EL CITOESQUELETO

Profesora: Cristina Murga Montesinos

Asignatura: Métodos avanzados en Biología Celular, Molecular y Genética.
MASTER EN BIOFISICA.

1!

EL CITOESQUELETO
Filamentos
intermedios de
queratina en un
fibroblasto

Tinción de las proteínas

mayoritarias de una
célula fijada (con azul
de Coomassie)

Microtúbulos
•!El citoesqueleto es el andamio estructural de la en células
célula, pero es DINÁMICO (capaz de ensamblarse y epiteliales
desensamblarse)
•!Responsable de grandes movimientos (no sólo es el
esqueleto celular, sino también del movimiento
muscular por ejemplo)
•!Representa, además, la “Red de Carreteras” del
transporte intracelular.
2
Tipos de componentes del citoesqueleto:
•!Microfilamentos o filamentos de actina (AF): “cables” de
2 cadenas de actina filamentosa-FLEXIBLES
(protuberancias de la membrana)
•!Microtúbulos o filamentos de tubulina (MT): tubos
huecos con paredes de tubulina polimerizada- RIGIDOS
(red de carreteras, esqueleto axonal y huso miótico)
•!Filamentos intermedios (IF): compuestos de proteínas
específicas de cada tipo celular o compartimento
subcelular (“láminas” en el núcleo, “queratinas” en
epitelio, etc)- RESISTENTES (soporte de estructuras)

8-9 10 24
Diámetro (nm):

Filamentos
intermedios

Microfotografía electrónica de los

filamentos intermedios de láminas 4
nucleares (bajo la membrana nuclear)
Estructuras especializadas (“desmosomas”) anclan la red de filamentos
intermedios a las membranas para mantener las células unidas y dar
RESISTENCIA MECANICA a los epitelios (capa de células que recubre 1
órgano).

DESMOSOMA

Epitelios con
mutaciones
en
queratinas:
epidermolisis
bullosa
simple 5

ESTRUCTURA Y FUNCION DE LOS

FILAMENTOS INTERMEDIOS

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MICROFILAMENTOS DE ACTINA: ESTRUCTURA Y POLARIDAD.
•! Se componen de la proteína
actina.

•! La actina monomérica libre es

globular (“actina-G”) y a la
actina polimerizada se le
denomina F (“filamentosa”) .

•! La actina puede hidrolizar el

ATP (actividad ATPasa): la ATP
actina-ATP tiende a
polimerizarse y la actina-ADP
a despolimerizarse (un
filamento de actina-ADP es más
inestable que uno de actina-
ATP).
•! Tienen POLARIDAD y se
designa extremo (-) al que
tiene expuesto el bolsillo de
unión a ATP al medio: un
filamento crece 5-10 veces
más rápido por el extremo (+)
que por el (-).
(+) 7

Actina en las proyecciones de la Mb plasmática

1.- Estables:
•!Microvilli en células del intestino.
•!Uniones adherentes en células
epiteliales (acomplejada con
cadherinas): “cinturón adherente”.

2.- Dinámicas:
•!Fibras de estrés (A)
•!Lamelipodios (B)
•!Filopodios y microespículas (C)

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 Varias proteínas se asocian a los filamentos de actina y
controlan su ensamblaje en estructuras ESTABLES.

Ensamblaje de microfilamentos en
REDES (“filamina”)

Ensamblaje de los
filamentos de actina
en redes/haces.

Ensamblaje de actina
en HACES (Fimbrina
y !-actinina)
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La actina bajo la membrana de la célula (“actina

cortical”) sufre una polimerización/
despolimerización es MUY dinámica formando
estructuras que ayudan al movimiento celular.

Actina en azul, miosina II en rojo

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 (1) La actina bajo la
membrana se va Ciclo de la
actina cortical
polimerizando en forma de
ATP-actina G (rojo), a
menudo en ramificaciones a
70º por el complejo Arp2/3
(azul, 2), se estabiliza por
FILAMINA (3) y va
hidrolizando su ATP (4).
Cuando es mayoritariamente
ADP-actina (blanco), las
proteínas de
“CAPPING” (amarillo) tapan
los extremos (+) del
filamento e impiden más
crecimiento. Entonces las
proteínas de corte Arp2/3
(“SEVERING”) como
COFILINA Y GELSOLINA
(gris) transforman la actina
F en actina G (5) que forma
complejos citosólicos con la
profilina (verde) y queda así
lista para un nuevo ciclo de
polimerización, o con
timosina "4 quedando
secuestada en forma de
actina G (en rojo).

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El ciclo de la actina cortical está regulado por señales

extracelulares.
Estímulos migratorios Estímulos de
adhesión
Membrana
plasmática

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 EL CITOESQUELETO ES DINAMICO: AGREGACIÓN DE PLAQUETAS

A) Morfología basal de las plaquetas---B) en presencia de moléculas coagulantes emiten filopodios--C)

estos agentes hacen que se extiendan sobre la lesión (formando lamelipodios) para taponarla.

1-Mb.plasmática
2-Red 2D de filamentos intermedios
3-Filamina: red de actina bajo la membrana
4-Contactos con el sustrato (actina en haces)
5-Anillo periférico de !túbulos

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MICROTÚBULOS

(-) (+)
•!Son polímeros de tubulina organizada en tubos GTP
cilíndricos huecos.
“Protofilamento”
•!Forman estructuras estables (axones, cilios,
flagelos, etc.) y otras dinámicas (huso mitótico).
•!La unidad de polimerización son DIMEROS de !/
" tubulina que unen GTP (la tubulina " lo hidroliza
a GDP).
•!Tiene POLARIDAD (+ es el extremo de
polimerización)

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POLIMERIZACIÓN
DE LA TUBULINA "#
Los !T s ensamblan por adición de dímeros de tubulina
Necesitan GTP y una Tª adecuada (a 4ºC despolimerizan)
Tienen un extremo preferencial de polimerización (+)
Tras polimerizarse en un !T, la " tubulina hidroliza su GTP con
el tiempo-->la mayoría de la tubulina en el !T se queda como
GDP excepto una “tapa” (cap) de GTP en el extremo (+).

ENSAMBLAJE/DESENSAMBLAJE:
La polimerización está favorecida dentro de la célula porque la
“concentración crítica” a partir de la cual sucede la polimerización suele
ser de 0.03!M y la [tubulina] celular es de 10-20!M.
Al ENSAMBLARSE, los dímeros de tubulina se polimerizan en forma de
pequeños protofilamentos individuales y no alrededor del extremo (“cap”)
en círculos.
Al desensamblarse, se desestabilizan las interacciones laterales y se
separan también como protofilamentos individuales. Ver video en:
http://www.studiodaily.com/main/technique/tprojects/6850.html
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“Inestabilidad dinámica”
de los !T: modelo de la
catástrofe.

sólo se añade tubulina GTP (la

tubulina GDP tiende a
despolimerizar)

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 El centro de organización de microtúbulos (MTOC)
•!El MTOC es la estructura de la que emanan los !T. Además establece su orientación dentro de la
célula: el MTOC se asocia sin contacto físico al extremo (-) de los !T y lo fijan en el cuerpo celular dejando
el extremo (+) hacia la membrana. De esta manera determina la dirección de transporte de orgánulos y
materiales desde o hacia la periferia celular.
•!Las células en interfase suelen tener 1 solo, pero las epiteliales, las de plantas y las embrionarias pueden
tener cientos. Las células en división tienen 2.
•!Cada MTOC suele tener 2 centriolos compuestos por 9 tripletes de !T cortos cada uno.

Estructura de
un centriolo

ECB 2nd Ed
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Microfotografías electrónica y de fluorescencia de un !T que irradia del MTOC

#-tubulina en verde, y !-" tubulina en rojo

La matriz pericentriolar contiene el $-
TuRC ($-tubulin Ring Complex) desde
donde se nuclea la polimerización de !T
a partir de un anillo de # tubulina
incluso a concentraciones sub-críticas de
!/" tubulina. Se localiza en el extremo (-).

PC: matriz
pericentriolar
C: Centriolo
MT: microtúbulo

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 Papel de los Durante la mitosis los centrosomas
se duplican y los centriolos
microtúbulos en la resultantes se separan en polos
opuestos de la célula para formar
separación de los el HUSO MITÓTICO.
cromosomas durante
la mitosis celular

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VIDEO: Mathews 4ed 19.02

•!El cinetocoro es un complejo de proteínas que se ensambla en en

centrómero del cromosoma y sirve de anclaje a los !T del huso
mitótico
•!La fuerza combinada de la dinámica de los !T (polimeriz/despolim) y
de los motores moleculares del cinetocoro consiguen: 1º.- “pescar” a
los cromosomas, 2º.- alinearlos en el ecuador de la célula, y 3º.-
transportar cada cromosoma a los polos opuestos durante la división
celular. 20
 RESUMEN DE LA CLASE Y CONCEPTOS IMPORTANTES

•! El citoesqueleto es una red de diferentes filamentos que dan soporte estructural a la célula a la vez
que organizan su actividad motriz y facilitan el transporte de orgánulos y materiales.
•! Hay 3 tipos de fibras: microtúbulos (tubulina), microfilamentos (actina) y filamentos intermedios
•! Los filamentos intermedios están compuestos de subunidades proteicas diferentes en distintos
tipos celulares y sólo existen en vertebrados. Son fibras elásticas estables que proporcionan a las
células resistencia mecánica y mantienen la estructura de los epitelios (capas de un solo “piso” de
células) y de la lámina nuclear.
•! Los microfilamentos son polímeros helicoidales de actina que tienen una polaridad de crecimiento (el
extremo + tiene mayor velocidad de polimerización). Son flexibles, de longitud variable y forman
haces, redes y otras estructuras dinámicas que cambian la forma de las células. Están concentrados
en la zona cortical (bajo la membrana plasmática).
•! Su estructura y longitud están determinadas por muchas proteínas que se unen a la actina que
regulan la estructura y velocidad de polimerización y, además, por la hidrólisis de moléculas de ATP
por los propios monómeros de actina.
•! Los microtúbulos son tubos huecos muy rígidos cuyas paredes se forman de dímeros de alfa+beta
tubulina. Su polimerización/despolimerización depende de la hidrólisis del GTP: los dímeros de
tubulina-GDP no forman microtúbulos estables.
•! Los microtúbulos irradian desde el MTOC con su extremo (+) hacia la periferia celular y ayudan como
“red de carreteras” intracelular al transporte de orgánulos y materiales, así como al correcto
anclaje y distribución de los cromosomas durante la mitosis (gracias a su “inestabilidad dinámica”).
•! Los microtúbulos se polimerizan cerca de los centriolos del MTOC a partir de un anillo iniciador de
gama-tubulina

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Bibliografía y páginas web de interés:

KIMBALL’S BIOLOGY PAGES: UN LIBRO DE LIBROS DE BIOQUÍMICA
TEXTO, ACTUALIZADO, CLARO Y Voet & Voet : muy didáctico y gráfico. Genial en
CONCISO DISPONIBLE ONLINE: motores moleculares y membrana plasmática.
http://biology-pages.info Lehninger : El libro de bioquímica por excelencia.
Estupenda la parte de motores moleculares y
metabolismo
LIBROS DE BIOLOGÍA CELULAR:
Stryer : Muy bueno en general y espectacular
Essential Cell Biollogy (ECB) 3Ed: un muy buen para estructuras de macromoléculas.
libro de los conceptos y elementos FUNDAMENTALES de la Mathews & Van Holde : muy bueno para
biología celular y genética. Tiene una URL en: membrana plasmática y con una visión más
http://www.classwire.com/garlandscience “biofísica” que el resto de los libros de
bioquímica.
GM Cooper & RE Hausman: “The cell: a molecular Lodish 6ed: en su web están disponibles todas las
approach”. EL LIBRO QUE OS RECOMIENDO figuras del libro y muchas animaciones y videos
PARA VUESTRO NIVEL. Muy actualizado con una visión dignos de ver clasificados por capítulos:
general con una muy buena perspectiva (que no se pierde en los http://bcs.whfreeman.com/lodish5e/
detalles) que trata únicamente lo “esencial”. Os lo recomiendo en
general, y en particular para la parte más “celular” (señales, Alberts 5ed: estos dos son mucho más
regulación del citoesqueleto, ciclo celular, etc). especializados y amplios. Para mirar cosas en
detalle, nomenclatura, etc.
Garrett & Grisham: lo podéis encontrar en la web: VIDEOS DE CELULAS EN MOVIMIENTO:
http://www.web.virginia.edu/Heidi/home.htm http://www.cellmigration.org/sciMovies.html
http://cellix.imolbio.oeaw.ac.at/Videotour/video_tour.html
El capítulo de hoy es el Ch. 17 http://www.bio.unc.edu/faculty/salmon/lab/mafia/
mafiamovies.html 22