Recuento de Reticulocitos

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Universidad veracruzana

Facultad de Química Farmacéutica Biológica


Laboratorio de Hematología

Práctica No. 6
Recuento De Reticulocitos.

FUNDAMENTO:
El RNA residual de los hematíes inmaduros (reticulocitos) es precipitado y
teñido con una tinción supravital de azul de cresil brillante, lo cual permite
identificarlos. Se preparan las extensiones y se cuentan las células que contienen
precipitados (reticulares) teñidos. Los resultados se dan en porcentajes de los
reticulocitos examinados y en cifras absolutas por mm3.

PREGUNTAS GUIA:
1. ¿Qué son los reticulocitos y en donde se producen?
2. Describe sus características morfológicas
3. ¿Qué utilidad tiene el efectuar en un paciente el recuento de
reticulocitos?
4. ¿Qué nos indica encontrar valores elevados o disminuidos de
reticulocitos en la sangre?
5. ¿Por qué debe reportarse tanto el valor relativo como el absoluto en este
recuento?

MATERIAL:
 Material necesario para la extracción de sangre
 3 Tubos de ensaye
 1 Pipeta Pasteur con bulbo de hule
 Portaobjetos
 Puente de tinción
 1 Pipeta de Thoma para glóbulos rojos con boquilla
 1 Cámara de Neubauer

REACTIVOS:
 E.D.T.A. al 10%
 Colorante de Wright
 Solución buffer de fosfatos
 Solución de Gower
 Solución colorante de azul de cresil brillante, la cual se prepara de la
siguiente manera:
Oxalato de Sodio . . . . . . . 1.3 g
Azul de cresil brillante. . . . . 1.0 g
Agua destilada . . . . . . . . 100 ml
Disolver, dejar en reposo unos días y filtrar. Conservar en frasco de vidrio color
ámbar.

EQUIPO:
Universidad veracruzana
Facultad de Química Farmacéutica Biológica
Laboratorio de Hematología

 Baño de agua a 37º C


 Microscopio
 Agitador de pipetas

TECNICA:
1. Extraer sangre venosa de la forma acostumbrada y mezclarla con
anticoagulante.

2. Colocar 3 gotas de la solución colorante de azul de cresil brillante en un tubo de


ensaye, añadir 3 gotas de sangre y mezclar cuidadosamente. Dejar en reposo en
baño de agua a 37ºC durante 15 minutos.

3. Transcurrido el tiempo indicado, mezclar bien la suspensión, preparar 4 frotis


sobre portaobjetos y dejarlos secar al aire.

4. Cuando los frotis estén secos proceder a la tinción de fondo con colorante de
Wright en dos de ellos, los otros dos no teñirlos.

5. Observar los frotis con objetivo de inmersión y anotar las diferencias


encontradas entre los frotis con y sin tinción de Wright.

6. Elegir el mejor frotis y contar en cada campo el número de reticulocitos (ver


esquema) y el número de eritrocitos hasta completar 1,000 células. Expresarlo
como porcentaje de células reticuladas (valor relativo en %).

7. Efectuar un recuento de eritrocitos por mm3 y calcular el número de reticulocitos


por mm3 (valor absoluto) de acuerdo a la siguiente fórmula:

T = No. de reticulocitos por mm3


N = No. de reticulocitos por 1000 eritrocitos
E = No. de eritrocitos por mm3
Universidad veracruzana
Facultad de Química Farmacéutica Biológica
Laboratorio de Hematología

VALORES DE REFERENCIA:
Relativo . . . . . . . . . 0.5 a 1.5 %
Absoluto . . . . . . . . . 24,000 a 84,000 por mm 3

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