Banco de Sangre Practica

UNIVERSIDAD DEL NORESTE
ÁREA QUÍMICO BIOLÓGICAS
LIC. EN QUÍMICA CLÍNICA
BANCO DE SANGRE.
REPORTE DE PRACTICA 1
DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO DIRECTO E INVERSO.
DOCENTE: QFB. JOSÉ ARGÜELLES RAMÍREZ
ALUMNA: ERICKA LIZBETH MATA MORENO
TAMPICO TAMAULIPAS A DE ABRIL DEL 2018

1. Objetivos generales:
 Identificar los antígenos de superficie del sistema ABO en los eritrocitos humanos mediante el uso
de antisueros para determinar el grupo sanguíneo directo.
 Identificar los anticuerpos contra sistema ABO en el plasma mediante el uso de eritrocitos
tipificados para determinar el grupo sanguíneo inverso.
2. Antecedentes
Los eritrocitos poseen en su membrana diversas estructuras con carácter antigénico que son
determinadas genéticamente. Muchas de ellas se han podido identificar serológicamente mediante
anticuerpos específicos. El primer grupo de estas sustancias fue identificado por Landsteiner en 1901;
a este grupo se le llamó sistema ABO, en el cual un individuo puede expresar en la membrana de sus
glóbulos rojos uno, dos, o ninguno de los antígenos A y B. Esto da por resultado que, si un sujeto
expresa la sustancia A, posee el tipo sanguíneo A, si expresa la sustancia B, será de tipo sanguíneo B;
en cambio, si no expresa ninguna de estas sustancias, será de tipo sanguíneo O. Como estas
sustancias se expresan por un patrón mendeliano codominante (A y B son dominantes), hay
posibilidad de que se expresen ambas sustancias: tipo sanguíneo AB. En lo que toca al tipo O
(ausencia de A y B), su patrón hereditario se comporta como recesivo.
Los individuos con tipo sanguíneo O tendrán anticuerpos anti-A y anti-B; los de tipo A tendrán
anticuerpos anti-B; en tanto que los de tipo B tendrán anti-cuerpos anti-A; y los de tipo AB no tendrán
anticuerpos anti-A y anti-B (son antígenos propios).
 SISTEMA Rh
En 1939, Levine y Stetson, reportaron el caso de una mujer con una intensa reacción hemolítica
después de haberle practicado una transfusión con sangre donada por el esposo. El antígeno
responsable fue diferente a los antígenos conocidos en aquella época. En 1940, Landsteiner y Wiener
inmunizaron conejos y cobayos con eritrocitos obtenidos de Macacus rhesus, partiendo del
planteamiento de que en los eritrocitos de estos monos podrían existir antígenos similares a los
humanos. El suero obtenido (anticuerpos) aglutinaba los glóbulos rojos de estos monos y a los
eritrocitos de 85% de la población blanca. Posteriormente, las investigaciones demostraron que el
antígeno involucrado en el caso de Levine y Stetson y en el antígeno hallado por Landsteiner y Wiener,
los cuales inicialmente se pensaban eran el mismo antígeno, resultaron ser distintos. Se estableció
que el antígeno del mono rhesus lo poseen la mayoría de los humanos y, además, otro diferente, pero
relacionado. A sugerencia de Levine, se conservó la denominación de factor Rh para el antígeno
humano y LW para el antígeno común al hombre y al mono. A mediados de los años 40 se habían
identificado cinco antígenos pertenecientes al sistema Rh (C,c,D,E,e). El D tiene dominancia
antigénica, de tal manera que, si un individuo expresa D en sus eritrocitos, será Rh positivo. Es hasta
fecha muy reciente que se pudo caracterizar la estructura de estos antígenos, la cual resultó ser muy
compleja.
3. Fundamento
Los eritrocitos humanos pueden o no tener en su superficie alguna combinación de los
antígenos del sistema ABO y Rh. De la misma forma, algunos individuos tendrán en el suero
isoanticuerpos dirigidos contra alguno de los antígenos del sistema ABO; solamente tendrán en el
suero isoanticuerpos anti-D aquellos individuos que hayan sido previamente sensibilizados a este
antígeno. En consecuencia, los sueros que contengan isoanticuerpos anti-A aglutinarán a los
eritrocitos que tengan al antígeno A y sucederá lo propio en otros casos. La siguiente tabla indica la
composición de isoantígenos e isoanticuerpos según el grupo sanguíneo ABO.
4. Material y reactivos:
 1 gradilla
 24 tubos 10 x 75
 4 pipetas Pasteur con bulbo
 Centrifuga clínica
 Sueros hemo clasificadores Anti-A, Anti B. Anti-AB. Anti-Rh
 Solución fisiológica en Pizeta
 Muestra problema
5. Metodología.
Grupo directo:
1. Se prepara una suspensión de glóbulos rojos del paciente al 5%, previamente lavado en solución
fisiológica.
2. En una gradilla colocar 4 tubos de ensaye de 10 x 75, marcados con las letras A, B, AB y Rh.
3. En cada tubo poner una gota de suspensión de glóbulos rojos al 5%.
4. En el tubo marcado con A poner una gota de suero Anti-A, en el tubo marcado con B, poner una
gota de suero Anti-B, en el tubo AB una gota de suero Anti-AB, Anti-Rh
5. Mezclar perfectamente los tubos y dejar reposar por dos minutos.
6. Mezclar nuevamente y se procede a centrifugar a 2,500 rpm durante un minuto.
7. Se sacan los tubos cuidadosamente de la centrifuga evitando que se mezclen los glóbulos rojos
que quedan depositados en el fondo de los tubos y para efectuar la lectura se sacuden
cuidadosamente el botón del fondo, uno por uno buscando si existe aglutinación macroscópica.
8. El resultado se reporta de acuerdo con la intensidad del grupo y al color del líquido sobre nadante,
de una o varias cruces, hasta cuatro.
Grupo inverso:
9. En una gradilla colocar 4 tubos de ensaye de 10 x 75, marcados con las letras A, B, AB y O.
10. En cada tubo poner una gota de plasma o suero del paciente.
11. En el tubo marcado con A poner una gota eritrocitos A, en el tubo marcado con B, poner una gota
de eritrocitos B, en el tubo AB una gota de eritrocitos AB y en el tubo marcado como O poner una
gota de eritrocitos O
12. Mezclar perfectamente los tubos y dejar reposar por dos minutos.
13. Mezclar nuevamente y se procede a centrifugar a 2,500 rpm durante un minuto.
14. Se sacan los tubos cuidadosamente de la centrifuga evitando que se mezclen los glóbulos rojos
que quedan depositados en el fondo de los tubos y para efectuar la lectura se sacuden
cuidadosamente el botón del fondo, uno por uno buscando si existe aglutinación macroscópica.
15. El resultado se reporta de acuerdo con la intensidad del grupo y al color del líquido sobre nadante,
de una o varias cruces, hasta cuatro.
Interpretación de las pruebas
Reacción del grupo Directo

Grupo sanguíneo Anti-A Anti-B Anti-AB
A 4+ 0 4+
B 0 4+ 4+
AB 4+ 4+ 4+
O 0 0 0
Reacción del grupo Inverso

Grupo Células A1 Células A2 Células B Células O
sanguíneo
A 0 0 4+ 0
B 4+ 4+ 0 0
AB 0 0 0 0
O 4+ 4+ 4+ 0
Reacción del Antígeno D

Antígeno D Anti-D
Positivo 4+
Negativo 0
6. Resultados
 Paciente 1
 Reacción del grupo Directo

A
B
AB
O
Grupo sanguíneo Células A1 Células A2 Células B Células O
A
B
AB
O
Antígeno D Anti-D
Positivo
Negativo
 Paciente 2
 Reacción del grupo Directo

A
B
AB
O
Grupo sanguíneo Células A1 Células A2 Células B Células O
A
B
AB
O
Antígeno D Anti-D
Positivo
Negativo
7. Observaciones

8. Evidencias
9. Conclusiones
La calidad de los resultados depende del respeto de las buenas prácticas de laboratorio:
 No utilizar los reactivos después de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

 No mezclar reactivos de lotes diferentes en una misma serie.
 Utilizar una punta de pipeta para cada muestra. Es indispensable tomar las
precauciones necesarias para no provocar contaminaciones.
 Comprobar la precisión y el correcto funcionamiento de las pipetas y de los otros
equipos.
 Llevar guantes y gafas de protección durante la manipulación de los reactivos y las
nuestras.
 No pipetear las muestras.
 Evitar salpicaduras, en su caso limpiar las superficies manchadas con lejía de 13Cl
diluidos al 10% y secar con papel absorbente.
10. Referencias bibliográficas

 Zenteno, E., Agundis, C., Chavez, R. y Lascurain, R. () Aglutinación activa: determinación de
grupos sanguíneos ABO. En línea. Disponible en:
http://www.facmed.unam.mx/fm/pa/2010/practicas/practicas_inmuno.pdf


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Reacción del grupo Directo

Reacción del grupo Inverso

Reacción del Antígeno D

 Reacción del grupo Directo

 Reacción del grupo Directo

 No utilizar los reactivos después de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

10. Referencias bibliográficas

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