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    C514 TD Serie 4 2020-2021-1

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    Année Universitaire 2020/2021

    Département de chimie

    Département de chimie
    Module : Méthodes de séparation (C514)
    TRAVAUX DIRIGES, Serie 4

    Exercice 1
    On effectue la chromatographie sur couche mince (CCM) de l’huile essentielle de peaux d’oranges.
    On réalise les dépôts suivants :
    x Dépôt 1 : Limonène
    x Dépôt 2 : Linalol
    x Dépôt 3 : Citral
    x Dépôt 4 : huile essentielle de peaux d‘oranges

    a) Quels sont les constituants de peaux d’oranges ? Justifier votre réponse.


    b) Calculer le rapport frontal de chaque espèce chimique.

    Exercice 2
    on réalise la chromatographie d'un boisson de fraise sur couche mince . On pose une goutte de ce
    boisson sur la ligne de dépot et on pose quelques gouttes des constituent suivants :

    Constituant Rapport frontal


    Bleu patenté E 131 0,4
    Colorant vert: tartrazine E102 0,9
    Azorubine E 122 0,75
    Colorant rouge de cochenille :E124 0,6

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    Année Universitaire 2020/2021
    Département de chimie

    Département de chimie
    Module : Méthodes de séparation (C514)
    TRAVAUX DIRIGES, Serie 4

    On obtient le chromatogramme le suivant:

    1) On a oublié de marquer la solution correspondant à chaqu'une des gouttes A , B , C , D et E. En


    utilisant les données identifier chacune des espèces A, B , C , D et E en justifiant votre réponse.

    2) Quels sont les colorants qui se trouvent dans le boisson de fraise?

    Exercice 3
    On détermine les temps de rétention (tr) au cours d'une chromatographie sur Sephadex, des
    protéines suivantes dont on connaît la masse moléculaire (MM) (Le débit de la colonne est de
    5 ml/min) :
    Composé MM tr (min)
    Aldolase 145000 10,4
    Lactate déshydrogénase 135000 11,4
    Phosphatase alcaline 80000 18,4
    Ovalbumine 45000 26,2
    Lactoglobuline 37100 28,6

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    Année Universitaire 2020/2021
    Département de chimie

    Département de chimie
    Module : Méthodes de séparation (C514)
    TRAVAUX DIRIGES, Serie 4

    a) Calculer les volumes d'élution (Ve) correspondants. Porter le log de MM en fonction de Ve -


    Que remarquez-vous ?
    b) Pour la glucokinase, tr = 21 min. Déterminer sa masse moléculaire à l'aide du graphique
    précédent. Existe-t-il une autre méthode pour déterminer la MM ?

    Exercice 4
    On veut séparer 3 acides-aminés : l'acide L-glutamique, la L-leucine et la L-lysine par
    chromatographie sur une résine polystyrénique substituée par des groupements sulfonate (-SO3-).
    Les pH isoélectriques de l'acide L-glutamique, de la L-leucine et de la L-lysine sont
    respectivement : 3,22 ; 5,98 ; 9,74, à 25 °C.

    On dépose ces 3 acides aminés sur la colonne, à pH 2, puis on élue en amenant progressivement le
    pH à 7.

    Quels acides aminés sont élués et dans quel ordre ? (On considérera que les interactions acide aminé-
    résine sont uniquement d'ordre électrostatiques).

    Exercice 5

    Le coefficient de partage de l'iode (I2) entre les deux solvants non-miscibles : tétrachlorométhane et
    eau, est égal à 100 à 25 °C. À 10 ml de solution aqueuse d'iode à 10 g/l, on ajoute 10 ml de
    tétrachlorométhane (CCl4).

    Donnée : I2 est plus soluble dans le tétrachlorométhane que dans l'eau.

    Déterminer la concentration en iode dans le tétrachlorométhane et dans l'eau, après agitation et


    décantation.

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