Microscopía y Tinción 3

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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA

GABRIEL RENE MORENO - U.A.G.R.M.

FACULTAD INTEGRAL CHIQUITANA- FAICHI

CARRERA DE ZOOTECNIA

TEMA: MICROSCOPIA – TINCION

MATERIA: EMBRIOLOGIA -HISTOLOGIA

SIGLA: ZOOT-201

INTEGRANTES: ORLANDO MASAI RIVERA

DOCENTE: ADOLFO FRANCISCO VARGAS

N° REGISTRO: 224086847

San Ignacio de Velasco – 2024


MICROSCOPÍA

INTRODUCCION.
El microscopio es un instrumento vital para la Microbiología y para muchas otras ramas
de la Medicina. El microscopio de Zacharias es utilizado y perfeccionado por varios
experimentadores y conocido en todos los países, se empleó su sistema óptico en
astronomía por Galileo Galilei quien publicó sus observaciones al igual que Kepler. En
1609 Galileo Galilei construyó el primer microscopio simple. De 1617 a 1619, apareció
ya un microscopio de dos lentes con un solo objetivo convexo y un ocular, cuyo autor,
según se supone, fue el físico Cornelius Drebbel
Se define la microscopía como la observación de objetos muy pequeños bajo grandes
aumentos. Los aparatos que se usan para ello se denominan microscopios. En la
medicina se usan la microscopía especialmente para analizar tejidos, células,
componentes sanguíneos y microorganismos. Normalmente hay varios trabajos que
preceden la observación de un material bajo el microscopio que permiten una mejor
observación, como puede ser la estructura de una célula. Los microscopios
convencionales, microscopía de luz, seconsigue un gran aumento del objeto a
investigar a través de un procedimiento de proyección en dos niveles. En este tipo de
microscopía el microscopio produce primeramente una imagen invertida real
aumentada del objeto iluminado mediante el objetivo.
El microscopio se divide en:
Microscopios simples.
Un microscopio simple es un instrumento que permite observar de forma aumentada
la imagen de un objeto. El microscopio simple es simplemente un microscopio
formado por una sola lente de aumento que se conoce comúnmente como lupa.
Microscopios compuestos.
Un microscopio compuesto, es un microscopio que produce una imagen ampliada de
una muestra de algo mediante dos sistemas ópticos que actúan sucesivamente. Se
diferencia de un microscopio simple (como una lupa) ya que este último amplía el
objeto mediante un solo sistema de lentes, los microscopios compuestos sirven para
ampliar a gran escala.

La clasificación del microscopio.

Microscopios monoculares: tiene un solo ocular.


Microscopio binocular: tiene dos oculares.
Microscopio trinocular: tiene dos oculares mas una camara.
Microscopio digital.
Tipos de microscopía
Microscopía óptica
En este microscopio la muestra se ilumina con una luz visible, lo que significa que tiene
un foco de luz apuntando directamente a la muestra. Esta luz, a su vez, es conducida a
través del objetivo y del ocular hasta que llega al ojo del observador. Aunque
el microscopio óptico es el más común de todos, su resolución no es muy buena debido
a la difracción de la luz.
Microscopia de campo brillante.
En este tipo de microscopía se observa el material sin coloración, la luz pasa
directamente y se aprecian en detalles naturales.
Microscopia de contraste de fase.
Técnicas
La microscopía óptica nos permite conocer la microestructura de muestras biológicas e
inorgánicas mediante la interacción con un haz de luz.
El microscopio óptico común está conformado por tres sistemas:
 El sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en las que
instaladas las lentes, que permiten el movimiento para el enfoque. Y una pletina
donde se coloca la muestra.
 El sistema óptico comprende un conjunto de lentes, dispuestas para producir el
aumento de las imágenes observadas a través de ellas.
 El sistema de iluminación comprende las partes del microscopio que reflejan,
transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a
través del microscopio. Cuando hacemos uso de la luz incidente o reflejada de
forma directa se trabaja en MO de Campo Claro.
Microscopio electrónico
A diferencia del microscopio óptico, aquí la muestra no se ilumina con luz son utilizando
electrones. Dichos electrones impactan contra la muestra dentro de una cámara de
vacío. Aunque existen diferentes tipos microscopio óptico, por lo general construyen la
imagen capturando los electrones dispersados y omitidos por la muestra. El nivel de
aumento, en este caso, es mucho mayor, aunque es necesario preparar la muestra y
colocarla en una cámara de vacío, por lo tanto, no es posible analizar muestras
biológicas vivas.
Microscopía electrónica de barrido (SEM)

Las técnicas de caracterización de materiales mediante microscopía electrónica de


barrido funcionan con lentes electromagnéticas, bobinas deflectoras, detectores de
radiación y un haz de electrones móvil y concentrado que va recorriendo toda la
muestra punto por punto. La imagen resultante se visualiza en una pantalla e incluye
información morfológica, cristalográfica, topográfica y de composición.

Microscopía electrónica de transmisión (TEM)

La microscopía electrónica de transmisión se diferencia de la de barrido en que mide la


mayor parte de las muestras a la vez (no punto por punto) y construye la imagen a
partir de los electrones que atraviesan el objeto analizado, y no de los que se dispersan
o rebotan contra la superficie. Además, la TEM usa muestras más finas y tiene una
resolución más potente, de nivel atómico.
Microscopio fluorescencia
Este tipo de microscopio utiliza las propiedades de fluorescencia para generar una
imagen. Con él es muy sencillo observar sustancias que emiten luz propia cuando se
iluminan con una longitud de onda determinada. Para conseguir esto, la muestra,
usualmente, se ilumina con una lámpara xenón o una lámpara de vapor de mercurio.
La función más básica de un microscopio de fluorescencia es la de permitir que la luz
excitada irradie el espécimen, para luego separar la luz más débil emitida de la
imagen. Primero, el microscopio tiene un filtro que solo deja que pase la radiación con
una longitud de onda específica que sea la misma que la del material fluorescente. La
radiación choca con los átomos en el espécimen y los electrones son excitados a un
nivel de energía mayor. Cuando se relajan a un nivel menor, éstos emiten luz. Para ser
detectables, o sea, visibles al ojo humano, la fluorescencia emitida desde la muestra
es separada de la excitación más brillante con un segundo filtro. Esto funciona gracias
a que la luz emitida es de una energía menor y con una longitud de onda mayor que la
utilizada para la iluminación.

Partes del microscopio.

 Base o pie: Es la pieza que se encuentra en la parte inferior del


microscopio y sobre la cual se montan el resto de elementos, que
proporciona suficiente equilibrio y estabilidad al microscopio, que lo
uza como un soporte.
 Brazo: El brazo constituye el esqueleto del microscopio. Es la pieza
intermedia del microscopio que conecta todas sus partes.
Principalmente conecta la superficie donde se coloca la muestra con
el ocular por donde ésta se puede observar.
 Platina: Esta es la superfície donde se coloca la muestra que se
quiere observar. Su posición vertical con respecto a las lentes del
objetivo se puede regular mediante dos tornillos para generar una
imagen enfocada. La platina tiene un agujero en el centro a través
del cual se ilumina la muestra. Se usa para sujetar las muestras.
 Pinzas: Las pinzas tienen la función de mantener fija la preparación
una vez esta se ha colocado sobre la platina.
 Tornillo macrométrico: Este tornillo permite ajustar la posición
vertical de la muestra respecto el objetivo de forma rápida. Se
utiliza para obtener un primer enfoque que es ajustado
posteriormente mediante el tornillo micrométrico
 Tornillo micrométrico: El tornillo micrométrico se utiliza para
conseguir un enfoque más preciso de la muestra. Mediante este
tornillo se ajusta de forma lenta y con gran precisión el
desplazamiento vertical de la platina. Esto da aumento a la imagen.
 Revólver: El revólver es una pieza giratoria donde se montan los
objetivos. Cada objetivo tiene proporciona un aumento distinto, el
revólver permite seleccionar el más adecuado a cada aplicación.
 Tubo: El tubo es una pieza estructural unida al brazo del telescopio
que conecta el ocular con los objetivos. Es un elemento esencial
para mantener una correcta alineación entre los elementos ópticos.

 Foco o fuente de luz: Este es un elemento esencial que genera un


haz de luz dirigido hacia la muestra. En algunos casos el haz de luz
es primero dirigido hacia un espejo que a su vez lo desvía hacia la
muestra. La posición del foco en el microscopio depende de si se
trata de un microscopio de luz transmitida o de luz reflejada.
 Condensador: El condensador es el elemento encargado de
concentrar los rayos de luz provenientes del foco a la muestra. En
general, los rayos de luz provenientes del foco son divergentes. El
condensador consiste en un seguido de lentes que cambian la
dirección de estos rayos de modo que pasen a ser paralelos o
incluso convergentes.
 Diafragma: El diafragma es una pieza que permite regular la
cantidad de luz incidente a la muestra. Normalmente se encuentra
situado justo debajo la platina. Regulando la luz incidente es posible
variar el contraste con el que se observa la muestra. El punto
óptimo del diafragma depende del tipo de muestra observada y de
su transparencia.
 Objetivo: El objetivo es el conjunto de lentes que se encuentran
más cerca de la muestra y que producen la primera etapa de
aumento. El objetivo suele tener una distancia focal muy corta. En
los microscopios modernos distintos objetivos están montados en el
revólver. Este permite seleccionar el objetivo adecuado para el
aumento deseado. El aumento del objetivo junto con su apertura
numérica suele estar estar escrito en su parte lateral.
 Ocular: Este es el elemento óptico que proporciona la segunda
etapa de ampliación de imagen. El ocular amplia la imagen que ha
sido previamente aumentada mediante el objetivo. En general, el
aumento aportado por el ocular es inferior al del objetivo. Es a
través del ocular que el usuario observa la muestra. En función del
número de oculares se puede distinguir entre microscopios
monoculares, binoculares e incluso triloculares. La combinación de
objetivo y ocular determina el aumento total del microscopio.
 Prisma óptico: Algunos microscopios incluyen también prismas en
su interior para corregir la dirección de la luz. Por ejemplo, esto es
imprescindible en el caso de los microscopios binoculares, donde un
prisma divide el haz de luz proveniente del objetivo para dirigirlo
hacia dos oculares distintos.

TINCIÓN.

Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar
el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias
que se usan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que
se observarán con diferentes microscopios. Es un proceso mediante el cual las
moléculas absorben el colorante en dicha superficie, el uso del colorante cambia el
color de las células del microorganismo y podemos realizar la observación mediante el
microscopio.

Tipos de tinción.
Tinción simple.
Se ase el uso del colorante solo para denotar la morfología celular.

Tinción diferencial.

Es una técnica que hace el uso de colorantes para diferenciar células bacterianas o
parte de ella misma.

Colorantes:
Son sustancias que se utilizan en la biología y medicina, para teñir las células,
estructuras o tejidos de su origen, para la observación del microscopio.

 Los colorantes más utilizados: Azul brillante de Cómase, Azul de


metileno, Azul de Nilo, Bromuro de etidio, Carmín de Best, Cristal
violeta, DAPI, Eosina, Fucsina ácida, Hematoxilina, Yodo, Naranja de
acridina, Tetróxido de osmio.
TINCIÓN de Gram.

Es un procedimiento de gran utilidad en los laboratorios dónde se manejan pruebas


microbiológicas, es definida como una tinción diferencial, que utiliza dos colorantes y se
clasifican en dos grupos: bacterias de Gram negativa y bacterias de Gram positiva.

TINCIÓN de Wright.
La tinción se usa para diferenciar elementos celulares de la sangre y se clasifica como
policromática, para teñir ácidos o básicos de la célula.

TINCIÓN de Ziehl-Neelsen.
Es la técnica usada en el diagnóstico rutinario de tuberculosis, es rápida que diferencia
las bacterias en dos grupos: los que resisten a la coloración con alcohol-acido y los que
no lo son.

TINCIÓN negativa
Se desarrolló para la microscopía de luz para rodear y delinear bacterias no teñidas u
otros materiales biológicos. Se desarrolló para la microscopía de luz para rodear y
delinear bacterias no teñidas u otros materiales biológicos. De gran utilidad para la
microscopía para la observación de los hongos
Bibliografía auxiliar

https://www.pce-iberica.es/instrumentos-de-medida/instrumentos-laboratorios/
microscopia.htm#:~:text=Microscop%C3%ADa&text=Se%20define%20la%20microscop
%C3%ADa%20como,c%C3%A9lulas%2C%20componentes%20sangu%C3%ADneos
%20y%20microorganismos.

https://www.pce-iberica.es/instrumentos-de-medida/instrumentos-laboratorios/
microscopia.htm

https://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/prepa4/n9/p1.html

https://sct.uib.es/Instruments-i-equips-dels-Serveis-Cientificotecnics/Area-de-
microscopia-optica-i-electronica/Microscopia-optica.cid108042

https://es.m.wikipedia.org/wiki/Microscopio_electr%C3%B3nico

https://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/
practico4.pdf

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