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    Practica 3. - Hidrolisis

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    Daniiel Ramgom
    Este documento presenta los resultados de un experimento de hidrólisis enzimática realizado por estudiantes. En el experimento, se observó la hidrólisis del almidón catalizada por la enzima amilasa en la saliva. Al añadir saliva a una solución de almidón, la amilasa hidrolizó los enlaces del almidón, rompiendo su estructura y cambiando el color al calentar la mezcla. El Lugol se utilizó para detectar la presencia de almidón antes y después de la hidrólisis.

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    Practica 3. - Hidrolisis

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    Este documento presenta los resultados de un experimento de hidrólisis enzimática realizado por estudiantes. En el experimento, se observó la hidrólisis del almidón catalizada por la enzima amilasa en la saliva. Al añadir saliva a una solución de almidón, la amilasa hidrolizó los enlaces del almidón, rompiendo su estructura y cambiando el color al calentar la mezcla. El Lugol se utilizó para detectar la presencia de almidón antes y después de la hidrólisis.

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    practica 3.- hidrolisis

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    CENTRO UNIVERSITARIO INTERAMERICANO

    PLANTEL GOLFO CENTRO

    LABORATORIO DE BIOQUÍMICA II

    PRACTICA 3. HIDROLISIS ENZIMÁTICA


    SECCIÓN F

    INTEGRANTES:

    PABLO PARDO ALVARADO


    NANCY PONCE URBINA
    JOSE QUIÑONES ZOQUIAPA
    PEDRO DANIEL RAMÍREZ GÓMEZ

    PROFESOR. RICARDO RODRÍGUEZ SÁNCHEZ

    GRUPO 01-3307-23, 7° SEMESTRE


    INTRODUCCIÓN
    La hidrólisis enzimática es un proceso en el que las enzimas facilitan la escisión
    de los enlaces en las moléculas con la adición de los elementos del agua,
    desempeña un papel importante en la digestión de los alimentos.
    La hidrólisis enzimática implica la acción secuencial de un grupo de enzimas,
    conocidas como celulasas, que pertenecen a la superfamilia de las glicosil
    hidrolasas, llamadas así porque catalizan la hidrólisis del enlace glucosídico
    entre 2 o más hidratos de carbono o entre estos y una fracción que no sea un
    hidrato de carbono.
    Un catalizador es una sustancia que aumenta la velocidad de una reacción
    química, sin sufrir ningún cambio al final de la misma. Casi todas las reacciones
    químicas que ocurren en los seres vivos son catalizadas por proteínas
    especializadas llamadas enzimas. La sustancia sobre la que actúa una enzima se
    llama sustrato. La enzima se une al sustrato formando un complejo enzima-
    sustrato que al final se disocia en enzima y producto. La enzima libre queda así
    en capacidad de unirse a otras moléculas del sustrato y generar más producto,
    hasta que se agote la disponibilidad del sustrato o se presenten efectos
    reguladores que inhiban la actividad catalítica de la enzima.
    La saliva contiene una mezcla de componentes y entre ellos la enzima llamada
    amilasa salival o ptialina, que hidroliza el enlace α-1,4 tanto del polisacárido
    almidón como del glucógeno de la dieta, liberando moléculas de maltosa,
    maltotriosa, una mezcla de oligosacáridos ramificados y glucosa. Como parte
    de sus propiedades cinéticas esta enzima cataliza la hidrólisis del almidón de
    manera óptima a pH de 7.0, por lo que a pH por arriba o por debajo de este valor
    su actividad se minimiza.
    La actividad enzimática puede verse afectada por cualquier factor físico o
    químico que altere su estructura tridimensional. Generalmente, las condiciones
    óptimas se encuentran entre límites estrechos de temperatura, pH, concentración
    salina, etc. A medida que las condiciones se alejan del punto óptimo, la
    actividad de la enzima empieza a decrecer y en condiciones extremas, puede
    perder su estructura tridimensional y se dice que la enzima es desnaturalizada.
    OBJETIVO GENERAL
    Reconocer el proceso de hidrolisis enzimática.

    OBJETIVOS ESPECIFICOS
    - Conocer la reacción del almidón al tener contacto con amilasa.
    - Ejecutar el proceso obtener hidrolisis a partir de amilasa.
    - El alumno observara la hidrolisis del almidón por acción digestiva de la amilasa
    salivar.

    MATERIAL Y EQUIPO
    - 1 microscopio
    - 1 gradilla
    - 2 tubos de ensayo
    - 1 pipeta 5ml
    - 1 pipeta 1ml
    - Pinzas
    - 1 mechero
    - 4 ml de almidón 2%
    - 1 ml Lugol
    - Agua y jabón liquido
    - Franelas blancas
    En el primer tubo agregar 2ml. De una
    M ETODOLOGÍA disolución de almidón al 2% y dos gotas
    de disolución de yodo (Lugol) y
    observar el resultado.

    INICIO Después calentar el tubo hasta que la mezcla


    pierda el color y dejar enfriar el tubo con agua
    corriente, esperar unos minutos y anotar el
    resultado.

    En el segundo tubo 2ml, de la disolución de


    FIN almidón y una cierta cantidad de saliva, mezclar
    bien la saliva con la disolución y calentar hasta
    que cambie el color y añadir unas gotas de
    Lugol, anotar resultados.
    OBSERVACIONES Y RESULTADOS

    Al primer tubo
    almidón y 2 gotas de
    Lugol.
    se cortó el jamón en Se aplico Lugol y se
    partes pequeñas para desnaturalizo.
    observar cómo se
    desintegra.

    Al segundo tubo se añadió 2 ml de almidón y saliva y posterior se añadió dos gotas


    de Lugol, colocándolas a baño maría mientras iba calentándose este iba haciendo
    un cambio de color a transparente turbio.
    El Lugol lo utilizamos para reconocer la presencia de almidón, porque esta
    sustancia adsorbe el yodo produciendo una coloración azul intensa, coloración que
    desaparece al calentar, porque se rompe la estructura que se ha producido, pero
    vuelve a aparecer al enfriar.
    CUESTIONARIO
    ¿Cuál es la estructura del almidón?
    Es un polisacárido de reserva en vegetales. Se trata de un polímero de glucosa, formado por
    dos tipos de moléculas: amilosa (30%), molécula lineal, que se encuentra enrollada en
    forma de hélice, y amilopectina (70%), molécula ramificada.

    ¿Qué es un azúcar reductor?


    Los Azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo intacto, y
    que a través del mismo pueden reaccionar como reductores con otras moléculas.

    ¿Qué tipo de enlaces hidrolizan las amilasas?


    Las α-amilasas son enzimas que catalizan al azar la hidrólisis de enlaces glicosídicos α-
    1,4 de polisacáridos como el almidón y el glicógeno, para producir maltosa, oligosacáridos
    de diferentes tamaños y cadenas más o menos ramificadas llamadas dextrinas límite

    ¿Qué amilasas se encuentran en los organismos animales?


    Las amilasas alfa, esta enzima hidroliza los enlaces 1-4 carbohidratos de forma aleatoria
    dando lugar a una mezcla de dextrinas, maltosa y glucosa. Actúa tanto sobre la amilosa
    como sobre la amilopectina, aunque en la amilopectina los puntos próximos al enlace 1-6
    no pueden ser hidrolizados.

    ¿Qué función tiene el Lugol?


    Se utiliza esta disolución como indicador en la prueba del yodo, que sirve para identificar
    polisacáridos como los almidones, glucógeno y ciertas dextrinas, formando un complejo de
    inclusión termolábil que se caracteriza por presentar distintos colores según las
    ramificaciones que presente la molécula de polisacárido.
    BIBLIOGRAFIA

    P.M. Coutinho, M.R. Andersen, K. Kolenova, P.A. vanKuyk, I. Benoit, B.S. Gruben, et al.
    Post-genomic insights into the plant polysaccharide degradation potential of Aspergillus
    nidulans and comparison to Aspergillus niger and Aspergillus oryzae.
    Fungal Genet Biol, 46 (2009), pp. S161-S169

    H. David, A.M. Krogh, C. Roca, M. Akesson, J. Nielsen.


    CreA influences the metabolic fluxes of Aspergillus nidulans during growth on glucose and
    xylose.
    Microbiology, 151 (2005), pp. 2209-2221

    S.T. Coradetti, J.P. Craig, Y. Xiong, T. Shock, C. Tian, N.L. Glass.


    Conserved and essential transcription factors for cellulase gene expression in ascomycete
    fungi.
    Proc Natl Acad Sci, 109 (2012), pp. 7397-7402

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