UNIVERSITE CHOUAIB DOUKKALI

ECOLE SUPERIEURE DE TECHNOLOGIE

SIDI BENNOUR

RAPPORT DE STAGE D’INITIATION

Sujet :

Détection et analyse des mycotoxines (l'indentification de

mycotoxines dans des échantillons alimentaires) .

Réalisé par :
ETTALAI Walid

Soutenu le …
devant le jury composé de:
Professeur : ……….
Professeur : ……….
Professeur : ………. Année Universitaire 2022/2023
7AYDHA HADI BLASH MNHA 7AYD DIAPO KAML

2
M9WD AZBI WLAH TA
M9WD HADI MZYANA

PLAN
Cadrage du Extraction des TACHES
projet mycotoxines Conclusion
EFFECTUES

3
Cadrage du projet

Présentation de l’entreprise

Depuis 1914

Le contrôle officiel et la protection du

consommateur

Recherche et développement

4
 DIRECTION

Assistanat de Service Audit et contrôle

Direction de gestion

HADA TAHOWA
Bureau
Communication
Bureau Assurance qualité
et métrologie

7AYD TBON MO
Division Technico Commercial et
Division Supports Division Technique
Développement

Service Technico Service Système Service Produits

Commercial d'information alimentaires

Service
Service RH, et Service Produits
Accompagnement,
Moyens Généraux agricoles et industriels
RetD

Service Finance et
Service Contaminants
Comptabilité

Service Additifs,
nutriments et biologie
moléculaire

5
Problématique ?
Objectifs

Analyser le échantillon de citrouille donné par ONSSA pour

Sécurité alimentaire .détecter la présence des mycotoxines
P1

Faire la connaissance de matériel utilise et suives le mode

opératoire .
Identifier si l'échantillon est contamine par les
P2
mycotoxines.

6
Matériel installé dans la service des contaminants

La zone Matériel

 Ciseaux
 Bouteilles des conservation
La zone de prélèvement  Espace pour stockage et réfrigérateur ou cas de lait

 Un broyeur
 Une balance
 Un agitateur
La zone d'extraction  Des bécher équipe par un papier filtre
 Une bombe
 Des pipettes

 Appareil HPLC
La zone d’appareillage

7
Description du service des contaminants

La zone de prélèvement La zone d'extraction des mycotoxines

La zone d'appareillage 8
La fiche donne par l’ONSSA

Fiche d'analyse

Numéro d'échantillon : 23-6394 la date d’entre : 26/7/2023

Nom d'échantillon : citrouille
Section : 8
Analyses demandés : Aflatoxines B1 G1 B2 G2

9
Mode opératoire d'analyse des AFLA B-G
L'extraction des molécule AFLA B-G

 Pose 25g de l’échantillon

 Ajouter 125 ml de méthanol (80 ⁒) et 5g de Na cl (spatule de sel) et agiter pendant 30 min
 Filtration du mélange
 Compléter par Tampon phosphate (PBS)
 Insérer les colonnes spécifiques pour les AFLA B-G
 Laisser s’écouler
 Laver la colonne avec 20 ml de méthanol 25 ⁒
 Récupérer avec 1 ml de solution S1 et 1 ml de solution S2
 Transférer l’extrait dans un viral injecter dans l’appareil pour l’analyse

10
Mode opératoire d'analyse des Ochratoxines

L'extraction des molécule OTA

 Pose 25g de l’échantillon

 Ajouter 100 ml de méthanol (60 ⁒) et agiter pendant 3min et laisser reposer 3 min
 Filtration du mélange
 Compléter avec un tampon phosphate (PBS)
 Insérer les colonnes spécifiques pour les OTA
 Laisser s’écouler
 Laver la colonne avec 20 ml de (PBS)
 Récupérer avec 1,5 ml de solution S1 et 1,5 ml H2o
 Transférer l’extrait dans un viral injecter dans l’appareil pour l’analyse

11
Mode opératoire d'analyse des Zéaralènone
L'extraction des molécule ZEA

 Pose 25g de l’échantillon

 Ajouter 150 ml de Acitonetrile et agiter pendant 1 h
 Filtration du mélange
 Compléter avec E.D
 Insérer les colonnes spécifiques pour les ZEA
 Laisser s’écouler
 Laver la colonne avec 20 ml de E.D
 Récupérer avec 2ml de meth HPLC
 Transférer l’extrait dans un viral injecter dans l’appareil pour l’analyse

12
Mode opératoire d'analyse AFLA M1
L'extraction des molécule AFLA M1

 Centrifuger 50 ml du lait liquide

 Filtration
 Prélever 50 ml dans une fiole du lait
 Dépôt dans la colonne
 Rinçage avec 15 ml E.D
 Récupération avec 2 ml meth HPLC et 1 ml E.D
 Mise en viole et injecter dans l’appareille HPLC

13
TÂCHES EFFECTUÉS

Preparation des solvents

Prélèvement des échantillon et extraction des molécule AFLA B-G,AFLA M1,

OTA et ZEA

Appareillage et lecture de chromatogramme

14
a lecture de chromatogramme et interprétation de certificat
chromatograme de standard
quantite de mycotoxins ( ppm) 60000

50000

40000

30000

20000

10000

0
Certifie contamine
tempe en minutes par les AFLA B-G
chromatograme de l'extrait
60000

50000
quantite de mycotoxins ( ppm)

40000

30000

20000

10000

0
tempe en minutes

15
Conclusion

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 Diplôme universitaire
UNIVERSITE Sidi Bennour
UNIVERSITE CHOUAIB DOUKKALI
Agro-envirennement
ECOLE SUPERIEURE DE TECHNOLOGIE
Rapport de stage SIDI BENNOUR
d’initiation
Détection et RAPPORT DE STAGE D’INITIATION
analyse des
mycotoxines Sujet
(l'indentification de Merci pour votre
mycotoxines
Détection etdans des des mycotoxines (l'indentification
analyse
échantillons ATTENTION
de mycotoxines dans des échantillons alimentaires) .
alimentaires) .
Présenté par
ETTALAIHADIWalid MALHA TAHIYA
Réalisé par : ZAYDHA
Encadré par ETTALAI Walid

Pr……
Soutenu le … devant le jury composé de:
Soutenu devant le jury
Professeur : ………. composé de :
Professeur : ……….
Pr. ………………
Professeur : ……….Pr. …………….
Pr. ………..???? Année Universitaire 2022/2023