Informe N°11 - Grupo N°3

UNIVERSIDAD NORBERT WIENER
Facultad de Farmacia y Bioquímica
Escuela de Farmacia y Bioquímica
INFORME N°11: Dosaje de Glucosa
Prueba de Tolerancia a la Glucosa - Glucosa Postprandial
DOCENTE: Dr. Q.F. Pineda Pérez, Neuman Mario
INTEGRANTES:
● Alvino Mateo, Laura

● Condori Balvin, Jessi Gabriel
● Huancayo Amaro, Sadid Yoselin
● Gonzales Surichaqui, Josselin
● Sifuentes Guillen, Melissa Alejandrina
● Villafuerte López, Cristina Magnolia
2022 - II
ÍNDICE
I. INTRODUCCIÓN………………………………………………………………….……3
II. MARCO TEÓRICO ……………………………………………………………...…...4
III. MATERIALES Y REACTIVOS …………………………………………………..8
IV. PROCEDIMIENTO………………………………………..………………………..10
V. RESULTADOS………………………………………………..……………………….12
VI. CONCLUSIÓN………………………………………………………………...……..15
VII. BIBLIOGRAFÍA ……………………………………………………………...……19

I. INTRODUCCIÓN
La glucosa es el principal azúcar que contiene la sangre y es la principal fuente de

energía de las células corporales. La glucosa procede de los alimentos que
comemos o el cuerpo la puede fabricar a partir de otras sustancias. Asimismo la
glucosa llega hasta las células a través del torrente sanguíneo y hay varias
hormonas, como la insulina, que controlan la concentración de azúcar en sangre.
Por ello,los azúcares que se ingieren con los alimentos son transformados por
el metabolismo en glucosa y esta se desplaza a través del torrente sanguíneo hasta
alcanzar las células de diferentes tipos de tejido proporcionando la energía que
necesitan para funcionar. El ejemplo más claro de este proceso es el del tejido
muscular, que necesita de esta energía para realizar el esfuerzo que le exige cada
movimiento.
Ante ello,una cantidad excesiva o insuficiente de glucosa en la sangre podría
ser un signo de un problema médico serio,por lo cual,los niveles altos de glucosa en
la sangre (hiperglucemia) pueden ser un signo de diabetes, una enfermedad que
puede causar serios problemas de salud a largo plazo y los niveles altos de glucosa
en la sangre también pueden ser causados por otras enfermedades que afectan los
niveles de insulina o glucosa en la sangre, como problemas con el páncreas y
glándulas suprarrenales.
En este sentido,lo recomendable es que la glucemia se mida al levantarse por
la mañana y antes del desayuno y se considera normal si los niveles de glucosa que
se sitúan entre los 70 y 100 mg/dl en ayunas y en menos a 140 mg/dl dos horas
después de cada comida.
Asimismo, con el fin de obtener unos resultados más seguros y
confiables, es importante la correcta recogida y conservación de la sangre para
poder realizar el dosaje de glucosa. Por ende, se deben seguir los protocolos para la
adecuada recogida, transporte y manipulación de la muestra, que es la que nos va a
proporcionar la información necesaria acerca de los valores del nivel de glucosa.
Finalmente, la importancia de la presente práctica radica en que este tipo
de pruebas favorecen a detectar alguna enfermedad patológica y así guiar y brindar
al paciente un tratamiento oportuno y el mejor manejo de la enfermedad de forma
segura y efectiva. En este caso, el presente informe se basará en el desarrollo de la
determinación de la glucemia y la tolerancia de la glucosa, en los cuales es
necesario recoger una muestra adecuada.
II. MARCO TEÓRICO
2.1 Glucosa
El azúcar en la sangre, también llamada "glucosa" es el azúcar principal que se

encuentra en la sangre. Esta proviene de los alimentos que se consumen y es la
principal fuente de energía. En consecuencia, la sangre lleva la glucosa a todas
las células del cuerpo para ser usada como energía.
La determinación de la glucosa (azúcar) sanguínea es necesaria para establecer

el diagnóstico de la diabetes mellitus y otras enfermedades en que existen
alteraciones del metabolismo de los carbohidratos.
Asimismo, los exámenes que evalúan la cantidad de glucosa en la sangre los

solicita el médico cuando la persona tiene un familiar con diabetes o cuando
presenta síntomas característicos de la enfermedad.
2.1.1 Hiperglucemia intermedia:
Las personas con hiperglucemia intermedia incluye la presencia de glucemia

en ayunas alterada (110-126 mg/dl), de intolerancia oral a la glucosa (140-199
mg/dl a las 2h tras 75 gramos de glusoca oral) o ambas a la vez. Estas
condiciones tienen riesgo de padecer diabetes y complicaciones
cardiovasculares u otro tipo, como las siguientes:
★ Enfermedades del corazón y los vasos sanguíneos

★ Daño en los nervios (neuropatía) de las extremidades
★ Daño en el sistema digestivo, disfunción eréctil
★ Enfermedad renal, daño ocular y deterioro de la audición
★ Enfermedades de la piel y cicatrización lenta
★ Apnea del sueño y demencia
2.1.2 Prueba de Tolerancia a la Glucosa Oral
La prueba más común de tolerancia a la glucosa es la prueba de tolerancia a

la glucosa oral (PTGO). Asimismo, el examen puede demorar hasta 3 horas.
Para ello, se seguirán los siguientes pasos:
★ Antes de que el examen comience, se tomará una muestra de sangre.
★ Luego le pedirán que tome un líquido que contiene una cierta cantidad de
glucosa (por lo regular 75 gramos). Se le tomarán muestras de sangre
nuevamente cada 30 a 60 minutos después de beber la solución.
Un examen similar es una prueba de tolerancia a la glucosa (PTG) intravenosa

(IV). Se utiliza en pocas ocasiones, y nunca se emplea para diagnosticar
diabetes. En una versión de esta prueba, se inyecta la glucosa en una vena
durante 3 minutos. Los niveles de insulina en la sangre se miden antes de la
inyección, y de nuevo en los minutos 1 y 3 después de esta. El tiempo puede
variar. Esta PTG casi siempre se usa solo para propósitos de investigación.
En ese sentido, se usa una prueba similar para diagnosticar el exceso de

hormona del crecimiento (acromegalia) cuando tanto la glucosa como la
hormona del crecimiento se miden después de ingerir una bebida de glucosa.
2.1.3 Método de la glucosa oxidasa
En esta prueba, el color formado en el proceso es directamente proporcional a

la cantidad de glucosa sanguínea que puede medirse con el
espectrofotómetro.
La glucosa es oxidada enzimáticamente por la glucosa oxidasa a ácido

glucónico y agua oxigenada.
La reacción es la siguiente:
O2 + H2O + Glucosa —> Ácido glucónico + H2O2
El agua oxigenada formada es separada, y el agua y el oxígeno disminuyen

por una peroxidasa en presencia de un aceptor de oxígeno, que es convertido
en un componente coloreado, cuya cantidad se lee con el espectrofotómetro.
2.2 Nivel de absorbancia
Esta magnitud física alude específicamente al nivel que absorbe un elemento

óptico de acuerdo a la unidad de distancia, teniendo en cuenta una longitud de
onda determinada.
Asimismo, la absorbancia se mide a través del uso de un espectrofotómetro o

un lector de microplacas, que es un instrumento que dirige la luz de una longitud
de onda específica a través de una muestra (en microceldas) y mide la cantidad
de luz que absorbe la muestra.
De este modo, como ya se mencionó líneas arriba, al finalizar la prueba, el color

formado en el proceso de nivel de absorbancia en el espectrofotómetro es
directamente proporcional a la cantidad de glucosa sanguínea que puede
medirse con el espectrofotómetro.
III. MATERIALES Y REACTIVOS
V. PROCEDIMIENTO
DETERMINACIÓN DE LA GLUCOSA SÉRICA
Fundamento :
La glucosa reacciona con el reactivo enzimático que contiene una mezcla de las
enzimas Glucosa Oxidasa (GOD) y Peroxidasa (POD). En la primera etapa la
Glucosa es oxidada a Ac. Glucónico por la acción de la enzima GOD, liberándose
como producto H2O2, el cual en una reacción mediada por la enzima POD,
reacciona con el Ac. p-Hidroxibenzoico y 4- Aminoantipirina produciendo un
compuesto coloreado con un máximo de absorción a 505 nm., en cantidad
proporcional a la cantidad de Glucosa presente en la muestra.
GOD
D-Glucosa Ácido D-Glucónico + H2O2
H2O2 + p-HBA + 4-AAP POD

H2O + Complejo Coloreado
A) Toma de muestra basal
Técnica:Se procede la toma de muestra ,se extrae la sangre y se le lleva

centrifugar para obtener el suero.
-En tres tubos de ensayo rotulados colocamos el blanco ,calibrador y muestra según
indica la siguiente tabla :
Blanco Calibrador Muestra
Muestra (ml) - - 0.01
Calibrador (ml) - 0.01 -
Reactivo (ml) 1.00l 1.00 1.00

-Se debe mezclar bien el calibrador más reactivo y la muestra más reactivo ,después
llevar a temperatura de 37 °o medio ambiente y después dar lectura en el
espectrofotómetro a 505 mm. Tomar nota de las lecturas de absorbancia y realizar
los cálculos en base a la siguiente fórmula :
PRUEBA DE TOLERANCIA A GLUCOSA
B) Ingerir bebida glucosada
El mismo participante que se realizó la extracción de muestra basal debe ingerir una
bebida glucosada de 250 mL (gaseosa).
C) Toma de muestra 40 minutos después.
Realizar la extracción de muestra basal después de haber pasado 40 minutos de

haber ingerido la bebida glucosada. Luego se lleva a centrifugar para obtener el
suero.
En un tubo de ensayo limpio y seco verter 1 mL de reactivo y adicionar 10 μg del

suero, agitar y mantener a 37º C por 5 minutos.
Luego de haber culminado los 5 minutos, verter la solución en una celda o cubeta
para espectrofotómetro y medir determinar la absorbancia en un espectrofotómetro
calibrado a 505 mm. Anotar los resultados.
D) Tomar muestra basal luego de 30 minutos.
Después de haber pasado 30 minutos volver a realizar la extracción de muestra

basal y llevar a centrifugar.
En un tubo de ensayo limpio y seco verter 1 mL de reactivo y adicionar 10 μg del

suero, agitar y mantener a 37º C por 5 minutos.
Luego de haber culminado los 5 minutos, verter la solución en una celda o cubeta
para espectrofotómetro y medir determinar la absorbancia en un espectrofotómetro
calibrado a 505 mm. Anotar los resultados.
V. RESULTADOS
Los valores de absorbancia del estándar o calibrador y de los tubos de la muestra

se procede a calcular la concentración de glucosa en la muestra,para ello usamos
la siguiente fórmula:
❖ Resultado de la glucosa sérica en ayunas de un integrante del grupo:
Absorbancia del calibrador: 1.669 Absorbancia de la muestra: 1.006
Factor= 100(observado en el estándar)/1.669= 59.9161174
Glucosa= 59.9161174 x 1.006= 60mg/dl

❖ Resultados de la glucosa sérica tras la ingesta de glucosa (gaseosa) a los
40 minutos.
Repetir el procedimiento con una muestra nueva de sangre post ingesta de

glucosa.
Medimos la absorbancia de la muestra: 0.873
Factor= 100(observado en el estándar)/1.669= 59.9161174
Glucosa= 59.9161174 x 0.873 = 52.3mg/dl
❖ Resultados de la glucosa sérica a los siguientes 30 minutos:
Repetir el procedimiento con una muestra nueva de sangre
Medimos la absorbancia de la muestra: 0.970
Factor= 100(observamos en el estándar)/1.669= 59.9161174
Glucosa= 59.9161174 x 0.970 = 58.92 mg/dl

VALORES OBTENIDOS:
Tabla 1: Concentración de glucosa en sangre en la estudiante del grupo 3
Glucosa basal a los 40 minutos a los 70 minutos
Estudiante 60mg/gl 52.3mg/dl 58.9 mg/dl
FIGURA 1. Curva de tolerancia oral a la glucosa de la estudiante

VI. CONCLUSIONES:
● Se determinó la glucosa basal sérica(sangre venosa), esto se cuantificó por

la liberación de peróxido en la reacción química que se produce con el
reactivo GLUCOSA OXIDASA dándonos un complejo coloreado.
● Se determinó la concentración de glucosa en suero después de ingerir una
carga de glucosa(GASEOSA).
● Se determinó la curva de tolerancia a la glucosa mediante el test de
tolerancia oral a la glucosa (TTGO) por espectrofotometría.
● Se empleó la utilidad diagnóstica de la prueba de tolerancia a la glucosa a
partir de los resultados obtenidos.
● El tamaño y estado de las celdas influye en la lectura de la absorbancia.
● Se comprendió la importancia del test de tolerancia oral a la glucosa para el
descarte de DIABETES MELLITUS.
VII. REFERENCIAS
1. Medlineplus. Prueba de glucosa en la sangre. [Internet]. [Citado el 07 de

Noviembre de 2022]. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/prueba-de-glucosa-en-la-
sangre/.
2. Revista diabetes.Importancia del monitoreo de la glucosa en pacientes con

diabetes mellitus. [Internet]. [Citado el 07 de Noviembre de 2022]. Disponible en:
https://revistadiabetespr.com/importancia-del-monitoreo-de-la-glucosa-en-pacien
tes-con-diabetes-mellitus/.
3. Mayo clinic. Hipoglucemia. [Internet]. [Citado el 07 de Noviembre de 2022].

Disponible en:
https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/hypoglycemia/symptoms-c
auses/syc-20373685
4. MINSA. Bioquímica sanguínea. [Internet]. [Citado el 07 de Noviembre de 2022].

Disponible en: http://bvs.minsa.gob.pe/local/PSNB/704_MS-PSNB459-3.pdf
5. MINSA. Guía de Práctica Clínica para el Diagnóstico, Tratamiento y Control de

la Diabetes Mellitus Tipo 2 en el Primer Nivel de Atención. [Internet]. [Citado el
07 de Noviembre de 2022]. Disponible en:
http://bvs.minsa.gob.pe/local/MINSA/3466.pdf

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Prueba de Tolerancia a la Glucosa - Glucosa Postprandial

DOCENTE: Dr. Q.F. Pineda Pérez, Neuman Mario

● Alvino Mateo, Laura

II. MARCO TEÓRICO ……………………………………………………………...…...4

III. MATERIALES Y REACTIVOS …………………………………………………..8

VII. BIBLIOGRAFÍA ……………………………………………………………...……19

La glucosa es el principal azúcar que contiene la sangre y es la principal fuente de

El azúcar en la sangre, también llamada "glucosa" es el azúcar principal que se

La determinación de la glucosa (azúcar) sanguínea es necesaria para establecer

Asimismo, los exámenes que evalúan la cantidad de glucosa en la sangre los

2.1.1 Hiperglucemia intermedia:

Las personas con hiperglucemia intermedia incluye la presencia de glucemia

★ Enfermedades del corazón y los vasos sanguíneos

La prueba más común de tolerancia a la glucosa es la prueba de tolerancia a

★ Antes de que el examen comience, se tomará una muestra de sangre.

Un examen similar es una prueba de tolerancia a la glucosa (PTG) intravenosa

En ese sentido, se usa una prueba similar para diagnosticar el exceso de

2.1.3 Método de la glucosa oxidasa

En esta prueba, el color formado en el proceso es directamente proporcional a

La glucosa es oxidada enzimáticamente por la glucosa oxidasa a ácido

O2 + H2O + Glucosa —> Ácido glucónico + H2O2

El agua oxigenada formada es separada, y el agua y el oxígeno disminuyen

Esta magnitud física alude específicamente al nivel que absorbe un elemento

Asimismo, la absorbancia se mide a través del uso de un espectrofotómetro o

De este modo, como ya se mencionó líneas arriba, al finalizar la prueba, el color

DETERMINACIÓN DE LA GLUCOSA SÉRICA

H2O2 + p-HBA + 4-AAP POD

A) Toma de muestra basal

Técnica:Se procede la toma de muestra ,se extrae la sangre y se le lleva

Blanco Calibrador Muestra

Muestra (ml) - - 0.01

Calibrador (ml) - 0.01 -

Reactivo (ml) 1.00l 1.00 1.00

PRUEBA DE TOLERANCIA A GLUCOSA

B) Ingerir bebida glucosada

Realizar la extracción de muestra basal después de haber pasado 40 minutos de

En un tubo de ensayo limpio y seco verter 1 mL de reactivo y adicionar 10 μg del

Después de haber pasado 30 minutos volver a realizar la extracción de muestra

En un tubo de ensayo limpio y seco verter 1 mL de reactivo y adicionar 10 μg del

Los valores de absorbancia del estándar o calibrador y de los tubos de la muestra

❖ Resultado de la glucosa sérica en ayunas de un integrante del grupo:

Absorbancia del calibrador: 1.669 Absorbancia de la muestra: 1.006

Factor= 100(observado en el estándar)/1.669= 59.9161174

Glucosa= 59.9161174 x 1.006= 60mg/dl

Repetir el procedimiento con una muestra nueva de sangre post ingesta de

Medimos la absorbancia de la muestra: 0.873

Factor= 100(observado en el estándar)/1.669= 59.9161174

Glucosa= 59.9161174 x 0.873 = 52.3mg/dl

❖ Resultados de la glucosa sérica a los siguientes 30 minutos:

Repetir el procedimiento con una muestra nueva de sangre

Medimos la absorbancia de la muestra: 0.970

Factor= 100(observamos en el estándar)/1.669= 59.9161174

Glucosa= 59.9161174 x 0.970 = 58.92 mg/dl

Tabla 1: Concentración de glucosa en sangre en la estudiante del grupo 3

Glucosa basal a los 40 minutos a los 70 minutos

Estudiante 60mg/gl 52.3mg/dl 58.9 mg/dl