Reacción de Widal P

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REACCIÓN DE WIDAL

La reacción de Widal es un método serológico, utilizado comúnmente en el diagnóstico


de la fiebre tifoidea o entérica así como la fiebre paratifoidea.

Fue desarrollada por Georges Fernand Isadore Widal, prestigioso médico francés, en
junio de 1896.

La fiebre tifoidea es una de las enfermedades infectocontagiosas más difundidas


actualmente. Es causada por Salmonella tiphy, una bacteria descrita por Eberth en 1880
y aislado por Gaffky en 1884. La clasificación se realiza sobre la base de su antígeno “O”
somático y el antígeno flagelar “H”, además posee en su superficie un polisacárido
capsular, el antígeno Vi.

La distribución de la enfermedad es mundial, aunque se manifiesta de manera frecuente


en los países en desarrollo. En África es una causa importante de morbimortalidad. No
existen registros fieles acerca de la magnitud de su prevalencia debido a la notificación
incompleta y muy variable, pero se estima que cada año ocurren en el mundo
aproximadamente 33 millones de casos con 300 000 fallecidos.

BASES INMUNOLÓGICAS DE LA REACCIÓN DE WIDAL:

La reacción de Widal demuestra la presencia de anticuerpos aglutinantes (aglutininas)


contra los antígenos O (somático), antígenos H (flagelar) de Salmonella typhi y antígenos
A y B para salmonellas paratiphy A y B.

Los anticuerpos contra el antígeno O aparecen luego de 6 a 8 días de iniciada la


enfermedad y desaparecen posteriormente entre 3 y 6 meses. Los anticuerpos contra el
antígeno H aparecen a los 8 a 12 días, alcanzando títulos más elevados con respecto a los
anti-O y pueden persistir por más de 1 año. Los anticuerpos contra el antígeno Vi
aparecen más tardíamente, a la tercera semana, sin embargo lo hacen en títulos bajos
1/10-1/20 con respecto a los anteriores.

El antígeno somático O, nombrado así del alemán Ohne Hauch, que significa
sin movimiento, está conformado por una cadena repetida de polisacáridos, que hace
parte del lipopolisacarido (LPS) de la pared celular; por lo general, el antígeno O no es
único, sino que está constituido por diversos factores antigénicos que permiten dividir
las Salmonellas en grupos O, por ejemplo, O:9 y O:12.

El antígeno flagelar H deriva su nombre igualmente del alemán Hauch, por el halo
producido en un medio de cultivo a raíz del movimiento, es una proteína termolábil a
diferencia del antígeno O; según este, las Salmonellas pueden ser monofásicas, cuando
contienen siempre el mismo antígeno flagelar, generalmente específico (S. typhi, S.
paratyphi A), o difásicas, cuando el antígeno flagelar puede presentarse alternativamente
en fase específica o menos específica, que puede ser común con otras Salmonellas (fase
I y fase II).
El antígeno capsular Vi, denominado así por ser el determinante en la virulencia de esta
bacteria, ya que confiere resistencia contra la respuesta inmune celular y humoral del
huésped.

LIMITACIONES DE LA REACCIÓN DE WIDAL

Entre las limitaciones de la reacción de Widal, se debe considerar que hasta el 50 y el 33%
de los pacientes con fiebre tifoidea no tratada, no presentan el aumento característico
en los títulos anti-O y tienen negatividad en los títulos anti-H, respectivamente.

La importancia de la aglutinación de Widal radica en ser un método serológico, rápido,


barato, y ampliamente conocido para el diagnóstico de la fiebre tifoidea; sin embargo,
tiene grandes limitaciones por reacciones antigénicas cruzadas con
otras bacterias (principalmente enterobacterias, incluyendo Salmonellas no typhi),
parásitos, virus y hongos, llevando con frecuencia al clínico a sobrediagnosticar
síndromes febriles como fiebre tifoidea.

Otro aspecto que se debe considerar es que las reacciones cruzadas pueden proporcionar
falsos positivos y falsos negativos. Los falsos positivos se observa en inmunización previa
con vacuna tifoidea, hepatitis aguda y crónica, malaria, endocarditis estreptocócica,
brucelosis, infección por bacterias gramnegativas, parasitemia. Los falsos negativos
pueden estar dadas por falta de respuesta inmune en el 30% de los casos, uso de
antibióticos o esteroides que inhibe la respuesta inmune, tiempo inadecuado para la
determinación (lo más frecuente), falta de estandarización comercial de los reactivos,
error de laboratorio (fenómeno de zona), los portadores crónicos de Salmonella typhi.

Pruebas confirmatorias:
1. La prueba más fidedigna en este caso, es el cultivo y aislamiento de la cepa.
Primera semana: Se debe realizar el hemocultivo, positividad del 85-90% de los casos.
Segunda- cuarta semana: Realizar el coprocultivo no siempre se acompaña de diarreas, se
mantiene positivo en los portadores crónicos y se elimina en periodos de intermitencia.
PROCEDIMIENTO.
1. Identificar cada división de la placa de vidrio con el antígeno correspondiente: O,
H, A y B.
2. Depositar en cada división marcada, 0.08ml (80 ul) de suero del paciente.
3. Añadir 1 gota del antígeno respectivo. Es preciso mezclar por inversión el víal de
antígeno antes de usarlo, para garantizar una suspensión uniforme. No deben
congelarse.
4. Mezclar con un aplicador de madera (utilizar un aplicador para cada antígeno).
Eliminar en solución de lavandina al 1%.
5. Agitar suavemente la placa por rotación (120 r.p.m) durante 2 ó 3 minutos.
6. Observar la aglutinación con ayuda de un microscopio.
7. Cuando la reacción es positiva se repite la técnica con las diluciones siguientes de
suero: 0.04ml (40ul), 0.02ml (20 ul), 0.01 ml (10ul), 0.005 ml (5ul). Se realiza las
diluciones hasta que la reacción se negativice.
8. Proceder de la misma manera que la primera dilución.

INTERPRETACIÓN

El informe del resultado de la prueba se hace tomando en consideración la dilución más


alta que se observe en la reacción positiva.

 En tifoidea los anticuerpos llegan a tener títulos según la dilución: 1:20


1:40 1:80 1:160, etc.
 Negativo. Ninguna evidencia de aglutinación, sobrenadante idéntico al
control.
 Positivo: Presencia de aglutinación.
 Un título O somático a partir de 1/160 es considerado positivo.
 Título bajos suelen ser reacción cruzada (falso positivo) o enfermedades
pasadas o subclínicas.

Las cantidades empleadas de suero, corresponden a las siguientes diluciones:

Dilución (ml) Título


0.08 1/20
0.04 1/40
0.02 1/80
0.01 1/160
0.005 1/320
Debe considerarse un título obtenido, más los datos clínicos, pues ningún título aislado
puede considerarse diagnóstico.

Recomendaciones.
1. No congelar ninguno de los reactivos.
2. Evitar utilizar los reactivos fríos.
3. Es conveniente estudiar varias muestras de sangre del enfermo con diferencia de cinco
a siete días en los casos dudosos.
4. Es recomendable el uso de controles tanto positivos como negativos para asegurar la
validez de los resultados.

http://www.monografias.com/trabajos74/falsos-positivos-negativos-diagnostico-
medico/falsos-positivos-negativos-diagnostico-medico2.shtml#ixzz4m0tegQ00

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