UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NAYARIT

UNIDAD ACADÉMICA DE MEDICINA

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA, PARASITOLOGÍA Y MICOLOGÍA

PRÁCTICA NO. 2

“TOMA DE MUESTRA DE EXUDADO FARÍNGEO”

INTEGRANTES:
● Gutiérrez Pimentel Marco Antonio
● Hernández Díaz Sophia Stefany
● Inda Fletes Ana Karen
● Lerma Martínez Arturo Tadeo
● Hernández Martínez Edgar Arturo

EQUIPO 3, PARTE 1
2 “F”

FECHA DE REALIZACIÓN:
● 10 DE MARZO DEL 2023
DIAGRAMA DE FLUJO
INTRODUCCIÓN

El diagnóstico microbiológico que puede realizar el laboratorio depende de la calidad

de las muestras recibidas. Las muestras realizadas, recolectadas o transportadas
incorrectamente introducirán errores potenciales en la recuperación de patógenos y
pueden conducir a un diagnóstico erróneo o incluso a un tratamiento inadecuado del
paciente.

Los errores en cualquier etapa pueden generar pérdidas financieras y temporales,

mal uso de los recursos y, lo que es más importante, errores de diagnóstico que
afectan significativamente el pronóstico y la seguridad de la atención del paciente.

En este reporte nuestro objetivo fue realizar estas pruebas con las respectivas
muestra de cada uno de los compañeros y así poder observarlas con el microscopio
respecto a la preparación de especímenes microbiológicos, describa el equipo
requerido para la recolección de especímenes, las precauciones y las
recomendaciones especiales para la recolección y el transporte adecuados para
garantizar la viabilidad de los especímenes.

Así tendremos la experiencia necesaria que debemos de tener como parte del
personal del área de la salud, el cual requiere conocimientos e información precisa
para realizar el procedimiento en condiciones óptimas, capacitado adecuadamente
para mantener la muestra en términos de tiempo y características hasta su entrega
al área de análisis.
RESULTADOS
Sophia

tipo de célula 10 campos a 100X

células epiteliales (número de células por de 1 a 5 células con sus respectivos

campo) núcleos por campo microscópico

Bacterias (escasa, moderada o abundante) moderada

Tadeo

tipo de célula 10 campos a 100X

células epiteliales (número de células por 3 células sanas de la mucosa bucal, donde
campo) se distinguen 3 núcleos

Bacterias (escasa, moderada o abundante) nulas y/o escasas

 ANA

tipo de célula 10 campos a 100X

células epiteliales (número de células por 3 a 4 células bucales con sus respectivos
campo) núcleos por campo microscópico

Bacterias (escasa, moderada o abundante) escasas

EDGAR

tipo de célula 10 campos a 100X

células epiteliales (número de células por 2 células sanas con sus núcleos por campo
campo) microscópico

Bacterias (escasa, moderada o abundante) escasas

MARCO
N/A. No se obtuvo conclusión ya que se desperdicio la muestra
RESUMEN

HEMOCULTIVO:
Sangre obtenida a través de punción periférica
Material necesario
Reunir todo el material necesario antes de iniciar el procedimiento:
 Frascos de hemocultivos (aerobio y anaerobio)
 Compresor de goma
 Jeringas y agujas de punción IV
 Gasas estériles
 Guantes estériles y no estériles
 Mascarilla
 Paño estéril
 Alcohol isopropílico al 70%
 Clorhexidina alcohólica (clorhexidina al 2% en alcohol isopropílico al 70%)

Instrucciones para la toma de hemocultivos

1.1. Preparación del personal: Realizar lavado de manos con agua y jabón.
Utilizar guantes limpios.
No es necesario que sean estériles.
1.2. Preparación de los frascos:
1. Levantar la lengüeta de los frascos y desinfectar los tapones de goma con alcohol
etílico o isopropílico al 70%, o clorhexidina alcohólica.
Dejar secar al menos 30 seg
Eliminar cualquier gota de desinfectante residual del tapón con una gasa estéril
antes de la inoculación de la sangre si fuese necesario.
1.3. Preparación de la piel del paciente:
1. Aplicar un torniquete.
Localizar por palpación la vena que se va a puncionar.
Debe utilizarse una vena distinta para cada extracción.
Cuando no haya venas accesibles puede realizarse la extracción de sangre arterial.
2. Aplicar frotando clorhexidina alcohólica y dejar secar al menos 30 seg,
respetando el tiempo de secado.
Con una técnica aséptica correcta, el número de hemocultivos contaminados
obtenidos por venopunción no debe exceder del 3%.
1.4. Extracción de la sangre:
1. Quitar los guantes, higienizar las manos con solución alcohólica y vestir los
guantes estériles. Crear campo estéril.
2. Extraer la sangre de forma aséptica sin tocar el campo desinfectado, evitando
hablar y toser sobre el mismo o utilizando mascarillas.
3. Usar una aguja para cada venopunción.
4. No debe ponerse material no estéril sobre la aguja al sacarla de la vena. Utilizar
para ello una gasa estéril.
1.5. Inoculación de los frascos y transporte:
1. Inocular los frascos rápidamente para evitar la coagulación de la sangre, en
posición vertical, comenzando por el frasco anaerobio.
2. Invertir varias veces los frascos para que la sangre se mezcle con el medio de
cultivo.
3. Identificar debidamente los frascos y enviarlos lo antes posible al laboratorio
(máximo 18 h en casos justificados). Hasta su envío, mantener los hemocultivos a
temperatura ambiente. Nunca deben refrigerarse. No cubrir los códigos de barras de
los frascos.
1.6. Número de hemocultivos y volumen de sangre.
 Un hemocultivo se define como un volumen de sangre obtenido
asépticamente, preferiblemente mediante venopunción, inoculado en una o
más botellas con caldo de cultivo.
 En general se extraerán 2 hemocultivos el mismo día con un intervalo de 30
minutos a dos horas, o simultáneamente de lugares de venopunción
diferentes, lo antes posible tras la aparición de los síntomas y antes de iniciar
tratamiento antibiótico.
 En cada hemocultivo o extracción se inoculan dos frascos: uno aerobio
(tapón verde) y otro anaerobio (tapón naranja).
 Volumen de sangre: en cada hemocultivo se extraerán en general de 10 a 20
ml de sangre (5 a 10 ml por frasco).
 En endocarditis, otras infecciones intravasculares y otros casos de
bacteriemia continua, pueden extraerse un máximo de 3 hemocultivos
repartidos en 24 h con el volumen máximo.
1.7. Método de “Diferencia de tiempos para positividad” (DTP)
 Los hemocultivos obtenidos a través de catéter se contaminan más que los
obtenidos por venopunción a través de piel correctamente desinfectada.
Este método de obtención de hemocultivos debería utilizarse sólo en caso de
sospecha de bacteriemia relacionada con el catéter para aplicación en el laboratorio
del método de DTP.
Las condiciones de aplicación del método son las siguientes: Se extraerán al menos
dos hemocultivos: uno a través del catéter (uno por cada luz) y otro de sangre
periférica mediante venopunción. Los hemocultivos deben ser extraídos al MISMO
TIEMPO, inoculados con el MISMO VOLUMEN de sangre y enviados
INMEDIATAMENTE al laboratorio, donde serán incubados al mismo tiempo.
El volante de petición debe reflejar de forma clara el modo de obtención de cada
muestra (catéter o sangre periférica, tipo de luz).
Observaciones:
 Indicar claramente en la petición la sospecha de Brucella o endocarditis.
 Contactar con el laboratorio de Microbiología ante la sospecha de bacteriemia
por microorganismos “inusuales” o de “difícil crecimiento” (1)

ORINA
Orina de micción espontánea
Material necesario
 Frasco recolector estéril de boca ancha de tapa rosca.
 Equipo de higiene: jabón, gasas.

Obtención de la muestra
Instruir al paciente para que inicie la micción, desechar la primera parte de la orina,
introducir el frasco colector, recoger la parte media de la orina sin detener el flujo
urinario (5-10 cc) y terminar de eliminar en el sanitario o pato. Tapar el frasco sin
contaminar la muestra.

Transporte
Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de dos
horas y a temperatura ambiente. (1)

Heces liquidas y blandas

Material necesario
 Recipiente de boca ancha para recoger las heces, tipo orinal, bacinilla o
cuña. No es necesario que esté estéril, sólo es preciso que esté limpio. No
contendrá restos de jabones, detergentes, desinfectantes o iones metálicos.
 Tubo fecal swab para conservar y trasportar la muestra.
 Torunda incluida en el tubo fecal swab para trasvasar la muestra desde el
recipiente de recogida.

Obtención de la muestra
 Se toma una porción del recipiente donde hayan sido emitidas y se
transfieren al tubo fecal swab para el envío al laboratorio. Se deben
seleccionar aquellas zonas donde haya sangre, moco o pus.
 No son válidas las muestras contaminadas con orina. No debe utilizarse para
la recogida papel higiénico porque suele contener sales de bario que inhiben
algunas bacterias enteropatógenas.
Volumen mínimo
 Heces formadas o pastosas: para cultivo 1-2 g; para detección de
rotavirus/adenovirus añadir de 2 a 4 g más (muestras del tamaño de una
nuez son adecuadas pues permiten realizar todos los estudios necesarios).
 Heces líquidas: entre 5 y 10 ml.
NOTA: NO se procesarán heces duras y secas que no se adapten a la forma del
contenedor.

Transporte y conservación
 Para coprocultivo, detección de virus y el estudio de C. difficile toxigénico:
enviar la muestra en el tubo fecal swab con un volante que pude incluir esas
peticiones. Si no se va a procesar en 1-2 horas se debe mantener la muestra
refrigerada hasta un máximo de 24 horas. 15
 Para la determinación de antígeno de Helicobacter pylori: enviar la muestra
en un fecal swab con un volante que incluya esa única petición. La muestra
se puede mantener hasta 48 horas en refrigeración.
 Para el estudio de parásitos: se requiere una sola muestra remitida en el tubo
fecal swab y acompañada de un volante con únicamente esa petición. (No se
admitirán volantes con peticiones asociadas de cualquiera de los dos
epígrafes anteriores). La muestra se puede mantener hasta 48 horas en
refrigeración.

Observaciones
 Las muestras para coprocultivo deberán tomarse preferiblemente antes de la
administración de antimicrobianos o agentes antidiarreicos.
 Indicar la orientación diagnóstica, así como los datos de edad, estado
inmunitario u otros datos de interés del paciente.
 El estudio de virus en heces sólo se realiza de forma habitual en niños
menores de 5 años.
 La determinación de Clostridium difficile se realiza sólo en la primera muestra
de heces no formes con sospecha diagnóstica de infección y una vez resuelta
la diarrea si hubiera recurrencia. (1)

ESPUTO
Moco u otra materia que se expulsa desde los pulmones al toser
Material necesario
● Frasco estéril de boca ancha y cierre hermético.
● Suero fisiológico estéril al 3-10% y nebulizador.

Obtención de la muestra
 Para disminuir la contaminación superficial de la muestra con la microbiota
que coloniza el tracto respiratorio superior y la cavidad oral, se han
recomendado algunas medidas a tomar, como la extracción de la dentadura
 postiza, si se utiliza, y el enjuague de la boca con agua o solución salina
estériles, antes de la recogida de la muestra.
 El esputo obtenido por expectoración espontánea debe ser el resultado de un
golpe de tos profunda y contener secreciones purulentas representativas del
tracto respiratorio inferior. Se desecharán los esputos compuestos por saliva
o secreciones postnasales
 El esputo inducido, obtenido por la inhalación de NaCl al 3% mediante un
nebulizador ultrasónico, tiene su principal indicación para la detección de
Pneumocystis jiroveci y Mycobacterium tuberculosis. Para el resto de los
microorganismos su utilidad es dudosa.

Número de muestras y/o volumen

 Para el cultivo bacteriano rutinario es suficiente una muestra.
 Volumen > 1ml.

Transporte y conservación
 A temperatura ambiente < 2 horas.
 Refrigerado a 4ºC < 24 horas. (1)

Exudado vaginal
MATERIAL NECESARIO:
● Camilla ginecológica.
● Espéculo estéril.
● Torunda con medio de transporte líquido Amies (eSwab tapón rosa)

OBTENCIÓN DE MUESTRA:
● Con la paciente en posición ginecológica se introducirá un espéculo “sin
lubricante” (si es necesario lubricar utilizar agua templada).
● Recoger la muestra, bajo visión directa, con una torunda, de la zona con
mayor exudado o, en su defecto, del fondo del saco vaginal posterior.

NÚMERO DE MUESTRAS
● Se obtendrá una torunda, destinada al estudio microscópico y cultivo.

TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN
● Torundas con medio de transporte: < 24 horas a temperatura ambiente.

OBSERVACIONES
● Aunque ocasionalmente puede aislarse Neisseria gonorrhoeae de muestras
vaginales, ésta no es la localización habitual de dicha infección.
● Cuando se sospeche infección por Neisseria gonorrhoeae y Chlamydia
trachomatis, deberá enviarse muestra endocervical.
 ● Para completar el diagnóstico de vaginosis, si la toma no se realiza en
Microbiología, es importante realizar en el momento de la misma: la
determinación del pH vaginal, la producción de aminas volátiles por la adición
de KOH al 10% y observar las características del flujo. Todos estos datos se
consignarán en el volante de petición.
● No deben utilizarse en los días previos a la recogida de la muestra soluciones
antisépticas, óvulos ni pomadas. (1)

Exudados Endocervicales
MATERIAL NECESARIO
● Camilla ginecológica.
● Espéculo estéril.
● Torundas secas sin medio de transporte (para limpieza de endocérvix).
● Torundas con medio de transporte líquido Amies (eSwab tapón rosa).
● Para detección de Chlamydia trachomatis emplear torunda seca o con medio
de transporte.

OBTENCIÓN DE MUESTRA
● Con la paciente en posición ginecológica se introducirá un espéculo “sin
lubricante” (si es necesario lubricar utilizar agua templada).
● Limpiar el orificio cervical de secreciones vaginales, con una torunda seca y
descartarla.
● Bajo visión directa se imprimirá cuidadosamente el cérvix con las palas del
espéculo y se introducirá una torunda 2-3 cm en el canal endocervical con un
suave movimiento de rotación durante 5-10 seg.
● Repetir la operación con una segunda torunda.

NÚMERO DE MUESTRAS
● Se obtendrán dos torundas, una para examen microscópico y cultivo y otra
para biología molecular.

TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN
● Torundas con medio de transporte: < 24 horas a temperatura ambiente. No
se garantiza la viabilidad de Neisseria gonorrhoeae transcurridas 6-8 horas.

OBSERVACIONES
● Debe evitarse el uso de torundas de algodón ya que contienen ácidos grasos
insaturados que pueden inhibir el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae. (1)
Exudado Uretral

Material necesario
 Torundas uretrales finas con medio de transporte líquido tipo Amies (eSwab
tapón naranja) y gasas estériles.

Obtención de la muestra
 Cuando exista exudado franco puede recogerse con una torunda. El exudado
puede estimularse exprimiendo la uretra. Cuando no se obtenga exudado se
introducirá una torunda suavemente hasta penetrar unos 2-4 cm dentro de la
uretra y dejar al menos 2 segundos para facilitar la absorción.

Número de muestras y/o volumen

 Se obtendrán torunda destinada al estudio microscópico y cultivo y a la
biología molecular.

Transporte y conservación
 Lo más aconsejable es su envío en <15 minutos a temperatura ambiente.
 Torundas con medio de transporte: < 24 horas a temperatura ambiente. No
se garantiza la viabilidad de Neisseria gonorrhoeae transcurridas 6-8 horas.

Observaciones
 La muestra ha de recogerse preferentemente antes de la primera micción de
la mañana, si no es posible, se deberá esperar al menos 2 horas tras la
última micción para recogerla. (1)

Cuestionario

1. Para obtener una adecuada muestra del coprocultivo ¿Qué se debe evitar?
Fundamenta tu respuesta.
● No mezclarse con orina, agua o papel higiénico ya que en el laboratorio un
técnico coloca una parte de la muestra en un recipiente especial. Entonces,
este recipiente se llena con un gel que estimula la multiplicación de bacterias
u otros microorganismos y si esta muestra va mezclada con algo más saldrán
bacterias las cuales afectarán el diagnóstico. (2)

2. Antes de realizar la extracción de muestra de exudado faríngeo ¿Qué NO debe

hacer el paciente?
● El paciente no debe enjuagarse la boca, no se debe lavar los dientes y no
tiene que tiene que haber ingerido ningún alimento antes de la toma de
muestra
3. ¿Por qué se considera importante conocer la biota habitual del organismo en el
momento de realizar estudios microbiológicos?
● Se debe de tener en cuenta que la piel y todas las superficies de la mucosa
están colonizadas por biota habitual. Sin embargo, con frecuencia estas
superficies pueden adquirir una flora transitoria o, incluso, ser colonizadas por
patógenos potenciales provenientes del medio ambiente. A consecuencia de
esto se deben de seguir ciertos procedimientos especiales para distinguir
cuales son los verdaderos microorganismos que están implicados en el
proceso infeccioso y cuáles son los de la biota habitual para saber con qué
fármacos combatirlos. (3)

4. ¿Existen circunstancias en las que la biota habitual se convierte en patógena?

SI/NO justifique su respuesta.
● Si, las bacterias de la microbiota de ocupación son en general inocuas
cuando están sobre las mucosas, pero algunas pueden convertirse en
patógenas, si penetran al medio interno o si se hacen muy abundantes, y
provocar infecciones endógenas. (4)

5. ¿En qué circunstancias se requiere realizar el hemocultivo y cuál es la

probabilidad de éxito de obtener un hemocultivo positivo?
● El hemocultivo es el estudio de primera línea en pacientes con sospecha de
infección, el objetivo principal de los hemocultivos consiste en confirmar
bacteriemia, además permite no sólo establecer la causa infecciosa de un
episodio de bacteriemia, sino que con base en los resultados, hacer
modificaciones en el tratamiento antimicrobiano establecido y otorga un valor
pronóstico. Los hemocultivos son positivos en únicamente una tercera parte
de los casos. (5)

6. ¿Cuál es el mejor momento para tomar hemocultivo? Fundamenta tu respuesta.

● Idealmente los Hemocultivos de sangre deben ser obtenidos antes de la
administración de antibióticos.
● Si el tratamiento antibiótico empírico es una emergencia, el cultivo de sangre
puede aún ser efectuado inmediatamente después de la administración de
antibióticos.
● Si existe indicación de hemocultivo en un paciente recibiendo antibióticos, el
hemocultivo debe realizarse inmediatamente antes de la próxima dosis de
antibióticos cuando los niveles de antibióticos son mínimos. (6)
BIBLIOGRAFÍA

1.- Edición 6o. LABORATORIO MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA [Internet].

Chospab.es. [citado el 19 de marzo de 2023]. Disponible en:
https://www.chospab.es/area_medica/microbiologia/docTomaMuestras/1_Manual_re
cogida_transporte_conservacion_muestras_microbiologia.pdf
2.- Coprocultivo [Internet]. Medlineplus.gov. [citado el 20 de marzo de 2023].
Disponible en: https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003758.htm
3.- Ula.ve. [citado el 20 de marzo de 2023]. Disponible en:
http://www.serbi.ula.ve/serbiula/librose/pva/Libros%20de%20PVA%20para%20libro
%20digital/Manual%20de%20Bacteriologia.pdf
4.- Heredia B, Rosario M. Microbiota autóctona. Farm Prof (Internet) [Internet]. 2017
[citado el 20 de marzo de 2023];31(2):17–21. Disponible en:
https://www.elsevier.es/es-revista-farmacia-profesional-3-articulo-microbiota-
autoctona-X0213932417608739
5.- Pardinas-Llergo MJ, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F,
Díaz-Greene EJ. Probabilidad de éxito de obtener un hemocultivo positivo. Med.
interna Méx. [revista en la Internet]. 2017 Feb [citado 2023 Mar 20] ; 33( 1 ): 28-
40.Disponible en: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0186-
48662017000100028&lng=es.
6.- Gob.mx. [citado el 20 de marzo de 2023]. Disponible en:
https://www.pediatria.gob.mx/archivos/burbuja/5_Recomendaciones_de_toma_de_heocultiv
os.pdf