TRABAJO 1

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GUIA PAE (10-11)

➢ RESULTADOS

AGAR MACCONKEY AGAR MANITOL SALADO

Bacteria: Escherichia coli Bacteria: Staphylococcus aureos


Positivo: Fermentadora de Manitol
Fermentadora de lactosa

MEDIO TSI
Bacteria: Escherichia coli

Fermentación de A/A
carbohidratos
Sulfuro de Negativo
hidrogeno
Presencia de gas Positivo

➢ CONCLUSIONES

• A través de la practica realizada se determinó que el cultivo bacteriano en diferentes hidratos de


carbono proporcionó valiosa información sobre el metabolismo y la nutrición de las bacterias
estudiadas. A través de la observación del crecimiento en medios específicos, pudimos obtener
una visión más clara de las preferencias metabólicas y las capacidades nutricionales de las
bacterias.

• Mediante la practica realizada se determinó que la bacteria Staphylococcus aureus en el medio


MSA utiliza el hidrato de carbono presente en el medio que es el manitol para su crecimiento.
Estos ácidos reducen el pH del medio, el cual determino un cambio en el color del indicador de
pH presente en el medio MSA, permitiendo la observación del cambio de color del rojo fenol de
color rojo a amarillo debido a la fermentación del manitol.
• Finalmente, en la interpretación del medio TSI se observó que la bacteria Escherichia coli
presenta una reacción de fermentación positiva para los hidratos de carbono permitiendo la
observación de la parte superior e inferior del medio de un color amarillo, así como también la
producción de gas donde se determinó la presencia de burbujas y una ausencia negativa en la
producción de sulfuro de hidrógeno.

➢ RECOMENDACIONES

✓ En el proceso de realizar la siembra de la bacteria es recomendable tomar una leve cantidad del
inoculo para evitar que los microrganismos se encuentren de manera abundante y sobrecargada en
el medio.
✓ Se recomienda guardar y mantener en todo momento todas las medidas de bioseguridad debido a
que están manipulando bacterias.
✓ Evitar la contaminación de los medios de cultivo al momento de realizar la respectiva siembra de
los microrganismos.

➢ CUESTIONARIO
1) ¿Cuál es la composición del medio de cultivo TSI y su indicador de pH?

En la composición del medio de cultivo TSI se encuentran:

• El extracto de carne y la pluripeptona: Los cuales aportan los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano.
• La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fermentables.
• El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico.
• El sulfato de hierro y amonio es la fuente de iones Fe3+, estos se combinan con el ácido
sulfhídrico y dan producto al sulfuro de hierro, proporcionándolo de color negro.
• El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
• El agar es el agente solidificante. (1)

2) ¿Cuál es la composición del medio de cultivo Mac Conkey y su indicador de pH?


• Peptona de carne
• Peptona de gelatina.
• Lactosa
• Tripteína
• Mezcla de sales biliares Nº3
• Cloruro de sodio
• Rojo neutro: Indicador de pH
• Cristal violeta
• Agar

3) ¿Cuál es la composición del medio de cultivo MS y su indicador de pH?

• Extracto de carne
• Peptona de carne
• Tripteína
• Manitol
• Cloruro de sodio
• Rojo de fenol: es el indicador de pH
• Agar
• pH final: 7.4 ± 0.2
4) ¿Durante cuánto tiempo y a que temperatura se debe incubar las bacterias que tienen
repercusión clínica en el hombre? Explique y fundamente su respuesta.

La incubación de bacterias que tienen repercusión clínica en el hombre puede variar dependiendo del
tipo específico de bacterias que estemos considerando por lo general, las placas de cultivo se incuban
durante 24 a 48 horas para muchas bacterias, pero algunas cepas pueden requerir un tiempo más
largo.

Los microorganismos tienen un margen de temperaturas en el cual pueden crecer. A esto se le


denomina temperaturas cardinales en el cual se establecen los valores máximos, mínimos y óptimos
de crecimiento de acuerdo con la función del proceso de la división celular y la temperatura de
incubación de tal manera se puede clasificar a las bacterias, de acuerdo con este margen de
temperatura:

Hipertermófilos: Temperatura óptima se encuentra por encima de los 80ºC. Bastantes de ellos son
arqueas.

Termófilos: Temperatura óptima entre 45-70ºC. Por lo general son microorganismos de vida libre

Mesófilos: Temperatura óptima esta entre los 25-45ºC. Incluye microorganismos patógenos y
comensales del hombre y animales de sangre caliente y algunos de vida libre.

Psicótropos: La temperatura óptima de los microorganismos de este grupo se encuentra por debajo de
los 25 – 30°C incluye microorganismos de vida libre.

Psicrófilos: Su temperatura óptima de desarrollo esta entre los 12 – 15°C

5) ¿Cuál es el hidrato de carbono presente en el medio MSA y como se observa la reacción si el


microorganismo utiliza este como fuente de carbono?
El hidrato de carbono presente en el medio de manitol salado es el manitol. Cuando el
microorganismo (Staphylococcus aureus) fermenta el manitol, produce ácido láctico como producto
de fermentación. Estos ácidos reducen el pH del medio, lo que lleva a un cambio en el color del
indicador de pH presente en el MSA. Este indicador suele ser el rojo de fenol. En condiciones ácidas
(debido a la fermentación del manitol), el rojo de fenol cambia de color rojo a amarillo.

6) ¿Cuál es el hidrato de carbono presente en el medio Mac Conkey y como se observa la


reacción si el microorganismo utiliza este como fuente de carbono?

La lactosa es el hidrato de carbono presente en el medio Mac Conkey cuando las bacterias
fermentan la lactosa en el medio MacConkey, producen ácidos que acidifican el entorno. El medio
también contiene un indicador de pH, generalmente el rojo neutro el cual cambia de color en función
del pH del medio. Las colonias de bacterias que fermentan la lactosa aparecen rosadas o rojas debido
a este cambio de color, indicando la producción de ácidos durante la fermentación.

7) ¿Cuáles son los hidratos de carbono presente en el medio TSI y como se observan las
reacciones si el microorganismo los utiliza como fuente de carbono?

La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono presente en el medio TSI. Las bacterias
que son capaces de fermentar estos azúcares pueden producir ácidos y gases. La presencia de ácidos
reduce el pH del medio, y la producción de gases puede observarse como la formación de burbujas o
grietas en el medio. Además, algunas bacterias pueden producir sulfuro de hidrógeno (H2S), lo que
puede reaccionar con hierro en el medio para formar un precipitado negro de sulfuro de hierro (FeS).

Las interpretaciones en el medio TSI se realizan a través de la observación del color del medio:

Amarillo: Indica que se ha producido fermentación ácida debido a la utilización de azúcares.

Rojo: Indica que no se ha producido fermentación ácida.

8) ¿Cuándo una bacteria crece en el medio Mac Conkey, pero no utiliza el hidrato de carbono
presente, como se observa el crecimiento? Explique y fundamente su respuesta.

Si la bacteria no utiliza la lactosa presente en el medio como fuente de carbono, no se producirá la


fermentación de la lactosa. Esto significa que no habrá producción de ácidos durante la fermentación
de la lactosa por ende en términos de la observación diferencial, el indicador de pH en el medio de
cultivo Mac Conkey el rojo neutro no cambia de color alrededor de las colonias. En el caso de
bacterias que no fermentan la lactosa, producen colonias incoloras por lo cual el medio permanece en
su color original, que puede ser transparente o ligeramente rosado.

9) Si una bacteria no pude utilizar el azúcar como fuente de energía y carbono, ¿Qué otro
elemento es el utilizado?

Si una bacteria no puede utilizar azúcares como fuente de energía y carbono, puede recurrir a otras
fuentes de carbono y energía disponibles en su entorno. Algunas bacterias son capaces de utilizar
compuestos orgánicos diferentes a los azúcares, mientras que otras pueden depender de fuentes
inorgánicas como, por ejemplo: Algunas bacterias pueden utilizar compuestos orgánicos más
simples, como ácidos orgánicos, alcoholes, aminoácidos o incluso productos de degradación de otros
organismos.

Las bacterias autótrofas pueden obtener carbono de compuestos inorgánicos, como el dióxido de
carbono, así como también algunas pueden utilizar fuentes inorgánicas de energía, como la oxidación
de compuestos nitrogenados, azufre o hierro. Las bacterias son metabólicamente diversas y pueden
adaptarse a una amplia variedad de fuentes de carbono y energía.

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