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    Criofractura 1302.2

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    Alan Ramirez
    La técnica de criofractura permite visualizar la estructura molecular de las superficies internas de las membranas biológicas mediante la congelación rápida de la muestra, la fractura física de la misma, y la replicación de metales pesados que son observados usando microscopía electrónica. Se ha utilizado desde la década de 1950 y ha contribuido significativamente al entendimiento de la forma y función celular al nivel molecular.

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    La técnica de criofractura permite visualizar la estructura molecular de las superficies internas de las membranas biológicas mediante la congelación rápida de la muestra, la fractura física de la misma, y la replicación de metales pesados que son observados usando microscopía electrónica. Se ha utilizado desde la década de 1950 y ha contribuido significativamente al entendimiento de la forma y función celular al nivel molecular.

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    La técnica de criofractura permite visualizar la estructura molecular de las superficies internas de las membranas biológicas mediante la congelación rápida de la muestra, la fractura física de la misma, y la replicación de metales pesados que son observados usando microscopía electrónica. Se ha utilizado desde la década de 1950 y ha contribuido significativamente al entendimiento de la forma y función celular al nivel molecular.

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    Microscopía

    electrónica de
    criofractura
    FFEM (Freeze Fracturing Electronic
    Microscopic)

    EQUIPO 6
    RAMÍREZ RODRÍGUEZ ALAN
    RODEA CHÁVEZ KAREN DANIELA
    Historia
     La técnica de la criofractura fue desarrollada de manera temprana en la década
    de 1950 por el científico Russell Steere.

     No fue hasta 1960, cuando Daniel Branton comienza investigar mediante


    criofractura y a exhibir las imágenes obtenidas.

     Esta técnica llegó a su auge como fuente de investigación celular en las décadas
    de los 70 y 80.

     Ahora se usa en todo el mundo para estudios topográficos, siendo el único


    método disponible para producir una imagen directa de alta resolución de
    grandes áreas de superficies de membrana y caras de fracturas internas.
    Uso
     Visualizar la estructura molecular de las superficies internas de las membranas.
     Es de gran utilidad para observar la organización lipídica que no se encuentra en
    forma de bicapas.
     Esta técnica de observación es considerada como el procedimiento más aplicado
    para la visualización de estructuras lipídicas macromoleculares.
     Ha contribuido considerablemente a la comprensión de la forma celular para la
    función celular relacionada.
    Técnica

     Congelación rápida de muestra


    (criopreservadores).

     Corte o fractura física de la misma


    (navaja enfriada).

     Planos de segmentación.
    Replica de metal-carbono sobre la
    superficie.

    Platino u oro.

    Depositan oblicuamente (gránulos)


    un metal pesado seguido de una capa
    fortalecedora de carbono.
     La capa de carbono
    es traslúcida para el
    haz de electrones
    del microscopio
    electrónico.
     El tejido orgánico se
    elimina con
    detergentes
     Detectores
    electrónicos
     Electrones de
    retrodispersión
     Electrones
    secundarios
    Investigación
    Referencias
     Ascaso, C., & Rapsch, S. (1). ESTUDIO ULTRAESTRUCTURAL POR CRIOFRACTURA DE
    LOBARIA PULMONARIA (L.) HOFFM. Anales De Biología, (1), 135-143. Recuperado a partir
    de https://revistas.um.es/analesbio/article/view/33391
     Mühlethaler K. (1982). Técnicas de congelación-fractura aplicadas a las membranas
    biológicas. En: Martonosi AN (eds) Membranas y transporte. Springer, Boston, MA
     Portillo, S.A.(1994).Uso de criofractura para observación de la ultraestructura en Candida
    albicans con microscopía electrónica de barrido . Rev. Lat. Amer. Microbiol. 36(1). 1-7
     Steere, R.L. (1957). Electron microscopy of structural detail in frozen biological specimens.
    J. Biophys. Biochem. Cytol. 3, 45–60
     Sternberg, Brigitte , Sorgi, Frank L. y Huang, Leaf ( 1994 ), Nuevas estructuras en
    formación compleja entre ADN y liposomas catiónicos visualizados por microscopía
    electrónica de congelación y fractura ,  FEBS Letters , 356 , doi: 10.1016 / 0014-5793 (94)
    01315-2
      Wehrli, E., Mühlethaler, K. & Moor, H. (1970).Membrane structure as seen with a double
    replica method for freeze-fracturing. Exp. Cell Res. 59, 336–339

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