterias
como los Enterococcus estando presentes en la orina, no
reducen los nitratos a nitritos (son nitritos negativos). Por
lo que correríamos el riesgo de equivocarnos en un 10%,
ya que las estadísticas muestran ese porcentaje de falsos Fig. N° 210. Siembra de orina, por saturación de superficie (Fuente:
negativos (si solo usamos la tira para diagnosticar una Koneman, 2008).
Infección Urinaria).
Al día siguiente observar la placa petri sembrada, si
Ahora bien, la combinación los nitritos y
no hubo desarrollo, se debe incubar otros 24 horas, si al
leucocitos positivos de la tira reactiva, con la observación
cabo de las 48 horas no existe desarrollo, se informa
de abundantes bacterias y leucocitos en el sedimento,
como cultivo negativo.
tiene una sensibilidad de hasta un 93% de que se trate de
En caso de desarrollo, observar si existe colonias en
una infección urinaria. Por lo que se recomienda realizar
ambos medios (agar sangre y agar Mac Conkey); en este
el cultivo, la idetificación de la bacteria y el
caso, se trataría de una enterobacteria (estas bacterias
antibiograma.
desarrollan tanto en Mac conkey como en agar sangre), si
En cambio, cuando los resultados de estos
solo hubo desarrollo en agar sangre, entoces se trata de
exámenes muestran: nitritos y leucocitos negativos en la
cocos (este grupo de bacterias no desarrollan en Mac
tira reactiva, bacterias y leucocitos escasos, junto a
Conkey).
células epiteliales contaminates de la mucosa vaginal en
el sedimento, entonces, no se recomienda cultivar la
muestra. Recuento de colonias
El recuento de colonias se realiza en cualquiera
de los dos medios del siguiete modo:
Cultivo 1.- Trazar por la parte externa de la contratapa (caja petri)
Para el cultivo de la orina se utilizan los siguientes
dos líneas que permitan separar o dividir en cuatro
medios:
cuadrantes el diámetro del medio de cultivo.
 Agar sangre. 2.- Contar las colonias, en uno de los cuadrantes (escoger
 Mac Conkey (ó EMB) un cuadrante que muestre un intermedio de desarrollo de
 Agar Cled o agar nutritivo (optativo, otros colonias entre abundante y escaso) marcándolas para no
laboratorios) repetir el recuento de las mismas colonias.
Siembra en agar sangre, en este medio se siembra la 3.- El número de colonias contadas en un cuadrante se
orina por saturación de superficie, utilizando una asa debe multiplicar por cuatro (que representa a los 4
bacteriológica calibrada y que tiene la capacidad de cuadrantes) el resultado multiplicar por 100 que es el
contener 0.01 ml de orina (mismo procedimiento en Mac factor de dilución (0,01 ml de orina), éste resultado
Conkey)
La técnica de siembra consiste en:
239
representa al número total de colonias desarrolladas en el

medio.
RECUADRO N°. 16. UTILIZACIÓN DE AGAR

NUTRITIVO Y AGAR CLED PARA EL RECUENTO DE
Ejemplo: COLONIAS.
 En el cuadrante elegido se contó 260 colonias. Otros laboratorios realizan el cultivo y recuento de colonias en
 Este número se multiplica por 4 (número de agar nutritivo, con el mismo procedimiento que en sangre,
cuadrantes de la placa petri) también suele utilizarse agar Cled, sobre éste último el
 Este resultado se multiplica por 100 procedimiento es el siguiente:
(corresponde al factor de dilución 0.01ml de  Homogeneizar la orina.
orina).  Introducir en la orina una tira de papel Watman esteril
(6 mm de ancho por 8 cm. de largo, con una marca en
 El resultado es de 104.000
14 mm.), escurriendo el exceso en las paredes del
 Lo que significa que en este medio, frasco.
desarrollaron 104.000 UFC/ml.  Inocular la muestra tocando la tira de papel (sopado
con la orina hasta la marca 14 mm) al Agar Cled por
Interpretación del recuento de colonias algunos segundos, luego desechar la tira de papel.
Si el recuento de colonias es igual o mayor a  Repetir esta operación en otra parte del mismo agar
100.000, se informa como Infección Urinaria. cled.
Este criterio proviene de estudios efectuados por Kass  Incubar a 35 grados centígrados durante 24 hrs.
sanford, Mac Donald, Beeson, con muestras obtenidas
RECUENTO DE COLONIAS
por chorro medio, primera orina de la mañana y en Medio de Cled.- Al día siguiente observar el desarrollo de
pacientes sintomáticos. colonias, si no existe desarrollo, incubar otros 24 horas más,
Se toma en cuenta como posible infección luego contar el número de colonias en ambos rectángulos
urinaria en recuentos bacterianos más bajos (entre 104 y (ambos inóculos), este resultado dividir entre 2. Si el número de
105 UFC/ml, en los siguientes casos: colonias obtenidas es más de 30 corresponde a más de 100.000
UFC/ml (compatible con infección urinaria); si es de 1 a 9
1.- Niños y ancianos que no controlan esfínter, debido a colonias, corresponde a menos de 10.000 UFC/ml (compatible
que la concentración de la orina es baja a causa de las con una contaminación), los números intermedios entre estos
dos, tienen la misma consideración que en el recuento en agar
frecuentes micciones.
sangre.
2.- Orinas obtenidas con menos de tres horas de
retención.
3.- Pacientes jóvenes y ancianos con inmunosupresión,
cancer, especialmente próstata y transplante renal. Identificación bacteriana
4.- Pacientes que hubiesen finalizado recientemente su  Si en el agar Mac Conkey se encuentran
terapia antimicrobiana. colonias grandes lactosa positivas o lactosa
5.- Las orinas que contienen igual ó menos de 10.000 negativas y tienen forma bacilar gram negativa,
colonias se consideran contaminación. continuar con la identificación de
6.- Las excepciones a la anterior son: Enterobacterias realizando pruebas
a) muestra obtenidas por punción suprapúbica bioquímicas (TSI, LIA, C.S, SIM, UREA) y
cualquier número de colonias se considera posteriomente el antibiograma.
infección urinaria.
b) En control de tratamientos para infección  Si hubiera desarrollo en agar sangre de colonias blancas
urinaria, siempre que la muestra hubiese sido o cremosas, medianas o pequeñas y son cocos gram
obtenida asépticamente. positivas, entonces realizar identificación de
7.- En general cuando se presentan dos diferentes tipos de Estafilococos, mediante las pruebas bioquímicas
colonias, se considera que ha habido contaminación, Si (CATALASA, COAGULASA, NOVOBIOCINA, etc.).
así ocurriese, solicitar nueva muestra. Si el resultado se Si se trata de otro tipo de bacterias proceder de acuerdo a
repite y los pacientes a quienes se ha efectuado el análisis protocolo.
están a han sido hospitalizados, ó son inmunosuprimidos,
considerar ambos micoorganismos y a cada uno efectuar
un antibiograma por separado
Reporte de informe: Los datos que deben
informarse son los siguientes:
240
Cuadro N° 111. Informe de laboratorio de bacteriología

INFORME
BACTERIOLOGICO:
UROCULTIVO
Nombre: Rocio Cabrera Edad: 28 años
RESULTADO:
Densidad: 1030
pH: 5.5
Nitritos: Positivo
Leucocitos: +++
SEDIMENTO
Leucocitos: Abundantes
Bacterias: Abundantes
RECUENTO DE Más de 100.000
COLONIAS UFC/ml
Bacteria identificada: Escherichia coli
Sensible: Norfloxacino,
Antibiograma: nitrofurantoina.
Resistentes:
Ampicilina,
cotrimoxazol
241
UROCULTIVO
Muestra de orina
Examen directo
Tinción de Gram
PAPEL WATHMAN
Incubar 24 hrs.
A 35 a 37ºC CLED A.S. M.C. Siembra por
Saturacion de superficie
PRUEBAS BIOQUIMICAS
Catalasa
Coagulasa
Novobiocina
ANTIBIOGRAMA
Esquema N° 7. Procedimiento general del Urocultivo (cortesía: Lic. Diogenes Martinez).
242
CAPITULO 31
COPROCULTIVO
Introduccion Obtención de la muestra
El coprocultivo es el examen bacteriológico de
heces que comprende la siembra, aislamiento e a) Por evacuación directa.- La muestra más apropiada
identificación de las bacterias causantes de infecciones para efectuar un coprocultivo son las heces recogidas en
intestinales. un recipiente de boca ancha, tapa ajustada, de vidrio o
Estas infecciones según sus características, unos plástico (limpio, no siempre esteril). Que no tenga mas de
se denominan gastroenteritis y otras disenterías, en 2 horas de obtenida y evitar la contaminación con orina
ambos casos el síntoma más común es la diarrea. En la (las muestras no deben sacarse de pañales por que pueden
gastroenteritis el aumento en el número de deposiciones contener residuos de desinfectantes y orina), y en todos
mayor que el normal, está acompañada de dolor los casos el paciente no debe haber recibido tratamiento
abdominal, cólico de intensidad variable, náusea, antimicrobiano tres días antes de la toma. Cantidad 5 ml
vómitos, por su parte en la disentería el cuadro diarréico de heces diarréicas 10 gramos de heces sólidas.
se acompaña por dolor abdominal con cólicos y tenesmo
(deseo continuo, doloroso e ineficaz de defecar), demás b) Hisopado rectal.- con la ayuda de un hisopo esteril
de presentar a menudo moco fecal y sangre (leucocitos, (humedecido en solfis entibiado), introducir en el recto
piocitos y eritrocitos en heces). Los microorganismos hasta unos 2 o 3 cms. Realizar una rotación del hisopo a
frecuentemente comprometidos con estos síntomas son: fin de obtener la mayor cantidad de heces y realizar
Salmonellas, Shigellas, E. coli, Y. entecolítica y otros. inmediatamente la siembra en los medios de cultivo. Si
Por otra parte suele observarse diarreas profusas eso no es posible (por no contar con laboratorio), llevar a
frecuentemente causadas por virus, parasitos y otras un recipiente con medio de transporte (Cary Blair).
bacterias, entre ellos por ejemplo, rotavirus, Giardia El medio de transporte de Cary-Blair sirve para
lamblia y vibrio. transportar muchos agentes patógenos entéricos
Aunque la mayoría de las enteritis son benignas bacterianos como Shigella, Salmonella y Vibrio cholerae.
y autolimitadas, cuando la diarrea es intensa, produce La cosistencia semisólida del medio de Cary-Blair
deshidratación y transtornos hidroelectrolíticos, que en facilita el transporte, y el medio preparado puede ser
niños pequeños, ancianos o personas desnutridas conlleva almacenado a temperatura ambiente por hasta un año
un pronóstico grave. después de preparado. Debido a su alto pH (8,4), es un
Algunos agentes que causan estas infecciones medio de elección para el transporte y la preservación de
como Salmonellas, Shigellas, requieren tratamiento V. cholerae. A este medio se coloca el hisopo, se empuja
inmediato, por lo que los médicos solicitan la realización hasta el fondo del tubo que contiene el medio Cary-Blair,
de coprocultivos considerando los siguietes aspectos: se rompe la parte superior del hisopo, se tapa el tubo y se
1.- Paciente con diarrea más de tres días que requiere guarda en refrigerador 4 a 8°C.
rehidratación intravenosa
2.- Presencia de heces con sangre Transporte de la muestra
3.- Paciente con diarrea que viajó al interior del país  De preferencia se debe procesar la muestra de
recientemente manera inmediata, si no ocurre esto, es
4.- Paciente con fiebre y cefalea conveniente conservar la muestra en
refrigerador a 4 grados centígrado por un
Bacterias patógenas que afectan el tracto máximo de 2 horas.
gastrointestinal bajo  Cuando la muestra no puede ser procesada de
 Salmonella spp manera inmediata, se debe conservar en un
 Shigella spp medio de transporte (Cary Blair) manteniéndose
 Escherichia coli (en sus diferentes serotipos) hasta 72 horas en refrigerador.
 Campylobacter jejuni
 Yersinia enterocolítica Diagnostico bacteriologico
 Staphylococcus aureus Una vez tomada la muestra el procesamiento en
 Clostridium difficile laboratorio consiste en el examen directo, el cultivo y el
 Clostidium perfringens antibiograma.
 Vibrio cholerae
243
Examen directo Habitualmente en las heces se encuentra

Moco fecal: alrededor de 60 a 90 % de bacilos Gram negativos,
predominando siempre sobre la flora Gram positiva.
 Con un asa bacteriológica, tomar
Cuando sin haber leucocitos se encuentra un
aproximadamente 1 gramos de heces o si ésta
predominio de flora grampositiva, informar que el
fuese líquida, 1 ml. Elegir la parte mucosa,
equilibrio de la flora intestinal esta alterada, este caso en
purulenta o con sangre.
general se trata de una disbacteriosis (que ocurre
 Introducir las heces con cuidado, evitando tocar
frecuentemente con el abuso de antibióticos).
las paredes en el tubo de ensayo que contiene 3
La presencia de cocos grampositivos en grupos
ml. de solución fisiológica.
junto con abundantes leucocitos, sugiere una enterocolitis
 Con el asa bacteriológica, tomar del tubo el estafilocócica.
mucus lavado con la solución fisiológica. Si no
existiera mucus una asada del líquido.
 Hacer 2 extendidos sobre los portaobjetos,
Cultivo y aislamiento de enteropatogenos
El cultivo para el aislamiento de los
distribuyendo el mucus en círculos concéntricos
enteropatógenos, sigue un proceso paralelo:
y en forma homogénea.
1.- Cultivo para el aislamiento primario
 Dejar secar a medio ambiente.
2.- Cultivo de enriquecimiento.
 Un portaobjeto colorear con Gram y el otro con
giemsa.
Primer día:
El cultivo primario de heces se realiza en el medio Mac
Observación al microscópio: Conkey y selenito
Coloración giemsa.- Observar con objetivo de 100 X, 20
 Identificar la placa petri con el nombre del
campos microscópicos e informar la cantidad de
paciente y la fecha.
leucocitos por campo, con el siguiente criterio:
 Con un asa bacteriológica, se toma una buena
asada de la muestra.
 Ocasionales leucocitos : Menos de 1 leucocito
 Se deposita la muestra en un borde de la placa
por campo
de MacConkey (se realiza un pequeño extendido
 Escasos leucocitos : de 1 a 4 leucocitos por
en el agar).
campo
 Se lleva el resto de la muestra al tubo de
 Regular leucocitos : de 5 a 10 leucocitos
Selenito mezclándolo brevemente.
por campo.
 Luego sin esterilizar el asa se realiza el estriado
 Abundantes leucocitos: Más de 10 leucocitos
por agotamiento en el Mac Conkey.
por campo.
 Esterilizar el asa para guardar.
Es importante tomar en cuenta la morfología de los
leucocitos, ya que hay predominio de polimorfonucleares  Incubar la caja petri y el tubo de selenito a 35
en Shigelosis y salmonelosis y mononucleares en colitis grados centígrados, durante 24 horas.
invasiva por E. coli y diarrea de origen viral. Informar la
relación porcentual de los leucocitos encontrados. P. ej., Segundo día:
70% polimorfonucleares y 30% mononucleares. Al día siguiente observar el desarrollo de las
colonias en MacConkey, distinguiéndose colonias lactosa
Coloración de Gram.- Observar con objetivo de 100 X, positivas (Coliformes y otros) y lactosa negativas
20 campos mícroscópicos. Observar la forma, coloración (Salmonellas Shigellas y otros).
y disposición de las bacterias, mencionando la cantidad  las colonias lactosas positivas se caracterizan
aproximada de las bacterias (escasa, moderada o por tener bordes redondeados, convexos,
abundante). aspecto húmedo, consistencia cremosa o
mucoide, brillantes de colores rosados o rojos,
Interpretación del moco fecal. El resultado del moco medianos o grandes.
fecal es de gran utilidad, pues orienta en la etiología de  Las lactosas negativas tienen bordes
un proceso infeccioso; aunque nunca se tomará esta redondeados, convexos, aspecto húmedo,
información como resultado definitivo. consistencia mucoide, claras translúsidas
La presencia de regular o abundantes leucocitos pequeñas o medianas.
es indicador de procesos provocados por gérmenes  De estas colonias se escogen las lactosas
patógenos invasivos tales como: Shigellas, Salmonellas, negativas, para hacer con ellas las pruebas
Campylobacter, Escherichia coli enteroinvasiva o bioquímicas (por que se supone que entre ellas
enterohemorragica. se encuentran bacteias patógenas como
Una diarrea líquida sin leucocitos sugiere un Salmonellas, Shigellas y otros).
proceso toxigénico, como: infección por V. Cholerae, E.  Se inocula 1 colonia en los diferentes medios
coli enterotoxigénica o un proceso no infeccioso. diferenciales (Bateria bioquímica) mediante las
244
técnicas ya conocidas (TSI y LIA por picadura y Interpretación

estriado, CS y UREA por estriado y SIM por Actualmente los laboratorios donde se raliza
picadura). rutinariamente coprocultivos no realizan tipificación
 Incubar a 35 grados centígrados durante 24 serológica ni antibiograma para Eschericia coli, en razón
horas. de que esta bacteria es un habitante normal del intestino;
 Al día siguiente interpretar los resultados del su multiplicación se autolimita en el lapso promedio de 3
desarrollo bacteriano en cada uno de los medios días, razón por la cual incluso se recomienda a los
comparando con la tabla de identificación de médicos no realizar tratamiento con antibióticos. Sin
enterobacterias. embargo se debe considerar la edad del paciente y su
condición de inmunosupresión, ejemplo niños menores
Tercer día: de 2 años con diarrea y presencia de leucocitos,
- Realizar el antibiograma al microorganismo proveniente de un brote epidémico (casas-cuna) para
identificado y la tipificación serológica considerar como agente etiológico de diarrea y que
NOTA.- Si en el primer día no desarrolla colonias en necesita hacerse un antibiograma y tratamiento.
MacConkey, se resiembra la muestra enriquecida en Este mismo tratamiento es recomendado al
Selenito en Agar SS. Incubando 24 hrs a 35 grados asilamiento de proteus.
centígrados. Pseudomonas aeruginosa, klebsiella
 Al día siguiente observar las colonias: pneumoniae, enterobacter y serratia, se encuentran en
 Las colonias son parecidas a la lactosa escasa proporción en el intestino normal, razón por la
negativas (del inciso b), con la diferencia de cual tampoco se debe efectuar antibiograma, la excepción
que las colonias de Salmonellas presentan en su es cuando en el cultivo se presenta un solo tipo de estas
parte central puntos de color negro (OJO DE bacterias en pacientes hospitalizados y con
PEZ), pasadas las 24 horas toda la colonia se sintomatología evidente, en esos casos sí corresponde el
torna negra. antibiograma.
 Luego se procede igual que en el anterior caso a
partir del segundo día continuando con las Reporte de informes
pruebas bioquímicas y antibiograma. El informe debe contener: Identificación de la
bacteria y el antibiograma.
Si en laboratorio se cuenta con otros medios más selectivos
como XLD, las colonias de las Salmonellas son rojas con o sin Ejemplo:
centros negros, y las Shigellas con rojas o incoloras. En el cultivo primario se observan colonias claras
(lactosas negativas); realizada las pruebas bioquímicas se
Tipificacion serologica ve las siguientes caracateristicas:
Algunos laboratorios, realizan la tipificación
serológica principalmente para identificar los serotipos de Cuadro N° 112. Resultados de las pruebas bioquímicas
E. coli enteropatógena, enteroinvasiva, Lactosa Negativa
enterohemorragicas, Shigellas y Salmonellas; utilizando Glucosa Positiva
para ello antisueros mono y polivalentes. H 2S Negativa
En el diagnóstico de la S. typhi, el diagnostico en la Gas Negativa
primera semana de infección puede ser identificada Motilidad Negativa
mediante hemocultivo, en la segunda semana se C.S Negativa
recomienda realizar un coprocultivo y un urocultivo; la LIA Negativa
tercera semana un mielocultivo, y más después se puede Estas características nos permiten identificar la Shigella
realizar cultivo de líquido de sondaje duodenal; para spp.
aislar esta bacteria de las vías biliares (portadores Luego se debera realizar el antibiograma para esta
asintomáticos). bacteria y finalmente se debe realizar el informe.
245
Cuadro N° 113. Informe de un posible coprocultivo

INFORME
BACTERIOLOGICO:
COPROCULTIVO
Nombre: Angel Ramirez Edad: 35 años
RESULTADO:
Exame directo:
Moco fecal: Moderado
Leucocitos: 15 a 20 pcm
Relación leucocitaria: 75% PMN 25% MN

Flora bacteriana: Abundante
Tinción de Gram:
Bacilos gramnegaticos Abundantes
Bacilos grampositivos: Escasos
Cocos grampositivos: Escasos
Bacteria identificada: Shigella spp
Sensible: Cefotaxime,
Antibiograma: cloranfenicol.
Resistentes:
Ampicilina,
cotrimoxazol
246
COPROCULTIVO
Moco fecal:
Tinción de Gram
Incubar 24 horas
Siembra por agotamiento A 35º -37ºC
En MacConkey Caldo selenito
Agar SS
PRUEBAS BIOQUIMICAS
ANTIBIOGRAMA
Esquema N° 9. Procedimiento general del coprocultivo (cortesía: Lic. Diogenes Martinez).
247
CAPITULO 32
CULTIVO DE SECRECION VAGINAL Y URETRAL
Introducción  Se debe considerar el hecho, de que si no se

El cultivo de secreción vaginal y uretral es un piensa en una posible ETS, no se podrá nunca
procedimiento de laboratorio de microbiología que busca llegar a un diagnóstico.
identificar los microorganismos causantes de  Otras causas que han motivado el aumento de
enfermedades de transmisión sexual, que se encuentran estas enfermedades son: Facilidad de traslado de
con más frecuencia en las muestras procedentes del área un área a otro (viajes), promiscuidad y uso de
anogenital. drogas que provocan dependencia.
Las enfermedades de transmisión sexual (ETS),
constituyen un grupo numeroso de procesos infecciosos Consideraciones socioculturales
de etiología muy variada; que en la actualidad se involucradas en las infecciones de
encuentran agrupadas como Infecciones de Transmisión
Sexual (ITS), debido a la similitud de sus características
transmisión sexual
Este grupo de enfermedades se han catalogado
clínicas y epidemiológicas.
como enfermedades vergonzantes, enfermedades de tipo
Por otro lado, son enfermedades de importancia
secreto, enfermedades venéreas.
creciente tanto para el médico general, el especialista, el
El abordar este tipo de enfermedades, conlleva
salubrista, como para el investigador debido a varios
algunos problemas, en función de aspectos sociales,
factores; como los cambios en el comportamiento y
culturales e incluso hasta podríamos señalar de tipo
practicas sexuales, la relativa facilidad para su
religioso, pues como se podrá comprender, el
diseminación, la aparición de fenómenos de resistencia a
involucrarse con una función biológica reproductora
los antibióticos, el costo elevado para los programas de
relacionada con la intimidad sexual de un indivíduo o la
salud pública, las connotaciones familiares y personales,
pareja; se toca un tema sensible que se mantiene en
etc.
reserva y que dificultan en cierta forma el diagnóstico y
Estos mismos aspectos han motivado la
el tratamiento oportuno de estas enfermedades, así como
inclusión en este grupo de enfermedades, de procesos
la profilaxis y el control.
infecciosos tan diversos como la Hepatitis, Shigelosis,
Debemos añadir el hecho de que la influencia de
Giardiasis y otras menos frecuentes, pero cuyos
los medios de comunicación social, han provocado
mecanismos de transmisión incluyen cierto tipo de
cambios en la actitud de la juventud, pues así se presenta
práctica sexual, además de los mecanismos no sexuales.
el inicio de relaciones sexuales a temprana edad sin
protección (uso de preservativos o profilácticos-condón),
Consideraciones epidemiologicas la propensión a tener varias parejas, etc.
Las ITS se constituyen en un grupo de enfermedades
de carácter muy particular por los siguientes hechos:
Microorganismos patógenos que afectan el
 Una incidencia cada vez en aumento
 Tiene un carácter de reserva por parte de los aparato genital
pacientes, lo que hace que exista un subregistro Existe una gran variedad de microorganismos
de las mismas (no existe una estadística real). causantes de una infección del aparato genital, de los
cuales indicaremos los principales:
 Cambio en los hábitos sexuales de las personas.
 Neisseria gonorrhoeae
 Podemos decir con cierto grado de ironía, que
son las únicas enfermedades que se las  Treponema pallidum
adquieren por placer.  Gardnerella vaginalis
 Afectan a diferentes grupos etáreos, sin  Hemophilus ducreyi
discriminación de género, ni predominio  Chlamydia trachomatis
geográfico.  Trichomonas vaginalis
 Muchas de estas enfermedades, por periodos  Cándida albicans
prolongados se tornan asintomáticas, pero  Staphylococus aureus
mantienen su característica de fuentes de  Virus HIV
infección.  Algunas enterobacterias
 Otros
248
Cuadro N° 114. Resumen de los principales microorganismos que pueden transmitirse por vía sexual y las principales manisfestaciones
clínicas que causan.
MICROORGANISMO MANIFESTACIONES CLÍNICAS
Neisseria gonorrhoeae Uretritis, cervicitis, vaginitis, proctitis, faringitis,
conjuntivitis, epididimitis, prostatitis, bartolinitis,
endometritis, salpingitis e infecciones gonocócicas
diseminadas.
Chlamydia trachomatis Cervicitis, uretritis, vaginitis, proctitis, conjuntivitis,
epididimitis, bartolinitis, endometritis y otros.
Treponema pallidum Sífilis
Haemophilus ducreyi Chancro blando
Gardnerella vaginalis Vaginosis bacteriana
Trichomonas vaginalis Vaginitis, uretritis
Candida albicans Vulvovaginitis, balanopostitis
Shigellas spp, Giardias Infecciones intestinales
Papilomavirus humano (tipo 16, 18) Verruga vírica, cáncer cérvicouterino
Virus de la la inmunodeficiencia (VIH) Síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA).
Herpesvirus humano Herpes bucolabial, genital
Virus de la hepatitis B Hepatitis B
En este capítulo se expone brevemente la  Con este hisopo inocular inmediatamente en el

manera de identificar los microorganismos transmisibles medio de cultivo para gonococos en forma de Z,
por vía sexual que se encuentran con más frecuencia en para luego estriar en forma cruzada con asa
las muestras provenientes del aparto genital, tanto bacteriológica. Con el mismo hisopo hacer un
femenino como masculino. extendido para Gram.
 Lo ideal es que la siembra de las muestras en el
Toma de muestra en el caso de una uretritis medio de cultivo para aislar N. gonorrhoeae se
La toma de muestra destinada para el haga directamete en el consultorio. Si no es
diagnóstico de alguna ITS, es el paso más importante y posible practicar de inmediato la siembra y la
fundamental en la identificación de la misma. incubación de las placas, se utilizará algún
Para la obtención de muestra de la uretra, se medio de transporte como el de Amies o el de
recomienda NO higienizar los genitales externos por lo Stuart. El tiempo de transporte debe ser lo más
menos 24 horas y que el paciente no haya orinado como breve posible, sin sobrepasar las 12 horas a una
mínimo 3 horas antes. Debido que la orina arrastra todo temperatura ambiente máxima de 30°C. evitese
el material que pudiera haberse acumulado. la refrigeración.
La secreción uretral es útil para el diagnostico de
varias infecciones pero particularmente de uretritis Mujeres: (También se puede tomar una muestra uretral,
gonocócica y uretritis no gonocócica la cual se prosigue para el diagnóstico de gonorrea)
de la siguiente manera:  Pedir a la paciente que se ponga en cúbito dorsal
Varones: en una camilla ginecológica.
 Observar prepucio, y la parte externa del pene  Limpiar el meato uretral con la ayuda de una
en busca de lesiones, úlceras, vesículas, granos o gasa estéril.
manchas y también observar escroto.  Se puede realizar un masaje suave de la uretra
 Tomar el exudado uretral con la ayuda de un para obtener directamente el exudado o
hisopo, por lo menos una hora después que el  Introducir el hisopo 1 – 2 cm en el interior del
paciente ha orinado. meato.
 En caso de que exista exudado purulento  Sujetarlo por unos segundo (10 a 30 seg.)
espontáneo por la uretra se puede tomar esta.  Retirarlo y sembrar inmediatamente en el medio
 Se puede pedir al paciente que “comprima” el de cultivo para gonococos, haciendo un Gram,
pene o la estimulación mediante un masaje similar al del varón.
suave de la uretra.
 Si no hay secreción, tomar con un hisopo Vaginales y Cervicales:
uretral, introduciendo en la uretra unos 2 o 3 cm, Las siguientes muestras se obtienen durante el
dejando unos 10 segundos para que las fibras examen por parte del médico mediante el uso de un
se embeban en el exudado o bien con el asa especulo, (el cual se lubrica solamente con agua tibia
bacteriológica raspando suavemente la mucosa estéril), También observar en estas áreas la presencia de
de la uretra anterior. eritemas, úlceras, edema, secreción adherente, se debe
249
evaluar el color, olor, consistencia y volumen de la leucocitos polimorfonucleares. Este dato en el varón tiene
secreción vaginal. una sensibilidad y especificidad del 98% de que se trata
Primeramente se tomará la muestra de flujo de una uretritis gonocócica. En cambio en la mujer el
vaginal y luego de secreción cervical. Gram no es particularmente útil para diagnosticar una
infección gonocócica. El examen de los frotis de la
Muestra vaginal : (primer hisopo) secreción endocervical con el hallazgo de diplococos
Con un hisopo esteril, limpiar removiendo el gramnegativos intracelulares tiene una sensibilidad de
exceso de moco del orificio cervical externo y con el 50-70% y una especificidad de 50-90% para el
mismo hisopo a continuación, tomar la muestra de las diagnóstico de la infección gonocócica; (el resultado
paredes vaginales y fondo de saco posterior , con este positivo tiene poco valor predigtivo en las poblaciones
primer hisopo sembrar la muestra en el medio de CNA o donde es poco frecuente la blenorragia). El hallazgo de
agar sangre (Para aislar Gardnerella vaginalis), diplocococos intracelulares gramnegativos en un frotis
realizando una Z en el medio de cultivo. Este hisopo cervical, vaginales o uretral, debe notificarse como tal, y
colocar en un tubo de hemólisis que contenga un ml. de no como indicación de la presencia de N. gonorrhoeae,
solfis esteril, para la realización de los otros exámenes. ya que como sabemos en una mujer puede deberse a la
Quebrar la punta del hisopo y cerrar el tubo con algodón. presencia de flora bacteriana vaginal como Veillonella
(diplococos gramnegativos) o cocobacilos gramnegativos
Muestra cervical: que se tiñen en foma bipolar. Para establecer el
Con el segundo hisopo introducir 2 cm. En el diagnóstico en la mujer no es suiciente el examen de un
conducto endocervical, mantener durante 15 segundos, se frotis de exudado vaginal o uretral teñido con Gram, para
hace girar y se retira el hisopo (teniendo el cuidado de no confirmar realizar el cultivo.
tocar las paredes de la mucosa vaginal), luego sembrar la
muestra en forma de Z en el medio para gonococos, y
realizar un frotis para Gram (similar al de los varones).
Otras muestras
Rectales, bucofaríngeas en varones y mujeres:
 Las muestras anorrectales se obtienen
introduciendo el hisopo unos 4 o 5 cm en el
conducto anal (criptas anales), mediante un leve Fig. N° 211. Diplococos gramnegativos extracelulares (izq.) e
intracelulares (der.). (Fuente: Prats, 2012).
giro del hisopo. Estas muestras no deben
contaminarse con materia fecal. El examen de un frotis conjuntival teñido con
 Para recoger muestras buco faríngeas, se Gram, constituye una técnica sensible y específica par el
hisopea la pared posterior de la faringe y las diagnóstico de la conjuntivitis gonocócica. Presencia de
criptas amigdalinas y se siembra diplococos gramnegativos intracelulares es
inmediatamente la muestra. patognomónica de esta forma de conjuntivitis.
 En los lactantes con oftalmia neonatal, debe
recogerse exudado conjuntival con un hisopo o
un asa de platino (generalmente del ángulo
interno del ojo).
Úlceras:
Observar las características de las lesiones
ulcerosas. Toda presencia de úlcera debe ser estudiada
tanto para Treponema pallidum como para Haemophilus
ducrey. En este caso obtener la muestra (líquido seroso)
con hisopo, pipeta pasteur o con un asa bacteriológica
directamente del borde de la lesión. Realizar la
observación de la muestra preparada entre porta y cubre,
mediante el método del campo oscuro para T. pallidum y
tinción de Gram y cultivo para H. ducreyi. (Ya estudiada
en capítulos anteriores del programa).
Diagnostico de Neisseria gonorrhoeae

Exámen directo. El frotis o extendido realizado, fijar a Fig. N° 212. Extendido, tinción y observación de una muestra directa
la llama del mechero y teñir con Gram. Observar la de exudado uretral, endocervical, conjuntival y otros, con el hallazgo de
presencia de diplococos gramnegativos dentro los diplococos gramnegativos intracelulares (Fuente: Struthers, 2005).
250
Cultivo e identidicación microbiana Resultado:

 Ordenar los medios de cultivo necesarios; Para Positiva.- Cambio de color del disco de nitrocefina a un color
rosado.
gonococos pueden utilizarse cualquiera de los
Negativa.- Cuando no cambia de color.
medios siguiente: Thayer Martín con VCNT Nota.- Si la betalactamasa es positiva esto significa que la N.
(vancomicina, colistina, nistatina y Gonorrhoeae puede ser resistente a la penicilina, tetraciclina,
trimetoprima), o Agar chocolate con Isovitalex. ampicilina, amoxicilina, ticarcilina, piperacilina y cefalotina
 Colocar las cajas petri en latas de leche con una inclusive. Por esta situación el laboratorio deberá realizar
vela encendida junta con un algodón antibiograma.
humedecido con agua (método de la vela, para
proporcionar CO2 al 10%). Incubar a 35 grados ANTIBIOGRAMA
Preparar una suspensión de cultivo tomando 5 a 8 colonias
centígrados por 24 horas.
en un tubo de hemólisis con 2 ml. de solfis. Ajustar la turbidez
 Al día siguiente comenzar observando el medio 0,5 con la escala de Mc. Farland. Inocular la suspencsión
para gonococos, en busca de colonias pequeñas preparada con la ayuda de un hisopo en el medio de cultivo de
o medianas, grises, opacas, brillantes o GC con Isovitalex.
transparentes convexas como gotitas de rocio. Se recomienda colocar hasta 4 sensidiscos: Penicilina,
Cefotaxima, ciprofloxacina y tetraciclina.
Incubar a 35 grados centígrados en ambiente de CO2 por el
tiempo de 24 horas.
Resultado:
Medir los halos de inhibición con la ayuda de un calibro o
regla. Interpretar los resultados considerando los puntos de
corte recomendados por NCCLS (Comité Nacional para
Estándares de Laboratorio Clínico) para determinar la
susceptibilidad, intermedio o resistente de la bacteria.
Fig. N° 213. Colonias pequeñas y medianas, grises, brillantes como

gotitas de rocio en medio de Thayer Martin perteneciente a N.
gonorrhoeae (Fuente: Prats, 2012).
 Con ellas realizar un Gram, buscando

diplococos gram negativos.
 Luego realizar la prueba de la oxidasa
(resultando positiva).
 Con estas características ya se puede clasificar
presuntivamente como Neisseria gonorrhoeae.
 El mismo día, se realiza la prueba de
fermentación de azúcares (estudiada en
capítulos anteriores del programa),
Betalactamasa y el antibiograma.
RECUADRO N° 17. BETA-LACTAMASA (para Neisseria

gonorrhoeae)
Fundamento
Los antibióticos beta lactámicos (penicilinas, ampicilinas y
cefalosporinas), actúan sobre la pared bacteriana como agente
bacterioestático y luego bactericida.
Este efecto antibacteriano se ve limitado por la acción de
algunos microorganismos que producen Betalactamasa, esta
enzima rompen la unión amina del anillo betalactámico de estos
antibióticos con la producción de ácido penicilinoico
(inactivándolo al antibiótico), lo que produce muchos fracasos
terapéuticos cuando se usan penicilinas, ampicilinas,
cefalosporinas en el tratamiento.
Para detectar la presencia de esta enzima betalactamasa en la
N. Gonorrhoeae se realiza El método cromogénico, que se basa
en el cambio de color del disco de nitrocefina (B) cuando es
colocada en un tubo de hemólis que contiene una mezcla de 0,5
ml. de agua destilada con 4 colonias de N. Gonorrhoeae
aislada, luego de esperar 5 minutos.
251
Esquema general de un estudio de exudado

vaginal
Diagnóstico de Gardnerella vaginalis  Con aumento de 40X observar la presencia o no

El requisito mínimo para diagnosticar una vaginosis Trichomonas vaginalis, cuando están presentes,
bacteriana es la observación de tres o más de los éstos protozoarios tienen movimientos
siguientes aspectos: flujo vaginal anormal, pH vaginal > caracteristicos de rotación, vibración y
4,5, presencia de células clave (células epiteliales en cuya traslación, por la función de sus flagelos; cuando
superficie se encuentran adheridas gran cantidad de se inmovilizan se hacen redondos u ovales (no
bacterias cocobacilares gramvariables), test de aminas confundir con leucocitos).
positivo (muestra de secreción vaginal más 3 gotas de
KOH al 10% = olor a pescado), desarrollo en medio de Diagnóstico de Candida albicans
cultivo CNA o agar sangre (colonias diminutas, claras a  En la misma muestra directa de solfis, pueden
grises circulares con beta hemólisis) y pruebas observarse levaduras (moderadas o abundantes)
bioquímicas, siendo catalasa y oxidasa negativos (todos con o sin pseudomicelios, sembrar en el medio
ellos abordados en la teoría). de Sabouraud. Incubar a 37°C, durante 48 a 72
Si se identifica Gardnerella vaginalis, no es horas.
necesario realizar antibiograma, por que esta bacteria es  Si luego de ese tiempo desarrollan colonias
sensible al metronidazol. pequeñas o medianas cremosas blanquecinas
realizar y a la observación son levaduras
Diagnostico de Trichomonas vaginalis grampositivas, realizar el Test de filamentación,
 Con una pinza apretar el hisopo con secreción que consiste en colocar 2 colonias a un tubo que
sobre las paredes del tubo de hemólisis con contiene 0,5 ml de suero sanguíneo, incubar a
solfis, para extraer la secreción y todo el líquido 37°C, durante 2 a 6 horas.
que pudiera haber absorbido.  Luego de ese tiempo observar entre porta y
 Con una pipeta pasteur depositar una gota de la cubre una gota de la muestra incubada.
suspensión sobre un portaobjeto y colocar sobre  La observación de levaduras con
ella un cubre objeto. pseudomicelios indica la presencia de Cándida
albicans.
252
 La presencia solo de levaduras indica de que se Tambien en la muestra de solfis es conveniente

trata de Cándida spp (saprofita). realizar el recuento semicuantitativo de leucocitos
que son indicativos de infecciones por cocos Gram
Diagnóstico de Clamydia trachomatis positivos (E. aureus?) o bacilos Gram negativos
La muestra obtenida por hisopado de (enterobacterias?), de acuerdo a los siguientes
endocérvix, sirve para cultivar en muesras celulares criterios:
como los fibroblastos de ratón. Para luego ser  Cantidad habitual de leucocitos en flujo
observados al ser teñidos con yodo. No crecen en vaginal: 0 a 9 leucocitos pcm.
medios de cultivo microbiológicos y solo se replica  Proceso inflamatorio moderado: 10 a
en el interior de las células porque son 29 leucocitos pcm.
metabólicamente deficientes. También el diagnóstico  Cervicitis u otros: más de 30
se realiza mediate pruebas de serología como el leucocitos pcm.
inmunoanálisis enzimático (EIA). La positividad de La presencia de estos grupos bacterianos junto a
esta prueba debe confirmarse con un PCR. los leucocitos es indicativa de una infección, por lo
que debe realizarse el procedimiento para su
identificación.
253
CULTIVO DE SECRECION VAGINAL Y URETRAL
Examen directo
Tinción de Gram
Test de Aminas
Siembra en “Z”
Incubar 25ºC
A. S. A. CH. MacConkey Agar Sabouraud
Met. De la vela. 35 – 37ºC
PRUEBAS BIOQUIMICAS
- Oxidasa -Test de filamentación
- Fermentación en azúcares
- Betalactamasa
ANTIBIOGRAMA
(Neisseria gonorrhoeae)
Esquema N°. 10. Procedimiento general del cultivo de secreción vaginal y uretral (Cortesía Lic. Diogenes Martinez).
254
CAPITULO 33
CULTIVO DE SECRECIONES RESPIRATORIAS
Introducción de la mucosa nasal, permiten la invasión, colonización o
El aparato respiratorio es complejo en su estructura, el desarrollo de agentes infecciosos como los virus.
como también su división anatómica, de manera muy Estos microorganismos susceptibilizan al
general, podemos dividirlo en dos áreas: a) tracto hospedador, para el accionar posterior de las bacterias,
respiratorio superior y b) tracto respiratorio inferior. debido a que destruyen células del epitelio, alterando la
El tracto respiratorio superior comprende las fosas fisiología respiratoria, que se traduce en alteraciones
nasales, nasofaringe, faringe, orofaringe (amígdalas, fisiopatológicas que en determinadas ocasiones permiten
epíglotis), laringe, senos paranasales y el oído medio. El la exacerbación de agentes microbianos de la biota
tracto respiratorio inferior comprende la tráquea, los normal, otras veces permiten la implantación de agentes
bronquios y el tejido pulmonar. patógenos adquiridos, y en otras pueden producirse
Recordar que la estructura histológica del tracto invasiones a tejidos vecinos.
respiratorio superior esta formado por epitelios que Un ejemplo es la obstrucción de los orificios que
forman glandulas sebáceas, sudoríparas, folículos comunican los senos paranasales con la cavidad nasal,
pilosos, glandulas serosas y mucosas que evitan la que durante un proceso inflamatorio de la mucosa lleva a
entrada de partículas extrañas al tracto respiratorio dificultades en el drenaje de la secreción mucosa en los
inferior. mencionados senos, provocándose una retención de las
secreciones que cumpliendo un principio de que toda
Consideraciones fisiopatologicas cavidad cerrada se infecta, la cavidad sin comunicación
Para la instalación y proliferación de un agente termina por infectarse, originándose de esta forma
infeccioso en un determinado tejido, se hace necesario sinusitis.
tener presente la interacción de tres elementos: Otros factores de índole físico pueden intervenir
1.- El agente etiológico.- Es el causante de la favoreciendo a los agentes microbianos a colonizar o
enfermedad, en el que su patogenicidad, virulencia y desarrollar acción patógena en determinadas áreas del
número de elementos infectantes, son determinantes a la tracto respiratorio, podemos citar al humo del cigarrillo,
hora de producir la infección. que por el calor y otras sustancias tóxicas influyen
2.- El hospedador.- El que padece la enfermedad, en él, negativamente sobre el funcionamiento del epitelio
tiene importancia el estado previo de salud, estado ciliado del árbol traqueobronquial, produciendo una
nutricional, utilización de medicamentos parálisis de los cilios, un aumento en la secreción
inmunosupresores, otras enfermedades y factores bronquial y también una irritación de toda la mucosa,
predisponentes (genéticos, antecedentes patológicos), etc. estos son elementos favorecedores para la implantación
que susceptibilizan al huésped para adquirir la infección. de microorganismos y posterior infección.
3.- El medio ambiente.- Conjunto de factores Los procesos virales que afectan al árbol
condicionantes (temperatura, situación de trabajo, etc), traqueobronquial, producen también congestión, que al
donde interactuan el agente y el hospedador. igual que los irritantes predisponen a infecciones.
Como se podrá comprender, el medio ambiente es el Algunos procedimientos de diagnóstico como la
espacio donde coexisten el agente y el huésped en un broncoscopia, o procedimientos de intervención como la
equilibrio; debido a factores extrínsecos o intrínsecos al traqueotomía llegan a eludir las barreras defensivas.
hospedador, se rompe este equilibrio lo que en
determinadas ocaciones favorece al agente en desmedro Flora microbiana normal y patógena del
del hospedador, y en otras su acción será en sentido aparato respiratorio alto
contrario. La flora microbiana normal es variada, puesto
Las alteraciones anatómicas que afectan a la que existen múltiples factores que influyen tanto en la
estructura del tracto respiratorio superior, sean de índole cantidad como en el tipo de microorganismos, así
estructural, como deformaciones del septo nasal, cambios tenemos el segmento anatómico, la edad del huésped, la
en el tamaño de los cornetes, aumento de tamaño y frecuencia de higiene bucal que se realice y finalmente se
volumen de las amígdalas (hiperplasia) o aquellas otras debe indicar que hay una flora saprofita residente
alteraciones que se produzcan en las funciones habitual y otras de tipo transitoria.
(fisiológicas), como ser incremento o una disminución de Por su parte los patógenos más frecuentemente
la secreción del tracto respiratorio alto, depuración de la comprometidos con infecciones como faringitis,
misma, cambios en la irrigación de la mucosa nasal, amigdalitis, nasofaringitis, otitis media, sinusitis,
como sucede en las épocas frías o cambios súbitos de epiglotitis, etc; están relacionados con inmunosupresión,
temperatura en el ambiente, conduce a vasoconstricción desnutrición, enfermedades crónicas y otros que influyen
negativamente para la susceptibilidad a estas
255
enfermedades. Señalados dichos factores, se pueden flora indígena y patógena del tracto respiratorio superior.
indicar los siguientes agentes como constituyentes de la
Cuadro N° 115. Flora microbiana saprófita y patógena del aparato respiratorio
FLORA SAPRÓFITA FLORA PATÓGENA
Nariz: Senos paranasales:
Staphylococcus epidermidis Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae
Staphylococcus aureus 20 a 50% Streptococcus pyógenes
Moraxella catarrhalis Moraxella catarrhalis
Staphylococcus aureus
Pseudomonas aeruginosa
Boca y faringe: Nasofaringe, faringe, amígdalas,

Streptococcus grupo A (E. pyogenes 5 a laringe:
10% como flora transitoria) Herpesvirus
Streptococcus viridans Enterovirus
Lactobacilos Streptococcus pyógenes
Moraxella catarrhalis Corynebacterium diphtheriae
Veillonella spp. Streptococcus pneumoniae
Stafilococcus epidérmidis Haemophilus influenzae
Staphylococcus aureus Staphylococcuss aureus
Peptoestreptococos spp. Pseudomona aeruginosa
Espiroquetas Cándida albicans
Difteroides spp.
Haemophilus influenzae
Neisseria meningitidis (15 a 20% como
flora transitoria)
Klebsiella spp., E. coli, Pseudomonas
spp (en ancianos, desnutridos, tratados
con antibióticos y mala higiene bucal) y
Cándida albicans.
Estudio microbiologico de las infecciones del  Identificar 1 portaobjeto (para tinción de Gram)
aparato respiratorio alto y los medios de cultivo: Agar chocolate, agar
Este es uno de los análisis que mayores sangre, Mac Conkey, y agar sangre con telurito
problemas presenta al laboratorio de microbiología, de potasio para difteria (solo en caso de
debido a que existen diversos factores que influyen para solicitud).
dificultar su apropiada realización, entre los que podemos  Observar con detenimiento la solicitud de
mencionar: análisis. Tomar en cuenta los datos
1.- La abundante flora comensal que se encuentra en el proporcionados en el diagnóstico presuntivo a
área que puede confundir al microbiólogo no fin de utilizar los medios de aislamiento
experimentado. adecuado y añadir a los de rutina medios
2.- Toma de muestra inapropiada. especiales si así se requiere.
3.- La necesidad de utilizar de otros medios especiales,  Colocarse el barbijo.
para facilitar el desarrollo de algunas bacterias exigentes,  Colocar al enfermo en posición cómoda,
lo que aumenta el costo del análisis. dirigiendo la luz de la lámpara o linterna hacia
la faringe.
HISOPODO FARINGEO  Hacer pronunciar la letra A
 Bajar suavemente la lengua con un baja lenguas
Toma de muestra y cultivo  No tocar con el hisopo la mucosa bucal, la
 La recomendación inicial de todo cultivo es que úvula del paladar, ni la lengua.
antes de la toma de muestra, el paciente no esté  Utilizar un hisopo esteril introducir éste
con tratamiento antibacteriano por lo menos 3 directamente a la faringe posterior un raspado de
días antes de la toma de muestra. arriba hacia abajo, frotando con firmeza pero
 Paciente en ayunas y sin lavarse la boca. con suavidad en ambas caras de las amígdalas,
la fosa tonsilar y los lugares donde se observe
256
exudados, inflamación o ulceraciones para que Si se tratara de Estreptococo pyógenes:

todo el hisopo quede empapado en el exudado  En el agar sangre buscar colonias pequeñas,
faríngeo. transparentes, a veces blanco pálidas,
 Cuando la muestra ha sido tomada fuera del ligeramente secas, con beta hemólisis (en agar
laboratorio, ésta se puede transportar al chocolate son alfa hemolíticas).
laboratorio utilizado un medio de transporte  En la tinción de gram se observan cocos
como Stuart. grampositivos en cadenas cortas, en pares o
 Con el hisopo sembrar primero en los siguientes independientemente.
medios de cultivo: Agar sangre, agar chocolate  Se realiza la prueba de la catalasa, siendo
con isovitales y agar MacConkey y hacer 1 catalasa negativa.
extendido.  Se realiza la prueba de la bacitracina y
 La siembra se efectua depositando la muestra cotrimoxazol:
con el hisopo en un extremo del agar, luego  Con un asa bacteriológica dividir un agar sangre
estriar con un asa bacteriológica por nuevo en 2 partes.
agotamiento.  En cada una de ellas se siembra unas colonias
 Cuando se sospecha de difteria, tomar la características del estreptococo beta hemolítico
muestra de la fosa tonsilar, área retrouvular, los desarrollado el día anterior.
bordes de la pseudomembra, la que no debe  En uno de los lados se coloca un disco de
desprenderse por que sangra fácilmente Bacitracina, y en el otro un disco de
absorbiéndose la toxina por la zona. cotrimoxazol.
 En este caso sembrar la muestra en agar sangre  Se incuba a 35 grados centígrados 24 horas
con telurito de potasio y hacer el extendidos uno siempre por el método de la vela.
para Gram y otro para tinción Del Vechio.
 Las muestras de senos paranasales, se toman
con la ayuda de un hisopo la secreción purulenta
Resultado e interpretación:
El S. pyógenes, es sensible a la bacitracina (se
que drena de la nariz, previamente hacer una
observa alrededor del disco un halo, vale cualquier
limpieza de la cavidad nasal.
tamaño), y es resistente al cotrimoxazol (crecimiento de
colonias en los bordes del disco).
Procesamiento de la muestra
Primer día: Si se tratara de Estafilococo aureus:
 Estriar la muestra (contenida en el hisopo) sobre Por otra parte si en éste mismo agar desarrollarón
los medios de cultivo, iniciando con el agar colonias beta hemolíticas, cuyo Gram muestra cocos
sangre, agar chocolate, incubar éstos medios a grampositivos en parejas, cadenas cortas o racimos, y la
35°C., proporcionado al medio CO2 al 5 – 10% catalasa y coagulasa es positiva, entonces se trata del
(método de la vela). El medio de Mac Conkey Staphylococcus aureus.
no necesita este método.
 Colorear el portaobjeto con Gram para la Si se tratara de Estreptococcus pneumoniae:
observación de los leucocitos, cocos Gram
 En el mismo medio buscar colonias grises
positivos en cadena (probable S. pyógenes),
opacas, pequeñas o medianas alfa hemolíticas
cocos grampositivos agrupados de dos en dos
umbonadas luego umbilicadas, translícidas y
(E. pneumoniae?), coco bacilos gramnegativos
mucoides (en agar chocolate mismas
(H. Influenzae?) y otros.
característica).
 Informar los leucocitos de acuerdo a los
 Tinción de Gram, se observan cocos gram
siguientes criterios:
positivos en pares, en pequeñas cadenas o
. Menos de 1 leucocito por campo :
individuales.
Ocasionales leucocitos
 La prueba de la catalasa es negativa.
. 1 a 4 leucocitos por campo : Escasos
leucocitos  La prueba de la optoquina y quellung es
. 5 a 10 leucocitos por campo : positiva.
Moderados leucocitos
. Más de 10 leucocitos por campo : Antibiograma:
Abundantes leucocitos  Se utiliza Mueller Hinton con 5% de sangre de
Utilizar los mismos criterios para informar la cantidad de cordero
bacterias encontradas por campo microscópico.  Se prepara el inóculo ya conocido (turbidez
estándar de 0,5 en la escala de McFarland).
Segundo día:  Se siembra la muestra al Mueller Hintón con
sangre de cordero con la ayuda de un hisopo.
257
 Se colocan los siguientes discos:  Se incuba a 35 grados centígrados durante 24

 Oxacilina : 1 ug. horas por el método de la vela.
 Cotrimoxazol : 25 ug. Resultado:
 Cloranfenicol : 30 ug.  Desarrollo de colonias solo alrededor del disco
 Eritromicina : 30 mg. XV, significa la presencia de H. influenzae.
 Vancomicina : 30 mg.  Desarrollo de colonias solo alrededor del disco
 Incubar a 35 grados centígrados durante 18 V, significa la presencia de H.parainfluenzae.
horas, tiempo después leer.  El desarrollo alrededor de ambos discos (XV y
V), significa contaminación.
Si el halo del disco oxacilina es mayor a 20 mm se  Luego se realiza la prueba de la Betalactamasa,
reporta sensible a la penicilina. que generalmente es positiva.
La oxacilina es el representante de los betalactámicos  Luego realizar el antibiograma, utilizando
(penicilina, ampicilina, amoxicilina, cefalosporinas de Mueller Hinton Modificado (MHM), se
primera y segunda generación). Si el halo es menor a 19 colocan 3 sensidiscos: Cefotaxime,
mm se reporta sensibilidad disminuida a la penicilina Cloranfenicol y Ampicilina.
aunque este halo sea de 6 mm., es decir no hay Si en el medio de McConkey se encuentran colonias
resistencia definida en puntos de corte para E. lactosa negativas, y su Gram muestra Bacilos
pneumoniae. gramnegativos, realizar prueba de la oxidasa, si es
La lectura se realiza con la caja petri abierta. oxidasa positiva, se trata de Pseudomonas spp. Si es
OJO.- Leer el halo de inhibición del crecimiento y no la Oxidasa negativa, se trata de enterobacterias.
hemólisis.
Si se trata de Moraxella catharralis:
Si se tratara de Haemophilus influenzae: Colonias blanco grisáceas de consistecia cremosa
 En el agar chocolate buscar colonias de 1 mm de tanto en agar sangre como chocolate y muy oxidasa
tamaño, blanquecinas, cremosas o mucoides que positivas, puede tratarse de Moraxella catharralis. Con la
al tocarlas con el asa se deslizan sobre la tinción de Gram se observan diplococos gramnegativos.
superficie toda la colonia, además presenta un No se realiza antibiograma (no hay puntos de corte
olor a ratas (en agar sangre estas bacterias definidos), pero si se realiza la prueba de la B-lactamasa.
desarrollan con el método del satelitismo). Se informa la estimación semicuantitativa de las colonias
 De estas colonias se realiza un Gram, desarrolladas en estos medios: Desarrollo escaso,
observándose cocobacilos gramnegativos moderado o abundante.
pequeños.
 Realizar la prueba de la catalasa, la misma es Tercer día:
positiva. Leer el antibiograma si se hubiere realizado.
 Realizar la prueba de la oxidasa, la misma es
positiva. Interpretación
La identificación de S. pneumoniae, H.
Prueba de requerimiento de factores: X y V Influenzae en pacientes asintomáticos, se considera como
 Con la ayuda de un hisopo se siembra en toda la agentes comensales.
superficie algunas colonias de H.influenzae en el La presencia de Pseudomonas en pacientes
medio de Mueller Hinton. inmunosuprimidos, hospitalizados donde se ha
 A ambos extremos de la placa se coloca los presentado un brote en la sala, se la atribuye como agente
discos de XV y V causal de la infección.
258
CULTIVO DE HISOPADO FARÍNGEO
Tinción Gram
Incubar
incubar 24 hrs.37°C
Siembra por agotamiento
A.S. A.CH. M.C.
Tincion gram
Método de la vela
PRUEBAS BIOQUIMICAS
- Betahemolisis (+)
- Catalasa (-)
- Bacitracina (S)
- Cotrimoxazol ®
IDENTIFICACION BACTERIANA: Streptococcus pyogenes
Esquema N°. 11. Procedimiento general del cultivo de secresion faríngea

(Cortesía: Lic. Diogenes Martinez)
259
CAPITULO 34
CULTIVO DE ESPUTO
Introducción (especialmente con antibióticos) y presentación
Los procesos infecciosos que frecuentemente se del cuadro clínico.
produce en las vías respiratorias bajas son bronquitis,  Leer bien la solicitud de toma de muestras,
bronconeumonía, y cuando está afectada los alvéolos y tomando atención a pedidos de investigación de
en general a nivel del parénquima pulmonar se denomina bacterias que no se aíslan en los cultivos
neumonía. rutinarios como Micoplasma pneumoniae,
Los microorganismos causantes de la neumonía Mycobacteriun tuberculosis y otros.
llegan a los pulmones por las siguientes vías:
 Inhalación directa Toma de muestra
 Aspiración de contenido de las vías respiratorias  El frasco debe tener una capacidad de alrededor
superiores de 50 ml.
 Propagación a lo largo de la superficie de las  Debe ser de material opaco y desechable, con
mucosas boca ancha y tapa de rosca.
 Diseminación hematógena  Indicar al paciente que se enjuague la boca con
solfis o solución de bicarbonato de sodio al 1%
Debemos señalar que en los procesos neumónicos, (para eliminar la flora saprofita de la boca)
existe una variedad de microorganismos como agresores,  Explicar al paciente que debe expulsar la
la variación dependerá de la edad del huésped, su expectoración con una tos profunda, INSISTIR
condición previa de salud, puesto que existen organismos EN QUE LA SALIVA ES UNA MUESTRA
que afectan a huéspedes desnutridos y otros a huéspedes QUE NO SIRVE PARA ESTE ANÁLISIS
aparentemente saludables, pero que poseen un sistema  Se recomienda que la muestra se tome en las
inmunitario deprimido. primeras horas de la mañana cuando es más fácil
El esputo es la muestra más utilizada para el obtener el esputo debido a su acumulación
diagnóstico de infecciones del aparato respiratorio durante la noche.
inferior, principalmente neumonía y tuberculosis.  Si el paciente no puede tomarse la muestra por
Normalmente no es una muestra muy adecuada debido a este método, hacerlo por el método postural.
que está contaminada con secreciones del aparato
respiratorio superior y, por tanto, con bacterias nativas Procesamiento de la muestra
del aparato respiratorio superior. Cuando se obtiene una
muestra de buena calidad permite el diagnóstico
Primer día:
adecuado, evitando el aislar solo bacterias saprofitas Se preparan dos extendidos uno para la tinción de Gram y
contaminantes. otro para Ziehl.
El aparato respiratorio inferior es normalmente Tinción de Gram y cultivo para el diagnóstico de
estéril. neumonia:
 En la tinción de Gram buscar fundamentalmente
el número de leucocitos e informar siguiendo los
Microorganismos patógenos mismos criterios de informe, encontrados en
 Streptococcus pneumoniae vías respiratorias superiores.
 Haemophilus influenzae  Buscar igualmente: cocobacilos gramnegativos
 Klebsiella pneumoniae encapsulados (sospechar de Haemophilus
 Staphylococcus aureus influenzae), Diplococos grampositivos con
 Pseudomonas (en pacientes hospitalizados) cápsula (Streptococcus pneumoniae?), bacilos
 Mycobacterium tuberculosis gramnegativos con cápsula (Klebsiella
pneumoniae?), cocos grampositivos en grupos y
Condiciones de la toma de muestra otros bacilos Gram negativos.
 Tomar la muestra antes de iniciar el tratamiento  La observación de la tinción permite al
con antibióticos. Si los hubiera recibido dejar el microbiólogo darse cuenta si la muestra es un
tratamiento por lo menos 3 días. esputo sospechoso de infección o está mezclado
 Evitar en lo posible la contaminación con la con saliva o material proveniente de boca y
flora endógena de vías aéreas superiores. faringe. Para ser considerada como muestra
 Registrar los antecedentes del paciente referente válida de esputo, es necesario la presencia de 25
a infecciones previas, hospitalizaciones, estado neutrófilos, y máximo 10 células epiteliales por
inmunológico, tratamientos previos campo microscópico de 100X, donde también se
260
observe el predominio de un solo tipo La baciloscopia es el examen básico para el diagnóstico

morfológico bacteriano. Si el esputo no cumple de la tubeculosis humana especialmente en su forma
con estos criterios se debe rechazar y solicitar brocopulmonar (según normas de la Red Nacional de
nueva muestra. Es en la boca que habitualmente Laboratorios de Tuberculosis de Bolivia, la baciloscopia
se encuentran abundantes microorganismo tales está recomendada solamente en muestras de esputo).
como cocos gram positivos alargados grandes y
en cadenas: Streptococcus viridans, Diplococos Muestra
gramnegativos: Moraxella spp, Bacilos La muestra indicada, es el esputo proveniente
gramnegativos fusiformes, grandes: del árbol bronquial, obtenida después de un esfuerzo de
Fusobacterium que frecuentemente contaminan tos. No son aconsejables: la muestra de faringe, secreción
estas muestras. nasal o sólo saliva (leer toma de muestra). Entre otras, se
recomienda recolectar la muestra en un ambiente
Siembra e identificación bacteriana ventilado o al aire libre, asegurándose que frente al
 Con el asa de platino tomar una porcion paciente no haya personas en el momento de la
purulenta de la muestra de esputo y sembrar en expectoración, evitando siempre la contaminación con el
los siguientes medios: Agar sangre, Agar esputo a los bordes del recipiente, obtener una cantidad
chocolate, MacConkey, por agotamiento. de 5 a 10 ml de esputo y colocando la tapa en el envase.
 Incubar los dos primeros medios sembrados en Debiendo solicitarse tres muestras como mínimo, la
una admósfera de C02 (método de la vela). primera en el momento de la consulta, la segunda al día
siguiente y la tercera en el momento de entregar la
Segundo día: segunda muestra.
 Observar el agar sangre en busca de colonias
pequeñas, transparentes, planas y con áreas de Procedimiento
alfa hemólisis, efectuar el procedimiento para Con las medidas de bioseguridad (uso de
identificar Streptococcus pneumoniae (similar al mandil, barbijo, guantes y detrás del mechero), se debe
anterior cultivo). realizar el extendido de la muestra; para esto primero se
 También buscar colonias grandes, transparentes identifica el portaobjeto con lápiz graso o marcador,
ó verduzcas, reptantes, efectuar Gram y oxidasa, anotando el número que corresponda al paciente en el
si son bacilos gram negativos y oxidasa extremo esmerilado de la placa. Se toma la parte más
positivos continuar la identificación para representativa de la muestra (esputo purulento, espeso o
Pseudomonas. con estrías de sangre) con la ayuda de un aplicado de
 Si fueran oxidasas negativas seguir el madera (parte astillada) que facilita la adhesión de la
procedimiento para identificar enterobacterias. muestra, depositar ésta en el centro del portaobjeto
 Observar el agar chocolate, la presencia de realizando el extendido con un movimiento de vaivén en
colonias medianas como gotas de agua o forma circular, longitudinal, hasta lograr una película
ligeramente amarillentas y planas, que al homogénea ni muy gruesa ni muy delgada.
tocarlas se desprende toda la colonia, hacer un El frotis debe abacar tres cuartas partes del
Gram y oxidasa, si fuese oxidasa positiva y portaobjetos, dejando en los extremos un margen de 1cm
bacilos Gram negativos continuar la y a los lados medio centímetro, esto para evitar que el
identificación para Haemophilus influenzae operador se contamine al manipular la placa, desechar el
(Similar al anterior cultivo). plicador en el frasco con hipoclorito de sodio al 3%
(tratar de no quemar al mechero por los aerosoles que se
pueden eliminar y por consiguiente contaminar el
Tinciónde Ziehl Neelsen y cultivo para el ambiente.
diagnostico de Tuberculosis pulmonar Dejar secar el frotis al medio ambiente, fijar la
muestra, pasando la placa tres veces por la llama del
Baciloscopia mechero.
La baciloscopia es el conjunto de Teñir según la técnica yá conocida.
procedimientos técnicos consistentes en la toma de
muestra, extendido, tinción (Ziehl Neelsen) y Lectura
observación con el recuento de los BAAR en un frotis, Observar al microscopio utilizando el objetivo a
principalmente en una muestra de esputo. inmersión (100X), colocando una gota de aceite de
inmersión sobre el frotis, recorriendo desde un extremo
de la placa hacia el otro, buscando las formas bacilares de
color rojo, rosado o púrpura en un fondo azul.
261
microscópicos observados, lo que según el índice de la

OMS corresponde a:
POSITIVO PARA BAAR (+).
Causas de error en la baciloscopia

Se tienen dos tipos de errores, los falsos
positivos que son resultados aparentemente positivos,
Fig. N° 214. Observación microscópica de una baciloscopia, donde se pero que no lo son en realidad debido a varios factores. Y
visualiza BAAR. los falsos negativos que son resultados aparentemente
negativos, que en realidad pueden ser positivos y por
diferentes factores se da un resultado erróneo.
Interpretación a) Falsos positivos
La observación de la placa se realiza en cien campos  Toma de muestra en envases reutilizados
microscópicos; preferentemente en sectores de la placa  Uso de portaobjetos rayados o sucios
donde se encuentren cúmulos de leucocitos y mucus  Uso de microscopio en mal estado
(lugares donde frecuentemente existe mayor
 Poca capacidad para definir bacilos de artificios
concentración de BAAR).
de coloración
Antes de iniciar con el conteo de BAAR, debemos
 Transferencia de bacilos de un extendido a otro
tener una hoja cuadriculada con cien cuadraditos
pequeños, esto para anotar en cada uno de ellos los  Confusión de muestras y/o extendidos
BAAR encontrados en cada campo microscópico  Error en transcripción de resultados
observado (cada cuadradito corresponde a un campo Falsos negativos
microscópico)  Muestra no representativa
Una vez hecho el recuento de BAAR en los campos  Muestra en cantidad insuficiente
microscópicos observados, la suma total de bacilos  Extendido de la muestra no representativa
encontrados se divide entre el número de campos  Calentamiento deficiente o excesivo
observados, el resultado se compara con la tabla  Mala decoloración de fondo
aprobada por la Organización Mundial de la Salud  Decoloración excesiva
(OMS):  Uso de microscopio en mal estado
 Lectura de un número insuficiente de campos
Tabla de la OMS.  Errores en transcripción de resultados
1.- Negativo para BAAR. Cuando en la observación de  Limites de sensibilidad de 5000 a 10000 por ml
cien campos microscópicos no se encuentra ningún de muestra.
Bacilo Acido-Alcohol Resistente. En estos casos se
recomienda observar otros cien campos microscópicos
Recomendaciones
para confirmar la negatividad de la muestra.
 No utilizar portaobjetos rayados o ya utilizados
2.- Positivo para BAAR. Presencia de Bacilos Acido
Alcohol-Resistentes en la muestra. En este caso realizar  Una vez finalizado el trabajo depositar las
el recuento de BAAR por campo microscópico, esto para muestras en el incinerador y proceder al
informar el número de cruces de positividad que quemado
corresponda; para este propósito la OMS recomienda  Las láminas positivas y negativas, deben
utilizar el siguiente índice baciloscópico: guardarse para un posterior control de calidad
a) Positivo (+): cuando el resultado de la división de los
BAAR encontrados es de menos de 1 BAAR por campo Cultivo de Mycobacterium tuberculosis
en 100 campos microscópicos observados. De acuerdo al resultado (positivo, negativo o
b) Positivo (++): Cuando el resultado de la división de dudoso), se realiza el cultivo, para ello la muestra se
los BAAR encontrados es de 1 a 10 BAAR por campo en procede a descontaminarla por el Método de Petroff;
50 campos microscópicos observados. éste método consiste en:
c) Positivo (+++): Cuando el resultado de la división de Mezclar la muestra de esputo 2 ml con 1 ml de
los BAAR encontrados es más de 10 BAAR por campo, hidróxido de sodio al 4%, agitar vigorosamente la mezcla
en 20 campos microscópicos observados. e incubar a temperatura ambiente (25-30°C) durante 30
minutos, de esta manera estamos destruyendo a las
Ejemplo: Sin en un frotis contamos un número total de bacterias acompañantes y sobre todo estamos
90 BAAR en 100 campos microscópicos observados; fluidificando el esputo de manera que obtengamos un
procedemos a dividir 90 entre 100, obteniendo el homogeneizado. Luego se procede a centrifugar durante
cociente baciloscópico 0,8; esto significa que tenemos 20 minutos a 3000 rpm, desechando el sobrenadante;
menos de 1 BAAR por campo en 100 campos luego se añade al sedimieto dos gotas de rojo fenol
acuoso; inmediatamente tomará un color rojo intenso
262
(alcalino). Ya que este pH no es útil deberemos posición vertical el resto del tiempo de incubación. Tener
neutralizarlo, para este fin utilizamos ácido clorhídrico al la previsión de no ajustar muy drásticamente las tapas de
4% colocando 2 o 3 gotas al tubo; obteniéndose una los tubos. La lectura de los cultivos se realiza a los 8 días,
coloración rosada tenue. Con la ayuda de una pipeta 15, 30, 45 y 60 días. Observando las características del
pasteur esteril se toma la muestra del tubo para luego desarrollo de colonias en cada uno de los tubos. Se debe
sembrar en los dos tubos de Lowenstein Jensen, también contar el número de colonias: si hay menos de 20,
se realiza un extendido en portaobjeto para la tinción de informar el número contado, entre 20- 100 informar (+),
Ziehl. más de 100 (++) y colonias confluentes (+++).
Se incuban los tubos en posición horizontal Realizar las pruebas bioquímicas para la
durante las primeras 24 horas; para luego colocarlos en identificar al Mycobacterium, e informar el resultado.
263
CAPITULO 35
HEMOCULTIVO
Introducción
La llegada de las bacterias al torrente
circulatorio ya sea como producto de una infección
asentada en un determinado tejido del organismo o por
una infección transitoria, trae consigo una serie de
síntomas, caracterizadas principalmente por fiebre,
escalofríos intermitentes o prolongados.
Cuando se indaga los antecedentes del paciente, se
encuentra con alguna de las siguientes situaciones, que
pueden explicar el origen de estos síntomas:
 Pacientes con infecciones urinarias.
 Pacientes con quemaduras infectadas.
 Pacientes con heridas sépticas post operatorias.
 Pacientes con catéteres venosos.
 Pacientes que fueron intervenidos
quirúrgicamente del aparato genital.
 Pacientes con tratamiento antimicrobiano
prolongado.
 Pacientes tratadas con drogas inmunosupresoras, Fig. N° 215. Bacteriemia transitoria (a), intermitente (b) y contínua (c).
corticoides o con alimentación parenteral. (Fuente: Struthers, 2005).
El médico al evaluar estos síntomas y sus Septicemia

antecedentes, concluye que puede tratarse de una Es la segunda etapa del proceso infeccioso, que
Bacteriemia, una Septicemia o un Shock en proceso consiste en la invasión y multiplicación bacteriana en el
(Etapas de un solo proceso infeccioso sistémico). torrente circulatorio.
La septicemia es un síndrome clínico caracterizado por
Bacteriemia fiebre, escalofrios, malestar general, taquicardia,
Es la primera etapa de un proceso infeccioso hipotensión arterial y postración, lo cual ocurre cuando
sistémico que consiste en la invasión bacteriana al las bacterias circulantes al multiplicarse exceden a la
torrente circulatorio, sin multiplicarse en ella. Esta etapa eliminación por fagocitosis.
puede ser transitoria, intermitente o continua. En muchos de los casos, los niños además de estos
síntomas experimentan vómitos, distensión abdominal, y
a) Es transitoria: Cuando hay invasión de diarrea.
microorganismos, a menudo pertenecientes a la flora
bacteriana normal de la piel o mucosa al torrente Shock séptico
sanguíneo. Ocurre por ejemplo en una extracción dental Representa la vía final de las infecciones
con el ingreso de flora bacteriana de la boca al torrente bacterianas masivas y graves, con la implementación de
circulatorio por breve tiempo, ya que éstos son una inflamación sistémica con leucocitosis o leucopenia,
inmediatamente fagocitados en el hígado y bazo. hipotensión y fallo multiorgánico (insuficiencia renal,
cardíaca, etc.), con oliguria y transtornos metabólicos.
b) Es intermitente: Cuando las bacterias de un sitio La toxemia de estos casos es producto de la presencia de
infectado, son liberadas esporádicamente hacia el torrente bacterias gramnegativas.
sanguíneo, por ejemplo. Desde un absceso, peritonitis,
etc. Agentes etiológicos de una bacteriemia o
septicemia
c) Es continua: Cuando existe continúa circulación de  Salmonella thypi
bacterias en la sangre, como en el caso de una  Escherichia coli
endocarditis bacteriana subaguda. En general, se  Staphylococcus aureus
caracteriza por picos febriles, escalofrios, soplo cardíaco,
 Staphylococcus epidermidis
y muchas veces máculas puntiformes en la piel.
 Streptococcus pneumoniae
 Streptococcus viridans
264
 Neisseia meningitidis del aumento de la temperatura, pues existe un

 Clostridium perfringens periodo de 1 a 2 hrs. Entre el momento de
 Haemophulus influenzae entrada de los gérmenes a la circulación y el
 Brucella spp. escalofrio siguiente.
 Enterococcus faecalis  Específicamente en la fiebre tifoidea, si los
 Pseudomona aureginosa cultivos de la primera semana son negativos, y
 Streptococcus pyogenes el paciente continua con fiebre, realizar otros
hemocultivos cada semana, durante cuatro
 Candida albicans
Nota.- Considerar…. Que la identificación de dos o varios
semanas.
microorganismos puede indicar una bacteriemia
polimicrobiana, que a veces se presenta en pacientes La toma de muestra debe realizarla el personal
debilitados pero también puede deberse a contaminación. La específicamente entrenado, en lo posible se tratará de un
bacteriemia anaerobia suele estar causada por varios agentes laboratorista; en su defecto el personal de enfermeria
patógenos a la vez; por ejemplo, en las graves bacteriemias siguiendo las instrucciones que por escrito debe entregar
fulminantes que se producen en los traumatismos graves o el laboratorio a toma de muestra.
las operaciones del intestino grueso, uno o varios anaerobios Utilizar 2 Frascos de Hemocultivo (de 100 o 50
puede asociarse a uno o más aerobios.
ml) uno para aerobios y otro para anaerobios:
AEROBIOS: Pueden ser caldo tripticasa soya, caldo
Diagnostico bacteriológico columbia, caldo brucella o caldo BHI. ANAEROBIO:
Una vez diagnosticada la bacteriemia o la Pueden ser caldo columbia con 0.5% de cisteina, caldo
septicemia, el médico pide al laboratorio la realización BHI pre-reducido o caldo tioglicolato).
de un HEMOCULTIVO (cultivo de sangre), para la
identificación y antibiograma del agente causal de esa Primer día
infección. Identificar los frascos: Nombre y edad del paciente,
Sala de internación y No. De cama, fecha y hora de la
Toma de muestra toma de muestra.
Antes de proceder a la toma de muestra se debe  En la Toma de muestra propiamente, utilizar
conocer el diagnóstico presuntivo, indagar al paciente guantes estériles y barbijo.
sobre sus síntomas, si está recibiendo tratamiento  Elegir el sitio para la punción (aplicando
antimicrobiano, esto para decidir el número, la secuencia brevemente el torniquete).
y los horarios de toma de muestra de sangre.  Limpiar firmemente la piel con una torunda de
algodón embebida en alcohol de 70%
Número de hemocultivos a realizar:  Luego limpiar en forma concéntrica la piel con
 Pacientes sin tratamiento con antimicrobianos: 3 una torunda embebida con tintura de yodo al 2%
hemoclutivos en 48 horas.  Dejar actuar durante 2 minutos.
 Pacientes con tratamiento con antimicrobianos:  Durante este tiempo cubrir el área con pedazo de
5 hemocultivos, en 48 horas. gasa estéril.
 Paciente con shock (emergencia): 3  Abrir la región de la tapa metálica del frasco de
hemocultivos en forma contínua de diferentes hemocultivo y desinfectar con una torunda de
venas antes del tratamiento. algodón embebida en alcohol.
 Colocar el torniquete, retirar la gasa de la zona
Secuencia en la toma de muestra: de extracción (NOTA, no volver a tocar con los
 En endocarditis bacteriana, se obtienen las dedos el área desinfectada, ya que ésta es una
muestras en cualquier momento, debido a que causa frecuente de contaminación de los
los microorganismos se encuentran en escasa hemocultivos, con microorganismos de la piel.).
cantidad en la circulación, pero en forma  Limpiar nuevamente la piel con otra torunda
constante. embebida con alcohol 70%.
 En pacientes que reciben antimicrobianos se  Con la jeringa descartable extraer 10 ml. de
toma en todos los momentos antes de la nueva sangre.
administración del antimicrobiano.  En el frasco de hemocultivo aeróbio inocular 5
 En pacientes con shock, tomar la muestra uno ml. de sangre (cuidando de no introducir aire) y
tras el otro, en diferentes lugares y venas y con sin cambiar de aguja, colocar los otros 5 ml. al
diferentes jeringas. medio anaeróbio (si los frascos contienen 50 ml;
puesto que la dilución de sangre en el medio
Horarios de la toma: debe ser al 10%). Si los frascos contienen 100
 En pacientes con aumentos intermitentes de ml de medio entonces colocar 10 ml de sangre a
temperatura, extraer la sangre momentos antes cada medio. (NOTA, La sangre en el medio no
265
debe exceder el 10%, por que las substancias de  La cantidad de sangre a extraer en lactantes es
defensa del individuo presentes en la sangre, de 1 a 2 ml., niños 2 a 5 ml.
pueden inhibir el desarrollo de las bacterias).  Incubar a 35 grados centígrados durante varios
 Mezclar inmediatamente por inmersión. días.
Fig.N° 216. Toma de muestra y siembra en un hemocultivo (Fuente: Struthers, 2005).
Segundo día  Medios de cultivo ( Agar sangre, agar chocolate

Luego de la incubación de las primeras 24 horas, con isovitales y Mac Conkey)
hasta 7 dias, observar el sobrenadante de los frascos del  Dos portaobjetos desengrasados y estériles.
hemocultivo (evitando cualquier movimiento brusco) con  Marcador. Asa de platino, mechero bunsen.
el objetivo de ver alguna de las siguientes características:
Hemólisis, turbidez, coágulos o burbujas de gas. Procedimiento:
Anotar cualquiera de estos cambios en un cuaderno del Identificar las cajas petri que contienen el medio de
laboratorio, para comparar con los resultados finales. cultivo previamente calentados a 35°C. Igualmente los 2
portaobjetos previamente flameados a la llama del
mechero.
Subcultivo (a partir del segundo día)  Inclinar ligeramente el frasco del hemocultivo,
Ordenar todos los materiales y medios necesarios: para flamear su tapa rápidamente con el
 Cajas petri mechero.
 Jeringas
266
 Introducir la aguja con cuidado de no mover desarrolla el mismo microorganismo en cultivos de dos o
demasiado el sobrenadante; aspirar alrededor de más muestras., c) cuando el desarrollo es rápido (48
1 ml. del líquido, evitando al introducir la aguja, horas).
que ingrese aire al frasco. Únicamente en casos excepcionales y/o cuando los
 Abrir la tapa de la caja petri (que esta vez está pacientes han sido o estan hospitalizados y en pacientes
con la tapa hacia arriba) con la mano izquierda y de gravedad que se presentan 2 tipos de colonias.
con la derecha introducir la aguja en la caja sin Contaminantes: La contaminación de los hemocultivos
tocar el medio, depositar 2 o 3 gotas del líquido puede evitarse siguiendo estrictamente las normas de
y cerrar rápidamente la caja, proceder asepsia durante la obtención e inoculación de la sangre en
igualmente con los otros medios de cultivo; los medios de cultivo. Pero aun en condiciones ideales,
también depositar 3 gotas del líquido en cada en el 3-5% de los hemocultivos se desarrollan
portaobjetos. microorganismos “contaminantes” procedentes de la piel
 Extender las gotas del sobrenadante sobre el tales como S. epidérmidis (puede ser agente causal de una
medio de cultivo, con el asa de platino, así como infección o contaminante), P. acnés, Clostridium spp,
también las del portaobjeto. difteroides o del medio ambiente como Bacillus spp., en
 Incubar las cajas a 35 grados centígrados y con escasa cantidad y en un solo hemocultivo, generalmente
5 a 10% de CO2 (Método de la vela) las cajas de se trata de una contaminación (es ésta una de las razones
agar sangre y chocolate. por las cuales se debe tomar más de 3 hemocultivos en un
 Colorear las muestras de los portaobjetos. proceso infeccioso).
 NOTA: El resultado de las características de La presencia de Enterobacterias, Pseudomonas
desarrollo de los hemocultivos y las de la aeruginosa, Staphylococcus aureus, Haemophilus, S.
coloración de gram (forma, coloración y Pneumoniae, levaduras en un hemocultivo, indica en la
disposición de las bacterias) informar gran mayoría de los casos, que se trata de los agentes
inmediatamente al médico sea por escrito o por etiológicos de esa infección.
teléfono.
Ejemplo No. 1: Si en el hemocultivo se observa turbidez
 Realizar este procedimiento cada 2 días. Hasta 7
y presencia de coágulos, el Gram muestra cocos
dias.
grampositivos, dispuestos en pequeñas agrupaciones. En
En pacientes graves, que están recibiendo el agar sangre existen colonias blanco grisaceas
medianas, humedas brillantes con hemólisis alrededor de
antibióticos y no responden al tratamiento o pacientes
las colonias, realizar Pruebas Bioquímicas para cocos:
con endocarditis presumiblemente por bacterias de difícil
La prueba de la catalasa es positiva, la prueba de la
crecimiento, incuabar los frascos de hemocultivo hasta 14
coagulasa es positiva; estos datos son suficientes para
días.
definir que se trata del Staphylococcus aureus. El
Pruebas bioquímicas e identificación bacteriana. A las siguiente paso será el realizar el Antibiograma para
determinar la susceptibilidad y resistencia de esta
24 horas del subcultivo, se observa el desarrollo de las
bacteria a los antibióticos.
colonias. De acuerdo a sus características, los medios en
los que desarrollan, además de la verificación con otra
Ejemplo No. 2: Si en un hemocultivo se observa
tinción de gram, se procede a realizar las pruebas
turbidez y algunas burbujas de gas, y el Gram muestra
bioquímicas.
Debe sospecharse una infección propiamente bacilos gram negativos, entonces realizar pruebas
bioquímicas para enterobacteras.
dicha en los siguientes casos: a) cuando se desarrolla el
Finalmente el informe al médico debe contener:
mismo microorganismo en dos frascos de la misma
muestra (en la mayor parte de los casos es un solo agente  La bacteria identificada
etiológico el que desarrolla en los medios), b) cuando se  El antibiograma
267
HEMOCULTIVO
PRIMER CULTIVO incubar hasta 15 días. A 35 – 37ºC
SUBCULTIVO Tinción de Gram

Siembra por Agotamiento
Incubar
24 hrs a 35 a 37ºC
A.S. A.CH. M.C.
Método de la vela
PRUEBAS BIOQUIMICAS
CATALASA T.S.I.
COAGULASA L.I.A.
BACITRACIN C.S.
NOVOVIOCINA S.I.M.
OPTOQUINA UREA
ANTIBIOGRAMA
Realizar el antibiograma de acuerdo al microorganismo identificado
Esquema N° 12. Procedimiento general de un hemocultivo

(Cortesía Lic. Diogenes Martinez)
268
CAPITULO 36
CULTIVO DE LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO
Introducción amortiguación de golpes y se localiza en el espacio
El cerebro y la médula espinal están protegidos subaracnoideo, es decir, en el espacio que queda entre la
por el cráneo y la columna vertebral respectivamente. El piamadre y la aracnoides. El LCR es segregado por el
tejido nervioso (cerebro y médula espinal) está separado plexo coroideo de los ventrículos intracraneales, sale del
del hueso por medio de tres capas de tejido conjuntivo, la sistema ventricular a través de los agujeros de Luschka y
piamadre, la aracnoides y la duramadre. El líquido Magendie y después se distribuye rodeando al cerebro y
cefalorraquídeo (LCR) actúa como mecanismo de a la meninge espinal.
Fig. N° 217. Estructura del tejido nervioso que sufre la infección bacteriana (Fuente: Struthers, 2005).
Vías de ingreso obnubilación (visión borroza o torpor mental) al coma y

Los microorganismos pueden alcanzar el convulsiones.
cerebro y médula espinal principalmente a través de dos
vías: la hematógena y la directa. La hematógena se Microorganismos comprometidos con las
produce a través de los sistemas vasculares arterial y meningitis
venoso del cerebro donde llegan pequeños émbolos  Neisseria meningitidis
infectados (transportan microorganismos) desde zonas de  Streptococcus pneumoniae
infección alejadas, como el absceso pulmonar, válvulas  Streptococcus agalactiae
cardíacas infectadas o como ocurre por ejemplo con los
 Escherichia coli
meningococos que se introducen en el torrente sanguíneo
 Haemophilus influenzae
a partir de la nasofaringe y alcanzan el cerebro a través
del sistema arterial y causar una meningitis. La directa  Staphylococcus aureus
ocurre generalmente como consecuencia de traumatismos  Pseudomona aeruginosa
craneoencefálicos con lesión de fractura ósea, quedando  Mycobacterium tuberculosis
el SNC expuesto al medio externo y por tanto a la  Cryptococcus neoformans
contaminación bacteriana con flora patógena o flora  Virus del herpes
microbiana normal, también puede ocurrir como  Enterovirus
producto de una intervención quirúrgica o focos La etiología de las meningitis varía con la edad. Las
odontogénicos. meningitis en niños menores de un mes de edad
Las meningitis son infecciones principalmente (meningitis neonatales), están causadas principalmente
de la capa aracnoides y la piamadre ambos en contacto por Escherichia coli y Streptococcus agalactiae; en tanto
con el LCR, en general son de curso agudo sus que en menores de 6 años el Haemophilus influenzae es
principales síntomas son la fiebre, cefalea, vómitos, la bacteria que más se aisla de estas infecciones, en niños
rigidez de nuca y fotofobia, cuando existe además una mayores a 6 años, jóvenes adultos Neisseria meningitidis
encefalitis (menigoencefalitis), hay disminución del nivel Streptococcus pneumoniae y los virales son los
de conciencia de intensidad variable, que va de microorganismos más comunes.
269
Diagnóstico citoquimico y microbiológico inmediatamente. Nunca preservar la muestra a

El diagnóstico inicial se realiza a través de la refrigeración.
obtención de muestras de LCR y la tinción de Gram, por
la gravedad del cuadro se recomienda iniciar el Examen químico. Comprende el examen macroscópico
tratamiento empirico una vez obtenida la muestra. A de los aspectos físicos y químicos, se debe anotar la
través de la punción lumbar que debe ser realizada por el cantidad, color (normal es claro como agua de roca),
médico, con normas de asepsia y antisepsia en la piel con puede ser amarillo o xantocrómico (por hemólisis o
rigurosiada; luego de la punción se obtiene LCR de 5 a ictericia), aspecto: transparente, turbio, purulento o
10 ml que debe ser distribuida en dos frascos estériles sanguinolento, pH, densidad, y someter a la
para realizar un examen citoquimico y otro centrifugación la muestra (5 a 10 minutos a 3000 rpm) y
microbiológico. realizar con el sobrenadante la determinación de glucosa
El transporte de la muestra al laboratorio debe ser y proteínas (reacción de Pandy) y con el sedimento
rápido en razón de que las células contenidas en el LCR realizar el estudio microscópico, que incluye el recuento
se destruyen rápidamente por el cambio de pH, la de células, la diferenciación de los leucocitos y frotis para
temperatura y la glucorraquia (glucosa del LCR) sufre realizar coloraciones de Gram, giemsa y Ziehl Neelsen.
modificaciones, por tanto se debe procesar
Cuadro N° 116. Caracteristicas del LCR normal y patológico

OBSERVACIÓN NORMAL MENINGITIS MENINGITIS TUBERCULOSA
BACTERIANA
Leucocitos 0 a 5 PMN y 200 a 20.000 PMN y 100 a 1000 mononucleares
monocitos Cayados (neutrófilos jóvenes)
Glucosa 45 a 85 mg/dl 5 a 20 mg/dl 20 a 40 mg/dl
Proteinas 15 a 45 mg/dl >100 mg/dl 50 a 100 mg/dl
Bacterias Se observan bacterias Gram Rara vez es positiva para BAAR.
(+) o (-).
Cultivo e identificación bacteriana

El sedimento de la muestra debe cultivarse En lo referente a Cryptococcus neoformans,
inmediatamente en agar sangre, agar chocolate (ambos en realizar un examen directo mezclando una gota del
CO2 al 5%) y MacConkey. Incubar a 37°C, por 24 horas, sedimento del LCR con una gota de tinta china entre
si no hay desarrollo incubar hasta 72 horas. En caso de porta y cubre. Observar con objetivo de 40X y buscar la
sospecha de Tuberculosis, sembrar em Lowenstein presencia de levaduras encapsuladas.
Jensen, durante 6 semanas. El informe final debe contener el resultado del
Luego del desarrollo de las colonias, realizar un examen químico, citológico, tinción de Gram y Ziehl, el
Gram y las pruebas bioquímicas necesarias para la microorganismo identificado y el antibiograma.
identificación del microorganismo de acuerdo a protocolo
ya conocido, además del antibiograma respectivo.
270
CAPITULO 37
CULTIVO DE EXUDADOS PURULENTOS, HERIDAS Y
ABSCESOS
Introducción tratamiento de su enfermedad. Por desgracia, el 5-10% de

Hay un conjunto de procesos infecciosos muy los sujetos internados contraen alguna enfermedad
heterogéneos entre sí, tanto por su localización como por durante su estancia en el hospital. Las infecciones
su cuadro clínico y su pronóstico, entre ellos mencionar: hospitalarias (nosocomiales) son costosas, y
1) las infecciones de la piel, tejido celular subcutáneo y generalmente se pueden evitar o limitar en gran medida.
de los musculos; 2) las infecciones abdominales y Muchas se contraen en los departamentos de cirugía. La
genitales, y 3) las infecciones de las incisiones tasa de infección postoperatoria de heridas quirúrgicas
quirúrgicas. La mayoría de ellas están causadas por varía según éstas sean intervenciones quirúrgicas
bacterias denominadas “bacterias piógenas”, que dan abdominales, torácicas, ortopédicas y otros. La infección
lugar a la formación de exudados purulentos o pus y/o de la herida quirúrgica puede producirse inmediatamente
necrosis de los tejidos. El exudado está constituido por después de la operación o varios días después y limitarse
microorganismos invasores, leucocitos, principalmente a la línea de sutura o extenderse a toda la zona operada.
polimorfonucleares, y una mezcla de humores orgánicos El agente etiológico más frecuente es Staphylococcus
y fibrina, los mismos pueden estar emanando al exterior aureus (generalmente resistente a la penicilina y ahora
de una herida o formando abscesos. también a la meticilina), seguido muy de cerca por E. coli
La procedencia anatómica del exudado puede y otras bacterias intestinales. Los anaerobios procedentes
variar considerablemente, lo mismo que los del intestino grueso del paciente pueden penetrar en el
microorganismos que intervienen en la infección. Casi campo operatorio y ocasionar graves infecciones mixtas
todas las bacterias de la flora normal o que penetran en el que son bastante frecuentes en los hospitales con
organismo pueden producir un exudado. programas de asistencia y profilaxis postoperatoria mal
organizada. Cabe la posibilidad de que Bacteroides
Heridas infectadas en el hospital fragilis y, de vez en cuando Clostridium perfringens
Una de las principales preocupaciones que penetran en el torrente sanguíneo y causan una infección
suscita la asistencia de las personas hospitalizadas es postoperatoria generalizada que a menudo es mortal.
evitarles cualquier daño durante el diagnóstico y
Microorganismos patogenos
Cuadro N° 117. Bacterias asociadas con mayor frecuencia a las infecciones de piel, tejidos blandos, artritis y osteomielitis.
INFECCIONES BACTERIAS COMPROMETIDAS
Infecciones de la piel Estreptococos del grupo A, Staphylococcus aureus,
Pseudomona aeruginosa.
Infecciones de tejidos blandos Estreptococos del grupo A, coliformes, anaerobios
intestinales, Clostridium perefringens.
Artritis séptica Staphylococcus aureus, estafilococos caugulasa
negativos, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus
viridans, coliformes, Pseudomonas spp., Neisseria
meningitidis
Osteomielitis Staphylococcus aureus, Sterptococcus pneumoniae,
Estreptococos B-hemolíticos Streptococcus viridans,
coliformes, salmonella spp.
El diagnóstico y tratamiento de los pacientes con éstas deben tomarse con la ayuda de un hisopo de la
infecciones supuradas requiere una relación estrecha profundidad de la herida o pequeñas muestras de tejido
entre el clínico y el microbiólogo para una correcta representativo de la misma; deben colocarse en un tubo
recogida de la muestra, el transporte al laboratorio y el esteril tapado con algodón y enviado a laboratorio
procesamiento adecuado. inmediatamente. En caso de abscesos utilizar una jeringa
y aguja para puncionar el absceso, la muestra obtenida
Toma de las muestras enviar al laboratorio en la jeringa con la aguja asegurada
Las muestras de exudados purulentos pueden con su cobertor.
provenir de infecciones de intervenciones quirúrgicas,
quemaduras, úlceras de decúbito y desgarros infectados,
271
En caso de exudados de cavidad pleural, pericardico, informar inmediatamente al médico tratante del olor, el
interarticulares, etc. se obtiene por aspiración con jeringa resultado del Gram, pues esos datos pueden ser útiles
en condiciones de asepsia. para elegir empíricamente el antibiótico apropiado.
También ayudará a determinar si se necesita un cultivo
Examen macroscópico de anaerobios.
Las muestras de pus que llegan a laboratorio en
una jeringa o un recipiente esteril deben ser objeto de un Examen directo
examen cuidadoso (color, cosistencia y olor) a cargo del Con cada muestra realizar un Gram, si el médico
Laboratorista. pide, también realizar una tinción de Ziehl Neelsen.
Anotar las características bacterianas encontradas
a) Color.- El color del pus varía entre amarillo verdoso y y leucocitos: número de PMN pcm, características
rojo pardusco. En general el color rojo se debe a la morfológicas, tintoriales y cantidad de las bacterias
presencia de sangre o hemoglobina. El material aspirado (escasas, moderado o abundantes), considerar también la
de un absceso amebiano del hígado tiene una consistencia presencia de hongos.
gelatinosa y un color entre pardo oscuro y pardo
amarillento. El pus proveniente de heridas quirírgicas o Cultivo e identificación
traumáticas (quemaduras) pueden aparecer teñidos de Sembrar las muestras en agar sangre, agar chocolate
verde azulado por la presencia de piocianina, pigmento y MacConkey, identificar las bacterias mediante las
elaborado por Pseudomonas aeruginosa. pruebas bioquímicas de acuerdo a protocolo conocido y
realizar el antibiograma correspondiete.
b) Consistencia.- La consistencia puede variar entre la Sin embargo, no hay que someter
propia de un líquido turbio y la de una sustancia espesa y sistemáticamente a pruebas de sensibilidad, las bacterias
pegajosa. Por lo general, los exudados extraidos por cuya sensibilidad se conoce de antemano, como en el
aspiración de las articulaciones, la cavidad pleural, el caso de los estreptococos del grupo A, Pasterurella y
saco pericárdico o la cavidad peritoneal son líquidos y actinomyces que casi sin excepción son sensibles a las
presentan toda clase de gradaciones entre un exudado penicilinas. Así como en los casos de infecciones mixtas
seroso y el pus verdoso. no es necesario realizar los antibiogramas a todas
bacterias encontradas, en estos casos los médicos suelen
c) Olor.- El olor nauseabundo fétido es uno de los realizar un tratamiento empírico considerando las
rasgos más característicos de las infecciones por características morfológicas y tintoriales de las bacterias.
anaerobios o de las infecciones mixtas, por aerobio y
anerobios, aunque a veces pueden faltar. Hay que
272
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273
274
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JUAN PEREZ COCA

ILUSTRACIONES: HERIBERTO R. ILLANEZ ZEBALLOS

1.- Protistas inferiores los demás microbios. Finalmente en 1969 Whittaker

Fig. N° 3. Clasificación biológica de los seres vivos

1. Reino Monera.- Está formado por organismos

4. Reino Vegetal.- Lo forman organismos autotróficos,

5. Reino Animal.- Está formado por seres heterotróficos,

Evidenciándose con ello, que los eucariotas tienen una

Relación evolutiva de los microorganismos, multicelulares complejos y desarrollados como los

EVOLUCIÓN PREBIÓTICO EVOLUCIÓN

Esquema Nº 2. Periodos de la evolución precelular y origen de la vida

Sin embargo la explicación del origen de la vida, Origen de las enfermedades

Sin embargo, quien fue el primero en observar los

Fig. Nº 12.Rober Hooke (Fuente: www.softarchive.net).

En posteriores años, el desarrollo de la sustancias orgánicas. Esta postulación fue largamente

Ese mismo año (1877), Ferdinand Cohn

5.- Descubre 4 métodos para atenuar microorganismos y

c) La inoculación del microorganismo aislado por

3.- En 1884, descubre el Vibrión Colérico, causante del

Fig. N° 21. Hans Christian Joachim Gram, 1852-1938.

Ilia Méchnikov, en 1882 estudia los mecanismos

fabricar su compuesto número 606, que resultó ser un

Carlos Finlay, (Cubano) descubre el mecanismo

Fig. Nº 25.Carlos Finlay (Izq.), y Walter Reed (Der.): La fiebre amarilla

En 1929, A. Fleming descubre la penicilina, al

Cuadro N° 1. Clasificación de las bacterias de importancia clínica

BACILOS Haemophilus Haemophilus influenzae

ESPIROQUETAS Treponema Treponema pallidum

BACTERIAS Chlamydia Chlamydia trachomatis

INTRACELULARES Y Rickettsias Rickettsi rickettsii

ESTRUCTURA CELULAR BACTERIANA

a) Equivalencia de las dimensiones más utilizadas en el estudio de las estructuras bacterianas:

Microscopio óptico Desde 0.2 um. Observación de la estructura general de las

1. Cápsula Las cápsulas son de mayor espesor durante la

estafilococos, estreptococos poseen microcápsulas

a) Polisacáridos.- Los azúcares más habituales que

bacteria su especificidad antigénica permitiendo membrana y estabilizarla. Además es tóxico para el

negativos. Las Mycobacterias son teñidas adecuadamente

virulentas de Mycobacterium tuberculosis). La macrófagos. En las cepas de Mycobacterias más

Funciones y propiedades de la pared fagocitosis, tener cierta resistencia al complemento,

Fig. Nº 38. Membrana citoplásmica (Fuente: www.guia.heu.nom.br).

algunos de ellos se encuentran rodeados por una capa

evitar su réplica o segregación del plásmido durante la

Fig. Nº 42. Partes de una épora (Fuente: www.webcd.usal.es).

Fig. Nº 41. Localización de las esporas hiendo de izquierda a derecha:

La estructura de un esporo presenta las

7. Flagelos El corpúsculo basal, en las bacterias Gram

Fig. Nº 44.Partes de un flagelo (Fuente: www.el100ambientologo.blogspot.com).

Fig. Nº 45. Ubicación de los flagelos bacterianos (Fuente: www.hanskrause.de).

Fig. Nº 46.Disposición de los flagelos bacterianos.

a) Catabolismo.- Es el proceso de descomposición de las substancias nutritivas en compuestos más simples.

Ejemplo: La glucosa una vez en el citoplasma sufre la

Fructosa 1-6 difosfato

1-3 fosfoglicerato + NAD NADH2 Nitratos fumaratos

Ácido láctico, Ácidos mixtos y alcoholes + CO2

VÍA DE LAS HEXOSAS MONOFOSFATO

RECUADRO N° 1: Efecto de la caída del pH en un medio de 6-fosfogluconato

Glucosa 6-fosfato ADN, RNAm,RNAt y RNAr Proteína