J. Sanz

ANALYSIC II
GRUPO UCM
UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID
SEGURIDAD ALIMENTARIA: ENSAYOS DE BIOACUMULACIN

1. Bioacumulacin de metales y sus especies 2. Bioacumulacin de compuestos orgnicos
REACH (Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemical substances) es una
nueva regulacin de la Comunidad Europea sobre sustancias qumicas y su uso saludable (EC 1907/2006). Su fin es la proteccin de la salud humana y el medio ambiente a travs de la pronta y mejor identificacin de las propiedades de las sustancias qumicas.
Sustancias qumicas >10 tm por ao o sustancias que podran ser peligrosas
Chemical Safety Report (CSR)
Toxicidad Persistencia Bioacumulacin
OCDE 305: mtodo par la evaluacin de la bioacumulacin. El protocolo tiene un coste mayor de 100.000 para cada compuesto y se necesitan 108 peces adultos
alternativa!!!: (Q)SAR, clulas y subclulas, estudios in vivo
En los ltimos aos, este pez ha servido de modelo para estudios en los campos de biologa molecular, genmica y toxicolgico (inluyendo ecotoxicolgico).
VENTAJAS: De acuerdo con la 86609/EEC Directiva, los embriones y las larvas no se consideran animales. Posee un genoma similar al de los humanos (80% similitud), facilitando la extrapolacin a los humanos de los resultados obtenidos. Cada hembra es capaz de poner 200300 huevos por semana.
El desarrollo embrionario del pez zebra es muy rpido.
Development of an alternative method to TEST DE BIOCONCENTRACIN Bioconcentration Test (OCDE/305)

Larvas Embriones
Contaminante (concentracin 0,1-1% LC50 )
Absorcin:
Tiempos de muestreo: 2, 4, 6, 21, 24, 45 y 48 h
Depuracin:
Tiempos de muestreo: 4, 6, 21 y 24 h
MEDIDA DE LA CONCENTRACIN EN: MEDIOS DE CULTIVO LARVAS
Factor de bioconcentracin (BCF), se define segn el OCDE 305 test,

como la relacin de la concentracin una sustancia qumica en un organismo y en el agua cuando se alcanza el equilibrio. La cintica de la bioconcentracin se puede describir por un modelo de primer orden (agua y organismo acutico)
Durante el periodo de exposicin:
Durante el periodo de depuracin:
Cuando se alcanza el equilibrio: Cf/Cw= BCFk = k1/k2
1. Bioacumulacin de metales: Selenio, Se IV Metilmercurio Tributilestao Arsnico, As III 2. Bioacumulacin de compuestos orgnicos:
Pesticidas: clorpirifos, dicofol, atracina PAHs: antraceno y fluoreno PCB 104 Microbiocida: triclosan
MeHg
Conc. larvas(mg/g) 0,009 0,008 0,007 0,006 0,005 0,004 0,003 0,002 0,001 0 0 10 20 30 40 50 60 70 80 Tiempo de bioacumulacin (horas) Conc. larvas (mg/g) 0,0009 0,0008 0,0007 0,0006 0,0005 0,0004 0,0003 0,0002 0,0001 0 0 10 20 30
Se (IV)
Tiempo de depuracin
40 50 60 70 80
Tiempo de bioacumulacin (horas)
Conc. MeHg (gL-1) 10 1
Fase de absorcin K1 K2 (Lkg-1h-1) (h-1) BCFk 35 0,015 2333 150 0,03 5000
Fase de depuracin BCF48h 1119 3748 k2 (h-1) 0,008 0,02
Conc. Se (IV) (g L-1) 10 1
Fase de absorcin (Lkg-1h-1) 3,7 K1 k2 (h-1) 0,05 BCFk BCF48h 74 60 354
Fase de depuracin k2 (h-1) 0,08 -
Larvas contaminadas con 2 g/L BCF = 1280
Larvas contaminadas con 0.2 g/L BCF = 834
Conc. in larvae (ng/g) 1400 1200 1000 800
Conc. in larvae (ng/g) 160 140 120 100 80
600
60 40 20
400
200 0 0 10 20 30 40
DEPURATION
50 60 70 80 Bioaccumulation time (hours)
DEPURATION
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Bioaccumulation time (hours)
DICOFOL
Cf 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 0 0 10 20 30 40 Time (h) 50 60 70 80 Concentration in zebrafish larave w ith time (1ppb)
BCF = 8019
ANTRACENO Y FLUORENO
Cf 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 0 20 40 Time (h) 60 80 Concentration antracene in zebrafish larave w ith time (1,5ppb)
Cf 8000 7000 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 0 20 40 Time (h) 60 80 Concentration fluorene in zebrafish larave w ith time 20ppb
BCFss = 2084 (1.5ppb) BCF= 903-2710(METI-NETI)
BCFss = 601.7 (20ppb) BCF=396-821(METI-NETI)
TRICLOSAN
3 PPB
Concentracin en el pez con el tiempo Cf 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 0 10 20 30 40 Tiempo (horas) 50 60 70 80 Cf 50000 45000 40000 35000 30000 25000 20000 15000 10000 5000 0 0 10 20 30 40 Tiempo (horas) 50 60 70 80
30 PPB
Concentracin en el pez con el tiempo
CONSTANTES K1= 69 y 43.4 K2 = 0.0342 y 0.0165 (3 y 30 ppb)

FACTOR DE BIOACUMULACIN BCF =K1 /K2 = 2018 y 2630 (3 y 30 ppb)
A. Alzate, M. C. Prez-Conde, A. M. Gutirrez and C. Cmara Selenium-enriched fermented milk: A suitable dairy product to improve the selenium intake for humans. International Dairy Journal INDA-D-10-00017R2, 20 (2010) 761-769 Zoyne Pedrero, Sara Murillo, Carmen Cmara, E. Schram, J.B. Luten, Ingo Feldmann, Nobert Jakubowski, Yolanda Madrid Selenium speciation in different organs of african catfish (claria gariepinus) enriched through a selenized garlic based diet JAAS 26(1) 116-122, (2011). M.A. Bryszewska, J. Sanz, E. Sanz, M.E. Ortiz-Santaliestra, R. Muoz-Olivas, C. Cmara Arsenic biotransformation during aquatic development of Iberian green frog Rana perezi JAAS 26(1) 178-186 (2011) Malgorzata A. Bryszewska, Estrella Sanz, Jon Sanz Landaluce, Riansares MuozOlivas, Manuel E. Ortiz-Santaliestra, Carmen Cmara. Evaluation of arsenic biotransformation by Iberian green frog during metamorphosis. J. Anal. Atom. Spectrom., 2011, 26, 178-186. DOI: 10.1039/C0JA00084A. Mervi M Seppnen, Juha Kontturi, Isabel Lpez Heras, Yolanda Madrid, C. Cmara and Helin Hartikainen Agronomic biofortification of Brassica with Se-enriched of SeMet and its identification in Brassica seeds and meal. Plant and Soil (2010) 337:273283.
Isabel Lpez, Susana Cuello, Carmen Cmara, Yolanda Madrid Approach for rapid extraction and speciation of mercury using a microtip ultrasonic probe followed by LC-ICPMS Talanta 82 (2010) 594599 S. Cuello, J. Sanz, Y. Madrid, C. Cmara Metabolism and bioaccumulation of methylmercury and selenite using zebrafish (Danio Rerio) larvae as a model. Env. Sci. Techn. Enviada (2011) A. Lopez Serrano, J. Sanz Landaluce, R. Muoz-Olivas, C. Cmara. Larvae zebrafish (Danio Rerio) as a model for the evaluationof inorganic arsenic and TBT bioconcentration. Water Research Enviada (2011). J.L. Luque, P. Cabezas, C. Cmara Proteomic as a tool for examinating heavy metals toxicity. TRAC (2011) En prensa.
9th International Symposium on Selenium in Biology and Medicine, Kioto (Japn), Junio 2010.
Ttulo: The role of microorganisms on inorganic selenium biotransformation during lactic fermentation
C Cmara Conferencia Invitada
Ttulo: Selenium-enriched fermented milk: A sutable dairy product to improve selenium intake in humans Autores: A.M. Alzate, C. Prez Conde, M. Gutirrez, C. Cmara (Pster)
6th International Franco-Spanish Workshop on Bio-Inorganic Analytical Chemistry Pau, Francia, 23-25 Septiembre 2010
Ttulo: Speciation of selenium in Brassica meal after agronomic biofortification with selenium Autores: I. Lpez, J. Konttury, M. Seppanen, C. Cmara, Y. Madrid (Comunicacin oral)
European Winter Conference on Plasma Spectrochemistry Zaragoza, Espaa 30 Enero-4 Febrero 2011
Ttulo: Speciation of selenocompounds in Clarias gariepinus by using different separation mechanism LC-ICP-MS Autores: I. Lpez, Y. Madrid, C. Cmara (Pster) Ttulo: Bioaccumulation capability of silver ion and silver nanoparticles in zebrafish larvae by ICP-MS. Autores: A. Lpez-Serrano, J. Sanz, R. Muoz, C. Cmara, A. Lpez, B. Simonet, M. Valcarcel. (Pster)

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SEGURIDAD ALIMENTARIA: ENSAYOS DE BIOACUMULACIN

REACH (Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemical substances) es una

Sustancias qumicas >10 tm por ao o sustancias que podran ser peligrosas

Chemical Safety Report (CSR)

Toxicidad Persistencia Bioacumulacin

alternativa!!!: (Q)SAR, clulas y subclulas, estudios in vivo

El desarrollo embrionario del pez zebra es muy rpido.

Development of an alternative method to TEST DE BIOCONCENTRACIN Bioconcentration Test (OCDE/305)

Tiempos de muestreo: 2, 4, 6, 21, 24, 45 y 48 h

MEDIDA DE LA CONCENTRACIN EN: MEDIOS DE CULTIVO LARVAS

Factor de bioconcentracin (BCF), se define segn el OCDE 305 test,

Durante el periodo de exposicin:

Durante el periodo de depuracin:

Cuando se alcanza el equilibrio: Cf/Cw= BCFk = k1/k2

Tiempo de bioacumulacin (horas)

Conc. MeHg (gL-1) 10 1

Fase de depuracin BCF48h 1119 3748 k2 (h-1) 0,008 0,02

Conc. Se (IV) (g L-1) 10 1

Fase de absorcin (Lkg-1h-1) 3,7 K1 k2 (h-1) 0,05 BCFk BCF48h 74 60 354

Fase de depuracin k2 (h-1) 0,08 -

Larvas contaminadas con 2 g/L BCF = 1280

Larvas contaminadas con 0.2 g/L BCF = 834

Conc. in larvae (ng/g) 1400 1200 1000 800

Conc. in larvae (ng/g) 160 140 120 100 80

Bioaccumulation time (hours)

BCFss = 2084 (1.5ppb) BCF= 903-2710(METI-NETI)

BCFss = 601.7 (20ppb) BCF=396-821(METI-NETI)

CONSTANTES K1= 69 y 43.4 K2 = 0.0342 y 0.0165 (3 y 30 ppb)

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