Transaminacion - Secc 3

Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Práctica 1.3 Reacción de transaminación y su reconocimiento por medio
de cromatografía en papel
Integrantes: Hernández López Daniela Grupo: 3OV1

Jácome López Stephani Nicole Sección: 3
Introducción
Glu 20 7.2 0.208
La reacción de transaminación es un proceso
bioquímico en el que un grupo amino (-NH2) Glu 25 7 0.202
se transfiere de un aminoácido a un
α-cetoácido, produciendo un nuevo Alanina 18.2 0.527
aminoácido y un nuevo α-cetoácido. Esta
Testigo 6.6 0.191
reacción es catalizada por una enzima
conocida como transaminasa. La Problema 6.5 0.188
transaminación es esencial en la biosíntesis
de aminoácidos y también en la degradación Frente del 34.5
de los mismos. solvente
La cromatografía en papel es una herramienta
útil para la identificación de productos de la Tabla 1. Resultados para la curva tipo
reacción de transaminación. Después de que
se haya llevado a cabo la reacción, se puede (uL) L-Glu (umoles) Absorbancia
L-Glu
aplicar la muestra a una hoja de papel y
separar los productos por cromatografía en 5 0.1 0.257
papel. Los productos pueden ser identificados
por su posición relativa en el papel y 10 0.2 0.303
comparados con los estándares conocidos.
Objetivo 15 0.3 0.461
● Cuantificar la actividad de la
20 0.4 0.729
transaminasa ALT/TGP a partir de un
extracto crudo de hígado. 25 0.5 0.806
Resultados
Testigo 1.65 2.466
Problema 1.63 2.440
Imagen 1. Revelado del cromatograma
Tabla 1. Cálculos de Rf
Muestra Distancia Rf
recorrida
Glu 5 7.8 0.226 Gráfico 1: Curva tipo del ácido glutámico
Glu 10 7.5 0.217 Cálculos

20 𝑢𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢 1 𝑚𝐿
𝑢𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢 = 5𝑢𝐿 = 0. 1
Glu 15 7.3 0.211 𝑚𝐿 1000 𝑢𝐿
Cálculo de μmoles de Glu del tubo P yT de corrimiento de misma distancia en los puntos
acuerdo a la ecuación de la recta de la de Glu a diferentes concentraciones, problema
curva tipo. y una muy tenue en testigo. Por otro lado,
hubo un corrimiento de mayor distancia en los
Cálculo de μmoles de glutamato en el testigo: puntos de alanina, testigo y problema.
2.466+0.054
1.524
= 1. 6535
Conclusiones
Se logró cuantificar la actividad de la enzima
Se añadieron 60 μL en cromatograma y se en unidades arbitrarias de transferasa (UAT)
requieren saber los μmoles en 1 mL: gracias a la curva tipo y distintas fórmulas
dándonos como resultado
1.653 𝑢𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢 60𝑢𝐿
𝑢𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢 = 𝑋 1000 𝑢𝐿
= 27. 55 μ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢𝑝 93. 66 μ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢/𝑔/ℎ.
La transferasa transfiere un grupo amino
Cálculo de μmoles de glutamato en el de un aminoácido a un α-cetoácido
problema:
aceptor; dando como resultado la
2.440+0.054
1.524
= 1. 6364 formación de un nuevo aminoácido y un
nuevo cetoácido.
Se añadieron 60 μL en cromatograma y se
requieren saber los μmoles en 1 mL: Referencias bibliográficas
- Bohinski, R. (1991). "Bioquímica".
𝑢𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢 =
1.636 𝑢𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢
𝑋
60𝑢𝐿
1000 𝑢𝐿
= 27. 26 μ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢t Editorial Addison-Wesley Iberoamericana,
S. A. 5a Ed. pp. 671-675.
Cálculo de UAT: - Recuperado el 14 de mayo de 2023 en:
μ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢 𝑟𝑒𝑎𝑙 https://www.fmvz.unam.mx/fmvz/p_estudi
𝑈𝐴𝑇 = (𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒 ℎí𝑔𝑎𝑑𝑜)(𝑡𝑖𝑒𝑚𝑝𝑜 𝑑𝑒 𝑟𝑒𝑎𝑐𝑐𝑖ó𝑛) os/apuntes_bioquimica/Unidad_10.pdf
- Recuperado el 14 de mayo de 2023 en:
31 g —-- 600 mL x=0.0516 g http://iqb.fcien.edu.uy/pdf/aminoacidos%2
x —-- 1mL (hígado en tubo) 0I%202004.pdf
0.0516 g —--- 1000 μL x=0.003096 g de

hígado
x —-------- 60 μL (en papel)
27.55 μ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢 − 27.26 μ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢

𝑈𝐴𝑇 = (0.003096 𝑔)(1 ℎ𝑟)
𝑈𝐴𝑇 = 93. 66 μ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢/𝑔/ℎ
Discusión
Se sintetizó el ácido glutámico a partir de la
transaminasa, dicha enzima se encarga de
transferir el grupo amino de la alanina a un
α-cetoglutarato y así obtener un glutamato y
piruvato.
Se realizó el reconocimiento por medio de
cromatografía en papel, donde se colocó en
una línea recta en distintos puntos separados
a distancias iguales diferentes
concentraciones de Glu. Al revelar el
cromatograma en solución de ninhidrina al
0.05% en etanol, las manchas se tiñeron de
violeta, demostrando la presencia del
glutamato como resultado se obtuvo un

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Glu 5 7.8 0.226 Gráfico 1: Curva tipo del ácido glutámico

Glu 10 7.5 0.217 Cálculos

0.0516 g —--- 1000 μL x=0.003096 g de

27.55 μ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢 − 27.26 μ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐺𝑙𝑢

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