Antibiogramas
Antibiogramas
Antibiogramas
El medio de cultivo en el que se realizan la mayoría de los antibiogramas (excepto para bacterias
exigentes) es el medio Muëller-Hinton (extracto de carne, aminoácidos y almidón . Este medio se
puede usar en estado líquido o sólido.
Estos medios de cultivo corresponden a las exigencias de la OMS (1961, 1977) y a la Norma DIN
58940.
La composición de estos medios de cultivo garantiza, por una parte, condiciones favorables
decrecimiento y por otra parte, cuenta con la ausencia, muy considerable, de antagonistas de las
sulfamidas. Para mejorar de forma considerable el crecimiento de microorganismos exigentes,
puede añadirse sangre al
Agar MUELLER-HINTON. Esto puede sin embargo, según JENKIND y col. (1985), conducir a
resultados erróneos en el ensayo de Enterococos frente a aminoglicósidos.
Composición (g/litro) Infusión de carne 2,0, hidrolizado de caseína 17,5; almidón 1,5.
Empleo e interpretación La prueba de sensibilidad o el ensayo de resistencia, se llevan a cabo de
la manera prescrita para este fin. Incubación: 24 horas a 35 ºC aerobia
METODOS: Difusión en agar PUEDE SER:
disco-placa: Este método, que es el más frecuentemente usado, es también llamado difusión por
disco o Kirby-Bauer, En este caso, el microorganismo es inoculado en la superficie de una placa de
agar, sobre el cual se colocan discos impregnados con una concentración conocida del antibiótico..
Las placas se incuban por 16-18 horas a 35Ì C. Durante la incubación, el antibiótico difunde
radialmente desde el disco a través del agar, por lo que su concentración va disminuyendo a medida
que se aleja del disco. En un punto determinado, la concentración del antibiótico en el medio es
incapaz de inhibir al germen en estudio.El diámetro del área de inhibición alrededor del disco puede
ser convertido a las categorías de susceptible, intermedio o resistente (S,I, o R) de acuerdo a las
tablas publicadas por el National Committee for Clinical Laboratories Standards. Si las
recomendaciones para realizar este método son fielmente seguidas, las categorías se correlacionan
muy bien con los resultados de los otros métodos.
Se prepara una suspensión bacteriana con una turbidez equivalente al 0,5 de McFarland en solución
salina. Se introduce una torunda en dicha suspensión y con la torunda se hace una siembra en tapiz
en la superficie del medio. Sobre ella se colocan los discos de antibióticos, que llevan una carga
determinada. Se incuba a 37º C durante 18-24 horas.
Con una regla milimetrada se miden los diámetros de los halos de inhibición que aparezcan
alrededor de los discos de antimicrobianos. Los resultados se comparan con unas tablas en las que
se correlacionan diámetros de halo con categorías clínicas (S, I, R).
E-test: Este método ha sido descrito más recientemente y representa una sofisticada combinación
de los métodos descritos anteriormente. El E-test es más simple que otros métodos para obtener una
CIM. Utiliza una tira de plástico que contiene concentraciones crecientes de un determinado
antibiótico que van desde 0,016 ug/ml hasta 256 ug/ml/ Esta tira se pone sobre una placa de agar
que ha sido inoculada con el organismo en estudio. Después de incubar la placa por 16 a 18 horas,
se forma un área de inhibición de forma elíptica, en la cual la concetración inhibitoria mínima
puede ser leída directamente (ver Figura 1). Este es el método de elección para hacer estudios de
susceptibilidad en gérmenes problemáticos o con requerimientos especiales, como por ejemplo
Streptococcus pnemoniae, Streptococcus pyogenes, Haemophilus influenzae y gérmenes
anaeróbicos.
Dilución en agar. Es considerado el método de referencia . En este método, placas conteniendo una
determinada concentración de un antibiótico son inoculadas con el microorganismo en estudio y
luego incubadas por 16 a 18 horas. Después de la incubación, se examina si el organismo crece o no
en cada una de las placas, con lo cual se determina la concentración inhibitoria mínima (CIM) para
el antibiótico. Si una cepa de S.aureus crece en una placa que contiene una concentración de oxalina
de 0,06 ug/ml pero no crece en una placa con una concentración de oxalina 0,l2 ug/ml, significa que
la CIM de oxalina que se requiere para inhibir a ese organismo es 0,12 ug/ml.
Dilución DE CALDO. Son los métodos cuantitativos de referencia para determinar la sensibilidad
y resistencia de las bacterias. Consiste en determinar el crecimiento de una bacteria en presencia de
concentraciones crecientes de un antibiótico. Se pueden realizar en medio sólido o líquido; este
último en forma de macrodilución en tubo o microdilución en placas de plástico con múltiples
pocillos. En los medios líquidos, cuando las bacterias se multiplican aparece turbidez, pero cuando
el antibiótico inhibe el crecimiento el medio no se vuelve turbio; la dilución del antibiótico
correspondiente al primer tubo o pocillo en que no existe crecimiento es la CMI. A partir de los
tubos, donde no hay crecimiento se puede determinar la CMB, resembrando el contenido de estos
tubos sobre un medio de cultivo y observando si existe o no desarrollo de colonias.
Métodos automatizados. En este momento existen varios sistemas que ofrecen diferentes niveles
de automatización para el estudio de susceptibilidad. Utilizan una medición turbidimétrica o
fluorométrica para detectar crecimiento bacteriano en un medio líquido. La mayoría de ellos emplea
el método de microdilución y períodos de incubación menores que los habituales. Estos métodos
son bastante confiables para el estudio de enterobacterias y otros gérmenes de crecimiento rápido,
pero generalmente no son los adecuados para los de crecimiento lento o con requerimientos
especiales.
Cuando el laboratorio informa que un organismo es susceptible, se debe a que se ha hecho una
interpretación basada en las concentraciones que el antibiótico correspondiente alcanza en el suero.
Como regla general la concentración alcanzada en el plasma (y en el sitio de infección)debe ser por
lo menos 2 a 4 veces más alta que la concentración inhibitoria mínima para que el antibiótico sea
efectivo clínicamente. En la Tabla 4 se muestra un ejemplo del informe habitual de un
antibiograma realizado en el Laboratorio de Microbiología del Hospital de la Universidad Católica.
El método utilizado es dilución en agar y los resultados son expresados como S, I, R. Además se
informa la CIM en ug/ml a varios agentes antimicrobianos. En este ejemplo, el S.aureus es
resistente a penicilina (R8) ya que la concentración mínima necesaria para inhibirlo es 8 ug/ml, lo
cual está por encima del punto de corte para ser considerado susceptible (S<0.12 ug/ml). Este
mismo S.aureus es susceptible a cefazolina (S1), lo cual significa que se necesita 1 ug/ml de
cefazolina para inhibirlopara inhibirlo y eso se considera susceptible (S=<8 ug/ml. El resto de los
antibióticos son informados de acuerdo a sus propios puntos de corte. No todos los antibióticos
analizados son informados, ya que si una cepa es susceptible a los antibióticos más comúnmente
usados en este tipo de infecciones, el resto no se informa. Además, existen casos en los cuales
sabemos que no existe una buena correlación entre los resultados in vitro y la eficacia clínica. Por
ejemplo, los S.aureus. resistentes a meticilina deben ser considerados resistentes a todos los agentes
beta-lactámicos a pesar que pueden aparecer susceptibles por los métodos in vitro.
Note: This service is not intended for secure transactions such as banking, social media, email, or purchasing. Use at your own risk. We assume no liability whatsoever for broken pages.
Alternative Proxies: