Metodo de faust

El examen coproparasitos copico (CPS) es un conjunto de tcnicas diagnsticas que

constituyen la indicacin para la identificacin de la mayora de las enteroparasitosis
causadas por protozoarios ohelmintos. Su eficacia y sensibilidad para establecer un
diagnstico correcto dependen de la adecuada indicacin y preparacin de la muestra, los
datos clnicos y antecedentes de inters que seanaportados al laboratorio y de su correcta
y completa ejecucin con examen directo microscpico.

La tcnica de Faust, hace una buena concentracin de quistes, huevos y larvas; es la
tcnica preferida porla generalidad de los laboratorios. Las formas parasitarias son
encontradas con facilidad pues las preparaciones quedan con pocos artefactos. Los
elementos parasitarios son recuperados de la capasuperficial y los residuos se mantienen
en el fondo del tubo. Con estas tcnicas los preparados son ms limpios que los
obtenidos por sedimentacin.

MTODO DE CONCENTRACIN POR FLOTACION
FAUSTFUNDAMENTO: Se basa en que los quistes y/o huevos de los parsitos flotan en
La superficie por ser de menor densidad que el sulfato de zinc a 33,3%, cuya densidad es
1.180. Es til para la bsqueda dequistes y/o huevos de parsitos y excepcionalmente se
observan larvas. Se recomienda controlar la densidad del sulfato de zinc y usar agua
filtrada para el lavado previo de la muestra.
METODO:
A. Sehace una suspensin homognea con 1 g de materia fecal y 10 ml de agua.
B. Se filtra la suspensin a travs de la gasa colocada en el embudo, colectando el filtrado
directamente en el tubo.
C. Secentrifugan los tubos a 2000 rpm durante 1 min.

D. Se decanta el sobrenadante y se suspende el sedimento con agua. Se centrfuga
nuevamente, repitiendo la misma operacin hasta que el sobrenadante seobserve limpio.

E. Se decanta el ltimo sobrenadante, se suspende el sedimento y se agrega Sulfato de
Zinc 1.180 Baum y se centrfuga a 2000 rpm durante 1min.




El alumno aprender a realizar un mtodo por el cual le ser ms fcil encontrar
parsitos, y utilizara algunos objetos y sustancias que ya conoce y sabe manejar. A s que
de esta manera realizara el mtodo de RITCHIE el cual consistir en centrifugacin,
decantacin, mezclar con varias sustancias, y observar al microscopio.
FUNDAMENTO:
Este mtodo se basa en la concentracin de los quistes y huevos por sedimentacin
mediante la centrifugacin, se necesitaran de algunas sustancias como: ter,
formaldehido, y sol salina; que respectivamente nos ayudaran a encontrar los parsitos en
las heces.
Este mtodo (RITCHIE) nos proporciona una ventaja muy importante ya que no deforma a
los parsitos, y permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada
antes de ser examinada, esta tcnica nos resulta ms conveniente en casos de
tratamiento o de cierta frecuencia, ya que por el procedimiento que a continuacin se
realiza es ms probable encontrar alguna forma de vida parasitaria.

MATERIAL Y EQUIPO: SUSTANCIAS:
-centrifuga
-tubos de ensaye cnicos -sol. Salina isotnica
-gasa cortada en cuadros -sol. De formaldehido al 10%
-embudos de polietileno -ter
-vasos de precipitados de 50 ml. -heces fecales
-aplicadores de madera -yodo lugol
-pipetas Pasteur con bulbo
-portaobjetos
-cubreobjetos
-microscopio
METODO:
a) Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. De la materia fecal en
el vaso de precipitados, se aaden 10 ml de solucin salina y se homogeniza.
b) Se filtra la suspensin a travs de la gasa colocada en el embudo recogiendo el
filtrado en el tubo cnico.
c) Se centrifuga la suspensin durante 2 min. a 2000 r.p.m
d) Se decanta el sobrenadante y se resuspende el sedimento con la solucin salina,
centrifugando, decantando y resuspendiendo 2 veces ms
e) Al ltimo sedimento se agregan 5 ml. De sol. De formaldehido al 10%, se mezcla y
se deja reposar durante 10 min.
f) Se aaden despus 0.5 ml. De ter, se tapan los tubos y se agitan energticamente
durante 30 seg.

g) Se centrifuga durante 2 min. a 2000 r.p.m.

h) Despus de centrifugar se observan 4 capas ( aunque en nuestra muestra no se
observaron muy bien estas capas):
>ter en la superficial
>un tapn de restos fecales
>formaldehido
>sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.
i) se decanta el sobrenadante.
j) Se introduce la pipeta Pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del
sedimento y se coloca en el portaobjetos.
k) Se le aade una gota de lugol y se le coloca el cubreobjetos.

l) Se observa la preparacin en el microscopio con los objetivos 10x y 40x.

RESULTADOS:
Al observar al microscopio en el objetivo 10x se identificaron algunos quistes pero en el
objetivo 40x no se lograron observar mejor. Se compararon y el resultado fue:


Quistes de entamoeba histolytica
COMENTARIO:
Claro ese fue el resultado para m ya que es muy parecido y casi en el centro de la
primera imagen se puede observar un quiste con aproximadamente 2 o 3 ncleos dentro,
y en la segunda imagen hice mi comparacin es por eso que mi resultado es ese.
Conclusin:
Al hacer mi comparacin yo deduzco que es ENTAMOEBA HISTOLYTICA ya que en este
solo se encuentran quistes con 4 ncleos por mucho y en la muestra se observan 3; se
aprendi a realizar el mtodo y a identificar quistes y algunos parsitos.
FUENTE DE INFORMACION:
-texto redactado por Q.F.B. Amalia Briones Amador.
- no se sugiri alguna pg. De internet.

Datos:
Alumna: Rubi Joseline Castillo Jurez Grado y grupo: 3DM Especialidad:
Laboratorista clnico
Profe: Dr. Vicente Martnez Fragoso

TECNICA DE FAUST
MTODO DE CONCENTRACIN FLOTACIN DE FAUST
OBJETIVO
Buscar en las muestras biolgicas la presencia de los distintos parsitos para tener un
conocimiento ms amplio sobre ellos.
FUNDAMENTO:
Se conoce como tcnica de Faust, ya que fue l quien la diseo en 1938. Es una de las
ms populares, se utiliza prcticamente en todos los laboratorios del sector salud y
privados.
Ventaja y Desventajas
Esta tcnica es mejor para quiste y protozoos que para huevos y larvas de helmintos. El
xito depende de la exactitud en la densidad del sulfato de Zinc. El contacto prolongado
con el sulfato de zinc, puede deformar los quiste y dificultar su identificacin, por lo tanto
estas preparaciones debe ser examinan lo antes posible

MATERIAL

Porta objetos.
Cubreobjetos.
Gasas.
Tubos de ensayo.
Embudo
Solucin acuosa de sulfato de Zn.
Baso de presipitado
Abate lenguas

Muestras biolgicas

Heces





PROCEDIMIENTO:

1) Mezclar bien una porcin de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de
agua destilada.






2) Filtrar la suspensin a travs de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de
centrifuga, ayudndose con un embudo pequeo.






3) Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1min.







4) Decantar el liquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida
anterior, centrifugar nuevamente. Re suspender el sedimento.




5) Repetir el procedimiento hasta 2 veces hasta que el liquido sobrenadante este listo.






6) Decantar nuevamente el lquido sobrenadante remplazndolo por igual cantidad de
solucin de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solucin bien la solucin con el
sedimento. Centrifugar durante 1 minutos por 1500 rpm.












7) Tomar de 3-4 gotas de las partculas que flotan en la superficie del liquido. Colocarlos
en un porta-objeto y mezclar con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre-objeto










8) Examinar al microscopio y reporte sus resultados.


Mtodo indicado para el diagnostico de huevos livianos de helmintos (Necator,
Tricocefalos, scaris, H.nana).



Observaciones










En la primera muestra trabajada solo encontramos grasa.



En la segunda muestra trabajada se observaron jabones, residuos vegetales grasa y fibra.



CONCLUSIONES

La finalidad de la practica es la bsqueda de parsitos hasta el momento no hemos
encontrado. Con la prctica continua llegaremos a encontrarlos. En las practicas
anteriores y en esta ultima solo hemos hallado grasa, fibra .y restos vegetales e incluso
cremos encontrar una amiba pero no era as solo se trataba de una fibra.

coproparasitoscopico mtodos de concentracin

las infecciones parasitarias, producidas por protozoos y helmintos
intestinales, afecta a ms de dos billones de la poblacin mundial y
constituye un problema de salud pblica, especialmente en pases en
desarrollo con inadecuadas condiciones sanitar

El diagnstico de las infecciones parasitarias intestinales se basa ampliamente en el
anlisis microscpico de las muestras fecales, que incluyen montajes hmedos directos,
concentrados y frotis con tincin permanente. La cantidad de formas parasitarias en
muestras de materias fecal, a menudo, es muy escasa y muy difciles de detectar en
preparados directos en fresco o en frotis teidos; por lo tanto, siempre deben realizarse
procedimientos de concentracin.
En general, las dos tcnicas de concentracin utilizados con mayor frecuencia son los de
sedimentacin y de flotacin.
El mtodo de concentracin por sedimentacin con formalina-ter es el procedimiento
ms utilizado para concentrar quistes de protozoos, huevos y larvas de helmintos, y es
ms eficiente que los mtodos de flotacin. No obstante, debe tenerse cuidado durante el
proceso de decantar el sobrenadante ya que pueden perderse una cantidad significativa
de formas parasitarias. Adems, el ter es un solvente orgnico peligroso y muy
inflamable.
Por otro lado, el mtodo de flotacin con sulfato de zinc es til para recuperar quistes de
protozoos y huevos de helmintos; sin embargo, los huevos operculados, al igual que los
de Schistosoma y los infrtiles de Ascaris, no se obtienen con facilidad con este
mtodo.




Coproparasitoscopico mtodo de concentracin por cimentacin

O
mtodo de FAUST

MATERIAL:

Aplacadores de madera
Papel de estraza
Portaobjetos
cubreobjetos
Solucin de lugol
tubos de ensaye de 13x100
Microscopio
agua de la llave
Asa bacteriolgica
vaso de precipitados de 100 ml
Gasas gradilla
Centrifuga mechero bunsen o Fisher
Embudo
densmetro de 1.100 a 1.200
Sulfato de zinc con densidad 1.18 (aprox. 33%)









PROCEDIMIENTO
1) Mezclar bien una porcin de materia fecal para preparar una suspensin
homognea con 1 a 2 g de materia fecal en 10 ml de agua destilada.
2) Filtrar la suspensin a travs de una gasa doblada en cuatro, sobre un
tubo de centrfuga, ayudndose con un embudo pequeo.
3) Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1 min.
4) Decantar el lquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la
medida anterior, centrifugar nuevamente. Resuspender el sedimento.
5) Repetir el procedimiento 2 veces hasta que el lquido sobrenadante est
listo.
6) Decantar nuevamente el lquido sobrenadante reemplazndolo por igual
cantidad de solucin de sulfato de Zinc al 33%. Mezclar bien la solucin con
el
sedimento. Centrifugar durante 1 minuto a 1500 rpm.
7) Tomar 3 a 4 gotas de las partculas que flotan en la superficie del lquido.
Colocarlas en portaobjeto y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar
cubreobjeto. (Te puedes ayudar con el asa limpia o flameada, para recoge la
muestra de la pelcula superficial, durante 2 o 3 ocasiones sucesivas y se
deposita en el portaobjetos)
8) Examinar al microscopio y reporte sus resultados.
9) Realiza el dibujo de lo observado.
10) Para ayudarte a identificar a los parsitos que puedas encontrar; recurre
a
los dibujos de los diversos parsitos mostrados en las grficas de la
practica anterior.
NOTA: Recuerda, la materia fecal es potencialmente infectante, por lo que se
tendrn los cuidados necesarios para su manejo, que garanticen la
correspondiente bioseguridad.


MTODO DE CONCENTRACIN POR SEDIMENTACION RITCHIE

OBJETIVO
Conocer y observar los quistes y huevos mediante un mtodo el cual vamos
a hacer y dar su determinacin.

FUNDAMENTO
La prevalencia del parasitismo intestinal es alta en muchos pases del
mundo y la presencia de parsitos puede estar asociada a diferentes causas
entre ellas factores higinicos sanitarios que son los de mayor incidencia. El
diagnstico de los parsitos intestinales presentes en la poblacin es cada
da ms necesario y ms aun en los pases subdesarrollados.


PRINCIPIO Y METODOLOGA DE LA DETERMINACIN
Es fundamento de la tcnica se basa en el uso de la fuerza centrfuga que
obligara a los
parsitos a ir al fondo del tubo, del ter que elimina los detritus orgnicos,
mientras que el
formol ayuda a mantener la integridad de las formas parasitarias que se
concentran.

Reactivos




















NUM. NOMBRE
DEL
REACTIVO
CONCENTRACI
N

CANTIDAD

1 Formaldehdo

40 % 500 ML
2.

Eter etlico o
de petrleo
Q. P 300 ML
3 Solucin
salina
0.9% 1000 ml



Materiales de laboratorio


CANTIDAD DESCRIPCIN
30

Coladera
30

Embudos
30

Gradillas
30

Pipetas Pasteur
30

Portaobjetos

30 Cubreobjetos



TCNICA O PROCEDIMIENTO

1. Diluir 2 grs. De heces en 5 ml de solucin salina fisiolgica.

2. Filtrar la solucin obtenida sobre colador y embudo.
3. Centrifugar durante 5 minutos a 2500 r.p.m.
4. Eliminar el sobrenadante.
5. Volver a lavar si es necesario
6. Al sedimento agregar 3 ml del formaldehdo al 40 % y 2 ml de ter.
7. Tapar el tubo y agitar enrgicamente
8. Centrifugar 3 mins a 2500 r.p.m. (entre el ter y el formaldehdo se formar
un
tapn de grasa y materiales orgnicos)
9. Del sedimento tomar una muestra con la pipeta Pasteur
10. Colocar la muestra entre portaobjeto y cubreobjeto
11. Observar al microscopio con 10 X y posteriormente con 40 X.
12. Reportar.