Pop Hematologia

POP – PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO
Responsável por elaboração do POP:

Paolla
Andressa
dos
Santos
RA:
41810556
8
Responsável pela REVISÃO do POP:
Profª Yves Silva Teles Matos Data da criação: 10/12/2021
Versão Próxima revisão: Data da revisão: 10/12/2021

1 2022 Data da aprovação:10/12/2021
HEMATOLOGIA
Material Necessário:
• Seringa 5ml com agulha 25x7
• Álcool 70% (iodado)
• Garrote
• Tubo vacun EDTA (tampa roxa)
• microscópio
• lâminas para microscopia
• lamínulas
• tubo capilar (sem heparina)
• cartão para leitura de Ht
• tubo de ensaio
• pipeta volumétrica de 10 volumes
• pêra para aspiração
• reagentes Drabkin- Hayen
• corante panótico
• Becker p/ descarte para materiais
• micropipetas com ponteiras
• câmara de neubauer
• banho maria
• bico de Bunsen
• microcentrífuga
• espectrofotômetro + cubetas
• Água destilada
• Descarpack
• Álcool 70% - Iodado
• Punção – garrote - bizel
• Micropipetas - 1º e 2º estágio
• Ponteiras – excesso- descarte- lavagem
• Menisco de pipetas volumétricas
• Álcool 70% - Iodado
• Punção – garrote - bizel
• Micropipetas - 1º e 2º estágio
• Ponteiras – excesso- descarte- lavagem
• Menisco de pipetas volumétricas
• Câmara de neubauer – lamínula – micropipeta
• Capilar – bico de Bunsen
• Microscópio – macro e micrométrico – lentes - chariot
Ordem para a realização do Hemograma Completo:
• -Hematócrito
• -Dosagem de Hemoglobina
• -Contagem de glóbulos brancos e vermelhos
• -Contagem e diferencial dos leucócitos com observação da série vermelha
• -Cálculo dos Índices Hematimétricos (VCM, HCM, CP.CM)
• -Contagem de plaquetas e reticulócitos quando solicitados
• -Velocidade de Hemossedimentação (VHS) quando solicitado.
Valores de referência:
Homens: 40% a 50%
Mulheres: 35% a 45%
Crianças até um ano: 34% a 40%
Recém-nascidos: 50% a 60%
Interpretação: Valores abaixo indicam anemia ou hidratação excessiva (gravidez), e valores
acima indicam desidratação ou Policitemia.
Dosagem de Hemoglobina:
Método da cianometahemoglobina:
Para dosagem de Hb é necessário:
Usarmos padrões de concentrações conhecidas,
geralmente utiliza-se as concentrações de 5, 10 e/ou 15g/dl.
Líquido de Drabkin:
Bicarbonato de Sódio - 1,0g
Cianeto de Potássio - 52,0mg
Ferrocianeto de Potássio - 198,0mg
Água destilada - 1000,0ml
Em um tubo de ensaio pipetar 5,0 ml de reativo de Drabkin e colocar 20μl de sangue
total (homogeneizado).
Incubar 10 minutos á temperatura ambiente e fazer a leitura em espectrofotômetro em
540 nm zerando o aparelho com Drabkin .
Cálculo:
Determina-se a densidade ótica (DO) do padrão e posteriormente um fator que nos
fornecerá a concentração de cada amostra quando medidas com mesmo reagente.
Valores baixos correlacionam-se à processos anêmicos
Então: [ ] da Hb da amostra = DO amostra x F Assim: Leitura x fator = Hb g /dl

Homens: de 14 a 18 g/dl
Mulheres: de 12 a 16 g/dl
Crianças até um ano:11 a 12 g/dl
Recém-Nascido: de 14 a 19 gIdl
Interpretação: A dosagem de Hb está relacionada diretamente com o conteúdo e coloração
do eritrócito sendo de grande auxílio no diagnóstico das anemias.
Valores baixos correlacionam-se à processos anêmicos
Contagem de hemácias:
Contagem de células:
. Método do Hemocitômetro em Câmara de Neubauer
Contagem de glóbulos vermelhos: determinação de eritrócitos por mm de sangue.
Em tubo de ensaio pipetar 4,0 ml de solução de Hayen (diluidor isotônico
contendo um fixador para conservação das células) e 20μl de sangue total (diluição 1:200).
“ 0,02 ml X 3,98ml “
Solução diluente:
Citrato de sódio - 3,8g
Formol a 40% -2,0 mI
Água destilada q.s.p. - 100,0mI
Fixar a lamínula sobre a câmara de Neubauer e preenchê-la com o sangue diluído e
contar os cinco quadrados indicados na imagem abaixo. Para esta contagem pode ser
utilizada a objetiva microscópica de 10x.
Multiplicar o número de hemácias encontradas nos cinco quadrados por 10.000.
Resultado em mm³.
Homens: ],5 a 5,5 milhões/mm
Mulheres: 4,0 a 5,0 milhões/mm
Recém-nascidos: 5,5 a 7,0 milhões/mm
Interpretação: Valores aumentados são encontrados nas policitemias e os valores
diminuídos relacionam-se aos processos anêmicos de diversas etiologias.
A contagem em câmara de Neubauer oferece grande variabilidade de erro e dispêndio de
tempo, portanto sempre que possível é preferível a contagem em aparelhos automatizados
Contagem de reticulócitos:
Em um tubo de ensaio colocar 2 gotas de sangue e 2 gotas de azul de cresil brilhante,

incubar 15 minutos em banho- Maria 37º C.
Fazer o esfregaço e contra corar com Panóptico ou Leishman.
Observar de 1000 a 2000 relatando a porcentagem de Reticulócitos encontrados.
Calculo:
N° de hemácias por mm³ x reticulócitos encontrados
N° de hemácias contadas
V. R. 50 a 150 mil mm³ ou de 0,5 a 1,5%

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Ordem para a realização do Hemograma Completo:

Então: [ ] da Hb da amostra = DO amostra x F Assim: Leitura x fator = Hb g /dl

Em um tubo de ensaio colocar 2 gotas de sangue e 2 gotas de azul de cresil brilhante,

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