Tesis Del Semen en Cuy

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Spermova 2020; 10(2): 94- 101
Artículo original - Original paper DOI. 10.18548/aspe/0008.14

CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA Y MORFOMÉTRICA DEL


ESPERMATOZOIDE DE CUY (Cavia porcellus)

Morphological and morphometric characterization of the guinea pig sperm (Cavia porcellus)
Urbano Cabeza1, César Ordóñez1, Aydee Meza1 , Hernán Cucho1

1 Escuela Profesional de ABSTRACT


Zootecnia,
Universidad Nacional The aim of this study was to determine the morphological and morphometric characteristics of guinea
de San Antonio Abad pig sperm (Cavia porcellus), using an image analysis system. Semen from collected from five type 1
del Cusco, Peru. guinea pigs, four months old (1.19 ± 0.15 kg) by electroejaculation method, between 3 and 5 times
for each animal, making a total of 22 adequate collections. The volume, pH, sperm concentration, total
* Corresponding author: motility and percentage of live sperm were determined. The samples for the analysis of sperm
Hernan Cucho. e-mail: morphology and morphometry were stained with Spermac® and analyzed using the Motic Image Plus®
hernan.cucho@unsaac software. The morphology was analyzed according to the dynamics of its acrosomal reaction,
.edu.pe distinguishing 4 classes. The length, width, area, perimeter, ellipticity, elongation, regularity and
rugosity of the head of the guinea pig sperm were determined, as well as the midpiece length and the
Recibido: 05/12/2020 tail of the spermatozoa. Guinea pig sperm morphology was analyzed with a complete random design,
Aceptado: 29/12/2020 and the morphometric parameters by random blocks, using Duncan's test to compare means in both
Publicado: 31/12/2020
cases. In relation to morphology, significant differences (P <0.05) were found in the percentage
distribution of classes, the most recurrent being class 2 (41.67%), higher than the other 3 groups. An
animal effect (P <0.05) was found in the morphometric variables of head and midpiece of guinea pig
spermatozoa. The morphometric measurements of guinea pig spermatozoa were: length (7.45 ± 0.29
µm), width (6.55 ± 0.25 µm), area (43.02 ± 3.03 µm2), perimeter (26.56 ± 1.07 µm), midpiece length
(12.02 ± 0.70 µm) and spermatozoa tail length (92.96 ± 3.96 µm).

Keywords: Guinea pig, semen analysis, electroejaculation, morphology, spermatozoa morphometry

RESUMEN

El objetivo del estudio fue determinar las características morfológicas y morfométricas del
espermatozoide de cuy (Cavia porcellus), utilizando un sistema de análisis de imágenes. Se colecto
semen de cinco cuyes del tipo 1, de cuatro meses de edad (1.19 ± 0.15 kg) por el método de
electroeyaculación, entre 3 y 5 veces por cada animal, realizándose un total de 22 colectas
adecuadas. Se determinó el volumen, pH, concentración espermática, movilidad total y porcentaje de
espermatozoides vivos. Las muestras para el análisis de la morfología y morfometría espermática
fueron teñidas con Spermac®, y analizadas utilizando el software Motic Image Plus®. La morfología
se analizó en función de la dinámica de su reacción acrosomal, distinguiéndose 4 clases. Se determinó
la longitud, anchura, área, perímetro, elipticidad, elongación, regularidad y rugosidad de la cabeza
del espermatozoide de cuy, así como la longitud de la pieza intermedia y de la cola del
espermatozoide. La morfología del espermatozoide de cuy se analizó con un diseño completo al azar,
y los parámetros morfométricos mediante bloques al azar, empleando la prueba de Duncan para
comparar medias en ambos casos. Con relación a la morfología, se halló diferencias significativas (P<
0.05) en la distribución porcentual de clases, siendo la más recurrente la clase 2 (41.67%), superior a
los otros 3 grupos. Se halló un efecto animal (P< 0.05) en las variables morfométricas de cabeza y
pieza intermedia de los espermatozoides de cuy. Las medidas morfométricas del espermatozoide de
cuy fueron, longitud (7.45 ± 0.29 µm), anchura (6.55 ± 0.25 µm), área (43.02 ± 3.03 µm2), perímetro
(26.56 ±1.07 µm), longitud de la pieza intermedia (12.02 ± 0.70 µm) y longitud de la cola del
espermatozoide (92.96 ± 3.96 µm).

Palabras clave: Cuy, análisis semen, electroeyaculación, morfología, morfometría espermatozoide

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DOI. 10.18548/aspe/0008.14 Cabeza U, Ordóñez C, Meza A, Cucho H. SPERMOVA. 2020; 10(2): 94-101

INTRODUCCION El estudio se realizó entre abril y setiembre del 2018. Se


utilizaron 5 cuyes machos del tipo 1, con una edad de 4 meses
El cuy (Cavia porcellus) es una fuente importante de proteínas y un peso promedio de 1.19 ± 0.15 kg; la alimentación fue
para los pobladores andinos (Grégoire et al., 2010); en otras mixta (concentrado comercial y forraje verde).
latitudes es usado como animal de laboratorio (Clemons y
Seeman, 2011). Los últimos años su importancia económica se Colección de semen
ha visto incrementada, para el año 2017, el Ministerio de
Agricultura del Perú, estimó una producción anual de 21 103 La colección de semen fue realizada por el método de
toneladas de carne de cuy, alcanzando un consumo per cápita electroeyaculación (EE), se siguió el procedimiento propuesto
de 0.66 kg/habitante/año (MINAGRI, 2019). por Meza et al., (2018), que empezó con el pesado de los
animales. Las colectas de semen se realizaron entre 7 y 8 am.
Los eyaculados de los cuyes machos, tiene características Los animales fueron anestesiados por vía intramuscular con
peculiares, como la de producir tapones copulatorios para xylacina 2% (0.05 ml/kg) y ketamina 10% (0.10 ml/kg) en
prevenir la fecundación de la hembra por otros machos función al peso. Se esperó entre 1 y 2 minutos, para que el
(Martan y Sheperd, 1976), otra de sus peculiaridades es la animal este completamente aletargado, y se lo sujetó en
presencia de rouleaux, o apilamiento de espermatozoides, posición decúbito-dorsal con la cabeza ligeramente levantada;
descrita por varios autores (Freund 1958, 1969; Fawcett y para evitar que el cuy se moviera se sujetaba de las
Hollenberg, 1963; McGlinn et al., 1979), característica que extremidades anteriores y posteriores, tras lo cual se realizó
ocurre en el epidídimo y probablemente este influenciada por la limpieza de la zona pene-prepucial con agua destilada
los andrógenos (McGlinn et al., 1979). atemperada a 35°C, se desenvainó el pene y se colocó el tubo
colector.
El análisis seminal es determinante para conocer la fertilidad
del macho, usualmente la evaluación de la movilidad, Se construyó un transductor de 6 cm de largo y 0.4 cm de
concentración y morfología se consideran en un diámetro, con dos electrodos bipolares, que se conectaba a un
espermiograma, siendo la morfología espermática la más electroeyaculador (Minitube®, Tiefenbach, Alemania); el
relevante con la genética del hombre y animales (Landry et al., transductor, se lubricaba con gel de ecografía y se introducía
2003; Kosova et al., 2014; Ray et al., 2017). aproximadamente 5 cm en el recto del animal. El voltaje al que
fueron sometidos los animales fue de 2 a 9 voltios (V), éste se
La evaluación de la morfología del espermatozoide de cuy, en incrementaba en 1 V, la duración de cada estímulo fue de 3
general se ha realizado en función de otros roedores (Freund, segundos, con 4 repeticiones en cada voltaje, los estímulos eran
1969; Pinduisaca, 2018; Benavides et al., 2020); Kim et al., constantes sin intervalos de descanso hasta llegar a los 8 V. El
(2001), ha diferenciado 4 clases de células espermáticas de proceso se realizó en el Laboratorio de Biotecnologías
cuy, en función de la dinámica de la reacción de su acrosoma, Reproductivas de La Raya, en un ambiente temperado entre
característica que puede ser usada para clasificarla 15 a 20°C. La erección del pene ocurrió entre los 3 y 4 V. En
morfológicamente. Debido a que el acrosoma del la primera colecta de todos los animales se observó un
espermatozoide del cuy excede su cabeza (Kim et al., 2001; coagulado blanquecino (tapón), que se endureció al tomar
Yucra, 2013), su caracterización morfométrica ha sido contacto con el medioambiente, que fue desechado, luego de
dificultosa, existiendo escasos reportes al respecto (Cummins y la expulsión de éste se produjo el eyaculado del semen. Estos
Woodall, 1985; Gallardo et al., 2002; Loor, 2015). Por ello tapones copulatorios se producen a partir de proteínas
que el presente estudio se ha realizado con la finalidad de coagulantes secretadas tanto por las vesículas seminales como
realizar una caracterización objetiva de la morfología y por las glándulas coagulantes, su función sería la de prevenir
morfometría del espermatozoide de cuy, información que la fecundación de la hembra por otros machos (Martan y
servirá para la aplicación de biotecnologías reproductivas en Sheperd, 1976), que de igual forma ha sido reportada en
esta especie. ratones (Sutter et al., 2016); también se verificó la presencia
de rouleaux, o apilamiento de espermatozoides.
MATERIALES Y MÉTODOS
La duración de la colección fluctuó de 15 a 20 minutos, con
Código de ética variaciones individuales, la eyaculación ocurrió en promedio a
los 8 V. El intervalo entre las colecciones de semen fue de una
Los autores declaran que el presente estudio se ha llevado a semana, se realizaron 5 colectas por animal, obteniéndose 22
cabo de acuerdo con el Código de Ética para los experimentos colectas adecuadas (88%) entre 3 y 5 por cada animal. Se
con animales, tal y como se refleja en la normativa: desechó el semen contaminado con orina o con concentraciones
http://ec.europa.eu/environment/chemicals/lab_animals/legi de espermatozoides menores a 10 x 106/mL.
slation_en.htm.
Análisis del semen
Del lugar de estudio y los animales
Se determinó el volumen (mL) por observación directa; el pH se
El estudio fue realizado en el Centro de Investigación en evaluó utilizando tiras reactivas de pH, la coloración final
Camélidos Sudamericanos CICAS - La Raya, de la Universidad indicaba el grado de acidez.
Nacional de San Antonio Abad del Cusco, ubicado en el distrito
de Maranganí, provincia de Canchis, departamento del Cusco, La concentración de espermatozoides (millones de
Perú, ubicado a una altitud de 4130 metros. El área pertenece espermatozoides por mL), se evaluó con una cámara
a la zona de vida de páramo húmedo - subalpino subtropical Spermtrack® (Proiser R+D, S.L., Paterna España), empleando
(Holdridge, 1967). 3 µL de semen puro, que fue evaluado a 100 aumentos, tras

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lo cual se realizó la dilución de la muestra empleando base Tris En este estudio, al realizar las evaluaciones morfológicas de
(Souza, 2009), hasta alcanzar una concentración final de 10 – los espermatozoides, se encontraron las 4 clases descritas por
15 millones de espermatozoides por mL. Las evaluaciones de Kim et al., (2001), discriminándose de forma visual estas
la movilidad total, porcentaje de espermatozoides vivos, células, en cada una de las clases; todas las evaluaciones
morfología y morfometría espermática se realizaron con la morfológicas fueron realizadas por el mismo operador.
muestra diluida. La movilidad de los espermatozoides se
evaluó utilizando un sistema CASA ‐ Mot (ISAS®v1, Proiser R + El segundo análisis efectuado, fue el de las características
D, Paterna, España), empleando un objetivo de 10X de morfométricas, para ello se analizaron 1025 imágenes de los
contraste de fase negativo, los archivos de video se grabaron espermatozoides evaluados morfológicamente. La cantidad de
y analizaron a 25 cuadros por segundo (fps) durante un espermatozoides evaluados de cada clase estaba en función
segundo. La movilidad total (MT), se definió como el porcentaje de las proporciones halladas al realizar la evaluación
de células móviles dentro de la muestra, esta variable se precedente.
analizó en un microscopio de contraste de fases (UOP; Proiser Se midieron los siguientes parámetros morfométricos: longitud
R+D) del sistema ISAS® v1. (L, µm), anchura (W, µm), área (A, µm2) y perímetro (P, µm) de
la cabeza del espermatozoide; la longitud de la pieza
El porcentaje de espermatozoides vivos se valoró empleando intermedia y de la cola del espermatozoide, para las
eosina y nigrosina (Minitube®, Tiefenbach, Alemania), usando mediciones se empleó el software Motic Image Plus 2.0®. De
5 µL de semen, que luego fue mezclado con la misma cantidad las medidas de longitud, anchura, área y perímetro, se
de eosina y nigrosina, las muestras se evaluaron en un determinaron los parámetros de forma de la cabeza del
microscopio trinocular con cámara (Motic BA310; Kowloon, espermatozoide: elipticidad (L/W), elongación ([L-W]/[L+W]),
Hong Kong), empleando el objetivo de 40X, se contó no menos regularidad (πLW/4A) y rugosidad (4πA/P2). Todas las
de 100 espermatozoides por muestra. evaluaciones morfométricas fueron realizadas por el mismo
operador. El estudio de la morfometría de un espermatozoide
Análisis de la morfología y morfometría del espermatozoide de nos permite detectar alteraciones en la espermiogénesis y en
cuy la maduración epididimaria (Hidalgo et al., 2006), lo que
conllevaría a una eficiente selección de reproductores.
Se realizaron frotis empleando 5µL de muestra de semen, una
vez secos (20 minutos), se tiñeron con Spermac® (Stain Análisis estadístico
Enterprises, Onderstepoort, Sudáfrica), según protocolo del
producto. Se aplicó la estadística descriptiva para el volumen, pH,
concentración espermática, movilidad total y porcentaje de
El primer análisis que se realizó fue el de morfología, espermatozoides vivos. Se determinó la normalidad de datos
empleando los frotis preparados con Spermac®, para su con la prueba de Kolmogorov-Smirnov y la homogenidad de
estudio se usó un microscopio con cámara (Motic BA310; varianzas con la de Levene.
Kowloon, Hong Kong) de 3.0 Megapíxeles, las imágenes
fueron tomadas con el software Motic Image Plus 2.0®, La distribución morfológica porcentual por clases no
utilizando el objetivo de 40X, la resolución de las imágenes fue presentaba distribución normal, fue transformada por su
de 2048 x 1536 pixeles, se capturaron 6325 logaritmo decimal, y analizada con un diseño completamente
espermatozoides de las 22 colectas. al azar, la comparación de medias se hizo con la prueba de
Duncan (α=0.05).
Kim et al., (2001), ha diferenciado 4 clases de células
espermáticas de cuy, en función de la dinámica de la reacción Todos los parámetros morfométricos del espermatozoide
de su acrosoma y de los patrones de tinción que éstos excepto el área de la cabeza, no mostraban distribución
produjeron, indican que los espermatozoides de cuy de la clase normal, se empleó el procedimiento Transreg del SAS para su
1, son células completamente intactas; los de la clase 2 tienen transformación. Estas variables fueron analizadas con un
un acrosoma que empieza a hincharse levemente producto del diseño de bloques al azar, la comparación de medias se hizo
inicio de la reacción acrosomal. Los espermatozoides de clase con la prueba de Duncan (α=0.05). Todos los procedimientos
3, presentan un acrosoma que empieza a descomponerse; las estadísticos se realizaron con el programa SAS v 9.4.
células de la clase 4 han perdió la mayoría, si no todo el
contenido acrosómico (Figura 1). RESULTADOS

Colección y evaluación del semen

La eficiencia de las colecciones de semen por EE, fue de 88%,


presentando el 12% restante concentraciones de
espermatozoides menores a 10 x 106/mL, presencia de orina,
o eyaculación parcial, lo que motivo su exclusión del estudio.
En total, se analizaron 22 muestras adecuadas de semen, entre
3 y 5 colectas de cada animal. Las características seminales de
los animales evaluados se muestran en la Tabla 1. En todas las
Figura 1. Representación gráfica de las clases espermáticas muestras analizadas se ha encontrado la presencia de
de Cavia porcellus en función de su reacción acrosomal y rouleaux o apilamiento de los espermatozoides.
patrones de tinción (Kim et al., 2001).

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Tabla 1. Características seminales de cinco cuyes machos


(promedio, desviación estándar, coeficiente de variabilidad,
máximos y mínimos) colectadas por electroeyaculación (n= 22
colectas de semen).

Variables Promedio C.V. Max Min


Volumen (mL) 0.38 32.08 0.70 0.20
Figura 2. Imágenes capturadas con el microscopio Motic Image
pH 7.05 5.76 7.50 6.50
Plus 2.0®, utilizando el objetivo de 40X. (a) clase 1; (b) clase
Concentración 47.33 53.67 116.00 13.84 2; (c) clase 3; (d) clase 4. Escala de barra = 5 µm aplicable a
(106/mL) todas las imágenes.
Movilidad total 69.40 19.51 88.80 39.89
(%)
Espermatozoides 72.65 11.27 86.96 55.88 Se halló diferencias significativas (P< 0.05) en la distribución
vivos (%) porcentual de clases, siendo la más recurrente la clase 2, que
vienen a ser los espermatozoides que muestran un acrosoma
D.S.: desviación estándar; C.V.: coeficiente de variabilidad; n: que empieza a hincharse levemente producto del inicio de la
colección de semen; Max: máximo; Min: mínimo. reacción acrosomal, que era seguida por las células
espermáticas de clase 1, que son las intactas; ambas clases se
Morfología espermática podrían considerar como espermatozoides intactos y con
probable capacidad de fertilizar un ovocito, los que suman
Los 6325 espermatozoides de cuy se clasificaron en función de 69.86% de los espermatozoides de las muestras, fluctuando
la dinámica de su reacción acrosomal (Kim et al., 2001), las los porcentajes de los animales evaluados en el rango de
imágenes de las 4 clases encontradas se muestran en la Figura 65.24 a 72.26%.
2, y su distribución porcentual por clase y animal en la Tabla
2.

Tabla 2. Distribución porcentual (%) de la clasificación morfológica de los espermatozoides de cuy en función de su dinámica
acrosomal.

Clase Cuy
Promedio
morfológica 1 2 3 4 5
1 27.86 29.40 26.84 28.43 28.74 28.19b
2 44.20 39.70 38.40 43.83 42.70 41.67a
3 7.94 11.68 10.02 6.07 6.18 8.44d
4 20.00 19.23 24.74 21.67 22.38 21.70c

Número total de células de cada animal: cuy 1 = 1281; cuy 2 = 972; cuy 3 = 1317; cuy 4 = 1127; cuy 5 = 1628. a-d Superíndices
distintos dentro de columna indican diferencias significativas entre clases. P < 0.05.

Morfometría espermática

La longitud y área de la cabeza de los espermatozoides de la


clase morfológica 4, son diferentes (P< 0.05), en relación a las
otras 3 clases; en el caso de la anchura espermática, es mayor
(P< 0.05), la de las células que pertenecen a las clases 4, 1,
2; el perímetro de las clases morfológicas 1, 2 es superior al
de las clases 3 y 4. Las principales secciones del
espermatozoide de cuy se muestran en la Figura 3 y las medias
y desviación estándar de las variables morfométricas
evaluadas en función de las clases morfológicas en la Tabla 3.

Figura 3. Secciones del espermatozoide normal (clase 2) de


Cavia porcellus. C: cabeza; PI: pieza intermedia; T: cola. Escala
de barra = 10 µm aplicable a la imagen.

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Tabla 3. Variables morfométricas de la cabeza, pieza intermedia y cola del espermatozoide de cuy (media ± DS) en función de
su clase morfológica.

Clase morfológica
Variable Promedio
1 2 3 4
Longitud (µm) 7.40 ± 0.31b 7.44 ± 0.29b 7.24 ± 0.26c 7.62 ± 0.19a 7.45 ± 0.29
Anchura (µm) 6.54 ± 0.26a 6.57 ± 0.25a 6.36 ± 0.23b 6.57 ± 0.21a 6.55 ± 0.25
Área (µm2) 42.41 ± 3.08b 42.85 ± 3.03b 42.33 ± 3.39b 44.64 ± 2.16a 43.02 ± 3.03
Perímetro (µm) 26.55 ± 1.02a 26.74 ± 0.99a 25.50 ± 1.25c 26.33± 1.06b 26.56 ±1.07
Elipticidad 1.13 ± 0.04b 1.13 ± 0.04b 1.14 ± 0.02b 1.16 ± 0.02a 1.14 ± 0.04
Rugosidad 0.76 ± 0.02c 0.75 ± 0.02c 0.82 ± 0.06a 0.81 ± 0.04b 0.77 ± 0.04
Elongación 0.06 ± 0.02b 0.06 ± 0.02b 0.06 ± 0.01b 0.07 ± 0.01a 0.06 ± 0.02
Regularidad 0.90 ± 0.04a 0.90 ± 0.03a 0.86 ± 0.04c 0.88 ± 0.03b 0.89 ± 0.04
Longitud PI (µm) 11.95 ± 0.70b 12.11 ± 0.73a 11.74 ± 0.65c 11.91 ± 0.54b 12.02 ± 0.70
Longitud cola (µm) 92.89 ± 3.77a 93.42 ± 4.07b 90.75 ±3.61c 92.30 ± 3.52b 92.96 ± 3.96

DS: desviación estándar. PI: pieza intermedia. Número total de células de cada clase morfológica: clase 1 = 203; clase 2 = 590;
clase 3 = 67; clase 4 = 165. a-c Superíndices distintos dentro de filas indican diferencias significativas entre variables. P < 0.05.

Hubo efecto animal (P< 0.05) en las variables morfométricas mostraban bajos coeficientes de variación (3.16 a 7.04%),
de cabeza, longitud de la pieza intermedia y cola del excepto la elongación que mostraba un 24.33%.
espermatozoide de cuy (Tabla 4). Las variables morfométricas

Tabla 4. Variables morfométricas de la cabeza, pieza intermedia y cola del espermatozoide de cuy (media ± DS) en función del
animal.

Animal
Variable
1 2 3 4 5
Longitud (µm) 7.38± 0.25b 7.47 ± 0.27a 7.47 ±0.33a 7.49 ±0.33a 7.43 ±0.27a
Anchura (µm) 6.54± 0.23a 6.52 ± 0.26b 6.58 ±0.24a 6.56 ±0.29a 6.55 ±0.24a
Área (µm2) 43.10± 2.89a 42.69 ± 3.21b 43.43 ±3.07a 43.09 ±3.38a 42.73 ±2.62b
Perímetro (µm) 26.57± 1.07a 26.42 ± 1.08a 26.64 ±1.08a 26.49 ±1.22a 26.62 ±0.92a
Elipticidad 1.13± 0.03c 1.15 ± 0.04a 1.14 ±0.04b 1.14 ±0.03a 1.14 ±0.03b
Rugosidad 0.77± 0.04a 0.77 ± 0.04a 0.77 ±0.04a 0.77 ±0.04a 0.76 ±0.03b
Elongación 0.06± 0.01c 0.07 ± 0.02a 0.06 ±0.02b 0.07 ±0.01a 0.06 ±0.02b
Regularidad 0.88± 0.04c 0.90 ± 0.03a 0.89 ±0.04b 0.90 ±0.04a 0.90 ±0.03a
Longitud PI (µm) 11.95 ± 0.60a 11.86 ± 0.72b 12.09 ±0.75a 11.94 ±0.67b 12.20 ±0.70a
Longitud cola (µm) 92.90± 4.20b 91.82 ± 3.71c 93.83 ±3.77a 91.29 ±3.80c 94.31 ±3.47a

DS: desviación estándar. PI: pieza intermedia. Número total de células por animal: cuy 1=216; cuy 2=184; cuy 3=230; cuy 4=170;
cuy 5=225. a-c Superíndices distintos dentro de filas indican diferencias significativas entre variables. P < 0.05.

DISCUSIÓN el propuesto por Meza et al., (2018), que alcanzaba el 69%


de eficiencia, que en este trabajo se incrementó a 88%. El 77%
Colección y evaluación del semen de colectas, no mostraban el tapón copulatorio, el cual no fue
reportado por Benavides et al., (2020), según indican por el
Los primeros reportes de colección de semen en cuyes protocolo de electroeyaculación usado; pero que si fue
domésticos por electroeyaculación fueron de Freund (1958, observado por Freund (1958), Martan y Sheperd (1976) en
1962, 1969); Sumar et al., (1968), hizo los primeros reportes cuyes domésticos y Sumar et al., (1968) en cuyes silvestres.
en el cuy silvestre, en estos trabajos, aún no se anestesiaba a
los animales, como se realiza en la actualidad (Meza et al., El volumen (0.38 mL), es inferior a los reportados por Freund
2018; Benavides et al., 2020). (1969), Paredes et al., (2020), y Benavides et al., (2020). Los
dos primeros reportes provienen de colectas sin sedación de
Benavides et al., (2020), reporta una efectividad de 95% en los animales; y son ligeramente superiores a los reportados por
el procedimiento de colecta de semen, ligeramente superior al Pinduisaca (2018). Los valores que se obtuvo solamente son
obtenido en este estudio, la diferencia podría deberse a las comparables con los hallados por Freund (1969) y Benavides
edades de los animales, en el primer caso adultos con una et al., (2020), que provienen de colectas sucesivas. En este
descendencia de al menos 7 camadas, y en el presente, con estudio, no se ha observado una tendencia creciente o
cuyes que empiezan su etapa reproductiva; también se decreciente del volumen producto de las colectas sucesivas con
debería a las diferencias en el protocolo de colección de intervalos de una semana.
semen. El protocolo de colección de semen que empleamos fue

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El pH seminal que reportamos (7.05) es similar a los obtenidos Morfometría espermática


por Benavides et al., (2020) y Mise (2014), en todos los
estudios, se usó tiras de papel para su evaluación. Se tienen escasos reportes sobre la morfometría del
espermatozoide de Cavia porcellus, que informan sobre la
Los informes de concentración espermática obtenida por el longitud (7.5 a 10.87 µm) y anchura (6.6 a 9.45 µm) de la
método de EE y que provienen de colectas repetidas, van cabeza del espermatozoide; la longitud de la pieza
desde 13.38 hasta 43.87 x 106 espermatozoides por mL intermedia (8.75 a 9.31 µm) y de la cola (84.41 a 92.3 µm)
(Freund, 1969; Meza et al., 2018; Benavides et al., 2020;), los (Cummins y Woodall, 1985; Gallardo et al., 2002; Loor,
valores obtenidos en este estudio (47.33 x 106), son 2015); en estos casos las células analizadas son escasas, los
superiores, y muestran una gran dispersión de datos, similar a dos primeros informes no usaron software alguno de análisis
lo reportado por Benavides et al., (2020) y Meza et al., de imágenes, además las tinciones empleadas fueron
(2018). En el cálculo de esta variable se usó un Spermtrack®, diferentes, ninguna específica para espermatozoides, lo que
que ha mostrado mejores resultados que las cámaras de conlleva a diferentes valores de morfometría de las células
Neubauer para estas evaluaciones (Soler et al., 2012; (Soler et al., 2005; Cucho et al., 2019).
Crespilho et al., 2017), que lo diferencia de los estudios antes
mencionados. Yucra (2013), ha evaluado los espermatozoides epididimarios
de cuy empleando un Sistema de Análisis Computarizado de
La movilidad total obtenida (69.40 %), es inferior a los Semen (CASA), hallando una longitud de 7.68 µm, anchura de
reportados por Paredes et al., (2020) y Benavides et al., 6.98 µm, con un área y perímetro de la cabeza de 42.25 µm2
(2020), también obtenidos por EE; la diferencia con ambos y 26.26 µm, respectivamente; las ligeras diferencias podrían
viene a ser el empleo de un sistema CASA, que nos proporciona deberse a la tinción empleada Diff Quik®, y en este estudio
una evaluación objetiva de esta variable, además ninguno de Spermac®; a los equipos usados para la medición, y
ellos informó la presencia de rouleaux, que encontramos en principalmente a que no se discriminaron las clases a las que
todas las colectas. El porcentaje de espermatozoides vivos de pertenecían los espermatozoides, que en este estudio se
semen de cuy es similar a lo reportado por Aragón (2019), encontraron y que presentaban diferencias significativas.
estudio que también se realizó en La Raya y con la misma
metodología. Entre las variables de forma de la cabeza de los
espermatozoides, la elongación es la más relevante, ya que
Morfología espermática ésta influye en la velocidad de los espermatozoides, porque
reduce el grado de arrastre y, por tanto, la energía necesaria
Existen dos tipos de especies animales en función de su para el movimiento de los espermatozoides (Malo et al., 2006;
morfología espermática, los homomorfos y los heteromorfos; Humphries et al., 2008), considerando ello, es probable que el
los primeros tienen una morfología constante entre individuos, espermatozoide de cuy requiera mayor energía para
así como dentro de animal (Soler et al., 2014), como es el caso transportarse, que una célula espermática de carnero o
del cuy. verraco, que presenta formas más aerodinámicas.

Existen reportes que han evaluado la morfología del Esta investigación es el más completo reporte sobre las
espermatozoide de cuy, en función de otras especies como los características morfométricas del espermatozoide de Cavia
conejos (Benavides et al., 2020) u otros roedores, es por ello porcellus, con parámetros no solamente de dimensiones de su
que los valores de espermatozoides normales que se informan cabeza, también de su forma, de su pieza intermedia y cola
son elevados como 95% (Freund, 1969); 96% (Pinduisaca, espermática.
2018); 81.74% (Benavides et al., 2020); pero en dichas
evaluaciones, no se ha considerado que los espermatozoides CONCLUSIONES
de cuy muestran un capuchón acrosomal que excede la cabeza
espermática (Figura 1 y 2), y que al momento de colectar su Se halló 4 clases morfológicas de espermatozoides de cuy en
semen a éste lo podemos encontrar en diferentes estados, función de su dinámica acrosomal, las clases 1 y 2, que
desde intacto hasta ausente, peculiaridad que comparte con el representarían a las células intactas alcanzan alrededor del
cuy silvestre (Cavia aperea) (Cooper et al., 2000). Esta 70% de los espermatozoides, también se encontró un efecto
característica debería ser más valorada al realizar la animal (P< 0.05) en las variables morfométricas de cabeza y
evaluación de la morfología espermática del cuy, y que en pieza intermedia de los espermatozoides de cuy, variables que
nuestro caso alcanza alrededor del 70% de células intactas y muestran escasos coeficientes de variación.
con probable capacidad fecundante, y que se podría
considerar como normales. CONFLICTO DE INTERESES

Se encontró que aproximadamente el 30% de Los autores declaran no tener ningún conflicto de interés
espermatozoides colectados no presentan acrosoma, o lo han personal o económico, ni sus intereses han influenciado en los
perdido en su mayor parte, que podríamos considerarlos resultados del estudio.
anormales; en la investigación no se ha determinado defectos
especialmente de la cola espermática, por lo cual posiblemente CONTRIBUCIÓN DE LOS AUTORES
este grupo sea algo mayor.
Preparación y ejecución: HC, UC, AM; desarrollo de la
metodología: UC, AM, CO; concepción y diseño: HC; edición
del artículo: HC, UC, AM; supervisión del estudio: HC, CO.

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