Diluciones

L a b o rato r i o d e i n m u n o l o g í a
M CQ . L i ze t h J o c e l y n S e r n a V i l l a l o b o s
 Diluir

Laboratorio de inmunología
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 Definición
Proceso físico que consiste en preparar una solución de menor
concentración a partir de una solución concentrada.

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 𝑛𝑢𝑚𝑒𝑟𝑎𝑑𝑜𝑟 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 1 1
Fracción = = =
𝑑𝑒𝑛𝑜𝑚𝑖𝑛𝑎𝑑𝑜𝑟 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 + 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑦𝑒𝑛𝑡𝑒 10 1 + 9

Proporciones (soluto): (soluto + diluyente) = 1:10

Exponencial 10−1 = 0.01

Ejemplo:
𝟏
𝟏: 𝟏𝟎 = = 𝟏𝟎−𝟏
𝟏𝟎
1 parte del soluto + 9 partes del solvente

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5
 Se realiza en un solo paso, desde la solución
original hasta la dilución final.

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 Definición
Sucesión de diluciones con incrementos
progresivos y regulares, el factor de
dilución siempre será igual.

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Prepare una dilución Factor de dilución 10
1/100,000 𝟏
𝒙
𝟏
𝒙
𝟏
𝒙
𝟏
𝒙
𝟏
=
𝟏
𝟏𝟎 𝟏𝟎 𝟏𝟎 𝟏𝟎 𝟏𝟎 𝟏𝟎𝟎,𝟎𝟎𝟎

Dilución directa:
1 mL en 99,999 mL
A B C D E
Dilución seriada:

1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml

9 ml
10 ml 9 ml
10 ml 9 ml
10 ml 9 ml
10 ml 9 ml
10 ml

Dilución 1/10 Dilución Dilución Dilución Dilución

Muestra o 1/100 1/1000 1/10000 1/100000
1:10 o o o o
1:100 1:1000 1:10000 1:100000
 Material utilizado:

-Calibración

-Medir volúmenes pequeños con instrumental de

tamaño mucho mayor o viceversa

Diluyente utilizado:

Puntos críticos en -Soluciones insolubles

la realización de -pH inadecuado

-Contaminación
diluciones Operador:

-Mal enrasado

-Mal pipeteo

Material de vidrio:

-Error del 2% aumenta con las veces que se utiliza

 Ejercicios

Dilución directa
 -Lleve 5 mL de muestra a una dilución 1/10.

1. Datos 2. Fórmula 3. Despeje 4. Sustitución

a) 𝟓 𝒎𝑳
𝟏 𝑽𝒎 𝑽𝒕 = 𝟏𝟎 ∙ = 𝟓𝟎 𝒎𝑳
= 𝟏
𝒅 𝑽𝒕

𝑽𝒕 𝑉𝒎 Volumen del diluyente= 50 𝒎𝑳 − 𝟓 𝒎𝑳 = 45 mL

𝟏 𝑽𝒎
= =
1/d=1/10 𝒅 𝑽𝒕 𝒅 1
Vm=5 mL
Vt= ?
1/d= Dilución
𝑽𝒕 = 𝒅 ∙
𝑽𝒎 5. Resultado
Vm= Volumen de muestra 𝟏
Volumen del diluyente= ? Vt= Volumen total = (Volumen de diluyente + b)
Vm)
𝑽𝒕 = 𝑽𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 𝒅𝒆 𝒅𝒊𝒍𝒖𝒚𝒆𝒏𝒕𝒆 + 𝑽𝒎 Volumen del diluyente= 45 mL

𝑽𝒕 = 𝟓𝟎 𝒎𝑳
𝑽𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 𝒅𝒆𝒍 𝒅𝒊𝒍𝒖𝒚𝒆𝒏𝒕𝒆 = 𝑽𝒕 − 𝑽𝒎

Laboratorio de inmunología
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 Vm=5 mL
Volumen del diluyente= 45 mL
Vt= 50 mL
Dilución = 1/10

5 ml

45
50 ml
ml

Dilución 1/10
o 1:10, o
Muestra 𝟏𝟎−𝟏
Laboratorio de inmunología
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 -Prepare exactamente 200 mL de una dilución 1/50.

1. Datos 2. Fórmula 3. Despeje 4. Sustitución

1) Despejar Vm (𝟐𝟎𝟎 𝒎𝑳) ∙ 𝟏

𝑽𝒎 = = 𝟒 𝒎𝑳
𝟏 𝑽𝒎 𝟓𝟎
=
𝒅 𝑽𝒕 Volumen de diluyente= 200 mL – 4 mL= 196 mL
𝟏 𝑽𝒎
= (𝑽𝒕) ∙ 𝟏
1/d=1/50 𝒅 𝑽𝒕 = 𝑽𝒎
Vm= ? 𝒅
Vt= 200 mL
1/d= Dilución
2) Despejar Volumen del diluyente
5. Resultado
Vm= Volumen de muestra
Volumen del diluyente= ? Vt= Volumen total = (Volumen de diluyente +
Vm) Vt= Volumen de diluyente + Vm Vm= 4 mL

Volumen de diluyente= Vt - Vm Volumen de diluyente= 196 mL

Laboratorio de inmunología
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 Vm= 4 mL
Volumen del diluyente= 196 mL
Vt= 200 mL
Dilución: 1/50

4 ml

196
200 ml
ml

Dilución
1/50, o 1:50,
Muestra o 𝟓−𝟏
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 Ejercicios

Dilución seriada
 -Prepare 6 mL de una dilución 1:81, utilizando diluciones seriadas, y solo
cuenta con 16 mL de diluyente

1. Encontrar factor 3. Fórmula 3. Despeje 4. Sustitución

de dilución
𝟏 𝑽𝒎 1) Despejar Vm
= (𝟔 𝒎𝑳) ∙ 𝟏
81 = 9 𝒅 𝑽𝒕 𝑽𝒎 = = 𝟐 𝒎𝑳
𝟏 𝑽𝒎 𝟑
9=3 1/d= Dilución =
𝒅 𝑽𝒕
Vm= Volumen de muestra Volumen de diluyente= 6 mL – 2 mL= 4 mL
3 𝑥 3 𝑥 3 𝑥 3 = 81 Vt= Volumen total (Volumen de diluyente (𝑽𝒕) ∙ 𝟏
+ Vm) = 𝑽𝒎
𝒅

2) Despejar Volumen del diluyente 5. Resultado

2. Datos Vt= Volumen de diluyente + Vm Vm= 2 mL

Volumen de diluyente= Vt - Vm Volumen de diluyente= 4 mL

1/d=1/3
Vm= ? Diluyente para la dilución seriada: 𝟒 𝒎𝑳 𝟒 =
𝟏𝟔 𝒎𝑳
Vt= 6 mL
Volumen del diluyente= ?
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 Factor de dilución 3
Dilución en serie 𝟏
𝟑
𝒙
𝟏
𝟑
𝒙
𝟏
𝟑
𝒙
𝟏
𝟑
=
𝟏
𝟖𝟏

Vm= 2 mL
Volumen del diluyente= 6 mL
Vt= 8 mL
A B C D

2 ml 2 ml 2 ml 2 ml

68 ml
ml 68ml
ml 68 ml
ml 68 ml
ml

Dilución 1/3 Dilución 1/9 Dilución 1/27 Dilución 1/81

Muestra o o o o
1:3 1:9 1:27 1:81
 -Prepare 3 mL de una dilución 1:1024, utilizando diluciones seriadas, y solo
cuenta con 12 mL de disolvente.

1. Encontrar factor 3. Fórmula 3. Despeje 4. Sustitución

de dilución
𝟏 𝑽𝒎 1) Despejar Vm
= (𝟑 𝒎𝑳) ∙ 𝟏
5
𝒅 𝑽𝒕 𝑽𝒎 = = 𝟎. 𝟕𝟓 𝒎𝑳
1024 = 4 𝟏 𝑽𝒎 𝟒
1/d= Dilución =
𝒅 𝑽𝒕
Vm= Volumen de muestra Volumen de diluyente= 3 mL – 0.75 mL= 2.25 mL
4 𝑥 4 𝑥 4 𝑥 4 𝑥 4 = 1024
Vt= Volumen total = (Volumen de (𝑽𝒕) ∙ 𝟏
diluyente + Vm) = 𝑽𝒎
𝒅

2) Despejar Volumen del diluyente 5. Resultado

2. Datos Vt= Volumen de diluyente + Vm Vm= 0.75 mL

Volumen de diluyente= Vt - Vm Volumen de diluyente= 2.25 mL

1/d=1/4
Vm= ? Diluyente para la dilución seriada: 𝟐. 𝟐𝟓 𝒎𝑳 𝟓 =
𝟏𝟏. 𝟐𝟓 𝒎𝑳
Vt= 3 mL
Volumen del diluyente= ?
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 Factor de dilución 10
Dilución en serie 𝟏
𝟒
𝒙
𝟏
𝟒
𝒙
𝟏
𝟒
𝒙
𝟏
𝟒
𝒙
𝟏
𝟒
=
𝟏
𝟏𝟎𝟐𝟒

Vm= 0.75 mL
Volumen del diluyente= 2.25 mL
Vt= 3 mL
A B C D E

0.75 ml 0.75 ml 0.75 ml 0.75 ml 0.75 ml

2.25 ml
3 ml 2.25 ml
3 ml 2.25 ml
3 ml 2.25 ml
3 ml 2.25 ml
3 ml

Dilución 1/4 Dilución 1/16 Dilución 1/64 Dilución Dilución

Muestra o o o 1/256 1/1024
1:4 1:16 1:64 o o
1:256 1:1024