Guía de Practicas de Biología Celular y Molecular FAMURP

Facultad de Medicina Humana

“Manuel Huamán Guerrero”

Guía de Laboratorio
Biología Celular y Molecular

Lima – Perú
2022

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UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

Facultad de Medicina Humana

“Manuel Huamán Guerrero”

Dr. Elio Iván Rodríguez Chávez

Rector

Dr. Félix Romero Revilla

Vicerrector Académico

Dra. María del Socorro Alatrista Gutiérrez

Decana (e) de la Facultad de Medicina Humana

Docente de Laboratorio:
• Blga. Carola Chambers Medina.

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Instrucciones Generales

 Al inicio de cada clase se dará 05 minutos de tolerancia luego de la hora

que figura en la guía de matrícula.
 Los alumnos deberán leer previamente las indicaciones señaladas en la guía
de práctica.
 Durante el desarrollo de la clase el alumno se mantendrá atento a la
explicación.
 Los alumnos participarán activamente durante el desarrollo de cada
práctica.
 Los teléfonos celulares se mantendrán dentro de sus mochilas durante toda
la clase excepto cuando el docente indique que pueden utilizarlo.

Normas de bioseguridad

1. El alumno ingresará con el mandil blanco manga larga largo, doble

mascarilla quirúrgica o una mascarilla KN95.
2. Al ingresar se desinfectarán las manos con alcohol en gel, luego se
ubicará en su respectiva mesa.
3. El cabello se mantendrá recogido al ingreso y durante la permanencia
en el laboratorio.
4. Los collares largos, pulseras y anillos deberán retirarlos antes del inicio
de las prácticas.
5. No se permitirá́ el ingreso a los alumnos que presenten minifaldas,
shorts o bermudas, sandalias o zapatos descubiertos.
6. Durante el desarrollo de las prácticas el alumno mantendrá el
distanciamiento establecido por el Ministerio de salud.
7. Sobre las mesas de trabajo solo se podrá colocar el material requerido
para realizar las prácticas.
8. Los alumnos se harán responsables de los materiales que se les ha
asignado en la practica.
9. Los alumnos no utilizarán la boca directamente para medir cualquier
solución, para ello harán uso de las propipetas que se encontrarán en
sus mesas de trabajo.
10. Con las manos enguantadas NO tocarse los ojos, boca, nariz.
11. Los alumnos antes de retirarse colocarán los desechos en su respectivo
contenedor de bioseguridad que se ubican en cada mesa de trabajo
antes de retirarse del laboratorio, también dejará su área de trabajo
limpia y ordenada.
12. Los alumnos deberán lavarse las manos después de haber manipulado
material biológico, al sacarse los guantes y antes de salir del
laboratorio.

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Evaluación:

Durante el desarrollo de las practicas los alumnos serán evaluados de manera

individual en base a 20 puntos:

* Test: 12 puntos.
* Presentación de resultados: 3 puntos.
* Participación o respuesta a preguntas en clase: 3 puntos.
* Comportamiento durante la clase: 2 puntos.

 Test que se aplicará para verificar que posea los conocimientos básicos:
- Conceptos teóricos básicos de la practica.
- Los objetivos de cada práctica.

 Participación en clase: se evaluará los procedimientos y las respuestas a

las preguntas realizadas por el docente.

Evaluación:

Los alumnos serán evaluados durante el semestre, rindiendo exámenes que

comprenderá los temas desarrollados según indicación del Docente.

El examen constará de 20 preguntas de opción multiple, correlacionar,

emparejar, etc.

La fecha será señalada por el docente con anticipación.

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CRONOGRAMA DE PRACTICAS 2022 II

SEMANA TITULO DE LA PRACTICA

1 Instrucciones Generales y reconocimiento de material y
equipo de laboratorio
2 Microscopia
3 Identificación de células procariotas, eucariotas y Células
sanguíneas
4 Niveles de complejidad de un sistema viviente
5 Movimiento de cilios y flagelos
6 Glicocalix: grupo sanguíneo
7 Permeabilidad de la Membrana Celular
8 Movimiento intracelular: Ciclosis

9 Visualización de Mitocondrias y lisosomas

10 Mitosis en meristemos de Allium cepa

11 Cromatina sexual: Corpúsculo de Barr
12 Gametogénesis
13 Extracción de ADN en tejido hepático

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Practica Nº 1

RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO

Introducción:

En las practicas de laboratorio es esencial el uso de instrumentos, materiales y

equipos de laboratorio para el manejo de las muestras. Hay una serie de
materiales que nos va a permitir el desarrollo de las practicas, siendo necesario
el reconocimiento de estos y su aplicación.

Material de vidrio:

Bagueta: se utiliza para agitar y mezclar sustancias.

Placa Petri: Existen de diferentes medidas; es utilizada para preparar cultivos de

hongos y bacterias, y también para seleccionar muestras de animales.

Frasco Gotero: Son de color blanco o ámbar. Sirven para guardar de una manera
segura los reactivos, regularmente se administra con conteo de gotas.

Tubos de ensayo: Estos recipientes sirven para hacer experimentos o ensayos, los
hay en varias medidas y aunque generalmente son de vidrio también los hay de
plástico

Pipetas: Permiten medir volúmenes. Las hay en dos presentaciones:

a) Pipeta graduada: Es un elemento de vidrio que sirve para dar volúmenes

exactos, con esta pipeta, se pueden medir distintos volúmenes de líquido, ya
que lleva una escala graduada.
b) Pipetas Pasteur.

Laminas excavadas: láminas de porcelana con pozos para observar reacciones de

aglutinación para determinar grupo sanguíneo.

Mecheros de vidrio para alcohol

Otros materiales:

• Propipeta de tres válvulas: este se utiliza junto con la pipeta para trasvasar
líquidos de un recipiente a otro.
• Hojas de bisturí.
• Pinzas de madera Gradilla para tubos de ensayo.
• Estuche de disección

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Equipos:
Incubadora.
Centrífuga.
Microscopio compuesto de campo claro.
Balanza de 0 – 600 grs.
Autoclave.
Cámara de extracción de gases.
Estufa

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PRACTICA N° 2

MICROSCOPÍA

Introducción:

El microscopio es un instrumento que permite amplificar la imagen de un objeto

pequeño. La imagen puede ser observada directamente, fotografiada o percibida
por fotocélulas u otros receptores, dependiendo de la naturaleza y del uso que
haya de hacerse de esta imagen.

Breve reseña histórica:

En 1590 Hans y Zacarías Janssen (Middleburg, Holanda) construyeron el primer
microscopio compuesto. Este consistía de un tubo con lentes en ambos extremos,
cerca de uno de ellos se coloca el objeto (objetivo) y por el otro extremo se observa
(ocular). Este instrumento artesanal constituyó la base conceptual de la
microscopia moderna.

Marcello Malpighi (1653) fue uno de los primero que observo tejidos bajo el lente
del microscopio. Se considera el fundador de la Anatomía microscópica.

Antonio Van Leewenhoek (1673) usó un magnificador simple y un soporte para el

espécimen y observó protozoarios infusorios (ciliados) a una magnificación de
aproximadamente 275 X. El descubrió microorganismos en agua y en 1683 publicó
sus primeros dibujos de bacterias, también descubrió el espermatozoide humano.

Giovanni Batista Amici (1827), es famoso por los microscopios de alta calidad,
introdujo un conjunto de sistemas acromático. El incidió en la importancia del
espesor del cubre y porta objeto para la calidad de la imagen. Inventó el objetivo
de inmersión.

Reigner de Graaf realizó estudios en los órganos reproductivos de los animales y

descubrió ciertos elementos en los ovarios que desde entonces se conocen con el
nombre de folículos de graaf.

Otto Muller Consiguió en 1773 distinguir lo suficientemente bien a pequeños seres

para clasificarlos en dos tipos: bacilos y espirilos.

El trabajo de Amici sirvió para que un grupo de microscopistas de Carl Zeiss,

Ernst Abbe y Otto Schott, diseñaran el sistema de inmersión usando un aceite
que tenga el mismo índice de refracción que el vidrio, incidieron en la importancia
de la apertura numérica.

En 1879 Walter Flemming observo la división celular.

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Asimismo, en 1886 introdujeron los objetivos apocromáticos para el microscopio.

En los primeros años del siglo XX, el profesor Kohler ideó el método de iluminación
microscópica, conocido universalmente como "iluminación Kohler"; también
diseño y perfeccionó el microscopio de luz ultravioleta.

En 1906 Santiago Ramón y Cajal recibió el Premio Nobel de Fisiología y Medicina

por su doctrina de la neurona, para poder visualizar las neuronas utilizo técnicas
de coloración lo que permitió aislar las neuronas y demostrar a través del
microscopio que estaban separadas.

En 1906 Alois Alzheimer presentó por primera vez en la XXXVII Conferencia de

Psiquiatría el estudio de una enfermedad de la corteza cerebral denominada la
enfermedad de Alzheimer, que presentaba diversos síntomas como perdida de la
memoria, desorientación y demencia.

En 1983 Harald Zur Hausen descubrió que el virus del papiloma humano, una
enfermedad de transmisión sexual, era un factor necesario en el desarrollo de casi
todos los canceres cervicales. Zur Hausen logro aislar bajo el microscopio dos
cepas de los virus responsables del 70% de los canceres en el cuello del útero.

Clases de microscopios

MICROSCOPIOS OPTICOS:

El microscopio óptico común sigue siendo el instrumento más importante para

la enseñanza y la investigación de muchas especialidades como la biología celular.

Entre los que pertenecen a la microscopia óptica tenemos:

• Microscopio de Campo Oscuro: Se utiliza en hematología, minerales,

cristales químicos, etc.

• Microscopio de Fluorescencia: Aplicaciones: marcaje de moléculas en células

y tejidos para su caracterización e identificación, estudio de células
normales y patológicas, estudios inmunológicos, etc.

• Microscopio de Contraste de Fases:

Aplicaciones: en disciplinas como fisiología, parasitología, farmacología
(procesos celulares, identificación y cuantificación de microorganismos,
efecto de medicamentos y otras sustancias en las células, etc.)

• Microscopio de luz Polarizada:

Aplicación: Identificar sustancias cristalinas o fibrosas intracelulares (como
el citoesqueleto) y extracelulares (Sustancia amiloide, asbesto, colágeno,
cristales de uratos y otras de origen exógeno)

• Microscopio Confocal de barrido Láser:

En el campo de la biología celular es muy útil para medir procesos
dinámicos, realizar videos para capturar secuencias es muy corto tiempo

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en células vivas y otras aplicaciones como por ejemplo medir actividades

enzimáticas, reacciones de oxidación , pH intracelular, fagocitosis,
apoptosis, estudios de ADN y ARN.

• Microscopio Compuesto de Campo Claro.

Partes:

A. El Sistema de Soporte
Consiste en:
• La Base
• El Brazo
• El Revólver
• La Platina

B. El Sistema de Aumento.
• Los Objetivos: Lentes donde se forma a la imagen real, invertida y
aumentada del espécimen que se observa.
Aumento:
El objetivo de 10x aumenta 10 veces.
El objetivo de 40x aumenta 40 veces.
El objetivo de 100x aumenta 100 veces.
Los objetivos secos son: 4X, 10X, 40X, El objetivo de 100x utiliza como
medio óptico el aceite de inmersión.

Apertura numérica (A.N)

Es la medida de la capacidad de un objetivo para colectar rayos de
luz difractados que pasen a través del espécimen. A medida que
aumenta la apertura numérica mayor es el poder de resolución.

Resolución
Es la capacidad del microscopio para discriminar dos puntos situados
uno cerca de otro (poder de resolución). Esta capacidad se extienda
hasta una distancia mínima que el instrumento es capaz de distinguir
(límite de resolución).

• El Ocular: son un conjunto de lentes que permiten magnificar la

imagen aumentada por el objetivo. Actúa como una lupa es decir
proyecta una imagen virtual y derecha de la definida por el objetivo.
Por ejemplo si la imagen del objetivo aumenta 40 veces (objetivo de
40x) y enseguida de 10 veces mediante el ocular de 10x, el aumento
será de 400 veces.

C. El Sistema de Iluminación.

• Fuente luminosa.

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Muchos microscopios básicos, utilizan espejos o focos de bajos

voltajes. La luz natural o artificial es focalizada, vía un sistema de
lentes colectores en el condensador.

• Condensador
En los microscopios de luz transmitida, el condensador concentra un
cono de luz de la misma apertura numérica (AN) del objetivo con el
que se observa la muestra.

• Diafragma
Se encuentra dentro del condensador, se utiliza para reducir o
ampliar la cantidad de luz que ingresa al condensador.

D. El Sistema de Ajuste o Enfoque.

• Tornillo Macrométrico.
• Tornillo Micrométrico.
• Tornillo de ajuste del condensador (eleva o baja el condensador)
• Elevador del diafragma (cierra o abre el diafragma)
• Tornillos reguladores de la platina.

Para conseguir una buena iluminación:

* Utilice el objetivo de menor aumento (10x).

* Eleve la lente frontal del condensador a una distancia de 1 a 2 mm de la
platina
* Cerciórese que el diafragma este abierto.
* Observe por el ocular y desplace la platina girando con una de sus manos
el tornillo de desplazamiento de la platina.
Enfoque

* Colocar la muestra sobre la platina y sujetarla.

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 Girar el revólver hasta el objetivo de 10x.

 Gira el tornillo macrométrico y lleva la platina a una distancia de 1 a 2mm
entre el objetivo y la lámina preparada ESTA OPERACIÓN DEBES HACERLA
SIN COLOCAR TUS OJOS SOBRE LOS OCULARES.
* Ahora coloca ambos ojos abiertos sobre los oculares. NO COMETAS EL
ERROR DE CERRAR O SEMICERRAR ALGUNO DE TUS OJOS.
* Una vez realizado lo anterior empieza a desplazar hacia abajo la platina,
utilizando el tornillo macrométrico hasta que empieces a visualizar el
espécimen que se encuentra en la muestra que has preparado. Este enfoque
se llama ENFOQUE GRUESO.
* Luego gira el revólver hasta el objetivo de 40x. Rota el revolver, de manera
que cambias de objetivo sin necesidad de bajar la platina.
 Empieza a girar, con tus dedos pulgar e índice de ambas manos, el tornillo
micrométrico en un mismo sentido hasta que puedas observar nítidamente
el espécimen, ESTO ES EL ENFOQUE FINO, que se ajusta a la visión de cada
observador.

Técnica de la inmersión:
Consiste en colocar una gota de aceite de inmersión entre el cubreobjetos
y la lente frontal del objetivo de máximo aumento. Para ello, teniendo ya
enfocado el objeto a un aumento menor, se gira levemente el revólver, se
coloca una pequeña gota de aceite de inmersión sobre el cubreobjetos, luego
se sigue girando hasta enfocar con el objetivo de mayor aumento y se
procede al ajuste con el tornillo micrométrico.
Terminada la observación se eleva el tubo o se baja platina y se limpia el
objetivo con papel de seda o lente suave que puede estar humedecido en un
detergente especial para lentes.

MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS

Tenemos:

• Microscopio Electrónica de Transmisión.:

Proporciona contraste mediante los electrones dispersos. Las muestras que
se van a analizar por microscopía de transmisión de electrones se pueden
preparar con tintes positivos o negativos. En la tinción positiva, la muestra
de tejido se corta en secciones finas y se tiñen con sales de metales pesados
que reaccionan con lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. También se pueden
utilizar para identificar macromoléculas específicas dentro de las células.
La tinción negativa resulta útil para la visualización de estructuras
biológicas intactas, como las bacterias también macromoléculas.

• Microscopio Electrónico de Barrido: se emplea para examinar superficies de

objetos cuyo tamaño va desde un virus hasta la cabeza de un animal. La
preparación del espécimen es producir un objeto que tenga las mismas
propiedades de forma y superficie que en el estado vivo, pero que carezca
de líquido, por lo tanto, para fijar la muestra esta se somete a una serie de
alcoholes y luego se secan en un proceso de secado a punto crítico, luego
se cubre con una lámina delgada de metal. Lo que lo convierte en un blanco
adecuado para un rayo de electrones.

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II) OBJETIVOS

1. Identificar los diferentes componentes del microscopio.

2. Demostrar como enfocar las muestras trabajadas.
2. Observar detalles de la muestra con el objetivo de mayor aumento.

III) MATERIALES:

Materiales que debe traer el alumno:

1. Láminas portaobjetos (una caja por mesa de trabajo).

2. Láminas cubreobjetos (una caja por mesa de trabajo).
3. Guantes descartables (dos pares por alumno)

Materiales que proporciona el laboratorio:

1. Lanceta
2. Algodón
3. Alcohol

Muestra:

 Sangre.

IV) PROCEDIMIENTO

Preparación y Observación de la muestra:

Muestra: Sangre

 Colocar en un campo dos algodones con alcohol y un algodón seco, lanceta

sellada, lámina portaobjeto y lámina cubreobjeto.
 Seprocede a colocarse los guantes, luego procede a desinfectar la yema del
dedo, índice o medio de su compañero con el algodón y alcohol.
 Presionar la yema del dedo (por encima de la articulación) y realizar una
punción con ayuda de la lanceta a un lado de la yema.
 Se coloca la muestra de gota de sangre en la lámina portaobjeto sin
agregarle agua y se coloca sobre la muestra una lámina cubreobjetos.
 A este tipo de láminas que presentan una muestra líquida se denominan
preparaciones húmedas.
* Cuando se coloca la lámina sobre la platina, se asegura con las pinzas del
sistema de desplazamiento que se encuentran sobre la platina.
* Para enfocar la muestra primero debes hacerlo con el objetivo de menor
aumento (10) y se observa con los dos ojos para poder ajustar la visión de
la muestra. También se observa el puntero que se encuentra en uno de los
oculares.

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Recomendaciones para el uso del Microscopio óptico:

1. Los portaobjetos y cubreobjetos deben estar limpios y secos
2. Comience siempre las observaciones con el objetivo de menor aumento.
Esto le dará una visión integral del preparado y le permitirá seleccionar las
mejores aéreas o las de especial interés, que luego observará con mayores
aumentos.
3. La iluminación debe ser homogénea y de buena intensidad, pero no excesiva
y deberá modificarla de acuerdo con el objetivo que está utilizando.
4. Siempre que se haga una observación, ajuste el enfoque con el tornillo
micrométrico aun cuando ya haya sido enfocado por otra persona
previamente.
5. Recuerde que el microscopio óptico otorga imágenes invertidas del objeto,
por lo tanto, el movimiento que realice de la platina será inverso al
corrimiento de la imagen.
6. Si el líquido excede la lámina cubreobjetos utilizar papel filtro.

V) REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

• Karp, Gerald. 2013 Biología Celular y Molecular 7 ma. Edición, Mc

Graw Hill.Ulrich
• Welsch, Johannes Sobotta 2013 Histología. 3ra edición. Editorial
Médica Panamericana.
• http://www.agro.unlpam.edu.ar/catedras-
pdf/biologia2010/Apuntes%20Te%F3ricos%202010/Microscop%EDa%2
02010.pdf
• https://books.google.com.pe/books?id=Oy-
kG04ClBUC&pg=PA9&dq=microscopia&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwiH3s
a-
n9DLAhVC6CYKHQHwBtMQ6AEIOTAF#v=onepage&q=microscopia&f=f
alse
• https://books.google.com.pe/books?id=NxYmIRZQi2oC&pg=PA1&dq=m
icroscopia&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwivj9v92sfcAhWvrFkKHR9CDW8
Q6AEISDAG#v=onepage&q=microscopia&f=false

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PRACTICA Nº 3

IDENTIFICACIÓN DE CÉLULAS PROCARIOTICAS Y EUCARIOTAS

I) INTRODUCCIÓN

La célula es la unidad estructural y funcional de los sistemas vivientes por su

origen, se clasifica como:

• Célula procariotica: Los organismos vivos unicelulares que incluyen a las

bacterias, presentan una estructura simple.
Los procariotas están divididos en dos grandes grupos: Arqueobacterias que se
vinculan de forma más estrecha con los eucariotas y los Eubacterias
(bacterias).
Dentro de las Aequeobacterias tenemos: metanógenos, halófilos, acidófilos,
termófilos.

BACTERIAS:
La estructura de la célula procariota está formada por citoplasma con
abundantes ribosomas, su material genético formado por un conglomerado de
compacto de ADN, la membrana citoplasmatica se encuentra rodeada por una
pared compuesta por peptidoglicano que confiere la forma a la célula. Algunos
presenta una cápsula.

 Cápsula (algunos la presentan) de naturaleza glucoprotéica que le

confiere protección a la bacteria.
• Pared celular: los peptidoglucanos son polímeros, es decir que estan
formados por unidades que se repiten un sin número de veces.
• Membrana celular: formada por 40% de fosfolípidos y un 60% de
proteínas, también presenta pequeñas cantidades de glucolípidos.
• Citoplasma: compuesto por un 85% de agua y 15% formado por
minerales y enzimas.
• Estructuras que le confieren movilidad: Cilios y flagelos.
• Mesosomas: son invaginaciones de la membrana, tenemos los
mesosomas septales que se proyecta hacia el centro del citoplasma para
formar el tabique de separación cuando se produce la division celular
bacteriana.
• Plásmidos: estructuras que contienen genes bacterianos.
• Pilis: son largos flexibles pero no proporcionan movimiento como los
flagelos y son pocos. Se encargan de la transferencia del material
genético en el proceso de apareamiento bacteriano denominano
conjugación
• Fimbrias: son pequeñas estructuras y numerosas no presentan
movimiento ondulatorio formada basicamente por una proteina
denominada fimbrilina, en algunas especies estas ayudan a su fijación o
adherencia a superficies como tejido animal.

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• Las Bacterias carecen de núcleo diferenciado; presenta un ADN circular en

doble hélice sin proteínas asociadas; carecen de microtúbulos y estructuras
relacionadas. En los procariotes no hay compactación de los cromosomas
ni huso mitótico. El ADN se duplica y las dos copias se separan de manera
sencilla y precisa por el desarrollo de una membrana celular entre las dos.
La mayor parte de los procariotas corresponde a organismos asexuados, ya
que solo contienen una copia de su único cromosoma y carecen de procesos
comparables a la meiosis, formación de gametos o fecundación verdadera.
Aunque en los procariotas no hay una reproducción sexual verdadera,
algunos son capaces de tener conjugación en la cual un fragmento de DNA
se transfiere a otra.

La cubierta de la membrana plasmática se encuentra muy diferenciada y se

denomina pared celular bacteriana, esta le da rigidez y forma a la bacteria; su
estructura molecular básica es el peptidoglicano. La pared puede contener
algunos otros componentes, además del peptidoglicano, como los
lipopolisacáridos en las bacterias gram-negativas y los ácidos teitoicos en las
bacterias gram-positivas.

Las bacterias comprenden, por una parte, especies de importancia médica puesto
que producen una serie de infecciones y padecimientos en el hombre y en los
animales pero, por otra parte, una gran mayoría representa beneficios para la
agricultura, la industria y la salud humana y animal.

Las bacterias, se clasifican de acuerdo a como retiene el colorante cristal violeta,

en su pared celular, según la técnica diseñada por el médico danés Hans Christian
Gram, es la siguiente:

 Gram positivas: Pared celular contiene mureina y ácido teitoico.

Ejemplos: Listeria, Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, y Clostridium.

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 Gram negativas: La composición de su pared celular es más compleja.

Además del peptidoglucano, contiene una asociación de proteínas lípidos y
lipopolisacáridos.
Ejemplos: gonorrea: Neisseria gonorrhoeae, meningitis: Neisseria meningitidis y
síntomas respiratorios Moraxella catarrhalis, enfermedades respiratorias:
Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae , Legionella pneumophila,
Pseudomonas aeruginosa, enfermedades urinarias: Escherichia coli, Proteus
mirabilis, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens y enfermedades
gastrointestinales Helicobacter pylori, Salmonella enteritidis, Salmonella typhi.

• Célula eucariótica: presentan compartimentos definidos por membranas

celulares, El compartimiento más grande recibe el nombre de citoplasma y
contiene las organelas, asociaciones supramoleculares (ribosomas,
microtúbulos y microfilamentos) y demás moléculas que participan en el
metabolismo celular.
En el núcleo se encuentra el material genético organizado en cromatina,
además se puede observar el nucléolo que es una organización
supramolecular ribonucleoproteica.
Los organismos eucariontes incluyen a los organismos más conocidos,
agrupados en cuatro reinos: Animalia (animales), Plantae (plantas), Fungi y
Protista.
Las células vegetales presentan diferencia en la cubierta esta es muy
marcada y se conoce con el nombre de pared celular vegetal.

CÉLULAS EPITELIALES
Las células epiteliales son un componente especializado de muchos órganos.
Presentan unas características estructurales comunes, en especial una
disposición en capas cohesivas, pero desempeñan funciones diversas gracias a sus
adaptaciones especializadas, estas capas forman epitelios y funcionan
principalmente como:

• Cobertura o revestimiento de las superficies corporales, por ejemplo la piel,

el intestino y diferentes conductos.
• Unidades funcionales de las glándulas de secreción como la saliva y el
hígado.

El tejido epitelial consiste en asociaciones de células muy juntas que forman

laminas. Las células epiteliales contiguas están unidas por medio de diversos
contactos celulares bien definidos. En la base del epitelio se forma una lamian
basal (extracelular). Los epitelios son los primeros que se forman, tanto desde el
punto de vista filogenético como desde el punto de vista ontogénico (en el curso
del desarrollo embrionario). En los epitelios se produce un recambio celular
constante, es decir que continuamente mueren células y al mismo tiempo hay
una producción continua de células nuevas.
El origen de las células nuevas esta en las células troncales, que en los epitelios
lábiles forman células nuevas de modo constante, por ejemplo en el epitelio del
tubo digestivo, vías respiratorias y en la epidermis. En los epitelios estables el
reemplazo celular ocurre en forma lenta pero la lesión se estimula, por ejemplo,
en los epitelios renal y hepático.

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En la mayoría de los órganos las células epiteliales son las portadoras especificas
de la función correspondiente, por ejemplo, en el pulmón, el hígado, el páncreas y
el riñón. Estos epitelios reciben el nombre de parénquima de estos órganos,
mientras que el tejido conjuntivo portador de vasos y nervios en los órganos
correspondientes forma el estroma.

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Organismos patógenos para el hombre:

Células sanguineas:
Los Leucocitos o Glóbulos blancos son células nucleadas, presentan
características que los diferencian por la forma de los leucocitos o la morfología
de su núcleo, sus propiedades funcionales, la afinidad del tinte por sus
granulaciones citoplasmáticas y su origen, constituyen la base para su
subdivisión en los siguientes grupos:
• Granulocitos,
• Monocitos,
• Linfocitos.

Los leucocitos existentes en el organismo circulan temporalmente por el torrente

sanguíneo. La mayor parte de estas células se encuentran en la medula ósea, así
como en los tejidos y órganos, donde cumplen funciones especiales.

Granulocitos: la mayoría de los granulocitos poseen un núcleo polilobulado,

mostrando con frecuencia varios segmentos interconectados por delgados
filamentos de cromatina. El citoplasma contiene gránulos característicos, que
permiten establecer una clasificación de los granulocitos de acuerdo con su
presencia.

Las granulaciones en el citoplasma contienen enzimas que se van a encargar, en

el caso de los macrófagos, “digerir” las bacterias, este fenómeno es conocido con
el nombre de fagocitosis, o sea la propiedad de absorber y digerir a los gérmenes.
Las bacterias atraen a los macrófagos por sustancias químicas que se difunden
en el medio. Este movimiento amiboideos, ante gérmenes o sus toxinas se
denomina quimiotaxismo que les permiten migrar entre todos los tejidos, entran
y salen de los capilares.

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Los leucocitos polimorfonucleares presentan núcleo lobulado y citoplasma

granuloso, tenemos:
• Neutrófilos: núcleo lobulado y su citoplasma se tiñe con colorantes neutros.
Son fagocitos y se forman en la médula ósea. Contienen gránulos
citoplasmicos, que se tiñen levemente. Los granulos
• Eosinófilos: Gránulos del citoplasma mas grandes y se tienen con colorantes
ácidos.
• Basófilos: presentan gránulos que se tiñen con colorantes básicos.

II) OBJETIVOS
• Identificar las estructuras celulares de células procarióticas y eucariótica.
• Diferenciar bacterias Gram positivas y Gram negativas
• Identificar el compartimiento nuclear de una célula eucariótica.

III) MATERIALES
Materiales que debe traer el alumno:
1. Láminas portaobjetos y cubreobjetos.
2. Guantes.

Materiales que proporcionará el laboratorio:

1. Hisopos de mango de madera largos.
2. Lancetas
3. Colorante azul de metileno.
4. Bateria de Gram:
 Solución de cristal violeta.
 Solución de lugol.
 Solución alcohol-acetona.
 Solución de safranina.

IV) PROCEDIMIENTO

Preparación de muestras: procariotas: Coloración Gram.

1. Extraer con el hisopo una muestra de sarro dentario y extenderlo (frotis)
en la parte central del portaobjeto.
3. Fijar el frotis a la llama del mechero.
4. Cubrir con Cristal Violeta por 1 min.
5. Lavar con agua corriente.
6. Cubrir la preparación con lugol por 1 min.
7. Lavar con agua corriente.
8. Agregar alcohol-acetona hasta que ya no arrastre colorante.
9. Lavar con agua corriente
10. Agregar el colorante safranina por 30 seg.
11. Lavar con agua corriente.
12. Secar con ayuda del mechero.
11. Observar al microscopio (al ser una muestra seca no requiere de
cubreobjetos) primero a 10, luego agregar a la lámina 01 gota de aceite de
inmersión y pasar al objetivo de 100.
12. Fotografie sus observaciones con el objetivo 100.

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Preparación de muestras: células eucarióticas (células epiteliales) coloración de

azul de metileno.
1. Tomar una muestra de raspado bucal (cara interna de las mejillas) y
extenderlo sobre la parte central de un portaobjeto limpio y desengrasado.
2. Dejar secar a temperatura ambiente.
3. Cubrir la lámina con azul de metileno por 10 min.
4. Enjuagar con agua corriente.
5. Dejar secar a temperatura ambiente
6. Observar al microscopio a 10 y luego a 40. Esquematice sus observaciones
con el objetivo de 40.

V) REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

Darnell J., Lodish H & Baltimore D. 2016. Molecular Cell Biology. 8va. Edición. Ed.
Scientific American Books. New York

James Steven Lowe, Peter G. Anderson Histología Humana 4ta. Edición Ed.
Elsevier. España.

https://books.google.com.pe/books?id=TdsoWPEYaoUC&pg=PA1&dq=celulas+proca
riotas&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwi2rab9pYvPAhVBySYKHTAsBbsQ6AEIGjAA#v=one
page&q=celulas%20procariotas&f=false

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PRACTICA Nº 4

NIVELES DE COMPLEJIDAD DE UN SISTEMA VIVIENTE

I) INTRODUCCIÓN

Los seres vivos son sistemas altamente organizados y complejos. El nivel más
simple de la materia es el subatómico, en este nivel se encuentran principalmente
los electrones, protones y neutrones que constituyen los átomos. En el siguiente
nivel, los átomos individuales forman moléculas, en este nivel se encuentran los
niveles atómicos, sub atómico y molecular más complejas o macromoléculas
formadas a partir de moléculas simples.
Las interacciones entre los componentes de un nivel dan lugar a propiedades
nuevas y diferentes de las que caracterizan el nivel anterior. En un nuevo nivel
de organización surge la propiedad más notable de todas, la vida, en la forma de
organismos unicelulares o multicelulares. Como lo establece la teoría celular,
todos los organismos vivos están compuestos de una o más células. Las células
vivas especializadas se organizan en tejidos como el epitelial, conectivo y
nervioso, los que a su vez pueden constituir órganos como el hígado, el tracto
intestinal o el cerebro humano, que presentan un grado extraordinario de
complejidad. Sin embargo, el cerebro es a su vez parte de algo mayor, el sistema
nervioso con nuevas propiedades que a su vez dependen de las del cerebro.

Otro rasgo fundamental que caracteriza a la vida es que los seres vivos
intercambian sustancias y energía con el medio externo funcionando como un
sistema abierto. Los organismos vivos son expertos en la conversión de
energética. El conjunto de reacciones químicas y de transformaciones de energía,
incluidas la síntesis y la degradación de moléculas, constituyen el metabolismo.
Otra capacidad crucial para la vida es que los organismos son capaces de
mantener un medio interno estable dentro de ciertos límites a pesar de que
intercambian materiales continuamente con el mundo externo. Todo esto es
posible por el fenómeno denominado homeostasis, es decir los seres vivos se
mantienen relativamente estables lo que le permite al organismo mantener su
identidad bioquímica y funcional pese a las cambiantes condiciones en su medio
exterior.

El organismo individual no es el último nivel de la organización biológica ya que

los organismos interactúan y así constituyen parte de un sistema más vasto de
organización, las poblaciones. Estas a su vez constituyen las comunidades que
forman un ecosistema. El último nivel de organización es la biosfera.

A continuación, detallamos los diferentes:

1. Nivel Quimico: Los atomos, formados a su vez por particulas subatomicas

(protones, neutrones, electrones),se combinan entre si para formar
combinaciones llamadas moléculas, que pueden ser inorgánicas y orgánicas.
Por lo tanto el átomo es la unidad mas pequeña de un elemento químico,
la molécula es la parte mas pequeña de un compuesto.

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2. Nivel Celular: Los diferentes tipos de moleculas se combinan entre si para

formar estructuras celulares llamadas organoides u organelos, como la
membrana celular las mitocondrias y los cromosomas, que realizan
funciones organizadas en la unidad biologica que es la celula. Tengamos en
cuenta que cada celula posee su propio metabolismo y es capaz de
reproducirse.
Algunos organismos son unicelulares, pero la mayoria son individuos
pluricelulares, por lo que las celulas semenjantes en forma y funcion se
unen para formar tejidos con distintos grados de complejidad. En los
individuos pluricelulares los tejidos se agrupan de acuerdo con sus
caracteristicas propias para formar órganos (partes del organismo
formados por varios tejidos que trabajan para la misma finalidad, como el
estomago o la mano).
Los órganos pueden ser de varios tipos y se combinan coordialmente de
diferentes maneras para dar origen a un nivel de organización mayor que
son los aparatos o sistemas, la principal diferencia radica en que los
aparatos sus organos estan formados por diferentes tipos de tejidos y en
los organos de los sistemas, predomina un tipo de tejido. El individuo u
organismo es el resultado de la organización y funcionamiento coordinado
de todos y cada uno de los niveles anteriores.

3. Niveles Ecológicos:
Poblacion: es el conjuntos de individuos de la misma especie que se
desarrollan en una zona geograifca limitada.
Comunidad: es el conjunto de todas la poblaciones de diferentes especies
que habitan en un ecosistema.
Ecosistema: es un nivel de organización mayor en el que se encuentran los
factores abióticos que consisten en las condiciones del medio que
interactuan con los seres vivos.
La biosfera: es el mayor nivel de organización biológica, incluye a todos los
seres vivos de todos los ecosistemas de la tierra.

La biología es una ciencia en constante desarrollo y diversificacion, por lo que se

han abierto otros campos de especialización en respuesta a la necesidades de la
sociedad. Por ejemplo la genómica ha respondido a la demandas de investigacion
en torno al genoma humano; la proteómica, que obedece al estudio de los
mecanismos de sisntesis de las proteinas y sus funciones en el organismo; la
ciencia ambiental, que permite el estudio de los efectos de la alteracion del
ambiente y los mecanismos para revertir los daños, y por ultimo, la conservacion,
que guia las investigaciones hacia la proteccion de la biodiversidad y la
restauracion de ecosistemas afectados por las actividades humanas.

II) OBJETIVOS

1. Observar y conocer los principales multiniveles de organización desde

individuo u organismo hasta la célula, tomando como modelo de estudio el
ratón.
2. Verificar las interrelaciones entre sistemas de órganos, tejidos, células y
moléculas

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III) MATERIALES

Materiales que debe presentar el alumno:

1. Un ratón blanco vivo (adulto).

2. Un tecknopor, medida 20x30 cm. Sin forrar.
3. 1 paño yess
4. Alfileres.
5. Una Bolsa negra para eliminar los desechos.
6. Papel Toalla.

Materiales que proporciona el laboratorio:

1. Microscopio compuesto de campo claro

2. Distencil
3. Algodón.
4. Jeringa de tuberculina.
5. Pipetas.
6. Propipetas.
7. Placas Petri.
8. Tubos de ensayo
9. Baguetas de vidrio
10. Gradillas
11. Colorante Wright.
12. Peróxido de Hidrógeno.

IV) PROCEDIMIENTO

Morfología externa del organismo en estudio.

1. Observe el ratón de cabeza a cola e identifique los órganos externos que

forman parte de los sistemas: digestivo, respiratorio, excretor, reproductor,
auditivo y visual.
2. Observa minuciosamente el sistema tegumentario e identifique los órganos
que lo forman.

Del organismo a los órganos.

Sacrificio del ratón:

1. Se coloca el ratón en posición dorso ventral (boca abajo) sobre el plano de

la tabla de disección.
2. Con ayuda del paño yess cubrir al ratón dejando las extremidades inferiores
expuestas.
3. Estirar una de las extremidades inferiores, palpar la zona blanda de esta y
colocarle 0.1ml. de distencil con ayuda de la jeringa de tuberculina. Esperar
unos minutos.

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Procedimiento:

1. Una vez muerto el ratón se procede a colocarlo sobre la tabla de tecnopor

en posición ventro dorsal (boca arriba) y con ayuda de la pinza se levanta
la piel de la línea medio ventral y se realiza un pequeño corte con la tijera.
2. Se introduce la sonda acanalada, con el canal hacia arriba hasta la parte
donde inicia el esternón y se realiza un corte longitudinal en la pared del
cuerpo siguiendo el canal de la sonda. Se tiene cuidado de no perforar
órganos de la región abdominal.
3. Observe y reconozca los órganos que se encuentran dentro de la cavidad
abdominal.
4. Observe en la base de la cavidad torácica, la presencia del músculo
diafragma.
5. Se introduce la sonda acanalada rompiendo el diafragma y se corta el
esternón (la pieza esquelética central, entre las extremidades anteriores).
Tenga cuidado de no dañar los órganos que están en la cavidad torácica.
6. Identifique los órganos que se encuentran en esta cavidad: corazón, los
pulmones.
7. Identifique el sistema reproductor de su espécimen. Reconozca si es macho
o hembra.

Hembra en estado de gestación

De los órganos a las células.

La sangre es un tejido que forma parte del sistema circulatorio.

1 Con la tuberculina descartable punce la aorta y tome muestra de
sangre. (con un Angulo de 90°)
2. Coloque una gota en el extremo de una lámina porta objeto, luego con otra
lámina haga una extensión o frotis (con un ángulo de 45°)
3. Deje secar y coloree con Wright
4. Luego observe al microscopio a menor aumento (l0) y mediano aumento (40).
¿Qué nivel de organización biológica esta Ud. observando?

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De las células a las moléculas.

Como puede comprobar, los órganos están formados por tejidos y las unidades
estructurales de estos son las células. Estas, a su vez, contienen organelas y
moléculas biológicas: proteínas polisacáridos, lípidos y ácidos nucleicos. Las
enzimas son proteínas catalizadoras que se encuentran en todas las células. Los
catalizadores tienen la característica de aumentar las velocidades de reacciones
que ya son energéticamente favorables al disminuir la energía de activación. Las
enzimas deben catalizar reacciones químicas en las apacibles condiciones
celulares: 37 ºc, pH 6.5 – 7.5 y solventes acuosos. Para demostrar la actividad
enzimática se realizará lo siguiente:

1. Tome una pequeña muestra de hígado, riñón y músculo del ratón, se coloca
cada muestra en una placa Petri y se cortan en pequeños cubitos, con ayuda
de la tijera o del bisturí.
2. Coloque los cubitos en tres tubos de ensayo diferentes, un tubo para cada
muestra.
3. Con ayuda de la bagueta de vidrio triture los cubitos en los tubos que ya
contienen 1 ml de peróxido de hidrógeno.
4. Observe y compare los resultados obtenidos en los tres tubos.

En todos los tejidos vivos las células se encargan de producir la enzima catalasa,
la cual cataliza la reacción que descompone el peróxido de hidrógeno, producto
del metabolismo celular.

V) REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Audesirk T. & Audesirk G.. 1996: Biología: La vida en la tierra. 4ta. Edición. Pretice-
Hall Hispanoamericana, S.A. México, Nueva York, Bogotá, Londres.
Ondarza R.N. 1996.Biologia Moderna . 10 a. Edición. ed.Trillias. México, Argentina,
España.
Rosaura Ruiz Gutiérrez 2006. 1ra edición. Editorial Pearson Education. Impreso
en México.
http://www.noticiasmvs.com/#!/noticias/explican-las-diferencias-sexuales-que-
provocan-el-cancer-de-higado-354.html

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